UNIVERSITATEA DE TIINE AGRICOLE I MEDICIN VETERINAR ION IONESCU DE LA BRAD IAI FACULTATEA DE HORTICULTURA SPECIALIZAREA: PROTECIA PLANTELOR

PROIECT VIROLOGIE SI BACTERIOLOGIE

NDRUMTOR: Dr. FLORIN DANIEL LIPSA STUDENT: GRANCEA CRISTIAN

2013

TEMA PROIECTULUI

VIRUSURILE SI BACTERIOZELE VITEI DE VIE

Clasificarea bolilor Plantele agricole sunt afectate n dezvoltarea lor de la smn pn la recoltare, precum i n perioada de pstrare, de numeroi factori biotici (microorganisme) i abiotici, care pot influena sntatea lor luat individual i a culturii privit din punct de vedere populaional. n funcie de natura factorilor care produc rnbolnviri, bolile plantelor se clasific astfel : Boli neparazitare, produse de aciunea nefavorabil a unor factori externi (temperatur, umiditate, lumin, substane poluante etc.) sau interni, proprii plantei (respiraie, metabolism dereglat n general etc). Din punct de vedere populaional al culturii agricole, exist adesea o multitudine de manifestri de acest tip induse de tasare (strat de sol mai dens ce apare la arturi repetate la aceeai adncime), zone cu exces de ap, exces de sruri, zone cu reziduuri fitotoxice de erbicide etc. Boli parazitare, provocate de diferii patogeni : -virusuri, -microorganisme, -alge, -plante superioare parazite (antofite). Aceste boli se clasific, n funcie de cauza lor, astfel: -viroze -boli produse devirusuri; -micoplasmoze- boli produse de microorganisme asemntoare micoplasmelor ; -bacterioze - boli produse de bacterii ; -rickettioze- boli produse de ricketsii ; -micoze- boli produse de ciuperci ; -antofitoze- boli produse de plante superioare (antofite) ; -lichenoze- boli produse de licheni; -ficoze- boli produse de alge ; -flageloze - boli produse de flagelate. Bolile parazitare ale plantelor agricole sunt produse de : virusuri, micoplasme, bacterii, ciuperci, plante parazite superioare (antofite) etc. In mod corespunztor, bolile produse de aceti patogeni se numesc: viroze, micoplasmoze, bacterioze, micoze i antofitoze. Bolile produse de virusuri sunt cunoscute de mult, cum sunt de exemplu ptarea lalelelor (1576) i mozaicul tutunului (1859), dar natura lor virotic a fost stabilit mult mai trziu. Numrul de boli produse de virusuri este ridicat i continu s creasc. n ultimele sale lucrri, Pop (1986, 1988) descrie peste 372 virusuri ce produc viroze ale plantelor agricole. Virusurile sunt foarte mici, nu se pot vedea dect cu microscopul electronic, sunt patogene i nu pot exista dect n organismele vii, pe baza crora se nmulesc. Prin purificare s-a reuit obinerea virusului mozaicului tutunului sub form de paracristale (Stanley, 1935), virusul piticirii i ndesirii tomatelor sub form de cristale (Bowden i Pirie, 1939) etc., forme care sunt infecioase i transmit boala. Studiul biochimic al virusurilor a artat c acestea pot fi considerate cu greu organisme. Pe de alt parte, ele

nu pot fi considerate nici simple molecule. Ele sunt constituite dintr-un acid nuclear i o protein. Fiecare virus este alctuit fie din ARN (acid ribonucleic), fie din ADN (acid dezoxiribonucleic) i un anumit tip de protein. Virusurile nu se nmulesc prin diviziune, ci au un mecanism propriu de multiplicare numai n celula plantei gazd. n acest fel, virusul nu consum ca ceilali patogeni coninutul celulei, nici nu acioneaz prin toxine, ci prin modificarea celulei care ncepe s funcioneze anormal. Simptome i diagnoz. Aciunea virusurilor asupra plantelor, ca urmare a perturbrii metabolismului, ncepe adesea cu schimbri mai greu de detectat, pentru ca n final s se nregistreze numeroase simptome caracteristice. Cel mai frecvent se poate observa o reducere a vitezei de cretere a plantelor afectate, ceea ce determin o talie mai mic a acestora sau chiar piticirea lor. Durata de via a plantelor afectate este mai mic i se nregistreaz pierderi de recolt. De regul, simptomele apar pe frunze, dar i pe alte organe se pot observa uneori numeroase schimbri morfo-anatomice. Exist i virusuri care pot infecta plantele fr s produc simptome vizibile, acestea fiind denumite virusuri latente. Alteori, simptomele apar i evolueaz foarte repede i se poate observa, n curnd dup infecie, moartea plantei. Evoluia simptomelor la cele mai multe boli virotice este lent i intensitatea lor crete progresiv. Leziunile locale apar mai frecvent la infeciile artificiale i se manifest prin pete clorotice sau necrotice. Mozaicurile de diferite tipuri se manifest prin pete pe frunze, de form i mrime variabile, de culoare galben sau galben verzuie. Ptrile inelare se exteriorizeaz prin pete de form neclar, clorotice sau necrotice, pe frunze, dar i pe fructe sau tulpini. Adesea aceste simptome tind s dispar, dei virusul nu dispare. Cloroza se manifest sub form de nglbeniri de diferite nuane pe frunze, mai ales la virozele ce afecteaz sistemul vascular. CAP 2. VIRUSURI SI VIROZE IN CULTURA VITEI DE VIE Virozele sunt boli cu caracter infecios i contagios, provocate de ageni patogeni numii virusuri, care sunt entiti de dimensiuni submicroscopice, vizibile numai la microscopul electronic, constituie n esena dintr-un singur nucleic i protein, fr metabolism propriu, capabile s se nmuleasc numai n celula vie. 2.1. Scurt-nodarea viei de vie Grapevine fan leaf virus Rspndire, importan, istoric. Referiri despre existena simptomelor

caracteristice scurt-nodrii n podgoriile din Frana, Italia, Germania i Austria se gsesc n literatura aprut la sfritul secolului trecut. Originar din rile de pe coasta estic a Mediteranei, i din Asia de est virusul a fost introdus cu materialul de nmulire, mpreun cu nematodul vector, n majoritatea rilor cultivatoare de vi de vie de pe glob. n prezent fiind cunoscut n toate rile cultivatoare de vi de vie din Europa,

California, America, Africa de Sud i Australia. El nu a fost izolat din plantele de Vitis labrusca cultivate n nord-estul S.U.A. i Canada, nici din speciile de Vitis crescute spontan n America de Nord. mportana economic a bolilor produse de virusul scurt-nodrii este apreciabil, butucii infectai cu tulpinile grave a acestuia realiznd numai aproximativ 20% din producia butucilor sntoi. Dei n condiii climatice favorabile bolii, viele bolnave pot fii complet distruse, frecvent ele vegeteaz timp ndelungat, ns capacitatea lor de producie este redus progresiv. Valoarea comercial a strugurilor soiurilor de mas este grav depreciat datorit prezenei fenomenelor de meiere i mrgeluire. Virusul reduce, de asemenea, capacitatea de prindere la altoire, precum i dezvoltarea sistemului radicular i a lstarului vielor altoite. Simptomele scurt-nodrii tipice au fost observate frecvent la unele soiuri (Aligote, Gras de Cotnari, Italia, Riesling italian) virusul fiind izolat, de asemenea, pe plante test. (Pop, 1979). Simptome. n cazul scurt-nodrii tipice (grapevine fan leaf), simptomele primare ale fazei acute a bolii constau n apariia de inele, desene liniare sau pete cu aspect uleios pe unele frunze, urmate la scurt timp de un mozaic verde puin evident, asociate cu diferite grade de deformare a limbului. n funcie de tulpina virusului i soi simptomele de mozaic i deformrile pot fi mai mult sau mai puin evidente sau complet absente. Internodiile vielor bolnave sunt mai scurte i neregulate, iar lstarii secundari mai abundeni ceea ce d plantelor unaspect pufos. Lstarii i corzile prezint adesea creteri n zig-zag, noduri duble i fasciaii. nlimea plantelor bolnave este mai mult sau mai puin redus fa de normal, n cazuri grave, reprezentnd sub din cea a vielor sntoase. Meierea, mrgeluirea i reducerea numrului i mrimii strugurilor sunt simptome caracteristice scurt-nodrii, ele aprnd uneori chiar la vie infectate cu cretere mai mult sau mai puin normal i fr simptome foliare specifice. Caracteristic este faptul c, n cazul unui atac negeneralizat, butucii bolnavi sunt grupai n vetre avnd dimensiuni diferite i o form eliptic. Spre deosebire de mozaicul galben al viei de vie, butuci afectai de scurtnodarea tipic nu sunt complect distrui ci vegeteaz ndelungat, producia lor fiind ns redus progresiv.

