GENETICA-Grupat Pe Subiecte de Examen

.........................................................................................................................................................................
GENETIC-CURS
CAPITOLUL I Genetica tiina ereditii i variabilitii r!ani"#el r vii $-%E&INI'IE (I O)IECTUL %E STU%IU AL GENETICII Genetica este tiina biologic a crei obiect de studiu l constituie ereditatea i variabilitatea organismelor, stabilind mecanismele care asigur conservarea informaiei genetice precum i cele ale modificrii ereditare. Anul apariiei geneticii ca tiin este 1865, cnd !" #! $"%&"' a emis primele legi ale ereditii, redescoperite n 1()) de *+ # de ,!-"., /#!!"%. i 0./*"!$A/1 23#0"4, 1((15. &enumirea de genetic a fost introdus de 3A0".#% la /ongresul de genetic din anul 1()6. Ereditatea, ca obiect de studiu a geneticii repre6int nsuirea descendenilor de a moteni de la prini caracteristici asemntoare. Aceast nsuire asigur stabilitatea caracterelor de7a lungul generaiilor, continuitatea biologic a indivi6ilor n cadrul speciei de la o generaie la alta. 8otenialitatea reali6rii acestui caracter se face prin intermediul genelor. Gena este definit ca particula material a ereditii locali6at n cromo6om i care condiionea6 formarea uneia sau mai multor caractere sau nsuiri. 0otalitatea genelor unui organism viu 2cele nucleare5 repre6int genotipul. 0otalitatea genelor din cadrul unui set 9aploid de cromo6omi, transmise ca o unitate de la unul din prini repre6int genomul. :elul de a fi a unui individ ca mod de manifestare a genotipului, n interaciune cu condiiile de mediu repre6int fenotipul. %oiunile de genotip i fenotip au fost introduse de ;#*A%."% n 1()( 28A%:-', 1(8)5. Variabilitatea ca cel de al doilea obiect de studiu a geneticii, repre6int nsuirea organismelor vii, cu diferite grade de nrudire, de a se deosebi ntre ele. <n natur nu e=ist doi indivi6i identici. /9iar i gemenii uniovulari nu sunt identici din punct de vedere genetic, ei manifestnd profile imunologice diferite, constituite n primele ase luni de via 23#0"4, 1((15. ,ariabilitatea poate fi ereditar i neereditar. a* Variabilitatea ereditar se transmite n descenden, de la prini la urmai i are ca surs recombinarea genelor n procesul de formare a gameilor i fecundare 2variabilitate recombinativ5, sau prin modificarea materialului genetic sub aciunea unor factori mutageni 2variabilitate mutaional5. b* Variabilitatea neereditar este determinat e=clusiv de influena condiiilor de mediu i cu toate c nu se transmite n descendeni, face parte din aspectul fenotipic al unui anumit individ. ,ariabilitatea fenotipic, sau diferenele constatate ntre indivi6i are dou surse primare i inseparabile de variabilitate> variabilitatea genotipic i variabilitatea indus de mediu sau ecologic. Aceast
1 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
relaie poate fi e=emplificat prin formula ,8?, @,", n care ,8 repre6int variabilitatea fenotipicA , repre6int variabilitatea genetic i ," variabilitatea ecologic. + - SCOPUL (I I,PORTAN'A GENETICII ,ariabilitatea genotipic sau ereditar are cel mai important rol n evoluie precum i n munca de ameliorare. &iversitatea genetic a organismelor vii a permis ca prin intermediul seleciei naturale sau artificiale s fie promovate, n generaiile succesive, doar genotipurile cel mai bine adaptate condiiilor de mediu, sau a celor ce rspund obiectivelor ameliorrii. &atorit de6ideratelor pre6entate, genetica este considerat o adevrat plac turnant n cadrul tiinelor biologice, fiind esenial pentru toi cei care studia6 viaa plantelor, a animalelor sau microorganismelor. "a ocup o po6iie central n diverse sectoare ale activitii umane 2agricultur, alimentaie, medicin, ecologie .a.5 2"lena 0B$AC, D)))5. 8entru creterea produciei agricole apare necesitatea ameliorrii materialului biologic e=istent. #rice program de ameliorare necesit un studiu a determinismului genetic a materialului iniial pentru stabilirea metodei de ameliorare. enetica constituie de fapt ba6a teoretic a ameliorrii plantelor. &escoperirile din domeniul geneticii moleculare i a ingineriei genetice sunt n pre6ent tot mai utile, fiind utili6ate n elucidarea unor probleme de interes maEor. #biectivul principal al ingineriei genetice const n modificarea genomului unor plante sau animale prin introducerea unor gene sau a unor fragmente de A&% de la o celul donatoare la una receptoare, obinndu7se specii transgenice. 8e aceast cale, la plante s7au obinut genotipuri re6istente la boli i duntori, la ierbicide, pesticide, stresuri climatice .a. 8rin intermediul ingineriei genetice au fost obinute surse bacteriene capabile de a produce proteine specifice mamiferelor, cum ar fi insulina, interferonul, 9ormonul de cretere .a. &e asemenea prin aplicarea metodelor genetice se pot contracara acumulrilor tarelor genetice 2caractere nefavorabile patogenetice .a.5. <n ceea ce privete genetica forestier, ea se individuali6ea6 n primul rnd datorit naturii aparte a plantelor lemnoase din pduri, cu deosebire, arborii. /a plante slbatice, e=trem de vec9i, policarpice, foarte longevive, de dimensiuni mari, arborii dein un grad avansat de 9etero6igoie i mari re6erve de variabilitate genetic, se diferenia6 prin ponderea mare a caracterelor cantitative supuse unui control poligenic aditiv, convieuind adeseori n ntinse comuniti 2populaii5 naturale, politipice, polimorfe, n care panmi=ia se manifest cu deosebit intensitate, iar mecanismele generale de 9omeosta6ie genetic sunt e=trem de perfecionate 2.0B%".+, 1(8D5. - - RA,URILE GENETICII (I ,ETO%ELE %E CERCETARE UTILI.ATE
D ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
Genetica formal sau genetica clasic, studia6 legile ereditii descoperite de !" #! $"%&"' 2transmiterea n descenden a caracterelor determinate de gene plasate pe cromo6omi diferii5 i 0*#$A. *+%0 $#! A% i colaboratorii si 2transmiterea n descenden a caracterelor determinate de gene plasate pe aceiai perec9e de cromo6omi5. <n studiul mecanismelor ereditii genetica a utili6at metode de lucru i ba6e de date oferite de alte tiine. &in mbinarea acestora, au luat natere numeroase ramuri ale geneticii, dintre care menionm> Citogenetica, care studia6 structurile celulare cu rol genetic. Radiogenetica, studia6 efectele radiaiilor asupra ba6ei materiale a ereditii. Genetica molecular, studia6 ereditatea la nivel molecular, bioc9imic. Genetica populaiilor, studia6 structura genetic a organismelor vii, precum i factorii care modific structura populaiilor. Genetica ecologic, studia6 procesele de adaptare a populaiilor naturale la mediul lor de via. Genetica cantitativ, studia6 legitatea variabilitii caracterelor, prin aplicarea metodelor matematice la studiul variabilitii. Genetica uman, cu rol maEor n prevenirea, combaterea i tratarea bolilor ereditare la om. enetica fiind o disciplin e=perimental, de6voltarea ei a fost condiionat de metodele i posibilitile de cercetare proprii, dar i de altele specifice altor discipline, de care genetica se poate folosi pentru nelegerea i e=plicarea legitilor i fenomenelor sale. Metoda genealogic, const n nregistrarea i anali6a datelor privind relaiile dintre indivi6i ntr7o succesiune de generaii. 8rin utili6area acestei metode se poate stabili modul de transmitere ereditar a caracterelor, precum i modul de manifestare. Metoda hibridologic, const n ncruciarea unor organisme cu ereditate diferit i anali6a statistic7matematic a motenirii caracterelor la urmai. 8rin intermediul ei se poate urmri modul de transmitere ereditar a caracterelor, a aciunii genelor i a grupelor de linFage ale acestora .a. /u aEutorul acestei metode au fost descoperite primele legi ale ereditii de ctre . $"%&"' i 0.*. $#! A%. Metoda biometric, const n studierea diferitelor caracteristici cantitative i stabilirea corelaiilor dintre diferite caractere. Aceast metod ofer informaii asupra variabilitii diferitelor caractere i corelaiilor e=istente ntre ele, gradul de meninere i mbuntirea caracterelor i a nsuirilor obinute prin selecie .a. Metoda citogenetic, este utili6at pentru studiul structurilor celulare cu rol genetic, cu aEutorul aparaturii de laborator specifice 2microscoape, te9nici cromatografice, difracie cu ra6e G .a.5. /u aEutorul ei s7au studiat caracteristicile cromo6omilor i a altor structuri cu rol genetic.
H ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
Metoda radiaiilor, permite utili6area diferitelor tipuri de radiaii pentru modificarea ereditii organismelor. Metode biochimice i biofizice, contribuie la cunoaterea structurii materialului genetic la nivel molecular. $aterialul genetic utili6at, n general pentru studiile de genetic clasic trebuie s pre6inte urmtoarele particulariti> 7 s aib caractere bine conturate, uor de urmrit 2marFeri genetici5A 7 s aib ciclul scurt de de6voltareA 7 s permit obinerea unui numr mare de descendeniA 7 s posede un numr relativ mic de cromo6omiA 7 s fie acceptabil la aciunea factorilor mutageniA 7 s nu fie foarte scump i s fie relativ uor de ntreinut. /a teste genetice ce ndeplinesc condiiile de mai sus, se poate utili6a> Drosophila, Neurospora, Escherichia, diferite virusuri, mai ales fagi, porumbul, bobul .a. /- SCURT ISTORIC A %E.0OLTRII GENETICII <n anul 1865, !" #! $"%&"' a comunicat re6ultatul cercetrilor sale privind 9ibridarea la plante, marcnd nceputurile geneticii, tiina ereditii. "l a fost primul naturalist care a aplicat cu succes teoria probabilitilor, pentru a e=plica fenomenul de dominan i segregare a factorilor ereditari la 9ibri6i, fiind considerat unul dintre fondatorii geneticii ca tiin. /ercetrile lui $"%&"' au rmas necunoscute pn n 1()), cnd au fost redescoperite de *+ # de ,!-"., /#!!"%. i 0./*"!$A/1, simultan i independent unul de cellalt, moment care marc9ea6 cu adevrat apariia geneticii ca tiin. 0rebuie menionat faptul, c problemele legate de genetic i transmiterea ereditar a caracterelor au preocupat din totdeauna omenirea. 8rimele dove6i scrise privind cunotinele despre ereditate ale civili6aiilor antice, au fost ntlnite la popoarele asiro7caldeene din #rientul miElociu. <n $esopotamia, la "lam, a fost descoperit o tbli de piatr cu o vec9ime de 6.))) de ani, cu pedigre7ul capului i copitei la cinci generaii de cai. <n recia Antic filo6ofii greci ncercau s gseasc rspuns la nterbarea Ide ce copii seamn cu priniiJ, sau care sunt cau6ele bolilor motenite. "i au emis aa numita teorie preformi t prin care e=plicau c noul organism este preformat n gamei, spermato6oid 2teoria spermatocist5, sau n ovul 2teoria ovocist5. +n repre6entant de seam a teoriei spermatociste a fost filo6oful A%AGA #!A. <n "vul $ediu, ideile gnditorilor greci au fost perpetuate, fr ns a se aduce noi argumente sau supo6iii referitoare la problemele ereditii. /ercetrile legate de genetic iau o amploare deosebit ncepnd din secolul al 1(7 lea, cnd diferii biologi au elaborat o serie de ipote6e teoretice, speculative despre mecanismele ereditii. <n toate aceste teorii se susine c motenirea caracterelor se
K ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
reali6ea6 prin intermediul unor particule care migrea6 din toate organele corpului ctre celulele se=uale, unde se activea6 i se transmit, dup fecundare, n descendeni. &ei au un principiu comun privind transmiterea ereditar a caracterelor, poart denumirea dat de autorii lor> 7 teoria pan permiei sau teoria pangenezei, elaborat de &A!L-% 7 teoria pla tidulelor, elaborat de *A"/1"'A 7 teoria micelar, elaborat de %M "'-A 7 teoria pangenelor, elaborat de *. de ,!-".. <n acelai secol, L#':: i 3A"! au formulat teoria epigenetic, dup care noul organism se formea6 n momentul fecundrii, iar L"-.$A%% teoria pla mei germinative care a stabilit e=perimental c nc de la primele divi6iuni ale 6igotului are loc separarea liniei germinale 2care va da natere la glandele se=uale5, de linia somatic 2din care se vor forma celelalte organe ale embrionului i ale adultului5. -mportana acestor teorii re6id din faptul c dei speculative, au cutat s gseasc un suport material fenomenului ereditii. 0oate se caracteri6ea6 prin aceea c admiteau dualitatea germen ! oma n sensul c organismul oricrui individ este alctuit din dou pri distincte, independente una de alta, germenul sau pla ma germinativ, rspun6toare de pstrarea caracterelor ereditare i transmiterea lor i oma, restul corpului. &up fecundare, germenul se separ de som i nu poate fi influenat de condiiile de mediu, urmnd a fi integrat n gamei 23#0"4, 1((15. "eoria factorilor ereditari formulat de $"%&"' 218655, constituie prima teorie tiinific a ereditii, legile formulate de el fiind valabile i ast6i. /onform acestei teorii, caracterele unui organism sunt determinate de factori ereditari grupai n perec9i, care n momentul formrii gameilor se separ, fiecare gamet cuprin6nd un singur factor, factori ce se reunesc n moduri diferite n momentul fecundrii, conducnd, ca urmare a relaiilor de dominan i recesivitate ce se stabilesc ntre ei, la apariia segregrii 2diferenierea caracterelor parentale n anumite proporii5 23#0"4, 1((15. <n primii ani ai secolului D), 3A0".#% descoper c legile mendeliene au valabilitate i n lumea animal, iar n 1()8 tot el este acela care denumete noua tiin biologic ce se ocup de studiul ereditii, genetica 2dup !A-/+, 1(8)5. +lterior, ;#*A%."% a emis noiunea de genotip, prin care se nelege ba6a ereditar a organismelor care cuprinde totalitatea factorilor ereditari 2gene5 i fenotip, prin care se nelege totalitatea caracterelor i nsuirilor organismului. <n 1()6, a introdus n tiin noiunea de gen. /u toate c n urma cercetrilor efectuate de *"!0L- n 18N5 i apoi de :'"$$-% 2188D5i alii, au fost descoperii cromozomii, denumii astfel de LA'&"O"! 218885, legtura dintre acetia i factorii mendelieni nu s7a fcut dect dup 1()) n urma cercetrilor lui .+00#% i 3#,"!--, care n 1()D au formulat ipote6a conform creia factorii ereditari se regsesc n cromo6omi, fiecare specie avnd un anumit
5 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
numr de cromo6omi, cu o anumit form i mrime 2dup !A-/+, 1(8)5. Aceast idee a fost preluat de 0. $#! A% i colaboratorii si, care n primele decenii ale secolului D), au pus ba6ele geneticii clasice elabornd teoria cromozomal a ereditii. <n urma cercetrilor fcute de 3A0".#% i 8+%%"0 n 1()6, acetia au descoperit fenomenul de linFage. $#! A%, fcnd o sinte6 a cunotinelor acumulate, consider c genele sunt plasate n lungul cromo6omului, liniar, transmindu7se mpreun cu cromo6omii n procesul formrii gameilor, iar ntre cromo6omii perec9i, omologi, provenii de la cei doi prini, pot avea loc sc9imburi reciproce de gene 2fenomenul de crossing7over5. $ai tr6iu, A,"!O, $c'"#& i $c/A!0O 21(KK5 au demonstrat faptul c A&%7 ul 2acidul de6o=iribonucleic5, din care sunt constituii n mare parte cromo6omii, este purttorul material al ereditii. &up cel de al doilea !6boi $ondial, s7au de6voltat considerabil cercetrile privind materialul genetic la nivel molecular. 8rintre cele mai importante reali6ri ale geneticii moleculare pot fi citate, descoperirea fenomenului de transformare la bacterii cu aEutorul A&% 2A,"!O i colab., 1(KK5, descoperirea structurii macromoleculei de A%&, desc9i6nd calea cercetrilor privind aci6ii nucleici 2LA0.#%, /!-/1 i L-'1-%., 1(5H5, reali6area biosinte6ei artificiale a A!% 2 !+%3"! 7$A%A # i #/*#A, 1(555 i A&% 21#!%3"! , 1(565, descoperirea faptului c la ribovirusuri A!%7ul constituie materialul genetic n care se gsete codificat informaia genetic 2:!A"%1"' i colab., 1(565, descifrarea codului genetic 2#/*#A, %-!"%3"! i alii, 1(6171(6N5, descoperirea reglaEului genetic 2;A/#3 i $#%#&, 1(615, sinte6a artificial a genei 21*#!A%A, 1(N)5 .a. &up 1(N) s7au de6voltat considerabil cercetrile de inginerie genetic care i propune> i6olarea i sinte6a artificial a genelor, transferul intraspecific i interspecific a genelor, de la organisme procariote la cele eucariote i invers, manipularea materialului genetic la nivel celular prin reali6area de 9aploi6i prin androgene6 e=perimental la plante, crearea de microorganisme capabile s sinteti6e6e aminoaci6i, proteine, 9ormoni, vitamine, antibiotice .a. <n 1(81, 3"! i -'3"!0, au reuit s sinteti6e6e in vitro i s construiasc o molecul de A&%7recombinant, prin care s7au demarat spectaculos cercetrile n domeniul ingineriei genetice i ale biote9nologiilor. &intre reali6rile spectaculoase, n acest domeniu, din ultima Eumtate a secolului D), merit menionate> 1(51 7 primul transfer de embrioni la o vacA 1(5D 7 primul viel nscut prin nsmnare artificialA 1(5D 7 prima clonare la amfibieniA 1(5D 7 prima plant regenerat in vitroA 1(N) 7 prima plant regenerat pornind de la protoplatiA 1(ND 7 primul 9ibrid interspecific obinut prin fu6iune de protoplati 2la tutun5A 1(NH 7 identificarea plasmidului 0i 2tumor inducting5A
6 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
1(N8 P identificarea primei gene umaneA 1(8H 7 obinerea primei plante transgeniceA 1(8K 7 prima natere uman, pornind de la un embrion congelatA 1(85 7 prima plant transgenic re6istent la o insectA 1(86 7 prima clonare la mamifere, utili6nd celule embrionareA 1(8N 7 prima plant transgenic re6istent la ierbicidA 1(8H 7 prima cereal transgenicA 1((1 7 prima utili6are a unui segment de A&% ca medicamentA 1((5 7 primul copil pornind de la fecundarea in vitro a unui ovocitA 1((N 7 prima clonare somatic in vitro la mamifere 2oaia &ollQ5A D))1 7 descifrarea genomului uman 2dup $i9aela /#!%"A%+, D))15. 'a noi n ar primele cercetri de genetic au fost efectuate nc nainte de 1()). /. ,A.-'"./+ 218K)71()D5 a urmrit n e=perienele 9ibridologice modul de transmitere a unor caractere la suine, semnalnd fenomenul de dominan i recesivitate precum i segregare n generaia :D 2dup !A-/+, 1(8)5. /. .A%&+7A'&"A 218NK71(DN5, a publicat n 1(15 primul manual de ameliorarea plantelor fundamentat pe principii genetice. ". !A/#,-RB 2186871(KN5, a de6voltat teoria legturii dintre ereditate i mediu. 9. -#%"./+ .-."C0- 2188571(6H5 s7a afirmat prin reali6ri remarcabile de crearea unor soiuri de gru. 0raian .B,+'"./+ 2188(71(6H5, fondatorul colii moderne de fitopatologie la ba6a creia st conceptul evoluiei conEugate ga6d7para6it i al modificrilor ereditare n urma interaciunilor bilaterale. %. .B+'"./+ 218(871(NN5, are contribuii remarcabile n domeniul geneticii cantitative. <n 1(H6, la iniiativa savantului 9. $A!-%"./+ a luat fiin prima .ocietate de enetic din !omnia 23#0"4, 1((15. +ltimii D) de ani constituie perioada celor mai remarcabile reali6ri materiali6ate prin lucrri de mare valoare teoretic i practic. 8rin aplicarea principiilor de genetic, n ameliorarea plantelor s7au fcut progrese remarcabile, crendu7se 9ibri6i i soiuri valoroase, la maEoritatea speciilor cultivate. Au fost obinui 9ibri6i interspecifici i intergenerici la gru 28!-A&/"%/+, 1()17 1(N55 la 3ucureti, linii 9omo6igote obinute artificial la porumb 2/. 3#0"45 i 9ibri6i obinui din linii di9aploide, 9aploi6i la cartof prin ncruciri interspecifice 28A%:-' i $A!-%5, linii poliploide de trifoi rou la /luE7%apoca. !eali6ri remarcabile s7au obinut la -nstitutul Agronomic 3ucureti mai ales n domeniul geneticii cantitative 20. /!B/-+%5. !eali6ri deosebite n domeniul ameliorrii plantelor au fost obinute de %.%. .B+'"./+, la gru, Al. ,!S%/"A%+ la floarea soarelui, /B3+'"A i #. /#.$-%, la porumb, '. &!B *-/- la or6 .a.
N ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
<n domeniul ingineriei genetice s7au obinut re6ultate notabile obinute de colectivul condus de 8. !A-/+ de la +niversitatea 3ucureti, precum i n cadrul -nstitutului de 3iologie i -//80 :undulea. CAPITOLUL II +1 Le!ile #endeliene ale ereditii . $"%&"' a nceput cunoscutele sale e=periene de 9ibridare la plante n 185N i opt ani mai tr6iu el sinteti6ea6 re6ultatele obinute n cele dou legi ale segregrii i anume> 7 legea puritii gameilor sau segregrii factorilor ereditariA 7 legea liberei combinaii a factorilor ereditari, sau a segregrii independente a perec9ilor de caractere. . $"%&"' a nceput e=perienele de 9ibridare la diferite specii de plante ca> Pisum, Hieracium, Phaseolus, Cirsium, Linaria, Mirabilis, Zea etc., ns n mod deosebit a fcut cercetri la ma6re 2Pisum sativum5, plant autogam care are caractere morfologice ce se pot uor recunoate. "l a nceput s lucre6e cu HK de soiuri de ma6re, dar dup doi ani de e=periene s7a fi=at asupra a DD de soiuri ce se deosebesc prin caracterele distincte 2bob galben 7 bob verde, plante nalte 7 plante pitice, bob neted 7 bob 6brcit etc.5 i constante, dnd natere unei descendene omogene. 2- ,ONO3I)RI%IS,UL (I LEGEA PURIT'II GA,E'ILOR Monohibridarea const n ncruciarea a doi indivi6i, care se deosebesc printr7o singur perec9e de caractere. !" #! $"%&"' a ncruciat ma6rea cu bobul neted 2caracter datorat pre6enei amidonului5 cu ma6rea cu bobul 6brcit 2caracter datorat pre6enei de=trinei5, obinnd n prima generaie numai plante cu bob neted. Acest caracter a fost denumit dominant, n timp ce caracterul Ibob 6brcitJ, care nu a aprut n prima generaie, a fost denumit recesiv. 8rin autopoleni6area plantelor din prima generaie, a obinut n generaia a doua att plante cu bob neted, ct i cu boabe 6brcite, proporia dintre caracterul dominant i cel recesiv fiind de H>1. . $"%&"' a cercetat modul de segregare i la alte perec9i de caractere, re6ultatele fiind pre6entate n tabelul D.1. . $"%&"' e=plic segregarea celor dou caractere studiate, bob neted i bob 6brcit, ca fiind datorate pre6enei n celul a dou tipuri de factori ereditari, notai cu A i a. 8lantele din soiul cu boabe netede 2AA5 conin e=cesiv factorul ereditar care determin acest caracter, iar cele din soiul cu boabe 6brcite 2aa5 conin e=clusiv factorul ereditar al caracterului respectiv. 'a 9ibri6ii din prima generaie, factorii ereditari ai mamei i tatlui se altur 2Aa5, astfel c atunci cnd acestea formea6 gamei, factorii ereditari se separ, fiecare gamet neavnd dect un singur tip de factor ereditar <n mod asemntor, poate s se desfoare i o ipotetic mono9ibridare la salcm .
8 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
ameii sunt, n felul acesta, puri din punct de vedere genetic. 8rin unirea acestor gamei pe ba6 de probabilitate n :D, n procesul fecundrii, se obin plantele generaiei a doua, care se comport astfel> 7 D5T din plante sunt pure cu bobul neted, avnd un singur tip de factori ereditari 2AA5A 7 D5T din plante sunt pure cu bobul 6brcit, avnd e=clusiv cellalt tip de factori ereditari 2aa5A 7 5)T din plante cu bobul neted, poart ambii factori ereditari alturai 2Aa5. $"%&"' a denumit plantele, care conin un singur tip de factor ereditar homozigote, iar cele care conin ambele tipuri, 9etero6igote. 'a indivi6ii 9etero6igoi nu se manifest dect unul dintre factorii ereditari, cel dominant 2bob neted5, cellalt rmnnd n stare ascuns 2bob 6brcit5. <n acest fel, . $"%&"' a reuit s descopere deosebirea dintre structura genetic a organismelor i nfiarea lor, noiune care mai tr6iu a fost denumit de ;#*A%."% genotip i respectiv fenotip. Genotipul repre6int totalitatea genelor coninute de un organism. #enotipul repre6int suma nsuirilor morfologice, fi6iologice, bioc9imice i de comportament a unui organism ca re6ultant a interaciunii dintre genotip i mediu. &in e=emplul anterior se remarc faptul c plantele cu acelai fenotip 2N5T bob neted5, pre6int genotipuri diferite> D5T sunt 9omo6igote i 5)T sunt 9etero6igote. .tudiul comportrii n descenden a 9ibri6ilor obinui l7a condus pe $endel la elaborarea primei legi a ereditii, legea puritii gameilor. Gameii unt $ntotdeauna puri din punct de vedere genetic, adic nu conin dec%t unul dintre factorii ereditari. &rin combinarea probabili tic a ace tor gamei rezult $n generaia a doua, $n urma fenomenului de egregare, un raport de ' dominant ( ) rece iv. 8rin autofecundarea generaiei a doua se obine generaia a treia, la care se observ urmtoarele> 7 din plantele pure cu bobul neted se obin e=clusiv plante cu bobul netedA 7 din plantele pure cu bobul 6brcit se obin e=clusiv plante de acest tipA 7 plantele 9etero6igote cu bobul neted segreg n felul urmtor> D5T plante 9omo6igote cu bobul neted, D5T plante 9omo6igote cu bobul 6brcit i 5)T plante 9etero6igote cu bobul neted. &eci, plantele 9etero6igote din generaia a doua se comport n generaia a treia la fel cum se comport 9ibri6ii din prima generaie. &ac florile plantelor 9ibride din prima generaie se poleni6ea6 cu polen de la plantele genitorului cu bob neted 2bacFcross5, atunci se obin n generaia a doua numai plante cu boabe netede, din care 5)T sunt 9omo6igote i 5)T 9etero6igote. <n ca6 contrar, dac poleni6area se reali6ea6 cu polen de la plantele cu bobul 6brcit, se va forma n generaia a doua Eumtate plante 9etero6igote cu bobul neted i Eumtate 9omo6igote cu bobul 6brcit.
( ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
#binerea ultimei combinaii nu ar fi posibil dac gameii ar conine ambii factori ereditari, deci gameii sunt puri din punct de vedere genetic, adic conin un singur factor ereditar 2o singur gen5 din perec9ea considerat. 4- %I3I)RI%AREA (I LEGEA SEGREGRII IN%EPEN%ENTE A PEREC3ILOR %E CARACTERE <ncruciarea ntre prini care se deosebesc prin dou perec9i de caractere poart numele de di9ibridare. . $"%&"' a studiat ca6ul cnd genitorii se deosebesc prin dou perec9i de caractere. "l a ncruciat ma6rea cu bobul neted i culoare galben cu ma6rea cu bobul 6brcit i de culoare verde. <n prima generaie 9ibrid, toate plantele aveau boabe netede i de culoare galben 2caractere dominante5. 8rin autopoleni6area plantelor din prima generaie s7a obinut generaia a doua 2: D5 n care apro=imativ (U16 din plante aveau boabe netede i galbene, HU16 6brcite i galbene, HU16 netede i ver6i i 1U16 6brcite i ver6i 2fig. D.K.5 <n mod ipotetic, ncruciarea unei forme de salcm cu flori albe 2AA5 i cu luEeri spinoi 2..5 caractere dominante, cu o form cu flori ro6e 2aa5 i luEeri nespinoi 2ss5 P caractere recesice P n prima generaie s7ar obine numai e=emplare cu flori albe i luEeri spinoi. <n :D, la arborii obinui prin autofecundarea 9ibri6ilor : 1 s7ar aEunge la urmtoarea repartiie a caracterelor> (U16 plante cu flori albe i luEeri spinoi, HU16 plante cu flori albe i luEeri nespinoi, HU16 plante cu flori ro6e i luEeri spinoi i 1U16 plante cu flori ro6e i luEeri spinoi 2.0B%"./+, 1(8D5. Aceast segregare se e=plic prin aceea c 9ibri6ii din prima generaie provenii din prini ce se deosebesc prin dou perec9i de caractere, formea6 patru categorii de gamei n care se afl cte un singur factor ereditar din fiecare perec9e. 8rin combinarea celor patru categorii de gamei se formea6 16 combinaii care repre6int segregarea n ca6ul ncrucirii prinilor ce se deosebesc prin dou perec9i de caractere, care se reali6ea6 astfel> (>H>H>1. <n ca6ul unei tri9ibridri, cnd se ncruciea6 organisme care se deosebesc prin trei perec9i de caractere, se formea6 opt tipuri de gamei masculi i opt tipuri de gamei femeli, prin a cror unire pe ba6 de probabilitate se formea6 6K de combinaii i 8 tipuri de organisme> 7 DNU6K cu trei caractere dominante 2A3/5A 7 (U6K cu dou caractere dominante i unul recesiv 2A3c5A 7 (U6K cu dou caractere dominante i unul recesiv 2Ab/5A <n acest fel, $"%&"' a aEuns la conclu6ia c la ncruciarea ntre organisme ce se deosebesc prin dou sau mai multe perec9i de caractere are loc fenomenul egregrii independente a perechilor de caractere. "l a considerat, de asemenea, c ereditatea unei perec9i de caractere este independent de ereditatea celeilalte perec9i de caractere, astfel c i segregarea are loc independent. &ac n e=emplul cu di9ibridarea, se studia6
1) ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
segregarea perec9ii de caractere bob neted i bob 6brcit, fr s se in seama de culoarea bobului 2galben sau verde5, atunci se obine acelai raport de segregare de H>1 ntre boabele netede i cele 6brcite. Acelai lucru se ntmpl i n ca6ul culorii boabelor. Aceasta este segregarea de tip Pisum denumit astfel deoarece a fost descoperit la ma6re. <n conformitate cu acest tip de segregare, n : D 9etero6igoii de tip Aa sunt identici fenotipic cu 9omo6igoii AA. 5- ALTE TIPURI %E SEGREGARE6SE,I%O,INAN'A Abaterile de la legile mendeliene ale ereditii apar n urma mecanismelor de interaciune a genelor, ce generea6 fenomene de dominan complet, incomplet, letalitate .a. !aportul de segregare genotipic n :D este acelai, dar n funcie de relaiile e=istente ntre genele alele sau nealele, aceste constituii genotipice determin fenotipuri diferite. *.'.). +emidominana <n ca6ul dominanei complete, organismele 9omo6igote 2AA5 pre6int acelai fenotip cu cele 9etero6igote 2Aa5. <n unele ca6uri ns, fenotipul organismelor ce conin genele alele n stare 9etero6igot se deosebete de cel al organismelor ce conin genele respective n stare 9omo6igot 2deci AAVAa5. :enomenul menionat este cunoscut sub denumirea de emidominan sau dominan incomplet. .emidominana a fost descoperit de /#!!"%. n 1(1D la specia Mirabilis jalapa. <ncrucind o plant cu flori roii 2!!5, cu una cu flori albe 2rr5, a obinut n generaia : 1 plante cu flori de o culoare intermediar, ro6 2!r5. -ndivi6ii 9etero6igoi 2!r5 manifest caractere intermediare ntre fenotipurile genitorilor, datorit dominanei incomplete sau semidominanei genei R P dominant asupra genei r P recesiv. 8rin autopoleni6area plantelor 9ibride :1, n :D s7au obinut att plante cu flori roii i albe, dar i plante cu flori ro6. !aportul fenotipic este identic cu cel genotipic 1!! 2flori roii5>D!r 2flori ro65>1rr 2flori albe5 2fig. D.5.5. 'a Zea mays, din ncruciarea unei varieti cu boabe albastre cu una cu boabe galbene au re6ultat n :1 plante cu boabe violete, culoare intermediar ntre genitori. <n : D s7a produs segregarea astfel>1 albastru> D violet>1 galben. Acest tip de segregare 21>D>15, n care organismele 9etero6igote pre6int fenomenul dominanei incomplete, este cunoscut sub denumirea de egregare de tip ,ea, pentru a7l deosebi de egregarea de tip &i um de H>1 observat de $"%&"'. 'a psri fenomenul de dominan incomplet a fost observat la ginile de Andalu6ia, cu penaE de culoare albstruie. "le provin din ncruciarea unei rase de gini cu penaEul negru cu una cu penaEul alb. <n :1 toate psrile au penaE albastru. <n :D se produce segregarea astfel> D5T penaE negru, D5T penaE alb i 5)T penaE albastru. Aceasta nseamn c ginile de Andalu6ia cu penaE albastru sunt 9etero6igote, fapt pentru care ele segreg mereu, neputndu7se crea o ras de gini de Andalu6ia. &ominana incomplet intervine i n ca6ul raporturilor de segregare la arbori, fenomenul acionnd probabil, n ca6ul unor caractere cum sunt forma acuminat a sol6ilor
11 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
conurilor de molid, n raport cu forma rotunEit sau culoarea rocat a ritidomului, la pinul silvestru, n raport cu culoarea cenuie7nc9is a ritidomului .a. 7- SUPRA%O,INAN'A8CO%O,INAN'A8 PLEIOTROPIA *.'.*. +upradominana <n acest ca6, indivi6ii 9etero6igoi depesc n productivitate, fertilitate, viabilitate etc., genitorii 9omo6igoi, dominani sau recesivi, AAWAaXaa. :enomenul se numete upradominan i el poate fi observat att la plante ct i la animale. <n procesul de apariie a supradominanei sunt de obicei, implicate mai multe gene cu caracter aditiv. :enomenul mai poart denumirea de heterozi monogenic. 'a Drosophila melanogaster, 9etero6igoii YY@, pre6int o cantitate mai mare de pigmeni n oc9i 2sepiaterina5, fa de genitorii 9omo6igoi Y @Y@ 2oc9i rou7crmi6iu5 i YY 2oc9i albi5. *.'.'. Codominana /odominana determin apariia la indivi6ii 9etero6igoi pentru genele dominante a unui fenotip nou, comparativ cu indivi6ii 9omo6igoi. .e tie c indivi6ii din populaia uman pot s aib patru grupe de snge notate cu A, 3, A3 i ). Aceste grupe de snge sunt determinate genetic de trei grupe de gene polialele notate L , L! i l. enele L i L! sunt dominante asupra genei l, iar mpreun sunt codominante, adic determin un fenotip nou P grupa de snge A3. /a urmare, indivi6ii pot fi fenotipic i genotipic de mai multe tipuri 2tabelul D.D.5 :enotip ) A 3 A3 enotip ll LL Ll L!L! L! l L L!
:ig. D.D. .c9ema grupelor de snge din sistemul A3) <n ca6ul fenomenului de codominan, ambele gene sunt funcionale, determinnd apariia unui fenotip nou. enotipul 9etero6igot L L! se manifest prin grupa de snge A3.
1D ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
8entru reali6area unor transfu6ii sangvine trebuie cunoscute grupele de snge ale donatorului i receptorului. /unoaterea modului cum se motenesc grupele sangvine are importan i n stabilirea paternitii. *.'.-. &leiotropia 8rin fenomenul de pleiotropie se nelege efectul fenotipic multiplu a unei singure gene. enele care au capacitatea de a determina la acelai organism dou sau mai multe caractere se numesc pleiotropice. :enomenul a fost observat de $"%&"', care a demonstrat c ma6rea cu flori albe are boabe cu tegumentul alb, cea cu flori colorate are tegumentul cenuiu sau brun. %-''.#%7"*'" a artat c o anumit gen la ov6 modific simultan forma aristelor spicului, pilo6itatea i fragilitatea tulpinilor. +n e=emplu caracteristic de pleiotropie l ofer 9ibridul Nicotiana silvestrisNicotiana tabacum, la care apar ase caractere distincte, desc9iderea carpelelor, transformarea ovulelor n carpele, alungirea a=ei florale deasupra carpelelor, placentaia, cantitatea de nectar i ncreirea ba6al a corolei, care sunt controlate de aceiai gen. 9-GENELE LETALE *.'... Genele letale enele letale sc9imb raportul mendelian de segregare, deoarece pre6ena lor n stare 9omo6igot 2dominant sau recesiv5 determin moartea indivi6ilor purttori, nainte de maturitatea se=ual. &up gradul de manifestare, efectul genelor letale poate fi> 7 gene letale, ce cau6ea6 o mortalitate de 1))T a indivi6ilor purttoriA 7 gene semiletale, n acest ca6 5)T dintre indivi6ii purttori morA 7 gene subvitale, care cau6ea6 moartea unui numr mai mic dect 5)T dintre indivi6ii purttori. %oiunea de gen letal a fost introdus n tiin de ctre /+Z%#0 21(115, n urma cercetrilor intreprinse pe oareci de culoare galben. Acetia s7au dovedit a fi ntotdeauna 9etero6igoi, deoarece prin ncruciarea a doi oareci galbeni, nu se obin niciodat numai oareci galbeni, ci un amestec cu indivi6i de alt culoare. !aportul ntre oarecii galbeni i cei de alt culoare este n general de D>1. &ac se notea6 gene pentru culoarea normal a blnii cu a i mutanta sa care determin culoarea galben a blnii cu AQ 2QelloY ? galben5, prin ncruciarea ntre organisme 9etero6igote ar trebui s se obin raportul de H>1 ntre indivi6ii galbeni i de alt culoare 2fig. D.6.5 AQaAQa?AQAQ@DAQa@aa
1H ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&ac se ine seama de tipul AQAQ, adic galben 9omo6igot lipsete, s7a dedus c gena AQ este o alel mutant letal, care n stare 9omo6igot duce la moartea organismului. .7a constatat c prin sacrificarea unei femele gestante, o parte a oarecilor de culoare galben mor n stadiu embrionar. 'a plante au fost identificate numeroase gene letale care n stare 9omo6igot provoac moartea embrionilor, sau plantelor nainte de maturitate. 'a porumb se cunosc 15 gene diferite care n stare 9omo6igot bloc9ea6 fotosinte6a i formarea clorofilei 2plante albinotice5, incapabile s supravieuiasc. Acelai fenomen a fost semnalat i la ntirrhium majus $:-CO,PLE,ENTARITATEA GENELOR *.'./. Complementaritatea genelor -nteraciunea dintre dou sau mai multe gene nealele, pre6ente mpreun, determin apariia unui alt fenotip, dect fenotipul determinat de fiecare gen n parte. 0. Complementaritatea de dominan a fost evideniat de 3A0".#% i 8+%%"0 21()85 la specia Lathyrus o"oratus. .7a remarcat c n urma ncrucirii a dou varieti de L. o"oratus, cu flori albe, n generaia :1 s7au obinut plante cu flori roii, iar n generaia :D, raportul de segregare a fost (U16 plante cu flori roii, NU16 plante cu flori albe. 8entru formarea antocianului este necesar pre6ena concomitent a dou gene dominante 2/ i 85. :iecare genitor pre6int n stare 9omo6igot o gen dominant i una recesiv 2//pp, respectiv cc885. <n stare dominant ambele gene sunt ntlnite numai n : 1 2/c8p5 i (U16 din plantele obinute n :D 2/7875. !aportul fenotipic de segregare este de (>N 2fig. D.8.5 1. Complementaritatea de rece ivitate, a fost evideniat de .*+'' n 1(1K, la specia Capsella bursa pastoris 2traista ciobanului5. .7a remarcat c forma capsulei plantei este determinat de interaciunea dintre dou gene nealele. <n starea de recesivitate a ambelor gene, apare tipul cu capsul ovoid. &ac una sau ambele gene se afl n stare dominant, apare tipul cu capsul triung9iular. !aportul genotipic de segregare n : D este de (U16 A73 2capsul triung9iular5>HU16 aa3 2capsul triung9iular5>HU16 A7bb 2capsul triung9iular5>1U16 aabb 2capsul ovoid5, iar cel fenotipic de 15>1 2fig. D.(5. Aciunea complementar a genelor recesive se e=plic prin pre6ena unor gene duplicate, adic a unor gene similare ca aciune, care ns se transmit independent. 8lanta Capsella bursa pastoris fiind un tetraploid, are dou perec9i din fiecare cromo6om omolog i ca atare posed gene duplicate, care determin aciunea de complementaritate recesiv. -nteraciunea dintre genele nealele poate determina apariia unui fenotip nou. :orma crestei la gini este determinat de interaciunea a dou gene nealele 8 i !. <n funcie de interaciunea lor, forma crestei poate s fie> 7 pprr P creast simplA 7 87rr P creast m6ratA 7 pp7! P creast trandafirA 7 87! P creast nuc.
