ef lucr. Sanda M.

Creoiu

Organite celulare semiautonome

Organite celulare semiautonome

Organitele celulare semiautonome sunt definite ca organitele aflate n relaie de simbioz cu celula, capabile de autoreplicare prin fisiune binar. In aceast categorie sunt incluse mitocondriile, cloroplastele i mai nou peroxizomii, care spre deosebire de primele nu posed material genetic propiu, dar sunt capabili de autoreplicare i se afl n interrelaie cu reticulul endoplasmic neted i cu mitocondriile.

Mitocondria
Definiie, aspecte generale, caractere morfologice Mitocondria este un organit delimitat de un sistem de membrane i este cunoscut ca uzina energetic a celulei. Denumirea deriv din limba greac, de la miotos fir i khondrion granul. Forma mitocondriei variaz, aa cum arat i denumirea, de la filamentoas la sferic. Mitocondria mai este numit i condriozom ( kondrion granul, soma - corp). Istoricul descoperirii mitocondriilor ncepe n 1856 cnd savantul suedez von Kolliker descrie nite structuri cu aspect granular la nivelul celulelor musculare. n 1886 Richard Altmann pune la punct o tehnic citologic de evideniere a acestor structuri granulare i emite ipoteza c aceste structuri, pe care le denumete bioblaste, ar fi unitile de baz ale activitii celulare. Mai trziu Carl Benda le denumete, conform terminologiei greceti, mitocondrii. Studierea

mitocondriilor se desfoar de+a lungul ntregului sec. XX, abia n 1978 fiind formulat toria chemiosmotic de ctre Peter Mitchell laureat la premiului Nobel. Aceast teorie explic cum ionii de hidrogen disperseaz prin membran i care este legtur cu ATP n procesul de respiraie

celular. Formularea teoriei a jucat un rol important n stabilirea funcii mitocondriei care desface molecule provenite din mediul exogen, spre exemplu carbohidraii, pe care le transform n ATP i depoziteaz astfel energia necesar proceselor metabolice celulare. 1

ef lucr. Sanda M. Creoiu

Organite celulare semiautonome

Abia n 1997, Paul Boyer i John Walker descriu funcia ATP sintazei, desluind astfel dup un secol i jumtate, misterele funcionale ale granulelor filamentoase. Mitocondriile ocup un sfert din volumul citoplasma oricrei celule, cu excepia hematiei adulte i sunt organite celulare de excepie, nalt specializate, cu capaciti funcionale multiple, rolul lor energetic fiind esenial pentru celule (producia de ATP). Mitocondriile sunt deosebite de restul organitelor prin modul de funcionare i prin relaiile pe care le au cu celelalte compartimente. Multe dintre enzimele mitocondriale sunt codificate de ADN-ul nuclear, i dup translatarea ARNm n citosol, lanurile polipeptidice nou sintetizate sunt importate n mitocondrie. Mitocondria posed i ADN propriu, cu capacitate de codificare limitat. De asemenea conine i ribozomi proprii de tip procariot. n majoritatea celulelor, volumul ocupat de mitocondrii este de aproximativ 5% din volumul celulei; n celulele hepatice procentul este de 15 20%, iar n fibra cardiac contractil, 30 35%. Prin videomicroscopie s-a observat c mitocondriile sunt organite mobile, flexibile, care se deplaseaz n celul n mod constant ctre zonele din citoplasm unde consumul energetic este mare. Lungimea unei mitocondrii este cuprins ntre 1,5-2 m iar diametrul poate varia ntre 0,3 0,5 m, ajugnd n cazuri patologice la 10 micrometri (megamitocondriile din hepatocitul ficatului alcoolic). n afara dimensiunilor, forma mitocondriilor poate de asemenea varia, avnd aspecte rotunde, ovale, alungite. Se pot vizualiza la microscopul optic prin tehnici speciale cum ar fi coloraia vital cu verde Janus. Ele apar sub forma unor corpusculi granulari sau filamentoi, numai dup efectuarea unor coloraii speciale (hematoxilin feric metoda Regaud n ficat, sau metoda Altmann n rinichi). La microscopul electronic, indiferent de forme i diametre, au aceeai organizare

ultrastructural. Ele sunt mrginite de o dubl membran. Membrana mitocondrial extern este neted, n timp ce membrana mitocondrial intern este plicaturat. Existena celor dou membrane

