Universitatea de Stat de Medicin i Farmacie Nicolae Testemianu

Catedra Biologie molecular i Genetic uman

Curs

Genetica uman
I

Chiinu, 2012

Cuprinsul
CURS 1 ...................................................................................................................................................................... 3
GENETICA UMAN TIIN FUNDAMENTAL I MEDICAL ......................................................... 3
CURS 2 ...................................................................................................................................................................... 7
APARATUL GENETIC AL CELULEI UMANE .............................................................................................. 7
CARACTERISTICA GENOMULUI UMAN .................................................................................................. 12
CURS 3 .................................................................................................................................................................... 17
VARIABILITATEA I FORMELE EI............................................................................................................. 17
(A) VARIABILITATEA NEEREDITAR ...................................................................................................... 18
(B) VARIABILITATEA EREDITAR SAU GENOTIPIC .......................................................................... 19
CURS 4 .................................................................................................................................................................... 21
CROMOZOMII UMANI .................................................................................................................................. 21
(B) CLASIFICAREA CROMOZOMILOR UMANI ........................................................................................ 26
STUDIUL CROMOZOMILOR UMANI.......................................................................................................... 28
NOMENCLATURA CROMOZOMILOR UMANI ......................................................................................... 32
CURS 5 .................................................................................................................................................................... 36
ANOMALII CROMOZOMICE ........................................................................................................................ 36
ANOMALIILE CROMOZOMICE DE STRUCTUR ................................................................................. 36
ANOMALIILE CROMOZOMICE NUMERICE ............................................................................................. 40
CURS 5 .................................................................................................................................................................... 47
TRANSMITEREA MATERIALULUI GENETIC DE LA CELUL LA CELUL....................................... 47
ERORILE MITOZEI ......................................................................................................................................... 50
CURS 6 .................................................................................................................................................................... 55
TRANSMITEREA INFORMAIEI GENETICE DE LA PRINI LA COPII ............................................ 55
GAMETOGENEZA .......................................................................................................................................... 55
DINAMICA CROMOZOMILOR N MEIOZ ............................................................................................... 57
ERORILE MEIOZEI I CONSECINELE LOR............................................................................................. 60

CURS 1
GENETICA UMAN TIIN FUNDAMENTAL I MEDICAL
Genetica este o tiin biologic fundamental, cu ritm rapid de dezvoltare, ce studiaz
proprietile universale ale vieii ereditatea, variabilitatea i substratul lor material moleculele de
ADN. n conceptul actual, organismul viu este un sistem deschis, ce se autoregleaz i se
autoreproduce. Activitatea vital este susinut de schimbul permanent de energie, substane i
informaie. Particularitile organizrii i funcionrii sistemelor biologice, cile de transformare a
substanelor i energiei sunt controlate de informaia ce se conine n gene. Descifrarea informaiei
genetice se realizeaz n procesul de biosintez a diverse proteine, care reprezint suportul tuturor
proceselor vitale ale organismului.
Ereditatea este proprietatea organismului de a pstra i a transmite caracterele morfologice,
fiziologice, biochimice i de comportament generaiilor urmtoare. Ereditatea este asigurat de
proprietatea moleculelor de ADN de a se replica cu mare exactitate i a determina transmiterea de-a
lungul miilor i milioanelor de generaii a informaiei i, deci, a caracterelor. Astfel, n realitate, nu
caracterele se pstreaz i se transmit, ci informaia genetic despre ele, codificat n ADN. Ereditatea
face posibil conservarea speciilor n spaiu i timp.
Variabilitatea este proprietatea organismului de a prezenta caractere deosebite de cele ale
prinilor, asigurnd diferene individuale, intrafamiliale i intrapopulaionale. Sursele principale ale
variabilitii sunt diferite modificri ale materialului ereditar (mutaiile) care apar n rezultatul erorilor
de replicaie sau aciunii diferitor factori mutageni fizici, chimici sau biologici. O alt surs de
variabilitate, este capacitatea moleculelor de ADN de a se recombina i, ca rezultat, apar combinaii noi
de gene i, respectiv, de caractere. Totodat, diveri factori ai mediului (intern i extern) pot modula
activitatea genelor, asigurnd rspunsul organismului n condiii concrete. Apariia la descendeni a
caracterelor noi este important din punct de vedere evolutiv, asigurnd adaptarea indivizilor la
condiiile noi ale vieii. Transmiterea caracterelor evaluante la descendeni determin dezvoltarea
speciei n timp.
Substratul ereditii i variabilitii la majoritatea organismelor vii este molecula de ADN (ca
excepie, la unii virui materialul genetic este reprezentat de molecule de ARN). Structura moleculelor
de ADN, proprietile, structura i funcia genelor, mecanismele moleculare ale reglrii activitii
genice reprezint obiectul de studiu al geneticii contemporane. Permanent sunt elaborate metode noi de
cercetare, identificate gene noi, stabilite legiti noi ce permit de a ptrunde mai profund n tainele
vieii.
Genetica ofer o nelegere tiinific a proceselor biologice ce stau la baza activitii vitale
normale a organismului, ct i a dereglrilor n diverse stri patologice. Toate tiinele despre om
integreaz realizrile geneticii, fapt confirmat prin ompartimentele geneticii care s-au transformat n
discipline independente:
Genetica general, clasic;
Genetica dezvoltrii;
Genetica senescenei;
Imunogenetica;
Genetica ecologic;
Neurogenetica;
Farmacogenetica;
Genetica comportrii;
Genetica medical;
Genetica clinic.
3

Genetica uman contemporan reprezint o tiin bazat pe genetica clasic i genetica

molecular ce se focuseaz pe:
legitile pstrrii, transmiterii i realizrii informaiei ereditare;
mecanismul apariiei, manifestrii i transmiterii modificrilor materialului genetic;
structura i funciile genelor normale i patologice.
Genetica uman contemporan utilizeaz att metodele clasice ale geneticii ct i cele
moleculare:
metoda genealogic studiul agregrii familiale ale caracterelor ereditare, stabilirea tipului de
transmitere i calcularea riscului de recuren la generaiile urmtoare, reprezentnd o etap
important n consultul i sfatul genetic;
metoda gemenologic studiul ponderii factorilor genetici i ecologici n manifestarea
caracterelor normale sau patologice;
metode citogenetice - analiza cromozomilor i depistarea anomaliilor cromozomiale de numr i
de structur;
metode molecular genetice analiza variaiilor nucleotidice la nivelul moleculei de ADN,
studiul genelor normale i genelor mutante, identificarea polimorfismelor normale i mutaiilor
patologice;
metoda populaional statistic analiza genofondului populaiei, stabilirea frecvenei unor
gene patologie, evaluarea factorilor ce deregleaz echilibrul populaional;
modelarea matematic i biologic;
genetica celulelor somatice studiul corelaiei dintre modificrile materialului genetic cu
modificrile fenotipice la nivel celular;
Medicii de diferite specialiti n activitatea lor ntlnesc boli genetice, de aceea utilizeaz
diverse metode n investigarea acestora. Depistarea modificrilor n structura genelor prin studiul ADN
reprezint o cale n diagnosticul corect al bolilor genetice. Ingineria genic permite elaborarea i
producerea diferitor preparate medicamentoase: hormoni, factori de cretere, interferon, etc. Una dintre
problemele actuale ale medicinei se refer la posibilitatea clonrii embrionilor pentru transplantul
esuturilor i organelor. Se elaboreaz metode ale terapiei genice, prin care gena patologic este
nlocuit cu cea normal. Din aceste considerente, genetica uman este o tiin aplicativ, cu un rol
deosebit n medicin.
Profilaxia bolilor genetice se bazeaz pe realizrile geneticii umane:
diagnosticul prenatal prin screeningul mutaiilor patologice;
terapia genic ce permite introducerea genelor umane in genomul celulelor somatice ale
purttorilor de mutaii cu revenirea la un genotip normal;
obinerea produilor genetici artificiali, transferul lor n alt celul sau organism, studiul
funciei;
sinteza noilor proteine cu proprieti terapeutice.
***
Piatra de temelie pentru progresul Geneticii umane este pus n anul 1956, an n care a fost
stabilit cromosologia uman i an n care a avut loc I-ul Congres n Genetica Uman la Copenhaga.
Principalele evenimente discutate la acest congres au fost:
numrul de cromozomi la specia uman (46,XX; 46,XY);
analiza grupelor de nlnuire;
studiul proteinelor prin electroforeza n gel;
stabilirea defectului molecular n siclemie.
Din 1956 pn n 1991 (Congresul VIII, Washington) au aprut metode moleculare n studiul
cromozomilor umani; s-a reuit s se studieze variaiile ADN-ului.
4

Spre 1961 deja s-au evaluat implicaiile clinice ale anomaliilor cromozomiale:
rolul cromozomilor X i Y n sexualizare, patogenia sdr. Turner, Klinefelter; a fost
descoperit TDF testis determining factor; a fost naintat ipoteza Mary Lyon privind
activitatea cromozomilor X la cele dou sexe;
s-a stabilit corelaia dintre cromozomul Philadelphia i LMC (leucemia mieloid
cronic) care este prima pies n teoria cancerului cu implicarea cromozomilor.
n 1966 a fost descifrat n totalitate codul genetic i se descriu erorile nnscute de metabolism;
se pun bazele diagnosticului prenatal prin amniocentez.
n 1971 se pun la punct erorile nnscute de metabolism prin studiul pe culturi celulare.
n 1980 se practic deja clonarea genelor umane. Iar din anul 1981 (Congresul de la Ierusalim)
se discut metodele de genetic molecular implicate n studiul localizrii genelor la nivel de
cromozomi, prin studiul familial a patologiilor cu transmitere mendelian. n 1985 a aprut tehnica
PCR. n 1986 la congresul de la Berlin s-a discutat despre studiul RFLPs n boala Hungtington; s-a
evideniat importana studiului molecular n aa patologii ca Granulomatoza cronic, distrofia
Duchenne, retinoblastom, leucemia mieloid cronic i limfomul Burkitt.
n 1991 s-au clonat i studiat genele implicate n patologia Duchenne, fibroza chistic,
neurofibromatoz, polipoza de colon, retinita pigmentar, cardiomiopatia hipertrofic, sdr. Marfan,
hipertermia malign; au aprut diverse concepte legate de impriting-ul genelor i disomia uniparental.
n 1994 a fost publicat Catalogul Fenotipurilor Autosomal Dominante, Autosomal Recesive i
X-lincate; acest catalog este denumit Catalogul genelor umane i a defectelor genice.
n 1996 a avut loc al XIX-lea Congres n Genetica Uman la Rio-de-Janeiro unde s-au discutat
marcherii ADN-ului; YAC-urile; rolul acidului folic n defectele aprute la nou-nscui i introducerea
acestuia ca supliment obligatoriu n perioada prenatal; diagnosticul preimplantativ al celulelor utilizate
n fertilizarea in vitro i metodele de selecie a produilor de concepie non-mutani.
Din 1996 pn n 2001 s-au descoperit mai mult de 1000 de gene implicate n patologia uman
(cu una sau mai multe mutaii); s-a studiat expresia genic, diagnosticul maladiilor genetice, s-au fcut
studii de omologie pe drojdii i drosofil.
n 2001 a demarat Proiectul Genomul Uman. n perioada 2001 - 2003 se schimb paradigmele
Geneticii:
de la structural la studiul funcional al genelor;
de la aranjarea genelor la nivel de cromozomi la secvenierea ADN-ului;
de la diagnosticul unei afeciuni genetice la determinarea predispoziiei genetice n
bolile comune;
de la etiologie la patogenie, la mecanismul producerii bolilor genetice;
de la studiul unei gene ce cauzeaz boala la studiul familiilor de gene;
de la genom la proteinom;
de la Genetica Medical la Medicina Genetic; Genetica Medical se axeaz pe
studiul patologiilor mendeliene i a aberaiilor cromozomiale, pe cnd Medicina Genetic
se focuseaz pe implicarea geneticii n orice parte a medicinii clinice, factorii genetici
fiind implicai n toate bolile existente, iar predispoziia genetic exist pentru maladiile
comune ale adultului i copilului; Genetica Molecular prevaleaz n toate aspectele
Geneticii Umane i Medicale.

Complexitatea studiilor din Proiectul Genomul uman, chiar n zilele noastre nc nu sunt
definitive, deoarece, dei marea majoritate a genelor sunt cunoscute, nc nu se tie cu certitudine, cum
se comport marea majoritate a acestor gene solo, darmi-te n concert cu celelalte gene din
genotipul uman.
Genetica Nou se bazeaz pe studiul secvenelor specifice de ADN cu funcie necunoscut i
corelaiile genotip fenotip. Aa dar, progresnd n ultimii 40 de ani de la fenotip la ADN, n urmtorii
30 de ani ne vom ntoarce de la ADN la fenotip determinnd funcia anumitor secvene de ADN.
O alt problem ce ine de viitor este studiul corelaiei: secvene ADN funcie variaie a
secvenelor ADN funcie. Se ateapt o nelegere a implicaiei factorilor genetici n afeciunile
multifactoriale (ex: HTA, boli psihice). Se ateapt o viziune nou asupra maladiilor genetice ale
celulelor somatice a patra mare categorie de maladii genetice (cancerul), celelalte trei categorii fiind
bolile monogenice, boli multifactoriale; anomaliile cromozomiale. Conexiunea ntre oncogenez i
teratogenez (oncogene i teratogene) deja a fost fcut pe exemplul tumorii Wilms i sindromul
cefalosindactiliei Greig. Terapia genic va deveni popular nu doar pentru maladiile ereditare, dar i
pentru cele ale celulelor somatice.
***
Trim n veacul celor dou revoluii tiinifice:
n biologie !!!
n informatic !!!
Geneticienii sunt privilegiai s lucreze ntr-un important cmp tiinific un cmp al
provocrilor intelectuale. Genetica uman este un cmp care deine fascinaii particulare, pentru c
implic aspectele fundamentale ale speciei noastre, sunt fascinaii pe care matematica, de exemplu, nu
le poate mprti.
Genetica Uman, combin fascinaiile intelectuale i antropoceutice, oportunitatea de a
contribui la bunstarea umanitii, de a fi n serviciul familiei i individului aparte prin Genetica
Medical. Dar acest privilegiu aduce cu sine i responsabiliti !!!
Proiectul Genomul Uman are semnificai etice, legale i sociale. Abilitatea de analiz a
genomului individului este acompaniat de riscul de a folosi greit informaia i de aceia trebuie de
limitat la maxim acest risc. Exist necesitatea pstrrii confideniale a anumitor studii pe indivizi,
trebuie protejat informaia pentru a nu se ajunge la un complex hazardat genetic comercial.