1K ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
<n urma ncrucirii ntre doi indivi6i 9omo6igoi, pentru ambele gene, 88rr i pp!!, cu creast m6rat, respectiv trandafir, n :1 se obin numai indivi6i cu creasta tip nuc !r8p, iar n :D se obin cele patru tipuri de creast n raport de ( nuc>H> trandafir>H ma6re>1 simpl 2fig. D.1).5 -nteraciunile dintre genele nealele intervin i n formarea i transmiterea caracterelor la arbori, numai c, pn n pre6ent, ele au fost puin studiate din cau6a dificultilor metodologice de care s7a amintit. $$- EPISTA.IA "pista6ia const n mascarea e=presiei fenotipice a unei gene numit 9ipostatic, de ctre o alt gen nealel numit epistatic. "pista6ia poate fi de dominan sau de recesivitate, dup cum gena epistatic este dominant sau recesiv. 0. Epi tazia de dominan. /uloarea glumelor i bobului la ov6 este determinat de dou gene> %, epistatic, pentru culoarea neagr i / 9ipostatic, pentru culoarea cenuie. 8re6ena genei %, n stare dominant mpiedec manifestarea genei /. <ncrucind ov6ul slbatic 2 vena #atua5, %%//, cu boabe negre, cu ov6ul cultivat 2 . sativa5, nncc, cu boabe galbene, s7au obinut n :1 plante 9ibride, 9etero6igote pentru ambele gene %n/c, cu boabe negre. 8rin autopoleni6area generaiei :1 s7a obinut n :D raportul de segregare fenotipic> 1D boabe negre>H boabe cenuii> 1 boabe galbene 2fig. D.11.5. !aportul de segregare geonotipic a fost> (U16 %7/> HU16 %7/c> HU16 nn//> 1U16 nncc. 1. Epi tazia de dominan i rece ivitate a fost evideniat de 3A0".#% i 8+%%"0, n e=perienele lor privind transmiterea colorat a penaEului la gini. /uloarea penaEului este determinat de dou gene nealele. +na dintre gene - P epistatic, care determin penaEul alb 2fie c este n stare 9omo6igot dominant --, sau 9etero6igot -i5 masc9ea6 manifestarea celeilalte gene, 9ipostatic /, care determin penaEul colorat. <n urma ncrucirii a dou rase de gini cu pene de culoare alb, 'eg9orn 2--//5 i LQandotte 2iicc5, n :1, s7au obinut 9etero6igoi -i/i, cu penaE de culoare alb. 8rin ncruciarea indivi6ilor :1 ntre ei, n :D s7au obinut indivi6i cu penaEul alb i colorat n raport de 1H>HA cei HU16 indivi6i cu penaE colorat 2negru5 avnd combinaia /7ii, n care gena / nu mai este represat de gena -, aflat n stare recesiv 2fig. D.1D.5. C. Epi tazia de rece ivitate. Aciunea unei gene recesive n stare 9omo6igot, gen epistatic, in9ib manifestarea altei gene nealele, n stare 9omo6igot sau 9etero6igot, gena 9ipostatic. /uloarea blnii la cini este controlat de dou gene> cc 2gena epistatic5, determin culoarea albA 3 P 2gena 9ipostatic5, care n absena cc, determin culoarea neagrA bb 2gen 9ipostatic5, n absena cc, determin culoarea maron. <n urma ncrucirii ntre dou rase de cini, una 9omo6igot cu blana alb, 33cc, i alta 9omo6igot cu blana maron, bb//, se obin n :1 numai indivi6i cu blan neagr,
15 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
3b/c. <n :D se obine raportul de segregare fenotipic> ( blan neagr> K blan alb> H blan maron 2fig. D.1H.5 $+-POLIGENIA SI TRANSGRESIUNEA *.'.2.&oligenia 3polimeria4 $ai multe gene nealele, care segreg independent, pot afecta acelai caracter, e=presia sa fenotipic depin6nd de numrul de gene dominante pre6ente. %-'..#%7"*'" a constat c la gru, n determinarea culorii bobului sunt implicate D 2H5 perec9i de gene nealele, notate cu ! 1, !D, 2!H5. /uloarea bobului depinde de numrul de gene dominante pre6ente i numrul de gene nealele 2D sau H5, implicate. &in figura D.1K, re6ult c intensitatea culorii boabelor de gru, la indivi6i re6ultai n : D, este proporional cu numrul de gene n stare dominant pre6ente n genotipul lor. -ndivi6ii cu K gene ! 2!1!1!D!D5 n genotipul lor, vor avea bobul rou nc9is, cei cu trei gene !, vor avea bobul rou, cei cu dou gene !, vor avea bobul roietic, cei cu o gen !, vor avea bobul rou pal, iar cei cu ambele gene n stare recesiv 2r 1r1rDrD5, vor avea bobul alb. !aportul de segregare n :1 este de 1>K>6>K>1, formndu7se 5 grupe fenotipice. *.'.)5. "ran gre iunea $ai multe gene nealele, determin n generaiile de segregare : D7:5, la o parte din descendeni, depirea e=presiei ma=imale i minimale a unui caracter, fa de gradul de manifestare a acestui caracter la genitori. 8rin ncruciarea unor iepuri, cu blan de culoare nc9is 2$ 1$1$D$D$H$HmKmK5, cu iepuri cu blan de culoare desc9is 2m1m1mDmDmHmH$K$K5, n prima generaie s7au obinut indivi6i 9etero6igoi cu blan de culoare intermediar 2$ 1m1$DmD$HmH$KmK5. &in descendena acestora, pe lng indivi6i cu diferite nuane ale blnii, apar i iepuri cu blan alb 2m1m1mDmDmHmHmKmK5, tran gre iune negativ 2nglobea6 toate genele recesive5, precum i iepuri cu blan de culoare neagr 2$ 1$1$D$D$H$H$K$K5, tran gre iune pozitiv 2nglobea6 toate genele dominante5. :ormele transgresive po6itive pot fi utili6ate ca genitori valoroi, n procesul de ameliorare. "=cepiile de la tipurile de segregare mendelian pre6entate, sunt n fond aparente, deoarece mecanismul separrii factorilor ereditari i al formrii combinaiilor rmne de tip mendelian. "=ist ns i abateri reale de la proporiile respective, avnd o alt surs, cum ar fi egregarea preferenial a cromozomilor, ne epararea cromozomilor omologi $n meioz , formarea nerandomi6at a 6igoilor la fecundare. Astfel, repartiia ntmpltoare n meio6 a cromo6omilor omologi la celulele fiice i formarea gameilor cu cromo6omi omologi i gene alele n raport de 1>1 sunt uneori deranEate, producndu7se egregarea preferenial a unor cromozomi. <n consecin, n macrosporogene6, la plante, se ntmpl ca un cromo6om s se locali6e6e de preferin n oosfer, iar omologul lui n unul din ceilali nuclei ai sacului embrionar, neparticipnd astfel la formarea 6igotului. Aberaii similare pot s apar i la
16 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
formarea spermaiilor i a polenului i ele afectea6 proporiile n care apar grupele de fenotipuri n descenden. 6ondi 7uncia cromozomilor $n meioz are ca efect la prima divi6iune apariia unei celule 9aploide cu un cromo6om suplimentar i a celeilalte celule 9aploide cu un cromo6om n minus celulele se=uale care iau natere vor produce astfel n procesul fecundrii 6igoi cu Dn@1 i Dn71 cromo6omi, deci cu alte caractere i cu alt repartiie la descendeni dect n ca6ul normal. #ormarea nerandomizat a zigoilor, adic unirea gameilor n procesul fecundrii nu n mod ntmpltor, dup cum se reali6ea6 de obicei, ci dup anumite preferine condiionate genetic, cum ar fi viabilitatea inegal a celulelor se=uale mascule sau capacitatea de formare i maturi6area inegal a stigmatului. :ecundarea nerandomi6at duce, de asemenea, la modificarea raporturilor de segregare mendelian. $-- ERE%ITATEA CARACTERELOR CALITATI0E SI CANTITATI0E <nsuirile organismelor sunt de o mare diversitate. "le se pot totui grupa n dou categorii importante> caractere calitative i caractere cantitative. Caracterele calitative sunt trsturi ale unui organism care7l fac s se deosebeasc categoric de un alt organism. &iferenele calitative mpart indivi6ii n tipuri distincte, fr legturi prin intermediari. /ele mai tipice pre6int stri alternative ca > pre6ena aristelor la gru 7 lipsa lor, pre6ena7lipsa coarnelor la animale, pre6ena 7 lipsa pigmentului, pigment de o culoare 7 pigment de alt culoare. <n aceast categorie se nscriu i trsturile definitorii la arbori, forma, structura anatomic, nsuirile metabolice caracteristice la frun6e, flori, fructe, tulpin .a. /aracterele calitative au un grad ridicat de stabilitate i sunt prea puin influenate de factorii de mediu, care nu pot determina dect mici variaii de e=presie, structur sau comportament, niciodat fundamentale. 'a om, un e=emplu concludent l ofer grupele sangvine, care depind n e=clusivitate de fondul genetic. <n anali6ele genetice, $"%&"', ca i ali cercettori, au e=primat n cercetrile lor, ndeosebi, caractere calitative. "le sunt determinate adesea de una sau dou perec9i de gene 2gene maEore5, iar efectul fluctuaiilor mediului nconEurtor asupra lor, poate fi imperceptibil dup cum s7a mai amintit. &in aceste considerente, n urma ncrucirilor apar fenotipuri distincte, bine conturate, cu dominan complet sau incomplet 2gene semidominante5, ceea ce determin o variabilitate di continu. Caracterele cantitative se caracteri6ea6 prin urmtoarele> se aprecia6 cantitativ prin msurare, cntrire, numrare, cronometrare etc., de aceea se mai numesc i caractere metriceA sunt determinate, adesea, de mai multe gene i nu pot fi separate uor i categoric pe clase de fenotipuri. .unt puternic influenate de condiiile de mediu i pre6int o variabilitate continu, adic fenotipuri cu valori cuprinse ntre cele mai mici i cele mai mari valori, ca un ir continuu de fenotipuri. ,ariabilitatea unor asemenea caractere se studia6 cu aEutorul biometriei.
1N ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
$/-CARACTERISTICILE ERE%ITATII CARACTERELOR CANTITATI0E +n e=emplu privind ereditatea mendelian a caracterelor cantitave i punerea n eviden a principalelor sale caracteristici o repre6int cercetrile lui "A.0 21(165 la Nicotiana longi#lora. <ncrucind ntre ele dou varieti de Nicotiana, una cu corola de K) mm lungime 2815, iar cealalt cu corola de (H mm 28 D5, caractere foarte constante, "A.0 a obinut n :1 i :D plante cu lungime intermediar, cu deosebirea c variabilitatea 9ibri6ilor :D a fost dubl fa de cea a 9ibri6ilor din :1 2fig. D.155. Autofecundnd plante din :D, deosebite n ceea ce privete lungimea corolei, s7au obinut n :H familii care n medie au avut aceeai lungime a corolei ca i formele parentale din :D. $ai mult, prin selecia divergent a plantelor din : D i :H s7au obinut familii care au avut valori foarte apropiate de valorile tipice prinilor iniiali 28 1 i 8D5. Aplicnd selecia n :K i :5 s7a reuit s se deplase6e media formelor e=treme i mai mult ctre cea a varietilor parentale 281 i 8D5. !e6ultatele obinute l7au fcut pe "A.0 s emit urmtoarele postulate> 7 ncruciarea ntre varieti 9omo6igote va da n :1 populaii avnd aceiai uniformitate ca cea a formelor parentaleA 7 variabilitatea populaiilor din :D, va fi mai mare dect a populaiilor din :1 A 7 n ca6ul cnd populaiile din :D sunt suficient de mari, pot fi ntlnii indivi6i cu valori egale cu ale formelor parentale A 7 n unele ca6uri unii indivi6i din generaia : D pot c9iar depi tipurile parentale, apar deci tran gre iuni A 7 indivi6ii situai n diferite puncte ale curbei de frecven a populaiilor : D, vor da n :H i n generaiile urmtoare familii care se vor deosebi marcant ntre ele. !e6ultatele obinute de "A.0 n urma 9ibridrii celor dou varieti de Nicotiana i postulatele stabilite au dus la conclu6ia c genele Eoac un rol foarte important n ereditatea caracterelor cantitative. %-'..#%7"*'" 21()(5 cercetnd ereditatea culorii la boabele de gru a stabilit c aceasta este determinat de trei perec9i de gene i anume> ! 1r1, !DrD, !HrH din care genele dominante !1, !D i !H condiionea6 culoarea roie, iar genele recesive r1, rD i rH culoarea alb. :iecare din cele H perec9i de gene segreg independent conform legii segregrii independente a perec9ilor de caractere a lui $"%&"'. Astfel, n urma autofecundrii indivi6ilor !1r1 se obin plante cu boabe roii i cu boabe albe n raport de H roii 2! 175 > 1 alb 2r1r15. <n ca6ul segregrii a dou perec9i de gene 2! 1r1, !DrD5 raportul dintre cele dou categorii de plante este de 15 roii > 1 alb, iar n ca6ul segregrii a trei perec9i de gene 2!1r1, !DrD, !HrH5 raportul de segregare este de 6H roii > 1 alb. -nterpretnd re6ultatele, %-'..#%7"*'" a elaborat teoria genelor polimere potrivit creia e=ist factori ereditari cu aciune foarte asemntoare, care i nsumea6
18 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
efectele, determinnd formarea aceluiai caracter cantitativ. /u ct numrul factorilor crete, cu att caracterul controlat devine mai e=presiv. Astfel de gene cu aciune individual redus care particip la formarea aceluiai caracter au fost numite gene polimere 2gene multiple, factori multipli5. :iecare gen n parte urmea6 ereditatea de tip mendelian ntocmai ca genele cu efect calitativ. /nd genele respective se asocia6 produc, n urma adiiei efectelor, o variaie cantitativ continu. 'a arbori, un e=emplu ipotetic de determinism polimeric poate fi dat la molid, n ceea ce privete forma sol6ilor conurilor. $olidul carpatic 2Picea abiens var. montana5 pre6int conuri cu sol6i acuminai 2ascuii5, n timp ce molidul de origine austriac 2P. abiens var. europaea5 are conuri cu sol6i rotunEii la vrf. "ste posibil ca formarea sol6ilor s fie codificat de dou perec9i de gene alele A1a1 i ADaD care, prin ncruciri, n :D s dea combinaii genotipice de ( i clase fenotipice n numr de 5 2fig. D.16 5. !eiese din anali6a datelor din tabel c n funcie de cota de participare a alelelor A 1a1 i ADaD, vrfurile sol6ilor varia6 de la puternic acuminai n genotipul A 1A1ADAD, la evident rotunEit n genotipul a1a1aDaD. <n acest ca6, ns, nu numai genele A1 i AD ar fi active ci i alelele a1 i aD care codific forma rotunEit a conurilor, fr ns ca ntre aceste gene s apar relaii de dominan i recesivitate. 0eoria genelor polimere a lui %-'..#%7"*'" a fost confirmat prin cercetrile lui "$"!.#% i "A.0 21(1H5 la porumb, &","%8#!0 la om, .*+'' 21(1K5 la traista ciobanului i "A.0 21(165 la tutun. "reditatea caracterelor cantitative a fost fundamentat sub aspect tiinific de ctre $A0*"! 21(K(, 1(5H5. 8otrivit concepiei sale transmiterea caracterelor se efectuea6 prin dou categorii de gene > poligenele minore i obligogenele sau genele ma7ore. 8rimele controlea6 caracterele cantitative iar ultimele caracterele calitative. 8oligenele sunt gene cu efect slab, de unde i numele de gene minore. 8e msur ce se acumulea6 ele e=ercit o aciune puternic n procesul de formare a caracterelor, fiind ec9ivalent cu genele polimere. CAPITOLUL III )a;ele cit l !ice ale ereditii -1 Or!ani;area cel<lar a #atariei vii /elula, ca form superioar de organi6are a materiei vii, este unitatea morfologic i funcional de constituire a tuturor organismelor vii, cu e=cepia virusurilor. /elula posed metabolism individual, ciclu de via i energie proprie, fiind capabil de cretere i autoreproducere independent.
1( ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
<n raport cu comple=itatea structural a celulei i mai ales a nucleului, organismele vii aparin la dou tipuri de organi6ri> tipul procariot i tipul eucariot. $2- ORGANI.AREA CELULARA LA EUCARIOTE #rgani6area eucariot, mai comple=, este caracteristic algelor ver6i, brune i roii, ciuperci, muc9i, ferigi, gimnosperme i angiosperme, i organismelor animale. <n linii mari, o celul eucariot este alctuit din membran, citoplasm i nucleu 2fig. H.1.5 Membrana celular 2plasmalema5 la plante este proteEat, de regul, de un perete celular de natur pectic7celulo6ic, avnd rol de sc9elet. 'a animale, plasmalema repre6int un strat superficial de condensare plasmatic, peretele celular lipsind. Citopla ma, nalt difereniat structural i funcional, este alctuit din > a4 cito olul 29ialoplasma5, repre6int mediul n care sunt incluse celelalte componente putnd s e=iste n stare de gel, sau de sol. b4 i temul de membrane au reticolul endopla metic, poate fi neted 2alfa5, sau rugos 2beta5. /el neted este repre6entat printr7o reea de tubuoare i ve6icole la nivelul crora se sinteti6ea6 n principal 9ormoni. .istemul endoplasmatic rugos are pe suprafaa sa formaiuni granulare ribo6omale, constituind erga topla ma, activ n sinte6a proteinelor de secreie. 8rganitele celulare sunt formaiuni intracelulare, unele pre6ente n toate celulele 2mitocondriile, aparatul olgi, li6o6omii, ribo6omii5, altele pre6ente numai n celulele vegetale 2plastidele5, cu rol n procesele metabolice specifice. a4 Ribozomii au granulele lui &alade sunt constituite din A!%7ribo6omal i proteine, cu rol important n sinte6a proteic. Au o structur constant, sub form sferic sau elipsoidal. !ibo6omii pot e=ista n citoplasm, sau ataai de reticolul endoplasmatic. "i se pot cupla cu A!%7m n procesul de biosinte6 formnd poli6omii. b4 Mitocondriile sunt structuri mici, independente, considerate centrele energetice ale celulei. 'a nivelul lor a fost pus n eviden A&%, cu rol n ereditatea e=tracelular. A&%7ul mitocondrial este dublu eliciodal circular i repre6int mai puin de 1T din A&%7ul celular. $itocondriile sunt capabile de autoreplicare, de cretere, de stocare i transmitere a informaiei genetice specifice, comportndu7se ca nite organite semiautonome, cu continuitate citologic i genetic. c4 &la tidele sunt organite citoplasmatice proprii celulei vegetale, cu rol esenial n procesul de sinte6 i stocare a substanelor organice. /onin toate elementele unui sistem genetic 2A&% i A!%5, avnd astfel rol ereditar. d4 0paratul Golgi este o reea perinuclear, alctuit din formaiuni numite dictio6omi, cu rol n procesul de maturare proteic, n transportul i depo6itarea substanelor elaborate.
D) ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
e4 Centrozomul, depistat n celula animal i vegetal, este format din doi centrioli i centrosferi i are rol n formarea fusului de divi6iune. :iind purttor de A&%, are rol ereditar. f4 9izozomii sunt corpusculi de form ovoid, ce conin en6ime digestive fiind responsabili de digestia intracelular. 3eneficia6 de en6ime 9idrolitice 2proteo6, ribonucleo6, fosfata6 .a.5 i sunt specifice celulei animale. :ormaiuni cu funcii asemntoare au fost semnalate i la plante 2pero=i6omi, sfero6omi i glio=i6omi5. 6ucleul sau carionul este partea cea mai repre6entativ a celulei sub aspect genetic, repre6entnd 1UK71UH din volumul total al celulei. %ucleul ca entitate morfologic, este alctuit din membran nuclear, cariolimf, nucleol, cromocentrul i cromatin 2cromo6omi5. a4 Membrana nuclear se evidenia6 n interfa6. "ste format din dou membrane lipoproteice, prev6ute cu pori prin care se reali6ea6 sc9imburile dintre cariolimf i citoplasm. $embrana e=terioar se racordea6 cu reticolul endoplasmatic, prin care reali6ea6 legtura ntre membrana nuclear i cea celular. Are rol important n organi6area i funcionarea cromo6omilor, precum i n procesul de replicare i transcriere de A&%. b4 Cariolimfa, nucleoplasma sau matri=ul nuclear, este mediul n care sunt incluse formaiunile nucleare, putnd e=ista n stare de gel sau sol. c4 6ucleolul, este pre6ent n nucleu ca un corp sferic, vi6ibil n interfa6 i profa6 ataat la unii cromo6omi n 6ona strangulaiei secundare. %umrul nucleolilor este caracteristic fiecrei specii. d4 Cromatina repre6int starea n care se gsete materialul cromo6omal n interfa6 sub forma fibrei elementare de cromatin. 8rin condensarea fibrei elementare de cromatin, n cursul divi6iunii celulare se pot evidenia cromo6omii. $4CRO,O.O,II LA ORGANIS,ELE EUCARIOTE,OR&OLOGIE8CO,P1 C3I,ICA 8rincipalii purttori ai informaiei genetice la eucariote sunt cromo6omii pre6eni n nucleul celular. Acetia sunt constituii din cromatin, ce conin apro=imativ 6)T proteine, H5T acid de6o=iribonucleic 2A&%5 i 5T acid ribonucleic 2A!%5. &up funciile lor, cromo6omii sunt de dou tipuri> autozomi, ce se regsesc n celulele somatice i varia6 ca numr de la o specie la alta i heterozomi, sau cromo6omi ai se=ului. /elulele somatice conin dou seturi de auto6omi i doi 9etero6omi $$ sau $%, iar celulele se=uale conin un set de auto6omi i un 9etero6om. '.).).). Morfologia cromozomului la eucariote .ub aspect morfologic, cromo6omul eucariot pre6int urmtoarele formaiuni> cromatidele surori, centromerul, constricia secundar, telomerii, satelitul i Fnobul.
D1 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
Cromatidele urori sunt dou uniti structurale identice genetic, unite la nivelul centromerului. Centromerul 2strangulaia sau constricia primar5 este 6ona cu care cromo6omul se fi=ea6 de fibrele fusului de divi6iune celular. "l mparte cromo6omul n dou brae scurt, sau pro=imal 2p5 i braul lung, sau distal 2[5 2fig. H.D5. <n raport cu po6iia centromerului, distingem urmtoarele tipuri morfologice de cromo6omi> 7 telocentrici, cu po6iia centromerului terminalA 7 acrocentrici, po6iia centromerului fiind subterminal A 7 submetacentrici, cu po6iia centromerului submedian A 7 metacentrici, po6iia centromerului fiind median. +trangulaia au con tricia ecundar este asemntoare centrome7rului, ns la nivelul ei cromatidele nu se unesc. 4ona se mai numete i organi6ator nucleolar, la acest nivel fiind ataat de obicei nucleolul. "elomerii sunt formaiuni terminale ale cromo6omilor ce le confer stabilitate. <n lipsa acestora apar restructurri cromo6omale i modificarea morfologic. +atelitul sau trabantul este o formaiune facultativ, separat de restul cromo6omului prin strangulaia secundar. &e regul este dispus pe braul pro=imal 2scurt5 al cromo6omului. :nobul este o formaiune terminal sau subterminal 9eterocromatic, dispus pe anumii cromo6omi, cu valoare de marFer citologic 2fig. H.H.5. '.).).*. +tructura cromozomului eucariot "lementul structural de ba6 al cromo6omului este nucleo omul. 'a microscopul electronic, nucleosomii apar ca un irag de perle, fiecare fiind alctuit dintr7un mie6 9istonic pe care se nfoar dou spire de A&%. <ntre doi nucleosomi e=ist elemente de legtur constituite din segmente scurte de A&% asociate cu o component 9istonic * 1 2fig. H.K5. .uccesiunea mai multor nucleosomi determin formarea fibrei imple de cromatin, care la rndul ei se spiralea6 sub form de selenoid i formea6 fibra elementar de cromatin, care constituie elementul de ba6 a cromo6omului. <n interfa6 cromo6omii se gsesc sub aceast form elementar de cromatin. '.).).*. Compoziia chimic a cromozomului eucariot /romo6omii sunt alctuii din cromatin, substan fundamental ce conine aci6i nucleici i proteine, lipide i poliglucide, ioni de calciu i magne6iu. 0;6<ul nuclear repre6int apro=imativ (5T din totalitatea A&%7ului celular, i rspunde de stocarea informaiei genetice i continuitatea ei de la o generaie la alta. /antitatea constant de A&% din fiecare cromo6om este supus unei variaiuni ciclice, determinat de separarea cromatidelor n cadrul ciclului celular. A&%7ul din care este constituit cromatina poate fi de dou feluri > 0;6 cu core ponden de codare i fr core pondent de codare.
DD ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
7 0;6<ul cu core ponden de codare este activ n procesul de transcripie, putnd fi de dou feluri > a4 0;6 nerepetitiv 2unic5 care conine gene active n procesul de sinte6 a proteinelor celulare, ce poart mesaEul genetic necesar transcrierii A!%7m A b4 0;6 repetitiv, corespunde genelor ce poart mesaEul genetic transcrierii A!%7r, A!%7t i A!%7m necesar biosinte6ei 9istomelor. 7 06;<ul fr core ponden de codare, inactiv n procesul de transcripie este nalt repetitiv, fiind sub dou forme> a4 0;6 paiator, dispus ntre secvenele uniceA b4 06; atelit cu locali6are telomeric, sau n vecintatea centromerului i a satelitului. 0R6<ul cromo6omal se gsete n cantitate diferit n celulele diferitelor organe, repre6entnd cca. 1)T comparativ cu A&%. &roteinele se pre6int sub forma de nucleoproteine i sunt> hi ton i nonhi ton. *istonele sau proteinele ba6ice sunt omogene, cu rol de reglare nespecific al activitii genelor i rol structural. %on9istonele sunt foarte 9eterogene, cu rol en6imatic, structural i reglator specific a activitii genelor. $5- CARACTERISTICILE CARIOTIPULUI LA EUCARIOTE Alturi de elementele morfologice, caracteristicile cromo6omilor sunt e=primate prin numrul, forma i mrimea acestora. %umrul, forma i mrimea cromo6omilor dintr7o celul somatic constituie cariotipul unui individ sau a unei specii. Acesta repre6int un criteriu de identificare a speciilor. 6umrul cromozomilor oscilea6 de la o specie la alta i este relativ stabil pentru indivi6ii aparinnd unei entiti ta=onomice. <n celulele somatice cromo6omii sunt dispui n perec9i, unul de origine matern i unul de origine patern 2cromo6omi omologi5, avnd aceiai form, aceiai mrime i aceiai valoare genetic, alctuind garnitura diploid, notat cu Dn. <n celulele se=uale, sau gamei, e=ist un singur set de cromo6omi, adic cte un cromo6om din fiecare perec9e, numrul lor fiind redus la Eumtate. Aceasta este starea 9aploid i se notea6 cu n. 'a monocotiledonate numrul de cromo6omi este cuprins ntre Dn?K i Dn?H)), iar la dicotiledonate ntre Dn?6 i Dn?DD6 2&A!'-% 0#% i L*O'-", 1((55. 'a arbori n celulele somatice numrul cromo6omilor 2Dn5 este cuprins ntre 1D i 1K 2la genurile Cercis, alnus, Laurus .a. i 6D78D la genurile ilanthus, &ilia etc. maEoritatea speciilor forestiere de interes, de la noi P molidul, bradul, laricele, pinul, fagul, steEarul, castanul .a. au DK de cromo6omi. #orma cromozomilor se stabilete n metafa6a divi6iunii mitotice, cnd cromo6omii ating ma=imum de contracie, n funcie de po6iia centromerului. <n anafa6, ca urmare a ndoirii braelor cromo6omale la nivelul centromerului, pot s apar configuraii n forma literei ,, ' sau -.
DH ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
Mrimea cromozomilor difer de la o specie la alta. 'ungimea lor varia6 ntre D i DD) microni, iar grosimea ntre ),D i D microni. &atorit caracteristicilor morfologice, fiecare cromo6om poate fi identificat n celulele indivi6ilor. /u toate modificrile care apar pe parcursul divi6iunilor celulare, cromo6omii apar n acelai numr, cu aceiai form i mrime, ceea ce permite individuali6area i recunoaterea lor n cadrul comple=ului cromo6omal. $7-REPRO%UCEREA CELULARA8 C=C9>9 CE9>90R M="8"=C += +EM6=#=C0"=0 +0 GE6E"=C0 .ubstratul material al ereditii se caracteri6ea6 prin continuitate. Aceast proprietate se reali6ea6 la nivel celular i se asigur prin reproducerea sa cu fidelitate, transmindu7se odat cu divi6iunea, de la o celul la alta i n procesul reproducerii, de la o generaie la alta. /iclul celular mitotic se desfoar n celulele somatice i poate fi definit ca fiind divi6iunea celular n urma creia plecnd de la o celul mam cu un anumit numr de cromo6omi, re6ult dou celule fiice cu acelai numr de cromo6omi ca i celula mam, identice genetic ntre ele, identice i cu celula mam de la care provine. <n cadrul ciclului mitotic se disting dou etape > divi6iunea nucleului sau cariochineza i divi6iunea citoplasmei sau citochineza Chariochineza. 8rocesele prin care trece materialul genetic din nucleu n carioc9ine6 se regsete n interfaz i mitoza propriu<zi . =nterfaza sau interc9ine6a, este fa6a dintre dou mito6e succesive. 'a microscop se observ nucleul conturat de membrana nuclear, cromo6omii fiind pre6eni sub forma fibrei elementare de cromatin i nu pot fi individuali6ai. <n cadrul nucleului pot fi v6ui unul sau mai muli nucleoli. <n funcie de momentul sinte6ei A&%7ului, interfa6a se mparte n trei etape > 1, . i D. :a6a 1 sau prereplicativ se caracteri6ea6 prin sinte6a proteinelor i a A!%7ului. /romo6omii sunt monocromatidici. :a6a . 2de sinte6 sau replicativ5 este caracteri6at de sinte6a A&%7ului, concomitent cu a proteinelor 9istonice, astfel c fiecare cromo6om devine bicromatidic, cele dou cromatide surori fiind identice. :a6a D 2postreplicativ5 este perioada de postsinte6 n care are loc maturarea nucleului i pregtirea sa pentru divi6iunea propriu76is. Mitoza sau mito6a propriu76is, cuprinde patru fa6e > profa6a, metafa6a, anafa6a i telofa6a. &rofaza este marcat de apariia n cadrul nucleului a cromo6omilor sub forma unor fibre subiri i lungi. <n profa6 dispar nucleoli, se de6organi6ea6 membrana nuclear i se constituie fusul de divi6iune.
DK ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
Metafaza. /romo6omii aEuni la condensarea ma=im se ataea6 cu aEutorul centromerului de fibrele fusului de divi6iune i se alinia6 la centrul celular formnd placa metafa6ic sau ecuatorial. <n metafa6 se pot determina numrul, forma i mrimea cromo6omilor, elemente ce definesc cariotipul unei specii. 0nafaza se caracteri6ea6 prin clivarea longitudinal a cromo6omilor, dup ce n prealabil s7a produs clivarea centromerilor. /romo6omii monocromatici se deplasea6 cu centromerul nainte, spre polii celulei. <n anafa6 se asigur reparti6area aceleai informaii genetice la celulele fiice, avnd n vedere c cele dou cromatide surori sunt identice. "elofaza este un proces invers profa6ei. <n cursul telofa6ei fibrele fusului de divi6iune dispar, iar cromo6omii monocromatici aEuni la cei doi poli se despiralea6, se subia6 i iau aspectul unui g9em 2spirem5. Are loc procesul de reconstituire a membranei nucleare i a nucleotidelor. Citochineza. <n esuturile somatice, n condiii normale, carioc9ine6a este urmat de divi6iunea citoplasmei. <n celula vegetal, cu perete celular rigid, divi6iunea citoplasmatic are loc la apariia la centrul celulei a unui corpuscul plasmatic denumit fragmopla t, de forma unui inel care treptat i umple lumenul cu substane celulo6o7pectice, care se transform n perete celular. 'a animale citoc9ine6a const n apariia unei strangulaii n 6ona ecuatorial a celulei, care asigur separarea celulelor fiice. &istribuia tuturor componentelor protoplasmatice este foarte precis i e=act, reali6at sub control genetic, fapt ce determin formarea a dou celule fiice cu aceiai alctuire structural i constituie genetic. .emnificaia esenial a divi6iunii celulare mitotice const n aceea c ea asigur continuitatea genetic de7a lungul generaiilor celulare succesive. /iclul celular, prin sporirea numrului de celule i procesele de biosinte6 ce le implic, asigur creterea organismului, asigurndu7se continuitatea genetic n ontogene6, de la o celul la alta, prin copierea mesaEului genetic n interfa6 i reparti6area acestui mesaE n condiii riguros e=acte celulelor fiice prin mecanismul mito6ei, n anafa6. <n consecin, n privina informaiei genetice nucleare, toate celulele sunt identice. 8rin desfurarea mito6ei se asigur constana numeric morfologic i structural a cromo6omilor. $9- CICLUL CELULAR ,EIOTIC (I SE,NI&ICA'IA SA GENETIC /iclul celular meiotic, sau divi6iunea meiotic este un tip particular de divi6iune celular, caracteristic organismelor ce se nmulesc pe cale se=uat i n urma cruia dintr7 o celul somatic cu Dn cromo6omi se formea6 K celule fiice cu n cromo6omi, diferite genetic ntre ele, diferite i de celula mam de la care provin.
D5 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&ivi6iunea meiotic se desfoar n celule germinale, locali6ate n organele de reproducere i implic dou divi6iuni succesive, meio6a - i meio6a --, interfa6a fiind pre6ent o singur dat, la nceputul ciclului celular, avnd ca finalitate formarea gameilor 2fig. H.6.5 Meioza = 2primar sau reducional5. <n aceast fa6 are loc reducerea la Eumtate a numrului de cromo6omi i fenomenul de recombinare genetic. &ivi6iunea meiotic are aceleai fa6e ca i cea mitotic, att pentru metafa6a - i --, ns profaza e te mai comple?. &rofaza =<a. <n aceast fa6 cromo6omii parcurg o serie de procese ce se reali6ea6 n urmtoarele subfa6e> leptonem, 6igonem, pac9inem, diplonem i diac9ine6. <n leptonem P nucleul se mrete n volum, cromo6omii apar sub forma unor filamente subiri, n lungul crora ncep s se conture6e cromo6omii. <n zigonem cromo6omii omologi, unul de provenien matern i altul de provenien patern, se altur i se unesc doi cte doi, formnd cromo6omi bivaleni. :enomenul de conEugare a cromo6omilor se numete inap . <mperec9erea cromo6omilor omologi este controlat genetic, realia6ndu7se strict gen alel la gen alel i se caracteri6ea6 prin formarea comple=ului inaptomenal, care permite reali6area recombinrii genetice prin crossing7over. &achinemul, se caracteri6ea6 prin condensarea cromo6omilor, legatura dintre ei devine din ce n ce mai intim, devenind posibile fenomenele de recombinare prin crossing7over. ;iplomenul se caracteri6ea6 prin faptul c la fiecare bivalent se pot observa K cromatide, datorit tendinei omologilor de a se separa, rmnnd unii ns la nivelul c9iasmelor. Aceast configuraie poart denumirea de tetrad cromatidic. ;iachineza este repre6entat de condensarea i scurtarea puternic a cromo6omilor. .paiile dintre c9iasme se mresc, c9iasmele fiind deplasate spre e=tremitile cromo6omilor, fenomen denumit terminalizare. 'a sfritul profa6ei - nucleolul i membrana nuclear dispar, formndu7se fusul nuclear, pe care se ataea6 configuraiile cromo6omale bivalente. Metafaza =. /romo6omii bivaleni se aea6 pe fibrele fusului de divi6iune, orientai cu centromerii spre polii opui, formnd placa ecuatorial. <n metafa6 sunt vi6ibile inc c9iasmele care leag cromo6omii fiecrei perec9i. 0nafaza =. 'egtura dintre cromo6omii omologi se diminuea6, bivalenii se separ n cromo6omi bicromatici, ce migrea6 spre polii celulei. <n anafa6a - are loc reducerea numrului de cromo6omi i recombinarea genetic intracromo6omial, datorit segregrii libere a perec9ilor de cromo6omi. "elofaza =. /romo6omii, n numr 9aploid, se grupea6 n cei doi nuclei, se formea6 membrana nuclear, se reorgani6ea6 nucleolii i apar dou celule 9aploide 2o diad5.
D6 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
/u aceasta se nc9eie prima divi6iune meiotic. %ucleii nou formai intr ntr7un stadiu numit interc9ine6. <n urma meio6ei -, uneori citoplasma se divide, alteori nu. <n acest ultim ca6 re6ult celule binucleate, numite diade. Meioza == 2mito6 9aploid5 este asemntoare unei mito6e. "a se petrece n celule cu numr 9aploid de cromo6omi. &rofaza ==. <n nucleul normal constituit, cromo6omii se condensea6 i se individuali6ea6. 'a sfritul profa6ei -- are loc de6integrarea membranei nucleare i formarea fusului de divi6iune. Metafaza ==. /romo6omii se deplasea6 spre centrul celulei, unde se fi=ea6 cu centromerul de fusul de divi6iune, formnd placa metafa6ic 2ecuatorial5. Aspectul cromo6omilor este de forma literei IGJ, configuraie determinat de pre6ena unui singur centromer pentru cele dou cromatide, iar braele lor se resping. /entromerul fiecrui cromo6om, care a inut unite cromatidele surori, se dublea6 structural i funcional. 0nafaza ==. Are loc separarea centromerilor i a cromo6omilor n cromatide, care devin cromo6omi independeni ce migrea6 spre poli. "elofaza ==. .e formea6 patru nuclei cu numr 9aploid de cromo6omi monocromatidici. $embrana nuclear se reface n Eurul fiecrui grup de cromo6omi 9aploi6i i are loc apoi citoFine6a. :ormaiunea format din patru celule 9aploide ce ia natere la sfritul meio6ei -- se numete tetrad celular. Astfel, dintr7o celul diploid cu Dn cromo6omi, n urma celor dou divi6iuni ale meio6ei, re6ult patru celule fiice 9aploide, cu n cromo6omi. :iecare din cele patru celule formate, conin combinaii diferite de gene, asigurndu7se astfel variabilitatea genetic. /iclul celular mitotic este, de fapt, un ciclu nc9is n sensul c celulele re6ultate n urma meio6ei nu mai reiau ciclul ntruct, la animale, acestea nu se mai divid urmnd a funciona ca i gamei n procesul de fecundare, iar la plante sufer un numr limitat de divi6iuni mitotice 9aploide n procesul de formarea gameilor. /iclul celular mitotic contribuie la reali6area a dou funcii biologice maEore> diversitatea lumii vii prin asigurarea variabilitii genetice a gameilor i continuitatea genetic de la o generaie la alta n procesul de fecundare, asigurnd constana numrului de cromo6omi a descendenelor. ,ariabilitatea genetic a gameilor se asigur n cadrul proceselor de recombinare intracromozomal prin crossing7over n profa6a meio6ei - i intercromozomal la nivelul setului 9aploid de cromo6omi prin segregarea independent a perec9ilor de cromo6omi omologi n anafa6a meio6ei - . +:-CICLUL %E 0IA' (I RECO,)INAREA GENETIC LA PLANTELE SUPERIOARE= SE,NI&ICA'IA )IOLOGIC (I GENETIC
DN ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
8rin ciclul de via se asigur continuitatea genetic de la o generaie la alta n filogene6 i cuprinde alternarea unor generaii celulare 9aploide, n procesul de formare a gameilor 2gametogene6a5, cu a unor generaii celulare diploide, datorit fecundrii. radul de repre6entare a celor dou generaii celulare, 9aploid i diploid, difer la plante i animale. 'a plante, gradul de repre6entare a nivelului 9aploid i diploid difer n raport de po6iia ocupat pe scara evolutiv. <n urma meio6ei re6ult celule 9aploide, care nu repre6int gamei ca i n ca6ul animalelor ci pori din care n urma mito6ei 9aploide succesive va re6ulta gametofitul 2generaia 9aploid5, formaiune ce va da natere gameilor. ameii n urma procesului de fecundare vor da natere zigotului diploid i apoi prin divi6iuni mitotice succesive se va forma porofitul 2generaia diploid5, care n urma meio6ei va produce din nou celule 9aploide 2spori5, nc9eindu7se astfel ciclul de via. &ivi6iunea reducional 2meio6a5, se produce att la animale, n permatogenez i ovogenez, ct i la plante, n micro porogenez i macro porogenez. <n spermatogene6 2meio6a, la animale mascule5, toate cele patru celule re6ultate sunt de regul, funcionale, repre6entnd spermato6oi6ii. <n ovogene6 2meio6a, la animale femele5, doar una dintre cele patru celule este funcional P ovulul P gametul femel. Gametogeneza la plantele superioare cuprinde microgametogeneza, sau procesul de formare a gameilor masculi i mega sau macro porogeneza, adic procesul de formare a gameilor femeli . <n micro porogenez 2meio6a la plante, n ca6ul grunciorilor de polen5 din fiecare celul 9aploid a tetradei se formea6 cte un gruncior de polen 2fig. H.8.5. Acesta, n timpul germinrii, sufer dou divi6iuni mitotice succesive, n urma crora re6ult un nucleu generativ i unul vegetativ. %ucleul vegetativ se resoarbe, iar nucleul generativ 9aploid trece printr7o nou divi6iune mitotic, dnd natere la doi nuclei spermatici, care repre6int gameii masculi. <n macro porogenez 2meio6, n ca6ul gameilor femeli5, numai una dintre cele patru celule ale tetradei este funcional, devenind sacul embrionar. %ucleul 9aploid al sacului embrionar parcurge trei divi6iuni mitotoce succesive n urma crora re6ult opt nuclei. +nul dintre aceti nuclei 9aploi6i ai sacului embrionar devine nucleul oosferei 2gametul femel la plante5, doi se contopesc dnd nucleul secundar diploid al sacului embrionar, trei formea6 nucleii antipodelor i doi devin nucleii sinergidelor. <n urma procesului de fecundare se reali6ea6 fu6iunea celor dou celule se=uale, mascul i femel. .ub aspect genetic, semnificaia fecundrii este primordial, deoarece prileEuiete ntlnirea i regruparea cromo6omilor omologi din gamei, unul de provenien matern, cellalt de provenien patern. /elula, dispune astfel de Dn cromo6omi fiind diploid, fa de gameii care sunt 9aploi6i cu n cromo6omi.
