Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Ax3qApollonia CURSURI Micro Primele 6 Final PDF
Ax3qApollonia CURSURI Micro Primele 6 Final PDF
PARAZITOLOGIE
SUPORT DE CURS
PENTRU SPECIALIZAREA
MEDICIN DENTAR
DIANA GHEEU
Doctor n Biologie
IAI
2011
UZ INTERN
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Cuprins
I. Introducere n studiul organismelor patogene - metode clasice i moderne de investigare.
Ci de transmitere ale organimelor patogene. Tipuri de infecii
II. Infecia i rspunsul imun
III. Bacteriile morfologie, fiziologie, patogenitate.
IV. Coci i bacili patogeni
V. V.1 Leptospirele. Rickettsiile.
V.2 Micologie - noiuni generale. Dermatofiii.
VI. Candidoza i actinomicoza
VII. Microflora normal. Mecanismele aderenei, ocuprii i dezvoltrii microorganismelor
n cavitatea bucal
VIII. Microflora abcesului dentar. Microflora cariei dentare
IX. Microbiologia plcii dentare: formare i interaciuni microbiene.
X. Noiuni generale de parazitologie. Relaia gazd- parazit. Protozoonoze: ageni etiologici,
transmitere i combatere
XI. Helmintoze: ageni etiologici, transmitere i combatere
XII. XII. 1 Noiuni de entomologie medical
XII. 2Virusurile: structur, replicare.
XIII. Infeciile virale cu virusurile: poliomielitei, herpetice, gripale, hepatice; HIV
XIV. XIV. 1 Mecanisme de rezisten bacterian la substane antibacteriene.
XIV.2 Vaccinoterapia n infeciile virale
Bibliografie
1. Baumgartner, J.C., Microbiological and molecular analysis of endodontic infections,
Endodontic Topics, 2004, 7, 3551.
2. Buiuc, D., Negu, M., (sub redacia), Tratat de microbiologie c1inic, Ed. Medical,
1999.
3. Cajal, N., Tratat de virusologie, vol.l, Ed.Medical, 1990.
4. Cemescu, C., Virusologie medical, Ed.Medical, 1998.
5. Duca, R., .a , Microbiologie medical, Ed. Didactic, Bucureti, 1979.
6. Georgescu, M., Microbiologie medical i imunologie fundamental , I.M.F.,
Bucureti, 1983.
7. Harley, J.P., Prescott, L.M., Laboratory Exercises in Microbiology, Fifth Edition,
HarleyPrescott: The McGrawHill Companies, 2002
8. Markell, Edward, David John, Wojciech Krotoski. Medical Parasitology. Philadelphia:
W.B Saunders, 1999.
9. Nitzulescu, I. Gherman, Parazitologie Medical, Ed. Medical, Bucureti, 1986.
10. Pace, J.R. et al., Biofilms, Infection and Antimicrobial Therapy, Taylor & Francis
Group (Ed.) LLC, U.S., 2006.
11. Rdulescu, S., Meyer E., Diagnosticul bolilor parazitare. n Parazitologie medical, Ed.
All, Bucureti, 1992.
12. Shiba, C.R., et al., Atlas of medical parasitology, Kyokuseysia Co. Ltd., Japan, 2006
13. Titeica, M. (sub red), Practica laboratorului clinic I.M.F., Bucureti, 1981
14. Vojdani M., Zibaei MSc, Frequency of Bacteria and Fungi Isolated from Pumice in
Dental Laboratories, J Res Health Sci, 2006, Vol 6, No 1, pp. 33-38.
15. **Metode de laborator, vol. II, Ed. Medical, Ministerul sntii i Academia de
tiine Medicale, Bucureti, 1977
16. **Antibiograma difuzimetric: tehnica de lucru i citirea rezultatelor n Imunologie I.
Moraru, Ed. Medical, Bucureti, 1984
2
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Curs I
Se ataeaz
Se multiplic
Macroorganismul : aprare
4
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
- virusuri cu tropism respirator (gripal, paragripal, adenovirusuri, rinovirusuri, rujeolic,
varicelos mai rar);
- enterovirusurile (polio, Coxsachie, ECHO);
- fungi (Candida, Aspergillius);
- protozoare Pneumocystis carinii,
- Toxoplasma n cursul travaliului.
Riscul infeciei intraspitaliceti este mrit prin investigatiile medicale sau chirurgicale
agresive (puncii exploratorii sau endoscopia cavitilor) sau prin actele terapeutice moderne
(respiraie asistat, intervenii chirurgicale agresive, perfuzii, cateterisme venoase prelungite,
medicaie imunosupresiv).
Metode de investigare
Componentele structurale ale microorganismelor joac rol de antigen, provoac rspuns
imun din partea organismului infectat, ceea ce rezult n producere de anticorpi. Reacia antigen
anticorp este specific, antigenul poate fi legat numai de anticorpul ce s-a produs ca rspuns la
stimulul antigenic respectiv. Aceste reacii pot fi folosite pentru detectarea unui antigen
necunoscut cu ajutorul unui anticorp cunoscut (metode de diagnostic directe) sau detectarea
anticorpilor din serul bolnavilor cu antigene cunoscute (serodiagnostic, metode de diagnostic
indirecte).
n cazul n care antigenul corespunde anticorpului, se formeaz complexul imun antigen-
anticorp. n funcie de cum se vizualizeaz/detecteaz formarea complexului imun exist mai
multe metode bazate pe reacii antigen-anticorp:
reacii de precipitare: complexele imune formeaz precipitat
reacii de aglutinare: complexele imune formeaz aglutinat
RFC se detecteaz consumarea complementului (acesta se leag de complexele imune)
reacii n care elementul cunoscut este marcat se detecteaz elementul marcat din
complexul imun format
1. Reacii de precipitare. Pot avea loc n medii lichide (metode folosite n bacteriologie)
sau n medii solide.
Antigenele: de natur coloidal (solubile), precipitinogene
Anticorpii: precipitine
Complexul imun: precipitat
2. Reacii de aglutinare
Antigenele: de natur corpuscular, aglutinogene
Anticorpii: aglutinine
Antigenele corespund cu anticorpii i sunt prezente n cantiti echivalente: se formeaz
aglutinatul (reea tridimensional de complexe imune), vizibil cu ochiul liber sub forma de
grunji.
Reacia de hemaglutinare, hemaglutino-inhibare (RHA-HAI) se folosete pentru
detectarea virusurilor care prezint pe suprafa hemaglutinine (HA). Exemplu metoda Hirst:
detectarea anticorpilor antihemaglutinin din serul bolnavilor de grip convalesceni
Metode moderne metode care folosesc un reactant imunologic marcat
1. Reacia de imunofluorescen (RIF). Fluorocromii se leag covalent de proteine
(imunoglobuline) = conjugat; emit fluorescen dac se expun la raze UV. Preparatul se
examineaz la microscopul cu fluorescen. Puncte fluorescente pe fond ntunecat confirm
rezultat pozitiv.
2. Metode imunoenzimatice (RIE, ELISA - enzyme-linked immunosorbent assay) Permit
detectarea antigenelor libere i a anticorpilor. Este posibil determinare cantitativ.
Reaciile au loc n aparate automate, semiautomate.La reacii particip:
- un reactant imunologic cunoscut ataat de un suport solid (plci cu godeuri, lame, baghete - se
pot folosi antigene, anticorpi, anticorpi monoclonali, proteina A
- un reactant imunologic marcat enzimatic - peroxidaza
5
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
- substrat specific (cromogenic). Se produce o modificare de culoare detectabil
spectrofotometric (determinare cantitativ)
- substane pentru stoparea reaciei (baze sau acizi puternici).
Identificarea microorganismelor prin detectarea acizilor nucleici
Genomul conine secvene specifice pentru fiecare microorganism, detectarea prezenei
acestora ntr-un produs patologic sau n culturi celulare avnd valoare diagnostic.
1. Metode de hibridizare. Principiu: fragmente monocatenare de oligonucleotide
marcate (sonde), avnd secven cunoscut (caracteristic unui virus) se vor atasa pe baza
complementaritii de secvene complementare situate pe acizii nucleici ale microorganismului
de identificat.
Etape de lucru:
- extragerea acizilor nucleici
- denaturarea acizilor nucleici si fixarea acestora pe un suport
- hibridizare: adugarea sondelor (marcate enzimatic, cu fluorocrom sau cu substane
radioactive) si atasarea acestora de secvenele omoloage
- eliminarea sondelor nefixate
- vizualizarea hibridizrii. Vizualizarea se face n funcie de tipul marcajului folosit.
Ex.1 Metoda Southern blot detecteaz secvene specifice de nucleotizi de ADN.
Etape:
- extragerea ADN-ului
- denaturarea ADN-ului se obin lanuri monocatenare
- fragmentarea lanurilor cu enzime de restricie (acestea acioneaz n locusuri
determinate, rezultnd fragmente de lungime diferit, caracteristice)
denaturare
- separarea electroforetic a fragmentelor n gel de agaroz (separarea se face n funcie
de mrimea fragmentelor)
- transferarea pe membran de nitroceluloz
- adugarea sondelor marcate cu substane radioactive atasarea de secvenele
omoloage
- se ndeprteaz sondele n exces, nelegate
- vizualizare prin autoradiografie
EX. 2. Northern blot detecteaz ARN, este necesar revers-transcriptaza
Ex. 3 Western blot detecteaz proteine.
2. Reacia n lan a polimerazei (PCR polimerase chain reaction)
Se detecteaz secvene specifice de acid nucleic dup o prealabil amplificare.
Etapele de lucru
- detectarea ADN-ului
- extragerea ADN-ului
- amplificare: se realizeaz n aparatul PCR si const din mai multe cicluri identice
- denaturare (900C)
- alinierea primerilor (500C) 2 secvene de oligonucleotide care se leag prin
complementaritate pe cele dou catene la o anumit distan ntre ele.
- sinteza lanurilor complementare (700C ) elongaie; este necesar prezena
enzimei polimeraz (Taq) si a nucleotidelor se formeaz lanurile complementare
astfel se dubleaz cantitatea de ADN
- reluarea ciclului de n ori se obin 2n copii ale secvenei de identificat
- vizualizarea produsilor de amplificare
- produsii de amplificare obinui se separ electroforetic
- colorare cu bromur de etidiu
- vizualizare cu raze UV prelucrare computerizat
Multiplex PCR se amplific mai multe gene odat
Real time PCR
RT-PCR - este necesar revers-transcriptaza
6
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Pentru studiul bacteriilor i al fungilor, afinitatea tinctorial este un criteriu important de
clasificare. Se folosesc n mod obinuit dou coloraii principale i anume: coloraia albastru de
metilen i coloratia Gram, la care se poate aduga (n funcie de diagnostic) coloraia Ziehl-
Neelsen. Realizat de Christian Gram, bacteriolog danez, n 1884, este o coloraie difereniat,
folosete doi colorani de culori controstante (violet de genian, pentru colorarea iniial i
fucsin bazic pentru recolorare), un mordant (soluia Lugol) i o soluie de difereniere,
decolorare (alcool-aceton). Coloraia Gram mparte toate bacteriile n Gram-pozitive i Gram-
negative n raport cu permeabilitatea diferit a peretelui dependent de structura lor diferit.
Sursa de ageni patogeni este reprezentat de un organism care are capacitatea s
gzduiasc, sa asigure supravieuirea i eventual multiplicarea i ntotdeauna diseminarea unui
agent patogen, direct spre organismul receptiv sau indirect prin intermediul cilor de
transmitere, prezentnd sau nu semne clinice de boala.
Exemple de surse de agenti patogeni:
- bolnavi cu forme tipice sau atipice de boal;
- purttori de ageni patogeni care pot s nu prezinte semne clinice de boal, dar pot fi:
- purttori preinfectioi, viitorii bolnavi aflai n perioada de incubaie a bolii;
- purttori sntoi care au un anumit grad de imunitate i o rezistent general nespecific
ridicat i acetia pot fi:
- temporari (cteva zile sau sptmni),
- cronici (luni, ani sau toat viaa).
- purttori foti bolnavi (dup vindecarea clinic nu se sterilizeaz)
- cunoscui (cei care au fost spitalizai) sau
- necunoscui (cei cu forme atipice care au fost tratai n ambulatoriu).
- animale bolnave (inclusiv psrile) ele pot fi:
- domestice,
- peridomestice,
- slbatice.
Animalele pot transmite antropozoonozele (90 de maladii dintre care 20 intereseaz i
populaia Europei). Bolile infecioase la majoritatea animalele purttoare de ageni patogeni au
aceleai caracteristici ca i la oameni (stare febril, cahexie, modificarea constantelor sangvine
etc.). Artropodele sunt vectori biologic activi care asigur n mod obligatoriu dezvoltarea cel
puin pentru un stadiu biologic al agentului patogen (ntari, pduchele omului, cpuele, puricii
oarecelui i obolanului etc.).
Modul de transmitere al organismelor patogene poate fi:
direct - se realizeaz ntre sursa de agent patogen i organismul receptiv (inhalarea, contact
fizic, srutul, muctura, transferul transplacentar, transfuzia de snge).
indirect - mai complex i implic una sau mai multe ci de transmitere (ap, aer, sol, alimente,
obiecte, mini, insecte sau combinate).
Ci de transmitere ale organismelor patogene
Aerul
Mecanismul de transmitere a agentului patogen prin aceast cale a fost descris de Pflgge in
1897.
n timpul expirrii, aerul iese cu o presiune mare, produce picaturi septice care vor rmne
suspendate n aer pe o durat variabil i vor fi dispersate n raport cu dimensiunile lor (dispersia
va fi intens cand dimensiunile vor fi 10).
