82

ndrumar de laborator BIOFIZIC FIZIC GENERAL

_______________________________________________________________________________________________

b)DETERMINAREA CONCENTRAIEI UNEI SOLUII OPTIC ACTIVE CU AJUTORUL POLARIMETRULUI Notiuni teoretice Polarimetria este tehnica de dozare a solutiilor de substante optic active. Aceste substane (solide sau lichide) au proprietatea de a roti planul de polarizare al luminii cu un anumit unghi datorita prezentei unuia sau mai multor atomi de carbon asimetrici. Substanele care rotesc planul de polarizare spre dreapta (n sens invers trigonometric) se numesc dextrogire (glucoza, lactoza, progesteron), iar cele care rotesc planul de polarizare spre stnga (n sens trigonometric) se numesc levogire (fructoza, colesterolul). Pentru soluii lichide, unghiul de rotaie al planului de polarizare depinde de natura substanei optic active, de grosimea stratului strbtut l (dm) i de concentraia lor c (%), dup relaia lui Biot: lc (1) 0 100 [o] este puterea rotatorie specific i este factor de proporionalitate care depinde de natura soluiei optic active, de temperatur i de lungimea de und a luminii folosite. Aparatul cu ajutorul cruia putem determina unghiul se numete polarimetru. El se compune din urmtoarele pri:
F P S L T A L0 O

unde: S - sursa de lumin monocromatic (lampa de sodiu); F- filtru; P - nicol polarizor; L - lama Laurent; T - tub polarimetric cu soluia de cercetat; A - nicol analizor; Lo - lunet de observaie, O - observator. Luneta se poate focaliza pe lama Laurent prin deplasarea ocularului. Nicolul analizor A se poate roti astfel nct ntre planele

ndrumar de laborator BIOFIZIC FIZIC GENERAL

83

_______________________________________________________________________________________________

seciunilor principale ale analizorului i polarizorului s existe diferite unghiuri, valorile acestora putndu-se citi cu ajutorul unui vernier pe o scal gradat solidar cu analizorul. Construcia polarimetrelor se bazeaz pe capacitatea ochiului de a aprecia cu o mare precizie egalitatea iluminrilor a dou suprafee alturate. Modul de lucru 1.Se aprinde lampa de Na i se ateapt 10 min. Se focalizeaz luneta pentru a vedea clar imaginea cmpului vizual. Se fixeaz punctul zero al vernierului ca s coincid cu zeroul scrii (discului) gradat i se controleaz ca cele dou regiuni ale cmpului vizual s apar egal iluminate (n caz contrar se va citi unghiul 0 i se va ine cont de el la urmatoarele citiri) 2.Se umple tubul polarimetric cu soluia de zahr de concentraie cunoscut C, avnd grij s nu rmn bule de aer in tub i se introduce n corpul polarimetrului. Datorit rotirii planului de polarizare al luminii, cmpul vizual se schimb, cele dou regiuni vor apare inegal iluminate. Se rotete ncet analizorul spre observator pn cnd cmpul vizual apare egal luminat ca n poziia iniial. 3.Se citete de 3 ori cu ajutorul vernierului unghiul pe scala gradat. Acest unghi reprezint tocmai unghiul cu care a fost rotit planul de polarizare al luminii de ctre soluia optic activ. Se calculeaz media . 4.Cunoscnd lungimea l (dm) a tubului (este notat pe tub) se calculeaz puterea rotatorie specific [ 0 ] a solutiei de zahr conform relaiei:

0 100
c l

(2)

5.Se procedeaz n acelai mod pentru mai multe soluii de zahr de concentraii necunoscute, calculndu-se concentraiile din relaia:
c

100 0 l

unde [ 0 ] este cel determinat anterior. 6.Se calculeaz erorile:

0 , 0

84

ndrumar de laborator BIOFIZIC FIZIC GENERAL

_______________________________________________________________________________________________

Tabel cu date experimentale

Nr. crt. Substana C grad

grad

l dm

[o] grad dm-1

Eroarea

Polarimetrele sunt folosite pentru determinarea glucozei si albuminei din urina, precum si pentru dozarea glucozei din lichidul cefalorahidian, ser sanguin, etc.