Istoric, definiia apoptozei.

Desfurarea apoptozei. Cile de realizare a apoptozei.

Caspazele.
Gena Tp53 i produsul ei. Concluzii. Desfurarea apoptozei (animaii). Bibliografie.

 Identificarea mecanismului apoptozei

Determinarea proteinelor ce contribue la apoptoz Analiza genei codificatoare a proteinei ce declaneaz

apoptoza

 Apoptoza (din greac apo = departe i ptosis = cdere) este o form a morii celulare programate, proces prin care celulele declaneaz propria

lor auto-distrugere ca rspuns la un anumit semnal.

Termenul a fost propus n 1972 ntr-un articol publicat n British Journal of Cancer de ctre John F. Kerr de la

Universitatea din Queensland (Australia) mpreun cu Andrew H. Wyllie i Alastair R. Currie de la Universitatea din Aberdeen (Scoia), ca rezultat al observaiilor lor fcute n cursul studiilor efectuate asupra esuturilor cu microscopul electronic.

 Procesul de apoptoza se

desfasoara in trei timpi 1. n faza iniial, celulele din esutul normal, pierd legturile cu celulele vecine, cromatina nuclear se condenseaz, rezultnd fragmentarea ADN-ului celular; celulele se retract din cauza condensrii cioscheletului; 2. n faza a doua, membrana celular se zbrcete, se gurete i se fragmenteaz, formndu-se corpi apototici care conin ADN fragmentat; 3. in faza final, celulele vecine i macrofagele fagociteaz corpii apoptotici.

Proteinele transmembranare a limfocitelor T-killer,(FasL) interacioneaz cu proteinele transmembranare a celulelorint(Fas). Apoi la Fas se ataeaz i adaptorii FADD (Fas - associated DD-protein). Interaciunea descrisa se realizeaz prin proteinele : DD (death domain domeniul morii), DED (death efector domain - domeniul efectorului morii), CARD (caspase activation and recruitment do- main - domeniul activrii i inhibiiei caspazei). Agregatul FasL - Fas - FADD) procaspaza 8 se activeaz, purtnd denumirea de apoptosoma, ce induce moartea .

 Caspazele reprezinta o clasa de proteaze. "C" provine de la cisteina din centrul activ al enzimei iar "aspaza" de la acidul aspartic dupa care aceste enzime realizeaza clivarea substratului cu o nalta specificitate. Caspazele implicate n apoptoza se mpart n doua grupe: initiatorii, care includ caspazele 2, 8, 9, si 10 si efectorii care includ caspazele 3, 6 si 7.Caspazele 1, 4, 5 si 11 au rol n reglarea inflamatiei iar caspaza 14 este implicata n diferentierea keratinocitelor. Caspaza 2 are dou forme, una (ICH-IL) iniiaz i alta (ICH-IS) inhib apoptoza. Caspaza 8 activeaz caspaza final (caspaza efector): prin proteoliz se genereaz caspaza 3, dupa ce procesul MPC devine ireversibil. Caspaza 3 se poate autoactiva, activnd alte caspaze i DFF, ce duc la scindarea ireversibil a ADN n fragmente nucleozomale.

 Cnd un factor extern blocheaz transportul e- intre hemul bh

i citocroma b a mitocondriilor, proteinele membranare SMAC (second mitochondia-derived activator of caspases) sunt eliberate n citosol n urma permeabilitaii membranei. Aceste proteine se leag specific de IAPs (Inhibotor of Apoptosis Proteins) le dezactiveaz astfel inhibarea apoptozei este distrusa i celula nu mai poate supravieui i este declanat apoptoza. IAPs de asemenea activeaza Caspazele. Prin afectarea membranei mitocondriale de asemenea se elibereaz Citocromul C prin intermediul canalelor MAC (mitochondrial apoptosis-induced chanel). Citocromul C eliberat din mitocondrie, leag specific proteina Apaf1 i ATP care mpreun cu pro-caspaza 9 formeaz un complex proteic care este apoptosoma. Apoptosoma taie procaspaza 9 rezultand caspaza 9, care la rndul ei activeaza caspaza 3.

