Imunologie Curs 11

Mecanismele rspunsului imun umoral

n condiiile n care particip antigene T-dependente (cele mai numeroase din

natur).
Pentru a fi realizat RIU, trebuie s participe i s schimbe informaii ntre ele trei tipuri
de celule: APC-uri, limfocitele T helper, limfocitele B i mult mai trziu (cnt trebuie s
nceteze RIU) particip limfocitele T reglatorii (supresoare).
Aceste trei tipuri de celule se afl la distan n organism unele fa de celelalte:
APC-urile sunt la porile de intrare
Limfocitele T sunt n zonele T-dependente din splin i ganglioni iar limfocitele B sunt
n zonele B-dependente din organele limfoide secundare (splin i ganglioni). Evenimentele
care au loc trebuie s aduc n proximitate aceste trei tipuri de celule.
Limfocitele B coopereaz doar cu limfocitele T helper, pe cnd limfocitele T helper
coopereazntr-o prim etap cu APC-urile non-B (macrofage i celule dendritice) i n a doua
etap cu limfocitele B.
n concluzie, rspunsul imun umoral presupune cooperri complexe ntre aceste celule
i obligatoriu derulare n etape (altfel nu pot s se aeze unele lng altele aceste trei tipuri
celulare).
Etapele rspunsului imun umoral:
I. Secvena de activare (efectorie)
- La aceast secven particip APC-urile non B, limfocitele T helper i limfocite B?
- Sunt selectate clonele de limfocite T i de limfocite B care au receptori specifici pentru
antigenul nostru T dependent
- Activarea metabolic i expansiunea clonelor care au fost selectate
- Sinteza unei cantiti adecvate de anticorpi
- Sunt receptori solubili care fixeaz i neutralizeaz antigenul
II. Etapa de inhibiie (retrocontrol)
- Particip apc-urile dar ele vor prezenta epitopii dar de data asta spre limfocitele T
reglatorii (supresoare) care vor recunoate specific epitopii respectivi dar dup aceasta
declaneaz mecanisme de oprire a rspunsului imun.
Aceste dou secvene au loc permanent n organismele noastre dar trebuie s existe
un mecanism riguros de reglare a activrii i a inhibiiei. Exces de activare
autoimunitate. Exces de inhibiie imunodeficien/acceptarea celulelor tumorale.
I. Secvena de activare
o Antigenul T-dependent ptrunde n periferie i la poarta de intrare el este deja
recunoscut de nite structuri imunologice (de ctre opsonine). Acestea
(opsoninele) sunt generic C3b (rezultat permanent din calea altern a
complementului) i dac antigenul nostru nu a ptruns pentru prima dat, la
poarta de intrare pot sta IgG (i pot i ele s opsonizeze antigenul respectiv).
o Nu tot antigenul este opsonizat, o parte din el poate rmne fr opsonine.
desen1
o Primele elemente celulare care vin n recunoatere sunt APC-urile non-B
(macrofagele i celulele dendritice). Recunoaterea aceasta iniial este o
recunoatere imunologic (se recunoate c este non-self) dar este nespecific.
o Aceast nespecificitate const n:
Se recunoate opsonina C3B prin receptorul CR.
Se recunoate imunoglobulina G, tot nespecific, prin receptor Fc-gamma-
R.
Se recunoate structura antigenic prin receptor de tip manoz/fucoz
(MR/FR)
Se recunoate structura antigenic prin receptor Toll.
o n urma acestei recunoateri n APC-urile non-B se produc multe modificri care
declaneaz rspunsul acestora:
Dac recunoaterea se face prin receptorii CR i Fc-gamma-R (sunt
receptori de endocitare, la fel ca MR/FR) se endociteaz complexul
receptor-antigen nativ.
Imediat dup endocitare, receptorii sunt desfcui de pe antigen de
enzimele lizozomale dar ei rmn n citosol pn cnd se va prelucra
antigenul nativ.
Pe de alt parte, antigenul nativ intr n lizozomi i ncepe s fie prelucrat
i dintr-un antigen iniial (nativ) rezult cteva zeci-cteva sute de epitopi
(cu semnificaie imunologic diferit) unii dintre ei sunt epitopi efectori,
alii sunt supresori i alii sunt imunoreglatori. Dintre epitopii efectori (care