CURS 2
APARATUL GENETIC AL CELULEI UMANE
Aparatul genetic al celulelor umane este format din structuri celulare ce conin ADN (nucleul
i mitocondriile) i care care intervin n realizarea funciilor ADN-ului (ribozomii i centrul celular).
Nucleul conine ~ 98% din ADN celular, iar numrul de molecule de ADN nuclear este corelat cu
numrul de cromozomi, care constituie o caracteristic de specie:
- n celulele somatice ale omului se conin 46 molecule lungi de ADN n cei 46 de cromozomi
(set diploid = 2n cromozomi);
- n celulele sexuale 23 molecule de ADN n 23 cromozomi (set haploid = n cromozomi).
ADN-ul cromozomial este extrem de heterogen, 25 % din secvenele polinucleotidice corespund
genelor structurale codificatoare de proteine. Totalitatea informaiei genetice (genele) din cei 46
cromozomi ai celulelor somatice formeaz genotipul, fiind n proporie de 50 % / 50% de origine
matern i patern.
Mitocondriile conin ~ 2% din ADN celular. Spre deosebire de nucleu, mitocondriile conin cteva
copii mici de ADN circular. Informaia genetic din mitocondrii constituie plasmotipul. Transmiterea
informaiei ereditare a mitocondriilor se face pe linie matern.
Ribozomii reprezint o component a aparatului de translaie a informaiei genetice, controlnd
biosinteza proteinelor expresia informaiei genetice codificate n ADN.
Centrul celular asigur formarea aparatului de diviziune responsabil de repartizarea materialului
genetic n procesul de transmitere a informaiei genetice de la o generaie de celule la alte celule n timpul
mitozei, de la prini la copii n timpul meiozei.

ORGANIZAREA I FUNCIONAREA MATERILAULUI GENETIC

(date generale)
(A) ADN-ul deine informaia genetic despre:
structura organismului
particularitile lui funcionale
particularitile de dezvoltare, reproducere, rspunsului la aciunea factorilor de mediu,
interaciunea dintre diferite elemente ale aceluiai organism sau cu alte organisme.
ADN reprezint macromolecule formate din dou catene polidezoxinucleotidice complimentare,
antiparalel sub form de dublu helix. Informaia genetic n ADN este nscris sub forma unei secvene
prin succesiunea a patru tipuri de baze azotate:
A, G, C, T
Bazele azotate se combin cte trei formnd codoni - "cuvintele" codului genetic, fiecare triplet
codific un anumit aminoacid, de exemplu:
AAA Lys
CAG Gln
TGC Cys
GGA Gly
etc.
Astfel, succesiunea tripletelor dintr-un segment codant de ADN determin succesiunea
aminoacizilor dintr-un polipeptid.
Secvena codant - ...AAACAGTGCGGA...

Fragment polipeptidic - ...Lys Gln Cys Gly...

Sucesiunea aminoacizilor din polipeptid determin particularitile spaiale i funcionale ale
proteinei.
Proteinele determin (direct sau participnd n diferite lanuri metabolice) toate structurile
celulare, activitle celulare, asigur interaciunea cu alte celule, particip n aprarea celulei sau
rspunsul la aciunea diferitor factori ecologici, etc.
(B) ADN-ul transmite informaia genetic din generaie in generaie (de la celul la alte celule
sau de la o generaie de organisme la alte generaii de la prini la copii).
La baza motenirii i transmiterei I.G. st proprietatea unic a moleculei de ADN de replicare:
1 molecul de ADN

replicare

2 molecule de ADN

n timpul replicrii sau sub aciunea diferitor factori ai mediului n molecula de ADN pot aprea
modificri n secvena nucleotidic mutaii. Mutaiile pot avea catacter adaptiv sau pot fi patologice.
Pentru a se evita acumularea de mutaii patologice moleculele de ADN au alt proprietate unic
reparaia cu refacerea structurii iniiale a ADN-ului prin nlturarea nucleotidelor eronate sau
modificate i inlocuirea lor cu nucleotide normale.
(C) ADN-ul realizeaz informaia genetic n timpul sintezei moleculelor de ARN i
proteinelor.
ADN-ul poate fi transcris sub form de secvene nucleotidice de ARN: ARNm, ARNr, ARNt i
microARN care particip la translaia I.G. i sinteza lanurilor polipeptidice - viitoare proteine
structurale, enzime, receptori, reglatori, etc..
8

ADN

transcript ie

ARNm
ARNt
ARNr
microARN

translatie

polipeptid protein funcional

(D) Procesele moleculare de baz din celule umane sunt:

replicarea ADN suportul transmiterii I.G.;
reparaia ADN suportul stabilitii I.G;
transcripia ADN i translaia ARNm suportul realizrii I.G..
Toate aceste procese:
(1) sunt programate se realizeaz numai ntr-o anumit perioad ontogenetic a celulei,
dependent de tipul celulei, depind de semnale exogene i endogene;
(2) se realizeaz matricial moleculele iniiale reprezint modele pentru sinteza produilor
specifici:
ambele catene ale moleculei de ADN sunt matrie pentru sinteza noilor catene de
ADN n timpul replicrii;
una din catenele moleculei de ADN este matri n timpul reparaiei celeilalte catene
de ADN;
una din catenele ADN-ului genic este matri pentru sinteza moleculelor de ARN
(ARNm, ARNt, ARNr) n timpul transcripiei ADN-ului;
molecula de ARNm este matri pentru sinteza polipeptidului n procesul translaiei
codului genetic;
(3) se desfoar dup principiul complementaritii bazelor azotate;
n timpul replicrii catenele noi de ADN sunt complementare celor vechi, matrielor;
n timpul reparaiei fragmentele reparate de ADN sunt complementare catenei
integre;
n timpul transcripiei moleculele de ARN sintetizate sunt complementare catenei
anticodogene a secvenei moleculei de ADN;
n timpul translaiei anticodonii moleculelor de ARNt adaptorii aminoacizilor
sunt complementare codonilor din ARNm.
(4) necesit factori proteici, uniti de polimerizare i energie pentru a se desfura:
a. pentru a se desfura replicarea:
ADN-polimerazele - enzime ce sintetizeaz catene noi de ADN pe baza catenelor
vechi;
dNTP nucleotide, monomeri pentru formarea noilor catene de ADN + donatori
de energie n realizarea legturilor covalente dintre nucleotide;
b. pentru a se desfura reparaia:
Endonucleaze enzime specifice ce nltur fragmentul nucleotidic defect;
ADN-polimerazele - enzime ce sintetizeaz fragmente noi de ADN pentru
inlocuirea golului;
dNTP nucleotide, monomeri pentru formarea noilor catene de ADN + donatori
de energie n realizarea legturilor covalente dintre nucleotide;
c. pentru a se desfura transcripia:
ARN-polimerazele enzime care sintetizeaz catene de ARN pe baza unei catene
a moleculei de ADN;
NTP - nucleotide, monomeri pentru formarea moleculelor de ARN + donatori de
energie n realizarea legturilor covalente dintre nucleotide;
d. pentru a se desfura translaia:
ribozomii sediul translaiei i sintezei polipeptidului;
ARNt - translatorii codului genetic i transportori de aminoacizi spre ribozomi;
9

(5)

(6)

(7)

(8)

aminoacizi monomeri pentru formarea polipeptidului;

ATP, GTP surse de energie.
necesit secvene nucleotidice reglatoare pentru interaciunea cu reglatorii procesului dat;

Pentru iniierea replicrii secvena ORI;

Pentru transcriie:
o
Promotor secven reglatoare a iniierei transcripiei;
o
Terminator secven reglatoare a terminrii transcripiei;
o
Enhancer secven intensificatoare a transcripiei;
o
Silencer secven atenuatoare a transcripiei.

Pentru translaie
o
Codon de iniiere - AUG;
o
Codon STOP - UAA, UAG sau UGA;
necesit factori proteici i energie pentru despiralizarea ADN-ului sau ARN-ului ca s fie
acsesate matriele i citite secvenele nucleotidice:
Helicazele enzime ce denatureaz acizii nucleici, scindez legturile de H dintre bazele
complementare ale ADN sau ARNm particip la toate procesele de baz analizate;
Topoizomerazele relaxeaz i despiralizeaz dublul helix de ADN, ajutnd Helicazele
n timpul replicarii.
se desfoar n mai multe etape cu cooperarea numeroilor factori proteici i n
consecin defectul sau absena unei proteine din setul necesar pot compromite calitativ sau
cantitativ replicarea, reparaia, transcripia sau translaia:
i Blocarea replicrii ADN-ului va conduce la blocarea proliferrii celulei (diviziunii
celulei) care n consecin pot duce la:
o deficiene in dezvoltarea i creterea organismului;
o deficiene n regenerarea i reinnoirea esurutilor;
o mbtrnire precoce i moarte.
ii Blocarea reparaiei ADN-ului va avea ca consecin:
o acumularea mutaiilor patologice;
o sensibilitatea sporit a organismului la aciunea radiaiei ultraviolete, radiaiei
ionizante, substanelor chimice din mediu;
o apariia i dezvoltarea rapida a tumorilor (cancerului);
o mbtrnirea precoce i moartea.
iii Blocarea transcripiei sau translaiei, fiind etape ale realizrii I.G. vor avea ca
consecin blocarea sintezei proteinei i diferite defecte la nivel celular sau organismic
dependent de:
o tipul proteinei,
o funciile ei n celul;
o tipul de celul, esut n care se sintetizeaz i / sau activeaz;
o perioada ontogenetic n care este activ,
o etc.
prezint principii generale comune la diferite organisme i anumite particularitai,
unele aspecte sunt aceleai i la procariote i la eucariote, inclusiv i la om.

NIVELE DE ORGANIZARE A MATERIALULUI GENETIC

Din punct de vedere funcional se disting trei nivele de organizare a materialului genetic: genic,
cromozomial, genomic, care au urmtoarele caracteristici comune:
1. autoreproducerea, care asigur transmiterea informaiei genetice la urmai prin replicarea ADNului i diviziunea celular suportul ereditii;

10

2. autoconservarea, ce asigur stabilitatea organizrii, pstrrii i repartizrii uniforme a materialului

genetic n succesiunea generaiilor prin replicare i reparaia ADN-ului important n pstrarea
caracterelor de specie;
3. mutabilitatea, care asigur proprietatea materialului genetic de a se schimba i de a transmite
modificrile descendenilor - sursa principal a variabilitii.
-

Gena - unitatea elementar structuralfuncional a ereditii i variabilitii:

reprezint o secven specific polinucleotidic din molecula de ADN;
conine informaia despre formarea caracterului elementar proteina: succesiunea de nucleotide din
ADN determin succesiunea de aminoacizi n protein;
asigur continuitatea material a informaiei genetice de-a lungul generaiilor, adic motenirea de
ctre descendeni a caracterelor parentale;
modificrile ce se produc n structura genei pot determina modificri n sinteza proteinei i ale
caracterului. Existena genelor a permis descoperirea de ctre G. Mendel a legitilor de motenire a
caracterelor.

Cromozomul reprezint substratul morfologic al ereditii i variabilitii:

- este reprezentat de o molecul de ADN linear compactizat cu ajutorul proteinelor histone i
nonhistone, vizibil n timpul diviziunii celulare;
- conine multe gene, de la cteva sute (crs. Y) pn la cteva mii (crs. 1);
- asigur aranjarea ordonat a informaiei genetice n spaiu, n grupuri de nlnuire, fiecare gen are
un locus fix pe molecula de ADN;
- determin transmiterea genelor n bloc, datorit proprietilor de replicare a cromozomilor i
compactizrii lor rapide;
- controleaz recombinarea materialului genetic crossing-overul.
Genomul este nivelul superior de organizare a materialului genetic care asigur unitatea
genetic a sistemelor unui organism prin realizarea informaiei genetice n caractere fenotipice i
integrarea diferitor procese moleculare, biochimice, morfologice i fiziologice. Genomul reprezint:
- totalitatea moleculelor de ADN ce se conin n celul;
- genomul celulelor sexuale umane - 23 molecule ADN nuclear (set haploid) i cteva moleculele de
ADN mitocondrial;
- genomul celulelor somatice - 46 molecule ADN nuclear (set diploid) i cteva copii de ADN
mitocondrial;
- genomul conine setul de secvene codante, reglatoare i modulatoare care asigur dezvoltarea
tuturor caracterelor specifice individului;
- sistemul de gene care se conine n 46 molecule de ADN ale celulelor somatice se numete genotip
i include circa 25-35 mii perechi de gene;
- genele din ADN mitocondrial formeaz plasmotipul;
- setul diploid al moleculelor de ADN nuclear, organizate sub form de cromozomi (complexe ADNproteine) formeaz cariotipul.

11

CARACTERISTICA GENOMULUI UMAN

Genomul este sistemul genetic complet al celulei organismului uman, care determin
dezvoltarea individual, activitatea vital i transmiterea caracterelor structurale i funcionale
descendenilor. Sistemul genetic uman complet include genomul nuclear i mitocondrial, adic 46
molecule ADN nuclear i cteva molecule circulare mitocondriale.

Genomul nuclear al celulei somatice umane reprezint 95-98% din cantitatea de ADN celular i
este fragmentat n 24 molecule de ADN distincte:

22 molecule de ADN ce formeaz cromozomii autozomi;

o molecul de ADN ce formeaz cromozomul X;

o molecul de ADN ce formeaz cromozomul Y.

n nucleu sunt aproximativ:
7 picograme de ADN cu o lungime de pn la 7 mld. p.n. (7x109),
circa 30.000 perechi de gene codificatoare de proteine care:

constituie doar 25% din ADN-ul celular;

sunt dispersate neomogen pe toi cromozomii;

90% regiuni eucromatice ce asigur transcripia i se caracterizeaz prin alternarea:

secvenelor unice i repetitive,

codificatoare i necodificatoare;
10% - regiuni heterocromatice ce constau din secvene nalt repetitive necodificatoare;
Partea necodificatoare a genomului se caracterizeaz printr-un polimorfism nalt, care

nu se manifest n fenotip,

constituie baza molecular a individualitii ADN-lui uman amprent genetic.

