Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
LISTA COLABORATORILOR
Coloraia Gram
Principiu: Dup colorare cu violet de metil i mordanare cu
soluie iodo-iodurat (Lugol) unele bacterii rezist la
decolorarea cu alcool i rmn violete (sunt grampozitive),
altele se decoloreaz i le putem recolora n rou cu fucsin
(sunt gramnegative). Comportamentul diferit al bacteriilor n
coloraia Gram l numim afinitate tinctorial.
Indicaii: aspectul morfotinctorial al bacteriilor n coloraia
diferenial Gram este caracter taxonomic primar util pentru
clasificarea preliminar a bacteriilor urmrii partea dreapt a
figurii).
Procedura (urmrii partea stng a figurii):
A. Colorare un minut cu soluie 0,2% violet de metil. Splare cu
ap de robinet.
B. Mordanare 2 minute cu soluie Lugol.
C. Decolorarea cu alcool-aceton este timpul cheie al coloraiei.
Alcoolul decoloreaz rapid. Adaosul de aceton n proporie de
1/3 face reactivul mai uor de manipulat i permite
decolorarea (diferenierea) optim n 5 secunde pentru
frotiurile subiri (e.g. din culturi) i 10-15 secunde pentru cele
mai groase (e.g. din prelevate patologice).
D. Recolorare cu fucsin fenicat Ziehl diluat 1/10.
Fig. 2-2:
Controlul de calitate
al coloraiei Gram
Utilizm un frotiu efectuat
dintr-o suspensie cu densi-
tatea 3 Mc Farland din
cultura peste noapte pe
agar nutritiv a Escherichia
coli ATCC 25922 i Bacillus
megaterium.
a. Tulpinile capsulate
formeaz colonii mucoide cu
tendin la confluare.
c. Colonii turtite, cu
suprafaa mamelonat, contur
neregulat (matt).
d. Tulpinile necapsulate
formeaz colonii mici,
rotunde, opace (glossy).
Fig. 9-2: Cultura pe agar cu
5% snge de berbec (1/1) a
unui streptococ -hemolitic:
streptococ viridans ce culti-
v sub forma coloniilor mici
(aprox. 1mm), nepigmenta-
te, opace, nconjurate de o
zon de liz parial a he-
matiilor ce determin
"nverzirea" mediului (-
hemoliz).
Fig. 9-3: Frotiu din cultura de
24 ore n bulion glucozat a
unei tulpini de Streptococcus
pyogenes. Coloraia Gram:
coci sferici gram-pozitivi
aezai n lanuri lungi.
Fig. 9-4: Impetigo contagiosa.
Faa este unul din sediile de
elecie.
La acest copil observm prezena
leziunilor multiple aflate n diferite
stadii evolutive: vezicule, pustule,
cruste galbene,"melicerice".
Denumirea popular a bolii este
aceea de "bube dulci".
Fig. 9-5: Streptococcus pyogenes. Frotiu din puroi obinut dup
detaarea unei cruste melicerice. Coloraia Gram (1000x). Sunt prezente
celule inflamatorii i coci sferici gram-pozitivi ce formeaz o pereche i
trei lanuri.
Fig. 9-6: Testul sensibilitii la
bacitracin i sulfametoxazol-
trimetoprim: tulpina de strep-
tococ -hemolitic prezentat
este sensibil la bacitracin
(B) i rezistent la sulfame-
toxazol-trimetoprim (SXT),
deci este streptococ de grup
A.
!
Micobacterii atipice
!
Mycobacterium leprae
!
Fig. 19-7: n partea stng desen: Mycobacterium leprae, bacil acido-rezistent
dispus n aglomerri compacte de bacili aliniai paralel i cap la cap, numite
"globi".
n dreapta: frotiu din raclatul unei leziuni ulcerate de lepr lepromatoas;
coloraia Ziehl-Neelsen modificat (1000x): bacili acido-rezisteni intra i extra
celulari dispui n "globi leproi".
Mycobacterium leprae
!
Fig. 19-8: Lepra tuberculoid:
stnga: macul la nivelul obrazului stng;
dreapta: zone depigmentate la nivelul toracelui.
n aceste zone, srace n bacili, neulcerate i puin contagioase, sunt prezente
tulburri de tip nevritic (anestezii).
Mycobacterium leprae
! !