 Lezarea ADN duce la acumularea n

celule a proteinelor genei p53. Diferite ci ale apoptozei pot interaciona intre ele. n unele cazuri calea receptoric duce la activarea procaspazei 8 puin efectiv. n aa caz se implic i calea mitocondrial a apoptozei - caspaza 8 interacioneaz cu proteina citozolica Bid din familia Bax, scindnd-o n 2 componente. Capatul C-terminal al Bid se intercaleaz n membrana mitocondrial, inducnd ieirea citocromului C i fixarea lui de APAF1. i ulterior formarea apoptosomei

 Dereglrile homeostaziei

Ca2+ intracelular duc la apoptoz, determinat de activarea procaspazei 12. Apoptoza, dependent de RE este n maladia Alzheimer: (neuronii corticali cu deficit de caspaza 12 sunt rezisteni la apoptoza indus de o protein amiloidic, dar nu la apoptoza indus de cit.C sau cu participarea receptorilor membranari).

 Proteina p53 este o

fosfoprotein nuclear, codificat de gena TP53, ce controleaz numeroase procese celulare, cele mai importante fiind apoptoza i derularea ciclului celular.

 Gena TP53(tumor protein

p53 ) face parte din familia genelor supresoare de tumori. Este localizat pe braul scurt al cromozomului 17, n poziia 17p13 (regiune frecvent deletat n cancere umane).

20.303pb, 11 exoni

 Proteina p53 mediaz blocarea

derulrii ciclului celular (tranziia celulelor din faza G1 n S sau din faza G2 n faza M) i inducerea apoptozei ca rspuns la lezarea ADN-ului. n celulele normale, blocarea derulrii ciclului celular mediat de p53 previne replicarea ADNului cu leziuni, reduce instabilitatea genetic i permite intervenia mecanismelor reparatorii, nainte de iniierea ciclului celular. Apoptoza indus de p53 este necesar pentru eliminarea celulelor mutante.

 Un criteriu important n apoptoz

l are degradarea cromatinei cromozomale n uniti nucleosomice. Caspazele activeaz DN-azele,dar sunt declanate de ctre CAD(caspase activated DNase). n celula normal exist o form a CAD-ului inactiv (ICAD), n timpul apoptozei ICAD-ul este digerat de ctre caspaza 3 astfel activeaz CAD, digernd ADN-ul; inhib enzimele de reparare a ADN-ului i degradarea proteinelor nuceului(degradarea laminei nucleului de ctre caspaza 6 n urma cruia se observ condensrile cromatidice).

 n ultimul stadiu al apoptozei celula emite pe membarana citoplasmatic semnale eat me (tradus literal, mncaim), semnale alctuite din

fosfatidilserin. n mod normal, fosfatidilserina, o fosfoglicerid, se gsete pe partea intern a citoplasmei, ns n timpul apoptozei este redistribuit pe suprafaa extracelular prin intermediul unei proteine denumit scramblase (n traducere din englez ca "enzim care produce dezordine"). Fagocitele necrofage, de ex. macrofagele, au receptori specifici pentru fosfatidilserin. Eliminarea celulelor moarte este necesar pentru a preveni o reacie imflamatoare.

 Apoptoza reprezint un proces fiziologic n dezvoltarea embrionar i aprare a organismului de factori externi iar prin dereglarea procesului de apoptoz pot aparea anomalii aa ca polidactilia, disfuncii imunologice s.a. Este un proces determinat genetic i foarte complicat cu un rol important in homeostaza celular. Apoptoza este controlat de gene, prin intermediul proteinelor. i din cauza existrii a mai multor ci de realizare, ea poate fi declanat chiar dac sunt defecte componentele unei ci. n rezultatul aciunii caspazelor are loc: 1. activarea procaspazelor, cu formarea caspazelor; 2. scindarea proteinelor antiapoptozice din familia Bcl; 3. hidroliza proteinelor laminelor, cu condensarea cromatinei; 4. distrugerea proteinelor, participante la reglarea funciei citoscheletului; 5. inactivarea i dereglarea activitii proteinelor ce iau parte n reperarea ADN, splaisigului ARNm, replicrii ADN.

 geomarz.wordpress.com ro.wikipedia.org

www.referat.ro
www.youtube.com www.scribd.com

www.rndsystems.com