Genomul nuclear reprezint o comunitate simbiotic de secvene nucleotidice, care const din
elemente obligatorii i facultative.
Elementele obligatorii determin formarea i transmiterea caracterelor specio-specifice i
individuale, structurale i funcionale ntr-un ir de generaii; controleaz particularitile dezvoltrii
ontogenetice ale fiecrui individ.
Elementele obligatorii ale genomului uman sunt:
genele structurale caracteristice speciei, numrul i localizarea crora sunt constante n genom;
12

 genele ARNr i ARNt produii crora asigur expresia genelor structurale, sinteza proteinelor
celulare baza tuturor structurilor i funciilor celulelor organismului uman;
secvenele inversate i palindromii care reprezint situsuri de recunoatere - reglatoare ale expresiei,
replicrii i recombinrii materialului genetic;
secvenele centromerice i telomerice care asigur integritatea materialului genetic cromozomial,
transmiterea exact a IG n timpul mitozei, meiozei.
Elementele facultative ale genomului sunt reprezentate de pseudogene, elemente mobile
(transpozoni), secvene de ADN viral, retrotranscripi (ADNc), care reprezint un substrat n evoluia
genomului.
CLASIFICAREA SECVENELOR GENOMULUI UMAN NUCLEAR
ADN nerepetitiv 60%
Tipuri de
secvene
Numrul de
copii per
genom
Localizare

Funcii

- gene structurale
- pseudogene
- spaiatori ai genelor
- secvene unice
- familii multigenice cu
un numr mic de copii
dispersate neomogen pe
toi cromozomii
- codific proteine
- separ secvenele
codificatoare
- regleaz expresia
genelor

ADN moderat repetitiv

30%
- gene de clasa I i III;
- SINEs
- LINEs
sute i mii de copii de secvene scurte
de 300-1000pb

ADN nalt repetitiv

10%
ADN satelit (100-200pb)n;
ADN minisatelit (14-65pb)n;
ADN microsatelit (1-4pb)n.
Milioane de copii de secvene de 2200pb

- sunt dispersate n genom

- formeaz secvene repetate n tandem

- -sateliii n regiunile de
heterocromatin costitutiv;
- minisateliii au localizare specific
pentru fiecare cromozom
- sateliii au rol structural;
- minisateliii reprezint markeri
specifici ai cromozomilor;
- microsateliii sunt hipervariabili marcheri genetici individuali
permit dactiloscopia genomic

- codific ARNr, ARNt, ARNsn

- reprezint transpozoni
- secvene ORI
- controleaz mperecherea corect a
cromozomilor n timpul meiozei

Genomul mitocondrial este reprezentat de 2-10 copii circulare de ADN, localizate n matricea
mitocondrial. Fiecare molecul de ADN const din 16.569 perechi nucleotide. Ambele catene ale moleculei
de ADN conin gene structurale care sunt lipsite de introni i se separ unele de altele prin gene ARNt. n
fiecare molecul de ADN sunt localizate 13 gene ce codific proteine enzime ale aparatului de respiraie
mitocondrial, 2 gene pentru ARNr i 22 gene pentru ARNt.
Genomul mitocondrial se caracterizeaz
prin:
numr variabil a copiilor per celul, care
depinde de numrul mitocondriilor i /
sau intensitatea metabolismului celular;
localizarea compact a genelor;
lipsa secvenelor necodante;
transcrierea informaiei de pe ambele
catene ale moleculei de ADN;
mutabilitatea nalt a secvenelor
nucleotidice;
mutaiile genelor mitocondriale sunt
cauzele unor boli genetice legate de
metabolismul energetic (de ex., miopatii,
encefalopatii, etc.);
transmitere pe linie matern.
13

DINAMICA MATERIALULUI GENETIC NUCLEAR

Materialul genetic nuclear este reprezentat de cromatin sau cromozomi, care din punct de
vedere al organizrii moleculare reprezint
complexe nucleoproteice (ADN, proteine histone,
proteine nehistone, ARN). Cantitatea, forma i
activitatea materialului genetic se modific n
funcie de:
- perioada ciclului celular;
- perioada ontogenetic;
- tipul celulei;
- aciunea factorilor de mediu.
n diferite perioade ale ciclului celular
materialul genetic se poate prezenta sub form de:
- cromatin sau cromozomi, graie diferitor
nivele de compactizare;
- cromozomi mono- sau bicromatidieni,
nainte sau dup replicare;
- secvene genetic
active sau inactive
transcripional.
Compactizarea ADN-ului nuclear

Dinamica materialului genetic pe parcursul ciclului celular

Perioadele
ciclului celular
G1

G2
Profaz
Metafaz
Anafaz
Telofaz

Grad de condensare

Procese genetice

Eu- i heterocromatin Transcripie,

translaie,
reparaie
Eu- i heterocromatin Replicaie,
transcripie,
translaie,
reparaie
Eu- i heterocromatin Transcripie,
translaie,
reparaie
Heterocromatin
Cromozomi
metafazici
Heterocromatin
Heterocromatin
Transcripie

Nr de cromozomi

Nr de mol de
ADN

46

46

46

4692

46

92

46

92

46

92

92
46+46

92
46+46

(A) COMPACTIZAREA MATERIALULUI GENETIC

Materialul genetic poate fi reprezentat de cromatin n nucleul interfazic i de cromozomi n
timpul diviziunii. Cromatina constituie forma extins i despiralizat a cromozomilor. Din punct de
vedere al interaciunii cu coloranii bazici, cromatina se clasific n dou categorii: eucromatin i
heterocromatin.

14

Eucromatina reprezint regiunea slab condensat a cromatinei care conine gene structurale
i este poriunea funcional activ a ADN-ului de pe care are loc transcripia. Astfel regiunile de
eucromatin sunt responsabile de expresia specific a informaiei genetice, reglarea proceselor vitale
eseniale prin expresia genelor house keeping. Ponderea eucromatinei poate varia de la celul la
celul datorit expresiei difereniate a genelor specifice de esut, specifice unei anumite perioade
ontogenetice sau aciunei factorilor de mediu .
Heterocromatina reprezint segmente de cromatin condensate, inactive genetic, care nu se
supun transcripiei. Se disting dou tipuri de heterocromatin: constitutiv i facultativ.
Heterocromatina constitutiv conine ADN repetitiv (ADN satelit), deci nu conine secvene
codificatoare i nu poate fi transcris. Astfel de secvene sunt implicate n idividualizarea
cromozomilor
(secvenele
telomerice), reglarea mitozei sau
meiozei (centromerii), separarea
secvenelor codificatoare i aranjarea
lor funcional n nucleu. Localizarea
segmentelor de heterocromatin
constitutiv n cromozomii omologi
este identic i, de regul, nu variaz
de la celul la celul.
- Heterocromatina facultativ
conine secvene codificatoare
Reprezentarea aceluiai fragment de cromozom n diferite celule (A, B,
neactive, funcia lor fiind
C). E eucromatina, Hc heterocromatina constitutiv, Hf
dependent de momentul
heterocromatina facultativ
ontogenetic, tipul de esut sau
de sex. Heterocromatina facultativ n anumite condiii se poate decondensa i transforma n
eucromatin. Heterocromatina facultativ autozomal regleaz indirect expresia genelor
dependente de esut sau a genelor ce activeaz n diferite perioade de vrst. Heterocromatina
facultativ sexual cromatina sexual X - reprezint un cromozom X heterocromatinizat n
nucleele celulelor somatice cu doi cromozomi X; inactivarea cromozomului X se realizeaz
arbitrar, indiferent de originea lui matern sau patern; astfel, n unele celule (46,XX) un
cromozom X este activ (eucromatinizat) iar cellalt - inactiv (heterocomatinizat).
(B) CANTITATEA MATERIALULUI GENETIC
Cantitatea materialului genetic n
celulele somatice depinde de perioada
ciclului celular. O celul tnr n perioada
G1 a interfazei, pn la replicarea ADN-ului,
conine 46 de cromozomi monocromatidieni
(46 molecule ADN). Pe parcursul perioadei S
are loc replicarea semiconservativ i
asincron a ADN-ului, cromozomii devenind
bicromatidieni (92 molecule de ADN). Cele
dou cromatide ale unui cromozom rmn
unite prin centromer pn n anafaza mitozei,
cnd are loc distribuia materialului genetic la
celulele fiice. n aa mod celulele nouDinamica cromozomilor pe parcursul ciclului celular
formate conin aceeai cantitate de material
genetic ca i celula iniial (transmiterea ereditar a materialului genetic de la celul la celul).
15

(C) ACTIVITATEA MATERIALULUI GENETIC

Activitatea materialului genetic se exprim prin capacitatea ADN-ului de a fi transcris.
Transcripia i rata transcripiei este dependent att de perioada ciclului celular, ct i de tipul
celulei, aciunea diferitor factori genetici sau negenetici.
Pentru ca o secven de ADN s fie transcris sunt necesare urmtoarele evenimente:
- solicitarea produsului proteic respectiv n celul;
- activarea unor factori de transcripie specifici;
- eucromatizarea secvenei respective de cromozom.
Deoarece pe parcursul diviziunii celulare ADN-ul este puternic condensat, eucromatizarea i
respectiv transcripia este posibil doar n interfaz.
Sub aciunea unor inductori ai transcripiei are loc despiralizarea selectiv a unui segment
cromozomic, iniierea transcripiei i sinteza unei molecule de ARN. Tipul i cantitatea proteinei
sintetizate este dictat de necesitatea celulei sau organismului.
Produii proteici ai genelor pot fi clasificai n cteva grupe:
- proteine house keeping indispensabile activitii tuturor celulelor,
- proteine specifice pentru un anumit esut,
- proteine necesare unei anumite perioade a ontogenezei celulei sau organismului;
- proteine necesare organismelor de sex feminin sau masculin;
- proteine necesare n anumite condiii de mediu.
Astfel, concomitent ntr-o celul se expreseaz circa 10% din setul de gene motenite.
Fiecare celul a organismului conine setul complet de gene
(30000 perechi gene pentru 46 mol. ADN nuclear)

Expresia genic numai 10% din toate genele

Expresie continu
Gene ARNr
Gene ARNt
Gene house keeping

Expresie dependent de anumite condiii:

- Gene specifice de esut;
- Gene specifice de perioada
ontogenetic;
- Gene specifice de perioada ciclului
celular;
- Gene specifice de factorii de mediu.

16

Non-expresie:
pseudogene

CURS 3
VARIABILITATEA I FORMELE EI
Variabilitatea este proprietatea organismelor de a obine caractere sau nsuiri noi, diferite
de cele ale prinilor. Variabilitatea este un fenomen biologic complex i universal n lumea vie:
- este determinat de factori ecologici i ereditari;
- se manifest prin modificri genetice, biochimice, fiziologice i morfologice.
Variabilitatea are o importan deosebit n viaa organismului, populaiei i speciei, asigurnd:
- polimorfismul genetic i fenotipic individual;
- supravieuirea organismelor n diversele condiii ale mediului;
- susceptibilitatea diferit a indivizilor la anumii factori ai mediului;
- manifestarea unor stri patologice;
- selecia natural;
- baza material a evoluiei speciei umane.
Factorii ecologici care determin apariia variaiilor pot fi clasificai n factori externi (fizici,
chimici i biologici) i factori interni (produi intermediari ai metabolismului, diferite stri
fiziologice).

CLASIFICAREA VARIABILITII
Transmiterea sau netransmiterea ereditar este criteriul fundamental n clasificarea
variabilitii. Valoarea biologic a variaiilor este judecat n raport cu faptul dac acestea sunt
corelate cu modificri la nivelul materialului genetic. Din acest punct de vedere, variabilitatea este
de dou tipuri:
- variabilitate neereditar, numit i variabilitate fenotipic sau modificaiune;
- variabilitatea ereditar sau variabilitatea genotipic.

17

(A) VARIABILITATEA NEEREDITAR

Variaiile neereditare sau modificaiunile reprezint reaciile organismului, determinate
genetic, de a rspunde la aciunea factorilo mediului ambiant prin schimbri morfologice, fiziologice
i biochimice, pe termeni mai scuri sau mai ndelungai.

i.
ii.
iii.
iv.

Modificaiunile se caracterizeaz prin:

variaii fenotipice neereditare;
poart un caracter adaptiv i favorizeaz individul n lupta pentru existen;
reprezint stri reversibile de durat diferit, determinat de tipul factorului ecologic,
intensitatea i durata de aciune a acestuia i particularitile caracterului modificat;
determin capacitatea organismelor de a reaciona diferit cnd sunt puse n condiii similare
de via, fiind o caracteristic ereditar (norma de reacie).

Exemple de modificaiuni la om pot fi: rspunsul la aciunea razelor ultraviolete (creterea

cantitii de melanin n epiderm bronzarea); rspunsul la eforturi fizice repetate (creterea masei
musculare); rspunsul la hipoxie (mrirea concentraiei hemoglobinei n snge); rspuns la aciunea
ndelungat a temperaturilor sczute (creterea stratului celulo-adipos subcutanat tipul arctic).
Modificaiunile se produc n anumite limite, ce sunt controlate genetic i sunt dependente de
doza i durata de aciune a factorului modificator. Pentru fiecare organism aceste limite sunt
individuale i se ncadreaz n noiunea de norm de reacie. Norma de reacie pune n eviden
raportul dintre potenialul genetic cu care individul se nate i posibilitile de manifestare fenotipic
a acestuia n diferite condiii mezologice (mediul ecologic, mediul familial, mediul social).
*****
Caracterele indivizilor i ale populaiei umane se manifest fenotipic n limitele normei de
reacie, a potenialului genetic nscris n structuri ereditare (genomul nuclear i mitocondrial), iar
prin educaie prin dirijarea factorilor sociali i ecologici, se pot dezvolta caracterele i trsturile
ce se nscriu n norma de reacie.
(1) Sunt indivizi cu potenial genetic favorabil, cu norm larg de reacie (talent muzical,
inteligen, capaciti fizice):
a. n mediu social-educaional nefavorabil nu se manifest posibilitile n toat
plenitudinea lor;
b. prin educaie se dezvolt posibilitile pe msura metodelor de educaie i a efortului de
perfecionare.
(2) Sunt indivizi cu norm de reacie manifestat n limite relative:
a. Fr educaie se manifest mediocru;
b. Prin educaie se manifest la valoarea lor.
(3) Sunt indivizi cu deficiene psiho-somatice determinate genetic, cu norm de reacie
manifestat n limite restrnse (oligofreni etc.) educai n instituii speciale.
*****
Unii factori ai mediului pot avea aciune distructiv asupra organismului, producnd
modificaiuni ce depesc limita normei de reacie. Drept exemple sunt anomaliile de dezvoltare
teratogene.
Factorii teratogeni de diferit natur (fizici, chimici, biologici) perturbeaz dezvoltarea
normal a embrionilor la diferite perioade ale ontogenezei, producnd anomalii morfologice,
fiziologice sau biochimice, prezente la natere. Acestea ar putea fi confundate cu defecte ereditare i
n acest caz poart denumirea de fenocopii (de ex., surditatea rubeolic, microcefalie alcoolic etc.).
18

(B) VARIABILITATEA EREDITAR SAU GENOTIPIC

Variaiile ereditare sunt produse prin modificri ale materialului genetic modificri n
structura i /sau cantitatea materialului genetic.

i.
ii.
iii.
iv.
v.

Variaiile ereditare se caracterizeaz prin urmtoarele particulariti:

sunt determinate de modificri specifice ale materialului genetic;
apar spontan sau prin aciunea factorilor fizici, chimici i biologici asupra materialului
genetic;
se transmit de-a lungul generaiilor, sunt ereditare;
reprezint sursa principal a evoluiei lumii vii;
stau la baza polimorfismului populaiei.

Sursele biologice ale variabilitii ereditare sunt mutaiile i recombinarea materialului

ereditar dou ci prin care apar caractere i / sau combinaii noi de caractere, ce au o anumit
valoare i semnificaie biologic.
1. VARIABILITATEA COMBINATIV
Recombinarea materialului genetic este asigurat n general de procesele legate de nmulirea
sexuat.
n dependen de cantitatea de material implicat n recombinare deosebim:
- recombinare genomic recombinarea materialului ereditar n procesul fecundaiei;
- recombinarea intercromozomic combinarea independent a cromozomilor neomologi n
anafaza I a meiozei;
- recombinarea intracromozomic recombinarea genelor ntre cromozomii omologi n procesul
crossing-overului.
Importana biologic a recombinrilor materialului genetic:
a. combinarea ntmpltoare a genelor de origine parental diferit i naterea unor indivizi cu
caractere comune ale ambilor prini unici din punct de vedere genetic i bioogic;
b. selecia natural prin eliminarea indivizilor cu combinaii defavorabile de gene, mutaii letale i
semiletale i supravieuirea indivizilor cu caractere normale, adaptive;
c. evoluia speciei datorit seleciei genelor evaluante.
2. VARIABILITATEA MUTAIONAL
Mutaia este fenomenul biologic de apariie a modificrilor materialului genetic, prin care
apar caractere i nsuiri noi, ci metabolice sau structuri noi i, ca rezultat, a unui fenotip nou.
Mutaia apare relativ rar i rmne destul de stabil de-a lungul generaiilor. Procesul prin
care apare mutaia se numete mutagenez. Factorii fizici, chimici i biologici care produc mutaii
se numesc ageni mutageni. Prin mutaie pot s apar gene noi (gene mutante), cu informaie
ereditar diferit de cea iniial (gen de tip slbatic).
Mutaia include modificri n structura acizilor nucleici i a genelor, schimbarea cantitii
materialului genetic (anomalii de numr ale cromozomilor); poate interesa materialul genetic
nuclear (genotipul) ct i materialul genetic citoplasmatic (plasmotipul).
n funcie de cantitatea materialului genetic modificat, sediului proceselor de mutagenez,
gen, cromozom, genom se pot descrie trei tipuri de mutaii:
i. mutaii genice ce se produc la nivelul moleculei de ADN, pot implica ntreaga gen, mai
multe nucleotide sau unul singur;
19

ii.

iii.

mutaii cromozomice (aberaii cromozomiale) sunt modificri structurale ale

cromozomilor ce constau n pierderea, ctigul sau rearangarea unor segmente din
cromozom;
mutaii genomice sunt modificri ale setului diploid (46) de cromozomi, afectnd fie 1-2
perechi cromozomi (aneuploidie), fie toi cromozomii, prin adugarea a 1-2-3 seturi
haploide (poliploidie).