D8 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
+nirea gameilor la fecundare se produce n mod ntmpltor, nediriEat, ceea ce constituie o surs primordial de variabilitate genetic. Astfel, n ca6ul combinrii a n gene, fiecare fiind repre6entat prin cte a alele, numrul de genotipuri 2g5 ce vor re6ulta, sunt>
a 2a +15 g = D
n
&in e=emplul dat, dac se iau n calcul numai 1) gene, fiecare cu cte D, H sau K alele, numrul de combinaii este de H1), respectiv 61) i 1)1) etc. <n ca6ul plantelor superioare, ngiosperme, se produce dubla fecundare, din contopirea oosferei cu gametul mascul, re6ultnd oul sau zigotul, iar din unirea nucleului secundar cu al doilea gamet se formea6 zigotul acce oriu 2fig. H.(.5. &ac 6igotul este diploid, 6igotul accesoriu are trei seturi de cromo6omi, fiind tetraploid, deoarece re6ult din fu6iunea nucleului secundar diploid cu gametul mascul 9aploid. :aptul c n setul triploid 2H n5 cromo6omi, un numr de D n cromo6omi provin de la printele matern i numai n cromo6omi de la cel patern are consecine n producerea unor fenomene genetice, de tipul ereditii citoplasmatice. &in 6igot, prin divi6iuni celulare succesive mitotice, ia natere embrionul, iar din 6igotul accesoriu, se formea6 endospermul secundar i albumenul. <n ca6ul 'ymnospermelor fecundarea este simpl, un singur gamet contopindu7se cu oosfera . "ndospermul primar al gimnospermelor, dei ndeplinete aceleai funciuni ca i la angiosperme, are origine diferit, lund natere dintr7o celul a nucelei aflat n apropierea micropilului i fiind 9aploid 2n cromo6omi5. <n esen, diferenierea timpurie a esuturilor embrionului, ca i diferenierea postembrionar care urmea6, att la angiosperme ct i la gimnosperme, are ca surs primordial informaia genetic din structurile A&% ale celulei7ou n care sunt memori6ate de la nceput toate caracterele organismului.
+$-NO'IUNI A ERE%IT'II 8entru genetic, studiul celulei i a divi6iunii celulare pre6int o mare importan deoarece face posibil identificarea materialului genetic, a mecanismului prin care genele se transmit de la celula mam la celulele fiice, de la ascendeni la descendeni, a modului
D( ........................................................................................................................................................................
CAPITOLUL I0 Te ria cr # ; #al a ereditii INTRO%UCTI0E >N TEORIA CRO,O.O,IAL
.........................................................................................................................................................................
cum se reali6ea6 recombinarea genetic i cum se produc mutaiile la nivel genetic, precum i restructurrile la nivelul cromo6omilor. 0eoria celular elaborat de ./*'"-&"% i ./*LA%% 218H85 i completat de L-!/*#L 218555, au demonstrat c organismele au o alctuire celular sau pluricelular i c celulele provin e=clusiv din alte celule. &up elaborarea teroriei celulare, studiul celulei a luat un avnt deosebit spre sfritul secolului al 1(7lea i nceputul secolului al D)7lea, permindu7i lui $#! A% s sinteti6e6e cunotinele acumulate ntr7o teorie cromozomial a ereditii, completat i cu re6ultatele e=perimentale proprii. 'egile ereditii elaborate de $#! A%, e=plic transmiterea ereditar a caracterelor determinate de gene plasate pe perec9i diferite de cromo6omi. "eoria cromozomial a ereditii are patru principii de ba6> plasarea liniar a genelor pe cromo6omiA fenomenul de linFage, sau transmiterea genelor plasate pe aceeai perec9e de cromo6omiA fenomenul de crossing7over sau sc9imbul reciproc de gene ntre cromo6omii perec9eA numrul limitat a grupelor de nlnuire a genelor. /ercetrile lui $#! A% i colaboratorii si, au fost efectuate n special asupra musculiei de oet 2Drosophila melanogaster5. Aceasta se nmulete foarte repede, o generaie putnd fi obinut, la o temperatur de D)\/ n numai 1D 6ile. Acest lucru, a permis ca pe parcursul unui an s se poat studia un numr mare de generaii succesive. :iecare femel produce cteva sute de descendeni. %umrul de cromo6omi somatici la D. melano(gaster este mic 2Dn?85, putnd fi uor identificai la microscop, datorit deosebirilor lor morfologice. .tudiind cteva sute de mii de indivi6i timp de mai muli ani, 0.*. $#! A% i colab. au reuit s identifice peste 5)) de mutaii care afectau toate organele insectei. Aceste mutaii au servit ca material de studiu transmiterii ereditare a caracterelor la descendeni i respectiv a mecanismului cromo6omial al ereditii. 8rin ncruciarea mutantelor ntre ele sau cu tipul normal, denumit i IslbaticJ s7a studiat modul de transmitere ereditar a diferitelor gene n cursul generaiilor succesive. Aceste re6ultate corelate cu cercetrile citologice ale materialului respectiv, au dus la elaborarea principiilor menionate la nceputul capitolului. ++- PLASAREA LINIAR A GENELOR PE CRO,O.O,I 8rima te6 a teoriei cromo6omiale a ereditii consider c factorii ereditari 2genele5 sunt plasai pe cromo6om n anumite po6iii precise, denumite loci 2locus5. &e obicei, genele se pre6int sub form de perec9i alele ce determin de6voltarea unor caractere contrastante, din care una este dominant i cealalt rece iv. 0.*. $#! A% a constat c genele pot suferi mutaii transformndu7se n gene alele. 8rin mutaie, gena dominant A ce determin tipul normal 2slbatic5 se poate
H) ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
transforma n gena alel recesiv a. /a urmare, genele se gsesc de regul sub form de perec9e 2alele5. enele se notea6 cu primele 17K litere ce desemnea6 prescurtat caracterul afectat de gena respectiv 2n limba engle6 sau latin5. &e e=emplu, gena mutant recesiv ce determin oc9i de culoare alb la musculia de oet se notea6 cu Y 2de la engl. Y9ite ? alb5, iar gena alel ce determin tipul normal cu oc9i roii, cu aceeai liter avnd indicele @ 2Y@5. ena ce determin corpul de culoare galben se notea6 cu Q 2de la engl. QelloY ? galben5, iar alela sa ce determin corpul normal gri, cu Q @. &in cele de mai sus se confirm ideea c genele alele sunt situate n aceiai perec9e de cromo6omi, n loci omologi, i influenea6 aceiai nsuire a organismului, determinnd apariia unor caractere contrastante 2tabelul K.15. /aracterul enele alele @ Y oc9i de culoare roie 1 /ulorae oc9ilor Y oc9i de culoare alb Q@ corp de culoare gri /uloarea D Q corp de culoare corpului galben vg@ aripi normale H :orma aripilor vg aripi vertigiale <ncrucind indivi6i normali cu diverse mutante sau diferite mutante ntre ele, $#! A% constat c transmiterea multor caractere se abate de la cea de7a a doua lege a lui $"%&"'. Admind c diferitele caractere ale organismului sunt determinate de genele plasate pe cromo6omi, $#! A% i d seama c numrul genelor este mult mai mare dect numrul cromo6omilor unui organism. &e aici conclu6ia c mai multe gene sunt plasate n acelai cromo6om, ntr7o succesiune liniar, n anumii loci. $#! A%, anali6nd un mare numr de indivi6i de D. melanogaster, femeli i masculi, insect ce are un numr de 8 cromo6omi, constat c femelele au o perec9e de cromo6omi omologi 2GG5, iar masculii un cromo6om G de form linear i un cromo6om neomolog, O de forma unui bastona frnt. Aadar, pre6ena cromo6omilor GO determin se=ul mascul, iar pre6ena perec9ii GG determin se=ul femel. Aceti cromo6omi au fost denumii cromozomi ai e?ului, heterozomi sau gonozomi, spre deosebire de restul cromo6omilor somatici, denumii autozomi. Aceast descoperire constituie un argument n favoarea ideii plasrii genelor pe cromo6omi, ntruct s7a pus n eviden c o anumit structur cromo6omic este corelat cu un caracter important, i anume se=ul. +--&ENO,ENUL %E >NLN'UIRE A GENELOR ?LIN@AGE* .tudiul celor peste 5)) de mutante de D. melanogaster au dus la constatarea nu numai c genele trebuie s fie plasate n cromo6omi, dar innd seama de numrul mare al genelor i numrul redus al cromo6omilor, mai multe gene trebuie s fie plasate n acelai
H1 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
cromo6om. .7a aEuns la conclu6ia c pe fiecare cromo6om e=ist un numr mare de gene i c ele se transmit mpreun, nlnuite la descendeni, manifestnd fenomenul de linFage. 'a Drosophila melanogaster e=perienele fcute de $#! A% au artat c transmiterea caracterelor nu se face conform tipurilor de segregare cunoscute, fapt consemnat nc din 1()5 de 3A0".#% i 8+%"00. /ei doi, au constatat c prin ncruciarea a dou varieti de Latyrus o"oratus, unul cu flori purpurii i grunciori de polen alungii, cellalt cu flori roii i grunciori de polen rotun6i, dac n prima generaie s7au obinut 9ibri6i cu flori purpurii i polen alungit, conform te6ei dominanei al lui $"%&"', n generaia a doua 2:D5 s7au reali6at raporturi de segregare diferite de cele mendeliene. "=cedentul de flori purpurii i polen alungit, ca i de flori roii i polen rotund, care s7au nregistrat fa de raportul de segregare (>H>H>1 a fost pus pe seama tendinei caracterelor respective de a se transmite mpreun, fenomen denumit de 3A0".#% i 8+%"00, cupla7ul gameilor. 'a Drosophila, ncrucindu7se un individ mutant pentru dou caractere 2corp negru i aripi vertigiale5 cu un individ normal P slbatic P 2corp cenuiu i aripi normale ? caractere dominante5, n :1 s7au obinut numai musculie cu fenotip slbatic P corp gri i aripi normale, din 9etero6igoi normali. Acetia, masculii 2]5 se ncruciea6 cu indivi6i dublu mutani 9omo6igoi 2femele ^5 reali6ndu7se aa numita retroncruciare sau bacFcross. <n :H reapar tipurile genitoare n raport de 1>1 datorit faptului c genele respective fiind plasate pe acelai cromo6om, se transmit nlnuite 2linFage5. /onstatnd c fenomenul se repet i n ca6ul altor mutante, $#! A% consider c faptul se datorea6 plasrii celor dou gene 2corp gri i aripi normale5 pe acelai cromo6om i transmiterea lor se face nlnuit, fenomen pe care l7a numit lin@age. /onform celei de a doua legi mendeliene, n :D trebuia s se reali6e6e o segregare independent a caracterelor i s apar urmtoarele tipuri de indivi6i> 215 aripi normale i corp gri, 2D5 aripi normale i corp negru, 2H5 aripi vertigiale i corp gri i 2K5 aripi vertigiale i corp negru. <n realitate, n urma ncrucirii respective, s7au obinut numai dou tipuri de indivi6i 7 cu aripi normale, corp gri i cu aripi vertigiale i corp negru 7, identici cu formele parentale. <ntruct numrul genelor este mult mai mare dect numrul cromo6omilor i implicit unele dintre gene fiind locali6ate pe acelai cromo6om, este normal ca acestea s nu se supun legii liberei combinri a genelor, ci s aib tendina de a se transmite la descendeni mpreun, odat cu cromo6omul respectiv. enele ale cror locui sunt situai n cromo6omi omologi i care au tendina de a se transmite mpreun, n bloc, la descendeni, aparin aceluiai grup de lin@age. %umrul grupurilor de linFage este egal cu numrul 9aploid de cromo6omi 2 n5 din celul. Astfel, la Drosophila 2Dn?85 sunt patru grupe de linFage 2n?K5A la ma6re 2Dn?1K5 P N grupe de linFageA la porumb 2Dn?D)5 P 1) grupe.
HD ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
"=trapolnd, la principalele specii forestiere numrul grupelor de linFage ar fi> 1D la molid, pin, brad, larice, tisa, fag, steEar, castan 2fiecare specie avnd D n?DK i n?1D5A 11 la ienupr, tuia, c9iparos de /alifornia 2Dn?DD i n?115A 1H la duglas 2Dn?D6, n?1H5A 1K la mesteceni, ulmi i du6i 2Dn?D8, n?1K5A la salcm 1) 2Dn?D), n?1)5. &e remarcat c problema numrului grupelor de nlnuire nu este foarte simpl. .unt specii la care numrul grupelor de nlnuire este inferior numrului perec9ilor de cromo6omi. 'a tomate 2)olanum lycopersicum5 se cunosc numai 1) grupe de linFage, fa de cele 1D posibile 2Dn?DK5, iar la iepure numai 11 grupe de linFage, n raport cu cele DD posibile 2Dn?KK5. :enomenul de linFage se manifest numai n ca6ul genelor plasate pe acelai cromo6om, n timp ce pentru genele plasate pe cromo6omi diferii transmiterea ereditar a perec9ilor de gene se face independent, aa cum a descoperit $"%&"'. -ntensitatea linFage7ului, capacitatea de transmitere nlnuit a genelor n descenden, depinde de distana dintre ele pe cromo6om, genele apropiate transmindu7 se linFat cu o frecven mai mare dect cele situate la distane mai mari. Aceast constatare a permis lui $#! A% s pun ba6ele teoretice privind di punerea liniar a genelor pe cromozomi i s obin date pentru ntocmirea 9rilor cromo6omale. 'a speciile forestiere, fenomenul transmiterii nlnuite a genelor de pe acelai cromo6om acionea6 ca i n ca6ul altor specii de plante, dar depistarea caracterelor linFate rmne incert din cau6a greutilor metodologice ale cercetrii, a structurii genetice practic necunoscute la cromo6omii respectivi. <n multe ncruciri ntre forme i varieti ale speciilor forestiere se remarc faptul c numeroase caractere nu sunt independente, foarte posibil ca efect al fenomenului de linFage. 'a foiase, L!- *0 semnalea6, c n general, tipul nervaiunilor la frun6e corespunde cu grosimea frun6ei i coninutul acestora n ulei. 'a frun6a de fag multe caractere se asocia6 foarte strns n timp ce marginea frun6ei vdete o anumit independen, ceea ce duce la supo6iia c gena respectiv are raporturi slabe de asociere cu alte gene implicate n specificitea frun6ei. DK-RECO,)INAREA GENELOR >NTRE CRO,O.O,II PEREC3E ?CROSSING-O0ER* SC3I,)UL RECIPROC %E GENE .tudiul mecanismului de transmitere ereditar a artat c nu ntotdeauna genele care fac parte din aceiai grup de linFage, adic sunt plasate n acelai cromo6om, se transmit nlnuit i c de la acest fenomen e=ist o serie de e=cepii. 8entru a e=plica aceste e=cepii s7a aEuns la conclu6ia c ntre cromo6omii perec9e are loc un sc9imb reciproc de gene, fenomen denumit crossing7over. 'a Drosophila, n e=perienele clasice ale lui $#! A%, s7au studiat transmiterea ereditar a caracterelor de la mutante, una cu aripi vestigiale 2vgvg5 i corp normal 2b @b@5 i alta cu aripi normale 2vg@vg@5 i corp mutant negru 2bb5. enele respective sunt plasate n perec9ea a doua de cromo6omi. <n :1 au re6ultat indivi6i 9etero6ogoi care aveau
HH ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
caracterele normale 2corp gri i aripi normale5. +lterior, o femel obinut n prima generaie dup ncruciare a fost retroncruciat cu un mascul care pre6enta ambele mutante, aripi vestigiale i corp negru 2vgvg7bb5. <n :D s7au obinut patru tipuri de musculie, adic cele dou tipuri intrate n combinaie 2vestigiale7gri i normale7negru5 i dou recombinate genetic 2fig. K.D.5. +ltimele dou categorii de organisme se datorete segregrii genelor care de obicei se transmit nlnuit. /au6a const n chimbul reciproc de gene pla ate pe cromozomii pereche n timpul divi6iunii meiotice. Anali6a 9ibridologic arat c 9ibridul femel : 1 produce patru tipuri de gamei i anume> b@vg i bvg@ i doi gamei noi cu genele bvg i b @vg@. /ei doi gamei noi apar prin sc9imbul segmentelor ntre cromo6omii omologi 2crossing7over5. /rossing7overul este o alt te6 a teoriei cromo6omale a ereditii, supranumit i te6a sc9imbului ec9ilibrat de gene ntre cromo6omii perec9e. <n loc s apar Eumtate din descendeni cu aripi vestigiale i corp normal i Eumtate cu aripi normale i corp negru, se obin K1,5T indivi6i cu aripi vestigiale i corp gri, K1,5T cu aripi normale i corp negru, 8,5T cu aripi i corp normale i 8,5T cu aripi vestigiale i corp negru. "=plicaia pe care o d $#! A% este urmtoarea> n timpul divi6iunii mitotice, cromo6omii omologi se apropie foarte mult i se ating unul de altul, n unul sau mai multe puncte de contact.. <n aceste puncte de contact cromatidele se pot rupe, astfel c ntre cromo6omii perec9e poate avea loc un sc9imb reciproc de segmente cromatidice. &ac pe aceste segmente se afl locali6ate gene diferite, dar alele, sc9imbarea unor segmente cromatidice duce la sc9imbul de gene, n urma crora apar cromo6omi i gamei recombinai. :enomenul de crossing7over, aa cum s7a v6ut, se produce n stadiul de 6igonem7 pac9inem al profa6ei primei divi6iuni meiotice, cnd cromo6omii omologi bivaleni 2fiecare cu cte dou cromatide5 se apropie foarte mult unul de altul i vin n contact direct cu unul sau mai multe puncte P chia me, n care, din cau6a tensiunilor dintre cromatidele e=terne i interne se pot produce rupturi i implicit, transfer reciproc de segmente 2stadiul de diplomen5. <n funcie de numrul de rupturi n punctele de contact, se aEunge la crossing7over simplu, dublu, multiplu. <n timp ce $#! A% i colab. si limitau crossing7over7ul la nivel intergenic, gena fiind ultima unitate de recombinare, cercetrile ulterioare 2dup 1(5)5, au demonstrat i e=istena crossing7over7ului intragenic. <n afara recombinrii genetice reciproce s7a mai relevat i e=istena recombinrii nereciproce, unidirecional, numit conversie. +2- &ACTORII CARE ,O%I&IC &REC0EN'A CROSSING-O0ERULUI <n condiii normale i uniforme de via, de la o generaie la alta, valoarea crossing7 over ntre dou puncte rmne constant. !egularitatea manifestrii crossing7over7ului,
HK ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
precum i lipsa acestui fenomen la o serie de organisme 2molute, viermi5, fac s se admit c att crossing7over7ul ct i linFage7ul se gsesc sub un anumit control genetic. :recvena fenomenului de crossing7over este determinat de o serie de factori, dintre care menionm> Genotipul. 'a unele organisme fenomenul de crossing7over este frecvent, n timp ce la altele este practic absent. Con tituia genetic influenea6 frecvena fenomenului de crossing7over. .7a constatat la toate organismele c, n segmentele adiacente centromerului, frecvena c9iasmei este mai redus. /au6a principal se datorete faptului c n aceste segmente, n general, genele sunt foarte dense i tot aici se afl principalele 6one 9eterocromatice. 0beraiile cromozomale P structurale i numerice afectea6 frecvena crossing7over7 ului. -nversia ntr7o cromatid suprim omologia i deci conEugarea regiunii afectate i ca urmare nu pot aprea c9iasma i implicit, nici crossing7over7ul. modificarea numrului de cromo6omi 2autopoliploidia, alopoliploidia, monosomia5 afectea6 n diferite moduri producerea c9iasmei i ca urmare apariia crossing7over7ului. procentul de crossing7over crete odat cu creterea di tanei dintre gene. +e?ul. 'a diptere i lepidoptere la se=ul 9eterogametic 2mascul GO, respectiv femela 4L5 nu apare n meio6 fenomenul de crossing7over. :aptul este e=plicat prin lipsa de omologie ntre cromo6omii G i O, respectiv 4 i L, care nu conEug n meio6. V%r ta. :recvena crossing7over7ului este ma=im la maturitatea se=ual i scade odat cu naintarea n vrst. 'a om, frecvena procesului de crossing7over este mai mare la femeile de peste H6 de ani. #actorii de mediu. 0emperatura, lumina, nutriia pot produce perturbri n apariia fenomenului de crossing7over. la Drosophila melanogaster s7a remarcat faptul c temperatura sc6ut mrete frecvena crossing7over7ului n unele segmente i o micorea6 n alta. +4- 3R'ILE CRO,O.O,ALE &eterminarea frecvenei crossing7over7ului i a linFage7ului i, implicit a distanelor dintre diferitele gene din acelai grup de linFage, a permis s se elabore6e 9rile cromo6omale 29ri genetice5, adic repre6entrile grafice ale cromo6omilor cu indicarea po6iiei relative a genelor linFage 2a marFerilor genetici5, constituente. 8entru aceasta s7a ncercat s se stabileasc distana e=istent ntre diferite gene, utili6ndu7se ca unitate de msur frecvena cu care se manifest fenomenul de crossing7over, deci frecvena cu care apar organismele recombinate. 8rocentul de crossing7over n cadrul unei perec9i de cromo6omi depinde de distana dintre gene. Aceasta pornete de la raionamentul logic c dac genele de pe acelai cromo6om sunt plasate mai departe una de alta, posibilitatea manifestrii crossing7over7 ului este mult mai mare dect dac sunt alturate 2fig. K.H.5. 8entru ntocmirea 9rilor cromo6omale se folosete deci analiza genetic, care const n efectuarea de 9ibridri ntre indivi6i diferii din punct de vedere genetic i
H5 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
studierea descendenei la mai multe generaii. <n acest fel se determin att grupele de linFage, ct i frecvena crossing7over7elor, adic distana dintre gene. Arile cromozomiale constituie repre6entarea grafic a cromo6omi7lor i a genelor care alctuiesc diferite grupe de linFage, gene plasate n cromo6omi la distane relative, e=primate n procente de recombinare. # alt metod pentru ntocmirea 9rilor cromo6omiale la unele diptere 2 D. melanogaster5 este metoda studiului citologic al cromo6omilor uriai 2politeni5 /romo6omii uriai sunt de 15) de ori mai lungi dect cromo6omii metafa6ici. ei sunt formai dintr7un mare numr de cromatide paralele, datorit unei replicri succesive ale cromo6omilor fr ca aceasta s fie urmat de separarea cromatidelor. :enomenul poart denumirea de politenie. &eci, celulele glandelor salivare care conin cromo6omii politeni rmn n profa6 i ca urmare nu se mai divid. 8rin colorare, de7a lungul cromo6omilor politenici se disting ben6i 2ntunecate5 i interben6i 2luminoase5. /romo6omii uriai de la D. melanogaster pre6int circa 5.))) de astfel de ben6i, cu o morfologie caracteristic i o po6iie constant. .tudiul comparativ a numrului, morfologiei i po6iiei ben6ilor din cromo6omii uriai de la musculie de oet normale i diferitele mutante au artat c ntre po6iia genelor pe cromo6omi i distribuia ben6ilor e=ist o corelaie direct. /ercetrile mai recente au artat c numrul de gene de la D. melanogaster este de circa 5.))), ceea ce corespunde cu numrul de ben6i din cromo6omii politenici. Aceste observaii au contribuit la alctuirea 9rii citologice la D. melanogaster. Aceasta a permis gsirea unui suport celular locali6rii genelor n cromo6omi 2fig. K.K.5. 8rimele 9ri cromo6omale au fost reali6ate de $#! A% i colab. nc din anul 1(D), la Drosophila i la Zea mays, specii cu nsuiri genetice foarte adecvate acestui scop. !e6ultatele notabile n stabilirea grupelor de linFage i constituirea 9rilor cromo6omale sunt cunoscute la tomate, gru, or6, gura leului i n ultimul timp i la om. 'a arbori, ntocmirea 9rilor cromo6omale rmne o problem desc9is, deoarece identificarea genelor marFer i verificarea segregrii mutantelor n descendeni prin metoda 9ibridrilor sunt greu de anali6at. <n plus, n ca6ul arborilor intervin complicaii din cau6a frecvenei mari a sistemelor poligenice. 8roblema nu este totui de nere6olvat dac, de e=emplu, se vor putea gsi marFeri fenotipici i se vor desfura studii la specii cu forme i varieti distincte sau inter9ibride, cum ar fi molidul, pinul silvestru, steEarul sau, ntr7o msur mai mic, bradul, fagul .a. 0eoria cromo6omial a ereditii a avut i are importante aplicaii practice. Aceste cunotine sunt importante n alctuirea programelor de ameliorare a soiurilor de plante i a raselor de animale. Astfel, printr7o alegere Eudicioas a genitorilor se obin 9ibri6i la
H6 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
care, n urma fenomenului de recombinare genetic apar noi combinaii de gene, crendu7 se posibilitatea selecionrii unor forme utile pentru practic. 8rin cunoaterea 9rilor cromo6omiale, a devenit posibil transferul anumitor cromo6omi sau segmente cromo6omiale de la un soi la altul, sau c9iar de la o specie la alta. <n acest fel s7au transferat gene utile pentru procesul de ameliorare a plantelor i animalelor 2e=. tranferul re6istenei la rugini de la speciile slbatice la gru5. "laborarea 9rilor cromo6omiale la om pre6int importan pentru studiul maladiilor ereditare. CAPITOLUL 0 GENERALE
+5CONSI%ERA'II PRI0IN% ERE%ITATEA CARACTERELOR SEAUALE /aracterele se=uale de ordin morfologic, anatomic, fi6iologic, comportamental sunt foarte bine evideniate la animale, respectiv la om. 'a plantele superioare ele sunt mai puin distincte, deoarece att la speciile dioice, ct i la cele unise=uate P monoice, diferenele dintre e=emplarele mascule sau femele se limitea6 adeseori la structura aparatelor florale. :aptul se corelea6, de altfel, cu e=istena i evoluia paralel a capacitii de regenerare, att pe cale se=uat, ct i pe cale vegetativ mai ales la ngiosperme, ca i cu capacitatea remarcabil a celulelor de a7i pstra timp ndelungat multipotena informaional. 'a animale, caracterele se=uale determinate genetic rmn numai acelea care asigur formarea unui anumit gen de celule se=uale i care condiionea6 deosebiri n structura organelor interne i e=terne de reproducere, implicate n procesul fecundrii. Aceste deosebiri intr n sfera caracterelor e?uale primare, n timp ce caracterele e?uale ecundare, au un anumit rol n reproducerea se=uat, dar nu particip n procesele de gametogene6 i fecundare i nu sunt supuse unui control genetic direct, formndu7se sub influena sistemului 9ormonal 2e=. penaEul la psri, talia, pilo6itatea, vocea la om .a5. Apariia i determinarea se=elor au nceput s fie e=plicate nc din antic9itate printr7o serie de ipote6e naive, cum ar fi aceea a lui *ipocrate privind Iputerea se=ualJ a IsemineiJ la prini sau n legtur cu funciile specifice ale testiculelor, cu direcia din care bate vntul .a. 8rimele cercetri privind mecanismul determinrii se=elor se datoresc citologului *"%1-% . <n anul 1()6 L-'.#%, pe ba6a cercetrilor citologice la diferite insecte din genul Protenor, clarific rolul i semnificaia cromo6omului $ n se=uali6are i introduce termenul de cromozomi ai e?ului, numii ulterior heterocromozomi, gonozomi .a. .e poate vorbi de un determini m cromozomal al e?elor. Asociat cu determinismul cromo6omal e=ist i un determinism genic al se=elor, descoperit la Drosophila de ctre 3!-& "..
HN ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&eterminismul cromo6omal, ca i cel genic, al se=elor trebuie s fie pre6ent i la plantele lemnoase dioice, 'in*o biloba, &a+us bacata, ,uniperus communis, dintre rinoase, Populus alba, P. nigra, P. trenula, )ali+ alba, cer negren"o, dintre foioase. "=istena unui asemenea determinism genetic re6ult cu certitudine din faptul c la nmulirea vegetativ, n ca6ul plopilor negri 9ibri6i, se=ul arborelui mam se pstrea6 cu strictee la descendeni. +7-TIPURI %E %ETER,INIS, CRO,O.O,AL AL SEAELOR 'a plante i la animale s7au pus n eviden mai multe tipuri de determinism cromo6omal al se=elor, tipul Drosophila, cu subtipul Lygaeus i Protenor, tipul bra+as cu subtipurile fluture i pasre i tipul cu 9aploidie mascul. TiB<l ;ro ophila, se caracteri6ea6 prin masculi 9eterogametici i femele 9omogametice i au fost identificate la insecte, mamifere, inclusiv la om, precum i la plante. .e=ul femel, pre6int o perec9e de cromo6omi ai se=ului 2heterozomi5 identici 2$$5, astfel c toi gameii femeli produi de astfel de organisme vor poseda cte un cromo6om $, fiind deci un e? homogametic. .e=ul mascul posed doi cromo6omi se=uali diferii 2$%5, astfel c Eumtate din gamei vor poseda cromo6omul $ i Eumtate cromo6omul %. "ste deci un e? heterogametic. &in unirea n procesul fecundrii a unui gamet femel ce posed cromo6omul $, cu unul mascul ce posed cromo6omul $, va re6ulta o femel 2$$5. &in contr, prin unirea unui gamet femel cu cromo6omul $, cu unul mascul ce posed cromo6omul %, va re6ulta un mascul 2%$5 2fig. 5.1.5. &e obicei, cromo6omul % este mai mic ca dimensiune dect cel $ i posed mai puine gene. <n unele ca6uri cromo6omul % a disprut complet. "ste vorba de subtipul Protenor de determinare a se=elor la care femela este $$ iar masculul $-, avnd deci un cromo6om mai puin 2se ntlnete la lcuste i la nevertebrate5. <n general, la tipul Drosophila, cu subtipurile Lygaeus i Protenor, raportul numrului de masculi i femele numit e?<ratio este egal 21>15 i a fost verificat la numeroase specii de plante i animale 2Melan"rium, !rygonia, Canabis .a5. .e=7ratio dei, n general constant, poate suferi modificri condiionate de factorii de mediu, cum ar fi termo7 i fotoperioada. <n ca6ul tipului de determinism se=ual de tip Drosophila, ca de altfel i a altor tipuri, se=ul se 9otrete n momentul fecundrii P tipul ingamic P n funcie de natura cromo6omilor se=ului din gamei. &e asemenea, din cele de mai sus re6ult c genele care determin se=ul se transmit de la o generaie la alta prin acelai mecanism ca i genele ce specific alte caractere P raportul genotipic i fenotipic se=7ratio 1>1 fiind de factur mendelian. .e=ul mascul 2$%5 se comport ca 9etero6igot dominant, iar se=ul femel 2 $$5 ca 9omo6igot recesiv. <n ceea ce privete determinismul se=ual genetic, la Drosophila doar cromo6omul $ conine gene ale se=ului, respectiv ale feminitii, n timp ce cromo6omul %, este
H8 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
9eterogametic i practic lipsit de gene ale formrii se=ului mascul. <ncrucirile dintre musculie cu numr variabil de cromo6omi $ 2diploi6i i poliploi6i5 i seturi de auto6omi au dovedit c genele determinrii se=ului se gsesc att n 9etero6omi, ct i n auto6omi, iar se=uali6area depinde de balana dintre genele feminitii din cromo6omul $ i genele masculinitii din auto6omi. Aceast teorie a echilibrului genelor $n determinarea e?ului, este valabil n ca6ul Drosophilei, la o serie de animale i probabil, la arborii dioici. TiB<l 0bra?a . <n comparaie cu tipul Drosophila, tipul bra+as de determinism cromo6omal al se=elor se caracteri6ea6 prin se= femel 9eterogametic i se= mascul 9omogametic. Astfel, femelele posed doi cromo6omi ai se=ului diferii 2 Z. sau $%5 fiind deci heterogametici. $asculii sunt homogametici avnd doi cromo6omi ai se=ului identici 2ZZ sau $$5. 8rin fecundarea gameilor femeli cu cromo6omul Z sau %, cu gameii masculi Z sau $, vor re6ulta descendeni masculi 2ZZ sau $$5. &ac ns fecundarea se reali6ea6 ntre femele ce posed cromo6omul . sau %,cu gamei masculi cu cromo6omul Z sau $, vor re6ulta n descenden femele 2fig. 5.D.5. Acest tip de determinare a se=elor este ntlnit la psri, la unele specii de amfibieni i reptile, precum i la unele nevertebrate. Adesea cromo6omul . sau % este mai mic ca dimensiuni dect perec9ea lui 2 Z sau $5, iar n unele ca6uri el a disprut complet. "ste vorba de subtipul fluture, la care femela este Z- sau $-, iar masculii ZZ sau $$. /ele dou tipuri de determinism cromo6omal al se=elor asigur totodat un raport constant i egal ntre se=e 2se=7ratio5 de 1>1. TiB<l de deter#ini"# al "eCel r c< DaBl idie #a"c<lin 2femel Dn i mascul n5. .e ntlnete la diferite specii de 9imenoptere, ca de e=emplu albina 2 pis melli#era5. :emelele provin din ovule fecundate i sunt diploide 2Dn?HD5, iar masculii din ovule nefecundate pe cale partenogenetic i sunt 9aploi6i. $asculul generea6 ns spermato6oi6i normali cu 16 cromo6omi, datorit formrii nucleilor de re tituie, prin care toi cromo6omii dintr7o celul se diriEea6 ctre un singur pol. <n determinismul genetic al se=elor la albine intervin mai multe gene alele, iar femelele diploide sunt 9etero6igote pentru aceste alele, n timp ce masculii, 9aploi6i, sunt 9emi6igoi, inclu6nd o alt alel dect femela. <ncruciarea dintre o femel diploid cu un mascul 9aploid 9eteroalelic, duce la apariia de femele diplogenotipice, motenind att caracterul mamei ct i al tatlui, n timp ce trntorii sunt haplogenotipici, motenind numai caracterul mamei. +9- &ACTORI CARE IN&LUEN'EA. %ETER,INIS,UL GENETIC AL SEAELOR &eterminismul genetic al se=elor i funcionarea sau nefuncuinarea genelor pentru masculinitate sau feminitate sunt influenate de o seam de factori dintre care menionm> cantitatea de citoplasm, modul de via, condiiile de mediu 2temperatura, lumina, umiditatea5, 9ormonii se=uali etc.
H( ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
Cantitatea de citopla m. 'a viermele marin Dinophilus, femele depun dou tipuri de ou> cu mult citoplasm, din care apar femelele i altele mai mici, cu citoplasm mai puin, din care apar masculii. 'a omida proas a steEarului 2Lymantria "ispar5, #'&./*$-&0 a semnalat e=istena unor factori genetici nucleari i citoplasmatici ai se=uali6rii. -nsecta manifest un puternic dimorfism se=ual, masculii fiind 9omogametici 2 ZZ5, iar femelele 9eterogametice 2Z.5 2determinism se=ual tip bra+as5. 8rin ncruciarea unor indivi6i masculi i femeli din rasa european, cu femele i masculi din rasa Eapone6, #'&./*$-&0, a obinut n afar de descendeni de un anumit se= i descendeni interse=uai. 8entru a e=plica fenomenul el presupune c se=ul este determinat de interaciunea dintre factorii masculini6ai 2$5, locali6ai n cromo6omul Z i factorii femini6ai 2:5, locali6ai n citoplasm. Modul de via. &eosebit de interesant este determinarea se=elor la viermele nematod Mermis subnigrescens. Acesta i depune oule pe frun6e care fiind mncate de lcuste aEung n intestinul acestora unde are loc eclo6iunea. 'arvele ptrund apoi n corpul lcustei unde i completea6 de6voltarea, ducnd o via para6itar, viermii prsind la maturitate ga6da pentru a tri liber pe sol. .e=ul viermilor depinde de numrul para6iilor care infectea6 o aceiai lcust> dac numrul este de 17H indivi6i ei devin femele care se reproduc prin partenogene6, dac numrul para6iilor este de K7DH ei se transform o parte n masculi, o parte n femele i o parte sunt interse=uai. <n fine, cnd numrul para6iilor depete DK ei devin toi masculi. "=emplul de mai sus evidenia6 importana modului de via a unor organisme, n procesul de se=uali6are. Condiiile de mediu 'a plante s7a remarcat faptul c sub influena condiiilor modificate de mediu 2lungimea 6ilei, temperatura, umiditatea etc.5, au loc sc9imbri importante privind raportul dintre se=e i modificri profunde ale inflorescenelor. Astfel, la cnep 2 Cannabis sativa5, plant dioic, prin cultivarea sa iarna n ser, sub influena 6ilelor scurte se mrete proporia de plante femele de la 5)T, la 8)7()T. $utaiile suferite de genele care controlea6 organele se=uale, sau anumite condiii de mediu, pot s conduc la apariia de rudimente ale florii femele n floarea mascul sau invers, aEungndu7se uneori s se forme6e gamei masculi n inflorescena femel sau ovule i stigmate n inflorescena mascul 2e=. porumb5. +n arbore monoic cum este molidul de6volt flori femele numai n vrful ramurilor, n timp ce florile mascule sunt plasate lateral pe lugeri. Aceas difereniere strict a unor celule identice ca potenial se=ual genetic se gsesc sub control fi6iologic programat, condiionat de nivelul sinte6ei au=inelor. .7a constatat c au=inele n concentraie de ),1T administrate pe cale artificial alterea6 e=presia se=ului, n sensul femini6rii, n timp ce giberelinele induc o puternic tendin de masculini6are. &etaarea frun6elor tinere dinspre
K) ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
partea superioar a ramurilor, cau6nd reducerea cantitii de au=ine n 6onele apicale, conduce la o masculini6are evident a florilor. -nfluena condiiilor de mediu asupra formrii mugurilor florali nu poate fi contestat la arborii monoici, care aEung s nfloreasc i s fructifice la vrste naintate 2n masivele pduri, la fag, steEari, brad, molid, c9iar la 6)7N) de ani5 i la care nflorirea este periodic. Aormonii e?uali. &eterminismul genetic al se=elor la animalele vertebrate are un caracter comple=, n sensul c diferenierea cromo6omal a se=elor este completat cu un mecanism care desvrete se=uali6area n cursul de6voltrii ontogenetice. 'a mamifere, de pild, 6igotul are o structur cromo6omial bine determinat, fiind genetic mascul sau femel. Aceasta este etapa genetic a procesului de se=uali6are. 'a om, aceast etap ine de la fecundare i formarea 6igotului, pn ce embrionul atinge vrsta de H5 de 6ile. /u toate acestea embrionul i ncepe de6voltarea ca organism 9ermafrodit i numai ulterior din progonada 9ermafrodit, n funcie de informaia genetic a auto6omilor i 9etero6omilor, se de6volt gonadele unise=uate 2ovarele i testicolele5. .e poate deci conc9ide c informaia genetic mai ales a 9etero6omilor determin formarea de gonade unise=uate. Aceasta este etapa gonadic a procesului de se=uali6are care la om ine pn n a 6)7a 6i de de6voltare embrionar. 8rocesul de se=uali6are masculin este continuat apoi cu aEutorul 9ormonilor androgeni elaborai de testicolul embrionar, n timp ce procesul de se=uali6are feminin se continu IpasivJ fr a necesita astfel de 9ormoni. +n argument n acest sens, l constituie castrarea embrionilor n perioada n care organele genitale sunt nedifereniate se=ual i care P indiferent de se=ul genetic P duce la se=uali6area sa feminin. Apariia organelor genitale mascule i femele constituie astfel o nou etap n procesul de se=uali6are a organismelor, etapa hormonal. <n etapa pubertii are loc desvrirea diferenierii se=uale a organismelor sub influena 9ormonilor secretai de ovar 2foliculina i progesteronul5 i de testicole 2testosteronul5 2!A-/+, 1(8)5. 8unerea n eviden a rolului 9ormonilor se=uali la vertebrate s7a reali6at cu aEutorul unor e=periene de castrare, transplantare a gonadelor, parabio6, tratamente cu 9ormoni etc. 21-1 &en #en<l de "eC-linEa!e /romo6omii $ i % conin i alte gene n afara celor se=uale. Aceste gene au tendina s se transmit la descendeni mpreun, legate de se=. Astfel, D. melanogaster conine pe cromo6omul $ peste 1K) de gene care se transmit nlnuit, manifestnd se=7linFage. .e diferenia6 gene complet se=7linFage cu cromo6omul $, gene complet se=7 linFage cu cromo6omul %, gene incomplet se=7linFage cu cromo6omul $ i gene incomplet se=7linFage cu cromo6omul %. Genele complet e?<lin@age se transmit dup mecanisme particulare, n funcie de tipul de determinism se=ual Drosophila sau bra+as.