Picturile septice sunt diseminate la o distant de 1,5-2 m, sau dac intervine tusea strnutul,
vorbirea, cntarea, dispersia va fi la 5-10 m, datorit curentilor de aer.
Dup un timp picturile septice pierd o parte din apa, devin mai uoare, persist mult in aer,
sedimenteaz pe suprafee i apoi se rspndesc n aer
Diseminnd agenti patogeni aflai n interiorul masei de substane organice vor genera
nucleosoli septici.
Ei se pot cupla cu particule minerale (praful din sol) i genereaz praful septic, care se
combin cu cele provenite din triturarea spontan a altor componente septice.
7
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Organismele receptive se vor contamina i eventual infecta inhalnd: picturi, nucleosoli sau
praf septic.
- Aerul ncperilor poate fi contaminat cu intensitate variabil n funcie de: destinatia
acestora, densitatea surselor de agenti patogeni, i calitatea decontaminrii periodice.
- Prin aceast cale se pot transmite: difteria, gripa, scarlatina, tuberculoza etc.
Solul
Este o alt cale de transmitere a infeciei, 1 gram de sol poate conine 2-5x109germeni.
Solul nu este un mediu prielnic dezvoltrii agenilor patogeni.
In afar de bacteriile care sporuleaz, ceilali agenti
patogeni supravieuiesc o perioad limitat de timp zile sau luni).
In sol se pot ntlni: fungi, ou i larve de geohelmini.
Contaminarea i eventual infectarea omului se poate face prin:
- cale digestiv, consum ap sau vegetale crude nesplate,
- cale respiratorie prin inhalarea pulberilor din solul contaminat,
- prin tegumente cu integritate pierdut.
Prin aceast cale se pot transmite: tetanosul, poliomielita, salmoneloza, tuberculoza,
parazitozele.
Apa
4/5 din bolile cunoscute n lume sunt legate de insalubritatea apei.
Transmiterea agentilor patogeni se poate face:
direct
- de la sursele de ageni patogeni: dejecte (umane, animale), adparea animalelor bolnave,
scldarea (oamenilor sau animalelor), depunerea cadavrelor animalelor;
indirect are loc prin:
- aer, sol, alimente, recipiente
Transmiterea indirect se produce n: inundaii, averse de ploaie, cutremure, cataclisme.
n aceste momente apar defectiuni, avarii, cnd nu se face sau este insuficient decontaminarea
apei sau utilizarea neigienic a surselor de ap.
Prin aceast cale se pot transmite: febrele tifo-paratifoidice. dizenteria, holera, hepatita
A, poliomielita etc.
Alimentele
Atunci cnd nu sunt prelucrate igienic sau atunci cnd nu se respect circuitele. Contaminarea
lor poate fi:
- primar (de la origine) sau
- secundar (prin dejecte, animale bolnave sau purttoare, aer, ap, sol, insecte sau mini
murdare).
Prin alimente se pot transmite: trichineloza, tuberculoza, antraxul, bruceloza, salmoneloze
etc.
Obiectele
Pot constitui o alt cale de transmitere.
Ele pot transmite:
- direct (de la sursa de ageni patogeni prin produsele eliminate: secreii, sput, urin, fecale,
snge, puroi) sau
- indirect (prin aer, sol, ap, mini).
Prin aceast cale se pot transmite: salmoneloze, tuberculoza, hepatita A, parazitoze.
Transmiterea prin mini murdare.
Contaminarea poate fi
- direct (de la agenjii patogeni) sau
- indirect (prin germeni vehiculai prin: aer, ap, sol, alimente, obiecte, insecte).
Se pot transmite: febr tifoid, dizenterie, hepatita A, parazitoze.
Insectele pot fi surse de ageni patogeni, gazde obligatorii cel puin pentru un stadiu de
dezvoltare (pduchii omului, cpuele, narii, puricii i ali flebotomi).
Altele sunt vectori pasivi, artropodele: mutele, gndacii de buctrie, furnicile, dup ce
contamineaz asigura doar transmiterea pe distane i perioade variabile de timp.
8
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Receptivitatea (gazdei)
Este starea organismului care nu-i confer acesteia posibilitatea de a nvinge o agresiune
microbian.
Gradul de receptivitate a unei populaii depinde de
- rezistena specific (imunitatea) care este dependent de prezena anticorpilor sau a unor
celule cu capacitate antiinfecioas.
- rezistent nespecific (general) este dependent de: integritatea barierelor cutanate i a
mucoaselor.
Imunitatea natural care se realizeaz fr intervenia omului i este de:
- specie omul i anumite animale fac anumite boli specifice;
- pasiv - urmare a transferului transplacentar de anticorpi,
- activ - imunitatea care apare dup trecerea prin boal.
Imunitatea artificial
Se realizeaz dup interventia omului, prin programe prevenionale.
Se utilizeaz produse biologice care ofer protectie specific.
Ea poate fi:
- activ - dup administrarea vaccinurilor;
- pasiv - dup administrarea de seruri imune sau de imunoglobuline (n acest caz
organismul este doar consumator).
Rezistena specific sau nespecific poate fi sporit prin utilizarea de: anticorpi monoclonali
cu aciune idiotipic i a sistemelor imunomodulatoare (imunostimulatoare ribozomale cu
aciune de aprare antiinfectioas).
Gradul de receptivitate depinde i de : vrst, alimentatie, profesie.
10
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Chiar i flora normal a organismului poate deveni patogen, mai ales dac printr-u accident,
sau o igien deficitar, ajunge n zone nespecifice (ex. E. coli din intestin dac ajunge n vezica
urinar poate s genereze infectii urinare).
O alt modalitate de infecie endogen este atunci cnd un germen i modific aspectul
patogen prin cptarea unor caractere sporite de patogenitate (virulen sau toxicitate).
Curs II.
Infecia i rspunsul imun
RSPUNSUL IMUN
Rspunsul imun reprezint totalitatea fenomenelor prin care organismul recunoate i
neutralizeaz structurile agresoare.
Contactul dintre Ag i celula care-l recunoate este urmat de un proces de multiplicare i
difereniere a acesteia, ce are drept rezultat sinteza de Ac specifici (rspuns imun umoral) sau
11
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
apariia limfocitelot T sensibilizate (rspuns imun celular). Efectele acestui prim contact
poart numele de rspuns imun primar.
n desfurarea rspunsului imun (indiferent c este umoral sau celular) exist mai multe
etape:
preluarea, prelucrarea i prezentarea Ag
recunoaterea Ag
activarea limfocitelor
faza efectoare i eliminarea Ag
declinul rspunsului imun (restabilirea homeostaziei)
meninerea memoriei Ag
RSPUNSUL IMUN UMORAL
Esena rspunsului imun de tip umoral este secreia de Ig (Ac) specifici ca urmare a
stimulrii antigenice a liniei limfocitare B.
Rspunsul imun care apare dup o prim expunere a unui organism la Ag se numete
rspuns imun primar. Ac sunt iniial de tip IgM, iar apoi nivelul acestora scade i apar Ac din
clasa IgG.
Rspunsul imun secundar se produce cnd acelai Ag se administreaz dup un
interval de timp. Aceast proprietate este posibil datorit faptului c n timpul desfurrii
procesului de difereniere, se desprinde un grup de celule care nu continu maturarea i
multiplicarea spre celule efectoare, ci rmn ntr-o etap timpurie de evoluie (n faza G1 a
ciclului mitotic). Rolul lor este acela de a pstra amintirea Ag, chiar dup totala sa eliminare,
de aceea poart numele de celule cu memorie. O nou stimulare antigenic produce
proliferarea i diferenierea n plasmocite a unora dintre celulele B cu memorie. Ac specifici
apar mai precoce, au o mai mare afinitate pt. Ag, nivelul lor seric crete mai rapid, iar secreia
este mai prelungit. Aparin clasei IgG. Acest rspuns imun presupune cooperarea intercelular
ntre limfocitele T i B, fr ajutorul altor celule.
Majoritatea Ag naturale, n special proteinele, necesit intervenia limfocitelor T pentru a determina un
rspuns imun umoral, de aceea se numesc Ag timodependente. Exist i Ag timoindependente, Ag care nu
necesit intervenia limfocitelor Th. n acest tip de proces nu se selecteaz celule cu memorie, nu exist rspuns
imun secundar, secreia este exclusiv de tip IgM, i dureaz luni de zile. Acest efect prelungit se explic i prin
faptul c odat format complexul Ag-Ac este fagocitat i digerat. Celulele fagocitare nu pot digera dect Ac,
elibernd Ag odat cu moartea celulei. Ag se va reinsera ntr-un nou ciclu.
Dup sinteza Ig, acestea se cupleaz cu Ag formnd complexele imune.
n cazul n care Ag este solubil, molecular, se formeaz complexe imune circulante care sunt epurate de
sistemul monocit/macrofag.
n cazul n care Ag face parte dintr-o membran celular, Ac se fixeax pe celul. Cuplarea ulterioar a
complementului duce la liza celulei sau la eliminarea celulei prin fagocitoz de ctre sistemul mononuclear-
fagocitic.
RSPUNSUL IMUN CELULAR
Rspunsul imun celular este implicat n:
eliminarea celulelor infectate cu microorganisme cu habitat intracelular (virui,
micobacterii, etc.)
aprarea antitumoral
rejecia grefelor.
n funcie de natura receptorului implicat n recunoaterea Ag expus pe suprafaa
celulei int, se pot distinge 2 categorii mari de celule implicate n acest tip de rspuns imun:
limfocitele Tc i celulele citotoxice MHC-nespecifice (NK i K). Ag care declaneaz acest
rspuns imun sunt timodependente.
Dup aproximativ 5 zile de la primul contact cu Ag apar n snge celulele T cu
memorie care sunt supuse unui proces de recirculaie continu. Ele nsmneaz continuu
esutul limfatic, conferindu-i memorie imun specific. Un nou contact cu Ag induce
proliferarea i diferenierea celulelor cu memorie spre celule efectoare, producnd un rspuns
imun n cteva ore.
REACIILE IMUNE
12
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
n unele situaii ns, rspunsul imun este inadecvat, exagerat, pierzndu-i rolul
protectiv i devenind nociv pentru organismul gazd. Ansamblul fenomenolor rezultate din
perturbarea proceselor imune, cu apariia unui rspuns imun capabil s produc leziuni
organismului gazd, poart denumirea de reacie imun. Pentru realizarea reaciei imune,
organismul face apel la o serie de factori nespecifici celulari i/sau serici. Aciunea lor este
complex i intricat, ei contribuind major la dezvoltarea inflamaiei locale, urmarea reaciei
imune.
Reaciile imune, prin caracterul lor sistemic, pot determina leziuni la nivelul tuturor
aparatelor i sistemelor organismului, iar cnd reacia este foarte intens poate produce chiar
moartea individului.
n funcie de mecanismul lor de producere, reaciile imune au fost mprite de Gell i
Coombs n patru tipuri principale:
- tipul I sau reacia anafilactic - contactul Ag-Ac este urmat de eliberarea de
substane biologic active ce acioneaz predominent pe muchuil neted i vase
- tipul II sau reacia citotoxic - Ac lezeaz direct celula alterndu-i structura sau
funcia i predispunnd-o la liz sau fagocitoz
- tipul III sau reacia prin complexe imune - depunerea tisular a CI i fixarea
complementului determin atragerea PMN i declanarea procesului inflamator
- tipul IV sau hipersensibilitatea tardiv - apare prin exagerarea rspunsului imun
celular.
Roitt descrie i tipul V de reacie imun, asemntor cu tipul II, dar n care Ac fixai pe
celul nu o distrug ci i modific numai funcia.
ORGANELE LIMFATICE
A. ORGANELE LIMFATICE PRIMARE sunt organele n care are loc diferenierea i
maturarea limfocitelor. Sunt considerate organe limfatice primare mduva osoas i ficatul,
responsabile de diferenierea limfocitelor B i timusul, sediul de difereniere al limfocitelor T.
1. Mduva osoas i ficatul:
Mduva osoas conine esutul hematopoetic i reprezint locul de origine al tuturor
celulelorsanguine la adult. Ea include i precursorii celulelor limfatice, seria limfoid
reprezentnd 5-15%.
Diferenierea celulei stem n elemente limfoide se face n trepte succesive, fenomenul fiind
independent de existena stimulrii antigenice, mduva osoas neavnd de altfel ci aferente i
modaliti de captare i prelucrare a antigenului. Proliferarea i maturarea precursorilor celulari
din mduva osoas se face sub influena unor citokine numite factori de stimulare ai coloniilor
(colony-stimulating factors). Ei sunt sintetizai de celule medulare stromale i de macrofagele
din mduv i creeaz un mediu local favorabil hematopoezei. Mduva osoas mai conine i
un procent variabil (ntre 5 i 15%) de plasmocite, formate la nivelul organelor limfatice
periferice ca o consecin a stimulrii limfocitelor B de ctre Ag.
Mduva osoas reprezint locul unde se desfoar post-natal diferenierea limfocitelor
numite B. La om, prenatal, acest proces se desfoar n ficat, n timp ce la psri el are loc
ntr-un organ limfo-epitelial numit "bursa lui Fabricius". De aici a provenit de altfel iniial i
denumirea acestor limfocite -B- bursodependente. Ulterior, cnd s-a vzut c procesul se
desfoar la om n mduv "bone marrow", denumirea acestui tip de limfocite s-a consolidat.
De menionat c limfocite provenind din mduv populeaz i timusul (mai ales corticala) unde
se pot diferenia n limfocite T.