O alt clasificare a mutaiilor se bazeaz pe tipul de celul afectat: germinal sau somatic:
- mutaiile germinale produc gamei anormali, care dup fecundare transmit mutaia la generaia
urmtoare, rezultnd un individ n care toate celulele vor fi mutante;
- mutaiile somatice vor forma o clon celular anormal i, secundar, prin modificrile morfofuncionale ale organelor, sunt implicate n geneza cancerului i accelerarea senescenei
organismului.
Mutaiile genice pot fi spontane sau induse. Primul tip este determinat de factori
necunoscui, imposibil de definit sau obiectivat de un observator; al doilea tip de mutaii sunt
produse prin aciunea unor factori cunoscui: fizici (radiaii ionizante), chimici (analogi ai bazelor
azotate, ageni alchilani) sau biologici (virusuri). Mutaiile spontane ar putea fi determinate de
radioactivitatea natural (reprezentat de razele cosmice, radioactivitatea terestr permanent i
iradierea intern) i reprezent circa 1,5% din totalul mutaiilor nregistrate la om.
Modificrile materialului genetic se pot rsfrnge asupra proprietilor vitale ale organismului
mutant i pot fi:
- mutaii evaluante, pozitive, care asigur apariia unor caractere noi care-l fac pe individ mai
rezistent la factorii de mediu;
- mutaii defavorabile, negative, letale sau subletale ce determin apariia unor anomalii
incompatibile cu viaa sau stri patologice;
- mutaii neutre care nu afecteaz vitalitatea producnd polimorfisme genice i fenotipice.

POLIMORFISMUL ADN
Analiza genomurilor umane, alese la ntmplare, indic identitatea lor n proporie 99,9%, iar
0,1% prezint variante diferite ale unei secvene de ADN. Aceste variaii pot fi att n interiorul
genelor, ct i n regiunile intergenice, ultimele fiind mai frecvente deoarece nu sunt eliminate de
selecia natural.
Polimorfismul ADN se refer la variaiile nucleotidice din diferite regiuni ale ADN-ului.
Exist mai multe tipuri de polimorfisme ADN:
- variaii a unui singur nucleotid SNP (single nucleotid polymorphism);
- variaii microsatelitice di-, tri-, tetra- i pentanucleotidice STR (short tandem reapeats);
- variaii minisatelitice cu secvene de 10-15 p.n. repetate n tandem - VNTR (variable number
tandem reapeats).
Secvenele polimorfe n genomul uman sunt ntlnite cu o frecven de un situs polimorf la
300-500 nucleotide.
Polimorfisme ADN nu se manifest n fenotip i constituie baza molecular a individualitii
ADN-lui uman amprent genetic , iar situsurile polimorfe marcheri n studiile populaionale
sau n identificarea persoanelor dactiloscopia genomic.

20

CURS 4
CROMOZOMII UMANI
Termenul de cromozom a fost propus n 1888 de Waldeyer cu referin la corpusculi colorai
ce pot fi vizualizai pe parcursul diviziunii celulare. n interfaz cromozomii sunt decondensai i se
prezint sub form de filamente, fibre sau bucle de cromatin bine organizate n nucleul celulei,
aspectul cruia depinde de tipul celulei sau perioada ontogenetic. Segmentele de cromatin active
transcripional se prezint sub form de eucromatin, iar cele ce nu se transcriu sub form de
heterocromatin. Cromozomii metafazici reprezint nivelul maximal de condensare a materialului
genetic nuclear, iar studiul cromozomilor n metafaz permite identificarea precis a fiecrui
cromozom, evaluarea morfologiei cromozomilor.

CARACTERISTICI GENERALE ALE CROMOZOMILOR

1. Cromozomii reprezint nivelul supramolecular de organizare a materialului genetic i
substratul morfologic al ereditii. Molecula de ADN este principalul component al
cromozomului, care-i specific funciile de pstrare, transmitere i realizare a materialului
genetic ce-l conine sub form de secvene polinucleotidice specifice gene.
2. Un cromozom conine de la cteva sute la cteva mii de gene: reprezint un grup de nlnuire
a genelor:
- sigur ordonarea genelor n spaiu i n timp - fiecare gen are o poziie fix pe cromozom
locus;
- activarea sau inactivarea genei este realizat strict dup necesitile celulei sau organismului;
- asigur transmiterea nlnuit a genelor i caracterelor determinate de genele unui cromozom.
3. Cromozomii se autoreproduc n perioada S a interfazei prin replicare semiconservativ a
moleculelor de ADN care i constituie. Replicarea diferitor segmente cromozomiale i diferitor
cromozomi se realizeaz asincron, dar la sfritul perioadei S toi cromozomii devin
bicromatidieni.
4. Cromozomii reprezint structuri dinamice ce i modific aspectul, forma, activitatea n
dependen de perioadele ciclului celular.
5. Cromozomii au structur neomogen de-a lungul lor datorit alternrii diferitor segmente de
ADN:
- secvene codificatoare i necodificatoare,
- secvene unice i repetitive,
- regiuni ce corespund eucromatinei i heterocromatinei;
- regiuni ce se deosebesc dup gradul de pliere a fibrei de cromatin (dimensiunile buclelor);
- regiuni cu un coninut diferit de perechi A T i G C;
- regiuni cu o cantitate diferit de proteine asociate.
Toate aceste explic polimorfismului cromozomial, colorarea difereniat a cromozomilor i
originea benzilor (Vezi Tehnici de analiz a cromozomilor).
Fiecare individ, fiecare celul conine un set diploid de cromozomi. Fiecare cromozom n
setul diploid are omologul su. Cele 23 de perechi de cromozomi ale celulei umane somatice
constituie cariotipul, care att cantitativ, ct i calitativ se implic n formarea fenotipului celulei i
organismului uman.

21

Modificrile numrului sau structurii cromozomilor produc anomalii de dezvoltare multiple

sindroame cromozomice plurimalformative (ex. 47, XX(XY),+21 sindrom Down;
46,XX(XY),5p- - sindrom cri-du-chat) sau determin transformarea clonelor celulare aneuploide.
Genetica dispune de variate tehnici de cariotipare pentru depistarea anomaliilor de numr
sau de structur a cromozomilor cu scop: de diagnostic al sindroamelor cromozomice, de prevenire
a naterii copiilor cu anomalii cromozomiale prin diagnostic prenatal i studiul anomaliilor
cromozomiale n tumori.

ORGANIZAREA MOLECULAR A CROMOZOMILOR

Cromozomul este constituit din 1 sau 2 molecule de ADN (n dependen de perioada
ciclului celular), asociat cu proteine histone, nehistone i ARN, formnd o nucleoproteid cu diferite
nivele de compactizare:
1. molecula de ADN cu diametru de 2 nm interacioneaz cu proteinele histone determinnd
formarea primului nivel de compactizare nucleosomic; octamere histonice (2H2A, 2H2B, 2H3
i 2H4) sunt nfurate de segmente de ADN cu o lungime de 160p.n., transformnd molecula
de ADN n filament nucleoproteic polinucleosomic cu diametru de 11nm i asigurnd un grad de
compactizare de circa 6 ori;
2. n prezena H1 filamentul de cromatin de 11 nm se supraspiralizeaz i se formeaz al doilea
nivel de compactizare - solenoidul, ce se prezint sub form de fibr nucleoproteic de 30 nm,
asigurnd un grad de compactizare de circa 40 ori;
3. solenoidul se fixeaz de axul proteic longitudinal al cromozomului (scaffold), format din
proteine ale matricei nucleare; solenoidul interacioneaz specific cu scaffoldul prin intermediul
SAR regiuni situs specifice de ancorare la SAP proteine situs specifice ale axului
cromozomial i astfel apare al treilea nivel de compactizare buclele, care permit un grad de
compactizare a materialului genetic interfazic de 600 1000 de ori;
4. al patrulea nivel cromozomul metafazic se formeaz prin rsucirea buclelor n jurul axului
cromozomial dup pierderea contactului scaffold / anvelop nuclear; fiecare spir se formeaz
din aproximativ 30 de rozete (bucle), buclele sunt orientate spre exteriorul cromozomului;
stabilirea nivelului maximal de condensare de 10 000 ori are loc n metafaz.

22

23

MORFOLOGIA CROMOZOMILOR METAFAZICI

-

Cromozomii sunt cel mai uor de analizat n metafaz sau prometafaz deoarece:
se afl n acelai plan placa ecuatorial;
sunt compactizai i pot fi uor individualizai;
sunt bicromatidieni, iar cromatidele surori sunt unite prin centromer, ce permite diferenierea
cromozomilor dup form.

Structura cromozomilor metafazici

(A) ELEMENTELE MORFOLOGICE ALE CROMOZOMILOR sunt:

- cromatidele;
- centromerii;
- telomerii;
- constriciile secundare;
- sateliii;
- situsurile fragile.
Cromatida este reprezentat de o molecul de ADN liniar asociat cu proteine histone i
non-histone maximal compactizat. Cromozomul metafazic are dou cromatide surori, identice
genetic, rezultate prin replicarea ADN cromozomial n perioada S a ciclului celular. Cromatidele
surori rmn unite prin centromer de la perioada S pn n anafaz.
Centromerul (c) reprezint secvena de ADN specific asociat cu proteine histone
specifice ce unete cromatidele surori. ADN centromeric este reprezentat de secvene nalt
repetitive. Poziia centromerului este fix i specific fiecrui cromozom, fiecrei perechi de
cromozomi omologi. Centromerul mparte cromatidele n dou brae: bra proximal p i bra distal q.
Centromerii au urmtoarele funcii:
- controleaz formarea kinetocorilor pentru fixarea cromozomilor la fusul de diviziune;
- asigur clivarea longitudinal i disjuncia cromatidelor surori cu formarea a doi
cromozomi monocromatidieni din fiecare cromozom bicromatidian;
- asigur distribuia egal i identic a materialului genetic n timpul mitozei, transmiterea
exact a materialului genetic de la celula mam la celulele fiice.
24

Telomerii (t) sunt secvene specifice de ADN asociate cu proteine speciale de la capetele
cromozomilor
(a) secvene scurte (TTAGGG) repetate n tandem de mii de ori i
(b) secvene de ADN specifice fiecrui cromozom.
Telomerii:
- protejeaz capetele cromozomilor de nucleaze;
- mpiedic fuziunea cromozomilor;
- asigur replicarea complet a ADN-ului nuclear i previn scurtarea progresiv a
telomerilor datorit activitii telomerazei;
- controleaz senescena celulelor i organismului pluricelular;
- contribuie la fixarea cromatinei de anvelopa nucleului interfazic, controlnd arhitectura
nucleului interfazic;
- particip la conjugarea cromozomilor omologi n meioz.
Constriciile secundare (h) reprezint regiuni de ADN repetitiv despiralizate, slab colorate,
prezente pe braele distale ale unor cromozomi (1, 9, 16, mai rar pe crs. 4,6,10 i Y) i pe braele
proximale ale cromozomilor acrocentrici 13, 14, 15, 21 i 22, ce conin organizatori nuclelolari.
Lungimea constriciilor secundare poate varia individual.
Sateliii (s) reprezint mici segmnente de heterocromatin constitutiv separate prin
constricia secundar la capetele braelor proximale ale cromozomilor acrocentrici 13, 14, 15, 21 i
22; numrul i dimensiunile sateliilor pot varia de la o persoan la alta.
Situsurile fragile reprezint nite regiuni cromozomiale decondensate, cu rezisten sczut
la aciunea mutagen ce se pot rupe uor determinnd rearanjamente cromozomiale. Situsurile
fragile sunt considerate ca marcheri genetici normali dac afecteaz regiunile de heterocromatin
constitutiv; se pot asocia cu unele stri patologice dac afecteaz regiuni crs codante (ex. FRAXA
i retardul mental familial); pot avea un rol n progresia tumoral (inactivarea unor gene supresoare
de tumori).

25

(B) CLASIFICAREA CROMOZOMILOR UMANI

n celulele somatice umane exist cte un set diploid de cromozomi (2n=46), adic 23 de
perechi:
- 22 perechi sunt identice la femeie i brbat autosomi;
- 1 pereche este diferit la cele dou sexe (XX la femeie, XY la brbat) gonosomi.
Cromozomii identici ca morfologie (form i mrime) i coninut genic, dar diferii ca
origine (unul de origine matern, cellalt de origine patern) se numesc cromozomi omologi.
n celulele sexuale mature (gamei) exist cte un set haploid de cromozomi (n=23): n ovule 23,X
(22 autosomi+ crs. X), iar n spermatozoizi 23,X (22 autosomi+ crs. X) sau 23,Y (22 autosomi+
crs.Y).
Pentru identificarea cromozomilor se folosesc criterii morfologice, indicii autoradiografiei i
marcajul n benzi.
Criteriile morfologice se refer la dimensiunile i configuraia cromozomului. Se deosebesc
criterii cantitative (lungimea cromozomului, indicele centromeric) i calitative (prezena constriciilor
secundare i a sateliilor) de clasificare a cromozomilor.
Lungimea cromozomului lungimea absolut a cromozomului (n microni) sau lungimea
relativ este calculat dup formula:
Lungimea cromozomului studiat
X 100.
Suma lungimilor cromozomilor setului haploid

Dup lungime cromozomii se clasific n: mari, mijlocii, mici.

