LP 3.

DECONTAMINĂRI PRIN CĂLDURĂ UMEDĂ

Temperaturi mai mici de 100oC

Pasteurizarea

 Foloseşte acţiunea combinată a caldurii umede şi a frigului

 Încălzirea lichidelor alimentare la temperaturi între 63oC şi 135oC distruge formele
vegetative, dar nu si sporii bacterieni.
 Refrigerarea imediată la 4oC completează, prin şoc termic, efectul micrbiocid al cşldurii şi
împiedică multiplicarea microorganismelor
Tip de pasteurizare Temperatură Timp
o
Joasă 63 C 30 minute
o
Medie 72 C 15 secunde
Înaltă (UHT) 135 oC 1 secundă

Tyndallizarea (sterilizarea fracţionată)

 Indicaţii: substanţe termolabile (medii de cultură, alimente).

 Parametri: 30-60 min., 3-8 zile consecutiv, la 56-100ºC
 Principiu: în intervalul dintre expuneri, produsele sunt menţinute la temperatura camerei, ceea
ce permite germinarea sporilor, formele vegetative care rezultă fiind distruse la al doilea sau
urmatoarele tratamente termice.

Temperatura de 100oC
Fierberea

 Omoară formele vegetative ale bacteriilor, aproape toate virusurile şi fungii în cca. 10 minute,
virusul hepatitei B în cca. 30 minute, iar unii endospori bacterieni în peste 20 de ore.
 Indicaţii: decontaminarea apei de băut, lenjeriei, instrumentarului de mică chirurgie în
urgenţe (în absenţa celui steril); fierul de călcat cu aburi distruge formele vegetative
bacetriene în 5-10 secunde.
 Parametri: 30 min., 100ºC
 Instrumentele se aşează pe un grătar ce se ridică aseptic la sfârşitul fierberii; instrumentele
fierbinţi se usucă pe fierbătorul fierbinte.

Temperaturi peste 100oC

Sterilizarea prin vapori de apă sub presiune (autoclav)

Autoclavul = incintă cu axul vertical sau orizontal, cu pereţi metalici rezistenţi şi un sistem de
închidere ermetică, în care vaporii de apă se comprimă la presiunea necesară sterilizării.
o Principiu: căldura umedă omoară microorganismele prin coagularea proteinelor; căldura
umedă este mai nocivă decât cea uscată.
o Indicaţii:
 soluţii (medii de cultură);
 sticlărie de laborator cu destinaţii speciale (pentru culturi de celule);
 bioreziduuri (culturi microbiene, produse biologice);
 material chirurgical din bumbac;
 obiecte şi instrumente din cauciuc;
 instrumentar metalic
o Parametri:
 presiune 0,5 atm 1 atm 2 atm
 temperatură 115ºC 121ºC 134ºC
 timp (formulă de calcul)

timpul de sterilizare = t egalizare a temperaturii + t omorâre a microbilor.

≈ natura, forma, = constant
volumul materialelor
o Etape de lucru:
 constituirea lotului de sterilizare,
 verificarea nivelului apei din interiorul autoclavului,
 introducerea materialelor ambalate şi a martorilor,
 închiderea autoclavului,
 evacuarea aerului (se cufundă într-un vas cu apă un tub de cauciuc adaptat la
robinetul de vapori; aerul este complet evacuat din incinta de sterilizare, când încetează a mai
barbota în apă)
 închiderea robinetului de evacuare a aerului
 ridicarea presiunii,
 sterilizarea (se urmăreşte realizarea temperaturii de sterilizare şi a timpului
corespunzător de menţinere a acesteia),
 coborârea presiunii,
 deschiderea aparatului (imediat ce presiunea a ajuns la 0; lichidele fierbinţi vor fierbe
exploziv şi pot sparge flacoanele dacă presiunea este mai mare de 0)
 uscarea materialelor (în autoclav, cu capacul deschis – vaporii de apă vor împiedica
depunerea pulberilor),
 verificarea martorilor,
 marcarea şi sigilarea materialelor.
o Controlul de calitate/martori:
 martori fizici: temperatură, presiune
 martori chimici: benzi adezive a căror culoare virează corespunzător numai când sunt
respectaţi parametrii sterilizării (temperatură şi timp).
 martori biologici: 106 spori de Bacillus geostearothermophilus în fiole cu medii de cultură.
după sterilizare, distrugerea sporilor este atestată prin absenţa cultivării, la 57oC, 48 h;
 martorii fizici şi chimici trebuie verificaţi la fiecare ciclu al sterilizării, iar martorii biologici
trebuie verificaţi săptămânal