Ficatul reprezint doar sediul primar, precoce de hematopoez, fiind locul prenatal de
difereniere i maturare a limfocitelor B. La adult, doar n unele circumstane patologice (cum
ar fi policitemia vera) ficatul i reia funcia hematoformatoare.
2. Timusul:
Timusul este un organ limfoepitelial care apare devreme n embriogenez, crete n
perioada intrauterin i atinge o dezvoltare complet la natere, pentru ca dup pubertate s
sufere un proces de involuie, probabil indus hormonal prin corticoizi i androgeni.
13
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Situat n mediastinul anterior, timusul este format din 2 lobi, acoperii de o capsul
fibroas, fiecare lob este organizat n lobuli, separai ntre ei prin trabecule de esut conjunctiv.
Lobulii la rndul lor, prezint o zon periferic (corticala) i o zon central (medulara).
n cortical se gsesc predominent celule limfocitare mari, imature care i au originea n
mduva osoas (n perioada adult), caracterizate printr-o vie activitate de multiplicare. Pe
msur ce migreaz spre medular prolifereaz i sufer un proces de maturaie.
n medular se gsesc predominent celule epiteliale reticulare ce contin n citoplasm
granulaii bogate n hormoni timici, unele celule fiind aglomerate n grupuri constituind corpii
Hassall; tot n medular se gsesc limfocite mici, mature, asemntoare celor din sngele
periferic.
n esen, participare timusului la meninerea homeostaziei imune privete dou aspecte
fundamentale:
a. realizeaz maturaia precursorilor limfocitari T;
b. asigur distribuia limfocitelor T ctre anumite arii ale organelor limfatice periferice,
numite zone timodependente. Aceste zone sunt: zonele paracorticale ale ganglionilor limfatici
i zonele periarteriolare din pulpa alb a splinei. Acest lucru este realizat graie unor receptori
de tip "homing" pe care limfocitele T i achiziioneaz pe tot parcursul lor intratimic.
Formarea limfocitelor T mature este rezultatul unui ir complex de etape de proliferare,
difereniere i maturare, care implic exprimarea la suprafaa celulelor a unor receptori
eseniali n recunoaterea antigenelor (TCR, CD4, CD8), n activarea metabolic limfocitar
(CD28, CD45) sau n adeziunea intercelular ca (CD2, LFA1 etc.). Proliferarea este controlat
de citokinele eliberate local, iar diferenierea apare n urma contactului limfocitelor cu celulele
stromei timusului, contact ce asigur generarea unor celule imunocompetente i departajarea
funcional pe liniile helper, citotoxic, supresoare i contrasupresoare.
ns, dup ce limfocitele T exprim pe suprafaa lor aceti receptori, marea majoritate mor
in situ prin apoptoz = moarte celular programat. Acestea reprezint aa numitul contingent
distrus, distrugerea lui mpiedicnd apariia procesului de autoimunitate. Puinele limfocite
rmase viabile (contingentul posttimic), trec n circulaie dup un pasaj prin medular.
Distrucia celular prin apoptoz i nu prin necroz nu las s ptrund n mediul extracelular
diversele debriuri celulare care ar putea declana un rspuns local inflamator, protejnd astfel
structura i funcia acestui organ. n plus, celulele apoptotice exprim pe suprafaa lor receptori
care permit recunoaterea i ingestia lor de ctre macrofage i epurarea lor rapid.
B. ORGANELE LIMFATICE PERIFERICE reprezint sediul unde se iniiaz i se
desfoar rspunsul imun. n aceast categorie sunt incluse att organe capsulate ca splina i
ganglionii limfatici, ct i esuturile limfoide difuze, asociate tubului digestiv (notat GALT -
Gut Associated Lymphoid Tissue), cilor respiratorii (BALT - Branchial Associated Lymphoid
Tissue) sau esutului cutanat (SALT - Skin Associated Lymphoid Tissue).
1. Splina este cel mai mare organ limfatic; ea este delimitat la exterior de o capsul ce
conine fibre musculare netede, din care se desprind trabecule ce ptrund n parenchim i
compartimenteaz organul. n parenchimul splenic se disting dou sectoare, diferite att ca
structur ct i ca funcie:
-pulpa roie situat la periferia lobulilor, alctuit predominent din macrofage cu rol n
fagocitarea hematiilor senescente i care aparine sistemului mononuclear-fagocitic;
-pulpa alb situat n jurul arteriolei centrale care conine esut limfoid numit PALS -
Peiarteriolar Lymphoid Sheath); acesta la rndul ei are 2 zone, una strinc periarteriolar, ce
conine n special limfocite T i formeaz (cum spuneam mai devreme) zona timodependent a
splinei i alta la periferia PALS ce conine aproape exclusiv limfocite B, organizate sub form
de foliculi - zona timoindependent. Aceti foliculi pot fi primari sau secundari, formai din
celule B activate antigenic, caz n care poart denumirea de centrii germinativi.
ntre pulpa roie i cea alb, la periferia foliculilor limfatici, se gsesc sinusurile marginale,
unde exist att limfocite T ct i B, precum i magrofage i celule dendritice, absolut necesare
(cum vom vedea n continuare) pentru cooperarea celular din cadrul rspunsului imun.
Funcia imunologic a splinei se exprim n special n generarea unor rspunsuri imune fa
de Ag aflate n circulaia sistemic.
14
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Rolul important pe care l joac splina n aprarea antiinfecioas este demonstrat de faptul
c la bolnavii splenectomizai apar infecii severe, mai ales cu germeni incapsulai (ca
pneumococii i meningococci).
2. Ganglionul limfatic constituie un adevrat filtru situat pe traiectul cilor limfatice. El
este de asemenea delimitat de o capsul fibroas ce trimite spre interior septuri fibroase
incomplete. Histologic, la nivelul ganglionului limfatic se disting trei zone:
- zona cortical - situat la periferie, alctuit din limfocite B aranjate sub form de foliculi
primari sau secundari (centrii germinativi), cu o structur asemntoare omonimilor lor din
PALS. Foliculii constituie zona timoindependent sau bursodependent.
- zona paracortical - situat sub cea cortical conine predominant limfocite T (din acest
motiv purtnd denumirea de zon timodependent), precum i un mare numr de macrofage.
- zona medular - situat parahilar i alctuit din vase sanguine, sinusuri limfatice,
limfocite B, T, plasmocite macrofage i celule dendritice.
Dup stimularea antigenic, limfocitele T i B migreaz unele spre altele, pierzndu-i
aceast repartiie anatomic. Limfocitele T activate prsesc ganglionul limfatic i ptrund n
circulaia sistemic, iar limfocitele B activate migreaz spre centrii germinativi unde
sintetizeaz anticorpi.
O atenie special este acordat segmentului vascular denumit venul postcapilar situat
paracortical, ale crei celule endoteliale sunt cilindrice i nalte i poart denumirea de High
Endothelial Venules - HEV. Aceast zon cu celule cilindrice este locul de trecere al
limfocitelor din circulaia sanguin n ganglion. Ele au pe suprafaa lor molecule de adeziune
numai pentru limfocite, fiind neutre fa de alte celule circulante.
3. Alte esuturi limfatice
Zone de esut limfatic exist n submucoasa unor poriuni din tractul digestiv (GALT) sau
respirator (BALT), precum i din tegument (SALT). n unele teritorii aceste colecii sunt
suficient de mari pentru a fi individualizate. Astfel, la nivelul tubului digestiv exist n jurul
faringelui inelul limfatic al lui Waldayer, compus din amigdalele faringiene, palatine, linguale,
iar la nivelul ileonului se gsesc plcile Peyer. Acestor structuri li se asociaz apendicele.
Colecii similare de esut limfatic se gsesc i la nivelul arborelui bronic (mai ales la bifurcaia
bronhiilor mijloci sau la jonciunea bronho-alveolar) i n tegument.
Importana acestui sistem imun rezid nu numai din faptul c el reprezint un mijloc
eficient de aprare la nivelul principalelor pori de intrare ale organismului, controlnd
contactul cu o multitudine de Ag cu poart de intrare digestiv, respiratorie i cutanat, ci i din
faptul c ele sunt organe limfopoetice importante i pot fi, la adult, surse de limfocite B sau T.
CELULELE SISTEMULUI IMUN
Celulele sistemului imun sunt: limfocitele, celulele prezentatoare de Ag (CPA) i celulele
efectoare
A. LIMFOCITELE
Limfocitele reprezint componentul celular major al sistemului imun. Ele constituie o
categorie de celule ce grupeaz mai multe populaii celulare similare morfologic, dar diferite
din punct de vedere funcional. Limfocitele provin din organele limfatice primare (timus,
mduva osoas i, n perioada intrauterin, ficatul). O parte din aceste celule trec n circulaia
periferic i migreaz ctre organele limfatice periferice. Restul rmn pentru o perioad n
circulaia general ca limfocite circulante unde totalizeaz aproximativ 25% din elementele
figurate albe. ntre cele dou sectoare exist o recirculaie permanet, asigurnd o
supraveghere imun competent i continu folosind un numr relativ mic de celule.
Recirculaia i migraia limfocitelor este reglat de moleculele de adeziune de pe suprafaa lor,
ce corespund unor alte molecule de adeziune de pe suprafaa celulelor endoteliale sau matricei
extracelulare, precum i de chemokinele secretate de la nivel tisular.
Durata de via a limfocitelor n sngele periferic variaz ntre 1 i 300 de zile, existnd i populaii
limfocitare care au o durat de via lung, de luni sau chiar ani, ele recirculnd n permanen ntre cele dou
sectoare ca celule cu memorie.
Limfocitele sunt singurele celule din organism capabile s recunoasc specific diferii determinani antigenici,
fiind astfel responsabile de dou dintre proprietile fundamentale ale rspunsului imun, specificitate i memorie.
15
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Din punct de vedere morfologic, limfocitele naive, care nu au fost stimulate antigenic, au un diametru cuprins
ntre 8 i 10 m, un nucleu mare, cu heterocromatin dens i citoplasm puin, ce conine un numr redus de
mitocondrii, lizozomi i ribozomi, aflate n stare de repaus sau n faza G0 a ciclului celular. Dup contactul cu Ag,
celulele intr n faza G1 a ciclului celular i i schimb caracteristicile morfologice (cresc n dimensiune,
ajungnd la un diametru de 10 -12 m, citoplasma e mai bine reprezentat i conine mai multe organite celulare).
Marea heterogenitate funcional a limfocitelor este legat de expresia anumitor receptori de suprafa. Unii
dintre aceti receptori sunt exprimai numai n anumite stadii de difereniere sau activare, pe perioade scurte de
timp, pe cnd alii sunt permaneni i caracteristici diverselor linii celulare limfocitare. Dup mai multe denumiri
utilizate pentru a desemna aceti receptori, s-a stabilit utilizarea indicativului CD (de la cluster of differentation),
n prezent cunoscndu-se aproximativ 250 CD.
1. Limfocitele T
La adultul sntos celulele T reprezint 60-80% din totalul limfocitelor, cea mai mare parte
avnd o durat de via lung, fiind celule intens recirculate. La microscopia optic
diferenierea dintre limfocitele T i B este practic imposibil. Prin prezena pe suprafaa lor a
unor receptori caracteristici, este posibil ns identificarea lor.
Care sunt acetia?
1. Receptorii limfocitului T, notai TCR (T cell receptor). Acetia au proprietatea fundamental de a
recunoate i a lega Ag. Sunt transmembranari i au o structur asemntoare poriunii Fab a moleculei de Ig,
fiind alctuii din 2 lanuri diferite de polipeptide, legate ntre ele prin puni disulfidice. Se cunosc 2 tipuri de
TCR: TCR1, primul care apare n timpul vieii intrauterine, compus din 2 lanuri i i TCR2 prezent pe
suprafaa a 95% din limfocitele T, alctuit din lanuri polipeptidice notate i . Ambele tipuri de receptori au un
domeniu variabil, n poriunea NH2-terminal, i unele constante. Aceti receptori sunt legai de membrana
limfocitelor T prin intermediul unui alt grup de 5 lanuri polipeptidice notate CD3 i care au rolul de a transmite
semnalul activator n interiorul celulei, formndu-se astfel un complex TCR-CD3 care are proprietatea de a se lega
att de Ag cu care vine n contact celula, ct i de moleculele Ag de histocompatibilitate.
Astfel, limfocitele T nu recunosc Ag native solubile (recunoscute de limfocitele B i Ac) ci numai pe acelea
cuplate cu MHC, fiind vorba de o recunoatere asociativ.
2. CD2 - unul dintre primii markeri de suprafa, prin care celula fixeaz n jurul ei un numr de eritrocite de
oaie cu formarea unor rozete (metoda este nc folosit pentru pentru identificarea i separarea limfocitelor T). E
prezent pe toate tipurile de limfocite T i pe NK. Are rol n aderarea limfocitelor T la APC sau celulele int (prin
legarea de contraligandul su LFA3) i rol accesor n activarea celular.
3. CD4 glicoprotein de suprafa situat predominent pe suprafaa celulelor Thelper (definitorie pentru
aceast clas de celule). CD4 reprezint receptorul T pentru moleculele MHC de tip II. Stabilirea legturii ntre
limfocitul T CD4+ i APC prin intermediul moleculei de MHC II contribuie esenial la recunoaterea Ag.
4. CD8 tot de natur glicoproteic, distribuit pe membrana limfocitelor T supresoare, contrasupresoare i
citotoxice. CD8 interacioneaz cu moleculele MHC I.