ef lucr. Sanda M. Creoiu

Organite celulare semiautonome

asigur compartimentarea spaiului mitocondrial. Astfel ntre cele dou membrane se gsete spaiul intermembranar (compartimentul extern), iar membrana mitocondrial intern nchide aa numitul matrix (matrice) mitocondrial. Plicile membranei mitocondriale interne, numite criste, au un diametru de 18-20 nm. Cristele nu compartimenteaz niciodat matricea mitocondrial denumit i compartimentul mitocondrial intern. Numrul i forma cristelor difer n funcie de tipul celulei, fiind de obicei orientate perpendicular pe axul lung al organitului, dar pot avea i aspect tubular sau triunghiular, aa cum este cazul celulelor secretoare de hormoni steroizi. Spre exemplu, ntlnim criste alungite, mai scurte sau mai lungi (ficat, miocard), ct i criste tubulare n seciune transversal, n celulele glandei suprarenale. Memebrana mitocondrial extern Membrana mitocondrial extern este organizat conform modelului mozaic fluid, n care proteinele reprezint 60% i lipidele 40%. Un tip special de proteine gsite n membrana mitocondrial extern sunt porinele, ce delimiteaz n membran pori, cu diametrul de 2 nm, prin care trec aproape nerestricionat molecule cu greutate molecular sub 5 kDa dinspre sau nspre citosol. Moleculele ptrunse ajung n spaiul intermembranar, dar nu pot strbate membrana mitocondrial intern. Membrana extern are receptori pentru polipeptide care sunt translocate n matrice, spaiul intermembranar sau membrana intern. Tot n membrana extern se gsesc enzime implicate n metabolismul acizilor grai. Acetia sunt preluai din citoplasm de pe transportori specifici i esterificai sub aciunea acil-CoA sintetazei din membrana mitocondrial extern. Transportorii citosolici ai acizilor grai sunt de natur proteic, denumii FABP, de la Fatty Acid Binding Protein. O funcie important a membranei mitocondriale externe este inactivarea aminelor biogene (adrenalin, noradrenelin, serotonin, dopamin) sub aciunea monoamin-oxidazei (MAO), acestea

ef lucr. Sanda M. Creoiu

Organite celulare semiautonome

fiind transformate n compui, ce pot fi ulterior excretai prin urin. De notat c MAO este enzima marker pentru acest compartiment, fiind singurul loc din celul unde se poate gsi. Spaiul intermebranar La nivelul spaiului intermembranar, numit i compartiment mitocondrial extern, nu exist diferene de concentraie fa de citosol, n ceea ce privete moleculele cu greutate molecular de pn la 5kD. n plus la acest nivel vom gsi enzime cum ar fi adenilat-kinaza care transfer un fosfat de pe ATP pe AMP, conform reaciei: ATP + AMP = 2ADP. Se consum o molecul de produs finit al funciei mitocondriale (ATP) pentru crearea a dou molecule de substrat; adic se creaz premizele obinerii a dou molecule de ATP, prin consumul uneia singure. Tot la nivelul compartimentului intermembranar se gsesc i nucleozid-fosfokinaze care transform nucleozidele n nucleotide, crend premizele obinerii unei diversitii de compui macroergici. Membrana mitocondrial intern Membrana mitocondrial intern este alctuit conform mozaicului fluid, dar are n compoziie 20% lipide i 80% proteine, ceea ce demonstreaz un rol metabolic deosebit de important. Membrana mitocondrial intern este impermeabil pentru ioni, funcie asigurat de prezena la acest nivel a unui lipid special, cardiolipina (fosfolipid dublu cu patru acizi grai), ce reprezint circa 20% din lipidele membranare. Proteinele ce intr n alctuirea acestei membrane sunt implicate n procesele de fosforilare oxidativ. Pentru ndeplinirea acestei funcii au fost descrise cinci complexe proteice, ce particip la reacii de oxidare i la sinteza ATP, precum i proteine ce regleaz trecerea metaboliilor spre i din matrice. Primele patru complexe intr n alctuirea lanului respirator sau lanului transportor de electroni, iar cel deal cincilea complex este ATP sintaza. Complexul I NADH-dehidrogenaza preia electronii de pe NADH i transfer la ubiquinon (CoQ), iar energia rezultat este folosit pentru a pompa protoni n spaiul intermembranar. Complexul II succinat-dehidrogenaza introduce n circuit electronii preluai de la FADH2.

