CURS 2 Celule prezentatoare de antigen

Celule prezentatoare de antigen (APC)

Definitie = celule ce joac un rol esenial n iniierea n organele limfoide secundare (ggl limfatici, splin) a unor rspunsuri imune, fie umorale, fie celulare fa de Ag timodependente. Ag timodependente - particip doar n iniierea rspunsurilor imune - rspunsurile imune se desfoar doar n organele limfoide secundare - condiia de baz n declanarea rspunsurilor imune const n stimularea de ctre Ag inductor a limfocitelor efectorii - limfocite efectorii: Limfocite B, Limfocite Tc - activarea limfocitelor efectorii NU se realizeaz niciodat per primam, ci activarea lor se realizeaz prin parcurgerea a mai multe etape => rspunsurile imune ce apar sunt procese multifazice

Etapele de principiu ale rspunsurilor imune fa de Ag timodependente 1. Acumularea intravascular a Ag declanatoare - ele se pot acumula n diverse esuturi - ele pot proveni din surs extern (Ag exogene) dac strbat barierele dintre mediu i organism (. cutanat, epiteliu digestiv, epiteliu respirator) Laura & Daniel 1

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen sau din surs endogen (eliberate ca urmare a generrii unor procese autoimune, Ag tumorale care se pot acumula ca urmare a eliberrii lor de ctre celulele tumorale Ag eliberate la distan foarte mare de esutul int, ele sunt lansate n circulaie i ulterior pot difuza extravascular cu acumulare n esuturi i organe) limfocitele efectoare pot fi localizate:- n circulaie - n organele limfoide, unde sunt prezente majoritatea clonelor de LB i LT Ag NU poate activa limfocitele circulante LB circulante NU pot fi activate pentru c obinuit ele NU difuzeaz extravascular LTc pot trece extravascular, dar NUMAI n condiii speciale (dac ele sunt celule cu memorie imunologic) Ag pot activa limfocitele din organele limfoide (ggl, splin). Ele ajung acolo ca urmare a faptului c sunt preluate i transportate acolo de APC

2. Transportul Ag declanatoare de la nivelul esuturilor ctre organele limfoide de ctre APC - APC se localizeaz n organele limfoide i aici ncep s prezinte pe membrana lor Ag transportat pn la acest nivel 3. Prezentarea Ag 4. Cooperarea dintre APC i - LB => RIU - LTc => RIC 5. Activarea limfocitelor efectorii n cadrul cooperrii celulare APC - n funcie de profilul lor funcional se mpart n dou categorii: 1. APC profesionale a. Macrofagele b. Celule dendritice c. Limfocite B 2. APC ocazionale a. Neutrofilele b. Celulele endoteliale c. Unele celule epidermice 1. APC profesionale A. Macrofagele - celule produse de mduva hematogen, ce lanseaz n circulaia sistemic elemente tinere sub form de monocite - acestea, dup un foarte scurt tranzit intracirculator (24-36h), trec n diverse esuturi i organe, fiind atrase sub aciunea unor factori chemotactici - n final => macrofage care devin macrofage activate - ajunse n stadiul de macrofag activat pot ndeplini funcia de APC

Laura & Daniel

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen funcia de APC trece obligatoriu prin 5 etape: 1) Captarea Ag declanatoare macrofagele capteaz de regul NUMAI Ag corpusculare (bacterii, virusuri, mici parazii). NU captez Ag solubile. Macrofagele capteaz Ag corpusculare aflate n 2 stri: opsonizate (mai frecvent) i neopsonizate. captarea e un proces mediat receptorial

Opsoninele = factori imunologici solubili care nvelesc sau tapeteaz Ag corpusculare i favorizeaz captarea Ag de APC Exist 2 opsonine de importan: - C3b a complementului (fragment rezultat din activarea factorului C3 al complementului). Ea e pus n libertate n urma funcionrii continue a cii alterne a complementului. C3b are ca particularitate faptul c se ataeaz de orice membran NON-SELF => depunerea ei pe suprafaa bacteriei. Macrofagele capteaz foarte uor aceste bacterii pentru c dispun pe suprafaa lor de receptori ce pot angaja legturi cu componenta C3b a complementului (CR) - IgG se depun pe suprafaa bacteriilor ca urmare a recunoaterii determinantului Ag de suprafa. IgG angajeaz legturi cu ei prin intermediul captului Fab al IgG. Astfel IgG proemin n lichidul