Mozaicul galben al viei de vie ( grapevine yellow mosaic), produs de tulpinile cromogene ale virusului scurt-nodrii, se caracterizeaz printr-o nglbenire evident, ce apare primvara de timpuriu,afectnd frunzele, lstarii,crcei i inflorescenele. La frunze acesta poate apare sub forma nglbenirii reelei nervurilor, ca benzi galbene situate n lungul unor poriuni ale nervurilor, nglbenirea unor sectoare ale suprafeei limbului sau a frunzelor n ntregime. In anumite cazuri,frunzele atacate au culoare galben sau alburie, iar unele poriuni ale suprafeei limbului se necrozeaz. De asemenea, viele bolnave prezint mai rar noduri duble, fasciaii i creteri n zig zag, ns struguri sunt n numr mic, de dimensiuni reduse i cu boabe normale puine,producia butucilor afectai fiind practic compromis. Vigoarea plantelor bolnave este redus progresiv butuci fiind complect distrui la civa ani de la apariia primelor simptome. n cazul nglbenirii nervuriene (grapevine vein banding ), simptomele constau ntr-o ptare galben armie ce apare la sfritul primverii sau la nceputul verii, n lungul nervurilor principale ale frunzelor mature, afectnd ntr-o mic msur i esuturile din apropierea nervurilor. De regul, simptomele apar pe un numr mic de frunze, persistnd pe acestea pn la sfritul perioadei de vegetaie. Forma frunzelor este normal sau puin afectat. Lstarii prezint rar noduri duble sau fasciaii. Simptomele sunt ns deosebit de grave la struguri, care sunt n numar mic, de dimensiuni reduse i cu un numr nensemnat de boabe normal dezvoltate, n cazul unor butuci producia fiind total compromis.

Foto 12: Grapevine fan-leaf Plante gazd. Toate soiurile de Vitis vinifera precum i speciile de vi american introduse n Europa i formele hibride obinute cu V. Lambrusca, V. Riparia, V rupestris, V berlandieri, V aestivalis i V candicans s-au dovedit susceptibile la virusul scurtnodrii att n condiii de infecii naturale ct i la inoculrile artificiale. Susceptibile la infeciile artificiale cu acest virus s-au dovedit de asemenea speciile ornamentale asiatice V. davidi, V. piasezkii, V. insicarii i specia fructifer V amurensis. Variabilitate, tulpini. Izolatele virusului scurt-nodrii difer mult ntre ele n ceea ce privete tipul i gravioditatea simptomelor aprute la plantele de vi i la gazdele ierboase.Dup reacia plantelor de vi de vie acestea sunt clasate n urmtoarele grupe de tulpini : - Tulpina scurt-nodri tipice (fan leaf strain ) produce diferite grade de marmorare i deformarea suprafeei limbului, deschiderea sinusurilor peiolare i a celor marginale, dinarea marginei limbului, creterea excesiv a lstarilor laterali, internodii scurte creteri n zigzag i noduri duble. - Tulpina mozaicului galben (yellow mosaic strain) produce colorarea n galben sau galben verzui a frunzelor, lstarilor i inflorescenelor n cursul lunilor de primvar, frunzele manifestnd n continuare diferite tipuri de nglbeniri, deformarea lstarilor lstarilor i coardelor fiind mai rar ntlnit.

- Tulpina nglbenirii nervuriene ( vein banding strain ) se caracterizeaz prin producerea unor benzi galbene proieminente n lungul nervurilor de ordinul 1-3, ale unor frunze mature. Transmitere, epidemiologie. Experimental virusul se transmite la toate soiurile i speciile de vi de vie prin mai multe tehnici de altoire, simptomele aprnd n cteva luni de la inoculare. Virusul scurt-nodrii poate fi transmis de la plantele de vi de vie bolnave la cele sntoase prin nematozii Xiphinema index i X italiae. n condiii experimentale nematodul X index a chiziionat virusul scurt-nodrii printr-o hrnire scurt pe rdcinile vielor infectate, reinndu-l apoi timp de 3 luni n cazul hrnirii lui n continuare pe plante libere de virus i timp de pn la 8 luni n absena plantelor gazd (Martelli, 1986). Experienele efectuate n ara noastr (Pop, 1985) i n alte ri arat c n plantaii rspndirea virusului scurt-nodrii prin intermediul nematozilor are loc cu o vitez redus, care nu depete 1,3-1,5 m/an. Datorit deplasrii active la distane mici a nematozilor n sol i transportrii lor la distane mai mari de ctre mainile utilizate n lucrrile de ntreinere, atacul n cmp al virusurilor transmisibile prin nematozi vectori constituie o surs de infecie n intervalul dintre defriarea plantaiilor vechi i nfinarea altora noi. n aceste condiii, rezult clar c rspndirea la distane mari a virusului scurtnodrii este asigurat, n principal, prin multiplicarea, comercializarea, i plantarea materialului de mulire infectat, diseminarea lui la scar mondial s-a realizat dup invazia filoxerei, care fcnd necesar producerea vielor altoite n pepiniere speciale a dus la efectuarea unui schib larg de material de mulire ntre diferite localiti, ri i zone geografice. Serologie. Virusul scurt-nodrii este un antigen moderat i poate fi obinut relativ uor liber de proteinele normale. n esuturile de difuzie n gel, formeaz o singur linie de precipitare. Antiserurile cu titlul de 1:512-1:1028 reacioneaz pn la o diluie de 1:16 cu virusul mozaicului, arabisului iar antiserul acestuia pn la o diluie de 1:125 cu virusul scurt-nodrii (Vuittenez, 1970). Mai recent tehnica imunoenzimatic (ELISA) s-a dovedit deosebit de avantajoas pentrun diagnosticarea virusului, permind identificarea acestuia din sucul extras din

viele infectate diluat pn la 1:50000. testul poate fi aplicat din iunie pn n octombrie ns concentraia maxim a virusului se nregistreaz la sfritul lunii iunie, n frunzele de la vrful lstarilor (Bovey i colab.1980). Prevenire i combatere. innd cont c n ara noastr starea sanitar a plantaiilor viticole n ceea ce privete atacul virusului scurt-nodrii este mult mai bun dect n anumite zone puternic afectate din unele ri europene, iar condiiile pedo-climatice sunt mai puin favorabile nmulirii i activitii nematozilor vectori, considerm c prevenirea rspndirii lui n podgoriile noastre poate fi asigurat prin aplicatea urmtoarelor msuri: Aprovizionarea sectorului de producie cu material sditor sntos liber de virusuri (Olobeanu, Pop, 1988). O stare sanitar corespunztoare poate fi obinut prin recoltarea corzilor de portaltoi din plantaiile n care s-au eliminat toi butucii cu simptome de vizoze i cu dezvoltare vegetativ slab. Corzile de altoi vor fi recoltate numai de la butucii fr simptome virale i cu o dezvoltare vegetativ foarte bun. nfiinarea noilor plantaii viticole cu material sditor liber de viroze se va face numai pe terenuri care nu au mai fost cultivate n ultimii ani cu vi de vie sau pe suprafee de pe care via de vie a fost defriat n urm cu 3-5 ani, interval n care acestea au fost cultivate cu plante pritoare i meninute libere de buruieni. Pentru obinerea de plante libere de virus din soiurile sau clonele total infectate se pot aplica termoterapia, microgrefarea pe portaltoi liber de virusuri i cultivarea n vitro a meristemelor i a vrfurilor de cretere (Barlass, 1982). n cazul necesitii nfiinrii unor suprafee viticole pe terenuri cultivate anterior cu vi de vie fr un repaus corespunztor al solului dup defriarea culturii, este necesar ca pe suprafeele respective s se aplice tratamente speciale contra nematozilor vectori. (Raski i colab. 1983). Pentru viitor sunt n curs de desfurare cercetri privind obinerea de soiuri de portaltoi n care s fie nglobai factorii care condiioneaz tolerana fa de virusul scurtnodrii prezeni n unele soiuri de Vitis vinifera, factor care determin rezistena fa de nematodul Xiphinema index identificai n unele specii de Vitis i factori care controleaz rezistena la filoxer.

10

2.2. Mozaicul armiu al viei de vie Grapevine Chrome Mosaic Virus Rspndire, importan, istoric. Boala este frecvent n viile de pe coasta nordic al lacului Balaton (Ungaria), unde este cunoscut nc din 1932, fiind confundat cu deficiena de fier, frecvent n zona respectiv. Dei are o rspndire limitat, virusul prezint un pericol potenial pentru podgorii, ducnd la compromiterea recoltei ii distrugerea butucilor infectai (Lehoczky, 1966; Sarospataki,1965). Simptome. Boala se manifest prin simpotome foarte evidente. Ele se caracterizeaz printr-o decolorare accentuat a frunzelor, care, primvara de timpuriu, devin de culoare galben-armie sau alburie. nglbenirea poate cuprinde suprafaa frunzelor n ntregime sau este limitat la unele sectoare ale limbului sau la esuturile din lungul nervurilor. n funcie de stadiul de dezvoltare a bolii, simptomele apar pe tot foliajul butucului sau numai pe unele frunze. Corzile i lstarii prezint bifurcaii, noduri duble i internodii scurte. Butucii bolnavi au o vigurozitate redus i producie nensemnat. Pe msur ce boala progreseaz ei przint simptome de declin, fiind complet distrui dup 5-6 ani de la apriia simptomelor. Boala apare la diferite soiuri de Vitis vinifera, hibrizi i specii de Vitis, fr a se observat deosebiri n ceea ce privete tipul i intensitatea simptomelor. O caracteristic important a bolii const n apariia butucilor bolnavi grupaii n vetre de form eliptic. Plante gazd. Infecii naturale cu acest virus s-au gsit la 33 de soiuri de vi roditoare, precum i la Vitis berlandierii X V .riparia Kober 5 BB, Vitis riparia Portalis, V. vinifera Aramon X V. rupestris Gl, V. labrusca X V. riparia X V. vinifera Othello i V. rupestris Du Lot. n codiii artificiale, virusul a fost transmis la mai multe specii ierboase. Transmiterea, epidemiologie. Experimental, virusul poate fii transmis prin inoculare de suc i prin altoire. n natur, este diseminat la distan prin mutiplicarea i comercializarea materialului infectat. n plantaii, virusul este transmis de la plantele infectate la cele sntoase prin nematozi, ns specia vectoare nu a fost nc identificat. . Prevenire i combatere. Pentru prevenirea rspndirii virusului mozaicului armiu al viei de vie se aplic aceleai msuri ca n cazul virusului scurt-nodrii. n ara noastr