ef lucr. Sanda M. Creoiu

Organite celulare semiautonome

Complexul III sau citocrom b-c1 preia electronii de la coenzima Q i transfer la citocromul c i din nou se pompeaz protoni n compartimentul mitocondrial extern. Complexul IV sau citocrom a-a3 sau citocrom oxidaza este ultimul complex din lanul respirator ce preia electronii i i transfer ctre acceptorul final, oxigenul, formnd ap. Gradientul de protoni creat prin pomparea acestora n spaiul intermembranar este folosit de complexul V ATP sintaza pentru producerea de ATP. F0F1ATP-aza este o protein transmembranar cu structur asemntoare cu un b de tob, ce funcioneaz ca o turbin, cu aciune reversibil. Capul de form rotund este orientat spre matrix, trunchiul este reprezentat de poriunea transmembranar a enzimei, iar gtul conecteaz cele dou poriuni descrise anterior. Componenta F1 este format din capul i gtul proteinei i are n alctuire 5 subuniti: , , , i . Subunitile i au capacitatea de a lega nucleotide, ns doar subunitatea are activitate catalitic. Componenta F0 este regiunea transmembranar ce structureaz un canal prin care este disipat gradientul protonic. Matricea mitocondrial Matricea mitocondrial sau compartimentul mitocondrial intern conine elementele necesare replicrii, transcrierii i traducerii informaiei deinute de ADN -ul propriu. Majoritatea proteinelor din mitocondrii sunt totui codificate n ADN-ul nuclear. Matricea mitocondrial deine i o multitudine de enzime implicate n metabolismul energetic aerob: complexul piruvat

dehidrogenaza, acid gras CoA dehidrogenaza, acid gras CoA sintaza, citrat sintaza. Rolul principal al matricei const n oxidarea diferitelor substraturi din ciclul Krebs. Enzimele necesare ciclului acidului citric sunt localizate n matricea mitocondrial, cu excepia succinat dehidrogenazei, ce se gsete la nivelul membranei interne. Rolul principal al mitocondriilor este de a produce ATP (adenosine triphosphate), sursa din care acesta este sintetizat fiind acizii grai i glucoza. Oxidarea unui acid gras cu 18 atomi de

ef lucr. Sanda M. Creoiu

Organite celulare semiautonome

carbon d natere la 146 de molecule de ATP, iar oxidarea unei molecule de glucoz (6 atomi de carbon) elibereaz 36 molecule ATP. n adipocitele brune, mitocondriile conin o protein special, termogenina, cu rol n decuplarea transportului de electroni de sinteza de ATP, i folosirea energiei acumulate n lanul respirator cu scopul de a produce cldur.

PEROXIZOMII Definiie, aspecte generale, caractere morfologice Peroxizomii sunt organite mici, 0,5-1,5 m, sferice, delimitate de un singur bistrat lipidic,

gsii in majoritatea celulelor eucariote. Sunt sediul principal al utilizrii oxigenului. Numele de peroxizomi provine de la coninutul crescut n oxidaze care produc peroxidul de hidrogen, toxic pentru celule. Peroxidul de hidrogen este degradat apoi sub influena catalazei, enzima marker a peroxizomilor, n oxigen i ap. Peroxizomii conin aproximativ 50 de enzime implicate n diferite ci metabolice. Dintre acestea mai importante sunt: D-aminoacid oxidaza, urat oxidaza i HMGCoA reductaza, inta principal a medicamentelor numite statine, responsabile de scderea colesterolului. Examina i la microscopul electronic de transmisie, peroxizomii sunt delimitai la exterior de o membran simpl, de circa 6 nm grosime, iar n interior conin o matrice granular, amorf sau fibrilar. n matrice, se observ uneori, una sau mai multe structuri cristaline nconjurate de material amorf mediu electronodens. Aceste structuri denumite cristaloizi (miez de urat oxidaz) se observ n special la regnul animal, dar sunt absente n peroxizomii umani. Peroxizomii sunt capabili de a se divide desi nu posed material genetic. Proliferarea peroxizomilor este o adaptarea la stimulii dein mediu care semnalizeaz necesitatea unor enzime lizozomale. Inducerea proliferrii se face n dou faze: 1. Proliferarea prin nmugurire din peroxizomii preexisteni;

ef lucr. Sanda M. Creoiu

Organite celulare semiautonome

2.