Laura & Daniel

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen interstiial prin captul Fc. Macrofagele pot angaja foarte uor aceste legturi prin Fc al IgG (au receptori pt Fc al IgG = receptori FcR) Mai putin eficient pot fi captate i Ag neopsonizate ca urmare a faptului c macrofagele au receptori pe suprafa capabili s recunoasc unele oligozaharide prezente n peretele Ag (fucozil, manozil). Aceti receptori se numesc F/M-R. Cei mai importani receptori sunt CR si FcR (receptori opsoninici) captarea e un proces imunologic specific. Macrofagele, prin receptorii de suprafa NU vin niciodat n contact direct cu determinanii Ag de suprafa ai bacteriilor => proces imunologic specific. 2) Endocitarea Ag captate - se realizeaz ca urmare a emiterii de pseudopode i constituirea unor vacuole - e un proces nalt consumator de energie 3) Prelucrare/procesare Ag endocitate, mai ales n compartimentul lizozomal - aici se realizez fragmentarea Ag nativ, scindarea lui cu generare a numeroase fragmente ce poar denumirea de epitopi - din mai muli epitopi, macrofagele realizeaz selecia epitopilor imunodominani (cei mai capabili de declanarea unui rspuns imun) 4) Conservarea unei mici pri din epitopii imunodominani n anumite subsectoare ale macrofagului - ea e important pentru c din cantitatea conservat ulterior macrofagul va elibera mici cantiti de epitopi, ceea ce conduce la ntreinerea n timp a rspunsului imun 5) Cuplarea majoritii epitopilor imunodominani n moleculele MHC => n final complexe MHC-epitopi i prezentarea Ag - complexele MHC-epitopi sunt prezentate pe membrana macrofagelor - prezentarea se realizez n cuplu cu moleculele MHC I, MHC II - epitopii sunt prezentai ctre Limfocitele TH. Ele cunosc doar epitopii care sunt prezentai n complex cu MHC II - din totalul macrofagelor: periferice 75% pot sintetiza MHC II splenice 50% pot sintetiza MHC II hepatice 25% pot sintetiza MHC II - dac macrofagele elaboreaz i MHC I i MHC II => ele sunt implicate n generarea unor rspunsuri imune - dac ele produc doar MHC I NU sunt implicate n generarea de rspunsuri imune, ele particip n reacii inflamatorii - cele mai importante etape pentru funcia de APC sunt prima i a cincea - funcia de APC e condiionat de receptorii de suprafa i de producerea de MHC II Funcia de ansamblu a macrofagelor transportul Ag tisulare prin limfaticele aferente ctre ariile timodependente (populate de Limfocitele TH) ale organelor limfoide secundare. Aceste arii sunt

Laura & Daniel

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen reprezentate de zona paracortical n ggl limfatici i de PALS intern n splin (PALS = stratul limfoid periarterial intern)

B. Celulele dendritice - celule produse de mduva hematogen ce au ca principal caracteristic morfologic faptul c n condiii de repaus prezint prelungiri citoplasmatice sau pseudopode - pseudopodele au 3 caracteristici: o sunt numeroase sau foarte numeroase o sunt fine, efilate o sunt lungi, depesc de 4 5 ori diametrul celulei propriu-zise - seamn morfologic cu celulele dendritice din SNC - ndeplinesc funcie de APC pentru c: o n general dispun de receptori de captare (CR, FcR) o n general ele elaboreaz molecule MHC - ele NU reprezint o clas omogen, ci una foarte heterogen att morfologic, ct i funcional - se disting 6 clase distincte, mprite n 3 clase mai mari (vezi tabel) o Nelimfoide 1. CD Langerhans - distribuite n esutul cutanat (limita dermo epidermic) unde formeaz un strat celular aproape continuu; submucoasa bucal; submucoasa tractului digestiv; submucoasa i mucoasa colului uterin - aspect atipic dendritic. Ele sunt celule stelate (prezint pseudopode puine i groase) - ele dispun de receptori CR, FcR din abunden, ns NU elaboreaz MHC II - funcia lor: transport Ag de la nivelul . cutanat sau alte locaii ctre ariile timodependente ale organelor limfoide secundare. Prezint Ag ctre LTH 2. CD Interstiiale - ele sunt distribuite ubicuitar la nivelul interstiiilor celulare - au aspect morfologic atipic dendritic (sunt stelate) - seamn cu CD Langerhans. Prezint receptori opsoninici, dar NU elaboreaz MHC II - ele transport Ag tisulare ctre ariile timodependente ale organelor limfoide secundare o Limfoide 3. CD Interdigitate - sunt distribuite NUMAI n ariile timodependente ale organelor limfoide secundare - sunt celule tipic dendritice - ele sunt cele mai mari productoare de MHC II, ns NU au receptori de captare Ag (CR, FcR) 4. CD Foliculare - pentru c sunt prezente n foliculii limfoizi (aglomerri de limfocite B). Ele sunt n zone bursodependente: cortexul ganglionar, respectiv PALS extern a splinei Laura & Daniel 5