11

virusul nefiind nc semnalat la via de vie, apariia i rspndirea lui n podgorii poate fii prevenit prin introducerea materialului sditor liber de virusuri, recoltnd corzile de altoi i portaltoi din surse care au dat rezultate negative la testarea lor pe specii de Chenopodium i pe indicatorul Vitis rupestris soiul Sf. Gheorghe.(Pop, 1988). 2.3. Mozaicul arabisului la via de vie Arabis mosaic virus in grapevine Rspndire, importan, istoric. Identificat pentru prima dat la via de vie n 8 localiti din R.F.Germania (Berks i Stellmach, 1996), virusul a fost semnalat ulterior la aceast plant n Frana, Elveia, Bulgaria, Iugoslavia i Japonia, aprnd singur sau n combinaie cu virusul scurt-nodriisau cu alte virusuri transmisibile prin nematozi. Simptome. Virusul a fost identificat n plante de Vitis vinifera manifestnd simptome de scurt-nodare i nglbenire, precum i n plante de portaltoi cu dezvoltare vegetativ slab. Astfel, el a fost izolat de la plante aparinnd soiului Chasselas cu internoduri scurte, noduri duble, frunze de dimensiuni reduse, foarte decupate i clorotice, de la vie din acelai soi cu grad naintat de meiere i mrgeluire, din plante de vi Risling italian ce manifest nglbenirea total a frunzelor i nroirea lstarilor i de la vie de Vitis riparia x V. berlandieri cu creteri reduse i frunze mici clorotice (Bovey i colab.1980). Plante gazd. n cadrul genului Vitis, virusul a fost identificat la mai multe specii. Transmitere, epidemiologie. Experimental, virusul poate fi transmis prin inoculare de suc, altoire i cu ajutorul nematodului Xiphinema diversicaudatum. Diseminarea n natur are loc prin multiplicarea materialului infectat i transmiterea lui de la plantele bolnave la cele sntoase prin nematodul vector. Prevenire, combatere. Principala msur de prevenire const n recoltarea corzilor pentru altoi i portaltoi din plantaii mam nfiinate cu material care a dat reacie negativ la testarea lui pe specii de Chenopodium i pe indicatorul Vitis rupestris soiul St. George (Pop, 1988).

12

2.4. Virusul bulgarian al viei de vie Grapevine bulgarian latent virus Rspndire, importan, istoric. Izolat pentru prima dat de la diferite soiuri de vi de vie n Bulgaria (Martelli i colab., 1977), virusul a fost identificat ulterior n Iugoslavia, Ungaria i Portugalia (virusul CM 112), precum i de la Vitis labrusca soiul Concord, n statul New York, S.U.A.. Dei relativ fecvent n plantaiile viticole, importana economic a acestui virus este relativ redus, infecia nemanifestndu-se prin simptome grave. Izolate asemntoare cu virusul bulgarian latent al viei de vie s-au obinut i n ara noastr, cu ocazia testrii diferitelor soiuri de vi prin transmiteri pe plante de Chenopodium quinoa. Simptome. Virusul bulgarian latent al viei de vie a fost izolat din unele soiuri de Vitis vinifera, cum este Rcatzitelli, fr simptome externe, iar la inocularea mecanic cu izolatele bulgreti ale acestui virus. n condiiile din Statul New York (S.U.A.) la viele soiului Concord (V. labrusca ) infectate cu acest virus s-au observat ntrzierea pornirii n vegetaie, creterea neregulat a lstarilor, foliaj verde-deschis i neuniformitatea strugurilor. Plante gazd. n cadrul genului Vitis, virusul a fost identificat la soiuri de V. vinifera i V. labrusca . Prin inoculri artificiale a fost transmis la 10 specii aparinnd la 4 familii dicotiledonate (Martelli i colab.1986). Variabilitate, tulpini. Att n Bulgaria ct i S.U.A. s-au obinut unele izolate care manifest unele deosebiri n ceea ce privete reaciile serologice. Transmitere, epidemiologie. Experimental, virusul se transmite prin inoculare de suc i altoire, iar n natur se rspndete prin multiplicarea materialului infectat. Se presupune c rspndirea virusului n plantaii are loc prin intermediul nematozilor, ns specia vectoare nu a fost identificat. Prevenire i combatere. Rspndirea virusului bulgarian latent al viei de vie n podgoriile din ara noastr poate fi prevenit prin producerea materialului sditor folosind corzi de altoi i portaltoi din surse care au dat rezultate negative la testarea lor pe plante de C. quinoa (Pop, 1988).

13

2.5. Rsucirea frunzelor viei de vie Grapevine Leafroll Agentul patogen, nrudiri, relaii. Etiologia rsucirii frunzelor viei de vie nu este ns complet lmurit, datele obinute mai recent idicnd faptul c n producerea ei ar fi implicate mai multe virusuri. Astfel, n Israel, Tane i Givony (1985) izoleaz din planelele de vi de vie cu simptome de rsucire, aparinnd soiurilor locale i din import, un potyvirus cu particule lungi de 790 nm. n Elveia, Italia, Israel, Tunisia i Algeria, rsucirea frunzelor viei de vie s-a dovedit asociat specific cu un closterovirus avnd particule lungi de 800 nm(grapevine virus A), un clostreovirus cu particule de 2200 nm (grapevine virus B) i mai multe closterovirusuri cu particule cuprinse ntre 1000 i 1800 nm (Conti i Milne, 1985). De asemenea, n floemul plantelor de vi de vie afectate de rsucire s-a pus n eviden un virus sferic de 30 nm n diametru (Conti i Milne, 1985). Deoarece n infecii naturale rsucirea frunzelor este frecvent asociat cu unele afeciuni, cum sunt stem pitting, corky bark i fleck, este greu de fcut o legtur etiologic precis ntre virusurile izolate menionate mai sus i rsucirea frunzelor nsi. Rspndire, importan, istoric. Rsucirea frunzelor este cunoscut din timpuri ndeprtate n Italia, Frana i Germania, natura ei infecioas fiind demonstrat de G. Scheu n 1936. n 1946, Harmon i Snyder desoper natura infecioas a bolii White Emperor, cunoscut de mult timp n California, iar A. C. Goheen demonstreaz c aceasta este etiologic identic cu rsucirea frunzelor. Boala prezint importan economic ridicat, reducnd producia cu 10-70 % i micornd n mod esenial coninutul strugurilor n zahr. n cazul unor soiuri roii de mas, strugurii recoltai de la butucii bolnavi nu pot fi comercializai, datorit reducerii intensitii culorii acestora. De asemenea, boala scade capacitatea de prindere la altoire i de nrdacinare a corzilor i mrete susceptibilitatea acestora la nghe. Frecvena rsucirii n plantaii este ridicat , n Frana, proporia portaltoilor americani ifectai latent ntr-o plantaie mam selectat vizual fiind de 54 %. n ara nostr, boala a fost infect pe cale experimental la soiurile Merlot , Feteasc Neagr, Chasselas dore i la unii hibrizi productori direci.

14

Simptome. n condiiile rii noastre, boala se manifest la soiurile roii ncepnd cu luna iulie, prin apariia de pete roietice difuze ntre nervurile principale ale frunzelor inferioare. Mai trziu, petele se mresc treptat, conflueaz, dnd frunzelor o culoare roietic uniforma, cu excepia unor benzi verzi, late de ctiva milimetri, situate n lungul nervurilor principale i secundare. Paralel cu avansarea nroirii, frunzele se rsucesc spre faa inferioar, n general n jurul celor 3 axe, limbul privit de sus avnd uneori o form triunghiular. Simptomele sunt deosebit de evidente n lunile august septembrie. n ultimul stadiu, la marginea limbului i n spaiile internervuriene, apar necroze, iar benzile din lungul nervurilor devin de culoare glbuie. La soiurile albe, simptomele sunt similare cu ale celor roii, cu deosebirea c, n loc de nroire, apare o clorozare uoar a spaiilor internervuriene. n cazul unor soiuri, cum sunt Thomson Seedless i Perlette, ntre nervurile principale apar zone sub form de arsuri, rsucirea frunzelor aprnd trziu i cu intensitate redus. n California, hibridul Bacco 22 A este foarte sensibil la rsucirea frunzelor, reacionnd n anul infeciei prin piticire sever, reducerea suprafeei limbului i apariia de cloroze internervuriene la frunzele tinere. Boala reduce vigurozitatea plantelor, numrul i mrimea strugurilor i coninutul acestora n zahr, cu efecte negative nsemnate asupra cantitii i calitii produciei. Culoarea strugurilor soiurilor negre este mai puin afectat. n cazul soiurilor roii (Cardinal, Emperor, Mission, Queen, Red Malaga i Tokay), strugurii nu se coloreaz normal pn n momentul recoltrii. n cazul unor soiuri albe (Melon, Riesling, Sylvaner, Thomson Seedless), strugurii nu au, de asemenea, culoarea normal alb-verzuie ci una alb-glbuie. Plantele din soiurile de Vitis vinifera infectate cu formele slabe ale agebtului patogen nu manifest simptome externe evidente. De asemenea, agentul patogen al rsucirii frunzelor este latent n soiurile i tipurile de portaltoi americani. Plante gazd. Cercul de plante gazd cuprinde reprezentani ai genului Vitis. Mai recent, virusul A al viei de vie a fost transmis la specii prin intermediul a trei specii de acarieni.