5. CD5 se gsesc pe toate limfocitele T i pe un subset de limfocite B.
6. CD28 prezent pe 95% dintre limfocitele T CD4+ i 50% din cele CD8+ are rol n activarea celular,
precum i rol de molecul de adeziune.
7. MHC I i II
8. Receptori limfocitari T cu funcie n adeziunea celular
Indiferent de particulariti, funciile efectorii ale diverselor celule imune implic n mod obligatoriu
adeziunea intercelular, proces cruia i se acord n ultima vreme o atenie tot mai mare. Adeziunea celular este
implicat att n funciile efectorii imune ct i n repartiia specific a diverselor tipuri de limfocite n anumite arii
ale sistemului imun. Principalii receptori limfocitari implicai n aderarea intercelular LFA (Ag asociat funciei
limfocitare), VLA , CD2 i CD4 pentru limfocitele Th i CD8 pentru limfocilele Tc. Astfel, moleculele de
adeziune au rol n:
-respingerea forelor electrostatice de respingere dintre 2 celule
-realizarea unui contact prelungit ntre celulele care urmeaz s coopereze
-favorizarea recunoaterii Ag
-rol accesor n activarea celular.
Clasificarea limfocitelor T se face dup funcia pe care o ndeplinesc, precum i dup tipul
markerilor de suprafa. Se deosebesc aslfel mai multe tipuri de celule T, cele mai importante
fiind:
a. Limfocitele T ajuttoare sau helper
- sunt CD4+ i recunosc Ag specifice asociate cu Ag HLA II.
- unele limfocite Th colaboreaz cu limfocitele B i macrofagele n inducerea rspunsului imun umoral, iar
altele colaboreaz cu alte celule T la producerea limfocitelor Tc intervenind n rspunsul imun celular.
- exist 5 subtipuri, 2 fiind mai bine cunoscute: Th1 care intervin n rspunsul imun celular prin stimularea
dezvoltrii limfocitelor Tc, creterea activitii macrofagice. Limfocitele Th2 care intervin n procesele atopice,
coordonnd secreia de IgE, IgA i IgG1, induc proliferarea eozinofilelor i a mastocitelor. Ele i exercit aciune
prin sinteza unor proteine numite citokine. Astfel, diferenierea lor nu se face pe criterii fenotipice ci n funcie de
16
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
setul de IL pe care l elaboreaz. De ex. LTh1 elaboreaz: IL-2, IL-3, IFN-, limfotoxin, TNF- i . LTh2
sintetizeaz: IL-4, IL-5, IL-6. ntre cele 2 subtipuri exist inter-relaii stimulatoare i inhibitoare. IFN- (secretat
de Th1) deprim maturarea Th2 cu consecine funcionale. Th2 (prin IL-10) suprim producia de Th1 acionnd
ca o celul supresoare.
b. Limfocite T supresoare
- sunt limfocite reglatoare care diminu att rspunsul imun umoral ct i pe cel celular
- majoritatea sunt celule CD8+
- formarea lor din din precursori este urmarea contactului cu Ag, fr implicarea MHC.
- recunosc determinanii Ag, elaboreaz factori supresori solubili cu funcie de contrareceptori blocani
- la rndul lor sunt supuse controlului inhibitor al limfocitelor T contrasupresoare.
- prin stimulare Ts de ctre Ag proprii (self) este prevenit procesul de autoimunitate.
c. Limfocitele T citotoxice
- sunt responsabile de citotoxicitatea mediat celular; ea este implicat n aprarea antiviral, antitumoral i
respingerea grefelor.
- provoac liza celulelor care poart pe suprafaa lor Ag
- au determinani antigenici de tip CD8+ i mai puin CD4+
- pentru ca Ag s fie recunoscut de ctre limfocitele Tc, el trebuie s fie asociat cu Ag MHC I, similar celui al
limfocitelor Tc. Acest fenomen poart numele de restricie HLA.
d. Limfocite T inductoare
- sunt CD4+, i recunosc Ag asociat cu MHC II
- stimuleaz activitatea altor limfocite T (helper, suppresor, citotoxice)
e. Limfocitele T cu memorie
- sunt formate n timpul rspunsului imun primar, sunt CD4+
-au o via lung, de peste 40 ani, dar perioada lor activ este de numai 10-15 ani.
Se poate astfel observa c limfocitele T joac un rol esenial n reglarea rspunsului imun, justificnd
afirmaia potrivit creia "Limfocitul T este dirijorul orchestrei imunologice"
2. Limfocitele B
Limfocitele B reprezint 5-15% din totalul limfocitelor circulante; au o durat de via
scurt (cteva zile). Ele sunt precursorii celulelor care sintetizeaz Ac, plasmocitele.
3. Celule natural killer (NK)
Celulele NK reprezint un subset de limfocite care au capacitatea de a omor celule
infectate i celule care i-au pierdut moleculele MHC I. De asemenea, celulele NK stimuleaz
macrofagele s distrug microbii fagocitai. Termenul de natural killer provine de la faptul c
aceste celule i exercit funcia citotoxic fr a necesita o activarea prealabil. De asemenea,
spre deosebire de limfocitele Tc, celulele NK nu i recunosc specific inta, similitudinea ntre
Ag MHC de pe cele 2 tipuri de celule nefiind necesar. Activitate lor nu este deci supus
fenomenului de restriciei HLA.
Celulele NK au pe suprafaa lor i receptori pentru poriunea Fc a IgG (FcRIII-CD16).
Acest lucru explic proprietatea lor fundamental de citotoxicitate fa de celule care au fixat
pe suprafaa lor Ac specifici i de care se leag prin intermediul acestor receptori. Acest
fenomen poart denumirea de citotoxicitate mediat de Ac, la realizarea lui nefiind necesar
participarea complementului.
Activitatea celulelor NK este stimulat de citokine ca: IL-15, IL-12, IFN.
B. CELULE PREZENTATOARE DE AG
Celulele prezentatoare de Ag (CPA) sunt celule specializate n capturarea Ag,
prezentarea lui limfocitelor i declanarea unor semnale care favorizeaz activarea limfocitelor.
Exist 2 categorii de CPA:
a. "profesionale": macrofagele, celulele dendritice i LB
b. "ocazionale": PMN (m.a. neutrofilele), celulele endoteliale.
1. Macrofagele
Sistemul mononuclear fagocitic sau sistemul monocit/macrofag sau reticulo-endotelial
reunete celule (monocitul i macrofagul) care au origine medular comun, precum i
caractere histologice (sunt celule mononucleare) funcionale (capacitate de fagocitoz)
similare. Rolul lor fundamental este aprarea mpotriva bacteriilor intracelulare i a fungilor.
Au origine n seria monocitar a sistemului hematopoetic; precursorii lor sunt monoblastul-
promonocitul-monocitul,
17
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Monocitele reprezint 1-8% din leucocite, au un T1/2 de 8-72 ore, dup care prsesc
torentul circulator i migreaz tisular, difereniindu-se n macrofage. Ele au un diametru de 10
15 m, un nucleu mare i o citoplasm bogat n lizozomi, vacuole i filamente de
citoschelet. Procesul de difereniere presupune: creterea dimensiunilor celulare, amplificarea
aparatului mitocondrial i lizozomal, dezvoltarea proprietilor de fagocitoz i sintez, apariia
unor receptori pe suprafaa celulei.
Macrofagele tisulare sunt heterogene, avnd morfologie, funcii i capacitti metabolice
diferite, n funcie de esutul cruia i aparin. Macrofagul este o celul cu diametru de 10-25,
cu nucleu mare, cu multe granule lizozomale i vacuole n citoplasm. Ele au cptat denumiri
specifice, n funcie de locul de reziden: Mf din esutul conjunctiv se numesc histiocite, cele
din ficat - celule Kupffer, cele din esutul nervos - celule microgliale, cele din plmn -
macrofage alveolare, cele din os - osteoclaste, cele din articulaii - sinoviocite A, etc.
Activarea macrofagelor nu este un proces specific, ca n cazul limfocitelor. El poate fi realizat sub influena
multor stimuli nespecifici: citokine (IFN- este cel mai puternic activator al macrofagului), contactul cu Ag,
substane mitogene, etc. Durata de via a macrofagului este de cteva luni.
Celulele sistemului monocit-macrofagic sunt implicate att n aprarea nespecific ct i n cea specific. n
imunitatea nespecific aceste celule fagociteaz unele Ag i sintetizeaz unele citokine care stimuleaz alte celule.
n rspunsul imun, celule monocit-macrofagice au un rol deosebit de important i complex, att n etapa iniial a
rspunsului imun cnd au funcia de CPA ct i etapa final, ca celule efectorii.
Ele au pe suprafaa lor numeroi receptori, dintre care cei mai importani sunt:
receptori imuni:
1.- receptorii pentru fragmentul Fc al moleculele de Ig
2.- receptori pentru complement
3. receptori de adeziune celulara (LFA- antigenul asociat funciei leucocitare)
receptori neimuni: (ei au rol n recunoaterea celulelor senescente, eritrocitelor heterologe, bacteriilor,
fungilor, paraziilor)
1.- pentru glicoproteine din structura peretelui bacterian,
2.- pentru proteine denaturate
3.- pentru hidrocarburi i glicoproteine care se termin n fructoz i manoz
4.- pentru fibronectin
5.- pt. unii hormoni,
6.- pt. Ag tumorale.
De asemenea, macrofagul are o capacitate secretorie mare, aceast celul putnd elabora peste 50-100 de
produi, dintre care menionm: enzime litice (elastaze, colagenaze, etc.), componente ale complementului (C1-
18
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
C5, properdina), pirogeni endogeni, factori care influeneaz diferenierea celular (de ex. colony-stimulating
factor, factori de angiogenez), factori citotoxici, citokine (IFN, IL, TNF-), unii factori de coagulare (V,VII, IX,
X, protrombina, tromboplastina), radicali activi ai oxigenului.
2. Celulele dendritice
Celulele dendritice reprezint o populaie leucocitar particular, caracterizat morfologic
de prezena unor prelungiri citoplasmatice, iar funcional prin capacitatea de a prezenta
antigenul (sunt celule prezentatoare de antigen profesioniste) i o extraordinar capacitate de a
stimula limfocitele T native i de a iniia un rspuns imun.
Celulele dendritice au origine i pot ndeplini rolul de CPA, datorit prezenei pe suprafa a moleculelor
MHC II i a receptorilor pentru Ag. Ele au capacitatea de a capta Ag i de a-l transporta la nivelul organelor
limfatice periferice. Dup sediul lor pot fi mprite astfel:
a. cele din organele nelimfatice:
-celulele Langerhans care se gsesc n special n tegument (formeaz o reea n stratul bazal i n epiteliul
scuamos), dar i la nivelul mucoasei bucale, faringe, col uterin. Pe suprafaa lor au molecule HLA II, receptori
pentru complement i pentru Fc. Ele pot fixa astfel complexele imune. Sunt implicate mai ales n
hipersensibilitatea cutanat de contact.
-celule interstiiale situate n plmn, tractul digestiv, cord, ficat, rinichi
b. cele din organele limfatice:
-celulele interdigitale - se gsesc n zonele limfatice bogate n limfocite T, cu care coopereaz (zonele
paracorticale ale ggl. limfatic, pulpa alb a splinei).
-celulele foliculare - se gsesc n foliculii limfatici din corticala ganglionilor limfatici i pulpa alb a splinei,
adic zone bogate n limfocite B. Multitudinea de arborizaii le permite un contact intim cu limfocitele B, ele
prezentnd acestora Ag ca atare, nedegradat sau n complexe imune, ntr-un proces independent de MHC.
C. CELULELE EFECTOARE
Limfocitele stimulate antigenic se transform n celule efectoare, al cror rol esenial este
acela de a elimina Ag. n aceast categorie sunt incluse: limfocitele T helper, limfocitele T
citotoxice i plasmocitele. Limfocitele T helper activate exprim receptori de suprafa i
secret numeroi produi care le permit s interacioneze cu alte celule. Limfocitele T
citotoxice activate dezvolt granule care conin proteine capabile s omoare celulele infectate
viral sau celulele tumorale. Limfocitele B stimulate antigenic se transform n celule capabile
s sintetizeze imunoglobuline, numite plasmocite. Morfologia acestora este diferit: nuclei
deni, citoplasm abundent, cu reticul endoplamatic bine reprezentat (acesta fiind sediul de
sintez al imunoglobulinelor) i complex Golgi perinuclear cu rolul de a converti
imunoglubulinele n forma final sub care sunt sintetizate.
19
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
ct i pe cele L. Numrul situsurilor combinative determin valena anticorpilor. de ex. el este 2 pentru IgG i 10
pentru IgM.
Att lanurile H ct i cele L nu sunt liniare, ci au o dispoziie buclat, ca urmare a legturilor disulfidice
intracatenare. Regiunile buclate astfel create poart denumirea de domenii. Lanurile L au 2 domenii (unul n zona
variabil i unul n cea constant). Lanurile H au un domeniu n zona variabil i 4-5 n cea constant.
Poriunea dintre primele 2 domenii ale regiunii constante ale lanurilor H poart denumirea de zona
balamalei (hinge region) datorit frexibilitii moleculei la acest nivel, ceea ce i confer un rol important n
angajarrea legturii dintre Ag i Ac.
Tipurile de Ig
Dup tipul de lan H, Ig se clasific n 5 tipuri, cu structuri i proprieti diferite, pe care,
foarte pe scurt, le vom trece n revist n continuare:
1. IgG
- reprezint clasa dominant din serul uman, adic 75% din totalul Ig
- au cea mai mare durat de via (3 sptmni).