K1 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
'a D. melanogaster, pe cromo6omul % se gsesc foarte puine gene P gene ale fertilitii masculilor i gene pentru epi P aa c genele de pe cromo6omul $ nu au alele corespondente, fiind 9omo6igote. &e aceea, n ca6ul musculiei de oet, fenomenul complet de se=7linFage nu se manifest numai la cromo6omul $. /a e=emplu, n acest sens, se poate da caracterul culoarea oc9ilor, care, n e=perienele fcute de $#! A%, a permis gsirea unor prime conclu6ii privind se=7 linFage. Astfel, la ncruciarea unei femele cu oc9i roii, normali, cu un mascul cu oc9i albi 2Y9ite eQes P Y5, mutant, n prima generaie s7au obinut numai indivi6i cu oc9i roii. 8rin ncruciarea descendenilor n :D s7a aEuns, conform raporturilor mendeliene la N5T indivi6i normali 2oc9i roii5 i D5T indivi6i cu oc9i albi 2raport H>15, ceea ce dovedete c nsuirea oc9i roii este dominant, iar cea de oc9i albi, recesiv i c genele respective segreg independent. -mportant de reinut este faptul c toi indivi6ii cu oc9i albi erau masculi, n timp ce indivi6ii cu oc9i roii se structurau DUH femele i 1UH masculi 2fig. 5.H.5. <ncrucind femele cu oc9i roii, 9etero6igote, din : 1, cu masculi cu oc9i albi, au aprut n :D 5)T descendeni cu oc9i roii, dintre care 1UD femele i 1UD masculi i 5)T indivi6i cu oc9i albi, de asemenea 1UD femele i 1UD masculi. .7a putut deduce astfel c genele care determin culoarea roie sunt plasate pe cromo6omul $, ntruct transmiterea lor din generaie n generaie urmea6 calea transmiterii cromo6omului $. Ereditatea complet legat de cromozomul F la D. melanogaster, se datorete genelor situate pe segmentul specific, neomolog, a 9etero6omului %. enele % complet se=7 linFage sunt numite gene holandrice, iar modul de transmitere ereditate holandric. "le se motenesc e=clusiv de descendenii masculi P ca6ul genelor care afectea6 forma urec9ilor sau formarea membranelor dintre degetele de la picioare etc. enele incomplet se=7linFage formea6 perec9i de alele n 9etero6omii $ i %, n segmentele lor omoloage. Aa sunt genele mutante care controlea6 daltonismul, retinita pigmentar, un tip de nefrit .a. 0ransmiterea ereditar a caracterelor prin se=7linFage pe cromo6omul $ a fost relevat i la plantele dioice din genurile Melan"rium, /ume+ .a. i nu e=ist motive s se conteste c s7ar putea manifesta i la speciile din genurile Populus sau )ali+. CAPITOLUL 0I N i<ni de !enetic # lec<lar 41 Genetica # lec<lar este acea ramur a biologiei care studia6 ereditatea organismelor la nivel molecular bioc9imic. 'a toate organismele materialul genetic este repre6entat de aci6ii nucleici 2A&% i A!%5. Acetia au capacitatea de a nregistra sub o form codificat bioc9imic informaia genetic, care determin toate caracterele i nsuirile organismelor vii. -:- ACI.II NUCLEICI (I ROLUL LOR GENETIC8 STR C3I,IC
KD ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
8rimele e=periene care urmreau s descopere determinismul genetic al unor caractere la bacterii au fost efectuate de !-::-0* 21(D85. Acesta a inEectat la oareci pneumococi vii neviruleni, mpreun cu pneumococi viruleni, dar care n prealabil au fost omori prin cldur. .7a constatat c oarecii din e=perien au murit de pneumonie. &in animalele moarte au fost i6olai pneumococi viruleni vii. &e aici s7a desprins conclu6ia c pneumococii neviruleni n contact cu IresturileJ pneumococilor viruleni, devin i ei viruleni. &eci, are loc un proces de transformare a pneumococilor neviruleni n pneumococi viruleni 2fig. 6.1.5. 8rocesul de transformare n acest ca6, a fost descifrat, n 1(KK, de ctre A,"!O i colab. care au descoperit e=perimental c acidul de6o=iribonucleic 2A&%5 este capabil s transforme caracterele ereditare de la un tip de pneumococi la altul. +nii pneumococi, notai cu litera I.J, formea6 colonii netede, au o capsul i sunt viruleniA alii notai cu litera I!J alctuiesc colonii rugoase, nu au capsul i sunt neviruleni. &in cau6 c la tipul I.J capsula poate fi format din diferite poli6a9aride, e=ist mai multe tipuri de pneumococi .-, .--,.--- etc. 1 7 pneumococi neviruleniA D 7 pneumococi viruleniA H 7 pneumococi viruleni omori prin cldurA K 7 pneumococi viruleni omori prin cldur mpreun cu cei neviruleni. <n mod spontan, prin mutaie, aceti pneumococi i pot pierde capsula i devin neviruleni de tipul !-, !--, !--- etc. A,"!O i colab. au e=tras A&% din celulele pneumococilor de tipul .---, pe care l7au introdus n mediul de cultur al pneumococilor neviruleni de tipul !-- 2fig. 6.D.5. &up DK 9 s7a constatat c printre pneumococi de tip !-apare i un anumit numr de pneumococi .---. .7a dovedit c pneumococi !-- s7au transformat n pneumococi .--- sub influena A&% de tipul donor. 8neumococii transformai transmit caracterele respective n descendeni. 'a eucariote, primele tentative de transformare genetic s7au fcut la rae de ctre 3"%#-0 i colab., n 1(5(. !aele de ras 8eFing inEectate cu A&% e=tras din testicolele i eritrocitele sngelui rasei 19aFi /ampell au suferit modificri importante n ce privete culoarea ciocului, a penaEului, talia, forma i po6iia capului, comportamentul .a. creindu7se o nou ras de rae, 3lanc9e neige. :enomenul de transformare a fost pus, ulterior, n eviden la numeroase specii de plante i animale fapt ce a demonstrat c A&% repre6int substratul bioc9imic al ereditii, de la virusuri pn la sistemele biologice celulare. A&%7ul constituie, n mod indiscutabil materialul genetic celular, avnd capacitate transformatoare att la microorganisme, ct i la organismele superioare. /antitatea de A&% n celule este constant, spre deosebire de cantitatea de acid ribonucleic 2A!%5 sau proteine, care sufer variaii substaniale. &e asemenea, A&% are o mare stabilitate, ceea ce atest, odat n plus, semnificaia sa maEor de substrat genetic, transmis ca atare de la o generaie la alta. A&% repre6int substratul ereditar universal al ereditii. .tructurile A&% Eoac rol de stocare sau memori6are a informaiei genetice, secvenele succesive de ba6e a6otate constituindu7se n ceea ce se cunoate sub numele de gene.
KH ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
+nele virusuri nu posed A&%, ci A!%, fiind denumite riboviru uri. "videnierea rolului genetic al A!% viral s7a reali6at la virusul mo6aicului tutunului 2,$05. !olul genetic al A!% la ,$0 s7a pus n eviden prin separarea pe cale c9imic a A!% de proteina viral, dup care s7au fcut infecii artificiale cu ambele componente ale virusului. .7a constatat c numai A!% viral are capacitate infecioas. 'a plantele infectate cu A!% a avut loc sinte6a de A!% viral, dar i a proteinei virale. Aceasta dovedete c materialul genetic n ca6ul ribovirusurilor este acidul ribonucleic 2A!%5. 'a ribovirusuri, genele sunt constituite din A!%. 'a viroi6i, organisme mai simple ca virusurile, capabile de a provoca boli la plante, materialul genetic este repre6entat de o molecul de A!%. <n conclu6ie, la unele virusuri i la viroi6i, A!%7ul este materialul genetic cu rol n transmiterea ereditar a caracterelor. Str<ct<ra cDi#ic a aci;il r n<cleici Aci6ii nucleici sunt substane c9imice macromoleculare alctuite din uniti mai simple denumite nucleotide. # nucleotid este alctuit dintr7o ba6 a6otat, un 6a9ar i un radical fosforic. 3a6ele a6otate din molecula aci6ilor nucleici sunt de dou tipuri> purinice i pirimidinice, ele re6ultnd dintr7un nucleu denumit purin i respectiv pirimidin. .tructura molecular a A&%7ului a fost descoperit n 1(5H de ctre LA0.#% i colab. 8urina este un tip de ba6 de a6otai, alctuit dintr7un 9eterociclu format din 5 atomi de carbon i K de a6ot, n timp ce pirimidina are o alctuire ceva mai simpl, fiind o ba6 a6otat format dintr7un 9eterociclu de 6 atomi din care K de carbon i D de a6ot. /ele mai importante ba6e purinice sunt adenina 2A5 i gaunina 2 5. Acestea sunt pre6ente att n molecula de A&% ct i n cea de A!%. /ele mai importante pirimidine sunt> citozina 2/5, i timina 205 n A&%. 'a A!%, n locul timinei se afl uracilul 2+5. ,aharurile care intr n alctuirea aci6ilor nucleici sunt riboza la A!% i dezo?iriboza la A&%. Aceste 6a9aruri sunt pento6e, avnd cte 5 atomi de carbon 2fig. 6.H., 6.K., 6.5.5. 8rin unirea unei ba6e a6otate cu un 6a9ar, ribo6a sau de6o=iribo6a, se obin aa numitele nucleozide. 8rin fosfati6area nucleo6idelor se obin nucleotidele care sunt unitile de ba6 ale aci6ilor nucleici. 8rin nlnuirea nucleotidelor se obin polinucleotide sau acizi nucleici, n care intr mai mult de 1) nucleotide. -$1 ACI%UL %E.OAIRI)ONUCLEIC ?A%N*-%ENATURAREA (I RENATURARE $acromolecula de A&% este bicatenar fiind format din dou lanuri polinucleotidice, nfurate elicoidal n Eurul unui a= comun, formnd un dublu heli?. /ele dou catene ale 9eli=ului de A&% sunt antiparalele. /ele dou lanuri polinucleotidice sunt complementare, n sensul c ntotdeauna o nucleotid care conine o ba6 a6otat purinic se leag cu una ce conine o ba6 a6otat
KK ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
pirimidinic i invers. /a urmare n macromolecula de A&% nu e=ist dect K tipuri de legturi> A70, 07A, 7/, /7 . .tructura bicatenar a A&% se reali6ea6 cu aEutorul unor puni de 9idrogen 7 duble ntre adenin i timin i triple ntre guanin i cito6in. Aceste legturi sunt de natur electrostatic. ;enaturarea i renaturarea 0;6. +n fenomen legat de structura bicatenar a A&% este denaturarea. 8rin ncl6irea unei soluii n care se gsete A&%, cele dou catene se despart i A&%7ul devine monocatenar. &ac se reali6ea6 o rcire brusc a soluiei, macromoleculele rmn sub forma monocatenar i poart denumirea de 0;6 denaturat. &ac rcirea se reali6ea6 treptat, se refac punile de 9idrogen dintre cele dou tipuri de catene complementare i macromoleculele devin bicatenare, re6ultnd 0;6 renaturat. 8e aceast ba6 se pot reali6a hibrizi moleculari dintr7un amestec de catene de A&%, provenind de la diferite specii. 8rin reali6area de 9ibri6i moleculari de tip A&%7A&% de origini diferite se poate determina gradul de complementaritate a nucleotidelor i respectiv nrudirea filogenetic a organismelor de la care s7a preluat A&%7ul. -+-REPLICATIA ,ACRO,OLECULEI %E A%N <n celulele fiecrei specii se gsete o anumit cantitate de A&%, n care se afl sub form codificat informaia genetic. 8entru reali6area divi6iunii celulare este necesar, printre altele, dublarea prealabil a cantitii de material genetic. <n acest fel, celulele fiice vor avea aceeai cantitate de A&% cu celula mam. .inte6a A&% poart denumirea de replicaie deoarece se reali6ea6 dup modelul emicon ervativ 2fig. 6.N.5. 8rin ruperea punilor de 9idrogen, moleculele de A&% se separ n cele dou catene complementare, iar nucleotidele libere din citoplasm se ataea6 pe ba6 de complementaritate de catenele vec9i. ,or re6ulta dou molecule de A&% bicatenar, fiecare avnd o caten vec9e 2care are rol de matri5 i caten nou sinteti6at. <n acest fel se asigur sinte6a noilor molecule de A&% cu mare fidelitate, moleculele7fiice fiind identice cu moleculele7mam. -pote6e privind sinte6a A&% consider c aceasta s7ar reali6a dup tipul con ervativ 2sinte6a Ide novoJ5 sau dup tipul di pe riv 2dispersarea A&% n pri componente5. .tudiul sinte6ei A&% in vivo i in vitro a demonstrat c ea se reali6ea6 dup tipul semiconservativ propus de LA0.#% i /!-/1 deoarece acest mecanism asigur o nalt fidelitate n sinte6a noilor macromolecule de A&%, identice cu cele vec9i. Rinnd seama c sinte6a A&% se reali6ea6 dup sistemul semiconservativ, c n acest proces cele dou catene servesc drept matrie pentru catenele nou sinteti6ate i c prin acest proces informaia ereditar este transmis fidel noilor macromolecule, procesul de sinte6 a A&% a primit denumirea de replicaie. A&% a fost replicat in vitro, ce ctre 1#!%3"! n 1(5K, cu aEutorul en6imelor celulare.
K5 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
--- ACI.II RI)ONUCLEICI ?ARN* Aci6ii ribonucleici 2A!%5 au, n general, o structur monocatenar, fiind alctuii dintr7un singur lan polinucleotidic. "=ist mai multe tipuri de A!%, avnd funcii diferite> )4 0R6 viral constituie materialul genetic al unor ribovirusuri cum sunt> virusul mo6aicului tutunului 2,$05, virusul poliomelitei, virusul gripal .a. *4 0R6 me ager 2A!%7m5 are rol de a copia informaia genetic a unei catene din macromolecula de A&% i, n felul acesta, reali6ea6 ceea ce se c9eam fenomenul tran cripie, o etap n procesul de decodificare a informaiei genetice i de sinte6 proteic. 'a A!%7m succesiunea nucleotidelor este complementar cu aceea a catenei de A&% de la care a copiat informaia. reutatea molecular a A!%7m este variabil, deoarece i mrimea informaiei copiate este variabil. '4 0R6 de tran fer 2A!%7t5 are rolul de a transfera aminoaci6ii la locul sinte6ei proteice. Are o greutate molecular mic i relativ constant, alctuit dintr7o succesiune de N)7() de nucleotide. "ste monocatenar, cu poriuni bicatenare, care formea6 o ti7 i trei bucle mari, fapt care i confer forma de trifoi. -4 0R6 ribozomal 2A!%7r5 intr n alctuirea ribo6omilor i are rol n sinte6a celular a proteinelor. <n molecula sa sunt numeroase plieri neuniforme datorit legturilor dintre nucleotidele complementare +7A sau 7/. .4 0R6 nuclear mic 2A!%7sn5 se gsete n nucleul eucariotelor, legat n mod stabil de proteinele nucleare. Acest tip de A!% este alctuit dintr7o secven de circa 1)) de nucleotide, avnd un rol important n funcionarea nucleului. -/- CO%UL GENETIC SI SINTE.A PROTEICA <n anul 1(5H, dup descoperirea structurii macromoleculei de A&%, s7a lansat supo6iia e=istenei unui cod genetic i c secvena nucleotidelor de7a lungul macromoleculei de A&% trebuie s conin sub form codificat informaia genetic a organismelor. "vident c s7a pus problema legturii dintre secvena celor K tipuri de nucleotide, ce conin diferite ba6e a6otate purinice i pirimidinice 2adenina, guanina, cito6ina i timina5 cu secvena aminoaci6ilor din catenele polipeptidice. .A$#, 21(5K5 a emis ipote6a c n macromolecula aci6ilor nucleici se gsete codificat informaia genetic necesar sinte6ei moleculelor de proteine. $acromoleculele de aci6i nucleici conin un numr mare de nucleotide, astfel c prin modificarea secvenei nucleotidelor se poate nregistra o enorm cantitate de informaie genetic. &ac se consider c o gen este format n medie dintr7o secven de 1))) de nucleotide, numrul posibil de sc9imbri n secvena nucleotidelor este imens, fiind egal cu K1))) sau 1)6)D. 8rin nlocuirea unei singure nucleotide din cele 1))) ale unei gene, se pot produce H))) de tipuri de gene alele. "vident c n felul acesta macromoleculele de aci6i nucleici au o capacitate practic infinit de variaie i respectiv de nregistrare a informaiei genetice.
K6 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
$acromoleculele de A&% conin programul sinte6ei proteinelor, informaia genetic ce determin ordinea de succesiune a aminoaci6ilor. 'egturile dintre secvena nucleotidelor n A&% i succesiunea aminoaci6ilor n molecula proteic se reali6ea6 cu aEutorul codului genetic. +nitile de codificare a informaiei genetice sunt repre6entate de codoni. Codonul este alctuit dintr7o secven de trei nucleotide din macromolecula de A&%, avnd capacitatea de a determina includerea unui anumit aminoacid n molecula proteic. 8rin codificarea celor D) de aminoaci6i care intr n alctuirea proteinelor, e=ist 6K de codoni, fiecare fiind format dintr7o secven de trei nucleotide. -nformaia genetic din moleculele de A&% este mai nti transferat ntr7o macromolecul de A!% mesager 2A!%7m5, prin fenomenul de tran cripie, dup care este decodificat i transformat ntr7 o secven de aminoaci6i prin tran laie 2fig. 6.8.5 <ntre secvena nucleotidelor din A&% i secvena aminoaci6ilor din molecula proteic e=ist o strns corelaie, fenomen denumit colinearitate. 8rin combinarea variat a celor D) de aminoaci6i, prin modificarea secvenei lor n catenele polipeptidice, se poate reali6a un numr imens de proteine. $acromoleculele de A&% sunt alctuite dintr7un numr mare de nucleotide, care sunt ns de numai K tipuri. 8rin modificarea secvenei celor K tipuri de nucleotide, se poate nregistra, cu aEutorul codului genetic, o cantitate imens de informaie genetic. A&%7ul este deci alctuit dintr7o secven de codoni, ce determin succesiunea aminoaci6ilor n moleculele proteinelor. Codul genetic i caracteri ticile ale /odul genetic este alctuit din 6K de codoni, cifra repre6entnd totalitatea combinaiilor posibile a celor K tipuri de nucleotide luate cte H, adic K H .7a reuit descifrarea complet a codului genetic, n sensul c sunt cunoscute toate tripletele de nucleotide 2codoni5 din A!%7m ce codific diferiii aminoaci6i. Aceti codoni sunt formai din K tipuri de nucleotide coninnd ba6ele a6otate adenin, uracil, guanin i cito6in. Adevratul cod genetic coninut n macromolecula de A&% poate fi foarte uor cunoscut prin nlocuirea nucleotidelor din A!%7m 2fig. 6.(.5 cu componentele lor> cito6ina 2/5 prin guanin 2 5, guanina 2 5 prin cito6in 2/5, adenina 2A5 prin timin 205 i uracilul 2+5 prin adenin 2A5. Rinnd seama c e=ist mai muli codoni dect aminoaci6i 2D)5, s7a dovedit e=perimental c mai muli codoni pot codifica un acelai aminoacid. &eci codul genetic este degenerat. &atorit fenomenului de degenerare a codului genetic, un anumit aminoacid poate fi codificat de mai muli codoni diferii. Astfel, leucina este codificat de codonii ++A, ++ , /++, /+/ i /+ .
KN ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
/odul genetic este ne uprapu , adic doi codoni succesivi nu au nici o nucleotid comun i este fr virgul 2citirea informaiei genetice se face continuu> ntre doi codoni succesivi nu e=ist semne de punctuaie5. &in totalul de 6K de codoni ai codului genetic, un numr de 61 codific cei D) de aminoaci6i, iar H codoni 2+AA, +A i + A5 nu codific aminoaci6ii, ci numai marc9ea6 sfritul unui mesaE genetic 2.0#85. /odul genetic este univer al. Acest fapt a fost dovedit prin studiul proteinelor biosinteti6ate n sisteme celulare libere, provenite de la bacterii i de la mamifere, sub influena unor A!% sinteti6ai artificial. .7a constatat c indiferent de originea sistemului celular liber se obin aceleai proteine, fapt ce constituie argumentul c aminoaci6ii ce intr n alctuirea proteinelor respective sunt codificate de aceeai codoni. Rinndu7se seama de universalitatea codului genetic, s7a dedus c are o origine foarte vec9e, lund natere n nsi procesul de apariie a vieii pe pmnt. !ecent, s7a demonstrat e=istena unor e=cepii de la IuniversalitateaJ codului genetic. Astfel, n genomul mitocondriilor 2organite celulare de la eucariote5 codul genetic pre6int mici deosebiri fa de cel IuniversalJ. &e pild, codonul + A, care n nucleu are semnificaia de .0#8, n genomul mitocondrial 2A&%7mt5 codific aminoacidul triptofan. "=istena unor deosebiri minore n A&%7mt nu afectea6 n ansamblu, universalitatea codului genetic, acelai la procariotele acelulare i celulare, precum i la eucariote. # alt caracteristic a codului genetic este modalitatea n care se reali6ea6 descifrarea mesaEului genetic coninut ntr7o succesiune de nucleotide. .7a demonstrat c citirea mesaEului genetic se face ntr7un singur sens, astfel c, absena unei singure nucleotide 2deleia5 sau adugarea unei nucleotide 2adiia5 face ca mesaEul s fie citit eronat, n continuare. -2-&UNCTIILE ,ATERIALULUI GENETIC ?TRANSCRIPTIA SI TRANSLATIA IN&OR,ATIEI GENETICE* !e6ultatele cercetrilor privind funciile materialului genetic pot fi sinteti6ate n relaia A&% A!% proteine 2fig. 6.1)5. /onform acesteia informaia genetic se reproduce prin replicaie i este decodificat 2transformat ntr7o protein sau en6im specific5 prin tran cripie i tran laie. "ran cripia constituie fenomenul prin care informaia unei catene de A&% este transmis la A!%7mesager 2A!%7m5, precum i altor tipuri de A!%. "ran laia nseamn transformarea unei secvene de nucleotide i respectiv de codoni din A!%7m ntr7o secven de aminoaci6i n catena polipeptidic. &up cum se tie, proteinele, care au un rol e=trem de important structural i funcional, sunt foarte variate n natur. "le repre6int, de regul, circa 5)T din substana uscat a celulelor. +nele proteine, cum este colagenul, au rol n reali6area structurilor organismului, iar altele, cum sunt enzimele, au rol de a catali6a reaciile metabolice. .inte6a proteinelor in vivo se reali6ea6 pe ba6a informaiei genetice din aci6ii nucleici.
K8 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
8n n pre6ent au fost identificate peste 1)).))) proteine diferite, vegetale i animale. <n linii mari, toate aceste proteine sunt alctuite din variaia secvenei a D) de aminoaci6i. <n procesul de sinte6 proteic la nivel celular, intervin trei tipuri de aci6i ribonucleici> A!%7mesager 2A!%7m5, A!%7ribo6omal 2A!%7r5 i A!%7solubil 2A!%7s5, fiecare avnd un rol bine determinat. !olul A!% n decodificarea informaiei genetice a fost pus n eviden de 3!A/*"0 i colab. 21(5)71(555, care au demonstrat c n celul sinte6a proteic este nsoit de o mrire considerabil a cantitii de A!%. !ecent s7a descoperit c unele ribovirusuri, la care materialul genetic este o molecul de A!%, sunt capabile s determine n celula respectiv sinte6a unui A&% cu aEutorul cruia se replic. "ste pentru prima oar cnd se demonstrea6 e=perimental c A!%7viral 2A!%7v5 poate servi ca matri pentru sinte6a A&%7ului. :enomenul poart denumirea de rever tran cripie sau inver tran cripie. -4-ETAPELE SINTE.EI PROTEICE &ependena sinte6ei proteice de informaia genetic din nucleu a fost pus n eviden la alga monocelular cetabularia me"iteraneea. &ac se ndeprtea6 nucleul celular, biosinte6a proteinelor continu ctva timp n celula anucleat a algei, ns cu vite6 redus. &up apro=imativ D) de 6ile, activitatea biosintetic ncetea6 complet i alga anucleat moare. &ac ns n acest timp se introduce un nucleu n citoplasma respectiv, n cteva minute alga i reia pe deplin activitatea. &rima etap n procesul de sinte6 proteic o constituie transcripia informaiei din A&% n A!%7m. :enomenul de transcripie a informaiei genetice de la A&% la A!% se reali6ea6 cu aEutorul en6imei A!% polimeraza. A!%7m copia6 informaia genetic numai a unei catene din macromolecula de A&%. <n celulele procariotelor, A!%7m copia6 informaia genetic a mai multor gene adiacente care alctuiesc un operon. /a urmare, se sinteti6ea6 mai multe proteine, de care celula are nevoie la un moment dat. 8e msur ce se sinteti6ea6 moleculele de A!%7m, ncepe sinte6a catenelor polipeptidice. 'a eucariote, A!%7m copia6 de regul informaia genetic a unei singure gene. Acest A!%7m, dup ce sufer unele modificri prin eliminarea secvenelor non7 informaionale, migrea6 n citoplasm, unde are loc sinte6a proteic. 8rin transcripia informaiei genetice se nelege nu numai sinte6a A!%7m ci i a celorlalte dou tipuri de aci6i ribonucleici 2A!%7r i A!%7t5, care sunt necesari pentru reali6area sinte6ei proteice. 0 doua etap a sinte6ei proteice este repre6entat de tran laie, n urma creia o secven de nucleotide din A!%7m este transformat ntr7o secven de aminoaci6i n molecula proteic. A!%7m se cuplea6 cu ribo6omii din citoplasm formnd poliribozomi. /oncomitent are loc activarea aminoaci6ilor 2AA5 din citoplasm prin legarea lor de A08 2adeno6intrifosfat5, substan c9imic ce servete ca donator de energie.
K( ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
/ele trei fa6e ale biosinte6ei proteice pot fi redate sintetic astfel> min oacil sin teta6a AA_A$8@8_8 $1 AA + A08 a -n aceast fa6 un aminoacid oarecare AA este activat n urma reaciei cu molecula de A08 donatoare de energie sub influena en6imelor denumite aminoacilsinteta6e. /a urmare, aminoacidul se leag de A$8 2ade6inmonofosfat5, iar dou grupuri fosfat sunt puse n libertate. min oacil sin teta6e AA_A!%7t@A$8 +1 AA_A$8@A!%7t a <n aceast fa6 are loc transferul aminoaci6ilor activi la A!%7t, sub influena acelorai en6ime din etapa precedent. /u aEutorul moleculelor de A!%7t aminoaci6ii sunt transferai la locul sinte6ei proteice n ribo6omi. era6e lim AA1_AAD@A!%t1@A!%7tD -1 AA1_A!%7t1@AAD_A!%7tD peptidpo <n aceas fa6, aminoaci6ii, de e=emplu, AA1 i AAD se unesc ntre ei prin legturi peptidice cu aEutorul en6imelor peptidpolimeraze. .e formea6 n acest fel catene polipeptidice, iar moleculele de A!%7t sunt puse n libertate i sunt reciclate, adic refolosite n procesul sinte6ei proteice. &e asemenea i ribo6omii sunt reciclai n cursul sinte6ei proteice. -5GENA1 STRUCTURA SI &UNCTII8 TIPURI <n concepia clasic, gena era definit de ctre ;#*A%%."% 21()(5, ca unitate a materialului genetic, locali6at n cromo6omi. <n organismele 9aploide genele se pre6int sub form simpl, iar n cele diploide sub form de alele. 0ipul primar al genei 2tipul slbatic5 se modific prin mutaii formnd una sau mai multe alele ce afectea6 acelai caracter. <n ca6ul organismelor diploide descendenii primesc numai cte un membru al perec9ii respective de alele, de la fiecare genitor. <n concepia clasic, gena are trei trsturi de ba6> - uniformitatea funcional, n sensul c determin producerea unui efect fenotipic A - unitate mutaional, prin care gena normal ce determin tipul slbatic se transform prin mutaii n alela, sau alelele sale, astfel c este afectat caracterul respectiv A - unitate de recombinare genetic, prin care genele se pot transfera de pe un cromo6om pe perec9ea sa, prin fenomenul de crossing7over. enele, pe ba6a locali6rii lor pot s fie autozomale i heterozomale. &eterminarea po6iiei unei gene ntr7un anumit cromo6om a fcut posibil alctuirea hrilor genetice. .ub aspectul manifestrii lor genele pot s fie recesive, dominante, codominante, epistatice, 9ipostatice, complementare sau indiferente. <n timp ce genele nucleare se transmit la descendeni i segreg dup tipul mendelian, genele e?tranucleare pre6int un tip de motenire nemendelian. <ntre cele dou tipuri de gene de la organismele eucariote poate e=ista un fenomen de interaciune, n sensul c cele nucleare pot determina funcionarea sau nefuncionarea celor e=tranucleare, mpreun putnd produce un anumit fenotip.
5) ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
Apogeul n concepia clasic despre gen a fost repre6entat de ipote6a o gen < o enzim, elaborat de 3"A&'" i 0A0+$ 21(K15. Aceast ipote6 poate fi sinteti6at astfel> &oate procesele biochimice "in organisme sunt controlate genetic, #iecare reac0ie "intr(un lan0 metabolic #iin" "eterminat1 primar "e o gen1. 2ntre gene 3i en4imele respective e+ist1 raportul "e 565. Prin muta0ia unei singure gene are loc blocarea sinte4ei en4imei corespun41toare 3i a reac0iei biochimice catali4at1 "e ea. Ca urmare are loc blocarea 7ntregului lan0 metabolic. 8pote4a consi"er1 c1 #iecare gen1 controlea41 sinte4a, #unc0ionarea 3i speci#icitatea unei anumite en4ime. %oiunea de gen a evoluat foarte mult odat cu apariia geneticii moleculare i a perfecionrii metodelor de investigaie la nivel molecular. Gena $n concepia actual poate fi definit drept un segment al macromoleculei de A&% 2sau A!% n ca6ul unor virusuri5, format dintr7o anumit secven de nucleotide, care acionea6 ca o unitate funcional i care conine secvena nucleotidelor ntr7o molecul de A!%7m 2transcripia genetic5 i respectiv a aminoaci6ilor ntr7o caten polipeptidic 2translaia genetic5 ena este alctuit dintr7un mare numr de subloci potenial mutabili, dispui linear ntr7o anumit ordine i ntre care poate avea loc fenomenul recombinrii genetice. &imensiunea genelor este variabil, n funcie de cantitatea de informaie genetic pe care o posed. 'a bacterii s7a calculat c n medie o gen este format dintr7o secven de ())71.5)) nucleotide, fiecare aminoacid fiind controlat genetic de o triplet de nucleotide denumit codon. &ac o protein este alctuit dintr7o singur caten polipeptidic sau din mai multe dar identice, ea este codificat de o singur gen. <n ca6ul cnd molecula proteic este format din mai multe catene polipeptidice nonidentice, ea este codificat de mai multe gene. &e e=emplu, 9emoglobina A este alctuit din K catene polipeptidice, identice dou cte dou 2` i a5, ea fiind codificat de dou gene diferite. .ub aspect funcional, genele pot fi clasificate n K categorii > )4 Gene tructurale care determin secvena aminoaci6ilor ntr7o caten polipeptidic, astfel c ntre secvena nucleotidelor n acidul nucleic i cea a aminoaci6ilor din proteina corespun6toare se observ fenomenul colinearitii. *4 Gene reglatoare, au rolul de a controla sinte6a proteic la nivelul celulei, n funcie de condiiile de mediu e=tracelular sau de necesitile funcionale ale celulei. '4 Gene arhitecturale care asigur integrarea proteinelor sinteti6ate n structurile celulare. -4 Gene temporare care activea6 cele H gene anterioare, pe ba6a unui program n timp i spaiu, astfel c n organism se reali6ea6 fenomenul citodiferenierii. LA&&-% 0#% 21(655, a denumit ntreaga serie de procese bioc9imice care duc de la gen la caracterul fenotipic respectiv i tem de aciune a genelor.
51 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
<n timp ce la procariote genele sunt formate dintr7o secven de nucleotide continu, ce codific o secven de aminoaci6i, la eucariote genele sunt alctuite din segmente informaionale, separate de segmente non7informaionale. &e e=emplu, gena ce determin sinte6a ovalbuminei la gin este constituit din IbuciJ pre6entnd ntreruperi de secvene de nucleotide care este transcris n A!%7m. Aceasta nseamn c n apte regiuni ale genei e=ist inserii de secvene de nucleotide care nu sunt transcrise n A!%7 m. /a urmare gena este alctuit din segmente informaionale, separate prin segmente de A&% non7informaional, sau silenios. .ecvenele de nucleotide non7informaionale incluse n gena respectiv se numesc introni. Au o mrime variabil ntre H)) i 1.K)) perec9i de nucleotide. !egiunile intercalare se numesc e?troni i ele constituie cu adevrat gena. <n genomul eucariotelor e=ist un numr relativ mic de gene, comparativ cu cantitatea total de A&%. &e e=emplu, la om, s7a calculat c numrul posibil de gene ar fi egal cu H1)6. <n realitate, numrul de gene este mult mai mic, fiind egal cu 5 1)K. Aceasta nseamn c numai o mic parte din genomul uman este constituit din gene funcionale, n timp ce cea mai mare parte din genom este constituit din A&% non7 informaional, cu alte roluri. /.-.). #unciile genelor i dogma central a geneticii enele au dou funcii> autocatalitic i 9eterocatalitic. &ogma central a geneticii const n faptul c informaia genetic se gsete n A&%, ea putnd s fie replicat 2funcie autocatalitic5 i decodificat prin transcripie i translaie 2funcie 9eterocatalitic5. /a urmare, flu=ul de informaii este unidirecional > A&% A!% P proteine. #uncia autocatalitic a genelor. /onst n capacitatea lor de a se autoreplica cu mare fidelitate, astfel c n procesul divi6iunii celulele fiice motenesc, de regul, aceleai gene e=istente i n celula mam. 'a organismele pluricelulare, fiecare celul a organismului posed totalitatea genelor caracteristice speciei respective, numai c n celule speciali6ate funcionea6 anumite gene, restul gsindu7se n stare represat. 'a plante s7a demonstrat c att celulele diploide ale organismului, ct i cele 9aploide, sunt capabile s regenere6e n culturi celulare ntreg organismul. &eoarece la maEoritatea organismelor materialul genetic este repre6entat de A&% i numai n ca6ul unor virusuri este repre6entat de A!%, funcia autocatalitic a genelor este repre6entat de procesul de replicaie a aci6ilor nucleici. Acest proces se reali6ea6 dup tipul emicon ervativ, prin care moleculele de A&% nou sinteti6ate sunt de fapt numai pe Eumtate, deoarece ele sunt formate dintr7o caten polinucleotidic vec9e i una nou sinteti6at. "=istena complementaritii nucleotidelor de7a lungul macromo7leculei de aci6i nucleici, permite sinte6a materialului genetic, cu o mare fidelitate. %umai aa se poate e=plica stabilitatea relativ a organismelor vii, transmiterea informaiei genetice n cursul generaiilor succesive.
5D ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
#uncia heterocatalitic a genelor. /onst n capacitatea lor de a determina sinte6e specifice de proteine, en6ime i alte biomolecule. Aceasta nseamn c informaia genetic pe care o conine fiecare gen este la un moment dat decodificat i transformat ntr7o secven de aminoaci6i, adic n catene polipeptidice. <n fiecare celul de tip procariot sau eucariot, genele se gsesc, de regul, ntr7un singur e=emplar sau form de alele, n timp ce numrul moleculelor proteice este foarte mare, de 6eci sau sute de mii. Aceasta nseamn c decodificarea informaiei genetice coninut n moleculele de A&% se reali6ea6 cu o vite6 foarte mare, nct celulele pot sinteti6a rapid cantiti mari de molecule proteice. 8entru aceasta e=ist un i tem de amplificare, prin care genele sunt copiate n numeroase e=emplare de A!%7m prin fenomenul de transcripie i apoi prin translaie sunt transformate n secvene de aminoaci6i, adic n catene polipeptidice. !ecent s7a descoperit c la eucariote genele cuprind secvene de nucleotide informaionale denumite e?oni i secvene non7informaionale denumite introni. Astfel, gena este alctuit din mai multe buci, din care numai e=onii sunt transcrii n A!%7m i informaia lor genetic este decodificat i transformat n segmente de aminoaci6i. <n procesul de transcripie intronii sunt eliminai. &e e=emplu, gena ovalbuminei, a proteinei din albuul oulor de gin, este format dintr7o secven de 8 e=oni i N introni, care alternea6. /a urmare, genele de la eucariote sunt mult mai mari dect cele de la procariote, deoarece au segmente de A&% non7 informaional. Acest ultim tip de A&% are rol n procesul de evoluie prin duplicarea genelor. enele de la eucariote au o structur discontinu sau n mo6aic. /.-.*. Gene uprapu e. 'a bacteriofagul p9i= 1NK, care are un genom circular, s7au descoperit gene suprapuse. ena A a acestui virus bacterian este mai mare, iar gena 3 de dimensiuni mai reduse, fiind inclus n gene A. &e asemenea genele & i " sunt suprapuse 2fig. 6.11.5. Aceasta nseamn c sinte6a A!%7m poate ncepe din dou puncte diferite ale aceleai gene, astfel c se pot sinteti6a dou catene polipeptidice de mrimi diferite. /.-.'. & eudogene. <n genomul unor eucariote au fost evideniate pseudogene, adic nite gene relicte, care i7au pierdut funciile i care au numai rol n meninerea ar9itecturii moleculare a cromo6omilor. Astfel de gene se regsesc n familia genelor 9emoglobinelor, a imunoglobinelor etc. cu care se nrudesc structural. :iind nefuncionale, pseudogenele acumulea6 mutaii cu o frecven mrit. /.-.-. Elemente genetice tran pozabile Elementele genetice tran pozabile sau transpo6onii sunt segmente de A&% de N5)7 K).))) perec9i de ba6e, capabile s circule n cadrul genomului att la procariote, ct i la eucariote i s se insere n diverse locusuri. "le pot determina mutaii genice, restructurri cromo6omale, activarea unor gene silenioase, inactivarea unor gene etc. 0raspo6onii sunt de dou tipuri >
5H ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
- tra pozoni impli, mai mici ca dimensiuni i care conin numai gena traspo6a6ei, en6im cu aEutorul creia se reali6ea6 transpo6iia A - tran pozoni compleci, de dimensiuni mai mari, care pe lng gena traspo6a6ei conin una sau mai multe gene care sunt transpo6ate dintr7un locus n altul al genomului. -nducerea transpo6iiei se reali6ea6 n condiii de stress provocat de agenii fi6ici 2radiaii, ocuri de temperatur5 i c9imici 2substane mutagene, poluante etc.5 sau prin cultura de celule i esuturi pe medii artificiale. <n aceste condiii se produce o destabili6are a genomului, fapt ce determin o mare variabilitate genetic. Aceasta permite o capacitate mrit de adaptare a organismelor la condiiile nefavorabile de mediu i bineneles supraviauirea. "lementele genetice transpo6abile au un rol important n evoluia rapid a organismelor vii n condiii de stress. CAPITOLUL 0II 51 Ereditatea eCtran<cler -7- GENE EATRANUCLEARE <n celulele eucariotelor marea maEoritate a genelor, respectiv a materialului genetic sunt locali6ate n nucleu. /a urmare, genele nucleare se manifest n conformitate cu legile mendeliene i cu teoria cromo6omial a ereditii. # mic parte din materialul genetic celular se gsete ns plasat n citoplasm, alctuind ereditatea e?tracromozomial sau citopla matic. :enomenul ereditii e=tranucleare este determinat de pre6ena n citoplasma celulelor a unor gene denumite gene e?tranucleare sau plasmagene, spre deosebire de genele nucleare sau cromogene. <n timp ce o mic parte din fenomenele de ereditate e=tranuclear sunt controlate e=clusiv de genele citoplasmatice, n ca6ul maEoritii fenomenelor de acest tip, au un control dublu re6ultat din interaciunea cromogenelor i plasmagenelor. &eterminanii genetici necromio6omiali pot fi clasificai, dup natura lor, n trei grupe > 15 ene necromo6omiale locali6ate n diferite organite de tipul cloroplastelor i mitocomdriilor A D5 ene necromo6omiale locali6ate n particole infecioase stabili6ate n celul 2particole Fappa i lambda la parameci, particole sigma i cele ce modific se=7 ratio la Drosophila etc.5 A H5 ene necromo6omiale plasate n constituieni citoplasmatici foarte mici, nedetectabili citologic 2gene care determin androsterilitateea citoplasmatic5. B.).). Genele mitocondriale i cloropla tice $itocondriile i cloroplastele sunt organite celulare care conin A&% sub forma unui singur cromo6om, de form circular i care se replic independent de materialul genetic din nucleu. Acest A&% e=tranuclear se deosebete de cel nuclear prin greutatea molecular i prin raportul ba6elor A@0U @/.
