CE ESTE CROMATOGRAFIA

Cromatografia este o tehnica pentru separarea

amestecurilor in componente pentru a analiza, a
indentifica, a purifica si/sau cuantifica amestecul sau
acomponentele.

• Analiza
separare • Identificare
• Purificare
• Cuantificare
amestec Componente
APLICATIILE CROMATOGRAFIEI

Cromatografia este utilizata pentru :

• Analiza – examinarea amestecului, a componentelor

sale si relatiile dintre acestea
• Identificare – determinarea unui amestec sau
componente pe baza unor componente deja
cunoscute
• Purificare – separarea componentelor pentru a
izola unul dintre ele ce prezinta interes pentru
studii ulterioare

• Cuantificare – determinarea cantitatii amestecului

si/sau a componentelor prezente in proba
APLICATIILE CROMATOGRAFIEI

Exemple din viata cotidiana in care este

aplicata cromatografia:
• Companii farmaceutice – determinarea cantitatii
fiecarui component chimic din noile produse
• Spitale – depistarea drogurilor sau a nivelului de
alcool din sangele pacientilor
• Medicina legala – compararea unei probe gasite la
locul crimei cu proba prelevata de la suspect

• Protectia mediului – determinarea nivelului de

poluare din sursele de apa

• Aplicatii industriale – pentru a purifica un

precursor
DEFINITIA CROMATOGRAFIEI

Definitia complexa:
Cromatografia este o tehnica de laborator ce separa
componentele dintr-un amestec folosind afinitatea specifica a
componentelor pentru faza mobila si mediul de absortie
stationar prin care trec.

Terminologie:
• Specific – cu o anumita particularitate
• Afinitate – atractie naturala sau forta dintre diferite
elemente
• Mediu Mobil – gaz sau lichid ce transporta componentele
(faza mobila)
• Mediu Stationar – partea instalatiei care nu se deplaseaza
cu proba (faza fixa)
DEFINITIA CROMATOGRAFIE

Definitie abreviata:
Cromatografia separa componentele unui amestec
pe baza afinitatii specifice fata de faza mobila si
faza fixa.

Explicatii:
• Componentul este plasat in faza fixa
• Faza mobila trece prin faza fixa
• Faza mobila solubilizeaza componentele
• Faza mobila deplaseaza individual componentele pe
o anumita distanta in faza fixa,in functie de
atractia lor specifica fata de cele doua faze
ILUSTRAREA CROMATOGRAFIEI

Faza fixa

Separare

Faza mobila

Amestec Componente
Afinitate pentru faza Afinitate pentru faza
Componente
stationara mobila
Albastru ---------------- Insolubil in faza mobila

Negru  

Rosu  

Galben          
TIPURI DE CROMATOGRAFIE

• Cromatografie lichida – separa probe de lichid cu un

solvent lichid(faza mobila) si cu o coloana compusa din
microsfere solide(faza fixa)

• Cromatografia gazoasa – separa probe de vapori cu un

gaz transportor(faza mobila) si o coloana de
microsfere lichide sau solide(faza fixa)

• Cromatografia pe hartie – separa probe de lichide

uscate cu un solvent lichid(faza mobila) si o banda de
hartie(faza fixa)

• Cromatografie in strat subtire – separa probe de

lichide uscate cu un solvent lichid(faza mobila) si o farfurie de
sticla acoperita cu un strat subtire de alumina sau silica gel.
(A) Utilizeaza sarcini, (B)
utilizeaza pori, si (C)
utiizeaza legaturile
covalente pentru a crea
afinitatea specifica printre
componentele
amestecului pentru faza
 PRINCIPIILE CROMATOGRAFIEI PE HARTIE

Fenomenul de capilaritate – miscarea lichidului printre spatiile unui

material poros datorita fortelor de adeziune,coeziune si tensiunii
superficiale.Lichidul poate ascensiona pe foaia de filtru deoarece
atractia fata de sine este mai mare decat forta gravitationala.

Solubilitate – gradul cu care un material( solvit) se dizolva intr-un

solvent. Solvitii se dizolva in solventi cu proprietati similare. Acest
lucru permite solvitilor sa fie separati prin diferite combinatii de
solventi.

Separarea componentelor depinde atat de solubilitatea lor in faza

mobila cat si de afinitatea specifica fata de faza mobila si cea fixa.
EXPERIMENTUL CROMATOGRAFIEI PE
HARTIE
Ce culoare are markerul?
REZUMATUL EXPERIMENTULUI

Scop:
Pentru a initia studentii in principiile si
terminologia cromatografiei si pentru a demonstra
separarea colorantilor din markere cu metoda
cromatografiei pe hartie.

Timpul necesar:
Timpul de pregatire: 10 minutes
Durata experimentului: 45 minutes

Costuri:
Mai putin de 30RON
 MATERIALE NECESARE

3 pahare Berzelius
3 capace
Apa distilata
Izopropanol
Cilindre gradate
3 filtre de hatie
Marker de diferite culori
Creion
Rigla
Foarfec
Banda adeziva
PREPARAREA SOLUTIEI DE
IZOPROPANOL

• Se prepara 15ml din fiecare concentratie de izopropanol

din fiecare pahar etichetat
50% , 70%, 100%
 PREPARAREA BENZILOR DE
CROMATOGRAFIE

 Se taie 3 benzi de hartie de

filtru.
 Se traseaza o linie cu
creionul la 1cm deasupra
marginei inferioare.
 Se eticheteaza fiecare
banda conform solutiei
corespunzatoare.
 Se deseneaza un punc cu
fiecare marker pe linia
trasata anterior.
 DEVELOPAREA
CROMATOGRAMELOR

Plasarea benzilor in paharele

Berzelius
Se asigura ca solutia nu
depaseste linia de start
Paharele Berzelius se tin
acoperite
Se lasa benzile in pahare pana
cand faza mobila migreaza
pana la 2 cm de marginea
superioara a fazei stationare.
Se scot benzile si se lasa la
uscat.
INTERPRETAREA CROMATOGRAMELOR
 COLORANTUL NEGRU

1. Colorantul separat – mov si negru

2. Insolubil in concentratii mici de izopropanol
3. Solubil in concentratii de izopropanol >50%
 COLORANTUL ALBASTRU

1. Colorantul separat – albastru

2. Putin solubil in contratii scazute de izopropanol
3. Solubilitate maxima in contratii mari de izopropanol
 COLORANTUL PORTOCALIU

1.Colorantul separat – portocaliu

2.Solubil in concentratii mici de izopropanol.
3.Partial solubil in concentratii izopropanol>70%