Poziia centromerului. Pentru a caracteriza poziia centromerului n cromozom se utilizeaz
indicele centromeric, care se calculeaz dup formula:
p
Ic
X 100,
p q
unde p lungimea braului proximal,
q lungimea braului distal.
n baza acestui criteriu cromozomii se clasific n:

metacentrici:

Ic = 31
45%

Ic = 17
30%

submetacentrici:

acrocentrici:

26

Ic = 46
49%

Pe baza criteriilor morfologice cantitative (lungimea i poziia centromerului) i calitative (satelii

i constricii secundare) cromozomii se grupeaz n perechi de omologi i se clasific n 7 grupe, notate
de la A la G:
grupa A - perechile 1-3, sunt cei mai mari cromozomi metacentrici, cromozomul 1 poate prezenta
constricie secundar pe braul distal (1qh), cromozomul 2 este uor submetacentric;
grupa B - perechile 4-5 de cromozomi sunt mari, submetacentrici;
grupa C - perechile 6-12 de cromozomi i cromozomul X sunt mijlocii, submetacentrici; sunt 16
cromozomi la femeie i 15 la brbat; cromozomul 9 prezint constricie secundar pe braul distal
(9qh);
grupa D - perechile 13-15 de cromozomi sunt mijlocii, acrocentrici; prezint constricii secundare
pe braele proximale i satelii;
grupa E perechile 16-18 de cromozomi; cromozomul 16 este metacentric mijlociu i poate
prezenta constricie secundar pe braul distal (16qh); cromozomii 17-18 sunt submetacentrici mici;
grupa F - perechile 19-20 de cromozomi sunt mici, metacentrici;
grupa G - perechile 21-22 i Y de cromozomi sunt mici, acrocentrici; cromozomii 21 i 22
prezint constricii secundare pe braele proximale i satelii; cromozomul Y nu prezint satelii;
cromozomii grupei G ajut la determinarea sexului: la femei sunt 4 acrocentrici mici (2 crs 21 + 2
crs 22) / la brbai sunt 5 acrocentrici mici (2 crs 21+ 2 crs 22 + Y).

Cariotipul uman 46,XY

Cariotipul uman 46,XX

27

STUDIUL CROMOZOMILOR UMANI

Analiza cariotipului urmrete evaluarea numrului, formei, structurii, prezena unor repere
morfologice i evideniaz polimorfisme individuale.
Actualmente exist diverse metode ce sunt utilizate n evaluarea cariotipului, depistarea
anomaliilor cromozomice de numr sau de structur, evidenierea unor markeri cromozomiali n
norm sau patologie. Mai mult ca att, unele tehnici bazate pe tehnologiile ADN recombinat, permit
identificarea unor modificri la nivel de secven de ADN cromozomial.

n dependen de scopul propus, cromozomii pot fi analizai att n interfaz, ct i n timpul

diviziunii. Aceasta permite identificarea att a unor schimbri minore n structura molecular a
ADN (microdeleii, microduplicaii), ct i modificri majore n structura i numrul cromozomilor
(aberaii cromozomiale, aneuploidii).
STUDIUL CROMOZOMILOR METAFAZICI
Etapa optim de studiu a cariotipului este metafaza, deoarece cromozomii sunt maximal
condensai i sunt dispui ntr-un singur plan, ceea ce permite identificarea lor precis. Pentru
studiul cariotipului trebuie ndeplinite urmtoarele condiii:
- s se obin celule n diviziune,
- s se blocheze diviziunea n metafaz i
- s se realizeze un preparat cromozomic care s fie examinat la microscop.
(1) Celule n diviziune pot fi analizate direct n cazul esuturilor cu proliferare activ
(mduv osoas, gonada masculin, tumori) sau dup realizarea unei culturi celulare din snge
periferic*, limfocite T, mduv osoas roie, fibroblati (piele, fascii, embrioni), celule amniotice,
celule din vilozitile coriale, tumori solide.
* Tehnica recoltrii sngelui periferic i punerea acestuia n cultur (constituie cea mai simpl tehnic de obinere a
cromozomilor umani):
se prelev snge periferic prin puncie venoas (n condiii de asepsie);
se recolteaz pe heparin, pentru a se mpiedica coagularea sngelui;
n condiii de asepsie, sngele este introdus ntr-un flacon ce conine un mediu de cultur specific, mbogit cu ser fetal
bovin sau ser uman AB;
pentru stimularea diviziunilor se utilizeaz fitohemaglutinina;
se incubeaz la 37C, timp de 72 ore.

28

(2) Blocarea diviziunilor n metafaz se face cu substane care inhib formarea fusului de
diviziune (citostatice) colchicin sau colcemida.
(3) Realizarea preparatelor (lamelor) pentru studiul la microscop impune urmtoarele
etape:
hipotonizarea celulelor pentru dilatarea celulelor i dispersarea cromozomilor (centrifugare,
eliminarea supernatantului i resuspendare n soluie hipotonic de KCl);
fixarea celulelor pentru a ntrerupe activitatea vital a celulei, pstrnd morfologia cromozomilor
(alcool + acid acetic);
colorarea cu soluie Giemsa sau un alt colorant specific pentru cromozomi;
examinarea la microscopul optic, ce permite analiza cromozomilor pentru evidenierea eventualelor
anomalii de numr (omogene sau n mozaic) sau anomalii de structur;
fotografierea plcilor metafazice din frotiu i decuparea cromozomilor;
identificarea cromozomilor i efectuarea cariogramei (idiogramei).

Realizarea cariogramei din preparate citologice

Cromozomi metafazici umani colorai cu colorantul Giemsa (colorare uniform)

29

MARCAJUL N BENZI AL CROMOZOMILOR

Exist un grup de tehnici speciale, prin care se evideniaz n lungul cromatidelor alternana de
zone colorate i necolorate, numite benzi. Acestea au o distribuie precis, determinat de structura
intern a cromozomului.

Cariotipul uman normal obinut prin colorare

difereniat G a cromozomilor unei celule
somatice (46,XX)

Schema cariotipului uman (46,XY) pe baza

colorrii n benzi G a cromozomilor
metafazici

Metodele de marcaj n benzi au aprut relativ recent, n anii '70, i au determinat o revoluie n
citogenetic, deoarece au o mare valoare practic:
marcajul n benzi reflect structura discontinu a cromozomilor, respectiv alternana de
eucromatin i heterocromatin, de secvene de ADN bogate n AT sau GC, de segmente de
cromatin cu concentraie diferit de proteine histone i proteine nehistone;

modelul benzilor este identic n toate celulele unui organism i la toi indivizii aceleiai specii, de
aceea efectuarea marcajului n benzi permite identificarea precis a unei specii;

marcajul n benzi permite identificarea precis a perechilor de cromozomi omologi, deoarece

acetea sunt la fel din punct de vedere genetic i au acelai model de benzi;

marcajul n benzi permite identificarea precis a fiecrui cromozom, deoarece cromozomii,

aparinnd unor perechi diferite, au alte gene i deci alt model al benzilor;

metodele de marcaj n benzi permit un diagnostic citogenetic foarte precis n multe anomalii de
structur (deleii, inversii) care nu se evideniaz sau se evideniaz foarte greu n coloraia
obinuit.

n consecin, utiliznd diverse tehnici de colorare a cromozomilor se obin benzi colorate

(pozitive) i necolorate (negative) stabile i caracteristice fiecrui cromozom. Diferite tehnici
(G,Q,R,T,C) determin o dispoziie specific a benzilor.

30

Caracteristica diferitor tehnici de bandare a cromozomilor

Tehnica de analiz a
Colorantul
Originea benzilor
Rolul practic
cromozomilor
utilizat
Benzi pozitive
Identificarea anomaliilor de
heterocromatin;
Giemsa
numr i de structur a
Metoda G
Benzi negative
cromozomilor
eucromatin.
Benzi pozitive
Identificarea anomaliilor de
Quinacrina
heterocromatin;
Metoda Q
numr i de structur a
(fluorescent)
Benzi negative
cromozomilor
eucromatin.
Benzi pozitive
Giemsa sau
Identificarea anomaliilor de
eucromatin;
Metoda R
colorani
numr i de structur a
Benzi negative
(revers)
fluoresceni
cromozomilor
heterocromatin.
Giemsa sau
Benzi pozitive
Analiza polimorfismului
Metoda C
colorani
heterocromatina
cromozomial
(centromeric)
fluoresceni
pericentromeric
Giemsa sau
Benzi pozitive
Analiza polimorfismului
Metoda T
colorani
heterocromatina telomeric
cromozomial
(telomeric)
fluoresceni

Dispunerea benzilor cromozomiale obinute prin diferite tehnici de

colorare (cromozomul X)

TEHNICI DE CITOGENETIC MOLECULAR

Pe baza metodelor de analiz molecular a acizilor nucleici au fost elaborate o serie de tehnici
noi de analiz a cromozomilor interfazici, ce se caracterizeaz printr-o specificitate i precizie
nalt metode de hibridizare in situ (FISH, CGH, SKY).

i.
ii.

iii.
iv.

Metoda FISH (fluorescent in situ hybridization) este bazat pe urmtoarele principii:

se utilizeaz sonde moleculare marcate fluorescent, care sunt complementare unor secvene
nucleotidice specifice ale unui cromozom sau fragment de cromozom;
n preparatul microscopic in situ, supus unui tratament alcalin, ADN-ul cromozomial
denatureaz prin ruperea legturilor de hidrogen dintre cele dou catene ale moleculei de
ADN;
la adugarea sondei n preparat are loc legarea ei complementar la secvena specific a
cromozomului - hibridizarea;
ulterior, preparatul este prelucrat cu o substan ce se leag selectiv de biotin sau de
digoxigenin: pentru biotin este specific streptovidina, iar pentru digoxigenin sunt

31

v.

anticorpii antidigoxigeninici; la aceste substane se pot aduga unul sau mai muli colorani
fluoresceni;
cromozomii colorai se vizualizeaz la microscop pe fondul cromozomilor necolorai.

Tehnica FISH se utilizeaz pentru evidenierea:

- cromozomilor supranumerari;
- anomaliilor cromozomice de structur;
- rearanjamentelor intercromozomiale complicate;
- microdeleiilor i microduplicaiilor cromozomice;
- localizrii genelor.
Aceast tehnic este precis, rapid i econom de aceea este tot mai larg utilizat n
diagnosticul anomaliilor congenitale, sindroamelor monogenice, diagnosticul prenatal.
CGH (comparative genome hybridization). Aceast tehnic este utilizat n citogenetica
oncologic pentru determinarea regiunilor cromozomiale deletate sau amplificate ntr-un anumit tip
de cancer. Regiunile deletate, de regul, conin gene supresoare de tumori, iar cele amplificate
oncogene. Astfel, metoda este utilizat pentru cartarea i clonarea genelor implicate n
cancerogenez.
Metoda CGH const n urmtoarele: se extrage ADN-ul dintr-o tumor i dintr-un esut
normal; ADN-ul din tumor i din esutul normal se marcheaz cu diferii fluorocromi; ADN-ul
marcat (i din tumor, i din esutul normal) este hibridizat cu preparatul cromozomic obinut din
tumor; se determin regiunile cu deleii sau cu amplificri dup intensitatea marcherilor. Analiza
rezultatelor este efectuat utiliznd programe speciale computerizate.
SKY (spectral karyotyping) analiza spectroscopic a cromozomilor. Aceast tehnic se
bazeaz pe utilizarea unui set de sonde fluorescente cu colorani diferii. Fiecare sond specific un
anumit segment cromozomic. Fiecare pereche cromozomial are parametri spectrali unici.
Utilizndu-se interferometrul, analogic aparatelor utilizate n msurarea spectrului obiectelor
astronomice, este posibil depistarea unor variaii minore n componena spectral a cromozomului,
invizibile ochiului. Computerul analizeaz datele interferometrului i graie unei programe speciale
indic pentru fiecare pereche de cromozomi culori anumite. Avantajul acestei metode const ntr-o
individualizare mult mai precis a cromozomilor, datorit culorii lor specifice; depistarea unor
translocaii ce sunt greu de depistat prin alte metode citogenetice. Se utilizeaz in oncocitogenetic
pentru depistarea aberaiilor cromozomice ce se produc la nivel de tumoare, chiar i a unor
rearanjamente ce implic fragmente cromozomice foarte scurte.

NOMENCLATURA CROMOZOMILOR UMANI

Exist un sistem internaional de standardizare, care permite formularea cariotipului normal sau
anormal cu ajutorul unor simboluri i semne, ce redau numrul de cromozomi i eventualele anomalii
de structur - deficit, surplus sau rearanjamente ale materialului cromozomic.
n cazul cariotipului normal se scrie numrul total de cromozomi urmat de o virgul, dup care
se scrie structura gonosomilor:
o cariotip feminin normal - 46,XX
o cariotip masculin normal - 46,XY.
Cariotipurile anormale pot caracteriza anomaliile cromozomiale numerice sau anomaliile
structurale:
o anomalii ale autosomilor numrul total de cromozomi, virgula, gonosomii, iar dup o alt
virgul, precedat de + (cromozom suplimentar) sau - (lipsa unui cromozom) se scrie
32

numrul cromozomului implicat (de ex..: 47, XX, +21 (trisomia 21); 47,XY,+13 (trisomia
13); 45,XX,-8 (monosomia 8); etc.;
o anomalii ale gonosomilor se scrie numrul total de cromozomi, urmat dup virgul de
gonosomii respectivi (de ex.: 45,X (monosomia X); 47,XXY (disomia X); 47,XXX
(trisomia X)).
n rezultatul colorrii difereniate pe fiecare cromozom se pot observa o serie de repere, elemente
importante pentru identificarea unui cromozom:
- benzi net conturate,
- centromerul,
- telomerele.
Dea lungul braelor cromozomilor sunt delimitate regiuni. Fiecare regiune are mai multe benzi, iar
benzile pot avea subbenzi.
Cromozomii metafazici prezint 400 - 500 benzi, n timp ce cromozomii aflai n profaza timpurie
prezint 1800-2000 benzi (metode de nalt rezoluie).

Aspectul crs prometafazici vs crs metafazici

Nomenclatura benzilor: regiunile i benzile se numeroteaz de la centromer spre telomere

pentru fiecare din brae; ex: 7q12 - cromozomul (7), braul distal (q), regiunea (1), banda (2).
Pentru desemnarea anomaliilor cromozomiale structurale se indic natura rearanjamentului i
punctele de ruptur, identificate prin banda i regiunea n care se produc. Exemple:
46,XX,del(1)(q21q31) - cariotip feminin cu deleiea unui fragment a braului distal al
cromozomului 1 de la regiunea 2, banda 2 pn la regiunea 3, banda 1.
46,XY,r(2)(p21q31) - cromozomul 2 inelar; punctele de ruptur sunt pe braul proximal n
regiunea 2 banda 1 i pe braul distal n regiunea 3 banda 1.
46,XX,inv(2)(p21q31) - inversie pericentric a segmentului cuprins ntre regiunea 2 banda 1,
braul proximal i regiunea 3 banda 1, braul distal ale cromozomului 2.
46,X,i(Xq) - isocromozom de brae distale al cromozomului X;
46,X,del(X)(q12.1-q24.3) deleia unui segment din crs X, de pe braul distal, de la regiunea 1
banda 2 subbanda 1 pn la regiunea 2 banda 4 subbanda 3.

