Analiza instrumentala

Cromatografie de gaze. Aplicatii

Abordarea analitica Identificarea problemeice doresti sa stii? Care este metoda instrumentala adecvata? Care este metoda cea mai buna? Ce semnifica rezultatele?

Etapele unei metode de analiza

Formularea problemei analitice Selectarea si aplicarea procesului analitic Optimizarea procedeului analitic Aplicarea procedeului optimizat Raportarea si interpretarea rezultatelor Formularea concluziilor

Parametri de performanta ai metodei

Selectivitatea Domeniul de lucru Acuratete si Precizie Limita de detectie Limita de cuantificare Sensibilitatea Robustetea

SENSIBILITATEA
Abilitatea de a masura diferente cat mai mici de concentratie ale analitului
Calibration Curve
3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 0 Chemical Concentration y = 0.0047x - 0.1629 R2 = 0.9996

Care dintre cele doua curbe prezinta o sensibilitate mai buna?

200 400 Instrument Reading 600 800

INTERVAL DINAMIC Intervalul dintre cea mai mare si cea mai mica concentratie analit care pot fi determinate cu precizie si exactitate. Ordin de marime Diferenta dintre doua numere consecutive pe o scala logaritmica
Example: diferente intre 10 si 100 sunt de un ordin de marime diferente intre 10 si 1000 sunt de doua ordine de marime diferente intre 0.10 si 1000 sunt de ordine de marime (104)

Instrumentele analitice au domenii de liniaritate dinamice variabile..

In cazul ideal, metoda trebuie sa prezinte un raspuns liniar

Semnalul produs de analit este direct proportional cu cantitatea sau concentratia analitului.

Msurarea preciziei unei metode

Una din metodele de evaluare a preciziei are la baz termenul cheie;

Deviatia standard, s
s= ( xi x ) 2
i

unde

n 1

x=

x
i

este media aritmetic

Deviatia standard relativ (RSD)

De mai mare utilitate este; Deviatia standard relativ (RSD) unde
s RSD = x

sau %RSD, cunoscut ca si coeficient de variatie, C.V.

s % RSD = 100 x

Precizia se caracterizeaza prin:

Repetabilitate: variabilitatea analitica in aceleasi conditii de lucru intr-un interval scurt de timp (un singur laborator, un singur operator,intr-un interval scurt de timp); Reproductibilitate: precizia obtinuta intre laboratoare (laboratoare diferite, analisti diferiti dar acelasi tip de aparat);

Acuratetea
Reprezinta gradul de concordanta intre rezultatul unei incercari si valoarea adevarata a masurandului; Arata in ce masura valoarea adevarata determinata pentru un analit dintr-o proba corespunde valorii adevarate.

LIMITA DE DETECTIE
Graficul reprezinta masurarea raportului semnal zgomot pentru un pic cromatografic. Semnalul A este sub limita de detectie, iar semnalul B peste limita de detectie.

Limita de detectie = concentratia analitului care produce un semnal al detectorului de cel putin 3 ori zgomotul de fond

Determinarea practica a celui mai mic semnal detectabil

Se masoara 10 probe oarbe independente o singura data fiecare: xLOD= xm(blanc) + 3blanc, unde blanc este abaterea standard a blancului
,,

Se masoara 10 probe oarbe independente fortifiate la cea mai scazuta concentratie acceptata, masurate o singura data: xLOD = 0 + 3proba

Limita de cuantificare
Graph showing the measurement of the signal to noise ratio for a chromatographic peak. Signal A is below the detection limit, while signal B is above the detection limit. Limita de cuantificare = concentration analitului care produce un semnal al detectorului de 10 ori mai mare decat zgomotul de fond

Determinarea practica a celui mai mic semnal cuantificabil

se masoara 10 probe oarbe independente o singura data fiecare: xLOQ= xm(blanc) + 10blanc, unde blanc este abaterea standard a blancului
,,

Se masoara 10 probe oarbe independente fortifiate la cea mai scazuta concentratie acceptata, masurate o singura data: xLOQ = 0 + 10proba

Robustetea
Reprezinta o masura a capacitatii acesteia de a ramane neafectata de variatii mici ale parametrilor metodei si ofera o indicatie despre siguranta metodei; Evaluarea robustetii se face cu ajutorul parametrilor: interni (temperatura, pH,), externi (analisti diferiti, echipamente, laboratoare diferite), fundamentali (stabilitatea solutiilor de incercare)

Etapele calibrararii unei metode

Se estimeaza domeniul de concentratii ale analitului.. Este evaluata matricea probei. Se prepara un set de standarde care sa acopere intreg domeniul de concentratii, uitlizandu-se dilutii seriale. Se prepara o solutie blank care nu contine analitul. Standardele sunt analizate si se traseaza curba de calibrare. Se utilizeaza cel putin o solutie blank + 3 solutii standard pentru a trasa curba. Intervalul de concentratii ale solutiilor standard trebuie sa cuprinda concentratia analitului.