15

Transmitere, epidemiologie. Experimental, agentul patogen poate fi transmis prin grefare de scoar sau altoire. n Australia, s-au obinut rezultate pozitive la transmiterea agentului patogen de la vi la vi prin Cuscuta campestris. Potvirusul izolat de Tanne i Givonz (1985) i virusul A al viei de vie (Milne i colab. 1984) sunt transmisibile prin inoculare de suc. Virusul A a fost, de asemenea, achiziionat de la vi i transmis la specii ierboase prin speciile de coccide Planococcus Ficus, P. Citri, i Pseudococcus longispinus (Rosciglione i Castellano, 1985). n natur, diseminarea bolii are loc mai ales prin multiplicarea, comercializarea i plantarea materialului infectat. Observaiile efectuate n ceea ce privete diseminarea bolii pe cale natural arat c aceasta are loc cu o vitez foarte redus n California i n mai rapid n unele ri ca Frana de Sud, s-a observat, de asemenea, rspndirea rsucirii frunzelor pe cale natural, asociat cu pduchele estos Plancoccus ficus (Engelbrecht i Kasdorf, 1985). Prevenire i combatere. Simptomele rsucirii frunzelor fiind evidente la mai multe soiuri de Vitis vinifera, n special la cele roii, o msur imprtant de prevenire const n recoltarea corzilor altoi numia din plantaiile mam din care s-au eliminat de la nmulire toi butucii infectai, pe baza observaiilor vizuale efectuate n toamn de ctre un personal calificat. Deoarece portaltoii de vi american pot fi infectai ff a manifesta simptome externe, recoltarea corzilor altoi de la vi roditoare fr a manifesta simptome de rsucire nu elimin total posibilitatea obinerii de vie infectate n pepinier. De aceea, se recomand ca, n cazul soiurilor care manifest simptome de rsucirea frunzelor s se elimine i s se nlocuiasc butucii bolnavi din plantaiile tinere, pe baza observaiilor vizuale efectuate toamna de tehnicieni calificai, n primii 2-3 ani de la plantare. Deoarece tipurile de portaltoi i numeroase soiuri de vi roditoare nu manifest simptome clare de rsucirea frunzelor, o msur sigur de prevenire const n recoltarea corzilor pentru portaltoi i altoi din plantaiile mam nfiinate cu material obinut de la vie la care absena rsucirii frunzelor a fost verificat prin testare pe soirile indicatoare. Plante libere de rsucirea frunzelor din clonele total infetate pot fi obinute prin meninerea plantelor infectate timp de 60-120 zile la 380C, urmat de detaarea i nrdcinarea separat a vrfurilor de cretere. Rezultate bune se pot obine prin tratarea

16

termic a mugurilor inectai altoii n stare de repaos pe portaltoi sntoi prin folosirea microgrefrii (Bass i Legin, 1981), sau prin utilizarea metodei culturilor meristematice (Barlass i colab. 1982). 2.6. Strierea lemnului viei de vie Grapevine Stem Pitting Agentul patogen, nrudiri, relaii. Cu toate c etilogia bolii nu este complt lmurit, se presupune c ea este produs de un virus transmisibil pri altoire. n Italia, Conti i colab. (1980) izoleaz dintr-o vi de vie cu simptome de striere lemnului virusul A al viei de vie (grapevine virus A), ns Milne i colab. (1984) apreciaz c aceasta ar fi mai degrab asociat cu rsucirea frunzelor dect cu strierea lemnului. Presupunerea c strierea lemnului ar putea fi produs de virusul scurt- nodrii nu este susinut de datele experimentale. Unele date obinute n California i Mexic arat c strierea lemnului (stem pitting) i spongiozitatea scoarei (corky bark) ale viei de vie ar reprezenta aceeai boal, ele neputnd fi difereniate prin reaciile produse la indicatorul LN 33. Boala descris n Italia sub denumirea de legno riccio ar fi, de asemenea, mai asemntoare cu grapevine corky bark dect cu grapevine stem pitting. Rspndire, importan, istoric. Cu toate c simptomele bolii erau cunoscute n Frana de mai mult timp, strierea lemnului viei de vie a fost descris ca o viroz, sub denumirea de legno riccio, n sudul Italei, abia la mijlocul secolului nostru, natura infecioas a acesteia fiind demonstrat de A. Graniti i G.P. Martelli (1966). Boala apare n majoritatea zonelor viticole de pe Glob, fiind frecvent i pgubitoare n numerose ri europene, precum i n cele din Orientul Mijlociu, Africa, Venezuela i S.U.A. Simptome caracteristice bolii au fost descrise i n ara noastr (Zinca, 1979). Strierea lemnului viei de vie este foarte important din punct de vedere economic, ducnd la diminuarea progresiv a creterii i produciei butucilor bolnavi i, n final, la moartea acestora, mai ales n cazul unor combinaii de altoi i portaltoi. Simptome. Viele afectate de strierea lemnului sunt mai slab dezvoltate, dau producii mai mici i de regul, pornesc mai trziu n vegetaie dect cele sntoase. Unii

17

butuci manifest un declin progresiv, fiind complet distrui n decurs de civa ani de la plantare. Un simptom relativ frecvent al strierii lemnului const n ngroarea altoiului n poriunea situat imediat deasupra punctului de altoire, diametrul acestuia fiind mult mai mare dect cel al portaltoiului. n cazul unor soiuri, cum este Italia, scoara altoiului din apropierea punctului de altoire este mult mai ngroat, de consisten spongioas i cu aspect rugos. Simptomele caracteristice bolii se observ ns dup separarea unor poriuni ale scoarei de cilindrul lemnos. Ele constau n prezena unor depresiuni alungite, late de 1-6 mm i lungi de 1-6 cm, la suprafaa cilindrului lemnos. Depresiunile din lemn, corespund unor protuberane de mrimi i forme asemntoare, prezente pe faa intern (cambial) a scoarei. n majoritatea cazurilor, tranformrile n lemn i scoara apar numai la portaltoii de vi american. Majoritatea soiurilor de vi roditoare, printre care Pans Precoce i Cardinal, prezint o toleran ridicat la agentul patogen al acestei boli, fiind adesea infectate fr a manifesta simptome. Alte soiuri de Vitis vinifera, ca Ohanez, Italia i Regina, sunt foarte sensibile, prezentnd simptome caracteristice. Plante gazd. Testarea plantelor de vi de vie cu privire la prezena agentului patogen al acestei boli poate fi efectuat folosind ca indicatori Vitis rupestris, V. riparia X V. berlandieri Kober 5 BB, sau hibridul LN 33, la care simptomele caracteristice apar la 1-3 ani de la inocularea lor prin altoire. Transmitere, epidemiologie. Experimental, agentul patogen poate fi transmis prin altoire, iar n natur este diseminat prin multiplicarea materialului infectat. n Europa nu s-a observat rspndirea bolii pe cale natural ns date n acest sens au fost obinute n Mexic (Teliz i colab. 1982). Prevenire i combatere. Agentul patogen fiind latent n soiurile i speciile de Vitis, msura de prevenire const n recoltarea altoilor i portaltoilor din plantaii mam nfiinate cu material din surse care au dat rezultate negative la testarea lor pe soiurile indicatoare specifice acestei boli (Pop, 1988).

18

2.7. Spongiozitatea scoarei viei de vie Grapevine corky bark Agentul patogen, nrudiri, relaii. Spongizitaea scoarei viei de vie se considera o afeciune de natur viral cu toate c etiologia ei nu este nc complet lmurit. Corbett i Viid (1985) identific n viele cu simptome de corky bark cutivate n California i Africa de Sud un closterovirus cu particule lungi de 1500 nm, dar rolul etiologic al acestiua nu af ost ns stabilit. n California i Mexic se consider c strierea lemnului (stem pitting) i spongiozitatea viei de vie reprezint aceeai boala, probabilitatea ca ambele tipuri de simptome s apar la aceleai plante fiind de peste 70 % (Teliz i colab., 1982). n Italia i restul europei mediteraniene, proporia vielor care prezint att simptome de strierea lemnului ct i de spongiozitaea scoarei este mai mic (Martelli, 1986). Rspndire, importan, istoric. Descris pentru prima dat n 1954 de W.B.Hewitt n California, boala a fost identificat ulterior n exic, Brazilia, Frana, Spania, Elveia, Italia, Iugoslavia, Bulgaria, Africa de Sud i Japonia, de regul cu ocazia testrii clonelor n cadrul sistemelor de producere a materialului sditor viticol liber de virusuri. Boala este puin rspndit n Italia i n alte ri ale bazinului mediteranean i nu a fost identificat pn acum n partea sudic a acestuia (Martelli, 1986). Boala are importan economic ridicat, ducnd la scderea produciei i micorarea duratei plantaiilor. n ara noastr, la testarea unui soi de Vitis vinifera cu privire la prezena infecilor virale, s-au obinut simptome asemntoare acestei boli pe indicatorul LN 33. Simptome. Cea mai mare parte a soiurilor de V. vinifera nu manifest simptome caracteristice acestei boli, plantele infectate exterioriznd numai o reducere a vigurozitii. n portaltoi americani, infecia este, de asemenea, latent. La unele soiuri de vi european, cum sunt Palomino, Petite Sirah, Mondeuse, Cabernet Franc, Gamay i LN 33, boala se manifest prin ntrzierea desfacerii mugurilor n primvar, maturarea neregulat a lemnului, formarea de lstari cu flexibilitate pronunat i apariia unor crpturi longitudinale n scoar, situate mai ales in partea bazal a acestora. n condiiile din California, se observ, de asemenea, distrugerea unor vrfuri ale lstarilor.Frunzele plantelor infectate sunt mai mici dect