5K ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
<n cloroplaste i n mitocondrii se gsesc ribo6omi asemntori celor bacterieni i se reali6ea6 sinte6a unor proteine, pe ba6a informaiei genetice din A&% propriu. Genele mitocondriale. :iecare celul vegetal sau animal conine circa 1)) de mitocondrii, ns n unele ca6uri numrul lor este mult mai mare. &e e=emplu, n celulele 9epatice de la mamifere e=ist circa 8)) de mitocondrii. <n mitocondrii se gsete un tip special de A&% mitocondrial 2A&%mt5, n care se gsesc n special genele ce codific en6imele necesare respiraiei celulare. <n genomul mitocondrial de la om se gsesc un numr de HN de gene. Genele cloropla tice. /loroplastele sunt organite celulare n care se gsete clorofila, pigmentul verde cu rol esenial n fotosinte6. %umrul de cloroplaste per celul vegetal varia6 de la 1 la alga )pyrogira, la H)75) n frun6ele plantelor superioare. <n cloroplaste se gsete un tip special de A&% cloroplastic 2A&%cp5. /antitatea de A&%cp este de regul mai mare dect cea din mitocondrii, astfel c pot fi codificate 1))7 15) de polipeptide diferite. A&%cp alctuiete un singur cromo6om i deci, un singur grup de linFage. $itocondriile i cloroplastele sunt transmise ereditar e=clusiv pe linie matern. -9 ERE%ITATEA %E TIP ,ATERN /#!!"%. 21()D5 a studiat la planta Mirabilis jalopa 2barba mpra7tului5 un fenomen de apariie a unor ramuri pe care frun6ele erau de culoare alb sau erau de tip amestecat, regiuni albe alternnd cu cele ver6i 2mo6aicate5 Acest ultim tip de frun6e l7a denumit albomaculatu , i se transmite n descenden pe linie matern, fenomen care a fost pus n eviden prin efectuarea de ncruciri ntre tipul normal de plante, albinotice i cele albomaculatus .e observ, c descendenii seamn cu forma matern i c numai n ca6ul florilor materne de tip albomaculatus se produce o segregare. Aceast segregare se datorete faptului c pe ramurile de tip albomaculatus e=ist att celule cu cloroplaste, ct i celule lipite de cloroplaste. 8lantele albinotice neavnd posibilitatea de a reali6a fotosinte6a, piereau de timpuriu. 0ransmiterea ereditar pe linie matern a caracterelor se datorete faptului c cloroplastele se gsesc e=clusiv n citoplasm, se reproduc independent de nucleu i 6igotul motenete tipul de plastide ale mamei. /au6a o constituie faptul c n sacul embrionar se afl primordiile cloroplastelor n citoplasma oosferei, n timp ce nucleii spermatici care reali6ea6 fecundarea sunt lipsii de astfel de primordii. &eosebiri importante ntre 9ibri6ii reciproci, datorit influenei materne au fost semnalate i la animale. &e e=emplu, din ncruciarea unui iepe 2E9uus caballus, Dn?6K5, cu un asin 2E. asinus, Dn?6D5 se obine catrul 2Dn?6H5A din ncruciarea invers dintre o mgri i un armsar re6ult bardoul 2Dn?6H5. <ntre catr i bardou e=ist deosebiri nsemnate n ceea ce privete talia, culoarea, puterea de munc etc. dei ambii 9ibri6i au Dn?6H de cromo6omi.
55 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
%on7identitatea 9ibri6ilor reciproci interspecifici ne se poate e=plica dect datorit e=istenei unor gene e=tranucleare, care se transmit pe linie matern. 51-1 ,er ! nia +n e=emplu interesant de ereditate e=tranuclear l constituie fenomenul de merogonie, prin care se nelege obinerea unor 9ibri6i prin fecundarea unei ovule enucleate cu un spermato6oid normal, 9ibri6i care manifest multe caractere materne. 3#,"!- 218((5 a demonstrat acest lucru prin introducerea ntr7o ovul enucleat de arici de mare a unor spermato6oi6i de la crinul de mare, obinnd larve 9aploide care nu aveau dect o garnitur de cromo6omi provenit de nucleul patern. 'arvele 9aploide nu erau e=clusive de tip patern, dei cromo6omii proveneau e=clusiv de la forma tat, ci pre6entau i caractere materne transmise din citoplasm 2!A-/+, 1(8)5. :enomenul de transmitere a unor caractere prin intermediul citoplasmei materne se numete matroclinie. :aptul este e=plicabil avnd n vedere c celulele se=uale femele conin o cantitate sporit de citoplasm, n comparaie cu cele mascule, ceea ce asigur transmiterea ereditar a unor anumite nsuiri. 'a mamifere organismul poate influena de6voltarea 9ibridului n cursul vieii intrauterine. &e asemenea, la plantele superioare, 6igotul ncepe s se divid imediat dup fecundare, formnd embrionul nc din perioada cnd acesta se afl n organismul matern. 8e de alt parte, la ngiosperme endospermul este format din celule triploide 2Hn5, cu dou garnituri de cromo6omi 2Dn5 de origine matern i numai o garnitur 2n5 de origine patern, ceea ce face ca influena endospermului s fie mai pronunat pe linie matern. "senial ns n ereditatea e=tranuclear este faptul c n citoplasm se locali6ea6 genomuri specifice 2cloroplaste, mitocondrial5 sau factori genetici necromo6omali, cu aparat genetic propriu, care au rol direct n ereditate. 51/1 Gene eCtran<cleare l cali;ate Gn Bartic le inHeci a"e <n diferite organisme au fost evideniate gene necromo6omiale locali6ate n particole de tip infecios care sunt particolele Fappa 215, lambda 2b5 i miu 2c5 la parameci, particole care afectea6 se=7ratio i cele de tip sigma la Drosophila melanogaster etc. 'a parameci s7au pus n eviden mai multe particole infecioase. .#%%"3#! 21(K55 a studiat la Paramecium aurela modul cum se produce segregarea la ncruciarea ntre dou tipuri de indivi6i > tipul Ire6istentJ care segreg n mediul nconEurtor o substan to=ic denumit paramecin, care nu aparine tipului Isensibil J. /apacitatea de a segrega paramecina se datorete unor particole Fappa aflate n citoplasm i care se transmit pe linie matern, lipsind complet la cele sensibile. /:-GENE EATRANUCLEARE NELOCALI.ATE 8e lng determinani genetici e=tranucleari locali6ai n diferite organite celulare e=ist, de asemenea, o seam de fenomene de ereditate e=tranuclear crora nu li s7a descoperit suportul celular corespun6tor. pentru aceste fenomene poate fi citat i andro teriltatea citopla matic la porumb, sorg, ceap, petunii etc.
56 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
Androsterilitatea sau sterilitatea mascul face ca poleni6area strin s devin obligatorie, deoarece gametul mascul 2polenul5 este nefuncional. Androsterilitatea duce la modificri profunde ale florii i n special a organelor se=uale mascule 2stamine, grunciori de polen5, favori6nd apariia polenului steril, incapabil de fecundare. :enomenul androsterilitii citoplasmatice a fost descoperit n 1()K de /#!!"%. la planta )atureja hortensis. +lterior fenomenul androsterilitii a fost remarcat la mai multe specii de plante > ceap, porumb, in, sorg, sfecla de 6a9r, gru .a. studiul acestor plante au evideniat trei tipuri de androsteri ereditari 2fig. N.1.5 i anume > citoplasmatic, nucleo7citoplasmatic i nuclear. 0ndro teriltatea nuclear 2tipul -5 este determinat de gene recesive locali6ate n nucleu 2msms5. Aceste plante nu se pot reproduce singure neavnd polen i de aceea pentru a le pstra ele se ncruciea6 cu plante androfertile 9etero6igote 2$sms5, obinndu7se n descendena :1, 5)T plante 9omo6igote androsterile 2msms5 i 5)T plante 9etero6igote 2$sms5 androfertile. 0ndro terilitatea citopla matic 2tipul --5 este determinat de gene locali6ate n citoplasm. prin ncruciarea acestor plante androsterile 2.5, transmis prin citoplasm, cu plante normale fertile 2:5, n descenden domin androsteriltatea 2.5 transmis prin citoplasm. /a urmare, plantele ce posed acest tip de androsteriltate se reproduc numai pe cale vegetativ sau prin ncruciri cu alte plante androfertile. .terilitatea mascul citoplasmatic poate fi transmis de la un soi la altul prin ncruciri repetate, n care genitorul patern se folosete mereu soiul ce trebuie transformat. &e e=emplu, soiul de ceap /rQstal La= poate fi transformat n soi androsteril prin ncruciarea cu soiul !ou italian 2cu androsterilitate citoplasmatic5 2fig. N.D.5 :olosind ca genitor matern soiul !ou italian i ca genitor patern /rQstal La= se obine n prima generaie androsteril, care este n ceea ce privete nucleul, 5)T de tip /rQstal La=. retoncrucind aceast generaie 2:15 cu /rQstal La=, descendena va fi androsteril dar cu nucleul n proporie de N5T de tipul /rQstal Ya=. repetnd retroncruciarea mai multe generaii se obine o plant care va fi androsteril, dar cu genomul de la /rQstal La=. "=periena pre6entat constituie o certitudine n ceea ce privete responsabilitatea plasmagenelor n e=presia caracterului de androsterilitate. Androsterilitatea citoplasmatic poate fi utili6at cu succes n producerea de semine 9ibride la speciile la care plantele : 1 se cultiv pentru diverse organe vegetative, cum sunt rdcinile, tulpinile, frun6ele sau florile. 8lantele 9ibride : 1 sunt viguroase, pre6entnd organe vegetative bine de6voltate. 0ndro terilitatea nucleo<citopla matic 2tipul ---5 este determinat de interaciunea unor factori ereditari, situai att n nucleu, ct i n citoplasm. Acest tip de androsterilitate difer n manifestare fa de cea citoplasmatic prin aceea c descendentele plantelor androsterile nu sunt n mod obligatoriu androsterile.
5N ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
8rin ncruciarea plantelor androsterile ca genitori materni cu plante fertile 2:5 9etero6igote 2!frf5 se obine o descenden care n : 1 este 5)T androfertil 2:, !frf5 i 5)T steril 9omo6ogot 2., rfrf5. <n acest fel tipul de androsterilitate poate fi pstrat la descendeni. <n sfrit, dac se ncruciea6 plante androsterile 2., rfrf5 cu plante androfertile dar care nu au capacitatea de restaurare a polenului 2:, rfrf5 se obine n : 1 o descenden androsteril i 9omo6igot 2., rfrf5, deoarece, dup cum s7a v6ut, androsterilitatea determinat de factori din nucleu se transmite ca un caracter minor. Acest tip aparine de fapt androsterilitii citoplasmatice. Androsterilitatea de tipul --- 2nucleo7citoplasmatic5 este utili6at n producerea de 9ibri6i la porumb, sorg i alte plante, avnd importan economic. 5141 Caracteri"ticile ereditii cit Bla"#atice <n general, fenomenul ereditii citoplasmatice se caracteri6ea6 prin > transmitarea caracterelor n alte proporii dect cele mendeliene, i anume n mod uniparental, adic de la printele care particip cu cea mai mare cantitate de citoplasm - manifestarea n :1 a caracterelor genitorului matern, indiferent de constituia genetic a organismelor respective A - fenomenul de linFage este absent vis7d7vis de grupele repre6entate de cromo6omii nucleari, fapt ce face s nu se poat ntocmi 9ri genetice pentru genele necromo6omiale A - manifestarea unor caractere fenotipice depin6nd de constituia genotipic a organismului matern, independent de genotipul propriu A - posibilitatea apariiei mutaiilor spontane sau induse artificial la genele e=tranucleare. # seam de cercetri relativ recente au demonstrat e=istena n citoplasm a unui aparat genetic propriu, realtiv independent de cel nuclear. &eosebirile dintre A&% nuclear i A&% din organitele celulare se manifest n imposibilitatea obinerii de 9ibri6i moleculari ntre A&% nuclear i A&% din organite. CAPITOLUL 0III 71 ReBr d<cerea Blantel r de c<lt<r 71$1 Si"te#ele de reBr d<cere i i#Blicaiile l r !enetice # variabilitate genetic corespun6toare nu poate fi creat fr e=istena reproducerii se=uate. $aEoritatea plantelor de cultur se reproduc pe cale se=uat, prin fu6iunea a doi gamei identici sau diferii din punct de vedere genetic, pentru a da natere unui 6igot. <n general, suprafaa receptoare a stigmatului n acel moment este apt de a primi polen de la planta care7l poart 2autopolen5, sau polenul plantelor vecine 2alopolen5. <n aceast situaie, n mod normal, sunt reali6ate autofecundri i fecundri ncruciate. <n cele
58 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
mai multe ca6uri reglrile biologice impun o predominan a unuia sau a celuilalt sistem de poleni6are, iar n funcie de natura genetic a gameilor vor re6ulta indivi6i 9omo6igoi sau 9etero6igoi 2.A,A00-, 1(8H5. &up modul n care are loc poleni6area i fecundarea, speciile se mpart n dou grupe> autogame i alogame. 0rebuie menionat faptul c autogamia i alogamia nu este perfect, n natur e=istnd specii ce manifest i un anumit grad de auto7 sau alogamie.<n unele ca6uri, speciile au scpat se=ualitii prin adaptarea unor regimuri de reproducere ase=uat, sau c9iar pe calea multiplicrii vegetative /$-)A.ELE GENETICE ALE PLANTELOR AUTOGA,E1 TEORIA LINIILOR PURE .peciile autogame au n general flori 9ermafrodite, organele se=uale aEungnd n acelai timp la maturitate 29omogamie5. "le se reproduc prin autogamie natural, adic prin unirea a doi gamei se=uali diferiti, dar identici genetic, formai pe acelai individ, cel mai adesea n aceeai floare. +n mare numr de specii se reproduc prin autopoleni6are. .unt considerate autogame speciile la care fecundarea strin nu depete n mod obinuit K%, cum sunt> grul, or6ul, ovrul, ore6ul, inul, ma6rea, soia, fasolea, tutunul, tomatele .a. -ncidena alogamiei la speciile autogame depinde de genotip, factorii de mediu i interaciunea dintre acetia. 8rocentul tinde s creasc n condiiile care favori6ea6, mai ales, perioada prelungit de nflorire i de desc9idere a florilor. $ecanismele care asigur autogamia pot fi riguros fi=ate la speciile clei togame8 la care florile nu se desc9id naintea poleni6rii. Anterele, situate la nivelul stigmatului, asigur poleni6area n interiorul corolei. <n aceast categorie de specii, menionm violetele i numeroasele specii floricole spontane de primvar, care emit i flori de var, cleistogame, mai mici, destinate s produc semine. <n numeroase ca6uri, florile fr a fi cleistogame, nu se desc9id dect dup ce fecundaia a fost reali6atA este ca6ul grului unde inflorescenele sunt nc9ise n glume, iar florile n glumele, a cror desc9idere se reali6ea6 tardiv. 'a fel, n ca6ul inului, fecundaia are loc naintea desc9iderii florilor. +n alt dispo6itiv floral, l pre6int leguminoasele autogame, la care, n caren este nc9is pistilul, nconEurat de cele 6ece stamine. 'a )olanaceae, la tomate, florile sunt aparent ca mogame8 adic floarea lor posed o corol desc9is n momentul fecundrii, ns pistilul, n cursul creterii sale, trece prin tubul format din anterele sale 2&"$A!'O, 1(NN5. &up cum am mai menionat, descendenii provenii de la plantele autogame 9omo6igote, sunt identici din punct de vedere genetic, toate variaiile sunt datorate modificaiilor. <n natur se pot ntlni rar linii pureA cultivarele autogame sunt n maEoritatea ca6urilor constituite dintr7un amestec de linii pure. &atorit autogamiei, ele pre6int o omogenitate i o stabilitate mai pronunat dect cultivarele alogame. C.*.). "eoria liniilor pure 3+tructura genetic a de cendenei la plantele autogame4
5( ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
0eoria a fost elaborat de botanistul dane6 ;#*A%%."% n 1()H, plecndu7se de la supo6iia c e=ist o variabilitate i la plantele autogame, aparinnd aceleai varietai. 8entru a stabili acest fapt, el a aplicat metoda seleciei individuale la cultivarul de fasole 8rincess. &escendenii plantelor alese au fost diferii n ceea ce privete nlimea, perioada de vegetaie, mrimea seminelor i alte caractere. ;#*A%%."% a difereniat 1( tipuri de plante, foarte diferite ntre ele, numindu7le linii1 &esecendenii acestor linii au fost foarte uniformi din punct de vedere genetic, capabili s transmit aceast uniformitate i descendentele lor, fapt ce a fcut s fie denumite linii pure. ;#*A%%."% a fost interesat s estime6e efectele seleciei n cadrul unei linii pure. "l a mprit seminele unei linii pure n trei grupe, mari, miElocii i mici. /ele care au provenit din semine mari produc i semine miElocii i mici. Acelai lucru s7a ntmplat i n ca6ul descendenelor provenite din celelalte categorii de smn. 8rivitor la producia de semine pe unitatea de suprafa, cele trei grupe de descendeni au produs apro=imativ aceeai cantitate de smn. !e6ultatele obinute pe parcursul a ase ani de selecie individual, n cadrul unei linii pure, au artat c nu apar diferene semnificative n greutatea medie a seminelor care provin din semine mari sau mici. ;#*A%%."% a conclu6ionat c orice ncercare de selecie n cadrul unei linii pure este ineficient. !e6ultatele sale sunt n concordan cu constituia genetic a liniilor pure. # linie pur este constituit din descendenii unei singure plante 9omo6igote i toi indivi6ii sunt 9omo6igoi, avnd acelai genotip. *omo6igoia lor este re6ultatul autopoleni6rii, a unirii gameilor de se= opus cu alele identice din punct de vedere genetic 2tabelul 8.1.5. &in moment ce toi indivi6ii dintr7o linie pur sunt 9omo6igoi, nee=istnd o variabilitate genetic n cadrul lor, selecia ntr7o linie pur va trebui s fie inevitabil ineficient. ,ariabilitatea care se observ la o linie pur se datorea6 efectului factorilor de mediu, selecia putnd avea efect numai dac materialul ales posed o variabilitate 9eritabil 2$AO#, 1(8)A A!&"'"A%, 1(865. <n mod normal, o linie pur nu este absolut uniform i permanent 9omo6igot pentru toate caracterele. <n silvicultur obinerea de linii pure la speciile 9ermafrodite 7 tei, salcm, ulmi, cirei .a. se dovedete dificil, deoarece, n natur autogamia acestora nu este perfect, iar vrsta naintat a maternitii lor limitea6 mult posibilitile de selecie. .c9imbrile 9eritabile ntr7o linie pur au loc datorit mutaiilor i poleni6rii libere. $utaiile spontane au loc n mod regulat cu o anumit frecvenUgenUgeneraie, iar un anumit procent de poleni6are liber este inevitabil, fenomene ce pot constitui surse de variabilitate genetic n linia respectiv. # alt surs de variabilitate ntr7o linie pur poate fi dat de 9etero6igotia re6idual, rmas n urma 9ibridrii formelor parentale. <n ca6ul n care selecia natural va favori6a 9etero6igoii, ei vor manifesta o productivitate mai mare, dnd mai muli descendeni, fenomen ce va fi reflectat n meninerea mai ndelungat a 9etero6igotiei dect se ateapt n mod teoretic. $eninerea variaiei genetice n cadrul unei linii autogame, va depinde pe lng avantaEul dat de nivelul 9etero6igotiei i de avantaEul competitiv 2$AO#, 1(8)5.
6) ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
.e poate afirma c toate sursele de variabilitate genetic dintr7o linie pur, pot s se manifeste cu o frecven foarte sc6ut, aa c o asemenea linie va pre6enta un nalt grad de uniformitate n ansamblul ei. .e poate conclu6iona c selecia aplicat ntr7o singur varietate a unei specii autogame 2gru, or6, soia etc.5 va fi eficient numai n ca6ul n care varietatea nu este constituit dintr7o linie pur, ci din cteva linii diferite n unele caractere. #dat ce se obine o linie pur, selecia n cadrul ei va fi ineficient, fiind mai profitabil s se ncerce o recombinare genetic prin 9ibridare, sau prin alte metode convenionale sau neconvenionale, dect s se conte6e pe sc9imbri genetice ce pot avea loc ntr7o perioad ndelungat de timp. 0rebuie menionat faptul c, timp de muli ani, s7a pus accentul pe crearea cultivarelor tip linie pur, considerate e=trem de uniforme i performante. <n ultimele decenii, s7a aEuns la conclu6ia c o uniformitate e=cesiv nu este necesar, din contra, uneori este de nedorit. /ultivarele tip linie pur, e=tinse pe areale geografice ntinse, au manifestat o vulnerabilitate genetic evident. Aceast sc9imbare de concepie se ba6ea6 pe observaia c un soi ce se caracteri6ea6 printr7o variabilitate genetic mai pronunat are o mai mare adaptabilitate ecologic, reali6nd producii mai stabile n condiii climatice sc9imbate 28#"*'$A%, 1(8(5. /+- SE,NI&ICA'IA GENETIC A 3I)RI%RII LA PLANTELE AUTOGA,E <ncruciarea sau 9ibridarea, este re6ultanta fu6iunii gameilor genetic diferii, re6ultnd organisme 9ibride, 9etero6igote pentru una sau mai multe gene alele. <n ca6ul unui organism autogam, dup 9ibridare, n urma autopoleni6rii, 9omo6igotia se instalea6 relativ rapid 2fig. 8.1.5. .e constat c n :1 toi indivi6ii sunt 9etero6igoi avnd constituia genetic Aa. 8lantele vor avea dou tipuri de gamei, A i a. Autofecundarea n : 1 ofer anse egale fiecrui gamet de a se uni cu fiecare tip de gamet. !e6ultanta acestui eveniment este generaia :D, constituit din genotipurile> D5% AA>5)% Aa>D5T aa. 8roporia genotipurilor 9omo6igote 2AA i aa5 fa de cele 9etero6igote 2Aa5 este 5) %>5)%. <n generaiile urmtoare de autopoleni6are indivi6ii 9etero6igoi vor produce descendeni 9omo i 9etero6igoi 2AA i aa, respectiv Aa5, numrul 9omo6igoilor crescnd n fiecare generaie de autofecundare cu 1UD din diferena dintre cele dou generaii precedente, n timp ce procentul 9etero6igoilor scade cu 1UD. &up cinci generaii de autofecundare vor re6ulta (6,( % indivi6i 9omo6igoi, iar dup 6ece generaii ((,(% "fectul autofecundrii asupra unei populaii 9ibride, constituit din genotipuri 9etero6igote de tipul Aa 2dup 3#!#;",-e, 1(()5
61 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&ac formele parentale difer printr7un numr mare de gene alele, 9omo6igoia va fi reali6abil relativ mai tardiv. <n ca6ul diferenelor de 1)) de perec9i de gene, populaia va avea 5)T de indivi6i 9omo6igoi, pentru toate genele, dup apte generaii de autopoleni6are . 8rocentul indivi6ilor 9omo6igoi 29o5Ugeneraie, dup 9ibridare, poate fi calculat cu formula> 9o ? 2179e5n, unde 29e5 este procentul indivi6ilor 9etero6igoi i 2n5 este numrul de loci prin care difer genitorii. Avnd n vedere c numrul 9etero6igoilor scade cu Eumtate n fiecare generaie de autofecundare, re6ult c 9e ? 21UD5 g, unde 2g5 repre6int numrul generaiilor de autofecundare. 8entru e=emplificare, s considerm c prinii difer n doi loci 2n5, procentul indivi6ilor 9omo6igoi dup trei generaii de autofecundare 2g5 va fi> 9o ? 21 P 21UD5H5D ? ),N6N ? N6,N% /9iar dac e=ist diferene de K) de loci, peste 5) % din linii vor fi 9omo6igote n :H pentru toi lociiA n generaia :1) diferenele n ceea ce privete numrul de loci nu mai sunt relevante 2ve6i fig. 8.D.5. :ormula menionat, este aplicabil numai n ca6ul n care toate genotipurile au aceeai rat de supravieuire i dac genele nu sunt linFate. C.*.'. Motenirea caracterelor calitative /aracterele calitative sau alternative sunt acelea a cror apariie este condiionat de aciunea genelor cu un efect puternic, aa numitele gene ma7ore1 /uloarea i forma florilor, fructelor, frun6elor i altor pri din plant i, uneori, c9iar i re6istena la patogeni pot fi ncadrate n caracterele calitative. &in moment ce nu e=ist cultivare ideale care s posede combinaii de gene i caracteristici satisfctoare pentru o lung perioad de timp, apare necesitatea crerii n mod continu, de noi recombinri genetice i pe ba6a lor, obinerea de cultivare cu caracteristici noi, mai valoroase. 8entru e=emplificare, s considerm ca obiectiv de reali6at obinerea unui cultivar de or6 cu dou rnduri, care s posede re6istent la rugin. 8entru aceasta se presupune c ne stau la dispo6iie un soi de or6 de dou rnduri, sensibil la rugini i o varietate de or6 2de ase rnduri5 re6istent la rugini. .e tie c locusul genelor pentru structura spicului este locali6at ntr7un singur cromo6om i c gena care determin apariia spicului cu dou rnduri de boabe, este dominanta 2&5, fa de gena care determin apariia a ase rnduri de boabe 2d5. 'ocusul genelor pentru re6isten este dominant 2!5, fa de gena ce marc9ea6 susceptibilitatea la rugini 2r5. &ac varietatea de or6 susceptibil la rugini este utili6at ca form matern, pentru a preveni autofecundarea, se efectuea6 castrarea manual sau aplicarea unui gametocid.
6D ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
8lanul de 9ibridare va fi urmtorul> 81 gamei :1 &&rr dd!! &r d! &d!r 8D
.e constat c n generaia :1 au aprut plante re6istente la rugini. Avnd n vedere c prinii difer n dou perec9i de gene alele, generaia :1 este 9etero6igot, segregnd n :D, dup urmtorul model mendelian> &in cele 16 combinaii posibile, (U16 din plante vor poseda combinaia de gene dorite, re6istena la rugini i dou rnduri de semine. :enotipul celor (U16 combinaii nu vor avea acelai genotip. %umai 1U16 va fi 9omo6igot pentru ambele perec9i de gene dominante 2!!&&5. Avnd n vedere c genele ce determin apariia plantelor cu dou rnduri i gene pentru re6istent sunt dominante, fa de alelele lor recesive, starea 9omo6igot nu va putea fi separat din punct de vedere fenotipic de cea 9etero6igot. &e aceea, n generaia :D apare necesitatea efecturii alegerii tuturor plantelor re6istente i cu dou rnduri 2&7!75 i numai n generaia : H va fi posibil selecia genotipurilor pentru ambele caractere dorite, care nu vor segrega n aceast descenden n ceea ce privete caracterele 2&&!!5. &ac generaia :K nu segreg, se poate considera c s7a obinut o linie de or6 de dou rnduri i re6istena la rugini. Aceast linie multiplicat n urmtoarele generaii, dac va manifesta o calitate i producie satisfctoare, se poate considera c s7a obinut un cultivar nou. &eoarece s7a urmrit mbinarea ntr7un singur genotip a dou gene maEore, frecvena unor astfel de fenotipuri n :D a fost mult mai mare dect al altor fenotipuri, (U16 din 16U16. &atorit acestui fapt, nu apare necesitatea cultivrii unei populaii numeroase de plante : D, pentru a gsi recombinarea favorabil a genelor. &e e=emplu, o populaie de H)) de plante va conine (U16H)) ? 168 plante re6istente i cu dou rnduri, din care 18 vor fi &&!! 21U16H))5. /a6ul pre6entat poate fi considerat cel mai simplu e=emplu. <n practic, de obicei, se urmrete obinerea recombinrilor utili6nd trei sau mai multe caractere. .pre e=emplificare, s considerm c se urmrete obinerea unui cultivar de or6 cu dou rnduri 2&&5, re6istent la rugini 2!!5 i cu spicul erect 2nn5. <n acest ca6, planul de 9ibridare va fi> 81 gamei :1 &&rrnn &r!r%n dd!!%% &rnd!% 8D
6H ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
<n generaia :1 plantele vor pre6enta cte dou rnduri de boabe, re6isten i spic erect. 8entru a se reali6a recombinrile dorite, generaia :1 trebuie cultivat fr nici o intervenie. 8lantele :1, cu constituia genetic &d!r%n, vor produce opt tipuri de gamei> &!%,&!n, &r%, &rn, d!%, d!n, dr%, drn. Aceti gamei pe ba6a recombinrilor ntmpltoare vor produce 6K combinaii n :D. &intre acestea, (U6K vor pre6enta recombinarea & P ! Pnn. <n continuare plantele de or6 re6istente i cu spicul erect vor trebui reinute i supuse n continuare unei selecii pn se va aEunge la starea complet de 9omo6igoie, pentru toate caracterele. &in punct de vedere teoretic, n ca6ul n care avem de a face cu trei caractere i cu o recombinare a genelor cu o frecven de (U6K, este necesar s avem un numr suficient de plante pentru a se asigura combinarea de gene dorit. <n ca6ul unei populaii de H)) de plante, n : D frecvena recombinrii ateptate va fi de (U6KH)) ? KD plante. Acest numr poate fi considerat prea mic deoarece pierderea incidental a ctorva tipuri dorite, vor scdea ansele de succes. &atorit acestui fapt este necesar cultivarea unei populaii de circa 1))) plante n : D, pentru a avea certitudinea c se va asigura un numr apro=imativ de 1)) plante cu recombinarea dorit 2(U6K1.)))5. C.*... Motenirea caracterelor cantitative $otenirea caracterelor dorite, cum sunt talia plantelor, numrul de semine, coninutul n proteine, procentul de ulei, producia de .+, producia de semine etc. aparin grupului de caractere cantitative, sau metrice. Aceste caractere sunt controlate de cteva gene, fiecare contribuind la formarea i e=presia caracterului n cau6, acionnd n mod obinuit aditiv. Asemenea gene, datorit efectelor individuale mai puin pronunate se numesc gene minore1 &in moment ce ele acionea6 mpreun, se numesc i poligene. :ormarea i e=presia unui caracter cantitativ depinde i de factorii de mediu. Aceti factori sunt capabili s modifice efectele poligenelor. &atorit acestui fapt, pot e=ista diferene privind nlimea la o linie consangvini6at, numrul de semine, coninutul n protein i, n special producia total. &in momentul n care o linie consangvini6at este practic 9omo6igot lipsindu7i variabilitatea genetic, orice variaie ce se manifest se datorete factorilor de mediu i se e=prim sub forma unei distribuii cu frecven normal. # asemenea manifestare a caracterelor cantiative complic lucrrile de selecie dup 9ibridare, deoarece variabilitatea datorat i factorilor de meniu este meninut n descenden, pe cnd succesul n ameliorare depinde de efectul genetic i 9eritabilitatea caracterului selecionat. +n e=emplu de motenire a unui caracter cantitativ l constituie transmiterea caracterului de talie, la gru, ilustrndu7se efectul genelor minore i apariia variabilitii. &escendenii :1 ai varietii de gru $7(1), cu o nlime medie a paiului de 1H1 cm i a varietii Acciaio, cu 5N cm, au o nlime medie de 1)D,N cm, ceea ce evidenia6 dominana parial a printelui mai nalt.
6K ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
0rebuie menionat c nu toate plantele :1 au o talie de 1)H cm, dar pre6int o variabilitate mai pronunat dect cele dou forme parentale. <n generaia :D valoarea medie a nlimii tulpinilor a fost de 8K cm, intermediar ntre cei doi genitori. ,ariabilitatea n generaia : D a fost continu i mai mare dect la formele genitoare i generaia :1. ,ariabilitatea n :D se datorete, n principal, efectului segregrii genelor. &up cum s7a menionat, aciunea genelor pentru determinarea unui caracter cantitativ sunt, de obicei, aditive, iar cnd efectele ambelor gene sunt aditive se formea6 un fenotip care repre6int suma efectelor po6itive i negative ale genelor individuale. Anumite gene pentru caracterele cantitative pot e=ercita un efect dominant. <n acest ca6, valoarea medie a generaiei :1 este apropiat de valoarea medie a oricrui printe i distribuia frecvenelor n generaia :D nu va manifesta o variaie simetric continu, ci una asimetric, conducnd la printele care posed genele dominante. <n ca6ul dominanei complete, valoarea fenotipic a generaiei :1, egalea6 valoarea unuia dintre prini 23#!#;",-e, 1(()5. /9eia succesului n procesul de selecie este dat de variabilitatea genetic ce se manifest n generaia :D. <n e=emplul dat, privind nlimea tulpinii, variabilitatea generaiei :1 a fost mare. &istribuia frecvenelor a oferit posibilitatea selecionrii genotipurilor cu o nlime a tulpinilor diferit de cea a genotipului 3, pn la nlimea tulpinii ntre N) i () cm, suficient de re6istente la cdere. /ercetrile din ultimele decenii sub aspect citogenetic i a geneticii moleculare, au evideniat faptul c nu toate caracterele cantitative sunt controlate e=clusiv de gene minoreA unele dintre ele pot fi controlate i de gene maEore. Au fost evideniate un numr de 6ece gene maEore care sunt implicate n controlul nlimii tulpinii la gru, caracter tipic cantitativ. +n e=emplu n acest sens, l repre6int genele !9t, gsite la soiul Eapone6 %orin 1) i care transmite fenomenul de reducere a taliei 2A''A%, 1(N)5. .tudiile lui ale i Ooussefian 21(855 efectuate pe plante monosomice, au evideniat c genele !9t1 i !9tH sunt locali6ate pe cromo6omul KA, !9tD i !9t1) pe K& i !9t8, pe D&. ene maEore au fost identificate ca influennd vernali6area 2,rn5, stadiul fotoperiodic 28pd5 i re6istena la iernare 28+ .'"O, 1(8HA $AO.0!"%1#, 1(N85. 8o6iia frun6elor este controlat de cel puin dou gene maEore, po6iia ori6ontal fiind dominant fa de cea erect 23#;#,-e, 1(()5. &in cele menionate reiese faptul c succesul n ameliorarea unor caractere cantitative depinde nu numai de relaia genetic i cea indus de mediu, dar i de componentele variabilitii genotipice. /)A.ELE GENETICE ALE PLANTELOR ALOGA,E1 INCO,PATI)ILITATEA
65 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
$ecanismele fecundrii ncruciate duc la meninerea stadiului de 9etero6igoie, deci a unei mai bune vigori 9ibride. <n msura n care, pentru o specie, aceast vigoare repre6int un avantaE selectiv, toate mutaiile care favori6ea6 alogamia vor avea o puternic valoare selectiv. 'a speciile alogame, polenul poate fi rspndit de ctre insecte 2plante entomofile5, vnt 2plante anemofile5, sau n unele ca6uri de ap. 'a numeroase plante monoice sau 9ermafrodite, regimul de alogamie este asigurat de un decalaE e=istent ntre organele se=uale mascule i femele. Aceast dichogamie ia dou forme> protogenie, cnd organul femel este receptiv nainte de de9iscena anterelor aceleai flori, ca n ca6ul unor gramineeA protandria, cnd organele mascule sunt apte pentru reproducie nainte ca stigmatul s fie receptiv. <n ca6ul n care nu e=ist un decalaE ntre maturarea celor dou se=e, apare un alt tip de mecanism genetic, incompatibilitatea, care frnea6 mai mult sau mai puin, creterea tubului polinic n ca6ul autopolenului, n raport cu alopolenul. <n natur se gsesc diferite dispo6itive biologice a cror e=isten se opune autofecundrii, datorit unor relative avantaEe pe care le pre6int alogamia, fa de autogamie. 8rincipalul avantaE este meninerea n cadrul populaiilor alogame a unei mai mari re6erve de variabilitate, datorit n principal pre6enei genelor recesive, mai puin favorabile n condiii obinuite, dar care pot deveni favorabile n condiii sc9imbate. Acest fapt determin fsupleea evolutivJ a populaiilor alogame 2%A *-+, 1(N85. Inc #Batibilitatea 8e lng mecanismele morfologice i mecanice care asigur poleni6area liber, mai e=ist i un mecanism fi6iologic, condiionat genetic, care generea6 efectul de incompatibilitate. Acest fenomen poate fi definit ca o reacie intim legat de polen i esuturile femele, naintea fecundaiei. -ncompatibilitatea se=ual poate fi definit c incapacitatea organismelor 9ermafrodite de a produce 6igoi, cu toate c gameii masculi i femelei sunt normali fertili, putnd n anumite condiii s fu6ione6e. Aceast in9ibiie, sau mpiedecarea fecundrii n cadrul sistemului de ncruciare se=ual se ba6ea6 pe mecanisme fi6iologice diriEate de genele sau alelele incompatibilitii i nu e=clude influena condiiilor de mediu asupra procesului de reacie care vi6ea6 e=primarea genelor implicate. -ncompatibilitatea se mparte n dou categorii> incompatibiltatea intraspecificA incompatibiltatea interspecific. =ncompatibilitatea intra pecific sau autoincompatibilitatea este un sistem 9omogenic, determinat de alelele multiple ale unui locus. <n procesul fecundrii, dac ambii parteneri au alele identice de incompatibilitate, re6ult o reacie de incompatibilitate.
66 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
=ncompatibilitatea inter pecific este un sistem 9eterogenic, ba6ndu7se pe cel puin dou gene situate n locusuri diferite. Acest sistem constituie o barier n apariia de rase i specii noi. +neori, sistemele genetice care impun poleni6area ncruciat pot fi asociate cu caracteristici morfologice care facilitea6 acest tip de poleni6are. &up locul, respectiv perioada de timp a reaciei de incompatibilitate, ."A!. 2dup '-.1"%. i 1!#*, 1(N65, o clasific astfel> in9ibarea se produce nainte sau la germinarea polenului, la suprafaa stigmatuluiA tubul polinic este stopat n procesul de cretere, cnd se gsete n esutul stilarA reacia de incompatibilitate se produce n momentul intrrii tubului polinic n ovarA ca urmare a reaciei de incompatibilitate, dup cariogamie, intervine avortarea ovulei fecundate, sau a embrionului. $ecanismul autoincompatibilitii a fost confirmat n ca6ul a peste H.))) de specii, aparinnd la circa 68 de familii, mai ales la cele cultivate din familia Cruci#erae, )a+i#ragaceae, /osaceae, )olanacea, Compositae i Liliaceae 23!"L3A1"!, 1(5(A :!A%1"' i A'+%, 1(NN5. '"L-. 21(5K5 a clasificat incompatibilitatea plantelor n dou grupe mari> 9eteromorfic i 9omomorfic. C.'.).). =ncompatibilitatea heteromorfic "=istena variaiei structurii florale din cadrul aceleai specii, a fost aprofundat dup publicarea studiilor lui *-'&"3!A%& n 186( i a observaiilor lui &A!L-%, n 18NN, constatndu7se e=istena unor relaii ntre variaiile florale i obstrucionarea autopoleni6rii. /u toate c 9eteromorfismul poate induce un numr mare de caractere 2lungimea anterelor, mrimea grunciorilor de polen, lungimea stilului, suprafaa stigmatic5, incompatibilitatea 9eteromorfic se ba6ea6 pe diferena de lungime a stilului i stigmatului, fenomen denumit 9eterostilie. '"L-. 21(5K5 a denumit tipul de floare cu stilul lung i antere scurte, pin8 iar cellalt tip de floare cu antere lungi i stil scurt, thrum. /onstituia genetic a tipului pin este "", iar cea a tipului t9rum S"8 . fiind dominant fa de s . 8oleni6rile sunt posibile numai ntre urmtoarele genotipuri> 215 2D5 pin 2ss5 1 pin 2ss5 > t9rum 2.s5 = 1 pin 2ss5 > = t9rum 2.s5 1 t9rum 2.s5 pin 2ss5 1 t9rum 2.s5
6N ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
/ombinaiile pin = pin sau t9rum = t9rum sunt incompatibile, ceea ce nseamn c genotipul .. nu apare. -mportana acestui tip de incompati7bilitate este minor pentru procesul de ameliorare. C.'.).*. =ncompatibilitatea homomorfic 'a angiosperme, nainte ca gametofitul mascul 2polenul5, s ntlneasc gametofitul femel, acesta trebuie s ptrund prin esutul sporofit 2pistilul5, pentru a aEunge la acesta din urm. 8istilul constituie seciunea unde, cu mici e=cepii, apare fenomenul de incompatibilitate. $ai mult, din moment ce pistilul este un esut diploid sporifitic, reacia de incompatibilitate este controlat genetic de genom, sau sporofitic. 8e de alt parte, gametofitul mascul 2polenul5 poart cel puin cteva componente din sporofitul pe care care s7a de6voltat. "l poart totodat i citoplasma printelui sporofit. Astfel, reactivitatea incompatibilitii polenului poate fi controlat genetic sau de genomul gametofitului patern. $odificarea genetic, n declanarea reaciilor de incompatibilitate sunt legate de procesele reglrii morfogene6ei grunciorilor de polen. .e distinge o condiie numit gametofitic, n care specificitatea fiecrui gruncior de polen este determinat de alela . =, pe care o conine. &in contra, se consider condiia porofitic, ca6ul n care toi grunciorii de polen ale aceleai plante, au aceeai specificitate, determinat de genotipul .=.Q ale acesteia.