Creterea organitului prin importarea de proteine ale matricei peroxizomale. Dac

aceasta cantitate este semnificativ peroxizomii vor crete n dimensiuni i apoi vor nmuguri. Biogeneza peroxizomilor Procesul prin care se formeaz membrana peroxizomilor este puin cunoscut. Acesta implic formarea bistratului lipidic i apoi importul proteinelor specifice n bistrat. Exist 3 proteine implicate n procesul de formare a membranei peroxizomilor, numite peroxine PEX3, PEX 16, PEX 19 Modelul bigenezei membranei peroxizomale: 1. Formarea bistratului lipidic. Dei numeroase organite se formeaz n reticulul

endoplasmic, rolul acestuia n formarea peroxizomilor este incert. Se presupune c aici ar avea loc formarea bistratului lipidic nainte de importul PEX3, 16, 19, proces dependent de proteine necunoscute nc. 2. Importul PEX16 i PEX3. Aceste 2 proteine necesare formrii membranei peroxizomale sunt importate n funcie de prezena PEX 19, singura peroxin despre care se tie c intervine

direct n legarea proteinelor din membrana peroxizomilor, fiind absolut necesar n geneza acestora. Proliferarea peroxizomilor este un proces dependent de o alt peroxin, PEX11.

poate fi indus ca rspuns la stimuli externi, determinnd proliferarea peroxizomilor. Importul proteinelor matricei peroxizomale Proteinele matricei peroxizomale sunt codificate de gene aflate n nucleu i sintetizate pe ribozomii liberi apoi importate post-translaional n citoplasm. Proteinele specifice peroxizomilor au 2 peptide semnal care direcioneaz aceste proteine spre matricea peroxizomal, numite PTS1 i PTS2 (peroxisomal targeting signal) Importul proteinelor matricei peroxizomale are 5 etape:

ef lucr. Sanda M. Creoiu

Organite celulare semiautonome

1. Legarea ligandului la receptor PEX5 recunoate PTS-1, iar PEX7 recunoate PTS-2. Se presupune c n acest proces intervin i proteine chaperone. 2. Transportul spre peroxizom este foarte puin cunoscut. 3. Andocarea receptorilor. PEX5 i PEX7 se asociaz cu PEX13, PEX14 i PEX17 constitueni ai complexului de andocare. 4. Disocierea i translocarea. PEX10 iPEX12 sunt proteine integrale din membrana peroxizomilor care interacioneaz direct cu PEX5. Procesul de import al proteinelor n matricea peroxizomilor este ATP-dependent. 5. Reciclarea receptorului. PEX5 este un receptor care efectueaz cicluri, fiind reciclat de peroxine cu rol de ATP-aze: PEX1 i PEX6. Funcii Peroxizomii sunt eseniali pentru ca o celul s funcioneze nomal. Astfel ei intervin n: oxidarea excesului de acizi grai cu lan lung de atomi de carbon rezultnd fragmente cu 2 atomi de carbon care fie sunt convertite la acetilcoenzima A fie sunt exportate din peroxizomi i folosite la noi sinteze de compui celulari; descompun purinele AMP i GMP la acidul uric i aminoacizi produc i export n citoplasm colesterol sintezei plasmalogenilor, conin primele 2 enzime necesare, un grup important de fosfolipide 19% din fosfolipidele organismului (se gsec concentrate n creier i cord). La plante exist peroxizomi specializai denumii glioxizomi care convertesc acizii grai i lipidele n glucide. La insecte (licurici) intervin n numit luciferaz. Boli peroxizomale La om exist o varietate rar de boli peroxizomale motenite, care implic existena unor variante mutante a uneia sau a mai multor enzime peroxizomale. 8 atragerea partenerului prin enzima

ef lucr. Sanda M. Creoiu

Organite celulare semiautonome

Adrenoleukodistrofia X-linkat (X-ALD) este o boal n care acizii grai nu sunt metabolizai corespunztor, consecina fiind o deteriorare a tecii de mielin a neuronilor. Boala apare la biei, deoarece gena este X-linkat. Alte boli sunt urmarea producerii unor peroxizomi nefuncionali, spre exemplu sindromul Zellweger. Boala este consecina motenirii a dou gene mutante, cle care codific receptorii care sunt responsabili de importarea proteinelor n matricea peroxizomului.