19

normal. n cursul verii, suprafaa frunzelor soiurilor roii se nroete uniform i se rsucete spre faa inferioar. n aceast faz, boala poate fi deosebit de rsucirea frunzelor viei de vie, la care nroirea suprafeei limbului nu este uniform, esuturile din apropiera nervurilor frunzelor rsucite rmnnd verzi. Toamna, frunzele de pe plantele bolnave cad mai trziu dect n cazul vielor sntoase. n cazul hibridului LN 33, se observ, n diferite puncte din lungul lstarilor, o hipertrofie a scoarei , cu formarea de esuturi spongioase i prezena unor crpturi longitudinale caracteristice. n dreptul acestor umflturi, la suprafaa cilindrului lemnos, se observ depresiuni alungite caracteristice pentru strierea lemnului viei de vie (stem pitting). Plante gazd. Agentul patogen al acestei boli a fost identificat n natur i transmis experimental numai la soiuri i specii de Vitis. Transmitere, epidemiologie.Experimental, agentul patogen poate fi transmis prin altoire. n natur boala este deseminat prin multiplicarea materialului infectat. Spre deosebire de California i Eurpoa, unde nu sunt citate cazuri de extindere a boli n podgorii, n unele plantaii din Mexic, Teliz i colab (1982 ) au observat rspndirea ei pe cale natural. Prevenire i combatere. Principala msur de prevenire const n recoltarea corzilor pentru altoi i portaltoi numai de la plante mam care au dat reacie negativ la testarea lor pe indicatorul LN 33. Plantele sntoase din clonele total infectate pot fi obinute prin aplicarea unui tratament termic ndelungat (90 zile la 380C), urmat de altoirea mugurilor pe portaltoi sntoi, sau de detaarea i nrdcinarea separat a vrfurilor de cretere (Pop, 1988). 2.8. Cloroza infecioas i nroirea frunzelor viei de vie Grapevine infectious chlorosis and leaf reeding Agentul patogen, nrudiri, relaii. Boala se consider de natur viral, ns agentul ei cauzal nu a fost nc stabilit. n floemul plantelor infectate, s-au pus n eviden grupe de elemente vasculare de form eliptic sau tubular, asemntoare cu cele descrise n cazul plantelor de Abutilon infectate de variegarea infecioas (Vuittenez i Stocky,

20

1980). Simptomatologic, boala prezint unele asemnri cu rsucirea frunzelor i spongiozitatea scoarei (corky bark) ale viei de vie. Rspndire, importan, istoric. Pn n prezent, boala a fost identificat numai n Frana, unde infecii naturale s-au pus n eviden la soiurile Cinsaut droit i Riesling de Rin (Vuittenenez i Stocky,1980). Simptome. Agentul patogen al acestei boli s-a dovedit latent n unele soiuri de vi infectate pe cale natural, simptomele caracteristice aprnd la soiul Pinot Noir. Plantele acestui soi infectate prin altoire au talia mai redus dect exemplarele sntoase. n cursul verii, frunzele acestora devin uor clorotice, iar spre toamn se coloreaz n rou violet. Spre deosebire de rsucirea frunzelor, nroirea cuprinde toat suprafaa limbului, inclusiv esuturile din apropiereanervurilor. Din acest punct de vedere, boala se aseamn cu corky bark, de care se deosebete prin faptul c frunzele nroite cad toamna timpuriu. Pe elementele mai vechi de 2 ani, apar bombri i crpturi caracteristice, ducnd la exfolierea linear a scoarei, care devine foarte casant. Strugurii se matureaz mai devreme dect n cazul butucilor sntoi, ns producia vielor bolnave este mult redus. Plante gazd. Pn n prezent, agentul patogen al acestei boli a fost identificat numai la unele soiuride Vitis vinifera. Transmitere, epidemiologie. Experimental, boala a fost reprodus prin altoir. Unele soiuri infectate nemanifestnd simptome externe, agentul patogen este diseminatuor prin multiplicarea materialului infectat. Prevenire i combatere. Prevenirea rspndirii boliipoate fi asigurat prin recoltarea corzilor de altoi i portaltoi de la plante mam care au dat rezultate negativela testarea pe soiul Pinot Noir. Agentul patogen al acestei boli fiind termostabil, nu a putut fi eliminat din viele infectate prin aplicarea termoterapiei (Pop, 1988). 2.9. Clorozarea nervurilor indicatorului St. George Grapevine Fleck Agentul patogen, nrudiri, relaii. Agentul patogen al acestei boli nu a fost nc izolat i caracterizat. Se consider c boala este de natur viral, dat fiind posibilitatea reproducerii ei prin altoire.

21

n plantele infectate s-au pus n eviden particule izometrice asemntoare virusurilor, ns rolul lor etiologic nu a fost stabilit (Verderevskaja i colab., 1983). Conti i Milne (1985) pun n eviden n floemul plantelor de vi de vie afectate de rsucirea frunzelor i fleck un virus sferic de 30 nm n diametru, dar rolul acestuia n producerea bolilor respective nu a fost stabilit pa cale experimental. Rspndire, imporatan, istoric. Simptomele caracteristice acestei boli au fost considerate muli ani ca fcnd parte din sindromul scurt-nodrii viei de vie, ulterior demonstrndu-se c ele aparin unei boli de sine stttoare (Vuittenez, 1966; Hewitt i colab., 1972). Boala apare peste tot unde unde se cultiv din bazinul sudic al Mrii Mediterane i n S.U.A. n ara noastr, aproximativ jumtate din viele testate aparinnd soiurilor de V. vinifera i unor tipuri, s-au dovedit infecatate cu agentul patogen al acestei boli.(Pop, 1977; Pop, 1987) Simptome. Agentul patogen este latent n toate soiurile de V. vinifera precum i n toi portaltoii de vi american, excepie fcnd Vitis rupestris. La aceasta, simptomele caracteristice constau n clorozarea unor poriuni ale nervurilor de ordin infeior, vizibil mai ales pe frunzele din jumtatea superioar a lstarilor. Datorit frnrii creterii esuturilor afectate, suprafaa limbului este mai redus, slab gofrat sau ncreit, asimetric, ceva mai puin dinat i cu marginile uor curbate spre faa superioar. Dezvoltarea vegetativ a plantelor infetate este mai redus dect la martor. Plante gazd. Boala este cunoscut numai la genul Vitis . Plante indicatoare. Ca indicaotor se folosete V. rupestris soiul St. Gorge. La altoirea acestuia n verde pe plantele de testat, simptomele apar dup 1-2 luni, iar altoirea n uscat dup 4-5 luni. (Pop, 1973). Transmitere, epidemiologie. Experimental, agentul patogen poate fi transmis prin altoire. De asemenea, s-au obinut rezultate pozititve la transmiterea lui de la vi la vi prin cuscut.n natur, este diseminat prin propagarea materialului sditor infectat, neexistnd dovezi privind transmiterea lui prin alte mecanisme. Prevenire i combatere. Date fiind latena i frecvena ridicat a bolii, precum i existena de clone libere de agentul patogen n materialul culivat n ara noastr, este necesar prevenirea rspndirii ei prin recoltarea corzilor de altoi i portaltoi numai de la

22

plante mam care au dat rezultate negative la testarea lor pe indicatorul V. rupestris soiul St. Gorge. Clone de vi lebere de agentul patogen al nacestei boli din cele total infectate pot fi obinute prin termopatie sau prin cultivarea in vitro a vrfurilor de cretere (Savino i colab., 1985). 2.10. Mozaicul nervurian al viei de vie Grapevine vein mosaic

Agentul patogen, nrudiri, relaii. Boala se consider de natur viral, datorit specificului simptomelor i transmiterii prin altoire, ns agentul cauzal nu afost stabilit pa cale experimenntal. Prin cercetri de microscopie electronic, n celulele mezofilului plantelor infectate, s-au pus n eviden mnunchiuri de basonae flexuoase, aparinnd unui closterovirus al cror rol etiologic nu a fost nc stabilit (Vuittenez i Stocky, 1980). Diferite boli de tip mozaical descrise de via de vie n mai multe ri europene par s fie identice cu mozaicul nervurian. Afeciunea descris n Australia sub denumirea de summer mottle prezint, de asemenea, asemnri cu aceast boal. Rspndire, importan, istoric. Descris ca o boal de sine stttoare la nceput n Frana (Legin i Vuittenez, 1973) i studiat aprofundat n ara noastr (Pop, 1973), mozaicul nervurian al viei de vie este mult rspndit, boli similare fiind descrise i n R.F.Germania, Elveia, Ungaria i U.R.S.S.. n urma testelor efectuate de noi, s-a conststat c numeroase soiuri de Vitis vinifera, n special cele ce se gsesc de muli ani n cultur, sunt puternic sau total infectate cu agentul patogen al acestei boli, aceasta aprnd, de asemenea, la portaltoii de vi american (Pop, 1977). Clonele de vi obinute prin selecie clonal din soiurile vechi sunt, de asemenea, practic total infectate, n timp ce seleciile noi obinutes-au dovedit deloc s-au slab contaminate (Pop i colab. 1987). Dei nu se cunoate exact influena bolii asupra produciei, aceasta prezint importan economic datorit frecvenei ei ridicate. Simptome. Forma de manifestare i intensitatea simptomelor sunt mult influenate de faza de cretere i de condiiile climatice.