stimuleaz rspunsul imun) nu toi au aceeai imunogenitate (au diferite
fore n a declana rspunsul imun).
Al doilea lucru care se ntmpl vine prin receptorii Toll. Prin acetia nu se
endociteaz antigenul dar se activeaz metabolic APC-ul:
Producie masiv de ATP
ncepe sinteza de citokine:
o unele sunt proinflamatorii merg pe imunitate nnscut;
o altele intervin n rspunsurile imune merg pe imunitate
adaptativ;
o unele fac i una i alta;
Ele produc trei tipuri de efecte (stimulare autocrin, paracrin
i la distan endocrin).
o Tot prin receptorii toll se activeaz citoscheletul i APC-urile
i cresc mobilitatea i prsesc porile de intrare:
 Unele pleac prin snge
Unele prin limf
o Trebuie s ajung n zonele T-dependente din zonele
limfoide secundare unde sunt limfocitele T helper crora
li se vor prezenta epitopii.
o Tot prin receptorii Toll ncepe sinteza de molecule MHCII,
proteine B7(CD80)
n zonele T-dependente ncepe prima cooperare intercelular (ntre
APC i limfocitele T helper). Este o cooperare care se desfoar
bidirecional, n dou feluri att cognitiv (prin contact n cele dou
membrane se cunosc, fac contact direct prin receptori) i noncognitiv
(prin citokinele pe care o celul le trimite spre cealalt).
Desen 2
Prima informaie pleac de la APC la limfocitul T helper (n sens
anterograd) APC-ul expune molecula MHCII cu epitopul (cei mai
imunogeni epitopi) iar LTh va expune receptor TCR care va recunoate
simultan att epitopul ct i molecula MHC II, realizndu-se ceea ce noi
numim recunoaterea asociativ intrareceptoral.
1. E-MHCII TCR-CD3
Simultan cu aceast recunoatere, LTh recunoate i (doar) moleculele
MHC II c sunt self iar aceasta se face prin receptori CD4.
(receptorii CD4 recunosc domeniile monomorfe din molecula MHC II,
adic domeniile alfa2 iar receptorul TCR recunoate domeniile
polimorfe din MHC II adic domeniile alfa1 i beta1 i este fcut pe
buclele CDR1 i CDR2 din TCR. Buclele CDR3 recunosc doar
epitopul)
Acesta este primul semnal i el produce activare metabolic dar este
insuficient pentru a declana RIU.
2. B7/CD80 CD28 (co-stimulare)
n urma acestei co-stimulri se activeaz foarte mult LTh dar nc nu se
declaneaz RIU.
Primele dou etape reprezint cooperarea cognitiv din cadrul sinapsei
imune. La nivelul sinapsei imune exist i cupluri de activare
intercelular de linia I i de linia a doua.
3. IL1-alfa IL1R
APC-ul descarc molecule de interleukin 1alfa. Aceasta se descarc
doar dup activarea APC-ului prin receptor Toll i ea migreaz n acest
spaiu intermembranar i se va fixa pe receptorul IL1R de pe membrana
limfocitului T helper i se declaneaz al treilea semnal.
Acest lucru duce la activarea metabolic a limfocitului dar nc este
incomplet. n urma acesteia i limfocitul T helper suport modificri
Se transform n limfoblast T helper care acum ncepe s secrete
citokine. Una foarte important este IL2 dar secret i receptorul pentru
 IL2 numit CD25. Aceast interleukin exercit simultan ca orice
citokin trei efecte:
Autocrin se fixeaz pe receptor i se mai produce nc o activare a
limfocitului T helper (al patrulea semnal activator este un semnal
autocrin).
4. IL2 IL2R
Paracrin se adreseaz altor limfocite T helper din zon dar se
adreseaz i APC-ului (cooperare retrograd dinspre LTh spre APC)
Prin IL2, APC-ul se activeaz i mai mult i reia ciclurile de
semnalizare, aceste semnalizri producndu-se de mai multe ori. La
aceast prim cooperare intercelular, LTh primete patru tipuri de
semnale activatoare (fiecare de mai multe ori).
n urma activrii limfocitului T helper n limfoblast T helper,
limfoblastul reacioneaz straniu (prsete locul activrii). El se afla n
zonele T dependente iar tendina pe care o are este s migrezespre
zonele B dependente din ganglionul respectiv sau din splin.