33

Simboluri
A-G
1-22
X, Y
/
p
q
pter
qter
cen
del
der
dup
dic
fra
i
ins
inv
mat
pat
r
t
upd
::
+
-

Simboluri folosite n descrierea cariotipului (standarde internaionale)

Semnificaia simbolului
Grupele de cromozomi
Numerele cromozomilor autosomi
Gonosomii (cromozomii sexuali)
Mozaicizm cromozomial
Bra proximal, scurt
Bra distal, lung
Captul braului proximal
Captul braului distal
centromer
Deleie, pierderea unui fragment cromozomic
Cromozom derivat printr-un rearanjament cromozomial
Duplicaie, dublarea unui fragment cromozomic
Cromozom dicentric, cu doi centromeri
Situs fragil
Izocromozom, cu brae identice p sau q
Inseria unui fragment cromozomic
Inversia unui fragment cromozomic
Origine matern
Origine patern
Cromozom inelar (ring)
Translocaia unui fragment cromozomic pe alt cromozom neomolog
Disomie uniparental
Rupere cu reunire
naintea numrului unui cromozom adugarea cromozomului ntreg,
dup numrul unui cromozom adugarea unei pri de cromozom
naintea numrului unui cromozom pierderea cromozomului ntreg,
dup numrul unui cromozom pierderea unei pri de cromozom

VARIAII ALE CARIOTIPULUI LA PERSOANE CU FENOTIP NORMAL

Exist uneori o serie de abateri de la regulile generale stabilite, care determin unele variante
(variaii) particulare rare, dar care nu reprezint anomalii cromozomice.
Variaii numerice:
- la femeie - dup vrsta de 60 ani, pn la 7% din celulele organismului pot pierde unul din
cromozomii X, devenind 45,X;
- la brbat - dup vrsta de 70 ani, pn la 2% din celule pot pierde cromozomul Y i devin 45,X.
Variaii structurale n heterocromatin:
- lungimea i forma cromozomilor omologi poate varia; variaiile n lungime intereseaz n special
braele scurte ale cromozomilor D, G.
- sateliii se gsesc obinuit n cromozomii acrocentrici, cu excepia cromozomului Y, dar pot fi
observai i pe ali cromozomi; pot prezenta o mare variabilitate n form i mrime.
- constriciile secundare care reprezint zone decondensate, situate n regiunile proximale ale braelor
lungi ale cromozomilor 1, 9, 16 i Y; uneori pot prezenta o mrire exagerat a constriciilor secundare
(46, XX, 1qh+; 46,XY, 1qh++...).
34

Polimorfismele de bandare (benzile Q, G i C) sunt reprezentate de diferene n ceea ce privete

mrimea i aspectul unor zone cromozomice; cel mai frecvent, polimorfismele implic regiunile
centromerice, braele scurte i sateliii cromozomilor D i G, zona de constricie secundar de pe braul
lung al cromozomului Y.
Semnificaia polimorfismului: polimorfismul se transmite dominant dup modelul mendelian, nu
modific expresia fenotipic deoarece pare limitat numai la regiunile heterocromatiniene,
inactive genetic (produce modificri cantitative ale ADN repetitiv).
Polimorfismul cromozomic este utilizat:
- ca marcher pentru evidenierea transmiterii unor caractere de la prini la copii (de ex.: cercetarea
paternitii);
- pentru determinarea originii parentale a nedisjunciei n aneuploidii (de ex.: originea cromozomilor
suplimentari n trisomii);
- pentru identificarea cromozomilor care conin gene marcher pentru unele patologii monogenice;
- stabilirea unor grupe de nlnuire (linkage) genic;
- evaluarea frecvenei unor polimorfisme n unele forme de leucemii i la copiii cu anomalii
congenitale.

35

CURS 5
ANOMALII CROMOZOMICE
Anomaliile cromozomice reprezint modificri ale numrului cromozomilor caracteristic
speciei (46 n celulele somatice umane) sau modificri structurale ale acestora. n literatur sunt
ntlnite noiunile de mutaii genomice (ce explic anomaliile cromozomice de numr) i mutaii sau
aberaii cromozomice (ce se refer la anomaliile de structur). Anomalii cromozomice numerice
afecteaz ntregul cromozom i cele structurale implic rearanjamente ale structurii cromozomilor.

Clasificarea anomaliilor cromozomice

Factori posibili ce produc anomalii cromozomice ar putea fi:

factori care deregleaz mitoza sau pot produce rupturi ale ADN-ului sau altereaz replicarea:
- factori chimici: citostatice, antimetabolii, radicali liberi, agenii alchilani;
- factori fizici: radiaiile ionizante;
- factori biologici: virusuri;
vrsta matern avansat, care sporete riscul erorilor n segregarea cromozomilor n meioz i a
aneuploidiilor la descendeni;
unul din prini este purttor de anomalie congenital echilibrat (translocaie, inversie);
rearanjrile intercromozomice prin crossing-over inegal sau erori de recombinare.

ANOMALIILE CROMOZOMICE DE STRUCTUR

Anomaliile cromozomice structurale pot fi clasificate n funcie de efectul fenotipic i de
mecanismul de producere.
Pe baza efectului fenotipic, anomaliile cromozomice structurale se mpart n: echilibrate
(inversiile i translocaiile), care nu modific fenotipul purttorului i neechilibrate (deleiile,
duplicaiile, etc.), care produc fenotipuri anormale.
n raport cu mecanismul de producere, anomaliile cromozomice structurale pot fi grupate n:
anomalii produse printr-o singur ruptur cromozomic (deleia terminal), anomalii produse prin
dou rupturi cromozomice n acelai cromozom (deleiile interstiiale, inversiile, cromozomii
inelari), anomalii produse prin rupturi n cromozomi diferii (cromozomii dicentrici, translocaiile
reciproce i cele robertsoniene; inseriile).
36

ANOMALII CROMOZOMICE ECHILIBRATE

Inversia reprezint o anomalie de structur, caracterizat prin modificarea ordinii genelor de pe
un fragment cromozomic. Mecanismul de producere const n ruperea unui cromozom n dou puncte
i rotirea cu 180 a fragmentului intermediar.
Inversiile pot fi de dou tipuri: pericentrice: produse prin ruptura unui cromozom n dou
puncte situate pe brae diferite, urmat de rotaia cu 180o a fragmentului intermediar i reunirea
fragmentelor; n urma acestei rotaii se poate produce modificarea configuraiei cromozomului;
paracentrice: produse prin ruptura unui cromozom n dou puncte situate pe acelai bra, urmat de
rotaia cu 1800 a fragmentului intermediar i reunirea fragmentelor; n urma acestei rotaii nu se
modific configuraia cromozomului, ci numai ordinea benzilor.

Translocaiile sunt anomalii de structur caracterizate prin trecerea unuia sau mai multor
fragmente cromozomice de pe un cromozom pe altul, fr a determina modificri fenotipice.
Translocaiile pot fi de trei tipuri:
- reciproce - produse prin ruperea a doi cromozomi n cte un punct, urmat de schimbul
fragmentelor rupte i realipirea cromozomilor;

cu inserii - produse prin ruperea a doi cromozomi neomologi, unul ntr-un punct i cellalt n
dou puncte de pe acelai bra, urmat de inserarea n punctul de ruptur al primului cromozom al
fragmentului intermediar din al doilea cromozom;

robertsoniene - produse prin ruperea a doi cromozomi acrocentrici la nivelul centromerului urmat
de fuziunea braelor lungi (fuziune centric) i pierderea braelor scurte (conin doar gene pentru
37

ARN ribosomal i, astfel, pierderea lor nu determin modificri fenotipice); acest tip de anomalii
conduce la scderea numrului de cromozomi de la 46 la 45.

Anomaliile cromozomice
echilibrate nu
modific fenotipul individului,
deoarece reprezint rearanjri cromozomice, care nu determin modificri cantitative ale materialului
genetic. Dar, purttorul unei translocaii echilibrate, dei normal fenotipic, poate produce gamei
anormali datorit erorilor de conjugare i erorilor de segregare (nedisjuncii) ale cromozomilor
implicai n translocaie.

Consecinele translocaiei robertsoniene t(13q21q)

asupra gametogenezei

38

ANOMALII CROMOZOMICE NEECHILIBRATE

Deleiile sunt anomalii structurale caracterizate prin pierderea unor fragmente cromozomice.
Anomaliile pot fi de dou tipuri:
- terminale - produse prin ruperea unui cromozom ntr-un punct, urmat de pierderea fragmentului
terminal;
- interstiiale - produse prin ruperea unui cromozom n dou puncte situate pe acelai bra, urmat
de pierderea fragmentului intermediar.
Deleiile se pot produce i prin alte
mecanisme: crossing-over inegal ntre
cromozomi omologi aliniai eronat, segregarea
cromozomilor anormali n cursul meiozei
parentale n cazul n care unul din prini
prezint o anomalie echilibrat. Deleia are ca
efect apariia unei diferene de lungime ntre
cromozomii omologi.
Duplicaiile sunt anomalii structurale caracterizate prin prezena n dublu exemplar a unui
fragment cromozomic. Anomalia se poate produce prin crossing-over inegal i segregare anormal a
cromozomilor cu translocaie.
Cromozomii inelari apar prin ruperea unui cromozom n dou puncte situate pe brae diferite,
urmat de pierderea segmentelor terminale (acentrice) i reunirea capetelor segmentului centric ntr-o
structur inelar.
Izocromozomii sunt cromozomi anormali formai fie numai din brae scurte, fie numai din
brae lungi. Mecanismul de apariie a anomaliei const n clivarea transversal a centromerului.
Anomalia are ca efect apariia unui cromozom care prezint concomitent deleia unuia din brae i
duplicaia celuilalt bra.

Cromozomii dicentrici sunt cromozomi anormali caracterizai prin prezena n acelai

cromozom a doi centromeri. Mecanismul de producere const n ruperea a doi cromozomi n cte un
punct, urmat de pierderea fragmentelor terminale i unirea celor dou segmente cromozomice, care
prezint centromere, ntr-un singur cromozom.
Anomaliile cromozomice neechilibrate determin un dezechilibru cantitativ al materialului
genetic (n plus sau n minus) ce se manifest fenotipic asemntor anomaliilor numerice (trisomii
pariale sau monosomii pariale). Trisomiile i monosomiile pariale ale unui cromozom determin
multiple caractere anormale n "tip i contratip" asemntoare cu monosomiile i trisomiile totale ale
aceluiai cromozom: trisomia 18 (sdr. Edwards) i monosomia parial determinat de 18q-; trisomia
13 (sdr. Patau) i monosomia parial determinat de r(13).

39

ANOMALIILE CROMOZOMICE NUMERICE

Anomaliile numerice sunt clasificate n: poliploidii (prezena n plus a unor seturi haploide
de cromozomi) i aneuploidii (prezena n plus sau absena unui cromozom ntreg).
Poliploidiile, n dependen de numtul de seturi haploide prezente n nucleul celulei somatice,
pot fi: triploidii (3n) - 69,XXX sau 69,XXY sau 69,XYY; tetraploidii (4n )- 92,XXXX sau
92,XXYY; etc.
Triploidia (3n) poate rezulta prin fecundarea de ctre un gamet normal (n = haploid) a unui
gamet anormal (2n=diploid); gametul diploid este rezultatul neseparrii citelor de ordinul II n meioza
parental (de obicei, n cursul ovogenezei, neexpulzarea primului globul polar - diginie; uneori n
cursul spermatogenezei - diandrie); prin erori n cursul fecundrii: fecundarea unui ovul (n) de ctre 2
spermatozoizi (2n) dispermie.
Tetraploidia (4n) poate fi rezultatul unei erori de clivaj n cursul primei diviziuni mitotice a
zigotului i dublarea numrului de cromozomi imediat dup fecundare (endomitoz) sau prin
fecundarea a 2 gamei diploizi (2n+2n=4n). Poliploidiile intereseaz o mare cantitate de material
genetic i la om sunt, de regul, neviabile (manifestndu-se prin avort n trimestrul I de sarcin sau
nou-nscui mori).
Aneuploidile se caracterizeaz prin prezena n plus fa de numrul diploid normal sau absena a
1-2-3 cromozomi. Majoritatea aneuploidiilor sunt consecina unor erori de segregare cromozomic
sau cromatidian n cursul diviziunii celulare, numite nedisjuncii. n cazul nedisjunciilor numrul
de cromozomi din celulele fiice nu este egal. Aceste anomalii se pot produce n meioza I, meioza II
sau n mitoz. Rareori, gameii nulisomici, iar apoi embrionii monosomici, pot rezulta datorit
pierderii cromozomilor printr-o ntrziere anafazic la nivelul plcii ecuatoriale.
Aneuploidiile omogene sunt rezultatul fecundrii unui gamet normal de ctre un gamet aneuploid
produs prin erori de distribuie a materialului genetic n cursul meiozei parentale.
Aneuploidiile n mozaic sunt rezultatul erorilor de distribuie a materialului genetic n cursul
mitozei (de obicei, diviziunile de segmentare ale primelor stadii embrionare).
CLASIFICAREA ANEUPLOIDIILOR:
a) dup surplus sau lips de cromozomi:
- monosomie (2n-1) - absena unui cromozom;
- trisomie (2n+1) - prezena unui cromozom supranumerar;
b) dup tipul cromozomului implicat:
- aneuploidii autozomale
- aneuploidii gonozomale
c) dup numrul de celule afectate:
- anomalii omogene (prezena anomaliei n toate celulele organismului);
- anomalii n mozaic (prezena unor linii celulare anormale i normale n acelai organism);
d) dup asocierea sau lipsa acesteia cu anomaliile de structur:
- anomalii libere fr anomalii cromozomice structurale;
- anomalii prin translocaie prezena n plus a unor cromozomi ataai la alii fr
modificarea numrului diploid normal, sau falsa absen a unui cromozom ca urmare a
40

fuzionrii cu un altul. Uneori termenul se folosete referitor la orice modificare cantitativ a

materialului genetic, inclusiv la anomaliile congenitale structurale:
anomalii complete prezena n plus sau lipsa unui cromozom n ntregime;
anomalii pariale prezena n plus sau lipsa unui segment cromozomic.

Efectele i gravitatea anomaliilor cromozomice cantitative depind de:

- tipul de anomalie i mrimea dezechilibrului genetic - cu ct defectul cantitativ este mai
mare, cu att consecinele sunt mai grave; deficitul are consecine mai grave dect excesul;
- coninutul genic i activitatea cromozomului implicat de ex., trisomia 1 nu este viabil,
trisomia 21 - da.
- tipul i numrul de celule afectate - afectarea celulelor somatice duce la modificarea
fenotipului individului; afectarea celulelor sexuale duce la apariia tulburrilor de reproducere.
Monosomiile sunt mai grave dect trisomiile. Singura monosomie viabil la specia uman este
monosomia X; monosomiile autozomale, Y i 98% din zigoii cu monosomie X se elimin ca produi
de avort, n trimestrul I de sarcin.
Trisomiile cromozomilor mari, activi genetic, sunt neviabile, producnd avort n trimestrul I de
sarcin sau nou-nscui mori. Viabile pot fi trisomiile 8, 13, 18, 21, fiind responsabile de multiple
anomalii de dezvoltare (sindroame):
- sindromul trisomiei 8 - 47, XX (XY), +8;
- sindromul Patau - 47, XX (XY), +13;
- sindromul Edwards - 47, XX (XY), +18;
- sindromul Down - 47, XX (XY), +21.
Anomaliile cromozomice viabile (sindroamele cromozomice) prezint modificri fenotipice
comune (tulburri de cretere pre- i postnatal; ntrziere n dezvoltarea psiho-motorie i debilitate
mintal; multiple anomalii viscerale, disgenezii gonadice) i modificri specifice ale cromozomului sau
cromozomilor implicai.
INDICAIILE ANALIZEI CROMOZOMILOR UMANI
Analiza cariotipului prin diverse tehnici de colorare a cromozomilor metafazici sau
prometafazici, utiliznd tehnici de citogenetic molecular (FISH) este indicat n urmtoarele
situaii:
(1) Copiii cu anomalii congenitale multiple (minore/majore) asociate cu:
- tulburri de cretere prenatal,
- ntrziere n dezvoltarea psiho-motorie postnatal,
- anamneza familial tulburri de reproducere.
(2) Debiliti mintale (indiferent de grad) de cauze nedeterminate i/sau tulburri de comportament
asociate cu:
- dismorfie facial,
- anamnez familial pozitiv ( teste pentru X fragil).
(3) Dac n situaiile (1),(2) se identific o anomalie de structur neechilibrat (monosomie sau trisomie
parial) se va studia cariotipul
- prinilor (anomalie cromozomial echilibrat);
- rudelor gr.I
(4) Stri intersexuale, pentru stabilirea sexului genetic (XX sau XY) sau anomaliilor cromozomilor
sexuali.
(5) Tulburri de dezvoltare pubertar semne de disgenezie gonadic:
- spermogram anormal (azo- sau oligospermie)
41

- amenoree primar sau amenoree secundar precoce.