//- INCO,PATI)ILITATEA GA,ETO&ITIC Acest tip de incompatibilitate a fost menionat pentru prima dat la Nicotiana san"erae, de ctre "A.0 i $A% "'.&#!: 2dup 3!- . i 1%#L'"., 1(6N5 pentru ca ulterior s fie semnalat i la trifoiul rou, trifoiul alb, sfecla de 6a9r, tutun, cartof, ierburi perene etc. 8osibilitatea polenului de a fecunda ovula depinde de o serie de alele la un singur locus, denumite .1,.D,.Hg...n. Resutul stilar diploid va avea oricare dintre aceste dou alele din serie, dar niciodat aceeai alel. runciorul de polen va avea numai o alel, deoarece este 9aploid. &ac esutul stilar conine o alel identic cu cel al grunciorului de polen, atunci tubul polinic nu poate penetra n stigmat i poleni6area nu poate avea loc, deoarece creterea acestuia este in9ibat. 8oleni6area poate avea loc dac alela din grunciorul de polen difer de cel al stigmatului i al ovarului. /apacitatea de fecundare a polenului depinde de propriul lui genotip. &e aceea, ncruciarea plantelor cu o constituie genetic diferit poate fi> 215 complet incompatibilA 2D5 Eumtate incompatibilA 2H5 complet compatibil 2tabelul 8.H.5. Aceast form de incompatibilitate este ilustrat i n figura 8.5.
68 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&ac o plant cu genotipul .1.D se autopoleni6ea6, sau se poleni6ea6 cu polen de la o alt plant, nucleii grunciorilor de polen pot s conin fie alela . 1 , fie alela .D. <ntruct ambele alele sunt pre6entate n esutul stilului, tubii polinici nu strbat sau strbat n ca6uri rare stilul, ntr7un timp destul de lung pentru a nu aEunge la timp la ovule, pentru a avea loc fecundaia . 0rei nivele de ncruciare compatibil pentru sistemul de autoincompatibilitate gametofitic i sporofitic 2dup 3!- . i 1%#L'"., 1(6N5 &ac planta cu genotipul .1.D este poleni6at cu polenul de la o plant cu genotipul .H.K, att tubul polinic cu alela .H, ct i cel cu alela .K, vor strbate stilul, fecundaia reali6ndu7se normal 2fig. 8.5. /5. &up cum s7a mai menionat, incompatibilitatea poate fi definit ca o reacie intim legat de polen i de esuturile femele nainte de fecundaie. Aceasta este un linFat coninnd cel puin trei gene care determin aceast reacie 2'"L-., 1(K(A 3!"L3A1"!, 1(5KA 8A%&"O, 1(6NA &e %"00A%/#+!0A 0AO'#!, 1(855. +na dintre gene, de specificitate, codific un polipeptid specific pentru fiecare alel .A acelai polipetid se regsete n stil i n polen. # alt gen, adiacent, va antrena pentru polen, activitatea factorului de specificitate. # a treia gen va fi activatoare pentru stil. !eacia de incompatibilitate se derulea6 dup cum urmea6> /ontactul tub polinic P esut femel va provoca declanarea celor dou gene activatoare nct locusul de specificitate a polenului i a stilului vor codifica polipetida lor specific 2fig. 8.6.5 <n ca6ul n care o protein specific se locali6ea6 n e=tremitatea de cretere a tubului polinic i se transform ntr7un dimer sau un tetramer in9ibitor, pe care dac l gsete i n esutul femel va provoca fenomenul de incompatibilitate 2'-.1"%., 1(6KA :!A%1"' i A'+%, 1(NNA &"$A!'O, 1(NN5. 8articularitile incompatibiltii gametofitice se pot re6uma la urmtoarele> se manifest n general, la speciile la care grunciorul de polen este binucleat 2Nicotiana, &ri#olium, Petunia, Prunus .a.5. ereditatea fenomenului este condiionat n cele mai multe ca6uri, monofactorial. n locusul . pot e=ista un numr foarte ridicat de alele, de la N)) la 8)) la &ri#olium pratense, 6K la &ri#olium repens. Aceast caracteristic i gsete e=plicaia considernd locusul . ca fiind un linFat. <n unele ca6uri, la ierburi, genetica incompatibilitii gametofitice difer de sistemul unui singur locus descris mai sus, acesta fiind bifactorial. 'ocii implicai n acest ca6, au fost notai cu . i 4. &ac alelele din locusul . i cei din locusul 4 ale grunciorilor de polen sunt identice cu alelele . i 4 din stil, se manifest fenomenul de incompatibilitate. &ac alelele din locusul . sau cele din locusul 4 vor fi diferite de cele din stil, sistemul va fi compatibil. <n cadrul sistemului cu doi loci, mperec9ierile compatibile se reali6ea6 cu o frecven de 571)% mai mare dect n ca6ul sistemului cu un locus, evideniat la trifoi i la tutun.
6( ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
.istemul cu doi loci, a fost descris la secar i la cteva graminee perene, considerndu7se c este preponderent n cadrul familiei graminee. 'a sfecla de 6a9r a fost pus n eviden un sistem de incompatibilitate cu patru loci, avnd la ba6 acelai principiu de funcionare ca al sistemului cu doi loci. "fectele alelelor incompatibilitii nu sunt ntotdeauna att de puternice nct s mpiedice n ntregime fecundaia. 'a numeroase specii se poate forma, oca6ial, o smn n urma strbaterii de ctre tubul polinic a stilului care poart aceleai alele ca i esutul stigmatului. <n acest ca6, avem de7a face cu fenomenul de pseudo7autoincompatibilitate. Acest fenomen poate fi provocat de factori de mediu, cum ar fi> temperatura, mutaiile, sau eventuale gene modificatoare. 8e lng aceasta, pot s apar i alele ale autofertilitii 2. f5, capabile s inactive6e alelele incompatibilitii. Alela .f este o alel din seria ., ce poate da natere unei anumite mutaii. <n unele ca6uri, nfrngerea barierei de autoincompatibilitate a fost obinut prin procedee diferite, dintre care menionm> poleni6area n stadiul de buton, poleni6area ntr6iat, aciunea temperaturilor nalte, a substanelor c9imice i 9ormonale, tetraploidi6area artificial, amestecul de polen, selecia genelor de pseudofertilitate .a. 2:!A%1"' i A'+%, 1(NNA 0AO'#!, 1(85A .A,A00- i colab., 1(86, 1((D5. /2- INCO,PATI)ILITATEA SPORO&ITIC /ontrolul sporofitic a incompatibilitii polenului a fost sugerat de /#!!"%., n 1(1D, la planta Car"aminae praetensis 2Cruci#erae5, dar o e=plicaie tiinific a fenomenului a ntr6iat H8 de ani. Atunci, s7a e=plicat controlul genetic a sistemului de incompatibilitate la Crepis #oeti"a 2Compositae5 2 "!.0"', 1(5)5. +lterior, acest sistem de incompatibilitate a fost evideniat la numeroase specii cu importan economic din familiile Cruci#erae, Compositae i Convolvulaceae. Acest tip de incompatibilitate este i ea condiionat de o serie de gene alele, la un singur locus i n contrast cu tipul gametofitic, funcionalitatea polenului este determinat de constituia genetic a plantei care l produce. 8articularitile sistemului sporofitic pot fi re6umate la urmtoarele> se ntlnete la speciile la care grunciorii de polen sunt, n general, trinucleate 2'ramineae, Compositae, Cruci#erae5A sistemul poate avea o condiionare genetic mono7 sau pluri7factorialA n general, se reunesc n linFaEul de incompatibilitate caracteristici morfologice care ntresc incompatibilitate 2e=emplu, 9eteromorfia5A la polen, specificitatea naintea individuali6rii fiecrui microspor se determin n esuturile diploide, n funcie de relaiile de aditivitate sau de dominana, mai mult sau mai puin complet, ntre alelele omoloageA dominana nu este aceeai pentru stamine i pentru stilA reacia de incompatibilitate se declanea6 din momentul n care polenul s7a depus pe stigmatA
N) ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
se pot obine plante 9omo6igote pentru o alel . 1, fie prin frngerea barierei de autoincompatibilitate fie prin pseudoautoincom7patibilitate. $ecanismul acestui tip de incompatibilitate se e=plic prin aceea c dac o plant posed genotipul .1.D i .1 este dominant fa de .D, ntreaga cantitate de polen va funciona ca i cnd ar fi .1A att grunciorii de polen cu alelele .1, ct i cu cele .D, vor fi imcompatibile pe un stigmat .1 i compatibil pe un stigmat .D. /ombinaiile genetice din cadrul unui sistem sporofitic sunt multiple i comple=e 2 ve6i tabelul 8.5.5. .istemul sporofitic a fost pus n eviden la floarea soarelui, var6 i alte specii dicotiledonate. 'a diferite specii de !rassica s7au utili6at numeroase metode de ngrngere a barierelor incompatibilitii, de la suprafaa stigmatului. Aceste metode include poleni6area timpurie, ndeprtarea suprafeei stigmatului, ocuri electrice, creterea concentraiei de /#D, altoirea .a. <n ca6ul poleni6rii bobocilor florali, impedimentul autoincompatibilitii este depit prin aceea c se depune polen pe stigmate imature, care nu au avut timpul s7i de6volte barierele de incompatibilitate. C.'.*. +emnificaia biologic a heterozigoiei C.'.*.). Con angvinizarea. 6oiuni introductive 8rin consangvini6are se nelege reproducerea prin autofecundare fora a plantelor alogame 9ermafrodite, sau monoice, sau ncruciarea ntre indivi6ii nrudii n ca6ul plantelor dioice. <n mod normal, speciile alogame care nu sunt autoincompatibile pot fi consangvini6ate prin autopoleni6are controlat. +nde se=ele sunt separate pe plante diferite, sau sunt controlate de sisteme ale incompatibilitii, se utili6ea6 ncruciarea frate7sor 2.-35. "ficiena comparativ a celor dou sisteme de mperec9ere este ilustrat n. &in figur se desprinde faptul c trei generaii de autopoleni6are aproape c egalea6 efectele a 6ece generaii de mperec9ere .-3 n ceea ce privete 9omo6igoti6area 23!- . i 1%#L'"., 1(6N5. .tructura mai mult sau mai puin 9etero6igot a unui individ, determin un efect global, e=trem de important, n urma consangvini6rii. 'a cea mai mare parte a organismelor se=uate fecundarea consangvin antrenea6 o cretere a nivelului mediu de 9omo6igoie, nsoit de diminuarea general a vigorii, fenomen semnalat ca efect al consangvini6rii. <ntr7o situaie invers, creterea 9etero6igoiei este legat de fenomenul de vigoare 9ibrid, sau heterozi . Aceste particulariti au fost evideniate nc din 1N6), de ctre 1h"'!"+0"!, iar noiunea de 9etero6is a fost propus de .*+'' n 1(1K, dup studiile privind vigoarea 9ibrid a liniilor de porumb, ncepute n 1()(. *etero6isul este considerat ca o stare de 9etero6igoie ma=im, care este mai uor de reali6at prin 9ibridarea liniilor genetic diferite, consangvi7ni6ate.
N1 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
,igoarea 9ibrid, sau 9etero6isul, se manifest n toat plenitudinea n :1. 8rin 9etero6is se nelege fenomenul de superioritate a organismelor 9ibride fa de formele parentale, sub aspectul vigorii generale, a adaptabili7tii, capacitii de producie, a calitii etc. /4- SE,INI&ICATIA GENETICA A CONSANG0INI.ARII 8rincipala seminificaie genetic a consangvini6rii este creterea 9omo6ogoiei. <n acest sens, o importan deosebit o are faptul c alelele recesive apar cu frecven mai mare n stare 9omo6igot n populaii consangvini6ate, dect n populaiile cu ncruciare liber. # populaie supus n mod normal unui sistem de consangvini6are 2autofecundare repetat, ncruciri ntre rude5, se desface ntr7o serie de linii reproductiv independente 2subpopulaii5. 'a orice linie, cretrea 9omo6igoiei este nsoit de modificri ale frecvenei genice i tendina fi=rii unei sau altei alele n fiecare locus A la liniile derivate din aceeai populaie de ba6, frecvenele genice tind s devin divergente. "fectul caracteristic al consangvini6rii la plantele cu fecundare ncruciat este reducerea mai mult sau mai puin pronunat a vigorii, adic apariia fenomenului de depre ie de con angvinizare 2reducerea valorii medii a caracterelor cantitative legate de cretere, de6voltare i reproducere, ca urmare a creterii gradului de 9omo6igoie5. $ecanismul genetic care produce depresia de consangvini6are nu este pe deplin elucidat, dar presupune c un rol determinant l Eoac segregarea i recombinarea genelor. /a efect a acestora, menionm > - separarea n 9omo6igoi a factorilor favorabili, care au fost reunii n 9etero6igoi A - e=istena unor linFage strnse ntre unii factori favorabili i alii nefavorabili, poate face imposibil obinerea unui 9omo6igot care s ntruneasc toate genele posibile A - dispariia interaciunilor de epista6ie. #ricare ar fi mecanismul genetic al depresiei de consangvini6are, s7a constatat c aceasta se accentuea6 pe msura creterii 9omo6ogoiei materialului biologic, pn cnd se aEunge la un minim de con angvinizare 2cea mai sc6ut valoare medioe a unei populaii, valoare la care se aEunge dup un numr de N71) generaii de consangvini6are i care rmne relativ stabil n ca6ul continurii consangvini6rii5. !educerea vigorii prin consangvini6are este diferit de la o specie la alta i c9iar de la un genotip la altul, n cadrul speciei. &e e=emplu, efectele consangvini6rii sunt minime la dovleac, dar evidente la porumb, floarea soarelui, lucern, trifoi etc. <n urma consangvini6rii, valoarea medie a multor caractere cantitative i calitative la arbori 2capacitatea de cretere n dimensiune i volum, capacitatea de regenerare .a.5 scade considerabil, putndu7se aEunge n condiii e=treme, c9iar la tre genetic P diminuarea puternic a capacitii de adaptare P datorit segregrii 9etero6igoilor. /ele mai sensibile sunt populaiile nc9ise i mici, la care depresiunea de consangvini6are se manifest puternic. <n populaiile mari, la care apariia 9omo6ogoilor
ND ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
recesivi este condiionat de legea 9a6ardului, consangvini6area are efecte mai slabe. Aceasta este, de fapt, situaia principalelor specii forestiere de la noi, pentru care, n natur, problema pericolului consangvini6rii nu se pune deocamdat. &e altfel, c9iar n ca6ul unor populaii mici sau i6olate P populaiile de fag din &obrogea sau de pin negru de 3anat P s7au creat prin selecie natural, mecanisme speciale de ec9ilibru genetic, care mpiedic manifestarea depresiei de consangvini6are 2.0B%"./+, 1(8D5. &epresia de consangvini6are face ca la plantele alogame autopoleni6area s nu facilite6e obinerea de genotipuri utili6ate direct n producie, ca n ca6ul plantelor autogame. /u toate acestea, consangvini6area ofer avantaEul de a facilita i6olarea de genotipuri 9omo6igote, deci stabile, care pot fi utili6ate n producerea de 9ibri6i. <ntradevr, 9omo6igoti6area ce apare n urma consangvini6rii duce la pariia, datorit segregrii i recombinrii, a unor noi genotipuri. <ntre acetia, alturi de numeroase tipuri aberante ca efect a trecerii n stare 9omo6igot a unei gene recesive duntoare, se ntlnesc i genotipuri care concentrea6 un numr mare de gene favorabile. <ncruciarea unor asemenea linii a cror 6estre genetic valoroas se completea6 reciproc, ntr7 un model ec9ilibrat, vor da natere la 9ibri6i valoroi, dect populaia iniial din care au fost e=trase liniile. ca un efect po6itiv, menionm i uniformi6area liniilor ca urmare a autofecundrii repetate, mai multe generaii succesive. *omo6igoie complet apare dup un mare numr de consangvini6ri repetate, n funcie de gradul de 9etero6igoie a materialului iniial, i are ca urmare eliminarea genelor letale sau subletale 2.A,A00-, 1(8H5. genotipurile care apar pot s fie 9omo6igot recesive, sau 9omo6igot dominante. $aEoritatea genotipurilor 9omo6igot recesive pre6int fenomenul de nanism, defecte clorofiliene, malformaii, sterilitate parial sau total, dar i unele nsuiri valoroase, cum sunt > tulpini scurte i re6istente la cdere 2porumb i sorg5, tulpini erecte i bogate n frun6e 2trifoiul rou5, coninut sc6ut de alcaloi6i la lupin i rapi, re6isten la stresurile climatice, boli i duntori .a. :ormele 9omo6igote receseve pot fi uor recunoscute, eliminate sau reinute, din prima sau a doua generaie consangvini6at 28A$:-' i colab., 1(N8, 1(815. &eosebit de valoroase sunt genotipurile 9omo6igote dominante, deoarece prin ncruciarea lor, nsuirile i caracterele valoroase ale acestora se transmit dominant. /5- )A.ELE GENETICE SI TIPURILE %E 3ETERO.IS :enomenul de 9etero6is repre6int vitalitatea ma=im a 9ibri6ilor din prima generaie 9ibrid, :1. .e e=teriori6ea6 prin vigoare mrit, reflectat prin cantitatea mare de rpoducie. Afectea6 toate caracterele i nsuirile biologice i economice ale plantelor, ndeosebi producia de semine sau fructe. *ibri6ii 9eterotici 2: 15 pre6int cel mai nalt nivel de 9etero6igoie, fiind reversul consangvini6rii. /ercetrile genetice privind 9etero6isul, efectuate de '"!%"! n 1(5K i $A0*"! n 1(55 2dup $+!"CA% i /!B/-+%, 1(ND5, e=plic acest fenomen genetic pe ba6a faptului c 9ibridul :1 pre6int n acelai locus dou alele diferite care determin vigoarea 9ibridului respectiv. Aceast vigoare 9ibrid este mai accentuat la 9ibri6ii plantelor
NH ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
alogame, obinui pe ba6a ncrucirii liniilor consangvini6ate i mai puin accentuat la 9ibri6ii plantelor autogame. .e presupune de asemenea, c 9ibri6ii : 1 manifest o modificare po6itiv a metabolismului, datorit genelor nealel 28#0'# i colab., 1(8(5. $aEoritatea cercetrilor au conclu6ionat c n toate ca6urile formele 9ibride : 1 manifest o vigoare sporit, o vigoare 9ibrid specific mai mare dect a generaiilor 9ibride mai avansate. Acest mod de manifestare a 9ibri6ilor, n prima generaie 2: 15, poart denumirea de heterozi , fiind un fenomen pur genetic cu consecine biologice specifice. :enomenul de 9etero6is are un spectru larg, dar intensitatea lui difer de la un 9ibrid la altul, de la o specie la alta. /aracteristice de ba6 a fenomenului de 9etero6is este vigoarea ma=im n : 1 i scderea acesteia n generaiile 9ibride ulterioare 2:D5. 8relungirea fenomenului n generaiile 9ibride avansate este posibil numai n anumite ca6uri i mai ales la plantele cu reproducere somatic sau vegetativ a cror 9ibri6i nu pre6int fenomenul segregrii, att de specific 9ibri6ilor se=uai. $anifestarea fenomenului de 9etero6is difer de la 9ibri6ii intraspecifici unde este ami accentuat, la 9ibri6ii interspecifici la care vigoarea 9ibrid este de obicei mai mic. <n cadrul aceleai specii nu toi 9ibri6ii : 1, ntre soiuri sau linii consangvini6ate manifest aceeai intensitate a fenomenului de 9etero6is. 8entru determinarea manifestrii ma=ime a fenomenului de 9etero6is se determin n prealabil capacitatea combinativ general i specific a genitorilor 2soiuri sau linii consangvini6ate5. *etero6isul la plante, ca miEloc de sporire a produciei, repre6int una dintre problemele genetice contemporane, cu cele mai largi implicaii teoretice i practice pentru ameliorarea plantelor. *etero6isul, ndeosebi la o serie de specii de plante cultivate ca, porumbul, floarea soarelui, sfecla, tomatele .a. tinde a deveni singura i cea mai eficient metod de e=ploatare a 9omo6igoiei n ameliorarea plantelor. 'a speciile forestiere sunt cunoscui numeroi 9ibri6i naturali cu manifestri evidente a fenomenului de 9etero6is, n ceea ce privete capacitatea de cretere, vitalitatea .a. 8e primul plan se situea6 plopii negri 9ibri6i P plopi de /anada P 9ibri6i ntre plopul negru european 2Populus nigra5 i plopii negri americani 2P. "eltoi"es i P. angulata5, utili6ai pe scar larg n culturi i n ara noastr. <n cadrul genului :uercus s7au semnalat o serie ntreag de 9ibri6i naturali cum sunt > :. rosacea, ;:. robur:. petraea<, :. "acica ;:. polycarpa:. pubescens<, :. hainal"iana ;:. #rainelto:. robur< .a. care ns, n general, nu par superiori speciilor parentale. 'a genul =agus, 9ibridul =agus taurica ;=. sylavtica=. orientalis< ntlnit la noi n 3anat, &obrogea, $untenia i #ltenia, se dovedete deosebit de productiv 2mai ales n
NK ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
3anat5 i viguros, precum i o mare capacitate de adaptare la un climat relativ secetos 2mai ales n &obrogea5. 'a genul Platanus, 9ibridul P. hybri"a ;P. aceri#olia< re6ultat din ncruciarea P. orientalisP. occi"entalis, manifest fenomenul de 9etero6is i este complet fertil . 'a genul bies, 9ibri6ii naturali . borm>lleria ; . nor"manniana . cephalonica< din Anatolia 20urcia5, . borisii(regis ; . alba .cephalonica< din recia i Albania, . rubro"ensis ; . alba . cephalo(nica< din .icilia 2-talia5 sunt deosebit de re6isteni la secet. <n cadrul genului Lari+, 9ibridul L. eurolepis ;L."eci"uaL.leptolepis< este mai repede cresctor i mai re6istent la cancer comparativ cu prinii. *ibridrile controlate la specii din genurile 8opulus, iuercus, :ra=inus, 8inus, 8icea, abies, 'ari= .a. au dus la obinerea de re6ultate contradictorii, iar n unele ca6uri efectul 9etero6is a fost obinut numai n prima generaie 2:15 2.0B%"./+, 1(8D5. *ibridarea crea6 totui combinaii de gene, unele superioare prinilor i n ca6ul speciilor lemnoase. &ac aceste combinaii sunt urmrite i utili6ate corespun6tor n scopuri practice, 9ibridarea i pstrea6, prin efectele pe care le d, ntreaga seminificaie genetic. $ultiplicarea pe cale vegetativ, repre6int unul din miEloacele de meninere a combinaiilor posibile de gene i de aici a meninerii vigorii 9ibride, mai ales la speciile care se nmulesc uor prin butai, cum ar fi plopii, slciile etc. 2.0B%"./+, 1(8D5. &intre ipote6ele i teoriile privind ba6a genetic a 9etero6isului amintim > - teoria heterozigoiei, elaborat de "A.0 i .*+'', consider drept cau6 a fenomenului starea de 9etero6igoie a 9ibridului n :1 A - teoria dominanei, elaborat de 3!+/", e=plic fenomenul de 9etero6is prin acumularea i combinarea n :1 a genelor sau alelelor dominante provenite de la genitori A - teoria $nlnuirii, emis de ;#%"., menionea6 c fenomenul are la ba6 nlnuirea genelor dominante, situate n cromo6omii omologi A - teoria timulrii, dup care, fenomenul se datorea6 unui sistem genetic stimulator A - teoria alelomorfi mului multiplu, pune la ba6a fenomenului ideea ereditii cumulative alelomorfe A - teoria upradominanei, emis de *+'', e=plic fenomenul pe ba6a pre6enei 9etero6igoiei monofactoriale A - teoria epi taziei, formulat de 0+!3-%, consider drept cau6 genetic intervenia 9etero6igoiei structurale sau a 9etero6igoiei inversiunilor. #ricare ar fi teoria privind 9etero6isul, apare ca certitudine c fenomenul e=ist i se manifest avnd un rol deosebit n ameliorarea plantelor. /au6ele adevrate ale
N5 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
9etero6isului trebuie cutate n rolul i aciunea factorilor genetici care intervin n de6voltarea ontogenetic a plantei. /ele mai importante tipuri de 9etero6is utili6ate n ameliorarea plantelor sunt > heterozi reproductiv, determin sporirea produciei de smn i fructe i n general organe reproductive, obinute n urma poleni6rii i fecundaiei A heterozi omatic sau vegetativ, determin formarea i sporirea masei vegetative A heterozi adaptativ, accentuea6 nsuirile legate de capacitatea de adaptare a plantelor la condiii ecologice diferite A heterozi adevrat, determin de6voltarea lu=uriant a plantelor 9ibride : 1, comparativ cu plantele ne9ibride. &up modul de manifestare, fa de populaia iniial, deosebim dou tipuri de 9etero6is > ci heterozi , prin care se nelege tipul de 9etero6is n care 9ibridul depete nivelul productiv al formelor parentale consangvini6ate, dar nu i nivelul populaiei cu poleni6are strin din care acestea au fost e=trase A tran heterozi , este tipul de 9etero6is n care 9ibridul 9eterotic depete nu numai formele parentale consangvini6ate ci i nivelul populaiei cu poleni6are liber din care au fost e=trase. -ntensitatea 9etero6isului este condiionat genetic de factori genetici i de mediu. &intre factorii genetici care influenea6 intensitatea de manifestare a 9etero6isului se pot menion > - modul de reproducere a plantelor, plantele alogame reacionea6, n general, mai puternic dect cele autogame A - 9etero6isul, dup cum s7a amintit, este n general mai accentuat n ca6ul 9ibridrii intraspecifice dect n ca6ul celor interspecifice i intergenerice A apar i e=cepii cum este ca6ul la 9ibri6ii /aphanus!rassica, sau diferite tipuri de Nicotiana A - 9ibri6ii dintre varieti pre6int un 9etero6is mai pronunat dect cei dintre biotipurile aceleai variati A - formele geografic ndeprtate manifest o intensitate mai pronunat a 9etero6isului, dect cele apropiate A - 9ibri6ii dintre formele 9omo6igote 2linii5 pre6int un 9etero6is mai pronunat dect cei re6ultai din prini 9etero6igoi A - cu ct pre6int o difereniere genetic mai pronunat 2pn la o anumit limit5, cu att 9ibri6ii manifest un 9etero6is mai pronunat i invers A ordinea ncrucirii genitorilor influenea6 intensitatea 9etero76isului A uneori genitorul matern are o influen mai mare asupra 9ibridului dect cel patern, datorit patrimoniului citoplasmatic.
N6 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
*etero6isul depinde de asemenea, de interaciunea dintre genotip i factorii de mediu. cercetrile au evideniat c acelai 9ibrid este capabil de producii diferite, n funcie de condiiile climatice ale diferiilor ani din 6ona n care se cultiv, de agrote9nica aplicat. /omportarea diferit a aceluiai 9ibrid n 6one ecologice diferite este determinat de reacia termoperiodic i mai ales fotoperiodic a acestuia
CAPITOLUL IA 91 ,<taiile i #ecani"#<l l r # lec<lar /7- %E&INITIA ,UTATIEI SI TIPURI %E ,UTATII %oiunea de mutaie a fost elaborat n anul 1()1 de *. de ,!-"., cel ce a elaborat teoria mutaionist. Mutaia poate fi definit ca fenomenul prin care se produc modificri ereditare n materialul genetic, modificri ce nu sunt provocate de recombinri genetice sau de segregare. "le pot s apar n mod spontan i atunci sunt denumite mutaii naturale, sau pot fi induse e=perimental, denumite mutaii artificiale. <ntre cele dou tipuri de mutaii sunt deosebiri de ordin calitativ. $utaiile naturale sunt produse de numeroi ageni mutageni din natur 2radiaii, sc9imbri de temperatur etc.5. $utaia poate fi definit i ca Imodificri discontinue cu efect geneticJ 2$AO!, 1(6H5. "le pot afecta diferite uniti ale materialului genetic. .ub acest aspect mutaiile pot fi clasificate n > - mutaii genice, cnd afectea6 genele A - mutaii cromo6omiale, cnd afectea6 cromo6omii A - mutaii genomice, n ca6ul cnd ntregul genom este afectat. &up modul de e=primare fenotipic ele pot fi clasificate n mutaii dominante sau ma ive. <n funcie de locul unde sunt plasate genele, mutaiile pot fi autozomale, plasate pe auto6omi i heterozomale, plasate pe 9etero6omi. Acest tip de mutaii manifest se=7 linFage. &e asemenea, e=ist i mutaii e?tranucleare ale genelor din citoplasm. # alt categorie o constituie mutaiile letale i emiletale, care afectea6 gene de importan maEor n organism, prin a cror blocare se reali6ea6 moartea individului nainte de maturitatea se=ual. $utaiile pot afecta genele de diferite tipuri 2structurale, operatoare, reglatoare5, care iau parte la reali6area reglaEului genetic. &e asemenea ele pot afecta regiuni mai mici sau mai mari de7a lungul genei, determinnd mutaii punctiforme P fiind mutaii intragenice. !eferitor la frecvena mutaiilor, pot fi evideniate gene mutabile, care sunt mai instabile i pre6int o frecven mai mare a mutaiilor comparativ cu celelalte gene din organism. # alt categorie sunt genele mutatoare care mresc frecvena mutaiilor altor gene.
NN ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&ac mutaiile afectea6 celulele liniei germinate, atunci ele pot fi transmise ereditar prin gamei la noua generaie. <n ca6ul cnd avem de a face cu mutaii somatice, acestea nu se transmit n descenden dect n ca6ul n care esutul sau organul respectiv se obine prin nmulire vegetativ, indivi6i care au apoi posibilitatea s se reproduc vegetativ. /9- &REC0EN'A ,UTA'IILOR (I NATURA LOR Apariia brusc a unor indivi6i avnd caractere sc9imbate 2mutante5 i care transmit modificarea n descenden a fost observat de mult timp i apar la ntmplare sub influena condiiilor de mediu. 'a plante, dup ce .8!"% "! din *eidelberg a descris mutanta cu frun6e lacrimate la Cheli"onium majus 2sec G-,5, &+/*".%" a descris fragul monofil, cu frun6e indivi6ate. # mutaie asemntoare a fost gsit la /obinia pseu"oacacia n anul 1855 i ea a dat natere salcmului monofil. ,ariatile pen"ula la numeroase specii de arbori, cum sunt )aphora japonica, ?lmus glabra, :uecus robur, Prunus pa"us .a. se datoresc, de asemenea, unor mutaii spontane. &A!L-% a descris numeroase mutaii la piersici i la animale 2oile de Ancona, cini buldogi .a. ."%3+/* 21(KD5 a gsit o mutaie spontan la lupinul alb 2 Lupinus luteus5 care nu coninea n seminele sale alcaloi6i. 'a pomii fructiferi i al 9amei s7au observat un mare numr de mutaii spontane, acestea fiind utili6ate direct ca soiuri noi, sau n programele de ameliorare. +n mare numr de mutante s7au semnalat la plantele ornamentale 2e=. laleaua $urillo5. /ea mai cunoscut mutant spontan din natur este gena opa[ue, la porumb, care influenea6 coninutul n li6in. # mutaie accidental de tipul celei genice, poate avea loc dup afectarea tautomeric a atomului de 9idrogen care mpiedic mperec9erea ba6elor complementare la nivelul acidului de6o=iribonucleic 2A&%5. .c9imbrile care pot avea loc la nivelul nucleotidelor A&%7ului provoac sc9imbri de cod, care la rndul lor produc sc9imbri n codonii A!%7m 2A!%7mesager5. <n aceast situaie, diferiii aminoaci6i pot fi eliminai re6ultnd sinte6a unor proteine diferite, ce pot s se manifeste prin apariia unor mutaii spontane naturale, ca de e=emplu mutaiile de culoare, de talie .a. LA0.#% 21(NK5, consider c mutaiile spontane re6ultate numai din modificri tautomerice pot s apar cu o frecven de 1) 7( la nivelul nucleotidelor i de 1) 76 la nivelul genelorUgeneraie. <n afara acestui mecanism, mutaiile pot fi cau6ate de aberaii cromo6omiale 2deleia, duplicaia, inversia, translocaia5 i de multiplicrile de genom 2poliploidia5. 'a microorganisme, care au o e=traordinar capacitate de multiplicare, numrul mutaiilor care apar ntr7un ciclu de reproducie este foarte mare. &e e=emplu, numrul uredosporilor de rugin a frun6elor de gru 2Puccinia recon"ita ssp. tritici5, n condiiile n care infectea6 numai 1T din suprafaa foliarU1 mp de teren este de H)) sporiU1 mmpU6i, respectiv 1)11 sporiU6iU9a 28A!'",'-"0 i 4A&#1., 1(NN5. &ac frecvena estimat a mutaiilor este de 1)78 vor aprea 1.))) mutanteUlocusU6iU9a.
N8 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&ac se ia n considerare c fiecare organism conine cteva mii de gene, putem afirma c fenomenul mutaional este practic continuu. L!- *-0 21(H15 menionea6 c mutaiile spontane sunt ntotdeauna mai numeroase dect necesitile evolutive ale speciei. !ata mutaiilor depinde de genele afectate, de condiiile ecologice .a.. +nele gene i sc9imb uor structura, dovedindu7se labile i genernd un mare numr de mutaii. Asemenea gene, dup cum s7a amintit se numesc mutabile sau instabile i apar ndeosebi n celulele somatice ale plantelor condiionnd variaiile n culoarea frun6elor, petalelor .a. Alte gene sunt tabile i sufer foarte rar modificri structurale. &ac se accept c mutaiile au Eucat un rol decisiv n evoluia speciilor, atunci la genul Picea i bies cele dou tipuri de gene i7au pus amprenta. &e e=emplu, genele care condiionea6 forma ba6ei acelor i ale persistenei sau caducitii sol6ilor la conuri trebuie s fi fost foarte stabile, aprnd prea puine modificri sub acest aspect, n comparaie cu genele ce afectea6 forma general i dimensiunea acelor sau a formei sol6ilor i bracteelor la conuri, care au fost afectate probabil, n msur mult mai mare de diverse mutaii 2.0B%"./+, 1(8D5. /nd $j''"! 2dup 3#!#;",-e, 1(()5 a reuit s induc mutaii la Drosophila melanogaster, prin iradiere cu ra6e G, aceasta a marcat nceputul unei noi ere a geneticii aplicate, mutaiile induse devenind o important surs de variabilitate. &e la acest eveniment s7au descoperit i utili6at, pe parcursul anilor, un numr impresionant de factori mutageni fi6ici i c9imici. 8rimele studii privind inducerea mutaiilor la plante se datoresc italianului 8-!#,A%# i americanului .0A&'"!. :recvena mutaiilor induse este mai mare dect a celor sponatne, oscilnd ntre 1) 7H7 1)75UgenUgeneraie. +nele gene mutea6 cu o frecven mai mare dect altele. .7a constatat c spectrul mutaiilor sponatne i a celor induse sunt similare i c mutaiile induse, s7au gsit sau se vor gsi n natur. <n funcie de utilitatea lor mutaiile pot fi folositoare, nefolositoare, sau neutre pentru organism. &eoarece procesul mutaional este aparent ntmpltor i necontrolabil, maEoritatea mutaiilor sunt cosiderate neutre, neafectnd n mod po6itiv sau negativ individul purttor. Asemenea mutaii pot s se menin ntr7o populaie timp ndelungat, att timp ct genele respective se gsesc n stare 9etero6igot. /nd genele devin 9omo6igote mutaiile pot s se e=teriori6e6e, putnd aduce c9iar un avataE purttorului, n condiii de mediu sc9imbat.din moment ce mutaiile re6ult nu numai printr7o sc9imbare genetic faa de tipul slbatic, dar i prin deleia uneia sau mai multor ba6e n A&% i n urma aberaiilor cromo6omale numeroase mutaii pot s manifeste un efect negativ. Asemenea mutaii sunt eliminate n procesul seleciei naturale sau artificiale.
N( ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
.elecia natural favori6ea6 mutaiile care sunt avataEoase purttorilor lor. Aceste mutaii sunt surse poteniale a tot ce este nou, ele Eucnd un rol important n evoluia speciilor, iar pe de alt parte pot constitui o inepui6abil surs de variabiltate genetic. 2:-,TA'IILE STRUCTURAL CRO,O.O,ALE, numite i aberaii cromozomale, se corelea6 cu sc9imbri n po6iia i numrul genelor i se datoresc posibilitii fragmentrii cromo6omului n meio6 sau n mito6. ele pot fi intracromo6omale i intercromo6omale ;eleia repre6int pierderea de ctre cromo6om a unui fragment acentric, cu una sau mai multe gene. &eleiile au efecte duntoare sau pot fi letale, dac sunt de anvergur. 'a plantele superioare, deficienele sunt transmise numai pe cale matern nu i pe cale patern, ntruct polenul afectat de deficien nu este viabil, sau nu poate fecunda oosfera. ;uplicaia constituie fenomenul invers deleiilor, prin care un fragment de cromo6om este ataat la un cromo6om omolog. &uplicaiile se declanea6 odat cu deleiile, ca efect a sc9imbului de fragmente ntre cromo6omii omologi n locusuri neomoloage. /romo6omul omolog care cedea6 un segment sau o gen devine deficient pentru genele respective, iar cromo6omul acceptor are dou seturi de gene pentru segmentul duplicat. &uplicaiile afectea6 organismele n msura mai mic dect deleiile, neavnd efect letal. &ein un rol important n evoluia speciilor, putnd sta la originea unora dintre i temele de gene multiple. .e presupune c la arbori avnd n vedere numrul mare al poligenelor i valoarea lor biologic definitorie, duplicaiile trebuie s se fi manifestat pe scar larg. &uplicaia anumitor gene poate s pre6inte interes deosebit n scopul sporirii capacitii de producie a plantelor agricole i a celor lemnoase, ca i a re6istenei fa de duntori. =nver ia se reali6ea6 prin sc9imbarea cu 18)\ a po6iiei unui segment de cromo6om care a suferit dou rupturi simultane. &ac fragmentul rotit conine centromerul, inversia este pericentric8 iar dac ruptura a avut loc ntr7un singur bra a cromo6omului ea se numete paracentric i nu include centromerul. <n mod obinuit, inversiile apar n profa6a meio6ei, n urma ruperii cromatidelor sau cromo6omilor. -nversiile au i ele un rol important n evoluia unor specii, contribuind la amplificarea variaei lor genetice. "ran locaia ia natere prin ncorporarea unui segment de cromo6om, n alt sector al aceluii cromo6om P tran locaie intracromozomal sau tran poziie, sau prin sc9imbul reciproc ntre cromo6omii neomologi P tran locaii intercromozomale sau reciproce. 0ranslocaia afectea6 conEugarea normal a cromo6omilor n profa6a - a meio6ei 26igonem5, determinnd apariia de gamei anormali n proporie de pn la 6)7N)T. 0ranslocaiile s7au manifestat activ n procesul de evoluie. .e consider, c la originea apariiei 9ominidelor a stat la ba6 un fenomen de translocaie care a facilitat
8) ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
trecerea de la K8 de cromo6omi la K6 de cromo6omi, prin fu6iunea a doi cromo6omi acrocentrici. 2$-&ACTORII ,UTAGENI :actorii mutageni care intervin n declaarea mutaiilor genice i structural cromo6omale sunt de natur fi6ic, c9imic i biologic. #actorii mutageni fizici sunt n special radiaiile, ce pot fi ioni6ante i neioni6ante i care produc modificri genice i structural cromo6omale prin ruperea legturilor c9imice din molecula de A&%, cau6nd deleii, inversii, translocaii etc. $utaiile induse de radiaii sunt cunoscute i sub denumirea de radio mutaii. Radiaiile ionizante, electromagnetice ;ra4ele $ 3i gamma< 3i corpusculare ;ra4ele beta, al#a, protonii, neutronii rapi4i 3i len0i, particolele grele< pro"uc e#ecte mutagene puternice prin #enomenul "e ioni4are. Ele in"uc muta0ii propor0ional cu cre3terea cantit10ii "e energie sau cu intensitatea ira"ierii 0esuturilor vii. /a"iosensibilitatea celulelor se "ove"e3te "irect propor0ional1 cu capacitatea lor "e 7nmul0ire 3i invers propor0ional1 cu gra"ul lor "e "i#eren0iere ;tabelul @.5.<. Do4a letal1, respectiv cantitatea "e ra"ia0ii ce provoac1 moartea a cel pu0in A-B ;DLA-< "in in"ivi4ii e+pu3i ira"ierii varia41 "e la CA- r ;unit10i roentgen< la om, 5-.--- r la p1r, m1r, porumb, D-.--- r la tomate, tri#oi, EA.---(5--.--- r la in, var41, ri"ichi etc. Radiaiile neionizante sunt ra"ia0iile ultraviolete ;?F< avGn" energie cuantic1 mic1, cu o capacitate penetrant1 re"us1 3i "e aceea ele se #olosesc pentru in"ucerea "e muta0ii la microorganisme 3i la polen. &act rii #<ta!eni cDi#ici1 E#ectul mutagen al substan0elor chimice "epin"e "e natura lor 3i "e starea DN "in celul1 7n momentul ac0iunii acestora. )ubstan0ele chimice mutagene au o structur1 chimic1 e+trem "e variat1, "e aceea o clasi#icare a lor "up1 acest criteriu este e+trem "e grea. =/EE)E ;"up1 P M=8L, 5@H-< a propus clasi#icarea agen0ilor chimici 7n "ou1 grupe mari6 ageni mutageni care acionea6 n perioada de biosinte6 replicativ a aci6ilor nucleiciA ageni mutageni c9imici care acionea6 direct asupra aci6ilor nucleici n repaus.. &in prima categorie fac parte, a6aserina, metiluretanul, cofeina, teobromina care sunt in9ibitori de concuren a precursorilor aci6ilor nucleiciA substane analoage ba6elor purinice i pirinidinice 2D7aminopurina 2D7A85, 57ioduracilul 257-+5, D7o=ipurina 2D7#85 etc.5, care pot fi incorporate n molecula de A&%, n locul ba6elor a6otate naturale, ce duc la apariia de mutaii.