I. APC nonB LTh + LbTh

Cea de-a doua etap a cooperrii este ntre limfocitul B i limfocitul T helper
II. LB LTh
O parte din antigenele T dependente reuesc s penetreze poarta de intrare i intr n
circulaie. La aceste antigene T dependente se pot aduga toxine deoarece antigenul
poate fi un parazit viu. i antigenele i toxinele acestora vor fi purtate de torentul sanguin
n zonele B dependente de data aceasta, n primul rnd din splin i secundar din
gangloni. Aici se afl CDF (celulele dendritice foliculare stau printre foliculii de
limfocite B). Acestea acioneaz ca nite filtre care opresc i antigenele native dar i
toxinele lor. Limfocitele B vor recunoate pe receptorii BCR aceste antigene. Acestea
endociteaz complexele BCR-antigen nativ i antigenul ncepe s fie prelucrat n
lizozom n paralel cu activarea metabolic a limfocitului B (vezi mecanismele de
activare prin receptori BCR!).
n urma acestei activri:
- limfocitele B ncep s produc molecule MHC II pe care vor prezenta epitopi din
antigenul nativ.
- Bineneles, i mresc i dimensiunile (prin activare metabolic se transform n
limfoblati B).
- Alt lucru care se ntmpl pe membrana limfocitelor B apar nite proteine noi care nu
erau nainte i care se numesc receptori CD40.
- Se produc i proteine B7
- Se activeaz citoscheletul (elementele de locomoie celular).
 - i limfoblatii B prsesc locul contactului antigenic i se orienteaz i ei ctre zonele
T dependente.
- Undeva la grania dintre zonele T dependente i cea B dependent din splin i
ganglioni, cei doi limfoblati se ntlnesc i are loc o nou cooperare intercelular. i
aceasta este bidirecional i se face i cognitiv i non-cognitiv (se respect simetria).
Care sunt stimulii pentru limfoblastul T helper:
(desen 3)
Limfoblastul B, n stadiul de limfoblast devine APC.
1. E-MHCII TCR-CD3
2. B7(CD80) CD28 (co-stimulare)
Acestor cupluri li se adaug cuplurile:
CD40 CD40L (CD40 i ligandul lui de pe LTh)
n urma co-stimulrii, limfoblastul T helper se activeaz complet i produce
cantitatea maxim de interleukin-2 pe care o poate produce. Aceasta va realiza
stimulare autocrin.
Se va descrca i IL-4, IL5. Toate trei tipurile de IL au i aciune retrograd,
paracrin, asupra limfoblastului B.
Acesta va fi stimulat i el nc o dat i atinge i el nivelul maxim de activare,
transformndu-se n plasmocit, ncepnd s secrete imunoglobuline:
o nti de tip M (dac este RIU primar).
o Dac ns, limfoblastul T helper produce IL-4 sau IL-5, acestea cnd merg
retrograd spre limfoblastul B, blocheaz rspunsul imun primar i se produce
rspunsul imun secundar, ncepnd producerea de IgG sau IgA (comutare
izotipic/switch izotipic). Interleukinele acineaz la nivelul genomului
plasmocitele.
Dup aceast activare complet, acestea pleac n locuri opuse. Se spune c fuga
aceasta a celor doi limfoblati ar duce la o prelungire n timp a RIU (pentru c nu
se consum o dat, rapid) dar pot fi i alte explicaii.

Limfocitele T helper caracteristici funcionale i diferenierea

Toate limfocitele T helper au pe membran receptorii CD4.
Toate limfocitele T helper au i receptori CD28 (i CD25) dar unele dintre LTh
stimuleaz RIC, altele RIU, altele n anumite condiii se transform din LTh n LT Supersoare.
S-a dovedit c evidenierea receptorilor membranari nu este suficient pentru a nelege
mecanismele LTh. Pentru a le nelege funcional, cel mai bine este prin descrierea bateriei de
citokine pe care le secret fiecare dintre ele.
nainte de a trece la IL, trebuie derulate cumva funciile LTh.
- Sunt celule eseniale n declanarea RIU primare.
- Tot LTh declaneaz mecanismul de switch izotipic prin citokinele pe care le secret:
o IL-4 induce switch-ul izotipic n plasmocite n aa fel nct acestea blocheaz
producerea de IgM i ncep prodcerea de IgG;
 o IL-5 stimuleaz n interiorul plasmocitelor swtich-ul izotipic prin care se oprete
producerea de IgG i ncepe producerea de IgA (deci IL-5 este esenial n RIU
din mucoase).
- Activeaz i stimuleaz creterea i diferenierea LT citotoxice (stimuleaz RIC).
- Stimuleaz activitatea bactericid a fagocitelor (prin acest mecanism de fapt stimuleaz
inflamaia imunitatea nnscut).
- Din cauza rolului lor foarte interesant i foarte important, LTh sunt i primele afectate
n infecia cu HIV. Numrul de LTh CD4+ se monitorizeaz permanent la infecia cu
HIV este elementul de baz prin care se apreciaz evoluia pacientului.

Diferenierea LT helper
- Iniial sunt limfocite T helper naive. Cnd acestea realizeaz prima activare (primul
contact antigenic), ele ncep s secrete IL-2 i receptori pentru IL-2. Astfel se realizeaz
o activare autocrin. n urma acestei prime activri autocrine, LTp trec n stadiul TH0.
- n urma activrii, LTh au posibilitatea de a secreta att IL-2 dar i cantiti mici de IL-
4, IL-5, interferon gamma. De aici, diferenierea se produce n funcie de citokinele din
mediu (care provin de la APC-uri):
o Dac n mediu predomin interferonul gamma, TH0 se transform n profilul
TH1, cel care activeaz RIC dar la rndul su secret cantiti mari de interferon
gamma (mimeaz citokina din mediu).
o Dac n mediu se afl IL-4 predominant, TH0 se transform n profil TH2 care
stimuleaz RIU.
o Diferenierea unui anumit profil l inhib automat pe cellalt.