(6) Cupluri cu tulburri de reproducere ( 2 avorturi spontane i/sau nou-nscui mori/vii
plurimalformai; 5% din cazuri se identific anomalii cromozomiale echilibrat la unul dintre
partenerii).
(7) Hemopatiile maligne, mai rar n tumorile solide, pentru diagnostic pozitiv i diferenial,
prognostic sau urmrirea evoluiei tratamentului.
(8) Sindroame cu instabilitate cromozomic (sindromul Bloom, anemia Fanconi, sindromul
Nijmegen, sindromul ICF .a).
(9) Depistarea efectului mutagen al expunerii profesionale sau accidentale la radiaii ionizante i
unele substane chimice (clastogene).
(10) n DIAGNOSTICUL PRENATAL, studiul cromozomilor n celulele fetale este indicat la femeile
gravide:
- peste 35 de ani;
- unul din prini are o anomalie cromozomic echilibrat;
- copil cu o anomalie cromozomic de novo (dei cariotipul prinilor este normal este posibil
un mozaicism gonadic prenatal);
- semne ecografice de alarm sau testele de screening biochimic (triplu test) pentru sindromul
Down sunt pozitive;
- pentru stabilirea sexului genetic, n cazul mamelor purttoare de mutaii recesive gonosomale
XNXa (n care se nbolnvesc numai din biei) i nu exist o metod de diagnostic prenatal
specific.

42

CURS
PARTICULARITILE CROMOZOMILOR X i Y
Gonosomii provin dintr-o pereche de autosomi, care n procesul evoluiei s-au difereniat
genetic i morfologic, formnd cei doi cromozomi X i Y. Acest proces s-a realizat prin
specializarea progresiv a cromozomului Y, care a pstrat genele determinismului sexual i a
pierdut aproape toate genele somatice, devenind mult mai mic ca cromozomul X, care a conservat
forma original pstrnd att genele de sexualizare, ct i cele somatice. Diferenierea celor doi
gonosomi a fost necesar pentru:
- a mpiedica schimbul de gene ntre cromozomul X i Y n meioz i permite conservarea pur a
determinanilor sexuali specifici fiecrui cromozom;
- a asigura ulterior obinerea unor zigoi cu sexe genetic distincte XX sau XY.
Cromozomii de sex (gonozomi, heterozomi) se deosebesc att dup structur (dimensiuni,
poziia centromerului, cantitatea de heterocromatin), ct i dup coninutul de gene.
Cromozomul X - este un cromozom submetacentric mediu (Grupa C). Este prezent n
celulele somatice la indivizii de ambele sexe: n dublu exemplar la femeile cu cariotip 46,XX i ntrun singur exemplar la brbaii cu cariotip 46,XY; este prezent ntr-un singur exemplar n ovule circa
1606 gene:
gene structurale pentru caractere somatice (de ex., grupa sanguin Xg, factorii VIII i
IX de coagulare, enzima glucozo-6-fosfat dehidrogenaza, vederea cromatic etc.);
gene reglatoare feminizante;
gene structurale feminizante;
gene structurale masculinizante.
Cromozomul Y este un cromozom acrocentric mic (Grupa G), 2/3 din braul q este
inactiv genetic, fiind heterocromatinizat. Este prezent ntr-un singur exemplar n celulele somatice
ale indivizilor de sex masculin cu cariotip 46,XY i n 50% din spermatozoizi. Cromozomul Y
conine circa 397 gene:
gene reglatoare masculinizante (SRY = Tdf);
gene care asigur fertilitatea (AZF1, AZF2);
gene structurale somatice (factorul de control al creterii dinilor, receptor
interleukin);
pseudogene (actin, Xg).
Deoarece genomul feminin conine doi cromozomi X, iar cel masculin un singur cromozom
X, produii genelor localizate pe cromozomii X ar trebui s fie ntr-o cantitate dubl la femeie fa
de brbat. Acest lucru ns nu se ntmpl datorit inactivrii unui cromozom X la femeile normale
i a cromozomilor X suplimentari la indivizii ce se abat de la normal, fapt ce determin s rmn n
stare funcional un singur cromozom X la ambele sexe, fenomen denumit compensaie de doz a
genelor X-linkate.

i.

ii.

Ipoteza existenei unui asemenea mecanism a fost formulat n 1961 de Mary Lyon i
cuprinde trei postulate:
n celulele somatice este activ un singur cromozom X, restul fiind inactivai i nedisponibili
pentru transcripie. Procesul de inactivare este un proces de heterocromatinizare: cromozomul X
inactivat este puternic condensat i vizibil n interfaz sub forma corpusculului Barr; replicarea
lui se produce la sfritul perioadei S.
Inactivarea se produce la nceputul vieii intrauterine, nainte de implantarea blastocistului (la
ziua a 16-18, la etapa de ~3000-4000 celule). Pn la acest moment ambii cromozomi X sunt
activi (se sintetizeaz ARNm, enzime); embrionii 46,XX i 46,XY sunt biochimic i funcional
43

iii.

diferii; inactivarea unui din cromozomii X, odat aprut, rmne definitiv la toi descendenii
celulei.
Inactivarea cromozomului X-matern sau X-patern are un caracter ntmpltor i independent n
fiecare celul. Deci fiecare femeie normal este un mozaic de celule somatice, unele avnd
activ X-ul matern, altele X-ul patern.

Consecinele genetice ale inactivrii cromozomului X

1. Compensarea dozajului genic X-lincat. Dac un X este inactivat:
- cantitatea total a produilor genelor X va fi aceeai la ambele sexe;
- procesul de inactivare a crs X nu este ntotdeauna complet i perfect;
- n aneuploidiile X
o femeile 45,X0 i brbaii XXY manifest fenotipuri anormale;
o s-a observat c fenotipul unui individ este cu att mai anormal, cu ct sunt prezeni
mai muli cromozomi X.
2. Variabilitatea expresiei la femeile heterozigote. Femeile heterozigote pentru gene X-linkate au
o variabilitate considerabil n expresia fenotipic, deoarece inactivarea cromozomului X este
ntmpltoare i ca urmare proporia celulelor n care o alel oarecare este inactiv va fi variabil (de
la 0%- 100%). Dac alela mutant este funcional ntr-o majoritate a celulelor organismului,
heterozigoii feminini pot manifesta tulburarea (heterozigotul care se manifest sau Layonizare
defavorabil ). Exemple de boli: deficitul de G-6-PD, daltonismul, hemofilia, distrofia muscular
Duchenne.
3. Mozaicismul. Femeile prezint un mozaicism pentru genele X-lincate i au deci dou populaii de
celule, una cu X- matern activ, alta cu X- patern activ. La om fenomenul de mozaicism a fost
evideniat n cazul femeilor heterozigote pentru:
form rar de albinism X-linkat, la care la fundul ochiului s-au depistat pete de celule
pigmentate i nepigmentate.
gena ce codific G-6-PD, aceasta prezint 2 alele care produc dou forme distincte ale enzimei.
La femeile heterozigote s-au izolat celule de piele n cultur i s-a demonstrat c descendenii
unei celule produc un singur tip de enzim.
MECANISME MOLECULARE IMPLICATE N LYONIZARE
Au fost semnalate gene care rmn funcional-active pe cromozomul X inactivat. O
explicaie a acestui fenomen ar fi faptul c o parte din ele au gene omoloage pe cromozomul Y, de
aceea nu necesit compensarea dozei. Genele din regiunea pseudoautozomal (PAR), cu o extindere
de 2Mb, cuprins ntre Xp22- pter sunt:
gena STS, care codific steroid-sulfataza;
gena MIC-2, din vecintatea regiunii pseudoautozomale;
genele DXS, U23E, UBEI din regiunea proximal a braului scurt;
gena RPS4X care codific proteinele ribozomale S4 din regiunea proximal a braului lung.
I regiunea pseudoautosomal (PA) cu gene comune i pe crs X i pe crs Y:

- Xpter;
- Ypter;
II regiunea cu gene specifice numai crs X;
III regiunea crs Y cu gene masculinizante;
IV regiunea crs Y (2/3Yq) cu secvene necodificatoare heterocromatin constitutiv.

44

Cercetrile de biologie molecular au identificat pe cromozomul X un segment - (q13),

implicat n inactivare, denumit centru de inactivare a cromozomului X (XIC). La acest nivel se
gsete gena XIST, care este o gen atipic - a pierdut potenialul de codificare proteic. Ea
codific o molecul de ARN de circa 17 Kb care rmne asociat cu cromozomul inactivat genetic.
Prin experiene de transgenez s-a constatat c gena XIST integrat ntr-un autosom este
capabil s declaneze procesul de inactivare cromozomial i formarea heterocromatinei. Prin
metoda FISH s-a constatat c molecula de ARN- XIST se localizeaz pe autosomul n care s-a
integrat gena i antreneaz inactivarea in cis a genelor autozomale. De asemenea s-a constatat ca
autosomul n care este integrat gena XIST este hipoacetilat la nivelul histonei H4 i are loc
formarea unui tip nou de histone- macroH2A1. Alte cercetri relev c mecanismul de inactivare
depinde de stabilitatea moleculei de ARN-XIST pe cromozomul X inactivat. Forma stabil i
instabil de ARN se transcrie de pe promotori diferii ale aceleai gene. Reglarea expresiei genei
XIST poate fi explicat pe baza fenomenului de amprentare genomic. Amprentarea genomic
(sau imprinting-ul parental) reprezint represarea permanent, dependent de originea parental, a
activitii transcripionale a uneia din cele doua copii ale unei gene din perechea de alele; sunt
modificri suferite de gene n cursul gametogenezei i/sau embriogenezei precoce i reprezint un
mecanism de reglare a expresiei fenotipice a unor gene.

TESTUL CROMATINEI X
Cromatina X reprezint un cromocentru vizibil, n mod normal, n nucleii interfazici ai celulelor
aparinnd sexului feminin; ea rezult prin heterocromatinizarea unuia dintre cei doi cromozomi X.
Originea i semnificaia cromatinei X a fost explicat de Mary Lyon (1961).
Studiul celulelor interfazice din orice esut provenit de la organismul feminin normal permite
identificarea cromatinei sexuale X. Tehnicile uzuale folosesc frotiul din celulele mucoasei bucale
(testul Barr) i frotiul din snge periferic. Evaluarea acestor teste presupune stabilirea numrului
cromozomilor X n corelaie cu numrul de corpusculi de heterocromatin X.
Corpusculul Barr reprezint un cromozom X heterocromatinizat, puternic condensat i intens
colorat bazofil. Este situat cel mai frecvent periferic, lipit de faa intern a membranei nucleare
(intranuclear) i are o form oval, plan convex, discoidal sau triunghiular. Mrimea medie este de
1 micron ( 0,3). Cnd corpusculul Barr este situat central trebuie difereniat de cromocentri nespecifici
sau de nucleol, care se prezint ca o formaiune rotund, cu dimensiuni mai mari, ce se coloreaz n
brun-crmiziu cu verde de metilpironin.

Morfologia corpusculului Barr n celulele mucoasei bucale.

A. Microfotografia nucleilor interfazici. B. Schema unei celule.
CB corpuscul Barr. NC nucleol.

n mod normal corpusculul Barr este prezent ntr-un singur exemplar la femeie i lipsete la brbat,
deoarece brbatul are un singur cromozom X, iar acesta nu se inactiveaz, n timp ce femeia are doi
cromozomi X, din care unul se inactiveaz.
n frotiurile mucoasei bucale frecvena teoretic a corpusculului Barr este de 100%, iar practic aproximativ de 30-40%. Aceast frecven real se datoreaz:
- excluderii corpusculilor situai central;
45

calitilor improprii ale unor nuclei din celulele superficiale sau profunde;
defectelor de colorare;
existenei reale a celulelor cromatin-negative: cromozomul X inactiv nu se condenseaz din cauza
unor condiii metabolice generale sau celulare;
alte cauze: vrsta, ciclu ovarian, boli, tratamente.

n cazuri patologice - anomalii de numr ale cromozomilor X (disgenezii gonadice) - poate fi

prezent la brbat (47,XXY), absent la femeie (45,X) sau prezent n mai multe exemplare la ambele sexe
(polisomii X).
Mrimea corpusculului Barr depinde de mrimea cromozomului X inactivat (mai mare de 1
micron: isoXq, duplicaie pe cromozomul X; mai mic de 1 micron: deleie pe cromozomul X, crs X
inelar).
Cnd pe aceeai lam se ntlnesc celule cu un numr diferit de corpusculi Barr, se ia n
consideraie numrul maxim gsit deoarece unii ar putea s nu apar.

TESTUL CROMATINEI Y
Cromatina Y reprezint aspectul interfazic al celor 2/3 distale ale braului q al cromozomului
Y. Se evideniaz prin colorare cu quinacrin prezentndu-se un corpuscul intens fluorescent (corpuscul
F), vizibil n nucleul interfazic. Mrimea lui este de 0,25 microni i este situat liber sau lipit de
membrana nuclear. Frecvena este diferit n diferite esuturi ale organismului masculin:
70-80% n fibroblati;
45% n spermatozoizi;
Corpusculul F este prezent exclusiv la brbat ntr-un singur exemplar; poate fi prezent n dou
exemplare la persoanele cu cariotip 47,XYY.
VALOAREA PRACTIC A TESTULUI CROMATINEI SEXUALE
Testul cromatinei X este un test rapid, foarte util n multe situaii, care poate fi efectuat n condiii
de dotare minim, cu mijloace modeste:
a) prenatal: n celulele extrase prin puncie amniotic - permite stabilirea sexului genetic al
ftului n anomaliile gonosomale recesive (de exemplu hemofilie sau miopatie Duchenne) n cazul n
care femeia este purttoare a genei anormale (risc 50%).
b) la natere: n cazul ambiguitii sexuale la nou nscuii cu testicul nepalpabil - pentru precizarea
sexului genetic i punerea n concordan cu sexul civil; sexul civil are importan mai ales n
edificarea ulterioar a sexului psiho-comportamental.
c) mai trziu: n diferite anomalii de sexualizare pentru precizarea sexului genetic; diagnosticul
disgeneziilor gonadice orhitice sau ovariene prin anomalii de numr i structur a cromozomilor
sexuali.
d) n medicina legal i criminalistic pentru precizarea provenienei feminine sau masculine a
unor fragmente de esuturi, pete de snge, fire de pr.
DAR, testul cromatinei sexuale este un test subiectiv, nu poate depista toate mozaicurile i nici
anomaliile autozomilor; n multe situaii, pentru precizare necesit efectuarea cariotipului.

