1. Metode de decontaminare i controlul de calitate al acestora.

Scopuri: De a defini noiunile: steril, sterilizare, septic/aseptic, dezinfecie, antiseptizare, prezervare. De a discuta sterilizarea prin cldur uscat, cldur umed: principiu, indicaii, contraindicaii, parametri, etape, control de calitate. De a discuta dezinfecia prin: fierbere, metode chimice. De a discuta condiiile corecte de preparare i utilizare a dezinfectantelor. Contaminare = prezena microorganismelor pe o suprafa. Colonizare = prezena i multiplicarea unui microorganism pe suprafaa gazdei, far o reacie deosebit din partea acesteia. Septic = contaminat cu microbi patogeni sau infectat (n cazul plgilor). Aseptic = lipsit de microbi patogeni. Asepsie = ansamblul metodelor prin care evitm contaminarea unui substrat sau a unor elemente de mediu, a cror condiie microbiologic trebuie respectat. Antisepsie = distrugerea sau ndeprtarea formelor vegetative ale microorganismelor, dar nu n mod necesar i a sporilor bacterieni, de pe suprafee vii. Antiseptic = substan antimicrobian pentru aplicri pe suprafee vii (tegumente, mucoase, plgi). Dezinfecie = distrugerea sau ndeprtarea formelor vegetative ale microorganismelor, dar nu obligatoriu a sporilor bacterieni, de pe suprafee inerte. Dezinfectant = substan antimicrobian pentru aplicri pe materiale inerte. Steril = lipsit total de microorganisme viabile. Sterilizarea = distrugerea sau ndeprtarea tuturor microorganismelor, de pe o suprafa sau dintr-un obiect, inclusiv a sporilor bacterieni. Prezervare = prevenirea multiplicrii unor microorganisme n produse farmaceutice, alimentare. Ageni de decontaminare: Mecanici: splare cu ap i spun Fizici: - cldura uscat/umed; - frigul (oc rece); - radiaii (neionizante / ionizante); - ultrasunete; - filtrare. Chimici: substane antimicrobiene Condiii de risc d.p.d.v. al contaminrii cu microorganisme: Critice (cu risc nalt de contaminare) = contact direct cu esuturile i cu mediul intern: exemple. Semicritice (cu risc intermediar de contaminare) = contact cu mucoasele: exemple. Necritice (cu risc minim de contaminare) = contact cu tegumentul intact: exemple. Nivele de eficien a decontaminrii: nalt = sterilizare; indicat n condiii critice Mediu = dezinfecie eficient; indicat n condiii semicritice

 Jos = dezinfecie, antiseptizare, decontaminare mecanic; indicat n condiii necritice. CLDURA USCAT a. Sterilizarea prin ardere n flacr - nclzirea la rou firul drept, ansa i spatula de nsmnare - Flambarea gura eprubetelor i flacoanelor, tija ansei de nsmnare - Incinerarea materiale dispozabile contaminate, reziduuri organice b. Sterilizarea prin aer cald (etuv) Principiu: cldura uscat omoar microorganismele printr-un proces de oxidare Indicaii: - obiecte din sticl (eprubete, pipete, baloane); - obiecte din porelan (mojar); - instrumentar chirurgical metalic (pense, bisturie, foarfece); - pulberi inerte higroscopice (talc); - uleiuri minerale. Contraindicaii: - soluii apoase; - obiecte din cauciuc sau cu garnituri din cauciuc; - seringi din sticl cu metal; - esturi i vat din bumbac sau fibr sintetic; - materiale contaminate din laborator. Parametri: - temperatura = 170 - 180 C; - timpul = 60 minute. timpul de sterilizare = t egalizare a temperaturii + t omorre a microbilor. natura, forma, = constant volumul materialelor Etape de lucru: constituirea lotului de sterilizare aezarea obiectelor ambalate i a martorilor n etuv programarea temperaturii de sterilizare i conectarea la sursa de curent sterilizarea (timpul de sterilizare se msoar din momentul atingerii temperaturii de sterilizare) rcirea materialelor controlul martorilor Controlul de calitate/martori: martori fizici: temperatura martori chimici: benzi adezive a cror culoare vireaz corespunztor numai cnd sunt respectai cei doi parametri ai sterilizrii. martori biologici: benzi de hrtie de filtru impregnate cu spori de Bacillus subtilis.