TH1 - Funcia lor principal este de stimulare a RIC iar principalele celule cu care
interacioneaz sunt celulele dendritice, macrofagele i limfocitele T citotoxice.
Citokinele pe care le secret sunt interferonul gamma i TNF alfa.
Mecanismele principale stimuleaz macrofagele s capete .......................................
Un alt efect (aciune) prin interferonul gamma pe care l secret, limfocitele T helper
stimuleaz puternic celulele dendritice i macrofagele s produc IL-12 iar aceasta la
rndul ei stimuleaz foarte puternic TH1 (ca i cum LTh i genereaz o bucl de
autoactivare). Mai mult dect att, acelai interferon gamma inhib producia de IL-4 i
automat diferenierea spre profil TH2.

TH2 Stimuleaz RIU iar principala celul cu care interacioneaz este limfocitul B.
El produce IL-4, IL-5, IL-7, IL-10, IL-13. Stimuleaz proliferarea limfocitelor B,
stimuleaz producia de IgM, stimuleaz switch-ul izotipic i producia de IgG i IgA.
Mai mult, prin IL (mai ales prin IL4 i IL10), LTH2 blocheaz orice sintez de interferon
gamma (exclud ansa de apariie a LTH1).
 Concluzii:
Odat ce un LTh a hotrt spre ce linie evolueaz, se blocheaz concomitent
diferenierea spre cealalt linie i toate LTh din mediu sunt stimulate s o ia pe aceeai
cale.
APC-urile, prin citokinele secretate, sunt cele care hotrsc soarta LTh (spre ce profile
vor evolua).
Modelul TH1/TH2 ncepe s fie foarte controversat la ora actual (sunt din ce n ce mai
multe argumente experimentale care dovedesc c lucrurile nu sunt chiar aa, ex.:
profilele nu se exclud 100% unul pe altul). n imunologie se consider c exist trei-
patru tipuri de LTh:
- Tipul TH1 (care stimuleaz RIC i produce n primul rnd interferon gamma i TNF
alfa)
- Tipul TH2 (stimuleaz RIU i produce n primul rnd IL-4).
- Tipul TH3 (produce IL-10 i TGF beta i n anumite condiii se transform n LT
reglatorii).
- Tipul TH4 (produc n primul rnd IL-16, au fost descoperite n contextul unor boli
autoimune dar nu ele sunt cele care le cauzeaz).

Produii de secreie a celulelor participante la RIU

Celulele participante sunt APC-urile, LTh, LB.
Produii de secreie ai APC-urilor activate
IL-1, IL-12, IL-18, IL-27
IL-1 este de dou tipuri (IL-1alfa, cu rol imunologic i IL-1beta care intervine n
reacia inflamatorie).
IL-1alfa este produs doar n sinapsa imun i se fixeaz rapid pe receptorii specifici
de pe LTh, exercitnd activarea non-cognitiv a LTh (al treilea semnal). n urma acestei
activri non-cognitive, LTh se activeaz complet ntr-o prim etap, se transform pentru
prima dat n limfoblast i ncepea s secrete IL-2 i receptori pentru IL-2 (CD25) care s
permit stimulare autocrin.
IL-12 este o citokin secretat de toate APC-urile (i de macrofage, i de celulele
dendritice, i de limfoblatii B). Stimuleaz n primul rnd diferenierea TH0 spre TH1 deci
apariia RIC. Al doilea rol stimuleaz sinteza de interferon gamma i TNF alfa din TH1
dar i din limfocitele T citotoxice i limfocitele Natural Killer (Asta nseamn activarea
aprrii antitumorale i antivirale prin LTc). Blocheaz sinteza vaselor de snge (rol
antiangiogenic). Pentru c stimuleaz LNK i blocheaz sinteza de vase de snge se
consider c este un important factor antitumoral. IL-12 nlocuiete (n anumite ri)
anumite citostatice cu rol distructiv i are o aciune antitumoral mult mai blnd i mai
selectiv.
IL-18 este produs de macrofage, formeaz un cuplu mpreun cu IL-12, are aceleai
funcii dar se mai adaug nc una: un rol proinflamator foarte puternic.
IL-27 este produs de APC-urile activate dar la nceputul activrii lor (producie
timpurie). Stimuleaz expansiunea clonal a LTh CD4+ (cu aciune predominant pe TH2,
deci stimuleaz mai mult? RIU). Acioneaz sinergic cu IL-12.