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen expun pe suprafaa lor n cantiti enorme receptori de captare (CR, FcR). NU elaboreaz MHC II joac un rol important n concentrarea n zone bursodependente a Ag declanatoare, ceea ce favorizeaz recunoaterea Ag de Limfocitele B. Ele au o funcie de filtru celular o Circulante 5. CD Sangvine prezente NUMAI n circulaie, dar n numr mic (sub 0,1% din totalul PMN) NU dispun de nici una din categoriile de molecule prezente pe suprafa 6. CD Vluroase celule aplatizate care prezint pe flancuri oscilaii sau ondulaii ale membranei sunt prezente NUMAI n limf NU dispun de nici un fel de receptori i nici NU elaboreaz molecule de MHC II CD CD Langerhans CD Interstiiale CD Interdigitate CD Foliculare CD Sangvine CD Vluroase CR +++ +++ +++++ FcR +++ +++ +++++ MCH II +++++

Nelimfoide (intratisulare) Limfoide Circulante

Se consider c aceste 6 tipuri de celule NU reprezint entiti morfologice n sine, ci toate provin dintr-o singur celul progenitoare, care n funcie de ariile pe

Laura & Daniel

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen care le traverseaz, i modific aspectul morfologic, de aceea discutm despre traficul i filiaia celulei dendritice. Mduva osoas lanseaz celule dendritice n circulaie, apoi ele trec n esuturi i organe. De asemenea din circulaie trec n ggl locoregionali. Se consider c parenchimul ggl prezint la exterior o zon cortex bursodependent, iar la interior o zon paracortex timodependent. n splin ajung prin arteriola central. n jurul ei se afl pulpa alb. Ea e populat de leucocite. n jurul pulpei albe se afl pulpa roie. Pulpa alb e alctuit din 3 manoane concentrice: a. PALS intern (timodependent) b. PALS extern (bursodependent) c. Zona marginal Iniial sunt produse CDS, care sunt ovalare. Ele pot urma 2 traficuri: 1. traficul intratisular a. esut cutanat - aici i modific aspectul morfologic (devin stelate) = CD Langerhans - ele prezint pe suprafa receptori de captare Ag (CR, FcR) prin care pot capta diverse Ag - apoi se activeaz i ncep s migreze, transportnd Ag - ele iau calea limfaticelor aferente ctre ggl locoregionali - n limf ele i modific aspectul n CD Vluroase i ptrund n ggl locoregionali, unde se stabilesc NUMAI n paracortex - aici i modific aspectul n celule tipic dendritice (CD Interdigitate). Ele produc MHC II prin care prezint Ag ctre TH, care se inclaveaz printre prelungirile lor => activare TH cu declanarea rspunsului imun b. organe somatice - aici i modific aspectul i devin stelate (CD Interstiiale) - funcie de captare Ag (prezint CR, FcR) - ele se activeaz i pot urma 2 tipuri de traficuri: calea limfaticelor aferente se transform n CD Vluroase i sub aceast form Ag e transportat n ggl locoregionali, unde ele se transform n CD Interdigitate calea antidromic i reintr n circulaie, se transform din nou n CD Sangvine. Sub aceast form ptrund n splin, lund calea arteriolei centrale i se fixeaz n PALS intern, unde se transform morfologic n CD Interdigitate i prezint Ag ctre LTH 2. traficul limfoid - CD Sangvine pot ptrunde direct n organele limfoide n ggl, unde se opresc n cortex, lund aspectul de CD Foliculare n splin, prin arteriola central i se fixeaz n PALS extern, unde devin CD Foliculare C. Limfocitele B - pot funciona ca APC pentru c prezint pe suprafaa lor receptori de captare Ag (CR, FcR i BCR)

Laura & Daniel

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen BCR capteaz Ag solubile n anumite etape LB pot elabora i expune molecule MHC II

Moleculele prezentatoare de Ag (MHC I i MHC II)