23

De regul, boala apare n cmp n ultima decad a lunii mai, simptomele fiind evidente n iunie i, parial, n iulie, dup care urmeaz o mascare mai mult sau mai puin accentuat. La Vitis vinifera, primele simptome constau, frercvent, n clorozarea nervurilor fine i a esuturilor alturate, se formeaz zone cloritice extinse pe sau ntre nervurile secundare, tabloul lund forma unui mozaic nervurian sau internervurian(Pl. 12, d). Mai trziu, clorozarea reelei nervurilor dispare, boala caracterizndu-se prin apariia de zone, pete, sau benzi, verzi deschis sau glbui, n lungul unor poriuni ale nervurilor princiapale, secundare i teriare. n ser, simptomele sunt mai evidente dect n cmp, unele soiuri manifestnd pete glbui, de dimensiuni apreciabile, asociate cu nervurile, altele numai o clorozare n verde- deschis a unor poriuni ale nervurilor. Plante gazd.Agentul patogen a fost identificat pn acum la soiuri de Vitis Vinifera i unele tipuri de portaltoi de vi american. Transmitere, epidemiologie. Experimental, boala poate fi transmis prin altoire. Diseminarea ei n natur este asigurat prin multiplicarea, comercializarea i plantarea materialului infectat. Procentul ridicat de infecie existent la soiurile din cultur se explic prin sintomele puin evidente i efectele patogene reduse ale bolii, care nu au permis aplicarea unei seleci conservative pe baza observaiior vizuale i nu au dus la autoeliminarea plantelor bolnave n faza de pepinier sau dup plantarea lor la locul definitiv. Prin testare, boala a fost identificat la unele forme ameliorate obinute relativ recent din smn i nc nealtoite pe portaltoi vegetativi. Prevenire i combatere. Principala msur de prevenire const n obinerea i plantarea materialului sditor liber de agentul patogen al acestei boli. n acest scop, selecile noi obinute din smn vor fi altoite pe portaltoi liberi de mozaic nervurian, fiind trecute apoi n sistemul naional de producere a materialului sditor liber de virusuri. n pepinierele de producie se vor planta numai vie obinute din corzi de altoi i portaltoi provenite de la plante mam care au dat rezultate negative la testarea lor pe soiurile indicatoare. Agentul patogen al mozaicului nervurian find rezistent la tratamentul termic, material liber de acesta din soiurile total infectate poate fi obinut prin meninerea

24

plantelor infectate la 38 C timp mai ndelungat urmat de nrdcinarea separat a vrfurilor de cretere, aplicarea microgrefri pe portaltoi sntoi, sau obinerea de plntue din celulele meristematice (Bass i Legin ,1981).

2.11. Necrozarea nervurilor viei de vie

Grapevine vein necrosis

Rspndire, importan, istoric. Boala a fost identificat n Frana (Legin i Vuittenez, 1973) i n cteva alte ri, considerndu-se ns c are o rspndire mai mult sau mai puin general, importana ei economic nefiind cunoscut. Simptome. Agentul patogen al necrozrii nervurilor viei de vie este latent in toate soiurile de vi european i n toi portaltoii de vi american, excepie fcnd Vitis rupestris x V.berlandieri 110 R. Viele infectate aparinnd acestui portaltoi au creterile mult reduse fa de normal. Semnelecaracteristice bolii constau n apariia unor necroze negricioase n lungul nervurilor, mai ales acelor de ordinul doi i trei, vizibile pe faa inferioar a limbului. La nceput acesta se observ la frunzele de la baza lstarilor, iar mai trziu i pe cele din partea superioar a acestora. n unele cazuri, boala duce la necrozarea i distrugerea lstarilor tineri sau a plantelor n ntregime. n condiii de ser, apar primvara, simptome de oc. Ele se caracterizeaz prin necrozarea crceilor i a majoritii lstarilor, n lungul lor obsernndu-se dungi de culoare brun i moartea vrfurilor de cretere. Majoritatea plantelor sunt total distruse, unele manifestnd ns nsntoire evident. Plante gazd. Vitis sp. Transmitere, epidemiologie. Experimental agentul patogen poate fi transmis prin altoire. n practic, este deseminat prin multiplicarea i plantarea materialului infectat, neexistnd observaii pe baza crora s se presupun rspndirea lui pe cale natural. Prevenire i combatere. Agentul patogen al necrozrii nervurilor viei de vie fiind latent n speciile de Vitis, boala poate fi prevenit prin recoltarea corzilor altoi i portaltoi de la plante mam care au dat rezultate negative la testarea lor pe indicatorul V. rupestrisX V. berlandieri 110R. Din clonele total infectate agentul patogen poate fi eliminat prin aplicarea unui tratament termic corespunztor (Saviro, 1985).

25

2.12. Enaiunea viei de vie

Grapevine Enation

Agentul patogen, nrudiri, relaii. Boala este considerat de natur viral, reproducerea simptomelor prin transmiteri artificiale fiind demonstrat de G.P. Martelli n 1966. Fiind adesea asociat cu virusul scurt-nodrii, unii autori au considerat prezena enaiunilor simptome specifice unei tulpini aparinnd acestiu virus. n alte cazuri, viusul scurt-nodrii nu a putut fi izolat din viele cu simptome caracteristice acestei boli, ceea ce nseamn c este produs de o alt energie. Rspndire, importan, istoric. Prezena enaiunilor la via de vie a fost menionat de mult timp, boala fiind cunoscut n numeroase ri europene (Italia, Frana Spania, Bulgaria) precum i n California, Venezuela, Africa de Sud i Australia, simptome similare fiind menionate i n ara noastr(Zinca i colab., 1979). Cu toate c are un efect negativ evident asupra produciei i longevitii butucilor, importana economic a bolii este redus, datorit frecvenei mici a butucilor infectai. Simptome. n primvar, dezmugurirea butucilor infectai este ntrziat, lstarii se dezvolt slab i cu ramificaii laterale plantele avnd un aspect tufos. Mai trziu, creterea i aspectul general al plantelor sunt normale. Caracteristic este prezena enaiunilor, care apar mai ales pe frunzele de la baza lstarilor. Acestea sunt perechi de proliferri lamelare, paralele, nalte de 2- 3 mm i lungi de 3-5 mm, drepte sau sinuoase, ce apar pe faa inferoar a limbului, majoritatea mergnd paralel cu nervurile principale. Uneori pot fi observate, de asemenea enaiuni mai mici sub form de cup, n spaiile internervuriene. Datorit creterilor neregulate, suprafaa frunzelor cu enaiuni poate fi puternic deformat, distorsionat, lobat i adnc crestat. Dei caracteristice, enaiunile nu constituie un simptom constant al bolii, ele neaprnd n toi anii i la toate soiurile. n absena lor, frunzlele de la baza lstarilor vielor infectate sunt mici, rotunjite, ngroate, rugoase i cu nervurile proeminente. Majoritatea frunzelor care prezint enaiuni numerosae cad n cursul verii, cele mai puin afectate avnd o dezvoltare normal. Poziia lstarilor este aplecat n jos fr ca acestea s manifeste o flexibilitate pronunat. Partea bazal a lstarilor este, de regul, ngroat, cu internodiile scurte, lite i deformate, prezentnd depresiuni, creste i protuberane longitudinale neregulate. La noduri, se poate

26

observa de asemenea proliferarea mugurilor, iar n lungul internodiilor se formeaz fisuri adnci evolund mai trziu n zone adncite eliptice de culoare brun. Plante gazd. Simptomele bolii au fost observate att la soiurile de Vitis vinifera ct i la tipurile de portaltoi de vi american. Transmitere, epidemiologie . n condiii experimentale, boala poate fi reprodus prin altoire, iar n natur este diseminat prin multiplicarea materialului infectat. Prevenire i combatere. Pentru prevenirea bolii, Martelli (1986) recomand obinerea vielor altoite folosind corzi de la plante mam supuse termoterapiei. 5.13. Alte virusuri Virusul ofilirii bobului la via de vie (broad bean wilt virus in grapevine) Virusul ptrii inelare negre a tomatelor la via de vie (tomato blank ring virus grapevine) Virusul ptrii inelare a zmeurului la via de vie (raspberry ringspot virus in grapevine) Virusul latent al ptrii inelare al cpunului la via de vie (straberry latent ringspot virus in grapevine) Virusul italian latent al anghinarei la via de vie (artichoke Italian lstent virus in grapevine ) Virusul mozaicului lucernei la via de vie (alfalfa mosaic virus in grapevine) CAP 3. BACTERII - BACTERIOZE Bacteriile sunt plante microscopice care pot fi parazite pe plantele de cultur. Bolile produse de bacterii (bacteriozele) au fost cunoscute nc din antichitate, fr ns s se cunoasc adevrata lor cauz. Abia n 1881, Burrill studiaz arsura merilor produs de Erwinia amylovora, denumit iniial Micrococcus amylovorus. ntemeietorul fitobacteriologiei este E. P. Smith, care din 1898 a efectuat cercetri sistematice asupra bacteriozelor. Ulterior, Appel, Burkholder, Izrailski au efectuat noi cercetri care au fundamentat noua disciplin - fitobacteriologia. Numrul de boli produse de bacterii este ridicat, multe dintre ele avnd o mare importan economic. n lucrarea lor recent, Severin i colab. (1985) descriu 69 de boli produse de bacterii la plante, dintre care dou boli sunt produse de rickeii. Simptome i diagnoz. Plantele sau esuturile afectate de bacterii patogene au un metabolism dereglat care se reflect adesea i n modificri anatomo-morfologice.