CLDURA UMED a. Sterilizarea prin vapori de ap sub presiune (autoclav) Principiu: cldura umed omoar microorganismele prin coagularea proteinelor. cldura umed este mai nociv dect cea uscat. Indicaii: - soluii (medii de cultur); - sticlrie de laborator cu destinaii speciale (pentru culturi de celule); - bioreziduuri (culturi microbiene, produse biologice); - material chirurgical din bumbac; - obiecte i instrumente din cauciuc; - instrumentar metalic Parametri: - presiune 0,5 atm 1 atm 2 atm - temperatur 115C 121C 134C - timp (formul de calcul) timpul de sterilizare = t egalizare a temperaturii + t omorre a microbilor. natura, forma, = constant volumul materialelor Etape de lucru: constituirea lotului de sterilizare, verificarea nivelului apei din interiorul autoclavului, introducerea materialelor ambalate i a martorilor, nchiderea autoclavului, evacuarea aerului (controlul evacurii complete, importana) ridicarea presiunii, sterilizarea (se urmrete realizarea temperaturii de sterilizare i a timpului corespunztor de meninere a acesteia), coborrea presiunii, deschiderea aparatului (imediat ce presiunea a ajuns la 0) uscarea materialelor (importana), verificarea martorilor, marcarea i sigilarea materialelor. Controlul de calitate/martori: martori fizici: temperatur, presiune martori chimici: benzi adezive a cror culoare vireaz corespunztor numai cnd sunt respectai parametrii sterilizrii (temperatur i timp). martori biologici: spori de Bacillus geostearothermophilus n fiole cu medii de cultur.

b. Tyndallizarea (sterilizarea fracionat) Indicaii: substane termolabile (medii de cultur, alimente). Parametri: 30-60 min., 3-8 zile consecutiv, la 56-100C Principiu: n intervalul dintre expuneri, produsele sunt meninute la temperatura camerei, ceea ce permite germinarea sporilor, formele vegetative care rezult fiind distruse la al doilea sau urmatoarele tratamente termice.

c. Dezinfecia prin fierbere Indicaii: instrumentar de mic chirurgie n urgene (n absena celui steril), alimente, apa de but, lenjerie, biberoane. Parametri: 30 min., 100C Instrumentele se aeaz pe un grtar ce se ridic aseptic la sfritul fierberii; instrumentele fierbini se usuc pe fierbtorul fierbinte. AGENI CHIMICI Clasificare: - Ageni de denaturare a strii coloidale a proteinelor (acizi, alcooli) - Ageni blocani ai gruprilor chimice libere a enzimelor (peroxizi, metale grele, formaldehid, oxid de etilen) - Ageni care lezeaz membranele celulare (fenoli, detergeni) - Ageni care altereaz acizii nucleici (derivai de anilin, acridin) Exist diferene n ce privete eficiena antimicrobian, activitatea n prezena substanelor organice, toxicitate; curat/murdar; necesitatea penetrrii agentului dezinfectant. Reguli privind utilizarea corect a dezinfectantelor: 1. Nu suprancrca, pentru a evita scurgeri contaminante la mobilizarea borcanului 2. Nu introduce obiecte care plutesc dect dac pot fi umplute i imersate complet sau dac borcanul are capac i poate fi nclinat repetat. 3. Nu introduce materiale cu coninut proteic mare, ci colecteaz-le separat pentru autoclavare direct. 4. Nu dilua dezinfectantul prin scurgeri de lichide. Pentru supernatantul din tuburile de centrifug folosete un container separat cu soluie mai concentrat de dezinfectare i prevzut cu plnie pentru reinerea aerosolilor contaminani. 5. Nu lsa mai mult de 24 de ore materialele n soluia dezinfectant i nu refolosi soluia pentru c se pot selecta i nmuli bacterii de contaminare rezistente 6. Soluiile dezinfectante nefolosite 24 de ore se arunc.