- d.p.d.v. structural IgG este un monomer, alctuit din 2 lanuri H de tip i 2 lanuri uoare care pot fi de tip
sau . Lanurile H sunt mprite n 4 subtipuri notate 1, 2 , 3 i 4, care definesc cele 4 subtipuri de IgG: IgG1,
IgG2, IgG3 i IgG4.
- d.p.d.v. funcional IgG au o importan deosebit, Ac rspunsului imun secundar
aparinnd n cea mai mare parte acestei clase.
- au o distribuie egal n sectorul intra- i extravascular
- IgG este singura Ig care poate traversa placenta, asigurnd protecia n primele luni dup
natere
- IgG1 i IgG3 se pot lega de componentul C1q al sistemului complementului, determinnd
iniierea activrii acestuia pe calea clasic. Activarea complementului de ctre IgG impune
participarea a minimum 2 molecule de Ac.
- IgG au de asemenea funcii antitoxice i de opsonizare
2. IgA
- structural se aseamn cu molecula de IgG, coninnd 2 lanuri grele, dar de tip , i 2
lanuri L sau .
- se cunosc 2 tipuri de IgA: IgA1 (majoritar) i IgA2.
- spre deosebire de cellalte tipuri de IgG, IgA sunt prezente att n ser ct i n diferite
secreii.
- din acest p.d.v se descriu: IgA serice cu o structur monomeric, (doar < de 10% fiind formate din
asamblarea a 2, 3 sau 4 monomeri), predominant de tip IgA1 i IgA secretorie care este de tip IgA2. Acest tip se
gsete n secreiile digestive, saliv, secreiile lacrimale, bronice, colostru, laptele matern. IgAs se prezint n
general sub forma unui dimer, reunit cu ajutorul unui lan polipeptidic J i un nou polipeptid, numit component
secretorie, ce se ataeaz de lanul H . Componenta secretorie este sintetizat de celulele epiteliale. Rolul su
este acela de a conferi IgA rezisten fa de aciunea enzimelor proteolitice din secreii. Limitnd ptrunderea Ag
n submucoase, IgA au rol n imunitatea local.
3. IgM
- este cea mai mare Ig, fiind alctuit din 5 monomeri identici unii ntre ei prin lanuri J i
legturi disulfidice la nivelul fragmentelor Fc.
- lanul H este de tip , iar cele L sunt fie fie
- este principala Ig a rspunsului imun primar
- are cea mai puternic aciune de activare a cii clasice a complementului, o singur
molecul de Ig M fiind suficeint pentru a fixa C1q.
-se poate sintetiza i local, forma secretorie posednd ca i IgA o component suplimentar.
4. IgD
- reprezint < de 1% din Ig serice
- este un monomer, n care lanul H este de tip
- semnificaia lor fiziologic nu este deplin elucidat, dar s-a dovedit c IgD, ca i IgM au
rolul de receptor pnetu Ag la suprafaa membranei limfocitului B.
4. IgE
- se mai numesc i reagine
- au cel mai scrut timp de mjumtire (2-3 zile)
- sunt monomeri, lanul H este de tip
20
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
- se fixeaz prin fragmentul lor Fc de receptorii specifici de pe membrana bazofilelor
circulante i mastocitelor tisulare, putnd declana astfel un rspuns de tip reaginic
- concentraia lor plasmatic crete n caz de infecii parazitare, fungice, virale.
SISTEMUL COMPLEMENTULUI
Sistemul complementului reprezint un complex de proteine serice ce conine 25-30 de
componente (aflate n mod normal n stare inactiv) care ndeplinesc un rol important n
aprarea organismului i n procesul inflamator. El face parte din mijloacele de aprare
nespecific ale organismului. Activarea componentelor sale se face succesiv, "n cascad". n
urma activrii rezult o ntreag gam compui biologic activi, care au capacitatea de a activa
celule cu rol efector att n imunitate ct i n inflamaie.
Principalele funcii ale complementului sunt:
Inflamatoare:
Activare PMN, Mf
Marginatia si diapedeza PMN
Chemotaxie
Degranularea mastocitelor
Cresterea permeabilitatii vasculare
Contractia mm. neted
Eliminarea CI
Funcia citotoxic - n stadiile finale ale activrii sale celulele int sunt lizate. El este
implicat n liza multor celule cum ar fi: hematii, limfocite, bacterii, virusuri cu capside
lipoproteice.
Neutralizare viral
Opsonizare - complementul activat se leag de Ag sau complexe imune, favorizndu-le
aderena i fagocitoza.
Privind aceste funcii ne putem da seama c acest sistem particip att n aprarea specific
ct i n cea nespecific, rolul lui fundamental fiind acela de a corobora cele dou tipuri de
mecanisme, crescnd eficiena intrinsec a fiecruia dintre ele.
Ficatul este principalul sediu al sintezei proteinelor ce alctuiesc acest sistem, dei
macrofagele tisulare i fibroblatii pot sintetiza i ei unele componente.
Activarea componentelor complementului se face pe trei ci: calea clasic, calea altern i
calea lectinelor.
Calea clasic
Elementul iniial este complexul imun Ag-Ac sau un Ag situat pe membrana celular.
Activarea se realizeaz prin legarea componentului C1 de fragmentul Fc al moleculei de Ig.
Calea clasic mai poate fi activat direct de unele virusuri i endotoxine. C1 este un complex
trimolecular ale crui componente sunt notate C1q, C1r i C1s, a cror activare se face n
aceast ordine.
C1s activeaz C4, o molecul de C1s putnd cliva mai multe molecule de C4, ceea ce duce la amplificarea
procesului. C4 este descompus n 2 componente: C4a i C4b. C4a este o substan numit anafilatoxin care are
urmtoarele proprieti: stimuleaz degranularea mastocitelor, elibereaz aminelor vasoactive din mastocit i
bazofil, produce contracia muchiului neted, crete permeabilitatea vascular, elibereaz amine vasoactive din
granulocite.
C4b se leag de urmtorul component ce ntr n joc, C2. C2 este clivat sub aciune C1s n 2 componente:
C2a (o proteaz) i C2b. C2b rmne legat de C4b formnd un complex enzimatic numit C3-convertaza, care
determin clivarea componentului C3.
C3 este clivat astfel n C3a (i ea o anafilatoxin) i C3b, un component major al sistemului complementului.
El se leag de C4bC2b formnd un complex trimolecular numit C5-convertaza. Tot C3b are capacitatea de a
declana calea altern de activare.
n plus, C3b i C4b favorizeaz aderena imun i fagocitoza, pentru c pe suprafaa unor celule ca
limfocitele, hematiile, celule fagocitare exist receptori specifici pentru aceste componente ale complementului.
Calea altern sau properdinic
Aceast cale poate fi declanat att imunologic (IgA, IgG) ct i neimunologic
(componente bacteriene, parazitare, unele enzime). n acest proces intervin mai muli factori,
cu origini variate notai B, D, H, I.
21
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
C3b protejat de Ag declanant se leag de factorul B, care, sub aciunea factorului D este clivat n 2
componente: Ba (cu efect chemotactic pentru neutrofiele) i Bb care rmne legat de C3b, formnd complexul
C3bBb, care reprezint pt. calea altern C3-convertaza. El are deci capacitatea de a cliva C3, genernd o cantitate
sporit de C3b. Astfe, de o singur molecula de Bb se leag mai multe molecule de C3b, formnd un nou complex
numit C5-convertaza cii alterne.
Ultimele secvene de activare sunt comune pentru ambele ci. C5-convertaza cliveaz C5 n C5a
(anafilatoxin, elibereaz SRS-A din mastocite i factor chemotactic) i C5b. C5b se leag succesiv de C6, C7, C8
i C9, formnd complexul C5b6789 numit complexul de atac al membranei (MAC). El are asemnri
structurale cu perforina (molecul eliberat de celulele NK), avnd ca i aceasta, proprietatea de a leza
membranele celulare, inducnd astfel liza celulei.
Activitatea biologic a complementului este controlat de mai multe elemente: viaa efemer a unor
componente activate, proteine serice cu rol de a modula i limita activarea unor componente.
ANTIGENELE
Antigenul este o substan, cel mai adesea strin organismului, capabil ca n
momentul ptrunderii sale n organism, s declaneze un rspuns imun (umoral sau celular) i
s reacioneze specific cu produii acestui rspuns imun (limfocite T sensibilizate sau Ig).
Se impun ns cteva meniunii fa de aceast definiie:
imunogenul este o substan capabil doar de a declana un rspuns imun
exist unele Ag care, n anumite condiii legate de calea de ptrundere sau concentraie,
pot induce inhibiia, supresia rspunsului imun ateptat, prin stimularea mecanismelor
supresoare. Acestea se numesc Ag tolerogene.
nu toate Ag sunt exogene. Exist i Ag endogene, cum ar fi autoantigenele (structuri
proprii devenite non-self) sau Ag tumorale.
Poriunea din Ag care interacioneaz cu Ac sau cu receptorii limfocitelor T poart
denumirea de determinant antigenic sau epitop. El este de fapt un subcomponent al
macromoleculei antigenice. Acesta poate avea o structur liniar (recunoscui numai de
limfocitele T) sau aminoacizii pot veni n contact fr ca pe lanul polipeptidic s fie alturai -
epitop conformaional- (recunoscui de limfocitele B). Epitopul poate fi situat la suprafaa
moleculei de Ag sau se poate gsi n interiorul acesteia, mai ales n structurile moleculare
complexe, caz n care se poate exprima numai dup degradarea parial i deplisarea restului
moleculei de Ag. O molecul de Ag poate avea mai muli determinani antigenici, fiecare
dintre acetia putnd induce sinteza unui Ac, proprietate numit plurivalen.
Caracteristicile fundamentale ale Ag sunt imunogenicitatea, specificitatea i
adjuvanticitatea.
A. Imunogenicitatea
Pentru ca o substan s fie imunogen ea trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii:
1. s fie strin organismului - cu ct ntre organismul gazd i cel cu ale crui
molecule nteracioneaz sunt mai diferite filogenetic, cu att acestea din urm sunt mai
imunogene. Exist nsi excepii n care substane strine organismului nu sunt antigenice, iar
altele proprii pot deveni antigenice n anumite condiii (aceast situaie este substratul bolilor
autoimune).
2. s aib o greutate molecular mare - n general molecule < de 5-10 kdaltoni nu sunt
imunogene. i n aceast privin exist ns excepii.
3. s aib o structur chimic complex - o molecul complex, cu un numr mare de
determinani antigenici, este mai imunogen. Cu excepia lipidelor pure, toate macromoleculele
sunt imunogene. Proteinele, mai ales cele bogate n aa aromatici, au cel mai puternic potenial
imunogen.
4. s fie digerabile - pt. a induce un rspuns imun, Ag trebuie s fie prelucrate de unele
celule (m.a. macrofagele). cele care nu pot fi digerate de echipamentul enzimatic al acestora nu
sunt imunogene.
5. s fie accesibil spaial - pentru a putea permite contactul cu paratopul
6. s aib o remanen mare n organul gazd - remanen legat de starea de
solubilitate. Cu ct o substan este mai insolubil, cu att este mai antigenic.
B. Specificitatea
22
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Este calitatea de a induce un rspuns imun strict specific fa de stimulul declanator.
C. Adjuvanticitatea
Este capacitatea de alipire a moleculelor de Ag de celulele prelucrante. Ea este mai
mare la Ag prezente sub form de particule dect la cele existente n soluie. Aceast
proprietate poate fi amplificat prin folosirea adjuvanilor, care, n plus, protejeaz Ag de o
degradare rapid, prelungindu-i astfel remanena.
Clasificarea Ag
Antigenele pot fi clasificate n funcie de criterii structurale, chimice sau de relaia
gazd-Ag.
A. Antigene complete i incomplete
Pentru ca un Ag s fie considerat complet el trebuie s ndeplineas ntocmai cerinele
impuse de definiie (s induc un rspuns imun i s reacioneze cu produii acestuia).
Exist ns molecule care datorit dimensiunilor mici, nu pot induce un rspuns imun
dect dac se asociaz cu un suport constituit din structuri proteice sau tisulare ce poart
denimirea de carrier, dar pot interaciona cu produii rspunsului imun. Asemenea molecule se
numesc haptene sau Ag incomplete. Ele nu au imunogenicitate (nu pot declana singure un
rspuns imun), dar au specificitate (reacioneaz cu Ac specifici). Carrier-ul este responsabil de
imunogenicitate, haptena este responsabil de specificitate.
B. Clasificarea chimic
Din acest p.d.v. Ag pot fi:
1. Proteine - cele mai antigenice structuri
2. Glucide - n general slab antigenice, moleculele ramificate (de ex. polizaharidele din
structura unor bacterii) pot fi ns puternic antigenice
3. Lipide - de asemenea slab antigenice n general. Unele ns, cum ar fi cardiolipinele,
pot fi antigenice i au semnificaie n unele boli.
C. Relaia gazd-antigen
Din acest p.d.v. se deosebesc mai multe situaii:
1. Antigene heretogene, heterologe sau xenoantigene sunt Ag care se gsesc la specii
diferite.
2. Antigene heterogenetice sau heterofile sunt Ag prezente la specii diferite filogenetic,
dar care au structuri analoage (au n comun unul sau mai muli epitopi). Din aceast cauz pot
reaciona cu acelai Ac specific (corespunztor epitopului comun) dnd reacii ncruciate.
