DOZAREA TRIGLICERIDELOR IN SER (metoda enzimatica)

Trigliceridele sunt esteri ai acizilor grasi cu glicerol, avand urmatoarea structura:

Prin hidroliza trigliceridelor sub actiunea lipazei pancreatice se elibereaza 2 molecule

de acid gras si 2-monoacil – glycerol (monoglicerid). (vezi imaginea).

Sursa trigliceridelor este fie exogena din absorbtia lipidelor, fie endogena, pornind de
la glicerol-3-fosfat si acizi grasi activati (Acil-CoA). In ficat si tesutul adipos are loc cea mai
importanta sinteza de trigliceride. Trigliceridele sintetizate in ficat sunt incorporate in VLDL
si transportate prin sange. Trigliceridele sintetizate in tesutul adipos reprezinta forma de
depozit si constituie principala sursa de acizi grasi ce va fi eliberata in conditii de nevoi
energetice.

Principiul metodei de dozare :

Trigliceridele (TG) sunt hidrolizate la acizi grasi (AG) si glicerol in prezenta lipazei.
Urmeaza o succesiune de reactii enzimatice astfel :

TG AG + Glicerol (lipaza)
Glicerol + ATP Glicerol-3-P + ADP (reactie catalizata de glicerol kinza
GK)
Glicerol-3-P + O2 DHAP + H2O2 (reactie catalizata de glicerolfosfat-
oxidaza, GPO)
 H2O2 + 4- Clorfenol + PAP* compus quinoniminic (rosu) + H2O
(reactie catalizata de peroxidaza POD)

PAP*= 4- amino-antipirina
Intensitatea coloratiei compusului obtinut este direct proportionala cu concentratia de
trigliceride din ser si se masoara la 500 nm.

Reactivi  (gata preparati):

1. Solutie tampon
2. Reactiv enzimatic
3. Solutie etalon 200mg/dl (2.28 mmol/l)

Proba de analizat : ser recoltat pe  vacutainer fara anticoagulant, cu/fara gel

separator. Nu sunt acceptate spre analiza seruri intens hemolizat / sange recoltat interprandial
care pot modifica valoarea rezultatului.

Mod de lucru :

Reactivi (µl) Martor (µl) Standard (µl) Proba (µl)

ser - - 10
standard - 10 -
reactiv de lucru 1000 1000 1000
H2O distilata 10 - -

Se lasa in repaus la temperatura camerei 10’ si se citesc absorbanta standardului si

probei fata de martor la 500 nm.

Calcule :
Ap/As x Cs = conc. de TG (mg/dl)

Valori de referinta :

Optim
<150 mg/dl

Borderline
150-199 mg/dl

Crescut
200-499 mg/dl

Foarte crescut
≥500 mg/dl
Valori de alerta clinica  - >500 mg/dL in prezenta pancreatitei diagnosticate; >1000
mg/dL risc de pancreatita.

Interpretare rezultate:
Valori crescute (Hipertrigliceridemie):
A. Izolata- la adulti valori 200 mg/dl constituie hipertrigliceridemie si poate aparea in
pancreatita, guta, ateroscleroza, hipotiroidism, diabet zaharat, alcoolism, boli hepatice.
B. Familiala:
a. Hipertrigliceridemie familiala, afectiune cu transmitere autosomala dominanta in care
apar cresteri ale VLDL.
b. Deficit familial de lipoprotein lipaza- determina acumulare de chilomicroni in plasma

Obs; totdeauna dozarea TG se face alaturi de alti parametri biochimici constituind examenul
de evaluare a profilului lipidic, atfel ca dozarea individuala a TG nu poate oferi informatii
suficiente in stabilirea unui diagnostic.Alaturi de alti constituienti ai metabolismului lipidic
(colesterol, fractiuni de colesterol etc.) nivelul crescut al TG este asociat cu afectiunile
coronariene ( ex. IMA), ateroscleroza, accident vascular etc.

Valori scazute:
Malabsorbtie, malnutritie, abetalipoproteinemii

Limite si  interferente:

Variatia intraindividuala este de 12-40% (valori minime dimineata si valori maxime in jurul
pranzului).
Cresteri tranzitorii pot aparea dupa un pranz bogat si ingestie de alcool. Valori crescute pot
fi intalnite in sarcina, obezitate, lipsa activitatii fizice, fumat.
Pot determina valori scazute efortul intens (scadere tranzitorie), modificarea dietei (in
interval de trei saptamani), pierderea ponderala (scadere permanenta).