27

Dintre cele mai tipice pot fi semnalate urmtoarele : P t r i 1 e de pe frunze i alte organe, care apar datorit reducerii numrului de cloroplaste, care pot evolua de la simple decolorri difuze pn la necroze ale limbului. Hidrozele apar la nceputul procesului de mbolnvire i se datoresc mbibrii cu ap a locului de infecie, ca de exemplu ptarea unghiular a castraveilor (Pseudomonas lacrymans). Pigmentarea esuturilor apare datorit excesului de antociani sub form de pete de culoare roie, a excesului de melanin sub form de pete de culoare neagr etc. Necrozele sau arsurile sunt simptome grave ale multor boli bacteriene, cum sunt cele produse de : Xanthomonas campestris pv. phaseoli, Pseudomonus syringae pv. syringae, Pseudomonas syringae pv. tabaci ete. Putregaiurile moi apar n depozite, dar i n perioada de vegetaie i se ntlnesc pe organele de rezerv, pe tulpini erbacee crnoase Cercetrile mai noi au permis elaborarea de metode de diagnoz a bacteriozelor i pentru clasificarea i identificarea bacteriilor ca de exemplu : RFLP (restriction fragment length polymorphism) a ADN cromosomal sau din plasmide, PCR (polymerase chain reaction), determinarea (profilul) proteinelor i a acizilor grai, spectrometria de mas pirolitic etc. De asemenea, metodele tradiionale de identificare a bacteriilor, datorit truselor rapide, au fost revoluionate (nutriional profilling) (Stead, 1995). Morfologia i structura bacteriilor. Bacteriile, au dimensiuni microscopice de ordinul micronilor i sunt unicelulare. Aparatul vegetativ are dimensiuni de 0,6-4 m X 0,30,4 m, uneori pn la 50 m la bacteriile filamentoase. Bacteriile fitopatogene se prezint sub mai multe forme : B a c i 1 i (Bacillus, Bacterium), de forma unor bastonae, izolate sau n lanuri (Diplobacillus, Streptobacillus); Actinomicete (Actinomycetales), de forma unor filamente ramificate. . Celelalte forme morfologice ,cum ar fi coci, vibrioni, spirili i spirochete , nu se ntlnesc n patologia vegetal. Structura celulei bacteriene este destul de simpl, cuprinznd : membrana, citoplasm i nucleoidul. Membrana este alctuit dintr-un perete celular multistratificat la exterior i o membran citoplasmatic la interior. Peretele celular asigur rigiditatea nveliului bacteriei, aparatul vegetativ fiind un dermatoplast. . . Uneori, la exteriorul acesteia se formeaz o capsul de natur polizaharidic. La exteriorul membranei, bacteriile cu forme alungite au cili (flageli), prelungiri citoplasmatice care ies prin porii membranei Citoplasma este un sistem coloidal omogen, este transparent i vscoas, iar n interior conine pigmeni (galbeni, roii) i vacuole, nconjurate de lipoproteine, formnd tonoplastul. Nucleotidul, alctuit din fibre fine de acid dezoxiribonucleic (ADN), formeaz o zon mai dens i apare ca o granul sferic sau oval, dispus central. Constituia chimic a bacteriilor este bine studiat i cuprinde : ap 75-85% din greutatea total, fiind att n stare liber ct i legat ; substane minerale,23% din greutatea uscat, coninnd P, K, Na, Ca, S, CI, Fe .a. ; acizi nucleici, care sunt sub form de ADN n nucleoid i ARN n citoplasm ; proteinele reprezint 60% din greutatea uscat, avnd rol structural sau fiind, de fapt, enzime ; glucide ,12-18%; lipide 10% din greutatea uscat. Metabolismul celulei bacteriene fitopatogene are caracter heterotrof, folosind ca surs de hran esuturile plantelor vii (parazite), dar i moarte (saprofite). Cu ajutorul enzimelor i

28

n special al hidrolazelor descompun substanele organice, iar n urma activitii metabolice pot secreta toxine i antibiotice. Toxinele (endotoxine i exotoxine) contribuie la procesul de patogenez i determin apariia diferitelor simptome ale bolilor. n ciclul de via al bacteriilor fitopatogene se ntlnete, alturi de stadiul parazit, i cel saprofit. Din aceast cauz, ele pot fi cultivate pe medii nutritive de cultur, dar cu adugarea frecvent a unor substane pe care nu le pot sintetiza , numite factori de cretere. Bacteriile fitopatogene au caracter aerob i rar, facultativ anaerob. nmulirea bacteriilor. Capacitatea de nmulire a bacteriilor este deosebit de mare, celula crete, atinge mrimea proprie speciei, dup care se divide transversal. ntre dou diviziuni trece o perioad de circa 20 minute. Aceasta nseamn o capacitate mare de a duna i numai o serie de factori externi i interni pot frna procesul. Dac se cultiv o bacterie fitopatogen n mediu lichid, se pot distinge o serie de faze, care se regsesc n mare msur i n evoluia bacteriei n plant : faza latent (staionar), n care bacteria se adapteaz la mediu ; faza de cretere n volum, care se manifest prin mrirea dimensiunilor bacteriei i n care ncepe procesul diviziunii ; faza exponenial (logaritmic), caracterizat prin diviziunea i creterea constant a numrului de celule n progresie geometric ; n funcie de logaritmul numrului celulelor i n funcie de temperatur, creterea este linear ; faza de ncetinire a ritmului de cretere a numrului de celule, datorate epuizrii treptate a sursei de hran i acumulrii produilor de metabolism ; faza staionar, n care multiplicarea i moartea celulelor este n echilibru ; faza de declin, n care numrul celulelor care mor ntrece pe cel al celulelor care se formeaz ; faza final de declin n care cultura se autodistruge. n natur i n planta gazd bacteriile sunt supuse aciunilor agenilor fizici, chimici i biotici, care au un rol deosebit de mare n frnarea capacitii lor extraordinare de nmulire. Dintre agenii fizici pot fi amintii : presiunea osmotic a mediului, deshidratarea, temperaturile ridicate, radiaia solar (n special cea ultraviolet). Factorii chimici cuprind : excesul de bioxid de carbon i lipsa de oxigen, excesul de -NH4 n sol, toxinele proprii n exces, antibioticele etc. Factorii biotici au o importan deosebit i reprezint o surs pentru eventualele mijloace biologice de prevenire i combatere a bacteriozelor. La epidemii puternice apar bacteriofagii sau virusurile bacteriene care produc liza bacteriilor Multe plante slbatice i buruieni din culturi pot constitui o surs de infecie pentru multe bacterii fitopatogene polifage. Transmiterea secundar a bacteriilor se poate realiza, de asemenea, prin diferite ci, dintre care cele mai importante sunt : prin curenii de aer (anemochor), la unele bacterii odat cu particulele de praf sau exsudatele bacteriene uscate ; prin picturile de ap (hidrochor), de ploaie, cu apa de irigaie, scurgeri de suprafa etc. ; prin diferite animale (zoochor), cum ar fi de exemplu prin albinele care viziteaz florile de mr i rspndesc bacteria Erwinia amylovora sau psrile care pot vehicula, de asemenea, muli ageni patogeni bacterieni. Un rol epidemiologie important l au uneltele agricole, mainile, ambalajele, sforile i srma de spalier etc. pentru meninerea i transmiterea bacteriilor.

29

Cap4. Bacterii i boli provocate de acestea n cultura viei de vie Bacteriozele plantelor, la fel cu cele de la animale, sunt boli produse de bacterii. Bacterile care produc boli la plante sunt organisme unicelurale heterotrofe, parazite facultative, cu lungimea de 0,6-4 microni i nlimea de 0,3-1,4 microni, ele se pot vedea la microscop. Majoritatea au forma de bastonae cu excepia actinomicetelor, care au forma filamentoas. O celula bacteriana este construit, n general din protoplasm (care cuprinde citoplasma, materialul celular, ribozomii i diferite incluziuni i vacuole), membrana citoplasmatic, membrana celural, cilii i capsula. Bacteriile pot fi izolate formnd colonii. 4.1. Cancerul bacterian al viei de vie Agrobacterium tumefaciens (E. F. Smith et Towns.) Conn. Cancerul bacterian la plante este cunoscut nc din antichitate , ntlnindu-se la un numr foarte mare de plante, la care produc pagube importante. n tara noastr primele relatri despre existena boli au fost fcute de Tr. Svulescu n anul 1929 Boala este rspndit n toate podgoriile i centrele viticole din tara noastr, fiind semnalat la o serie de soiuri foarte valoroase, sensibile la atac, mai ales n zonele unde se nregistreaz frecvent temperaturi minime care depesc pragul de rezisten la ger a acestora .Uni autori susin c boala nu este periculoas i nu are urmri grave asupra plantailor viticole i produciei iar ali consider c boala este foarte grav, producnd pagube att n pepiniere ct i n plantaii. n general se consider c cele mai mari pagube se ntlnesc n pepiniere si plantaiile tinere ,n primi ani de la plantare, cnd multe plante pier. n plantaiile de peste 8-10 ani, pagubele sunt uneori numai in regiunile cu temperaturi foarte sczute n timpul iernii. n aceste zone, mai ales la formele nalte de vi de vie, care nu se ngroap, gerul produce leziuni n care bacteria se instaleaz i determin moarte braelor mai btrne, debilitarea i chiar uscarea butucilor. Simptomatologia. La via de vie, cancerul bacterian se manifest sub forma unor tumori sau gale, de forme i dimensiuni diferite. La viele tinere, tumorile apar la baza portaltoiului, la zona de calusare i nrdcinare i la punctul de altoire. Mai trziu apar