Ac heterofili pot avea o importan mare n practic. De exemplu: treponema pallidum
are un epitop numit cardiolipin, care se gsete i n miocard. Detectarea Ac anticardiolipin
st la baza cunoscutei reacii numit VDRL de diagnosticare a infeciei cu Treponema
pallidum. n unele boli autoimune, apare Ac anticardiolipin, ceea ce determin apariia unor
reacii VDRL fals +.
3. Antigene alogeneice sau aloantigene sunt Ag caracteristice unei specii, dar care
difer ntre indivizii din interiorul speciei respective. Ele confer specificitate de specie.
Din aceast categorie fac parte antigenele de histocompatibilitate (HLA), cu rol decisiv
n rspunsul imun. Ele au cptat o deosebit importan odat cu dezvoltarea transplantelor.
De asemenea, s-a observat c unele grupe HLA prezint o mare susceptibilitate la o anumit
boal, de unde s-a nscut ideea unei predispoziii genetice.
Destinul Ag odat ptruns n organism este influenat de mai muli factori: calea de
ptrundere, solubilitatea sa, dimensiune, capacitatea organismului receptor de a-l elimina sau
distruge. Primul contact este cel cu mecanismele imunitii nscute (bariere mecanice, produi
de secreie, PMN, etc). Majoritatea substanelor exogene sunt astfel eliminate.
cnd Ag ajunge direct n snge, este transportat n splin, unde vine n contact cu
limfocitele locale i declaneaz rspunsul imun.
cnd Ag ptrunde pe cale cutanat sau subcutanat, este captat de celulele Langerhans
i este transportat n ganglionul limfatic de drenaj. Aici se desfoar rspunsul imun, iar
produii acestuia (Ac sau limfocitele sensibilizate) ajung n snge via canalul toracic,
23
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
cnd Ag ptrunde pe calea mucoaselor respiratorie sau digestiv, rspunsul imun se
desfoar n esului limfatic local. Ac acioneaz local, iar limfocitele B i T migreaz spre
alte locuri de reziden.
n concluzie, Ag care reuesc s depeasc barierele nespecifice, activeaz sistemul
imun declannd rspunsul imun.
Curs III
Bacteriile sunt celule procariote, cu un singur cromozom, saprofite, strict sau condiionat
patogene. Dimensiuni: 0,1-300 m. Se vd doar la microscop.
Produc bacterioze (de exemplu pneumonia, tuberculoza, meningita etc.).
Bacteriile au o capacitate mare de sintez i multiplicare. Se nmultesc asexuat, prin
diviziune direct, n 10-12 minute n condiii favorabile. Sunt sensibile la aciunea antibioticelor
i chimioterapicelor.
Sporul bacterian este forma de rezisten care apare la unele specii n condiii neprielnice de
nmulire.
Creterea bacteriilor este procesul biologic prin care bacteriile i mresc volumul, datorit
sintetizrii de noi produi i acumulrii apei.
Multiplicarea bacteriilor se realizeaz prin diviziune direct i rar prin nmugurire.
Diviziunea bacterian are loc atunci cnd bacteriile se gsesc ntr-un mediu favorabil
(lichid sau solid):
- prin diviziune direct sau binar - amitoza, prin sciziparitate, care se produce la majoritatea
bacteriilor; ritmul de diviziune este foarte rapid de 10-20 min; excepie face bacilul Koch care
are un timp de 18-20 ore.
- prin nmugurire sau ramificare (la un numr foarte redus de bacterii).
III.1. Morfologie
Pentru descrierea i identificarea bacteriilor exist mai multe criterii: morfologia, afinitatea
tinctorial, sporogeneza, mobilitatea etc..
Morfologic, bacteriile prezint:
Capsul de natur polizaharidic complex cu molecule neramificate lipsite de miez
lipopolizaharidic, puternic hidratat (99% ap).
Membrana extern - stratul exterior al peretelui celular, este triplu stratificat.
Peretele bacterian -cu componenta principal mureina sau peptidoglicanul, polimeri micti,
din dou tipuri de hexoze: N-acetilglucozamina (G) i acidul N-acetilmuramic (M).
Membrana citolplasmatic - delimiteaz citoplasma cu componentele sale structurate:
o nucleoid- reprezentat de cromozomul bacterian,
o ribozomi, etc.
Flagel(i)- flexibil(i)- cu rol n micare.
Pili (Fimbrii) imobili.
Protoplatii sunt forme bacteriene lipsite de perete bacterian, create artificial, meninute n
medii osmotice capabile s protejeze de liz bacterian. In medii hipotone aceste celule se
sparg, iar la medii hipertone se ratatineaz. Protoplatii provin din bacterii Gram-pozitive.
Sferoplatii sunt forme bacteriene create artificial prin indeprtarea parial a peretelui.
Peretele este lipsit de murein, ns conine lipide, motiv pentru care au aspect sferic.
Sferoplatii provin bacterii Gram-negative.
Grupe morfologice de bacterii:
Sferic: cocii: stafilococi i streptococi;
pneumococi (form lanceolat);
meningococi i gonococi (reniformi).
Cilindrici: bacili: forma alungit, de bastona cu forme diferite:
24
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Curb-spiralat: vibrioni, spirochete. Au corpul format din una sau mai multe spire:
jumate de spir: vibrion;
mai multe spire, nedeformabile: spirochete: genul Treponema i
Leptospira.
mai multe spire deformabile: genul Borrelia.
Cocobacili: forme intermediare: parvobacteriaceele
Filamentoase: Actinomicete: bacterii care n stadiul de culturi tinere formeaz filamente
lungi i ramificate, asemntoare unor micelii; ulterior se produce fragmentarea filamentelor
rezultnd forme bacilare cu lungimi diferite.
Bacteriile Gram-pozitive au un perete gros (200 - 800) alctuit dintr-un strat rigid de
peptidoglicani i din acid teichoic. Cantitatea mare de peptidoglicani (70-80%) ofer acestor
bacterii sensibilitate la lizozim i penicilin. Lizozimul hidrolizeaz specific peptidoglicanii ntre
N-acetil-glucozamin i acidul N-acetilmuramic. Penicilina inhib specific sinteza de
peptidoglicani.
Bacteriile Gram-negative au un perete mai subtire de 100 cu un continut mult mai mic de
peptidoglican (pn la 20%) i fr acid teichoic.
28
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
endotoxine - lipopolizaharidice, constituente ale peretelui BGN - antigen O
somatic, eliberate prin liza bacterian, oc endotoxinic;
Exemple de sintez de enzime: coagulaza - S. aureus, streptokinaza - S. pyogenes, betalactamaze
- S. aureus.
Curs IV
Coci i bacili patogeni patogeni
Coci patogeni
Stafilococii sunt coci gram-pozitivi, aerobi, imobili, nesporulai ce se dispun caracteristic
n grmezi, ciorchini, att n produsele patologice ct i n culturile pe medii solide.
Genul Staphylococcus este mprit n: Staphylococcus aureus, epidermidis i
saprophyticus. Din punct de vedere clinic este mai important clasificarea patogen care creaz
dou mari categorii:
Stafilococii secretori de coagulaz (foarte patogeni);
Stafilococii coagulazo-negativi (mai puin patogeni, S. epidermidis, S. saprofiticus).
Bacilii patogeni
Genul Escherichia face parte din familia Enterobacteriaceae1, sunt bacterii saprofite sau
condiionat patogene. Cea mai important specie este Escherichia coli. n caz de boal aceasta
poate fi pus n evident n: snge, urin, puroi, fecale, etc..
Sunt bacili Gram negativi, lungi de 2-3m i groi de 0,5m, ciliai, ceea ce face ca
majoritatea s fie mobili; ei nu sunt sporulai.
Cei mai multi colibacili nu sunt patogeni. Virulena i toxicitatea bacteriilor patogene
sunt legate de prezena Ag K i a unor toxine (enterotoxina, neurotoxina etc.) precum i
producerea hemolizinei i factorului citotoxic necrotizant.
n anumite conditii E. coli poate s dea natere la diferite afeciuni locale sau generale:
- afeciuni genito-urinare (85 % patotipuri uropatogene datorat unor adezine, hemolizine,
aerobactinei, care au receptori pe tractul urinar),
- infectii intestinale.
Sunt 6 patotipuri diareigene:
ETEC(enterotoxigen),
EHEC (enterohemoragic),
1
Familia Enterobacteriaceae cuprinde 5 triburi, mprite pe baza caracterelor biochimice.
Tribul 1 - genul ESCHERICHIA
- genul SHIGELLA
Tribul 2 - genul SALMONELLA
- genul ARIZONA
- genul CITROBACTER
Tribul 3 - genul KLEBSIELLA
- genul SERRATIA
- genul ENTEROBACTER
Tribul 4 - genul PROTEUS
- genul PROVIDENCIA
Tribul 5 - genul YERSINIA
Genurile Shigella i Salmonella sunt ntotdeauna patogene. Celelalte genuri sunt saprofite, condiionat patogene, cu
excepia speciei Yersinia pestis care este ntotdeauna patogen (produce ciuma sau pesta).
32
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
EIEC (enteroinvaziv),
EAggEC (enteroagregativ),
EPEC(enteropatogen),
DAEC (enteroaderent difuz).
Mai poate genera: endocardite, meningite, septicemii. Rspunsul imun este slab.
Genul Salmonella. Este un grup al familiei Enterobacteriaceae, tribulul 2, format din bacili
Gram negativi, mobili, nesporulai, ce au o structur antigenic complex i patogenitate ridicat
pentru om.
Clasificarea pe baza structurii antigenice a fost alctuit o schem de diagnostic n care genul
Salmonella a fost mprtit n grupuri (cu antigene somatice comune) fiecare grup este format
din specii care se diferentiaz prin antigenele flagelare specifice. Germenii din acest gen se
ntlnesc la omul bolnav sau purttorii de germeni, la mamifere, reptile, n mediul extern: ape,
sol, alimente.
Caractere morfologice i tinctoriale. Sunt bacili cu lungime de 2-3 m i groi de 0,6 m,
mobili, cu cili peritrichi bine dezvoltai, nu formeaz spori, majoritatea speciilor nu au capsule,
sunt Gram negativi.
Caractere de cultur
Sunt germeni aerobi, facultativi anaerobi.
Cresc pe medii de cultur simple (bulion, ap peptonat, geloz nutritiva).
Cresc sub forme S" care tulbur uniform mediile lichide i formeaz colonii netede,
rotunde, lucioase pe medii solide; sau sub form R", care sedimenteaz n mediile lichide i dau
natere la colonii zbrcite, cu margini neregulate, pe medii solide.
Salmonella typhi este cea mai patogen specie, i sintetizeaz totdeauna un flagel din
proteine specifice, de aceea poate identificat. Kauffman i White au stabilit c Salmonella cu
Ag O" = 9 sau 12 i cu Ag"H" = d, este Salmonella typhi, iar cu Ag"H"= g sau m este
Salmonella enteritidis. Acest fapt are mare importan practic deoarece cu ajutorul serurilor
imune specifice se poate pune diagnosticul. Antigenul solubil este endotoxina, ea are un rol
patogen mult mai important la salmonelele cu caracter invaziv, deoarece sunt puse n circulaie,
ducnd la generalizare (febra tifoid). Produsele patologice care se examineaz sunt: sngele,
mduva oaselor, materiile fecale, urina, bila, lichidul din petele lenticulare, n cazuri letale i
sngele din mduv, fragmente din organe (ficat, splin, ganglioni mezenterici).
Caractere de patogenitate. Toate salmonelele sunt patogene, prin multiplicare i
endotoxinogenez, iar cele ce prezint i o pseudocapsul (Ag Vi") au i caracter de invazivitate.
La om salmonelozele sunt sub dou forme principale:
- Boli septicemice, cu evolutie grav i mortalitate ridicat, cum sunt febra tifoid (produs de
bacilul tific) i febrele paratifoide A. B i C (produse de bacili parotidici A, B i C).
- Boli localizate, mai ales la nivelul tubului digestiv (toxiinfectiile alimentare i enteritele), cu o
durat mai scurt i de o gravitate mai redus.
Imunitatea
Fotii bolnavi de febr tifoid i parotifoid dobndesc o imunitate destul de solid, care poate
dura toat viaa.
Imunitatea n toxiinfeciile alimentare i a enteritelor este slab.
Imunitatea antitifoparatifoidic se poate dobndi i in mod artificial, prin vaccinare.
Diagnosticul de laborator n infeciile tifo-paratifoidice este bacteriologic i imunologic
Dup boala sistemic apar anticorpi care protejeaz cel puin 5-10 ani.
Bacilul dizenteric (Shigella dizenteriae)
Germenii genului Shigella produc dizenteria bacilar. Bacilii dizenterici sunt gsii n
materiile fecale ale bolnavilor de dizenterie i ale purttorilor. De asemenea se pot gsi n unele
alimente contaminate, ape poluate.
Caractere morfo-tinctoriale. Sunt bacili Gram negativi, imobili i nu sunt capsulai.
Genul Shigella are 4 subgrupuri serologice: A, B, C, D.
- Subgrupul A (Shigella dizenteriae) cuprinde 12 serotipuri. Acest grup este cel mai patogen.
Shigella Shiga este cel mai patogen dintre toate tipurile, elaboreaz exotoxina neurotrop.
33
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
- Subgrupul B (Shigella flexneri) cuprinde 6 tipuri, din care primele 4 au i subtipuri.
- Subgrupul C (Shigella baydii) cuprinde 15 tipuri serologice.
