Ingineria genetică

constă în manipularea ADN-ului şi/sau a genelor unui organism,

determinându-l să producă un efect/ caracter/ rezultat dorit

Rezultă organisme ale căror cod genetic a fost modificat

organisme transgenice
OMG
Bacterii, fungi, plante şi animale
Tipuri de ingineria genetică
Tehnologia ADN-recombinant
- Enzime de restricţie
- Vectori
- Plasmide
ex: obţinerea insulinei
porumbul Bt
(cu gena pentru delta endotoxina
anti-Bacillus thuringiensis)

Terapia genică
= inserţia unor gene cu efect terapeutic într-un organism
afectat de o boală incurabilă
Xenotransplantul
Terapia cu celule stem
Clonarea
 Clonarea umană

► Deocamdată, interzisă
► ONU a consfinţit interzicerea clonării
umane în 9 martie 2005
► Există mari dezbateri în privinţa
clonării terapeutice
 Terapia genică
 Presupune transferul şi expresia unei gene
terapeutice

 Este în esenţă o intervenţie care modifică

informaţiile iniţiale ale celulei

 Transferul de acizi nucleici trebuie să manifeste

un efect dominant asupra fenotipului celular
Distribuţia geografică a studiilor ce implică terapie genică
(pe continente)
Distribuţia geografică a studiilor ce implică terapie genică
(pe ţări)
Ţinte ale terapiei genice
Direcţii de cercetare în terapia genică
 Cum sunt introduse aceste gene
► Există două căi:
- Ex vivo – transferul de gene este realizat în
culturi celulare ce sunt ulterior transplantate
- In vivo – transfer prin intermediul unui
vector ce transduce gena direct la celulă
 Vectori

► Virali – retrovirusuri, adenovirusuri, herpex

simplex virusuri, adenovirusuri asociate
► Non-virali – lipozomi, polimeri

RETROVIRUS ADENOVIRUS AAV HSV

LIPOZOM NAKED DNA

Vectori utilizaţi în terapia genică
Vectori virali
Vector de genă-tratament

Acţiune lizogenică

Acţiune litică
 Viral versus non-viral

► Vectorii non-virali sunt mai puţin eficienţi

dar mai siguri în comparaţie cu vectorii virali
şi non-imunogenici
 LIPOZOMI

Dezavantaj:
-degradare facilă
-cantitate mare de ADN

Avantaje:
-costuri mai scăzute
-fără răspuns imun
-pretabili pentru
ţesut pulmonar

MUCOVISCIDOZA – ianuarie 1995

Rezultatul injectării intranazale a lipozomilor cu gena CFTR la 12 bolnavi:
lipsă reacţie imunitară dar rezultatul rămâne pozitiv doar 7 zile
 Alegerea vectorului
► Ţesuturile prezintă diferenţe de
transductibilitate
► În general sunt mai uşor de transdus
celulele cu ciclu de diviziune intens (cancer)
– neuronii sunt greu de transdus
► Unii vectori au specificitate de ţesut
Pentru SN, AAV şi HSV manifestă un
tropism specific
TIpuri de gene transferate prin terapie genică
TERAPIE
GENICĂ
APLICATĂ
 Terapia genică în cazul unei
mutaţii cu efect dominant negativ
INTRODUCERE DIRECTĂ DE ADN
ÎN ŢESUT

HIV (SIDA)
HBV şi HCV (Hepatita B şi C)
Virusuri gripale
CMV
HPV (Cancer col uterin)
Tuberculoză
Sindrom Lyme
INJECTAREA ADN ÎN CURENT DE HELIU

- Tehnica este pusă la punct pentru plante

ADN plasmidial precipitat

pe bile de aur pur de 1-3 microni

“Pistol” cu heliu
VECTORI VIRALI (cu ARN ŞI ADN)
 Bioetica

 Participanţii pot fi subiecţi umani

pentru care toate celelalte mijloace
de tratament au fost epuizate

 Implicaţii etice, sociale şi legale

 Consimţământ informat
- confidenţialitatea datelor
- posibile riscuri
- posibile avantaje