LABORATOR DE CICLURI BIO-GEO-CHIMICE HIDROLIZA ENZIMATIC A AMIDONULUI INFLUENTA RAPORTULUI ENZIMA SUBSTRAT ASUPRA VITEZEI DE REACIE 1.

INTRODUCERE Reaciile de hidroliz ale produilor macromoleculari naturali pot fi conduse att sub control enzimatic ct i mineral, de regul n prezena acizilor. Hidroliza amidonului este una dintre cele mai importante reacii industriale de prelucrare a produilor naturali. Una dintre aplicaiile cele mai importante const n obinerea alcoolului etilic prin fermentaia amidonului, conform lanului de reacii de mai jos. midonul este o polizaharid natural foarte rspndit compus din dou tipuri de macromolecul! amilaza " macromolecula cu structur liniar i amilopectina " cu structur ramificat. #atorit gradului diferit de polimerizare i a structurilor diferite, hidroliza enzimatic a acestor componente ale amidonului este diferit, astfel amilaza se descompune pn la glucozo"$ fosfat, conform schemei de mai jos, n timp ce amilopectina se descompune numai pn la de%trin & o dizaharid'. (ermentaia enzimatic a glucozei decurge dup acelai mecanism de fosforilare cu formarea intermediar a acidului piru)ic, similar glicolizei, acidul piru)ic se decarbo%ilea% la aldehid acetic, dar n acest caz aldehida se reduce la alcool nu se o%ideaz la *+,.

(ermentaiile alcoolice pariale produse de ciuperci i bacterii

au

importan n descompunerea substanelor organice moarte din sol. (ermentaia alcoolic are aplicaii practice la fabricarea drojdiei de bere, a

Hidro i!" #$!i%"&i'( " "%ido$) )i

LABORATOR DE CICLURI BIO-GEO-CHIMICE pinii, a buturilor alcoolice. -ilanul energetic al fermentaiei alcoolice este slab. #egradarea unei molecule de glucoz produce numai dou molecule de ./ i rezult 00 1cal. *. SCOPUL 2e e)ideniaz influena concentraiei enzimei asupra )itezei de reacie la hidroliza enzimatic a amidonului, e%primat prin timpul de hidroliz. +. MATERIALE SI MOD DE LUCRU M"&#ri" # soluie amidon, soluie H*l 3,45, termostat. Mod d# )'r) 2e numeroteaz cinci eprubete 2e introduc n cele cinci eprubete soluiile corespunztoare conform tabelului de mai jos
6umarul eprubetelor , 0 7 38 3 38 3 38 3

eprubete, soluie iod,

2olutii midon 49 &m:' cid clorhidric 3,46 &m:' ;nzim amilaz, <: =od picturi

4 3.8 3

8 38 30

,3

43

"

"

eprubetele se introduc ntr"un pahar berzelius n incubator la 83>*. din cinci n cinci minute se agit eprubetele i se noteaz culoarea soluiei.

Hidro i!" #$!i%"&i'( " "%ido$) )i

LABORATOR DE CICLURI BIO-GEO-CHIMICE ,. PRELUCRAREA REZULTATELOR pro%imnd cinetica reaciei la o reacie de ordinul 4 se determin )iteza de reacie astfel
dc dt

=k

2e calculeaz cantitatea de amidon iniial. .impul de reacie se consider inter)alul de timp dup care soluia se decoloreaz complet, adic s"a descompus ntreaga cantitate de amidon.

2e reprezint grafic )ariaia )itezei de reacie cu concentraia enzimei, e%primat ca raportul dintre cantitatea de amidon i cea de amilaz din fiecare eprubet.

2e compar )iteza reaciei catalizate enzimatic cu cea catalizat cu acid clorhidric.

Hidro i!" #$!i%"&i'( " "%ido$) )i