81 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&in a doua categorie fac parte> acidul nitros 2*%# D5, 9idro=ilamina i 9idra6ina i substanele alFilante 2dietilsulfatul, etilmetansulfonat5, cu aciune direct asupra aci6ilor nucleici n repaus. .ubstanele c9imice mutagene pre6int cteva caracteristici care le deosebeesc, sub aspectul aciunii lor, de mutagenii fi6ici> au o eficien mutagenic mai mare 2de D71)) ori mai mare5 dect radiaiileA - maEoritatea mutaiilor provocate nu sunt letaleA - produc frecvent mutaii somaticeA 7 provoac un numr mic de deficiene, asemntor iradiaiilor, dar mult mai puine. #actorii mutageni biologici care acionea6 asupra materialului ereditar din celul, sunt virusurile i microplasmele plasmele, ce pot provoca mutaii genice i aberaii cromo6omale, ntrerupnd sinte6a A&% n celula ga6d. 91/1 ,ecani"#<l # lec<lar al #<taiil r <nc din anul 1(5H, LA0.#% i /!-/1 care au descoperit structura macromoleculei de A&% au emis ipote6a c mutaia este o eroare n secvena nucleotidelor aci6ilor nucleici. -pote6a LA0.#%7/!-/1 privind mecanismul molecular al mutaiei consider, n esen, c printre cau6ele care duc la apariia mutaiilor la nivel molecular pot fi menionate urmtoarele> $odificarea structurii macromoleculei de A&%A - &eleia sau adiia uneia sau mai multor nucleotide n macromolecula de A&%A - .ubstituia uneia sau a mai multor nucleotide n macromolecula de A&%A - -nversia unei secvene de nucleotide din macromolecula de A&%. 0oate aceste modificri ale informaiei genetice coninute n macromolecula de A&% se pot manifesta sub form de mutaii. .ub influena diverilor factori mutageni se produc erori $n proce ul de replicaie a acizilor nucleici, care duc la apariia de mutaii, ca efect a nlocuirii unei ba6e purinice n macromolecula de A&% cu o alt ba6 purinic sau a unei ba6e pirimidinice cu o lat ba6 pirimidinic. CAPITOLUL A POLIPLOI%IA ?INGINERIA CRO,O.O,AL* 2+- I,PORTAN'A (I IN%UCEREA POLIPLOI%IEI 8oliploidia repre6int un fenomen deosebit de interesant sub aspect genetic i economic. /onsiderat ca o mutaie de genom, poliploidia se datorete unei sc9imbri a numrului de ba6 de cromo6omi 2=5. +nii autori consider c n ca6ul poliploidiei
8D ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
sc9imbarea const n adugarea uneia sau mai multor garnituri cromo6omale ntregi 2autopoliploi6i5, sau nEumtirea numrului de cromo6omi 29aploi6i i monoploi6i5. 8oliploidia apare prin multiplicarea seturilor proprii de cromo6omi, a seturilor cromo6omale ale 9ibri6ilor interspecifici sau intergenerici, sau prin 9ibridarea unor specii poliploide. <n primul ca6 avem de a face cu autopoliploidie, iar n al doilea ca6 se obin organisme alopoliploide, amfidiploide sau amfiploide. 8oliploi6ii care au un numr par de seturi cromo6omale se numesc artioploizi, iar cei cu seturi impare peri oploizi. .e pot distinge urmtoarele tipuri de poliploi6i> triploi6i 2Dn Hn5, tetraploi6i 2Dn Kn5, pentaploi6i 2Dn 5n5, 9e=aploi6i 2Dn 6n5 etc. i 9aploi6i sau monoploi6i 2D= =5. 8oliploidia a Eucat un rol important n evoluia plantelor. &eterminnd apariia unor plante mai viguroase, datorit creterii volumului celular n urma multiplicrii garniturii cromo6omale i favori6nd fi=area unor 9ibri6i interspecifici sub form de amfiploi6i, poliploidia a dat natere la noi specii care s7au e=tins dincolo de arealul de e=isten a speciilor diploide. .peciile angiosperme sunt poliploide n proporie de H)7H5T, iar dintre cele 65D de genuri care constituie 8)T din flora "uropei /entrale, DHH genuri 2cu KD1 specii5 sunt diploide i K1( genuri 2cu 18)H specii5 sunt poliploide, adic 6K,DT din total 2.0"33-%., dup .0B%"./+, 1(8D5. %umrul speciilor poliploide este mai mare n regiunile cu climat aspru, cum ar fi cele nordice, de altitudine mare, sau 6onele deertice, ca i consecin a vitalitii lor sporite i a re6istenei mai mari fa de stresurile climatice. 'a plantele lemnoase printre primii poliploi6i semnalai sunt tetraploi6ii lnus glutinosa i . japonica. %-'.#%7"*'" descoper n .uedia plopul tremurtor triploid, Populus tremula f. gigans, cu cretere mult mai viguroas dect a formei diploide. 'a rinoase speciile poliploide sunt foarte puine 2K,6T din total5, putndu7se semnala )e9uoia sempervirens 26n?66 cromo6omi5, Pseu"olari+ amabiils 2Kn?KK cromo6omi5, ,uniperus chinensis f. phit4eriana 2Kn?KK5. 'a foioase, e=ist numeroase specii i biotipuri poliploide la genurile lnus, !etula, )ali+, cacia, cer, &ilia, =ra+inus .a. #dat cu descoperirea factorilor poliploidi6ani, ameliorarea plantelor a putu s utili6e6e avantaEele pe care le poate oferi multiplicarea numrului de cromo6omi. -nducerea artificial a poliploi6ilor se reali6ea6 uor i sigur prin utili6area tratamentelor cu soluie apoas de colc9icin. /olc9icina este un alcaloid obinut din brndua de toamn 2 Colchicum autumnale5. <n stare pur are formula brut /DD*D5#6% i se pre6int sub form de cristale fine, ce se di6olv n alcool, cloroform sau ap rece. .ub influena luminii i a cldurii se degradea6 uor. $etoda colc9icini6rii s7a rspndit rapid deoarece se aplic uor, iar soluia are o bun capacitate de difu6iune n celule.
8H ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
.7a constatat c tratamentul ape=ului vegetativ al plantelor, sau imersarea seminelor n colc9icin, sau alte substane c9imice poliploidi6ante, duce la dublarea numrului de cromo6omi n celulele somatice. /olc9icina mpiedic formarea fusului de divi6iune n mito6, cromo6omii nu se deplasea6 spre placa ecuatorial ci se dispersea6 n celul. &up divi6iunea centromerilor, cromo6omii se divid, nu se deplasea6 spre polii opui ai celulei, rmnnd ntr7o singur celul. # asemenea celul va avea un numr dublu de cromo6omi 2Dn?Kn5, n loc de numrul diploid 2Dn?D=5, iar n divi6iunile mitotice se vor forma celule cu Dn?K= cromo6omi. -n9ibarea prin colc9icin a formrii fusului nuclear i meninerea ulterioar a ciclului cromo6omial normal, repre6int ba6ele poliploidi6rii prin utili6area acestei substane. 8entru a obine plante tetraploide se tratea6 cu colc9icin diferite organe ca> semine, plntue n primele stadii de de6voltare, inflorescene i muguri a=iliari, la nceputul de6voltrii .a. $etodica de aplicare a tratamentului cu colc9icin este condiionat, n general, de natura organului tratat i de specia utili6at. 0e9nica tratamentelor cu colc9icin a prilor vegetative ale plantelor sau a seminelor, este simpl. 8entru tratarea ape=ului vegetativ se utili6ea6 o soluie de ),D57 ),5)T colc9icin care se picur pe ape= sau se aplic tampoane de vat mbibat cu soluie, timp de 1UD 7 1or. .e mai poate plasa ape=ul vegetativ pe un substrat de agar impregnat cu soluie de colc9icin 1T timp de ctev ore. <n ca6ul imersrii seminelor negerminate, mbibate sau nembibate n prealabil n ap, se folosete o soluie apoas de colc9icin cu o concentraie de ),571,)7D,)T. -mersarea poate dura DK7K8 ore, sau poate fi accelerat prin efectuarea tratamentelor n vid 28A%:-' i colab., 1(NDA .A'#%0A- i .A,A00- Er., 1((H, .A,A00- Er., 1((N5. 'a diferenierea primelor frun6e, sau a celor cotiledonale, se fac determinri microscopice, pentru a se stabili gradul de ploidie prin metode indirecte i care vi6ea6> - numrul de cloroplaste n celulele stomaticeA - lungimea diametrului mare a celulelor stomaticeA - numrul de celule stomatice n cmpul microscopic. $etodele indirecte de determinare a gradului de ploidie se ba6ea6 pe e=istena unor corelaii ntre gradul de ploidie i diferitele caractere macroscopice i microscopice ale plantelor i permit o triere rapid a plantelor potenial poliploide 2!A-/+ i colab., 1(6(5. Acestea sunt completate ulterior cu anali6e citologice ce sunt determinante n cunoaterea cu e=actitate a gradului de poliploidie. /ele mai bune re6ultate se pot obine prin efectuarea anali6elor citologice pe radicele recoltate la orele N78 dimineaa, prefi=area lor n colc9icin ),5T, timp de H ore, urmat de fi=area n soluie /arnoQ, mbierea n pectina6 5T timp de 5 ore i n final colorarea cu orcein acetic.
8K ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
8rincipala metod de obinere a alopoliploi6ilor este 9ibridarea ntre specii diferite, compatibile. *ibridarea nu reali6ea6 n mod direct poliploi6i, aprnd necesitatea tratamentului cu colc9icin a 9ibri6ilor, pentru dublarea numrului de cromo6omi. .uccesul utili6rii poliploidiei este condiionat de urmtoarele> - s se lucre6e cu specii caracteri6ate prin numr mic de cromo6omiA - s se reali6e6e mai degrab la plante alogame dect la cele autogameA - s se utili6e6e specii cultivate mai ales pentru organe vegetative i mai puin pentru smn. 2-- E&ECTELE POLIPLOI%IEI <n procesul de ameliorare a plantelor, poliploidia poate constitui premi6ele unor obiective maEore dintre care menionm> 8binerea unor dimen iuni mai mari ale diferitelor pri ale plantei poate constitui un cert avantaE la speciile de la care se utili6ea6 diferitele organe vegetative, sau la plantele decorative. &e e=emplu, poliploidia este utili6at n ameliorarea sfeclei de 6a9r i furaEere, a trifoiului rou, a secarei., a diferitelor specii floricole 2narcise, 6ambile5 .a. 'a speciile care se cultiv pentru smn avantaEele conferite de dimensiunile mai mari ale acesteia sunt adesea anulate de fertilitatea mai sc6ut a poliploi6ilor. +porirea productivitii i a calitii constituie obiective maEore n ameliorarea poliploi6ilor deoarece utili6area lor, imediat dup obinere, nu pre6int o eficien economic deosebit. <n ca6ul trifoiului rou s7au obinut sporuri de producie cu D)7H)T de mas furaEer, comparativ cu formele diploide. 'a aceeai specie, coninutul n protein a crescut cu D7HT la formele Kn comparativ cu cele Dn. Acelai lucru este semnalat i n ca6ul raigrasului tetraploid 2.A,A00-, 1((85. 8binerea unor $n uiri noi, ce nu se manifest la formele diploide este reali6abil prin poliploidi6are. .fecla poliploid este mai re6istent la cercosporio6, comparativ cu formele diploide din care provine. .ecara, trifoiul rou, raigrasul tetraploid manifest o mai bun re6isten la factorii stresani de mediu, avnd caliti bioc9imice superioare celor diploide. <n ca6ul ultimelor dou specii se observ o cretere a perenitii. #avorizarea polenizrii este un efect al poliploidiei, fiind utili6at cu succes n ameliorarea sfeclei de 6a9r. .7a constat c polenul 9aploid de la plantele diploide germinea6 i reali6ea6 o fecundare mai rapid dect polenul diploid produs de plantele tetraploide. &atorit acestui fapt, prin cultivarea alternativ a unei forme diploide 2Dn5 i a unei tetraploide 2Kn5 de sfecl, sau n amestec de H>1 n favoarea formei tetraploide, pe genitorul tetraploid se formea6 un procent ridicat de smn triploid 9ibrid 2Hn5, utili6at n producie. .mna triploid de sfecl mbin avantaEele poliploidiei cu pre6ena 9etero6isului, ceea ce permite reali6area unor sporuri substaniale de producie, comparativ cu soiurile diploide sau tetraploide. +terilitatea poliploizilor cu numr impar de garnituri cromo6omale repre6int un avantaE economic la unele plante agricole. 'a pepenele verde, prin ncruciarea formei
85 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
diploide cu cea tetraploid, 9ibri6ii triploi6i nu formea6 smn. Asemntor, bananierul cultivat este un triploid la care nu se formea6 semine. .e poate spune c e=ist unele culturi la care autotriploidia poate constitui un obiectiv n sine. Acestea sunt 9ameiul, speciile de citrice i pQret9rum. 8ropagarea clonal este implicat n aceste ca6uri. .terilitatea este atractiv pentru primele dou culturi. 'a 8Qret9rum sterilitatea contea6 mai puin deoarece floarea i nu fructul constituie re6ultatul culturii. Dmbinarea genomurilor de la pecii diferite. 8rin poliploidi6are s7a reuit s se fi=e6e 9ibri6ii interspecifici sub form de amfiploi6i, unii cu importan practic. .pecia sintetic &riticale, care mbin genomurile grului cu cel al secrii, pre6int avantaEe, comparativ cu grul, n 6onele cu ierni foarte aspre, sau pe terenuri nisipoase. Amfiploi6ii pot fi utili6ai ca forme intermediare pentru reali6area unor ncruciri ndeprtate. "locvent n acest sens este soiul de gru 0ransfer reali6at de ."A!. 2 -#.A% i .B+'"./+, 1(ND5. #i?area trii de heterozigoie repre6int una din direciile de perspectiv n utili6area poliploidiei n ameliorare. &ublarea numrului de cromo6omi permite ca fiecare gamet s posede doi cromo6omi omologi, care pot fi diferii prin genele lor. &atorit acestui fapt, se poate stabili6a un nalt grad de 9etero6igoie care rmne nesc9imbat c9iar i n ca6ul autofecundrii. 8e aceast cale se sper s se obin fi=area 9etero6isului la porumb. 2/-AUTOTETRAPLOI.II Autopoliploi6ii naturali se formea6 prin unirea gameilor cu numr neredus de cromo6omi 2=?D=5. /ei artificiali sunt obinui, dup cum s7a menionat, prin tratamente cu diferite substane poliploidi6ante. /omparativ cu formele diploide, autotetraploi6ii au organele vegetative mai de6voltate, manifestnd fenomenul de gigantism. +tili6area n procesul de ameliorare a unui astfel de material iniial a permis reali6area de re6ultate notabile la cteva plante de cultur. "rifoiul rou tetraploid 2Dn?K=?D85. 8rimele plante poliploide de trifoi rou au fost create artificial, de ctre '",A% n 1(K), iar obinerea primei varieti de trifoi rou tetraploid s7a reali6at n .uedia 2;+'Z%, 1(5(5. &up aceast dat, au fost create numeroase varieti tetraploide. !spndirea lor a fost la nceput limitat de un coninut mai sc6ut de substan uscat, o sensibilitate la secet i mai ales de o producie de smn inferioar formelor diploide. 8rincipalul de6avantaE a trifoiului rou tetraploid, ca i a altor culturi furaEere poliploide, este o mai slab legare a seminelor comparativ cu formele diploide. 8e lng unele neregulariti ale meio6ei, intervine i faptul c plantele tetraploide au flori mai mari i mai puine dect plantele diploide, fapt ce face ca poleni6area s se reali6e6e cu o oarecare dificultate de ctre poleni6atori.
86 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
8e de alt parte, varietile tetraploide se evidenia6 printr7o perenitate evident, o bun re6isten la boli i duntori, coninut ridicat n protein i glucide solubile, producia ridicat de biomas 2.A,A00-, 1((85. Raigra ul tetraploid. "uploidia i aneuploidia constituie o surs important de mrire a variabilitii genetice, utili6at cu succes n genul Lolium, respectiv la L. perenne, L. multi#lorum i L. hybri"um, ceea ce a permis crearea i introducerea n cultur a soiurilor tetraploide. 8rimele soiuri tetraploide de raigras peren 2 L. perenne5 i raigras italian 2L. multi#lorum5 au fost create n #landa, prin tratarea seminelor ncolite sau a plntuelor nfrite n diferite stadii, cu soluie de colc9icin ),DT concentraie, timp de D7K ore. .oiurile tetraploide cultivate au un $$3 mai mare cu ND78DT dect soiurile diploide, un spor de producie de mas verde de 8718T comparativ cu soiurile diploide, dar apro=imativ egal sub aspectul ..+. .7a constatat c dei animalele prefer s pasc plantele tetraploide, acestea nu pre6int re6isten la clcare, comparativ cu cele diploide 23# #"!0, 1(N55. <n general, plantele tetraploide, comparativ cu cele diploide au culoarea verde nc9is, mai puin lstarii vegetativi, dar au frun6e i lstari cu limea, respectiv cu grosimea mai mare 2./*-0"A, 1((85. &up $A!-A ./*-0"A 21((85 selecia plantelor tetraploide se face prin anali6a mito6ei, metod ce a fost completat cu determinarea numrului i msurarea lungimii stomatelor, ceea ce permite o difereniere e=peditiv a plantelor Dn de cele Kn, cu o mare marEe de siguran. .oiurile tetraploide, de raigras aristat ct i cel de raigras peren au fost create i e=tinse n cultur fiind superioare formelor diploide, sub aspectul produciei de mas verde i a calitii acesteia. .oiurile tetraploide sunt stabile din punct de vedere genetic, nu se ncruciea6 cu cele diploide. /ercetrile recente, n domeniul utili6rii euploidiei la raigras au vi6at selecia unor genotipuri cu coninut ridicat de substan uscat pornindu7se de la un soi diploid valoros sub acest aspect 2!"*"+' i 3A"!0, 1((HA 3A"!0, 1((K5. +ecara tetraploid 2Dn?Kn ?D85. +tili6area ocurilor de temperatur i7au permis lui &#!."O 21(H65 s obin primul soi tetraploid de secar. Amplificarea lucrrilor s7a reali6at dup 1(K1, odat cu utili6area curent a colc9icinei n lucrrile de ameliorarea plantelor. /omparativ cu diploi6ii, autotetraploi6ii se caracteri6ea6 prin mrimea prilor vegetative, re6ultant a unui numr mai mare de cromo6omi i a unui volum mai mare a celulelelor. /ultivarele tetraploide au paiul mai tare i mai nalt, frun6e mai mari, spice mai lungi, iar seminele sunt de aproape dou ori mai grele dect n ca6ul diploi6ilor. Aceast ultim modificare a adus sc9imbri n raportul dintre 9idraii de carbon i
8N ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
proteine, secara tetraploid avnd cu cca. DT mai mult protein i de aici proprieti panificabile superioare. +n neaEuns a secarei tetraploide este proporia ridicat a sterilitii, cu cca. D)T mai mare dect la secara diploid, cultivat n condiii de producie. .terilitatea re6ult din formarea trivalenilor i univalenilor, ca i a lipsei balansului necesar ntre cromo6omi i citoplasm. Aceste cau6e au fcut ca secara tetraploid s fie timid acceptat de cultivatori. +n alt de6avantaE este acela c dac este cultivat n vecintatea unui lot cu secar diploid incidena triploi6ilor va fi ridicat datorit poleni6rii libere, plantele triploide fiind complet sterile. .ecara tetraploid este adecvat a fi cultivat pentru furaE verde, avnd o de6voltare lu=uriant a prilor vegetative. 8oliploidia deine un loc important n ameliorarea arborilor. Astfel, creterile viguroase i producia foarte ridicat de mas lemnoas n ca6ul unor specii forestiere poliploide ca )e9uoia sempervirens, Populus tremula f. gigans, lnus glutinosa .a. sunt puse n valoare n practica silvic. 8oliploi6ii indui artificial la ngiosperme manifest, n general, capacitate de acumulare de biomas superioar diploi6ilor. 'a 'ymnosperme, poliploidia, avnd efecte de reducere puternic a ritmului divi6iunilor celulare, respectiv a creterilor, este folosit pentru obinerea de arbori pitici ornamentali2mai ales n ;aponia5. <n silvicultur, ns, poliploidia este departe de a7i fi de6vluit marile sale resurse de ameliorare a arborilor, n vederea scurtrii substaniale a ciclurilor de producie, a mbuntirii calitii lemnului, a creterii coninutului de celulo6 i colofoniu .a. -nducerea autotetraploidiei are o vec9ime mai mare de o Eumtate de secol, obinndu7se re6ultate remarcabile doar la un numr relativ mic de specii. &in cau6a profundelor sc9imbri genetice i a unei evidente lipse de balansare ntre nucleu i citoplasm, fac ca ciclul mito6ei s fie mai lent, maturi6ndu7se mai tr6iu comparativ cu diploi6ii. 0otodat, numrul divi6iunilor mitotice poate fi redus ceea ce face ca tetraploi6ii, n maEoritatea ca6urilor, s nu pre6inte o cretere evident, n ciuda prilor vegetative mai mari. 8rincipalul neaEuns al tetraploi6ilor artificiali este dat de sterilitatea parial ce apare, n ciuda unui numr par de cromo6omi. 'a tetraploi6i e=ist patru cromo6omi omologi care favori6ea6 un [uadrivalent n stadiul de pac9inem al meio6ei. &ac n anafa6a -, o perec9e de cromo6omi migrea6 spre un pol i cealalt perec9e spre cellalt pol, celulele se=uale vor conine acelai numr de cromo6omi, fiind capabili de fecundare. <n ca6ul neformrii de [uadrivaleni, ci trivaleni i univaleni, ca6 frecvent ntlnit la tetraploi6ii indui, i apreciat de /A%&"!#% 21(865, ca fiind n proporie de H)76)T, apar gamei cu numr inegal de cromo6omi, incapabili de o fecundare normal. &ac o gen este pre6ent n patru do6e n loc de dou do6e, ea poate interaciona diferit cu alte gene, inclu6nd gene locali6ate n cloroplaste i mitocondrii 2$#!!-.,
88 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
1(8H5. Acest fapt poate genera, de asemenea, apariia sterilitii pariale, care reduce valoarea practic a unor tetraploi6i, e=ceptnd pe cele care pot fi propagate vegetativ. .c9imbarea din starea diploid n cea tetraploid cere o perioad apreciabil pentru reali6area unui balans bioc9imic i genetic n cadrul celulelor i prilor vegetative, ca i pentru adaptarea la mediu. &atorit acestui fapt, se recomand lrgirea ba6ei genetice pentru inducerea autotetraploi6ilor i aciunea cu succes a presiunii de selecie. 22-AUTOTRIPLOI.II #rganismele la care n genomul complet fiecare cromo6om este pre6ent de trei ori, se numesc triploi6i 2H=5. #rganismele triploide sunt mai viguroase dect ec9ivalenii lor diploi6i sau c9iar tetraploi6i, utili6ndu7se cu succes n cultur 2e=emplu, sfecla de 6a9r, sfecla furaEer .a.5. &in cau6a numrului impar de cromo6omi meio6a la triploi6i este neregulat, re6ultnd organisme sterile. Acest fenomen pre6int un evident avantaE n ca6ul soiurilor comerciale triploide, neavnd semine 2struguri, pepene verde, banane .a.5. 'a speciile cu multiplicare vegetativ cum ar fi ierburile, pomii fructiferi i plantele decorative, triploi6ii sunt foarte frecveni. "i pot s apar i n ca6ul n care o ovul cu un numr neredus de cromo6omi 2n?D=5 este fecundat de polen cu numr redus de cromo6omi 2n?=5. #binerea frecvent a triploi6ilor se reali6ea6 i prin ncruciarea formelor tetraploide cu cele diploide. +fecla de zahr 2Dn?D=?18A H=?DNA Dn?K=?H65, triploid este un produs indiscutabil a ingineriei cromo6omale. <n 1(H8, ./*LA%-04 a obinut sfecla de 6a9r tetraploid, care prin ncruciarea cu sfecla diploid a dus la crearea sfeclei triploide, mai productiv dect ambele forme parentale 2dup *"%&!-/1."%, 1(N(5. /rearea soiurilor poliploide de sfecl necesit urmtoarele etape> - inducerea artificial a tetraploi6ilor i selecia acestoraA - obinerea formelor tetraploide valoroase, cu capacitate combina7tiv ridicatA - gsirea celor mai favorabile combinaii 9ibride ntre formele tetraploide i diploide. .oiurile poliploide conin indivi6i care aparin la diferite grade de ploidie, de obicei di7, tri7 i tetraploi6i, din care cau6 au fost denumite anizoploide, spre deosebire de cele diploide i tetraploide, care pre6int un singur grad de ploidie, fiind denumite izoploide. /omponena soiurilor ani6oploide este diferit, n sensul c proporia triploi6ilor se ridic n general la peste K)T, de obicei K)76)T. 'a soiurile create pe ba6 de androsterilitate ea poate depi ()T. 8roporia diploi6ilor, care varia6 n limite mari, nu trebuie s depeasc K)T. <n sensul strict al cuvntului, este considerat soi poliploid numai acela care este format din plante triploide i tetraploide, iar soi triploid, n care predomin plantele triploide, avnd o proporie redus de plante cu alte grade de ploidie ale genomului.
8( ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
/omponena soiurilor ani6oploide este condiionat de raportul dintre plantele soiurilor parentale, de gradul de fecundare selectiv a celor dou forme parentale, de procedeul de recoltare, de sterilitatea polenului unuia dintre cele dou soiuri componente .a. 2.0B%"./+ i !-4"./+, 1(N65. /el mai bun raport ntre formele parentale este de 1>H sau 1>D, n favoarea formelor tetraploide, cnd se folosesc butai. +tili6area butailor cu grad diferit de ploidie face ca plantarea s se fac alternnd trei rnduri ale soiului tetraploid cu un rnd a soiului diploid, sau 6>D. <n ca6ul n care amestecul este format din smn 2ba65, raportul poate fi de 1>5A 1>8, deoarece smna tetraploid are o germinaie mai sc6ut i dimensiuni mai mari. .7a constatat c nu apar diferene marcante ntre proporia tetraploi6ilor obinui din smna reali6at de la semincerii plantai n rnduri alternative i smna re6ultat din recoltarea n amestec a formelor parentale. Apar diferene evidente n ca6ul n care cele dou forme parentale se plantea6 alternativ i se recoltea6 smna numai de la componentul tetraploid. "fectul 9etero6is ce se manifest la formele poliploide de sfecl de 6a9r se datorea6 fenomenului de selectivitate n procesul fecundrii. <ncruciarea liber a formelor Kn i Dn ar trebui teoretic, s duc la reali6area unei semine 9ibride n proporie de 5)T. <n realitate proporia plantelor triploide poate fi de 6)78)T n ca6ul utili6rii soiului tetraploid ca mam i de 1)7D)T cnd soiul diploid este utili6at n aceast calitate. AvantaEele oferite de sfecla de 6a9r triploid au fost evideniate mai ales dup descoperirea fenomenului de androsteriltate de ctre #L"% n 1(KD. Aceasta, a fcut posibil producerea pe scar larg, a 9ibri6ilor triploi6i monogermi. <n acest scop se utili6ea6 ca form mam linii androsterile, diploide sau tetraploide. :-./*"! 2dup .0B%"./+ i colab., 1(N65, re6umnd avantaEele uneia sau altei forme materne, consider ca neproductiv utili6area formei tetraploide din cau6a slabei capaciti de germinare a seminelor acestei forme. 8entru a crea soiuri comerciale triploide apare necesitatea, naintea obinerii 9ibri6ilor, de a reali6a o selecie la nivelul liniilor androsterile diploide i reali6area de smn diploid prin utili6area liniei diploide menintoare. 'a nivel tetraploid apare necesitatea verificrii gradului de ploidie i capacitatea genitorului patern de a reali6a un polen fertil. &epenii verzi fr m%n 2H=?HH5. eneticianul 1-*A!A a obinut n 1(51 pepeni ver6i fr smn, prin ncruciarea pepenilor diploi6i 2Dn?D=?DD5, cu cei tetraploi6i 2Dn?K=?KK5. &in cau6a meio6ei complet neregulate, plantele triploide 2H=?HH5 nu formea6 semine, situaie ce avantaEea6 comeciali6area acestora. Via de vie triploid i tetraploid 2H=?5NA Dn?K=?N65. .oiurile triploide i tetraploide de vi de vie au fost reali6ate de asemenea, prin colc9icini6are. /ele tetraploide au boabe mari i un numr redus de semine, cu avantaEe comerciale. Aspectele negative sunt condiionate de producia relativ sc6ut.
() ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
.oiurile triploide sunt complet lipsite de smn fiind ideale pentru obinerea stafidelor 2soiuri apirene5. 'a peciile fore tiere din genurile Populus, lnus, !etula, /obinia, stadiul triploid pare s repre6inte numrul optim de cromo6omi, cruia i corespunde potenialul biologic ma=im. 0riploidul re6ultat prin ncruciarea laricelui european cu laricele occidental 2Lari+ occi"entalis5 s7a dovedit de asemenea, deosebit de viguros. 0riploidul natural a plopului tremurtor crete mai viguros dect diploi6ii 2tabelul 1).15 Volumul tulpinilor la diploizi i triploizi de plop treurtor 3diploiziE)55F4 ;"up1 8nstitut o# Paperehemistry, "in ,..../8'H&, 5@IJ< &iploi6i 0riploi6i 8rini 2T5 2T5 1)) (D P. tremuloi"s P. tremula 1)) 1D( P. tremula P. tremula $ai repede dect diploi6ii cresc i triploi6ii de lnus glutinosa i ?lmus glabra. <n sc9imb, la !etula verrucosa i !. verrucosa !. man"shurica var. japonica, vite6a de cretere a triploi6ilor este uor diminuat. 24-ALOPOLIPLOI%IA Alopoliploi6ii sau amfiploi6ii re6ult n urma 9ibridrii naturale sau artificiale a dou sau mai multe specii sau genuri, urmate de dublarea sau multiplicarea seturilor de cromo6omi. &uplicarea apare dup fu6ionarea a doi gamei cu numr neredus de cromo6omi. # metod mai eficient pentru obinerea alopoliploi6ilor s7a dovedit tratarea generaiei :1 cu colc9icin. # alt cale este bacFcrosarea generaiei : 1 cu printele ce posed un numr mai mare de cromo6omi. Alopoliploi6ii, datorit pre6enei n stare dubl a seturilor originare de cromo6omi, fi=ea6 i manifest caracteristicile ambelor specii genitoare. "i sunt fertili deoarece n meio6 mperec9erea cromo6omilor este la fel de regulat ca i la diploi6ii originari. .pre deosebire de autotetraploi6i la care n meio6, din cau6a 9omologiei cromo6omilor se formea6 multivaleni, n meio6a alopoliploi6ilor 2n lipsa 9omologiei dintre seturile de cromo6omi5 se formea6 numai bivaleni. &atorit acestui fapt, n sporogene6 se vor forma gamei normali. 8entru a nelege procesul formrii alopoliploi6ilor aceasta poate fi e=emplificat prin intermediul unor specii sintetice, ca de e=emplu, &riticale. <n urma ncrucirii ntre gru i secar apar plante : 1 cu D8 de cromo6omi, a cror caractere sunt intermediare. 8lantele :1 sunt complet sterile deoarece toi cromo6omii sunt univaleni i gametogene6a este neregulat. /nd plantele :1 sunt bacFcrosate cu grul, descendenii re6ultai posed KD de cromo6omi derivai de la gru i N de la secar.
(1 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&eoarece cromo6omii de gru formea6 bivaleni n meio6, univalenii de secar nu pre6int un efect negativ puternic asupra procesului meiotic a plantelor primului bacFcross, fiind parial fertile. ameii diferii apar n cursul gametogene6ei la plantele primului bacFcross. /romo6omii grului fiind bivaleni se distribuie regulat la polii celulei, cte D1 cromo6omi la fiecare, n timp ce cromo6omii secarei fiind univaleni se distribuie neregulat. &ac un ovul va avea D1@N cromo6omi i va fi fecundat de un gruncior de polen cu D1@N cromo6omi, plantele re6ultate vor avea cromo6omii de la gru i de la secar, n total 56 cromo6omi, constituind specia sintetic de tip octoploid denumit &riticale 2genomul P AA33&&!!, Dn8=?565 Acest tip de triticale a fost obinut de ctre $+%04-% n .uedia i 8-.A!", n !usia, dar el nu s7a putut impune n producia agricol datorit produciei de boabe relativ sc6ut 2.A,A00-, 1(8H5. 8entru a corecta deficiena semnalat, n ultimele decenii ale secolului trecut, s7au investit eforturi susinute pentru a reali6a &riticale he+aploi"e 2AA33!!, Dn?6=?KD5, prin ncruciarea varietilor de gru turgi"um 2Dn?K=?D85, cu secara 2Dn?D=?1K5 i tratarea plantelor :1 cu colc9icin 23#!#;",-e, 1(()5. Amploarea lucrrilor efectuate au dus la obinerea unor soiuri valoroase de triticale, sub aspect cantitativ i calitativ. <n acest sens menionm soiurile $apac9e, 3eagle, !o9um .a. obinute la /-$$O0 n $e=ic, 'asFo, rado, 3oFro i $almo n 8olonia, ,ldeasa, +lpia, .ilver 0ebea .a. n !omnia. *ibri6ii ntre diferitele specii i genuri ofer posibiliti pentru creterea potenialului genetic a productivitii. .7au creat aloploi6i cu KD de cromo6omi ntre Elymus, care, posed spice cu peste 1)) spiculee i gru. $+;""371A.- i colab., 21(8H5 au menionat astfel de reali6ri. $etodele moderne de inginerie cromo6omal i genetic pot duce la reali6ri noi n acest domeniu. Raigra ul hibrid este re6ultanta ncrucirii ntre Lolium perenne i L. italicum, fiind considerat un amfiploid sintetic, de perspectiv. Are o cretere iniial rapid i o valoare nutritiv ridicat motenit de la raigrasul italian i o re6isten ridicat la stresuri i o bun fertilitate motenite de la raigrasul peren. Rapia ;!rassica napus, DnK=?H65 este un sintetic reali6at prin ncruciarea lui !. campestris 2DnD=?D)5 i !. oleracea 2DnD=?165. !rassica napus a aprut n mod natural, dar se poate reali6a i pe cale artificial. <ncrucirile ntre alotetraploi6ii naturali i cei sintetici duc la o evident cretere a variabilitii genetice, variabilitate care se folosete pentru ameliorarea noilor soiuri de rapi. 8e lng alopoliploi6ii menionai, au fost obinui i ali alopoliploi6i, dar acetia se folosesc ca material e=perimental sau au o semnificaie teoretic pentru studiile de genetic. +peciile fore tiere. Anumite familii cu specii lemnoase, avnd numere de ba6 relativ mari> =agaceae =?1D, ceraceae =?1H, !etulaceae =?1K, ?lmaceae =?1K,
(D ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
,uglan"aceae =?16 par a fi provenit printr7un proces de alopoliploidie din trecutul ndeprtat de evoluie a angiospermelor. <n ceea ce privete formarea speciilor, de e=emplu esculus carnea 2K=5 re6ult din ncruciarea speciilor . hippocastanum 2Dn5 . pavia 2D=5, fiind un alotetraploid fi=at i fertil. 0riploidul . plantierensis 2Dn?H=5 a luat natere prin ncruciarea dintre . carnea 2K=5 . hippocastanum 2D=5, fiind steril. =ra+inus tomentosa 26=5 pare s fie re6ultanta ncrucirii ntre =. americana 2K=5=. pennsylvanica 2D=5, iar Prunus "omestica 2Dn?6=?K85 este un amfiploid re6ultat din ncruciarea P. spinosa 2Dn?K=?HD5 P.cerasi#era 2Dn?D=?165. 25-ANEUPLOI.II Aneuploi6ii sunt organisme ce pre6int un numr mai mare sau mai mic de cromo6omi individuali, comparativ cu disomicii 2Dn5. <n acest sens se pot meniona> - monosomicii, Dn71, organisme care au pierdut un cromo6omA - nulisomicii, Dn7D, la care lipsesc ambii cromo6omi ai unei perec9i omoloageA - trisomicii, Dn@1, un cromo6om fiind pre6ent de trei oriA - tetrasomicii, Dn@D, un cromo6om este pre6ent de patru ori. Aneuploi6ii nu pot fi utili6ai direct n producie. /nd se obin serii monosomice i trisomice, ele pot fi utili6ate pentru substituirea sau adiia cromo6omilor individuali, la soiurile e=istente. .erii de monosomici i trisomoci s7au obinut la numeroase culturi agricole 2tabelul 1).D5, iar posibilitile de utili6are a acestora au fost menionate de ctre ."A!. 21(ND5, 1*+.* 21(NH5, !-'"O i 'AL 21(8K5. 8rin utili6area liniilor monosomice i trisomice se poate evidenia rolul anumitor cromo6omi n e=presia caracterelor i a de6voltrii organismului ntreg. $onosomicii permit locali6area po6iiei genelor pentru anumite caractere, pe cromo6omi. 8entru a stabili care cromo6om a unui soi este purttor a unei gene sau mai multor gene pentru o re6isten la un anumit patogen, se va ncrucia soiul respectiv cu monosomii altui soi. &ac re6istena este diminuat i controlat de o singur gen, se poate atepta ca N5T din plantele :D s fie re6istente i D5T susceptibile. *ibridarea care va da numai descendeni re6isteni indic c gena de re6isten este locali6at pe cromo6omul pentru care aceast plant este monosomic. $aniera de lucru poate fi sumari6at la urmtoarele> A. P pentru locali6area cromo6omului care poart gena dominant> a. P un genitor disomic posednd gena dominant este ncruciat cu seriile monosomice ale altui genitorA b. P n generaia :1, att plantele monosomice ct i cele disomice vor evidenia un caracter dominant i cromo6omul purttor al genei de re6isten nu poate fi identificatA c. P n generaia :D plantele disomice segreg n dominante i recesive n raport de H>1. &escendenii care nu segreg sunt monosomici i posed cromo6omul care poart gena dominant.
