Metode de sterilizare in microbiologie

Forma vegetativa a unei bacterii reprezinta forma

capabila sa se multiplice si sa produca boala.

Sporul bacterian reprezinta forma de rezistenta a

bacteriilor la conditiile nefavorabile de mediu

In conditii nefavorabile forma vegetativa a bacteriei trece in

forma de rezistenta prin procesul de sporulare, iar cand are din nou conditii prielnice pierde invelisurile si revine la forma vegetativa prin procesul de germinare.

 Din punct de vedere al patologiei umane sunt

implicate doua genuri bacteriene sporulate: Genul Bacillus(B. anthracis) si Genul Clostridium(C. tetani, C. botulini)

Metodele de sterilizare tin cont de posibilitatea

prezentei tulpinilor sporulate, motiv pentru care temperatura si intervalul de timp necesar trebuie adaptate in functie de acestea.

Ce este sterilizarea?

 Sterilizarea reprezinta un proces ce ndeprteaz i distruge toate microorganismele dintr-un mediu sau din interiorul unui obiect cu ajutorul unui agent chimic sau printr-un proces fizic.

Clasificarea metodelor de sterilizare:

Metode care utilizeaz ageni fizici:
cldura ( uscat, umed), radiaii UV, filtrarea, ultrasunetele.

Metode care utilizeaz ageni chimici:

substane antiseptice, substane dezinfectante.

 Metode care utilizeaz cldura uscat:

incinerarea, nclzirea la rou, flambarea, sterilizarea cu ajutorul aerului cald.

Metode care utilizeaz cldura umed:

fierberea, pasteurizarea, tindalizarea, autoclavarea

Sterilizarea prin intermediul radiatiilor:

Radiatiile sunt ionizante (X, gamma) si
neionizante (UV): efcte bactericide prin ruperea legaturilor de hidrogen, oxidarea dublelor legaturi din structura microorganismelor. produc radiatii UV

In microbiologie se utilizeaza lampi germicide ce Radiatiile ionizante se utilizeaza in sterilizari

industriale: alimente, medicamente, seringi de unica utilizare etc.

Metode de sterilizare prin caldura: 1. Caldura uscata:

-Incinerarea
-Incalzirea la rosu -Flambarea -Sterilizarea cu aer cald

Incinerarea
Incinerarea const n arderea materialului biologic n cuptoare speciale sau crematorii. Prin aceast metod sunt distruse cadavrele animalelor scoase din exploatare ca i vata i tifoanele infectate.

nclzirea la rou
nclzirea la rou este folosit pentru ansele bacteriologice care sunt meninute n flacra becului de gaz pn la rou, mai nti la baza flcrii, apoi la vrf. Ansa se sterilizeaz obligatoriu nainte i dup utilizare.

Flambarea
Flambarea const n trecerea prin flacra becului de gaz de cteva ori a obiectului care se sterilizeaz- lame de sticl, pipete gradate, pipete Pasteur, nainte de sterilizare iar ansa i gtul eprubetelor i baloanelor nainte i dup utilizare.

Sterilizarea cu aer supraincalzit inetuva(cuptorul Pasteur =Poupinel)

Se face in cuptorul Pasteur (sau Poupinel) Sterilizarea se realizeaza la 180C timp de o
ora,sau la 160C 2h, determinind carbonizarea microorganismelor, forme vegetative sau spori. Temperatura de 180C este necesara deoarece caldura uscata are o putere redusa de patrundere.
obiectelor cu parti metalice, a celor din cauciuc, lichide)

Se aplica pentru obiecte din sticla si portelan(nu

 Caldura umeda:
1. fierberea 2. pasteurizarea 3. tindalizarea 4.sterilizarea prin vapori sub presiune (autoclavare)

 Fierberea = este considerata sterilizare

incompleta deoarece actioneaza prin denaturare asupra formelor vegetative dar nu si asupra sporilor. 30min.la 100C, din momentul inceperii fierberii. instrumentelor ce se utilizeaza imediat.

Timpul de sterilizare este de minimum

Se foloseste pentru sterilizarea

 Tindalizarea=sterilizare fractionata sau

discontinua.

Se incalzesc produsele in baia de apa consecutiv

3-8 zile, timp de 1-3 ore intre 60-100C. Intre incalziri materialul este pastrat la 4C. peste 100C se altereaza ( unele medii de cultura

Metoda este aplicata in special pt lichidele care

Autoclavarea
Sterilizare prin vapori de apa sub presiune.
Caldura umeda sub presiune fiind mai
penetranta, este cea mai sigura metoda de sterilizare.

Ridicand presiunea vaporilor de apa la 1 atm., se

realizeaza o temp. de 120C care in 30 min. distruge atat formele vegetative cat si sporii.

 In autoclav se sterilizeaza medii de cultura,

material infectios, obiecte de cauciuc, aparate de filtrat, caserole cu material chirurgical, etc.

Nu se sterilizeaza lichide alterabile la peste

100C.

Presiunea interioara folosita este de

-0,5 atm-115C -1 atm-121C -2 atm-134C In microbiologie:121C in 15-30 min.

Autoclave