- Subgrupul D (Shigella sonnei) cuprinde dou faze: faza I (sau S) i faza II (sau R)
Caractere de patogenitate. Se evideniaz prin multiplicare i toxigenez, actioneaza la
nivelul sigmoidului provocnd ulceraii superficiale. n dizenteria dat de Shigella apar trei
simptome ce constituie sindromul dizenteric : scaune sangvinolente i mucoase, colici
abdominale, tenesme (senzaie de defecare fr scaun).
n general boala evolueaz cronic, uneori pe fondul unei rezistene sczute, dau recidive. La
copii este cea mai grav dizenterie.Rspunsul imun este foarte slab.
Vibrionul holeric (Vibrio cholerae)
Holera este o boal infecioas acut din grupul infeciilor de carantin i intestinale,
provocat de mai muli vibrioni (asiatic, El-tor, non O139), care ptrund n organismul uman
prin tractul digestiv, caracterizndu-se clinic prin simptome de deshidratare i crampe sau
convulsii musculare, manifestndu-se prin diaree i vome repetate, ce duc la dereglri
circulatorii i a metabolismului hidrosalinic. Primele 6 pandemii de holer au fost provocate de
vibrionul asiatic, iar acea de astzi de vibrionul El-tor. Ultimul este cu mult mai rezistent n
mediul ambiant. El se pstreaz destul de ndelungat la temperaturi joase (n experimente pn
la 127 zile), n bazinele acvatice cteva luni; n lapte i produse lactate 14-30 zile; pe
suprafaa legumelor i a fructelor 5-7 zile; n intestinul mutelor 4-5 zile; n organismele
hidrobionilor (peti, molute, broate, raci, crabi, stridii etc.) un timp mai ndelungat.
De notat, c vibrionul El-tor dup structura antigenic se subdivizeaz n serotipurile: Ogava,
Inaba i Higoima. n epidemia din 1995 n ara noastr preponderent (97%) s-a nregistrat
serotipul Ogava.
Sursa de infecie o constituie omul bolnav i purttorii de vibrioni. Ultimii n holera El-tor se
ntlnesc mai frecvent dect n cea asiatic i sunt periculoi, deoarece pacientul nu are semne
clinice.
Holera, ca i celelalte infecii intestinale, se transmite prin intermediul apei, produselor
alimentare, minilor murdare, obiectelor de uz casnic contaminate cu excreiile bolnavilor
holerici i prin intermediul mutelor. Un pericol evident n privina molipsirii de holer El-tor l
prezint contaminarea cu hidrobionii (animalele acvatice sus menionate) i chiar consumarea n
hran a unor din ei.
Genul Corynebacterim include mai multe specii de bacili Gram pozitivi (poate fixa
colorantul neregulat i pot avea incluziuni de polimetafosfat), uor incurbai, maciucai, aezati
n V. L mici grmezi neregulate, sau n palisade, nesporulai, necapsulari, imobili, aerobi,
facultativ anaerobi, catalazo pozitivi. Dintre Corynebacteriile patogene pentru om, grupul
Corynebacterium diphtheriae reunete trei specii: C. diphtheriae cu 4 biotipuri (gravis, mitis,
intermedius i belfanti ), C. ulcerans, C. pseudotuberculosis. C. diphtheriae are capacitatea de a
elabora exotoxin n urma conversiei genetice.
Bacilul difteric - Corynebacterium diphtheriae este agentul cauzal al difteriei. Difteria
este o boal infecioas grav, care n forma ei caracteristic se manifest printr-o leziune la
poarta de intrare, cel mai frecvent la nivelul amigdalelor, unde produce un exudat fibrinos,
aderent: "falsa membran" de culoare gri-maronie (diphthera = membran).
Ea se formeaz local sau se extinde acoperind faringele, obstructionand arborele traheo-
bronic producand crup laringian care poate provoca asfixie mecanic.
La adpostul falsei membrane, bacilii i continu multiplicarea i sinteza de toxin.
Tulpinile lizogene (infectate cu bacteriofag tox+) sintetizeaz toxina eliberat
extracelular i difuzat n organism pe cale sanguin i limfatic produce leziuni importante la
nivel cardiac (miocardit), nervos (demielinizare), renal (necroz tubular), suprarenalism,
muscular i hepatic. Diagnosticul de laborator este bacteriologic.Este un diagnostic de mare
urgent.
34
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Bacilul Koch2 (Mycobacterium tuberculosis), bacilul tuberculos, manifest un
parazitism strict, el este prezent n leziunile omului sau animalelor bolnave de tuberculoz, poate
fi gsit n praful din ncperile n care a fost rspndit sputa bacilifer sau pe obiectele
contaminate de bolnav.
Sunt bacili subiri cu lungimea de 3-10 m i ltime de 0,1-0,2 m, uneori ramificati,
drepi sau uor curbati sub formn literelor: X, Y, Z, cu granulaii puse n evident prin coloraii
speciale, imobili, nesporulati, necapsulati.
Rezistent. Bacilii rezist luni sau ani n praf, sunt sensibili la aciunea radiaiilor solare
i UV, sunt sensibili la aciunea antibioticelor: streptomicin, HIN, acidul para-amino salicilic,
etambutol, rifampicin (sinerdol), dar pot ctiga uor rezistent.
Diagnosticul de laborator este bacteriologic i se bazeaz prin punerea n eviden a
bacilului Koch n produsele patologice, n acest scop se folosesc 3 metode: examenul direct,
cultivarea i inocularea la cobai.
n tuberculoza pleuro-pulmonar se recolteaz: sput, aspirat bronic sau cavitar, lichid
de spalatura bronic, piese de exerez chirurgical, lichid de spltur gastric, fecale, piese
necroptice, lichid pleural.
n tuberculoza uro-genitala: urin, sange menstrual, biopsie de endometru, piese de
exerez chirurgical.
n tuberculoza ganglionar: material din biopsie sau punctie.
n tuberculoza ostio-articular: lichid articular, ,puroi din abcese reci, fragmente osoase.
In meningita tuberculoas: lichid cefalorahidian.
Cel mai folositor produs este sputa, pentru c tuberculoza pulmonar este forma cea mai
frecvent.
Bacilul lepros (Mycobacterium leprae) este agentul etiologic al leprei umane. Lepra
este o boal cu o evoluie cronic, semnele de boal variaz mult de la un pacient la altul; la
congresul internaional de combatere a leprei din anul 1953 s-a fcut categorisirea formelor de
boal:
1. lepra nedefinit (prima faz cutanat eritematoas)
2. lepra tuberculoas (cderea prului, apar inflamaii nodulare pe traiectul nervilor,
descompuneri de esuturi)
3. lepra bordeline (form instabil, fiind definit de starea imun, care trece n forma grav)
4. forma de lepr grav (forma contagioas, apar pete roiatice, brune, cap de leu, inflamaii
pe traiectul sistemul limfatic i nervos, descompunerea de esuturi cu tumefieri i ulceraii.
Aceste procese se pot extinde n muchi, oase tendoane i organe, moartea fiind produs de
infeciile secundare bacteriene.
Bacilul carbunos3 (Bacilus anthracis) este o bacterie gram pozitiv, care provoac
antraxul. Denumirea vine de la o leziune des ntlnit antraxul cutanat (pielea afectat este de
culoare neagr, cu aspect de crbune).
Cele mai multe cazuri de imbolnavire la om sunt reprezentate de infectiile cutanate si
cele respiratorii. Afectarea intestinal apare foarte rar, iar meningita se manifest doar n cazurile
grave cu bacteriemie sever.
Antraxul cutanat are o incubaie in medie de 5 zile. Leziunile sunt localizate de obicei in
2
Genul MYCOBACTERIUM Germenii din acest gen apartin familiei Mycobacteriaceae. Aceast
familie cuprinde mai multe specii, fiind aproape toate saprofite cu excepia speciilor: Mycobacterium tuberculosis i
Mycobocterium leprae.
In anul 1882 Robert Koch descoper bacilul tuberculozei; tot n acelasi an Paul Ehrlich descoper acido-
rezistena bacilului tuberculozei. In anul 1884 Robert Koch obine cultura baciluli tuberculozei pe ser coagulat.
In 1891 tot R. Koch semnaleaz fenomenul Koch i tuberculina. A. Calmette i C. Gurin in perioada
1908-1921 au cultivat prin treceri la 21 zile, n bulion cartof glicerinat i biliat o tulpin de Mycobocterium bovis
virulent izolat din lapte. In urma acestor treceri s-a obinut o tulpin fr patogenitate, dar capabil s determine
rezistenta fa de infecia tuberculoas, caracterele morfologice,tinctoriale, nutriionale, de cultur au rmas cele
iniiale. Aceast tulpin (tulpina BCG - bacilul Calmette i Guerin) a fost utilizat ca vaccin mpotriva tuberculozei
ncepnd din 1921; n 1927 se organizeaz laboratoare de producie a vaccinului BCG n 26 de tri , inclusiv n
Romnia.
3
Anthrakis (gr)= crbune
35
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
zonele expuse ale pielii: tegumentul feei i al membrelor superioare. La poarta de intrare apare o
macula mica, rosie care ulterior va evolua catre forma de pustula si ulceratie, cu necroza si
edem. Iniial apare prurit (mancarime) iar catre final leziunea nu doare. De obicei pacienii nu
prezinta febr. Vindecarea spontan se produce in peste 90% din cazuri, dar exista si forme
severe de boal, care netratate se vor finaliza prin deces. Contactul in antecedente cu animale sau
produse de animale potential contaminate, orienteaza diagnosticul catre infectia cu bacilul
antrax.
Antraxul prin inhalaie (boala lnarilor). Dupa cateva zile, simptomele se acutizeaza: febra
crescuta, dispnee si hipotensiune arteriala. La examenul radiologic pulmonar, se observa
largirea simetrica a mediastinului (mediastinita hemoragica).
Antraxul gastrointestinal. Se constat o simptomatologie variabila: febra, greturi, varsaturi,
dureri abdominale, scaune diareice cu sange sau chiar ascita (lichid in cavitatea peritoneala).
Diareea severa determina deshidratare masiva si hemoconcentratie. Daca bacteria se localizeaza
la nivelul faringelui va determina: febr, disfagie (nghiire dificil a alimentelor), durere n gt
i adenopatie regional.
Bacilul tetanic (Clostridium4 tetani) Este un bacil Gram pozitiv anaerob, cu capete
nerotunjite de 3-4/0.4 m, sporul terminal nu prinde colorani obinuii diametrul transversal
depete de 2-4 ori pe cel al corpului bacterian, are un contur refringent, o form rotund, mai
rar ovalar. Bacilul tetanic este foarte mobil, prezentnd fenomenul de "crare' pe supafaa
gelozei, n condiii de anaerobioz, asemntor cu cel al proteusului n condiii aerobe.
Patogenitatea este determinat de o exotoxin pe care orice tulpin de Cl. tetani dup 48-
72 ore, n mediul lichid, o produce i este suficient pentru a provoca o intoxicaie tetanic
mortal la animalul de laborator. Aciunea biologic a toxinei tetanice se exercit prin fixarea
exclusiv i ireversibil pe sistemul nervos mai ales central (SNC).
Bacilul botulinic (Clostridium botulinum5). Este un bacil lung i gros 4-6/0,8-1,2 m,
Gram pozitiv, mobil datorit cililor peritrichi, cu spor subterminal, deseori cultura poate pune n
libertate muli spori.
Este lipsit de virulen, incapabil de multiplicare n organism, produce n afara
organismului cea puternic toxin cunoscut, a crei ingestie provoac boala.
Este rspndit n sol i se gsete n intestinul omului i animalelor.
Sunt apte serotipuri tipuri de Cl. botulinum (A, B, C, D, E, F, G) la noi este mai
rspndit tipul B, foarte rar tipul A.
Gangrena gazoas (Miozita clostridian). Infecie difuz necrozant deosebit de grav a
esutului muscular, cu extensie rapid favorizat de prezena esuturilor devitalizate. Clostridiile
gangrenei gazoase cele mai frecvente specii sunt: Cl. perfringens, Cl. histolyticum, Cl.
oedematiens, Cl. septicum, Cl. sporogenes. Pot provoca la om tabloul clinic al gangrenei
gazoase:
- mai frecvent la muchii membrelor,
- infecia uterin postabortum,
- infecia post-operatorie, post-colecistectomie,
- abces cerebral, infecie sinuzal, poate afecta orice esut sau organ.
4
Genul Clostridium cuprinde numeroase specii, majoritatea sunt saprofite, dar un numr redus sunt
patogene. Sunt bacili Gram pozitivi, mobili datorit unor cili peritrichi (n afar de CI. perfringens) cu dimensiuni
mari, strict anaerobi, formeaz spori ovoizi sau sferici care au dimensiuni mai mari dect grosimea bacilului,
deformndu-l, sunt rspndii n mediul exterior mai ales n sol (anaerobi telurici). Patogenitatea este dat de
invazivitate dar i de toxigenez. Anaerobii patogeni se mpart n dou grupe:
- anaerobi productori de toxine histotrope, clostridiiie gangrenei gazoase:
Cl. perfringens, Cl. histolyticum, Cl. oedematiens, Cl. septicum, CI. sporogenes, etc.;
- anaerobi productori de toxine neurotrope: Cl. botulinum i Cl. tetani.
5
Botulus = crnat n limba latin. Clostridium botulinum a fost izolat n 1896 de Van Ermengem n cursul unei
intoxicaii cu crnai.
36
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Curs 5
Leptospirozele sunt boli cu potential septic, produse de genul Leptospira, caracterizate prin:
- febr
- stare septic
- afectare hepatic i renal ( icter + oligoanurie)
Etiopatogenie: - Leptospira cu 280 de variante, gen Spirocetaceae (Treponema pallidum)
- au forma spiralat
- coloratie argentic; se vizualizeaz la microscopul cu fond ntunecat
- se gsesc n apele stttoare: bli, lacuri , iazuri, mine inundate; n dejeciile
de obolan
- frecvent i la cabaline extrageri manuale de placent veterinari.