1. MHC I distribuite ubicuitar, pe membrana tuturor celulelor, cu excepia eritrocitelor i a trombocitelor sunt heterodimeri, formai din 2 lanuri diferite, dar asociate ntre ele, orientate cu capetele N-terminale n afara celulei i cele C-terminale n interior. Ele se noteaz cu i . e un lan mare, cu GM de aproximativ 40-45 kda, are GM de aproximativ 12 kda (2 microglobulin) o lanul foarte lung, NU este liniar el e constituit din 3 bucle (domenii), tiate prin puni sulfurice intracatenare buclele sunt formate din 100-110 aa cele 3 domenii se noteaz cu 1, 2, 3 1, 2 sunt constituite din secvene de aa variabile sau extrem de variabile (domenii polimorfe). Ele sunt poziionate fa n fa i constituie o cavitate de dimensiuni mici = situs de prezentare a Ag 3 au o structur constant pe toate celulele unui individ. E considerat un Ag self la acest lan se asociaz lanul o lanul poziionat extracelular realizeaz legturi covalente cu 3 are structur constant la toi indivizii aceleiai specii Funciile MHC I: prezentarea Ag endogene responsabile prin 3 de declanarea reaciilor de respingere a grefelor de esuturi i organe cooperarea dintre APC, pe suprafaa crora se poate afl, i LTc sau LTS. n timpul cooperrii dintre ele se angajeaz legturi prin MHC I cu un contraligand prezent pe membrana LTc i LTS (el se numete CD8). Angajeaz legturi cu domeniul 3.

Laura & Daniel

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen

2. MHC II distribuite restrns (pe membranele celulelor participante la rspunsurile imune: APC, LB sau LT) sunt heterodimeri, formai din 2 lanuri cu GM apropiat GM 32-34 kda GM 27-28 kda lanurile sunt organizate n bucle sau domenii. Pe fiecare lan exist 2 domenii (1, 2, 1, 2), dinspre captul N-terminal spre cel C-terminal. 1, 1 au structur variabil sau hipervariabil (domenii polimorfe). Ele sunt poziionate fa n fa, se onduleaz => o cavitate = situs prezentator de Ag 2, 2 sunt domenii monomorfe

Funciile MHC II: - prezentarea Ag exogene (provenite prin fagocitare) - pot avea o contribuie la declanarea unor reacii de respingere a grefelor (2) - cooperare APC i LTH => legturi ntre MHC II i un contraligand prezent tipic pe TH (CD4) => legturi CD4- 2

Laura & Daniel

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen

Mecanismele prezentrii selective a Ag de ctre moleculele MHC

a. MHC I prezint Ag endogene (provenite din citoplasma APC). La origine ele sunt proteine citoplasmatice ce pot fi autoantigene, Ag tumorale, Ag rezultate din metabolizarea bacteriilor cu habitat intracelular, din diverse categorii de virusuri ce colonizeaz citoplasma - proteinele trebuiesc prelucrate => un compartiment enzimatic (proteozomi = materiale enzimatice non-lizozomale, constituite din uniti sub form de inel 4 la exterior i la interior). au rol imunoreglator, iar sunt uniti enzimatice ce conin diverse tipuri de endopeptidaze mici fragmente peptidice = epitopi. Ei vor fi translatai din citoplasm n RER, unde se elaboreaz moleculele MHC I - translarea NU se face prin difuziune, ci prin sisteme transportoare ce se numesc TAP1/2 (transportorul asociat prezentrii Ag) - proteozomii sunt ancorai la TAP prin intermediul unor proteine de legtur LMP (low mass proteins) i sunt 2 varieti: LMP-2 (2 kda) i LMP-7 (7 kda) - epitopii sunt ncrcai pe MHC I, care sunt eliberai iniial ca lanuri individuale (I i I). Ele se asociaz => molecule MHC I (dar lanurile NU au afinitate mare ntre ele). Ele sunt solidarizate ca urmare a asocierii unor chaperine (CALNEXINA). nc NU e capabil s fixeze epitopii. Cea de-a doua chaperin i d capacitatea aceasta. Ea induce modificri conformaionale n , soldate prin deschiderea larg a situsului pentru prezentarea Ag (CALRETICULINA) CR5 permite ataarea complexului la sistemul TAP (crete afinitatea I pentru tapsin, care leag MHC I la sistemul TAP) => epitopii sunt ncrcai i complexul MHC I e adus la suprafa, iar epitopii vor fi recunoscui de LTc sau LTS. Laura & Daniel 1

CURS 2 Celule prezentatoare de antigen

b. MHC II 2 lanuri II i II, aflate n RER. La ele se asociaz lanul IIi(inhibitor). Prin captul N-terminal el obtureaz situsul pentru prezentarea Ag al acestor molecule => epitopii NU pot fi ncrcai pe MHC II. Cnd se cupleaz sunt translate n endozomi. n endozomi: lanul IIi: se ndeprteaz captul C-terminal, el rmnnd ataat prin captul N terminal (CLIP peptidul inhibitor divizat prin clivaj) lanul CLIP e ndeprtat => situsul prezentator de Ag devine liber => moleculele pot fixa epitopii rezultai prin calea endocitar (fagocitoz) la ncrcare moleculele sunt aduse la suprafa i epitopii prezentai vor fi recunoscui doar de LTH

Laura & Daniel