30

pe butuc, pe care an de an se fac tieri de toamn sau primvar. Tumorile la nceput sunt mici, albicioase, spongioase, apoi cresc i se ntresc, devenind brune sau brunnchis, cu o consisten spongioas dar ntrit, cu aspect buretos. Se pot ntlni dou tipuri de simptome : cancerul popiu-zis, care se manifest prin tumori bine conturate, sferice sau ovoidale i ariceala , care apare numai pe braele mai vechi de un an i pe tulpina vielor la formele nalte. Ariceala se prezint sub form de proliferri continue pe lungimea braului sau tulpinii, formate din aglomerri de gale canceroase mai mici (tumorete), pe o lungime mai mare sau mai mic a coardei. Majoritatea tumorilor putrezesc la sfritul fiecrui an i cad, n anul viitor aprnd altele noi. Caracteristic pentru cancerul bacterian este apariia de tumori secundare sau metastaze succesive, la o distan oarecare de tumora primar. Celulele care alctuiesc esutul canceros sunt mult mrite, fipertrofiate ,alungite sau uneori foarte mici . Ele au vacuole mici, sunt bogate n protoplasm i prezint caracteristici ale celulelor meristematice. Nucleii celulelor canceroase sunt mult mrii sau mici, deformai si conin un numr de cromozomi. Dac atacul se continu mai muli ani consecutiv, planta piere n ntregime. Ariceala poate aprea frecvent pe coardele rsucite n timpul cercuitului sau dup vnturi puternice. Tumorile se formeaz pe toate prile aeriene multianuale ale butucului i cu totul excepional pe unele rdcini mai groase, situate la mic adncime n sol. Viele cancerate sunt debile, frunzele sunt slab colorate, lemnul se matureaz

31

insuficient, iar la soiurile cu struguri roi frunzele se coloreaz prematur n rou .

Foto 11: Agrobacterium tumefaciens Agentul patogen. Este reprezentat de bacteria Agrobacterium Tumefaciens (E.F.Smith et Towns.) Conn., ncreng. Bacteriophyta cl. Schizomycetes bacteriile se gsesc n ce mai mare parte la exteriorul tumorii, printre celulele epidermice. Unele tulpini virulente (Art) au un spectru mai larg de gazde, altele sunt specializate numai pe anumite specii de plante. Exist mai multe biotipuri de tulpini, n cadrul crora exist tulpini virulente (Art) i tulpini avirulente (Arr) . Bacteriile au cel mai frecvent form de bastonae izolate n lanuri scurte. Pe mediu gelozat cresc sub form de colonii circulare, mici netede, strlucitoare transparente, mucilaginoase. Cultivate timp

32

ndelungat pe medii cu diferii aminoacizi, bacterile pot sa-i piard parial sau total virulena. Agentul patogen produce tumori canceroase prin emiterea unui principiu cancerigen i a unei substane stimulatoare de cretere (acidul naftil acetic). n anul 1972 , New i Kerr au descris o bacteriocin produs de Arr tulpina 84 denumit Agrocina 84 cu care s-au obtinut rezultate eficiente n combatere cancerului. La noi n ar N. Zinca obine rezultate bune n combaterea cancerului bacterian folosind biopreparatul Biozin pe baz de tulpina 12 Arr . Din datele publicate reiese ca dezvoltarea tumorilor i aricelei n ultimi ani a fost influenat de factori ecologici atingnd o frecven de 10-40 %la soiurile cele mai sensibile, situate pe terenuri grele, umede i reci cum sunt cele de la Valea clugreasc ,Lunca Oltului, Megidia, Cernavod i alte localiti, pe cnd pe versani bine expui la soare ai dealurilor de la Niculiel, Dealu Mare, tefneti, Trnave frecvena vielor cu cancer sa meninut sub 3 % Agentul patogen se transmite prin sol, n special prin solurile nisipoase unde i pstreaz patogenitatea pn la 3 ani. Bacteria fiind polifag, se poate transmite prin numeroase plante din cauza aceasta solurile plantailor defriate trebuie meninute curate de buruieni. Monocultura n pepiniere face ca o mare mas de rdcini infectate sa perpetueze de la an la an atacul acestei bacterii. De asemenea bacteriile se pot transmite uor prin instalaiile de forare a vielor, dac acestea nu sunt dezinfectate odat cu butai. Combatere. Deoarece agentul patogen este un parazit care ptrunde n interiorul esuturilor plantei gazd, odat cu infecia produs combaterea se face foarte greu. Se recomand o riguroas selecie fitosanitar, interzicnd-se recoltarea materialului pentru altoit din plantaiile bolnave. Butuci izolai suspeci de cancer se vor defria.Uneltele folosite la tiere vor fi dezinfectate prin mbiere intr-o soluie de formalin 3-5 %. Butai altoi i portaltoi vor fi mbiai 15-30 minute in soluie de Captan 0,2 % sau sulfat de cupru 2 % . Solul din pepinierele unde an de an se planteaz vie, neefectundu-se asolamentul de 4-5 ani va fi dezinfectat cu sulfat de cupru 2-3 t la ha sau Captan 500 kg la ha, plantarea fcndu-se dup 15-20 zile. La scoatere din biloane viele atacate vor fi arse. Viele tinere plantate la loc definitiv, care prezint simptome de atac vor fi scoase i arse, gropile dezinfectndu-se cu 8-10 l de formalin n concentraie de 2-3 %. n

33

plantaiile btrne, viele care prezint tumori sau ariceal vor fi curite, uscturile vor fi arse pe loc. Dup curire, naintea porniri n vegetaie, coardele braele i n special butuci vor fi stropii pn la mbiere cu sulf de cupru 4-5 %. S-au obinut rezultate foarte bune ungnd toate rnile fcute cu ocazia tierilor, cu o past de lanolin adus la vscozitatea dorit cu ulei de parafin la care se adaug Criptodin 2%. Prin ndeprtarea tumorilor, butucii nu sunt eliberai de infecie n urma tratamentelor anuale, totui plantele pornesc mai bine n vegetaie, vigurozitatea vielor este mbuntit i producia creste. Aceast lucrare trebuie nsoit ntodeauna de aplicarea unei agrotehnici superioare. Se vor lua msuri eficiente de protejare a plantailor mpotriva gerurilor, care sunt principalul factor de declanare a atacului de cancer bacterian. Butai portaltoi i coardele altoi vor fi mbiate timp de 2-5 ore ntr-o soluie de Chinosol n concentraie de 0,5 %. Tratamentele biologice cu biopreparatul Biozin dau rezultate bune in combaterea cancerului bacterian al viei de vie, aceast metod, atunci cnd este aplicat mpreun cu celelalte metode i cu o agrotehnic corespunztoare, duce la reducerea simitoare a atacului i la obinerea unor producii superioare (Miric i Afrodita Miric, 1986). 4.2. Boala lui Pierce la via de vie Pierces disease Boala este prezent n sudul SUA, n unele zone fiind endemic, nici o vi nu se poate cultiva din aceast cauz. Plantele infectate uneori mor n cteva luni, alteori triesc mai muli ani. Simptome. Pe frunze, la nceput apare o uscare, arsur, a marginei, bine delimitat de restul limbului care rmne verde. Arsura esuturilor nainteaz nspre centrul limbului care, cu timpul se brunific aproape n ntregime, iar mai trziu frunzele afectate cad, lsnd peiolii ataai de lstari. Inflorescenele plantelor atacate se opresc din cretere, se vetejesc i se usuc. Pe lstari se dezvolt pete brune. n anul urmtor, plantele infectate, primvara pornesc n vegetaie mai trziu, cu creteri slabe, ulterior pe frunze i inflorescene apar simptomele din primul an. Intern formaiunile lemnoase anuale prezint striuri galbene sau brune care se vd uor n seciuni longitudinale sau transversale. Aceste striuri sunt formate din vase xilemice umplute cu gom i tiloze.

34

Agentul patogen. Bacteria este de tipul richeii, cu dimensiuni de 1,0-3,2 x 0,40,5 um, avnd peretele celular ncreit tipic ca la richeii. Bacteria se dezvolt bogat n vasele xilemice recent s-a reuit cultivarea ei pe medii nutritive. Epidemiologie. Patogenul este transmis prin altoire i de cicade aparinnd mai multor specii, mai comune fiind Carneocephala i Draeculacephala. Cicadele achiziioneaz patogenul prin hrnire timp de circa 12 ore pe plantele infectate i l pot transmite continuu plantelor sntoase n tot restul vieii lor. Prezena patogenului ntr-o plant este determinat prin simptomele bolii cnd acestea apar sau prin transmitere pe plante indicator, fie prin altoire fie prin insecte vectoare. Soiurile de vi folosite de obicei ca indicatori sunt Carigane, Emperor i Palomino (Miric i Afrodita Miric, 1986).

BIBLIOGRAFIE 1. Baicu T., Tatiana Eugenia Sean- Fitopatologie agricol. Ed. CERES, Bucureti, 1996. 2. EUGEN ULEA FITOPATOLOGIE- ED. ION IONESCU DE LA BRAD IASI 2003 3. POP I.V. VIRUSURILE SI VIROZELE PLANTELOR ED. CERES BUCURESTI 1975 4. www.facultateregielive.com

35