Contaminare:
- pielea cu excoriaii la oamenii desculi, n special n orezrii;
- leptospirele au extremirile sub forma de crlig la un capt capilare sanguine ajung
n circulaia general diverse organe ochi, rinichi, ficat, meninge, splin, plamni.
Dupa fixare la nivelul organelor, leptospirele se multiplic intens determinnd leziuni
morfologice i funcionale, determinnd i o serie de sindroame, astfel:
- la nivel pulmonar determina pneumonite
- la nivelul ficatului apar leziuni datorita corpului microbian;
- la nivelul rinichiului sunt afectate : interstitiul si mb. Bazala
- la nivelui meningelui: plexurile coroide meningee
- la nivelul ochiului: umoarea apoasa
- la nivelui pielii: sdr eruptiv ( congestie tegumentara)
- Starea septica induce sdr. de CID sdr. hemoragic.
- Leptospirele dau cele mai multe cazuri de IRA; netratate duc direct la dializ
- Sdr. de insuficienta hepato-renal, cu: oc toxic, acidoz metabolic, transpiraii reci,
hemoragii
Tipuri de leptospiroze ntlnite:
- leptospiroza cu L. pomona ( sursa de infectie porci i sobolani)
- leptospiroza cu L. Grippo- Typhosa (oareci de camp, vite, cai)
- leptospiroza cu L. canicola (cinele)
- leptospiroza cu L. hyos (porc, soareci, vidr).
Genul Brucella cuprinde ase specii dar trei sunt de interes uman producnd
antropozoonoze:
Brucella melitensis (capre, oi),
Brucella abortus (vaci),
Brucella suis (porci).
Sunt cocobacili (bacili foarte mici) cu lungimea de 1 m i grosimea de 0,3m; sunt
ncapsulai, imobili, nesporulai, aerobi, Gram negativi.
Se gsesc n organismul infectat, animalele domestice care elimin bacteriile prin produsele
de avort, secreii, lapte etc., urmate de contaminarea masiva a mediului extern (sol, ap,
vegetaie) i de infectare a altor animale, omul fiind o gazd accidental, aprnd ca verig final
n lantul de transmisie a infeciei.
Brucella se multiplic intracelular, de aceea este rezistent la antibiotice. Calea de intrare
este digestiv, prin alimentele contaminate, sau prin contaminarea tegumentelor (ns nu pe cele
intacte). Animalul gestant bolnav prezint avort spontan.
Bruceloza se mai numete febr ondulant. Dup intrarea n organism cocobacilul se
multiplic intracelular n ganglionii limfatici i apoi ptrunde n circulatia sanguin.
37
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
Boala are o evoluie cronic, apar leziuni de tip proliferativ numite granuloame.
Gronuloamele se observ la nivel cutanat, n ficat, splin,. sistem nervos, boala fiind o
septicemie cu evoluie lent.
Rickettsiile sunt microorganisme care se situeaz la grania dintre bacterii i virusuri. Se
asemr cu bacteriile prin: dimensiuni, morfologie, organizare celular intern, compoziie
chimic, multiplicare prin divziune direct. Se aseamn cu virusurile deoorece nu cresc pe
medii acelulare, ele se multiplic numai in esuturi vii, ca virusurile.
Familia cuprinde trei genuri: Rickettsia, Coxiella i Ehrlichia. Aceste microorganisme
sunt transmise de artropode (pduche, purice, cpu) multiplicndu-se n corpul acestora.
Specia tip al acestei familii este Rickettsia prowazeckii, care este specific omului, celelalte
specii au ca surs animalele.
a b c
Figura 10. Agentul etiologic Treponema pallidum (a) i manifestarea sifilisului la nivel
tegumentar (b, c) (http://www.lib.uiowa.edu/hardin/MD/cdc/syphilis33.html).
Fungii sau ciupercile constituie astzi un regn aparte. Aparatul vegetativ este alctuit din
39
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
filamente numite hife a cror totalitate alctuiete miceliul. Reproducerea la ciuperci se
realizeaz prin spori.
Dup felul nutriiei fungii pot fi parazii i fungi saprofii. Aproape toti fungii sunt aerobi.
La fungi peretele celular conine chitina.
nmulirea poate realiza vegetativ prin simpla fragmentare a miceliului sau prin
intermediul unor formaiuni specializate numite spori. Sporii fungilor pot fi sexuati i asexuati.
Sporii sexuati: iau natere direct sau indirect printr-un proces de ncruciare ntre 2 celule de
sex opus. Se ntalnesc la fungii perfeci.
41
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
a b c d
Figura 15. Aspecte structurale la fungi: a, b- conidii cu conidiofori; c- miceliu septat, d- Aspergillus fumigatus.
42
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
toata populaia i n mod normal eliminai rapid de catre sistemul imunitar. Este agentul cauzal al
diverselor aspergiloze intalnite la om cu localizari diverse: pulmonare, nazale, oculare, cerebrale,
osoase, cardiovasculare si viscerale. n aspergiloza pulmonar simptomele pot include: febra,
slbiciune general, dureri de piept, pierderi de greutate, snge n urina, linii roii subiri sau
vase de snge sparte sub unghii.
Alternaria alternata este un mucegai de interior (se dezvolta n spaiile nchise), destul de
comun. Intr-un studiu efectuat a fost gsit n 87% din casele examinate. Este considerat unul
dintre cele mai importani alergeni; Alternaria alternata a fost implicat n cazurile de alergie la
persoanele care au fost expuse la lemn, ori rumegu de lemn, de asemenea cauzeaz pete maronii
pe plante.
CURS VI
Candidoza i actinomicoza
Candidoza bucal este determinat cel mai frecvent de Candida albicans, dar pot fi
implicate i alte genuri precum Candida tropicalis, Candida krusei, Candida parapsilosis sau
Candida glabrata. Inmulirea acestei ciuperci este controlat de o serie de bacterii prezente la
nivelul mucoasei bucale. Apariia unei noi bacterii la nivelul gurii ce rupe echilibrul dintre
microorganismele deja prezente aici, va permite ciupercii s se inmueasca n mod necontrolat.
Candidoza bucal este mai frecvent la nou-nascui, sugari i batrni.
Unele medicamente permit ciupercilor s se nmuleasca necontrolat:
- antibioticele, n special cele cu spectru larg (de exemplu, tetraciclina);
- contraceptive orale (pilulele);
- medicamente ce scad capacitatea de aprare a organismului precum corticosteroizii.
Modul de transmitere a ciupercii ce determina candidoza bucal difer n funcie de
vrst.
a b c
Figura 16. Candida albicans: agent etiologic (a-MO, b-ME) i aspect al infeciei n candidoza bucal (c).
Candidoza bucal, n forma sa uoar, poate ramne asimptomatic. In formele medii sau
severe apar simptomele.
La sugari
- pete (depozite) de culoare alb localizate la nivelul gurii i pe limba cu aspect brnzos.
Candidoza bucal poate fi confundata cu depozitele de lapte ce raman dupa alaptare. Aceste pete
alb-branzoase sunt aderente la mucoasa si nu pot fi indepartate cu usurinta. Daca sunt frecate,
pot sangera - limba si gura devin dureroase si pot apare dificultati la inghitire;
- scderea apetitului: sugarul poate refuza masa, mama confundnd uor acest simptom cu starea
de saietate (lipsa foamei) a copilului. In aceste conditii, sugarul poate deveni agitat;
- eritemul fesier: apare atunci cand infecia micotic se extinde si la nivel intestinal, ciuperca
fiind prezenta n scaunul sugarului;
- mameloane dureroase i eritematoase (roii) la mam: candidoza bucal a sugarului poate trece
neobservat pn n momentul n care mameloanele mamei devin roii i dureroase, n special n
timpul sau dup alptare.
La aduli
- senzaie de arsur la nivelul gurii i a gtului (de obicei acestea sunt simptome incipiente);
- pete albe aderente de mucoasa gurii i a limbii. esutul din jurul acestor depozite albicioase
43
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
este rou i dureros. Daca este frecat (n timpul periajului dinilor, de exemplu) poate sngera;
- apariia unui gust neplcut sau a dificultilor de a gusta alimentele.
Dac infecia micotic nu este tratat sau nu se remite spontan exist riscul ca aceasta s
afecteze i alte organe: la nivelul gatului (esofagului), a vaginului sau a pielii.
Pentru a preveni apariia candidozei bucale ar trebui urmate recomandarile de mai jos:
- meninerea unei igiene orale riguroase, aceasta implicnd perierea dinilor, curarea acestora cu
a dentar i folosirea unei ape de gur antiseptice zilnic. Daca pacientul a prezentat n
antecedente o infecie micotica a gurii, se recomanda schimbarea periuei de dinti;
- splarea minilor;
- dac se foloseste un antibiotic lichid se recomand cltirea gurii cu ap imediat dup
administrarea acestuia;
- tratarea afeciunilor medicale ce favorizeaza apariia candidozei, precum diabetul zaharat,
neoplasmele sau HIV;
- folosirea unui spacer pentru a administra corticosteroizii inhalatori, se recomanda cltirea gurii
cu ap dup fiecare administrare;
- la pacienii cu SIDA se recomand clatirea zilnic a gurii cu o soluie antiseptic.
Figura 17. Mecanismul infeciei n aspergiloza Figura 18. Mecanismul infeciei n candidoz:
pulmonar: Aerosoli cu conidii de Aspergillus Candida albicans traverseaz microvilii direct sau prin
fumigatus inhalai ajung n alveole unde, in mod germinaie i ajunge, prin intermediul circulaiei la
normal sunt eleiminate de macrofagele alveolare i organe unde se localizeaz de obicei n cortex unde
PMN. Imunitatea sczut perimte germinarea conidiei formeaz pseudohife. Normal sunt atacate i eliminate
i invazia. A fost semnalat de asemenea invazia de mononucleare i PMN. Factorii virulenei
direct a epiteliului ciliat. (adezinele, fenotipuri variabile, proteinele antioxidante
sau enzimele invasive) favorizeaz invazia n
organism.
Candidoza genital este dat tot de Candida albicans.
La femei:
- vulvo-vaginita - inflamaie a vulvei i a vaginului (vezi anatomia feminina) - aparitia unei
scurgeri (n cantitate mare) alb-cremoas, urt mirositoare. Ca la majoritatea infectiilor apare i
o mancrime jenant, senzaii de durere sub forma de arsur fr o localizare precis. De obicei
se asociaz i cu infecie la nivelul aparatului urinar determinnd dureri la miciune (urinare).
- netratat - se poate extinde, de la o simpl vulvo-vaginit, pn la nivelul ntregului perineu
(zona dintre picioare), la nivelul stinghiilor, coapselor, zona anusului. In timp mucoasa vaginal
sufera un proces de atrofie determinnd dureri continui.
La brbai
- balanita sau balanopostita - inflamatia glandului i a antului dintre gland i prepu - se manifest
mai sever cu aparitia unor bubie cu puroi care se pot sparge sau se usca; n unele cazuri apare i
o pseudomembrana alb-glbuie. Apar senzaii intense de mncrime local, dureri sub forma de
arsur.
- netratat - se extinde ajungand pe scrot i zona stinghiilor.
La ambele sexe se poate manifesta doar prin atingere urinar - la nivelul uretrei -
scurgere abundent / redus de puroi, cu urini tulburi, dureri la miciune, miciuni dese, prurit.
Este definit i termenul de candidoza conjugal cnd cei doi parteneri sexuali au o
44
Dr. biolog D. Gheeu - Microbiologie
candidoz genito-urinar care se manifest (uneori femeia poate purta fr nici o manifestare o
infecie cu Candida).
Tratament - dupa un examen la un medic specialist care a indicat i obinut rezultatele
unui examen microscopic ce pune n eviden ciuperca, tratamentul se poate ncepe cu o gama
foarte larga de antimicotice: Amfotericina B, Nistatin, Natamicina, Terbinafina, Itraconazol,
Fluconazol, Butoconazol, Clotrimazol, Ketoconazol, Flucitozina, Ciclopiroxolamina, etc.
Tratamentul se efectueaz concomitent la ambii parteneri sexuali. Tratamentul cu
antimicotice trebuie susinut i de o foarte bun igien local prin splturi zilnice (chiar de mai
multe ori pe zi) cu spunuri care sunt neutre sau bazice, splturi n care s-a dizolvat bicarbonat
de sodiu (chiar din cel alimentar - 2 - 3 linguri la un lighena de ap), soluii antiseptice pentru
splturi vaginale din comer.
Actinomicoza este o boal parazitar cutanat (dermatomicoz) sau visceral
(visceromicoz), provocat de microorganisme (Actinomyces ex. A. israelii, Actinobacillus),
comun omului i animalelor (n special a bovinelor, dar care apare i la cai, porci, cini i
pisici). Se manifest pe piele mai ales n regiunea capului, n jurul cavitii bucale i a gtului
sau, mai rar, la nivelul organelor (plmni, creier, inim, intestin, amigdale, mucoase bucale,
glande salivare, etc) prin apariia unor nodoziti subcutanate. Cel mai frecvent, infecia se
localizeaz la nivelul maxilarului inferior. Nodozitile sunt dure la nceput, apoi se nmoaie i
excret puroi cu granule galbene (puroiul conine filamentele i sporii microorganismului
parazitar). Limba se umfl i se rigidizeaz (limb de lemn).
46