(H ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
3. P pentru locali6area unui cromo6om care poart gena recesiv> <n acest ca6, locali6area cromo6omului ce poart gena recesiv se poate reali6a n :1, pe ba6a urmtoarei sc9eme> a. P un genitor disomic posednd o gen recesiv este ncruciat cu seriile monosomice ale altui genitorA b. P n generaia :1, planta cu caracterul recesiv este monosomic i posed cromo6omul purttor a genei recesive. 8e ba6a celor menionate, numeroase gene de pe cromo6omii individuali au fost locali6ai cu aEutorul seriilor monosomice. $enionm c gena 'r( pentru re6istena la rugina frun6elor de gru este locali6at pe braul lung al cromo6omului 63, gena *g pentru glume proase, pe braul scurt al cromo6omului 1A. 2."A!., 1(665. <n ca6ul speciilor forestiere, la genul &iletia 2=?K1?6N715, cei mai apropiai prini au N cromo6omi, aa c originea sa se e=plic prin multiplicarea seturilor iniiale i prin aneuploidie 2L!- *0, 1(5)5. $:1+1 Adiia i "<b"tit<ia de cr # ; #i 8e lng importana deosebit ce o pre6int pentru studiile genetice, aneuploidia st i la ba6a unor metode de ameliorare cum sunt> adiia de cromo6omi, substituia de cromo6omi i transferul de gene. 8rin intermediul lor s7au obinut re6ultate favorabile sub aspectul ameliorrii re6istenei grului la boli. +tili6area seriilor monosomice a permis substituirea cromo6omilor individuali dintr7 un soi, cu cromo6omii din alt soi. <n ca6ul ncrucirii a doi genitori, e=ist anse reduse ca descendena s aib toi cromo6omii unui printe i numai un cromo6om de la cellalt printe, a crui caracter se intenionea6 a fi transferat. Aceasta a fost posibil prin obinerea i utili6area seriilor monosomice. ."A!. 21(565 a transferat re6istena la rugina frun6elor, de la egilops umbellulata la grul comun. 8entru reuita 9ibridrii a folosit o specie intermediar, &riticum "icoccoi"es, dup sc9ema> ^ &. "icoccoi"es AA33 ] e. umbellulata ++ :1 grul comun 2&. aestivum5 AA33&& 3/1:1 grul comun 3/D:D grul comun 3/D:H reali6ndu7se o plant cu D1k 2gru5@1l 2Aeg5 2simbolul l repre6int univa7lenii, iar k bivalenii5. .7a obinut o plant re6istent la rugina frun6elor cu KD cromo6omi de la gru i un bivalent de egilops. *ibridul obinut pre6enta unele deficiene, ceea ce a pus problema separrii din cromo6omul de la egilops purttor a re6istenei la rugin, de caracterele
(K ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
negative. &escendenii plantelor primare au fost e=puse iradierii cu ra6e G, iar polenul iradiat a fost utili6at pentru poleni6are. &in cele 6.)(1 plante obinute, K) au pre6entat partea dorit de la cromo6omul de egilops, translocat cromo6omului 63 al grului comun. ."A!. a denumit noul soi 0ransfer, care, timp de muli ani a servit, n programele de ameliorare, ca surs de re6isten la rugina frun6elor i tulpinilor 2fig. 1).1.5. +n e=emplu mai recent, l constituie transferul re6istenei la Pseu"ocercosporella herpotrichoi"es de la egilops ventricosa la &riticum aestivum prin intermediul &. turgi"um subsp. carthlicum 2/A+&"!#%, 1(865. .oiul !#A.A!" pre6int gene de re6isten de la g. ventricosa pe cromo6omul N&, pre6entnd i translocaia 53UN3. Adiia de cromo6omi a fost aplicat i n obinerea unor linii de adiie prin ncorporarea unui cromo6om de la secar, ntr7un set cromo6omal al grului 2#m$A!A, 1(51A ",A%. i ;"%1-%., 1(6)5. 'iniile de adiie de secar, ov6, gru i tutun obinute pn n pre6ent, nu au dus la crearea unor soiuri comerciale valoroase, deoarece genotipurile cu una sau mai multe perec9i de cromo6omi adiionai de la alte specii sunt instabile i cromo6omul adiionat se pierde n mod frecvent. .ubstituia interspecific i intervarietal are o seminificaie mult mai mare pentru ameliorarea plantelor dect adiia de cromo6omi. &ac un soi, posednd o serie monosomic se utili6ea6 ca recurent i se intenionea6 ncorporarea re6istenei la rugina frun6elor 2e=. 'r(5 n acesta, se ncruciea6 cu un soi donator care posed gena 2e=. soiul 0ransfer5. <n generaia : 1 se reali6ea6 selecia pentru plantele re6istente la rugina frun6elor i se retroncruciea6 cu soiul recurent. &up K76 bacFcrossuri i autopoleni6ri, se obin plante disomice care au maEoritatea perec9ilor de cromo6omi de la soiul recurent i o perec9e de cromo6omi de la donator, purttoare a genei pentru re6isten. 8entru substituia cromo6omilor intervariatali, o perioad ndelungat de timp a fost utili6at soiul /9inese .pring, la care ."A!. 21(5K5, a creat o serie complet de monosomici, asigurnd smn tuturor amelioratorilor interesai. .oiul menionat neavnd valoare agronomic deosebit, liniile de substituie au pre6entat interes pentru studiile de genetic privind rolul cromo6omilor individuali n controlul anumitor caractere. 'AL i colab. 21(8N5 au obinut linii de substituie la un soi comercial valoros, /apelle &espre6 i la soiul semipitic *obbit I.ibJ. 'iniile de substituie ale lui /apelle &espre6 au fost folosite pentru studii genetice privind vernali6area, talia plantelor, re6istena la boli, calitile de panificaie i compenentele produciei. "=emplele menionate ilustrea6 substituiile intervarietale, respectiv ntre dou soiuri ale aceleai specii. .e pot reali6a substituii de cromo6omi ntre diferite specii sau genuri. 'a gru, n urma studiilor fcute de !-'"O i /*A8$A% 21(585, !-'"O 21(685, s7au obinut re6ultate interesante. "i au demonstrat c mperec9erea cromo6omilor
(5 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
omologi este controlat de o gen dominant 2895 locali6at pe braul lung al cromo6omului 53. !-'"O 21(685, a transferat re6istena la Puccinia strii#ormis de la egilops comosa la grul comun. 8lantele re6ulate au KD de cromo6omi de la grul comun i un bivalent P cromo6omul D$ P de la egilops. !e6ultatul acestei 9ibridri a fost soiul /ompire. Acest soi are o meio6 normal i poate fi utili6at la transferul re6istenei la P. strii#ormis fr a manifesta dificultile ce apar de regul n ca6ul 9ibridrilor interspecifice. 'AL i colab. 21(8H5 au reuit ca prin substituirea cromo6omului D$ de la eg. comosa cu unul dintre cromo6omii DA, D3 sau D& de la grul comun s ridice n mod semnificativ coninutul n protein la ultima specie. .ubstituirile de cromo6omi ntre gru i secar au stat la ba6a obinerii unor soiuri de gru de mare valoare comercial. /ele mai interesante substitiii i translocaii sunt cele ale cromo6omului 18 de la gru i cromo6omul 1! la secar. .oiul 4orba obinut n ermania are un cromo6om complet al secrii 1!, substituind o perec9e de cromo6omi de la gru, 13. Aceast substituie a dus la imprimarea re6istenei fa de unele rase de rugin, rugina tulpinilor 2.rH15, rugina frun6elor 2'rD65, rugina striat 2Or(5 i finare 28m85. /a re6ultat a ncrucirilor ntre varieti de gru i secar, braul scurt al cromo6omului de secar 1! a fost translocat la cromo6omul de gru 13, formnd translocaia 13'U13., n care sunt pstrate genele pentru re6isten la boli de la secar. 8rin acceai metod s7a obinut i soiul .al6munder 3artYei6en, cu translocaia 13U1!. &e la acest soi au derivat numeroase soiuri cu substituie, dintre care menionm soiul %eu6uc9t, utili6at de '+1OA%"%1# pentru obinerea soiurilor /auca6 i Aurora cu o bun re6isten la boli, o e=celent structur a spicului i fertilitate. &ei nu s7au rspndit n cultur n +!.., au contribuit la crearea a numeroase soiuri cu productivitate ridicat din multe ri, cum sunt 'ovrin1) n !omnia, AniFa, -stra i .olaris n /e9oslovacia, 3urgas, 3alcan i 4vesda n -ugoslavia .a. 23#!#;",-e, 1(()5. Au fost reali6ate substituii sau translaii de cromo6omi ai grului, cu ali cromo6omi, de la secar 2D! i N!5, dar fr a se atinge succese notabile n ameliorare, comparativ cu cele menionate anterior. 27-3APLOI%IA 8e lng fenomenul de poliploidie, n natur se ntlnesc i ca6uri de reducere la Eumtate a numrului de cromo6omi din celulele somatice, adic de la Dn la n, fenomen denumit 9aploidie 2n fiind multiplul numrului de ba6 =5. /u alte cuvinte organismele 9aploide posed n celulele somatice acelai numr de cromo6omi 2n5 ca i un gamet al aceleiai specii. 8rimii 9aploi6i au fost detectai, i studiai la Datura stramonium de ctre 3'A1".'"" i colab. n 1(DH 2dup 3#!#;",-e, 1(()5. +lterior, s7au gsit 9aploi6i la porumb, tutun, tomate, gru, .a.
(6 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
# plant 9aploid se de6volt dintr7un ovul nefecundat 2ginogene65, din alte celule ale gametofitului 2apogamic5, dintr7un gamet mascul 2androgene65 sau prin poliembrionie, coninnd diferite forme genomice, n funcie de nivelul de ploidie a speciilor din care provin 2'A/A&"$A, 1(NK5. <nEumtirea numrului de cromo6omi din celulele somatice i de apariie a 9aploi6ilor i7a gsit aplicare n ameliorarea plantelor. Astfel, la porumb, 9aploi6ii care apar n mod natural, cu o frecven redus, sunt utili6ai prin redublarea numrului de cromo6omi la obinerea de linii absolut 9omo6igote. #dat i6olat secvena urmrit, se recurge la dublarea numrului de cromo6omi prin colc9icini6are, pentru a reveni la numrul normal de cromo6omi. :recvena 9aploi6ilor naturali este sc6ut, de apro=imativ 1U1.))) n ca6ul partenogene6ei i cca. ),1U1.))) n ca6ul androgene6ei. 'a plantele superioare, incidena 9aploidiei naturale este de ),)5T la Zea mays, ),5T la &riticum monococcum, ),)D5T la &. aestivum, ),)D57),)HNT la 'ossypium barba"ense etc. /a o regul general, plantele 9aploide sunt mai scunde dect cele diploide, mai puin viguroase, tardive i complet sterile din cau6a cromo6omilor univaleni. 8entru a se corecta aceste deficiene, 9aploi6ii se dublea6 cu aEutorul colc9icinei pentru a se obine organisme diploide, aa numiii di9aploi6i sau dubli 9aploi6i. #ragnismele di9aploide sunt complet 9omo6igote pentru toate genele alelice, situaie ce nu se reali6ea6 n totalitate n ca6ul liniilor consangvini6ate, sau a organismelor autogame. -mportana lor pentru studiile de genetic ca i n ameliorare au dus la aprofundarea metodelor de obinerea lor in vivo i in vitro, cu o frecven sporit 29 - ,ETO%E %E IN%UCERE A 3APLOI.ILOR (I %U)LU 3APLOI.ILOR &ei are o valoare teoretic i potenialiti largi de aplicare, 9aploidia, pn n ultimele decenii a ocupat un loc nesemnificativ n programele de cercetare genetic i de ameliorare a plantelor de cultur. Aceasta s7a datorat incidenei reduse a 9aploidiei spontane, dar mai ales lipsei unor metode e=perimentale eficiente pentru i6olarea de 9aploi6i cu frecven ridicat i de obinerea de linii dublu 9aploide 9omo6igote. &intre metodele e=perimentale, actuale, de inducere a 9aploi6ilor, cele mai utili6ate sunt> a1 P lie#bri nia, respectiv apariia de embrioni gemeni sau mai muli embrioni, este destul de frecvent la plante. "mbrionii gemeni pot avea o constituie cromo6omal identic> diploid7diploid, 9aploid79aploid sau diferit, diploid79aploid, diploid7tetraploid, 9aploid7triploid etc. 8oliembrionia ca surs de 9aploi6i se utili6ea6 frecvent la speciile de Linum usitatissimum, Caspicum annuum, !eta vulgaris .a. 2%-04./*" i L"%4"', dup .A,A00-, 1(8H5.
(N ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
:recvena poliembrioniei varia6 n funcie de specie i de genotip. "=istena unui control genetic a acestui fenomen permite selecia de genotipuri cu capacitate mrit de formare de poliembrioni, dei ntre incidena poliembrioniei i frecvena 9aploi6ilor nu s7a gsit nici o corelaie stabil. 'a -//80 :undulea s7a utili6at cu succes aceast metod pentru obinerea de 9aploi6i i linii dublu 9aploide 9omo6igote la in 2&#+/"0, 1(N)5. b1 3ibridarea inter"BeciHic i interBl id, permite obinerea 9aploi6ilor partenogenetici sau semigametici la speciile cultivate )olanum, Me"icago, !rassica, Nicotiana, 'ossypium .a. 'a )olanum tuberosum se obin 9aploi6i n procente relativ ridicate prin ncruciarea speciilor tetraploide 2Dn?K=?K85, cu specii diploide 2Dn?D=?DK5. Aceast metod a devenit e=trem de folosit odat cu descoperirea poleni6atorului diploid )olanum phureja de ctre *#+ A. i 8"'Ai+-% 21(5N5. 8rin selecia riguroas a genitorilor s7a mrit frecvena 9aploi6ilor de 1)711 ori 28A%:-', "'"%A $A!-%, 1(ND71(NK5. <n ca6ul lui Me"icago sativa, autotetraploid, obinerea de linii di9aploide se reali6ea6 prin 9ibridarea cu diploidul Me"icago #alcata 23-% *A$, 1(6(5. /nd un tetraploid i un diploid sunt ncruciai, ca re6ultat al partenocarpiei, se obine un di9aploid care posed embrion D= i endosperm 6=, n loc de K=@6=. <n ca6ul cpunului, octoploid, ncruciarea se reali6ea6 cu tetraploidul Potentilla arsenina utili6at ca poleni6ator 2;A%-/1 i *+ *"., 1(NK5. .e ntlnete adeseori i fenomenul de semigamie cnd celula generativ a unui gruncior de polen intr n sacul embrionar dar nu fu6ionea6 cu ovula, re6ultnd o plant 9aploid 9imeric. :recvena 9aploi6ilor poate fi influenat po6itiv de poleni6area ntr6iat 2/*A.", 1(6(5, tratamente c9imice 2'A/A&"%A, 1(NK5, sau sub efectul citoplasmei strine 20.+%"LA1- i colab., 1(685. c1 Selecia de !en tiB<ri "ti#<lat are i a #arEeril r !enetici pentru inducerea i depistarea 9aploi6ilor, se utili6ea6 cu succes n special la porumb 2/*A.", 1(NK5. 8entru i6olarea de 9aploi6i prin procedeul marFerilor genetici, forma matern cu gene recesive, este poleni6at cu polen ce pre6int alele dominante marcatoare. /ea mai mare parte a descendenei fiind de origine 9ibrid, va manifesta caracterele dominante marcatoare ale tatlui i se va elimina. # mic parte a descendenei 2cca. 1U1.)))5 la care nu se manifest caracterele dominante marcatoare ale genitorului patern, se presupune a fi 9aploid 2de origine partenogenetic5 i se va menine pentru anali6 citologic, n vederea confirmrii strii 9aploide 23#0"4, 1(N(5. <nc din anul 1(K(, /*A." a obinut la porumb linii 9omo6igote de origine 9aploid, prin utili6area marFerilor genetici de culoare. 'a nceput a utili6at marFeri de culoare ai plntuei, apoi marFeri de culoare ai embrionului i seminei. 8aralel cu utili6area marFerilor genetici, /*A." a selecionat i folosit genotipuri valoroase ca surs
(8 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
pentru 9aploi6i. ,arietile de porumb .tocF 6, olden /ross 3antam i .tiff .talF .int9etic au indus o frecevn de KU1.))) 9aploi6i, iar 9ibri6ii dubli de la aceti 9aploi6i au dat frecvene de 1)U1.))) de indivi6i. .elecia de genotipuri din .tiff .talF .int9etic a mrit frecvena 9aploi6ilor de la 1,D la 8,NU1.))). d1 C<lt<ra in vitro. $etoda culturii de antere a devenit cea mai important metod in vitro de obinere a 9aploi6ilor, din polen. .7au obinut 9aploi6i, prin aceast metod la peste 6) de specii, ()T din familiile )olanacee i 'ramineae 2.+%&"!'A%&, 1(8HA ;"%."%, 1(865. !egenerarea cu succes a plantelor ntregi din calusul anterelor a fost reali6at numai la un numr limitat de specii de plante, tutun, cartof, var6, tomate, ore6, gru, petunia, porumb etc. 2;"%."%, 1(865. 8erspectivele utili6rii androgene6ei P ale crei potenialiti au fost insuficient valorificate P depinde de elucidarea unor aspecte de biologie celular privind modificrile ce au loc n antere n cursul meio6ei i diferenierii polenului, ca i de mbuntirea metodologiei de lucru, la nivelul tuturor etapelor 2.A,A00-, 1(8(5. &eaorece 9aploi6ii pot aprea n mod natural dintr7un ovul nefecundat sau alte celule din ovar, s7a ncercat obinerea de 9aploi6i din culturile in vitro din ovare i ovule. <n general, prin ginogene6 e=perimental s7au obinut unele succese la sfecla de 6a9r i gerbera, dar mai puin spectaculoase la alte specii, ca de e=emplu la gru 23#!#;",-e, 1(()5. # metod laborioas a obinerii de 9aploi6i in vitro const n eliminarea preferenial a cromo6omilor, metod denumit bulbo um i a fost elaborat de cercettorii canadieni 1A.*A i 1A# 21(N)5. /nd or6ul cultivat 2Hor"eum vulgare5 este ncruciat cu or6ul slbatic 2 H. bulbosum5 seminele re6ultate au endospermul nede6voltat. "ste posibil obinerea de plantule din astfel de semine, prin culturi de embrioni. "mbrionii derivai din H. bulbosum sunt eliminai n stadiile timpurii de de6voltare a plantulelor, iar cele care au supravieuit sunt de fapt plante 9aploide de H. vulgare 2.-$8.#% i .%A8", 1(815 2fig. 1).D.5. <n aceast ncruciare are loc n mod normal fecundarea, formndu7se 6igoi n proporie de 65T, iar n stadiul timpuriu al de6voltrii embrionare 21D71K 6ile dup poleni6are5, are loc eliminarea preferenial treptat a cromo6omilor bulbo um. 8lntuele formate din aceti embrioni conin numai genomul vulgare n stare 9aploid. "liminarea difereniat a cromo6omilor are loc indiferent de specia folosit ca genitor femel sau mascul. $etoda a fost e=tins i la gru, poleni6ator fiind folosit porumbul. 0e9nica culturilor in vitro a fost pus la punct i este folosit pe scar tot mai larg i n ca6ul speciilor forestiere. !eali6area n mas, c9iar n : 1, a unor populaii de linii complet homozigote la arbori, prin utili6area metodei menionate, desc9ide largi perspective n anali6a genetic privind structura cromo6omilor, locali6area mutaiilor, transformarea genelor prin recombinare, ca i n selecie i e=tinderea n cultur a genotipurilor superioare. *aploi6ii avnd o structur genetic unitar, pun n eviden,
(( ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
pregnant, intensitatea de impact a mediului, n diferite condiii ecologice de cultur forestier comparat 2.0B%"./+, 1(8D5. 4:- PARTICULARIT'ILE CITOLOGICE ALE POLIPLOI.ILOR Autopoliploi6ii se formea6 prin dublarea genomurilor proprii, n meio6 sau mito6. Astfel, diviziuni meiotice anormale conduc la apariia de celule se=uale nereduse, diploide 2D=5 i dup fecundarea acestora, la organisme tetraploide 2K=5. ;iviziuni mitotice anormale ale celulelor 6igotului, prin nesepararea i nedeplasarea cromo6omilor n anafa6, cau6ea6, de asemenea, formare de organisme tetraploide 2K=5. 'a plantele autotetraploide, meio6ele relativ anormale cau6ea6 scderea fertilitii i apariia de forme aneuploide, cu vitalitate diminuat 2fig. 1).H5. .e consider, de aceea, c derivaii autotetraploi6i ai diploi6ilor fertili au tendina de a fi sterili, aa cum se ntmpl n ca6ul autotetraploi6ilor de Lari+ europaea i Cryptomeria japonica. <n natur e=ist totui numeroase specii autotetraploide cu fertilitate normal, care, avnd nsuiri superioare diploi6ilor, probabil s7au meninut la nceput prin nmulire vegetativ, pentru ca, ulterior, prin selecia natural, s se elimine treptat formele cu meio6 anormal, precum i cele aneuploide, puin viguroase. 0lopoliploizii sunt adeseori sterili, deoarec pot re6ulta fie prin ncruciarea unor genitori cu genomuri complet diferite i, ca urmare, mperec9erea cromo6omilor provenii de la cei doi prini nu este posibil, fie prin ncruciarea unor forme cu genomuri omoloage, ca6 n care n meio6 apar tetravaleni, trivaleni i univaleni, cu aceleai efecte nefuncio7nale ca la autopoliploi6i. 0lotetraploizii provenii din 9ibri6i diploi6i sterili sunt ns susceptibili de a fi fertili i fi=ai. *ibri6ii diploi6i, coninnd dou serii diferite de cromo6omi, de e=emplu, A i 3, relev aceleai de6ec9ilibre n reparti6area cromo6omilor n gamei, menionate mai sus. Alotetraploi6ii i amfiploi6ii derivai din acetia include cte dou seturi genomice de la cei doi prini 2AA335, aa nct, la formarea celulelor se=uale, n meio6, fiecare gamet primete n total Dn cromo6omi, i anume de la fiecare genitor cte n cromo6omi. /a urmare fertilitatea polenului se restaurea6 i fructificaia se normali6ea6. CAPITOLUL AI 4$INGINERIA GENETICA ?TRANS&ERUL %E GENE* $etodele i te9nicile discutate se ncadrea6 n sens larg n domeniul ingineriei genetice, cu toate c ele nu au de7a face cu transferul genelor individuale, ci doar cu manipularea celulelor plantelor n care sunt ncorporate genoame nucleare sau citoplasmatice, sau fu6iunea acestora. 0ransferul unei gene particulare de la un organism la altul prin te9nicile A&%7ului recombinant, este considerat ca fiind domeniul ingineriei genetice pure. /u alte cuvinte, ingineria genetic const din manipularea direct a materialului genetic i transferul genelor dorite, de la un organism la altul ca i transferul unor gene obinute prin sinte6 c9imic 2&A!3".*LA! !#O, D)))5.
1)) ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
&escoperirea en6imelor de restricie a permis segmentarea moleculelor de A&% n anumite puncte, fiecare fragment fiind n maEoritatea ca6urilor o gen individual i recombinarea acestor fragmente ntr7un nou lan de A&% recombinant 2LA0.#% i colab., 1(8H5. -ngineria genetic implic urmtoarele proceduri > - selecia unui donor pentru o gen dorit A - selecia unui vector sau a unei te9nici de transfer a genei la un receptor 2sau recurent5 A - selecia unui receptor n care gena transferat va funciona normal. 0e9nicile A&% recombinant s7au dovedit de mare succes la nivelul procariotelor n producerea unor medicamente, cum ar fi insulina i interferonul 2LA0.#% i colab., 1(8H5. Aplicarea ingineriei genetice la plante nu s7a dovedit att de fast, de la nceput. +na din ncercrile de pionierat a fost transferul genelor de nitrificare 2nif5 de la /hi4obium la plante care nu triesc n simbio6 cu aceste bacterii 2porumbul, grul, alte monocotiledonate5. .7au fcut ncercri de transfer al genelor nif de la /hi4obium, prin intermediul unui bacteriofag ca vector, la specia &rema canalina. .tudiile au evideniat c transferul genelor nif nu este suficient pentru a reali6a obiectivul propus i c pe lng ele trebuiesc transferate gene promotoare i c e=ist n planta ga6d gene specifice care afectea6 genele nif 2,"!$A i '#% , 1(8H5. # reuit viitoare a transferului genelor nif, care s controle6e fi=area a6otului atmosferic la plantele neleguminoase va diminua substanial utili6area fertili6anilor cu a6ot. 8e lng virusurile utili6ate ca vectori pentru transferul unei gene dorite n receptor, sunt utili6ate i plasmidele, n special plasmidul 0i 2plasmid inductor de tumoare5, i6olat din grobacterium tume#aciens. 8lasmidele sunt molecule circulare de A&% care se comport ca microcromo6omi. "le se regsesc n aproape toate microorganismele. 8lasmidul se poate seciona prin en6imele de restricie i genele dorite se pot introduce n el. &up aceea, plasmidul este refcut, en6imatic, formnd un plasmid 9imer. Acesta se ncorporea6 din nou n bacteria care este folosit apoi pentru infecia organismului recipient. &ac A&%7ul plasmidial este integrat n genomul receptorului i genele transferate se manifest, se consider c s7a obinut pe aceast cale un organism transformat sau transgenic. 4+-,ANIPULAREA GENETICA LA PLANTE se desfoar n mai multe etape care n principiu include transferul unei gene strine n alt organism. ena utili6at este o gen 9imeric, constituit din trei pri > 215 o gen bacterian care codea6 secvenele pentru fosfotransfera6a de neomicin, sau %80, care confer re6isten la antibioticul Fanamicin, 2D5 un promotor i 2H5 un terminator al lui 07A&% din grobacterium A ultimele dou permit funcionarea genei transferate n noul mediu. 2A5 ena este introdus n plasmidul 0i 2care nu poart genele care cau6ea6 boala tumoral5 i ncorporat n grobacterium. 235 cu grobacterium se infectea6 protoplatii
1)1 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
plantelor de tutun. &up cteva sptmni, protoplatii formea6 calus 2&5 din care se regenerea6 plante ntregi 2"5. 0estarea re6istenei plantelor regenerate la Fanamicin se face prin semnarea seminelor lor ntr7un mediu care conine Fanamicin 2:5. 8lantele care rmn ver6i i se de6volt, posed gena bacterial ce stimulea6 e=istena en6imei %80, capabil s deto=ifice Fanamicina. /ele lipsite de gena bacterial rmn albe, deoarece Fanamicina distruge cloroplastele 2dup 0"$8" i ./*"'', 1(8N5 2fig. 11.D5. /ea mai simpl metod de transformare a plantelor prin intermediul plasmidului 0i este metoda discului 2*#!./* i colab., 1(855. &iscurile foliare, cu un diametru de 6 mm, se infectea6 cu grobacterium tume#aciens care conine un plasmid 9imeric cu gena dorit. 8rin aceast metod s7a reuit s se transfere gene re6istente la antibiotice, Fanamicin i carbamicin 2*#!./* i colab., 1(855. 0ransferul de gene prin ncorporarea direct a unui plasmid 0i n protoplast apare ca o posibilitate eficient n ca6ul petuniei i a altor dicotiledonate 2/#/1-% i &A,"O, 1(8N5. 8rimele re6ultate ale transferului direct de gene pentru re6istena la Fanamicin au fost obinute cu protoplati de &riticum monoccum i Lolium multi#lorum 28#0!O/+. i colab., 1(855. $icroinEectarea de A&% n nucleii protoplatilor sau n inflorescene constituie o metod nou de transfer a genelor 2./*"'', 1(8N5, demonstrat cu imprimarea re6istenei la Fanamicin i ncorporarea genelor de re6isten n mugurii floriferi de secar. 0ransferul de gene pentru re6istena la antibiotice n plante se utili6ea6 numai ca marFer pentru alte transferuri folositoare n ameliorarea plantelor. +n e=emplu l constituie transferul genelor pentru re6isten la ierbicide, reali6are deosebit de important pentru agricultur. -erbicidul glQp9osp9at este un in9ibitor al en6imei 57enolpiruvils9iFimate7H7 fosfata6 2"8.85 sinteti6at de plant. /#$A- i colab. 21(855 au i6olat gena mutant aro 0 pentru "8.8 din bacteria )almonella typhirium i l7au transferat n plasmidul 0i la . tume#aciens cu care au infectat plante de tutun. 8lantele transformate au manifestat o anumit re6isten la ierbicide. .*A* i colab. 21(865 au i6olat o clon de A&% complementar care cuprinde sinte6e de "8.8 dintr7o linie de petunia, tolerant la glQp9osp9at. # gen 9imer "8.8 a fost reali6at cu aEutorul virusului conopidei H5 ., n calitate de promotor, indus n celulele de petunia. 8lantele transformate au artat toleran la ierbicid. +nele ierbicide comerciale conin fosfinotricin 28805 care este un in9ibitor al glutaminei i al sinte6ei acestuia n plante, fiind utili6at ca un ierbicid neselectiv. &" 3'#/1 i colab. 21(8N5 au folosit gena bar care confer re6isten la )treptomyces hygroscopicus la bialap9os 2o tripeptid care conine 8805 i include fosfinotricin7 acetiltransfera6a 28A05 capabil s converteasc 8807ul ntr7o acetilat neto=ic. 8rin intermediul vectorului grobacterium, s7a reuit transferul genei bar n tutun, tomate i cartofi. 8lantele transgenice au manifestat o cretere a en6imei 8A0, fiind complet
1)D ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
re6istente la do6ele ridicate din produsele comerciale de fosfinotricin i bialap9os. "=emplul repre6int un succes n obinerea plantelor re6istente la ierbicide. 8#L"'7A3"' i colab. 21(865 au evideniat posibilitatea obinerii de plante transgenice pentru bolile virotice. # gen 9imeric avnd un A&% clonat pentru proteina protectoare 2/85 i gena acestuia la virusul mo6aicului tutunului 20$,5 a fost ncorporat n celule de tutun prin intermediul unui plasmid 0-. 8lantele regenerate au manifestat re6isten la 0$, ca pe un caracter nuclear. 0e9nica A&% recombinant ofer multe alte posibiliti. ;A$". i colab. 21(865 au urmrit s mbunteasc compo6iia proteic a plantelor. "i au sinteti6at un fragment de A&% care codific coninutul ridicat de aminoaci6i eseniali. :ragmentul denumit gen de introducere a acizilor e eniali 2*"AA"7gene5 a fost clonat i introdus ntr7o bacterie. <n acest fel gena a fost introdus n cartof prin intermediul lui grobacterium rhi4ogenes 2plasmid !i5, obinndu7se plante transformate. +n re6ultat interesant l7a obinut #L i colab. 21(865 care au reuit transferul genei lucifera6a de la licurici 2Photinus pyralis5, prin intermediul virusului mo6aicului conopidei H5 . n protoplatii de Daucus carota prin electroporaie i la Nicotiana tabacum prin folosirea plasmidului 0i de la . tume#aciens. &ei fr importan practic deosebit, reali6area menionat poate fi de larg interes pentru unele plante 9orticole, dar poate servi i la reali6area de marFeri pentru manipularea altor gene. +tili6area lui grobacterium n procesul de transformare genetic a plantelor este destul de complicat. &atorit acestui fapt au fost ncercate i alte metode. +na dintre acestea este un transfer direct de gene n celulele plantelor cultivate in vitro. $etoda inEectrii de A&% a ridicat cteva probleme legate de dificultile de penetrare a peretelui celular, daune produse celulelor inEectate 2./*L"- "! i colab., 1(8N5. -nEectarea direct n plante, semine, embrioni sau polen nu au dovedit c gena introdus este integrat i motenit stabil 2./*"'', 1(8N5. &e dat mai recent s7a demonstrat reuita transformrii prin inEecie direct, a A&%7ului plasmidial n mugurii florali de secar, reuindu7se obinerea a trei plante transgenice de secar 23#!#;",-e, 1(()5. 0e9nica A&% recombinant este fr ndoial o reali6are fascinant a gndirii umane, dar de la care nu trebuiete s se atepte miracole. 0rebuiesc aprofundate n continuare procesele metabolice la nivel molecular, procese de difereniere celular i organogene6, bariarele de integrare i funcionare a genelor strine transferate i nu n ultimul rnd dac plantele transgenice nu pot fi duntoare regnului animal. # plant transformat genetic pentru re6isten la un ierbicid sau o boal poate s7i piard re6istena ca re6ultat al apariiei de noi rase patogene sau noi ierbicide, n mod asemntor ca i n ca6ul genelor ncorporate prin metodele convenionale de recombinare. 0ransferul uneia sau mai multor gene de la un organism la altul este numai o parte a procesului de ameliorare, unde recombinrile genetice pentru caractere multiple rmn absolut necesare.
1)H ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
#binerea de noi genotipuri valoroase trebuie considerat ca un sistem integrat ba6at pe legi genetice, selecie natural i artificial i diferite metode de creare i utili6are a variabilitii genetice obinut prin recombinare genetic, mutaii i transfer. $etodele neconvenionale biote9nologice, trebuiesc considerate ca o parte integrant a sistemului de ameliorare i nicidecum un nlocuitor a ameliorrii convenionale. CAPITOLUL AII Ele#ente de !enetic a B B<laiil r 4-- &REC0EN'A GENELOR (I A GENOTIPURILOR 8opulaiile alogame, datorit sistemului lor de reproducere sunt conduse de legi diferite, comparativ cu plantele autogame. .istemul poleni6rii libere se ba6ea6 pe ncruciri ntmpltoare care ofer posibiliti constante de unire a gameilor genetic diferii. Alogamia este cel mai frecvent mod de reproducere i cel mai apropiat de panmi=ie 2sistem de mperec9iere ntmpltoare, liber i nediscriminatorie ntre indivi6ii unei populaii alogame5. <n acest fel, la reproducerea prin panmi=ie se menine nesc9imbat frecvena genelor i structura populaiei 28A%:-', 1(NK5. <n cadrul unei populaii formate din numeroase biotipuri i cnd nu intervin restricii n procesul poleni6rii i fecundrii 2ca6uri de selectivitate n procesul fecundrii sau de incompatibilitate5, plantele alogame sunt 9etero6igote pentru aproape toate genele care le conin. .istemul poleni6rii libere menine n mod constant 9etero6igoia, pe cnd prin autopoleni6are, odat cu creterea numrului de generaii se aEunge la o 9omo6igoie complet. &atorit acestui fapt, efectul seleciei n populaiile cu poleni6are liber este diferit de cel pe care7l are asupra unei populaii cu autopoleni6are, motiv pentru care i metodele de ameliorare vor diferi inevitabil. # populaie a unei specii alogame, conine genotipuri 9omo6igote 2AA i aa5 i genotipuri 9etero6igote 2Aa5. 8roporia dintre genotipuri se poate sc9imba depin6nd de frecvena lui A i a1 &atorit acestui fapt, populaiile alogame pre6int o anumit frecven de genotipuri i gene. *A!&O 21()85 n Anglia i L"-%3"! 21()85 n ermania au descoperit c n populaiile mari se atinge un ec9ilibru ntre gene i genotipuri, fapt cunoscut sub denumirea de legea *ardQ7Leinberg. "c9ilibrul poate fi meninut de la o generaie la alta n condiii de ncruciare liber i fertilitate constant a tuturor genotipurilor pre6ente n populaie. :recvena genotipurilor ntr7o populaie depinde de frecvena genelor din generaia precedent. &up prima generaie de poleni6are liber, frecvena genotipurilor se stabili6ea6, se atinge un ec9ilibru pentru orice frecven iniial de gene, n ca6ul unui singur locus. "c9ilibrul este meninut pn cnd se sc9imb frecvena genelor n populaie.
1)K ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
$eninerea nesc9imbat a frecvenei genelor ntr7o populaie panmictic diploid, nelimitat, este determinat de legea 9a6ardului i poate fi uor e=emplificat, considernd o perec9e de alele Aa, A cu frecvena iniial B i a cu frecven iniial I, astfel nct B6IJ$. 8rin unirea gameilor care cuprind genele A i a8 gameii ce se ntlnesc la ambele se=e din populaie, n frecvenele menionate B i I, vor da urmtoarele genotipuri> ^ amei femeli ] AU2p5 aU2[5 D amei AU2p5 AAU2p 5 AaU2p[5 :recvena masculi aU2[5 AaU2p[5 aaU2[D5 genotipului 7 genotipuri 9omo6igote AA cu frecvena pD 7 genotipuri 9omo6igote aa cu frecvena [D - genotipuri 9etero6igote Aa cu frecvena Dp[ <n generaiile urmtoare, genele ce conin gena A sau a se vor forma n aceeai proporie B i I, deoarece> 7 gena A va fi pre6ent n toi gameii formai pe organismele 9etero6igote Aa deci> pD@pDp[UD?pD@p217p5?pD@p7pD?p 7 gena a va fi pre6ent n toi gameii formai pe organismele 9etero6igote Aa, deci> pD@[Dp[UD?[D@[217[5?[D@[7[D?[ ameii purttori ai genei A sau a8 se formea6 n aceeai populaie se vor menine i ele n generaiile urmtoare n acelai raport de> pD2AA5>Dp[2Aa5>[D2aa5 ca i n generaiile anterioare &up cum se observ, legea *ardQ7Leinberg acionea6 numai n condiii strict delimitate, ce se gsesc greu n realitate, n cadrul unei populaii naturale. &ac frecvena genotipurilor difer de cea a populaiei iniiale este evident c noua populaie nu se va afla n ec9ilibru genetic. <n sistemul ncrucirilor randomi6ate, dac nu se sc9imb frecvena genelor se reali6ea6 un ec9ilibru a frecvenei genotipurilor, asemntoare cu cea a formelor parentale. "=ist factori care pot modifica ec9ilibrul genetic a unei populaii, producnd sc9imbarea genotipurilor i a genelor din cadrul populaiei respective. 4/- SC3I,)RI >N &REC0EN'A GENELOR-A)ATERILE %E LA adic> PAN,IAIE /u toate c o populaie alogam mare este relativ stabil, starea de ec9ilibru constituie mai mult o e=cepie dect o regul, deoarece factorii ce tind s de6ec9ilibre6e structura genetic a unei populaii acionea6 continuu. :actorii cei mai importani care tind s sc9imbe frecvena genelor i a genotipurilor sunt migraia, mutaia i selecia .a. Aciunea lor poate fi individual, cu toate c de cele mai multe ori este combinat.
1)5 ........................................................................................................................................................................
.........................................................................................................................................................................
a. 0baterile de la panmi?ie se ntlnesc, n principal, la plantele la care se manifest mai mult sau mai puin predominant autogamia. <n pre6ena autogamiei, frecvena genotipurilor din populaie nu mai rmne constant, aprnd tendina de eliminare treptat a genotipurilor 9etero6igote. &e e=emplu, dac n urma unei ncruciri apare un organism 9etero6igot pentru o perec9e de gene, prin autopoleni6are timp de cteva generaii procentul 9etero6igoilor se reduce foarte mult. Acelai efect de cretere a 9omo6igoiei se manifest i n ca6ul n care apare o tendin de ncruciare preferenial ntre organisme asemntoare. &e e=emplu, ntr7o populaie alogam de porumb poate s se manifeste o fecundare preferenial ntre plantele care nfloresc concomitent, fapt ce poate duce la sporirea procentului de 9omo6igoie pentru genele precocitii, peste valoarea prev6ut de legea *ardQ7Leinberg. /eea ce apare ca important este c abaterile de la panmi=ie modific frecvena diferitelor genotipuri, fr a afecta frecvena genelor din populaie, care rmne n continuare nesc9imbat de la o generaie la alta. 42-,IGRA'IA (I ,UTA'IILE b. Migraia duce la modificarea frecvenei genelor ntr7o populaie, n urma contactului cu alt populaie n care frecvena acelorai gene este diferit. $igraia poate modifica n mod evident ec9ilibrul genetic al unei populaii i anume> cu att mai puternic cu ct populaia indivi6ilor introdui din alt populaie este mai mare i cu ct diferena n frecvena genelor ntre cele dou populaii este mai accentuat. c. Mutaiile determinnd modificarea unei gene prin transformarea ntr7una din alelele ei, provoac sc9imbarea frecvenei genelor i deci a ec9ilibrului populaiei. &in acest punct de vedere, interesea6 ndeosebi mutaiile care se repet cu o anumit frecven n populaie, mutaii denumite recurente 2mutaie care apare repetat, cu o anumit frecven, n interiorul unei populaii, modificnd starea de ec9ilibru genic a acesteia5. 8resupunnd c gena A se transform prin mutaie n alela sa a cu o rat a mutaiei de n, iar mutaia invers de la a la A se produce cu rata de mutaie v, frecvena celor dou gene se va modifica treptat, pn va aEunge la o nou stare de ec9ilibru n care gena a va avea frecvena 9 = nu se reali6ea6 dect dup eliminarea total a genei A. !spndirea noilor mutaii n genofondul unei populaii depinde de aciunea lor asupra viabilitii i fecunditii individului, de penetra7bilitatea i e=presivitatea lor, de caracterul dominant sau recesiv precum i de valoarea lor selectiv. !spndirea mutaiilor depinde i de mrimea populaiei 28A%:-', 1(NK5. 44-SELEC'IA (I NU,RUL RE%US %E IN%I0I.I >NTR-O POPULA'IE d. +elecia face ca, datorit diferenelor de viabilitate sau fertilitate, care se manifest ntre diferitele genotipuri ale populaiei, acestea s participe inegal la producerea de descendeni. "ste evident c n acest mod selecia poate sc9imba considerabil frecvena genelor, modificnd astfel ec9ilibrul populaiei. "fectul seleciei depinde n mod substanial de felul genotipului asupra cruia acionea6. &ac selecia este ndreptat
1)6 ........................................................................................................................................................................ n . &ac mutaia invers nu se produce 2v ? )5, atunci ec9ilibrul populaiei n+v
.........................................................................................................................................................................
mpotriva unei gene dominante, toate organismele care pre6int aceste gene sunt mpiedicate de a se reproduceA n acest ca6 gena poate fi eliminat n cursul unei singure generaii. <n mod contrar, selecia mpotriva unei gene recesive are un efect mult mai lent. Astfel, presupunnd c selecia ndeprtea6 n fiecare generaie toi indivi6ii 9omo6igoi, datorit pstrrii genei recesive n indivi6ii 9etero6igoi, dup n generaii de selecie frecvena acestei gene va scdea de la [) la 9n = 1 + n9 ) n care> [) este frecvena genei nainte de selecie, iar n repre6int numrul generaiilor. Alturi de apariia continu de noi mutaii, selecia ca i fenomenul de superioritate adaptativ a 9etero6igoilor fa de oricare dintre 9omo6igoi, favori6ea6 meninerea n populaii a unor gene recesive, cu influen evident duntoare asupra organismelor, n condiiile respective de mediu. #rict ar prea de curioas aceast fncrcturJ de gene nefavorabile, pre6int o importan deosebit pentru capacitatea populaiilor de a evolua, adaptndu7se la condiiile sc9imbate de mediu. enele cu efect nefavorabil n condiii normale de mediu pot s fie uneori eseniale pentru adaptarea la noile condiii, iar meninerea lor n interiorul populaiei asigur acesteia posibiliti sporite de a supravieui unor sc9imbri radicale ale mediului. -nteraciunea proceselor de mutaie i selecie asigur, aadar, populaiilor nu numai o stare de ec9ilibru optim pentru adaptare la condiiile de mediu e=istente, dar i meninerea unei variabiliti care s permit adaptarea la condiii sc9imbate. e. 6umrul redu de indivizi dintr<o populaie face s apar fluctuaii ntmpltoare n frecvena genelor i a genotipurilor, dnd natere la fenomenul denumit drift genetic. "ste uor de neles c dac ntr7o populaie mare toate combinaiile de gamei au anse egale de reali6are, ntr7o populaie redus anumite combinaii de gamei se pot reali6a ntmpltor mai frecvent dect altele. Asemenea modificri ntmpltoare ale frecvenei genelor, alturi de i6olarea unor grupri mici de biotipuri, pot duce la apariia unor diferenieri considerabile la populaia de aceeai provenien. "fectele nefavorabile ale driftului genetic se nltur prin alegerea unui numr suficient de plante elite, plante care s repre6inte, pe ct posibil, ntregul fond genetic al populaiei.
9)
1)N ........................................................................................................................................................................

GENETICA-Grupat Pe Subiecte de Examen

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

GENETICA-Grupat Pe Subiecte de Examen

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

.........................................................................................................................................................................

CAPITOLUL I0 Te ria cr # ; #al a ereditii INTRO%UCTI0E >N TEORIA CRO,O.O,IAL

8lanul de 9ibridare va fi urmtorul> 81 gamei :1 &&rr dd!! &r d! &d!r 8D

S-ar putea să vă placă și