DETERMINAREA MICROORGANISMELOR: Microbiologia solului se ocup cu studiul microorganismelor ce populeaz solul, a activitii lor biochimice i fiziologice.

Trebuie de precizat c numai microorganismele care i petrec n sol faza vegetativ de dezvoltare i n condiii favorabile exercit procese care influeneaz particularitile fiziochimice, biologice i agricole ale solului, fac parte din sistemul biologic al solului i snt studiate de microbiologia solului. Alte microorganisme ce produc boli la om, animale sau plante, se consider c sunt accidental ntlnite n sol i ca atare, fac obiectul unui studiu al altor ramuri ale microbiologiei. Microorganismele specifice solului aparin la diferite grupe sistematice ca: bacterii, actinomicete, ciuperci, alge, protozoare i virusuri; el influeneaz starea solului care la un moment dat depinde de interrelaiile biologice care se stabilesc ntre organismele aparinnd acestor grupe, precum i ntre microorganisme pe de o parte i componentele organice i minerale ale solului, pe de alt parte. Microbiologia solului studiaz procesele microbiologice ce se desfoar n sol n scopul dirijrii lor n sensul dorit de om pentru mbuntirea calitii solului i a strii sale de fertilitate. n ansamblu, microorganismele din sol le snt specifice dou categorii de procese biochimice cu consecine multilaterale de ordin fizico-chimic, biologic i agricol: - n primul rnd sunt procesele de degradare (fermentaiile, amonificarea, etc.) prin care se elibereaz din materia organic substane minerale accesibile plantelor. - n al doilea rnd sunt procesele de sintez, (fixarea azotului molecular i humificarea), care creeaz n sol o rezerv de substane nutritive, mai cu seam sub form organic, ce influeneaz simitor starea fizico-chimic i fertilitatea solului. Cunoaterea profund a acestor procese i dirijarea lor raional poate contribui la mbuntirea condiiilor din sol i deci la ridicarea produciei agricole. Studiul participrii microorganismelor la procesele complexe din sol se axeaz n principal pe trei direcii: - cunoaterea ct mai complet a strii biologice a solului pe toat adncimea lui, prin studiul comparativ al frecvenei i activitii microflorei generale i grupelor fiziologice de microorganisme cu funcii bine determinate (fixarea de azot molecular, nitrificarea, fermentarea celulozei, etc.)

- studiul echilibrului dinamic care se stabilete ntre grupele fiziologice de microorganisme, precum i oscilaiile pe care le sufer acest echilibru n procesul natural de formare a solului i n cursul transformrii acestuia sub influena diferiilor factori legai de cultivare (prelucrarea solului, ncorporarea de ngrminte chimice sau organice). - cunoaterea biologiei solului sub dublu aspect, momentan i evolutiv, care face posibil compararea diferitelor orizonturi ale unui sol, compararea diferitelor tipuri de sol, constatarea unui eventual dezechilibru n sol, precum i stabilirea raporturilor ntre microflor i starea de fertilitate. Studiul microflorei solurilor se bazeaz pe cercetarea activitii acesteia n ansamblu i nu pe studiul microorganismelor izolate, n culturi pure. n acest sens S. N. Winogradschy arat c: Metoda de analiz a activitii reale a microorganismelor n natur trebuie s se bazeze nu pe cunoaterea speciilor izolate n afara mediului natural, ci pe reaciile ntregii comuniti microbiene n snul acestui mediu. - Sarcina principal a microbiologiei solului const n elucidarea laturii biologice a unor procese din sol, care ar putea fi studiate i pe cale chimic, de exemplu dinamica compuilor accesibili cu azot. Ptrunderea ns a mecanismelor biologice care determin aceast dinamic, permite att cunoaterea ct i dirijarea proceselor, deoarece geneza i proprietile solului, dinamica elementelor minerale accesibile plantelor snt determinate de fenomene biologice. Din aceast cauz microbiologia solului ocup un rol important ntre tiinele care studiaz solul, avnd sarcina de a stabili rolul componenilor sistemului biologic al solului n evoluia acestuia. Microbiologia solului ca tiin de sine stttoare abordeaz dintr-un punct de vedere propriu i prin metode specifice, fenomenele telurice, de unde rezult o concepie de ansamblu proprie, care influeneaz celelalte tiine ce se ocup cu studiu solului ca: pedologia, agrochimia, agrotehnica i altele.

Solul este considerat rezervorul natural al m.o., aici intalnindu-se toate m.o. de la suprafata pana in straturile profunde, in functie de proprietatile lor unde cresc si se produc. Raspandirea m.o. in sol este neuniforma si anume: - la suprafata solului, numarul de m.o. este redus, datorita uscaciunii, temperaturii sau pur si simplu actiunii omului si animalelor;

- in straturile superficiale, este considerat stratul de 20 cm sub suprafata solului. Aici intalnim numarul cel mai mare de m.o. datorita exigentei O2, nutrientilor, respectiv apei suficiente pentru desfasurarea activitatii fiziologice ale acestora. Aici numarul de m.o. variaza in functie de: - tipul de sol soluri nisipoase contin un numar redus de m.o.; - soluri cultivate numarul de m.o. este de 109 g/sol, numarul acestora depinzand si de tipul de cultura; - anotimp primavara numarul de m.o. este cel mai mare; - vara si iarna numarul fiind cel mai mic; - in straturile profunde ale solului, numarul de m.o. scade, fiind intalnite deobicei m.o. anaerobe si anume bacterii anaerobe. Distributia m.o. in sol este urmatoarea: - la suprafata bacterii fotosintezate; - in straturile superficiale bacterii actinomicete ( bacterii filamentoase, cu structura asemanatoare mucegaiurilor), drojdii si mucegaiuri; - in straturile profunde bacterii anaerobe. Implicatiile pozitive ale m.o. din sol, sunt: - prin biodegradarea compusilor organici ( resturi vegetale, cadavre) se elibereaza elemente vitale, cum ar fi : C, H2, S, N; - au un rol in mentinerea compozitiei chimice a atmosferei; - au un rol in asigurarea azotului necesar nutritiei plantelor ( bacterii fixatoare de azot); - au un rol in formarea humusului (solul este imbogatit cu substante nutritive, prin autoliza biomasei m.o.); - m.o. sunt principala veriga de legatura intre componentele biotice si abiotice ale solului. Implicatiile negative ale prezentei m.o. in sol, sunt: - in sol pot sa existe temporal m.o. patogene, care genereaza boli foarte grave precum ANTRAXul, provocata de Bacillus antracis si TETANOS-ul provocata de Clostridium tetani. Rolul bacteriilor n natur Bacteriile care triesc n natur joac un rol important n mineralizarea compuilor organici, contribuind astfel la realizarea circuitului elementelor n natur (azotul, fosforul, potasiul, calciul, magneziul i microelementele).

Bacteriile contribuie i la formarea substanelor humice, mbogind solul n materie organic. Prin unele substane bacteriene de natur mucilaginoas cum sunt polizaharidele capsulare, acestea contribuie la agregarea particulelor de sol, deci la mbuntirea structurii solului. Unele specii bacteriene au capacitatea de a produce antibiotice, care pot limita dezvoltarea unor grupe de microorganisme din sol, deci menin sau schimb echilibru biologic din sol. Unele grupe de bacterii triesc n simbioz cu plantele superioare producnd nodoziti i realizeaz fixarea azotului atmosferic; altele activeaz n zona rdcinii plantelor contribuind la dezvoltarea acestora i la sporirea activitii rizosferice. n medii specifice unele grupe de bacterii produc procese fermentative utile ca, fermentaia amidonului, a pectinelor, fermentaia lactic, butiric, propionic etc. Alte grupe de bacterii au capacitatea de a secreta enzime extracelulare cu care lizeaz unele bacterii sau ciuperci. Determinarea titrului bacteriilor coliforme. Poate fi fcut pe 2 ci: 1. nsmnarea suspensiei de sol n eprubete cu mediul lichid bulion lactozat sau n mediul Kessler Svenerton; 2. metoda filtrelor de membran. Cnd solul nu este poluat prea mult, se folosete metoda accelerat a filtrelor de membran, care const n urmtoarele: prin filtrele de membran nr.3, sterile, se filtreaz 5-10 ml suspensie de sol n diluie 1:10 centrifugat n prealabil timp de 5 min. pentru sedimentarea macroparticulelor. Filtrele cu bacteriile absorbite se iau cu pensa flambat i se pun pe suprafaa mediului nutritiv Endo turnat n prealabil n placa Petri. ntr-o cutie pot fi puse 4 filtre. Pe cutie sub fiecare filtru se scrie numrul probei i volumul suspensiei filtrate. nsmnrile se las n termostat la 37 C pentru 24 ore. Dup incubare se numr coloniile i se calculeaz titrul coli (numrul coliformilor la 1 g de sol uscat), 2-3 colonii tipice se coloreaz prin metoda Gram i se identific prin metoda titrometric.