46

CURS 5
TRANSMITEREA MATERIALULUI GENETIC DE LA CELUL LA CELUL
Una dintre proprietile fundamentale ale organismelor vii este autoreproducerea, asigurat
de proprietatea unic a moleculelor de ADN de a se replica. n timpul replicrii materialul genetic se
dubleaz, iar n timpul diviziunii celulare are loc distribuia lui descendenilor. Astfel, diviziunea
celular este ansamblul de evenimente genetice, biochimice i
morfologice, ce asigur, prin intermediul cromozomilor, transmiterea
informaiei genetice la generaiile urmtoare de celule sau organisme.
Transmiterea informaiei genetice de la celul la celul se realizeaz
n dou etape majore:
- dublarea ADN cromozomial;
- repartizarea egal i identic a cromozomilor celulelor
fiice.
Acurateea dublrii materialului genetic i distribuiei
cromozomilor n timpul diviziunii celulare sunt
asigurate de
succesiunea evenimentelor ciclului celular (ciclului mitotic) programate
genetic. Fiecare ciclu celular cuprinde dou perioade dinamic i calitativ
distincte: interfaza i mitoza.

Nr de
cromozo
mi

Nr de
mol.
ADN

Dublarea
materialului
genetic

G1

46

46

slab condensat

46

92

Replicare

slab condensat

G2

46

92

slab condensat

Profaza

46

92

puternic condensat

Metafaza

46

92

maximal condensat

Anafaza

92

92

puternic condensat

Disjuncia
cromatidelor
surori

Telofaza

46 + 46

46 + 46

puternic / slab
condensat

Citochineza

MITOZA

INTERFAZA

Perioadele ciclului
celular

Compactizarea
materialului genetic

Segregarea
materialului
genetic

Interfaza reprezint perioada dintre diviziuni pe parcursul creia materialul genetic este
decondensat i se prezint sub form de cromatin; informaia genetic este realizat prin expresia
unor anumite seturi de gene i sinteza diferitor proteine care asigur vitalitatea celulei, creterea,
specializarea celular i integrarea ei ntr-un esut. Pe parcursul interfazei celula primete semnale
mitogene (pentru celulele esuturilor proliferative inducerea mitozei este programat). Recepionnd
semnalele mitogene, celula deruleaz procesele de pregtire ctre mitoz:
- replicarea ADN cromozomial cu dublarea materialului genetic, cromozomii devenind
bicromatidieni;
47

controlul calitii materialului genetic i nlturarea defectelor din moleculele de ADN prin
activarea diferitor sisteme reparative;
dublarea centriolilor, care vor asigura formarea fusului de diviziune n timpul mitozei.
DUBLAREA MATERIALULUI GENETIC

Replicarea este procesul molecular prin care se realizeaz dublarea exact a moleculelor de
ADN (a secvenei nucleotidice), i n consecin dublarea exact a materialului genetic. Dintr-o
molecul de ADN se formeaz dou molecule identice att ntre ele, ct i cu molecula parental.
Acest proces are loc datorit particularitilor unice de organizare a moleculelor de ADN: ADN
este format din dou catene polinucleotidice complementare i antiparalele.
Principalele caracteristici ale replicrii sunt:
- sinteza replicativ a ADN-ului este semiconservativ, deoarece
fiecare din cele dou catene este folosit ca matri pentru sinteza
unei catene noi de ADN, noile molecule conin o caten matri
i alta nou;
- replicarea ADN-ului nuclear are loc numai o singur dat pe
parcursul ciclului mitotic, n perioada sintetic a interfazei;
- procesul este asincron - unele secvene de ADN se replic mai
precoce (eucromatina), iar alte secvene
mai tardiv
(heterocromatina).
n rezultatul sintezei replicative a ADN-ului materialul genetic se
dubleaz i cromozomii devin bicromatidieni. Dac pn la replicare n
celul sunt 46 de cromozomi monocromatidieni (46 de molecule de
ADN) dup replicare cei 46 de cromozomi devin bicromatidieni (92 de
molecule de ADN). Moleculele de ADN obinute prin replicare rmn
unite prin centromer pn n anafaz (dou molecule de ADN identice
ntre ele reprezint cromatidele surori ale unui cromozom) .
Replicarea semiconservativ a
ADN-ului

DISTRIBUIA MATERIALULUI GENETIC PRIN MITOZ ECVAIONAL

Mitoza reprezint mecanismul de distribuie a materialului genetic replicat la doi poli ai
celulei, asigurat de fusul acromatic i de separarea masei citoplasmatice, cu formarea a dou celule
identice genetic ntre ele i cu celula mam.

Mitoza reprezint o diviziune ecvaional determinat de urmtoarele evenimente:

condensarea materialuilui genetic cromatina se transform n cromozomi facilitnd distribuia
egal i identic a materialului genetic;

toi cromozomii sunt bicromatidieni; cromatidele surori sun identice, rezultate prin replicarea
ADN-ului cromozomial, cromatidele sunt unite prin centromer de la sfritul perioadei S pn n
Anafaz;

n regiunea centromerului fiecrui cromozom se maturizeaz cte o pereche de kinetocori, ce

asigur interaciunea cromozomilor cu firele fusului acromatic;

organizarea aparatului de diviziune centriolii n perioada S se dubleaz, n Profaz migreaz,

formnd doi poli ai celulei de la care se asambleaz firele fusului de diviziune;

48

microtubului fusului de diviziune se unesc cu cromozomii de ambele pri ale centromerului prin
intermediul kinetocorilor;

cromozomii maximal condensai, se aranjeaz ntr-un singur plan ecuatorial placa metafazic,
datorit aparatului de diviziune;

segregarea materialului genetic, replicat i condensat, se realizeaz prin:

- dublarea i clivarea longitudinal a centromerilor;
- disjuncia cromatidelor surori (din fiecare cromozom bicromatidian se formeaz doi
cromozomi monocromatidieni);
- migrarea simultan i sincron a cromatidelor surori spre polii opui ai celulei.

procesul de repartizare a materialului genetic se finalizeaz prin formarea a doi nuclei identici
urmat de citochinez.

Dinamica cromozomilor n diferite faze ale ciclului mitotic

Astfel, materialul genetic (cei 46 de cromozomi ai celulei somatice replicai), prin mitoz se
transmite de la o celul la dou celule fiice. Celulele rezultate motenesc cte 46 de cromozomi
material genetic identic, set de gene identic. Mitoza, n aa mod, reprezint mecanismul ce asigur
proprietatea celulelor de a transmite n succesiunea generaiilor material genetic identic.
Rolul biologic al mitozei:
asigur transmiterea egal i identic a materialului genetic n succesiunea generaiilor de
celule;
reprezint mecanismul universal de nmulire a celulelor somatice la organismele
pluricelulare;
49

asigur creterea organismelor pluricelulare la etapele prenatale i postnatal;

reprezint mecanismul prin care se rennoiesc esuturile;
intervine n procesul de regenerare a esuturilor.
CARACTERISTICA PERIOADELOR CICLULUI MITOTIC

INTERFAZA

Perioadele
ciclului celular

G1

G2

MITOZA

Profaza

Metafaza

Anafaza

Telofaza

Evenimente celulare principale

Creterea celular;
Specializarea celular;
Controlul competenei intrrii celulei n
perioada S.
Dublarea ADNului nuclear;
Dublarea centriolilor.
Controlul competenei intrrii celulei n
mitoz;
Acumularea factorilor proteici mitotici.
Disocierea membranei nucleare;
Condensarea cromatinei i transformarea
ei n cromozomi;
Formarea aparatului de diviziune;
Maturizarea kinetocorilor;
Interaciunea cromozomilor cu fusul de
diviziune.
Cromozomii sunt dispui ntr-un singur
plan ecuatorial;
Controlul interaciunii cromozomilor cu
fusul de diviziune.
Clivarea longitudinal a centromerului
Disjuncia cromatidelor surori
Migrarea simultan i sincron a
cromatidelor spre polii celulei
Decondensarea cromozomilor cu
transformarea lor n cromatin
Reorganizarea membranei nucleare, cu
formarea a dou nuclee
Citochineza cu formarea a dou celule
fiice

Procese
genetice de
baz

Forma de prezentare a
materialului genetic

Transcripia
Translaia
Reparaia

Cromozomi monocromatidieni,
decondensai sub form de
eucromatin i heterocromatin

Replicarea
Reparaia
Transcripia
Translaia
Reparaia
Transcripia
Translaia
-

Cromozomii devin
bicromatidieni, decondensai
sub form de eucromatin i
heterocromatin
Cromozomi bicromatidieni,
decondensai sub form de
eucromatin i heterocromatin
Cromozomii bicromatidieni
se condenseaz

Cromozomi bicromatidieni
maximal condensai

Din fiecare cromozom

bicromatidian, prin separarea
cromatidelor surori, se
formeaz doi cromozomi
monocromatidieni.
Cromozomi monocromatidieni,
ce se decondenseaz
transformndu-se n cromatin.

ERORILE MITOZEI
Erorile mitozei reprezint anomalii de distribuie a materialului genetic n timpul diviziunii
celulare. nsi distribuia materialului ereditar are loc n anafaz prin clivarea longitudinal a
centromerului, segregarea cromatidelor i migrarea lor simultan spre polii celulei, iar prin separarea
citoplasmei cele dou celule-fiice motenesc un numr identic de cromozomi. Din diverse motive
(defecte genetice, defecte metabolice, aciunea factorilor de mediu) aceste procese celulare pot fi
dereglate; se pot produce:
- asamblare anormal a fusului acromatic i interaciune defectuoas cu kinetocorii;
- depolimerizare asincron a microtubulilor, care determin migrarea neconcomitent a
cromozomilor spre polii celulei;
- defecte n structura centromerului ce mpiedic separarea cromatidelor-surori;
50

modificarea viscozitii citoplasmei care poate mpiedica procesul normal de deplasare a

cromozomilor spre polii celulelor, etc.
Principalele erori ce conduc la o distribuie anormal a materialului genetic sunt:
- clivarea transversal a centromerului cu producerea izocromozomilor;
- nedisjuncia cromatidian i
- ntrzierea anafazic cu producerea celulelor aneuploide (trisomii, monosomii).
-

CLIVAREA TRANSVERSAL A CENTROMERULUI

n anafaz, cromozomul bicromatidian se separ n doi cromozomi monocromatidieni prin clivarea
centromerului. Clivarea centromerului, n norm, se realizeaz n plan longitudinal, rezultnd doi
cromozomi identici dup mrime, form i informaie genetic, avnd un bra proximal (p) i altul distal
(q). Dar, mai rar, clivarea centromerului se poate realiza n plan transversal, rezultnd doi cromozomi
monocromatidieni diferii ca mrime, form i coninut genetic izocromozomi (iso) ce conin dou brae
de acelai fel:
- iso p (ip) cromozom format din dou brae p fiind absent braul q;
- iso q (iq) cromozom format din dou brae q fiind absent braul p.
n rezultatul clivrii transversale a centromerului i segregrii cromozomilor, cele dou celule
fiice vor moteni materialul genetic dublat al unui bra i absena altui bra al cromozomului
implicat n anomalie. Ex.:
46, XX CTCcrsX
46,X,i(Xp) / 46,X,i(Xq)
CTCcrsY
46, XY
46,X,i(Yp)/ 46,X,i(Yq)
CTCcrs 21
46, XX (XY)
46,XX (XY), i(21p) / 46,XX (XY), i(21q)
etc.
51

NEDISJUNCIA CROMATIDIAN
Cromatidele surori ale unui cromozom, rezultate prin replicarea premitotic a ADN-ului
cromozomial, se separ una de alta dup clivarea centromerului. Acest proces reprezint momentul
cheie n distribuia materialului genetic n timpul diviziunii. n caz de neseparare nondisjuncie
cromatidele surori ale unui cromozom vor migra la acelai pol, determinnd o repartizare inegal a
materialului genetic. Ca rezultat una dintre celulele fiice va moteni un cromozom n plus (2n+1
47 cromozomi trisomie), iar n cealalt celul va lipsi cromozomul respectiv (2n-1 45
cromozomi monosomie). Ex.:
46, XX NDcrsX
45,X / 47,XXX ;
NDcrsY
46, XY
45,X / 47,XYY;
NDcrs 13
46, XX
45,XX,-13 / 47,XX,+13;
NDcrs 18
46, XY
45,XY, -18 / 47,XY,+18;
NDcrs 21
46, XY
45,XY,-21 / 47,XY,+21;
NDcrs 8
46, XX
45,XX,-8 / 47,XX,+8;
etc.
NTRZIEREA ANAFAZIC
Dup separarea cromatidelor-surori, prin depolimerizarea fusului de diviziune, are loc migrarea
simultan a cromozomilor monocromatidieni spre poli opui. La fiecare pol ajung cte 46 cromozomi,
care vor fi separai n dou nuclee, iar prin citochinez vor rezulta dou celule cu coninut genetic
identic. Ca rezultat al defectelor de dezasambalre a microtubulilor sau a modificrii viscozitii
citoplasmatice migrarea cromozomilor poate fi asincron. n rezultat, unii cromozomi vor nimeri n
nucleul celulei-fiice, iar alii, cei ntrziai, vor forma micronuclei citoplasmatici, care vor degrada. n
consecin, celulele fiice motenesc seturi diferite de cromozomi: una dintre celule poate obine un set
normal, iar cealalt celul va fi monosomic. Ex.:
46, XX IAcrsX
45,X / 46,XX;
IAcrsY
46, XY
45,X / 46,XY;
IAcrs13
46, XX
45,XX,-13 / 46,XX;
IAcrs18
46, XY
45,XY, -18 / 46,XY;
etc.
CONSECINELE ERORILOR DIN MITOZ
Erorile de distribuie a materialului genetic n mitoz determin apariia celulelor cu seturi diferite
de cromozomi n acelai organism - mozaicuri celulare cromozomice ce pot genera dou sau mai
multe linii sau clone celulare, care difer prin numrul de cromozomi.

n rezultatul clivrii transversale a centromerului se poate produce mozaicul de tipul:

46,isop / 46,isoq - cnd eroarea afecteaz diviziunea zigotului, sau
46 / 46,isop / 46,isoq - cnd eroarea apare n cursul diviziunii blastomerilor.

n rezultatul nedisjunciei cromatidiene, eroare determinat de nesepararea cromatidelor surori ale

unui cromozom n cursul anafazei, apar mozaicuri de tipul:
- 45 / 47 cnd eroarea afecteaz diviziunea zigotului; sau
- 45 / 46 / 47 cnd eroarea apare n cursul diviziunii blastomerilor.
n rezultatul ntrzierii anafazice - eroare caracterizat prin migrarea cu vitez redus sau blocarea
migrrii unei cromatide dup ce disjuncia cromatidian s-a produs normal, determin apariia unui
mozaic cromozomic de tipul 45/46.
52

Evoluia clonelor celulare anormale depinde de viabilitatea celulelor care prezint anomalia
cromozomic:
a.
anomaliile grave determin moartea celulelor anormale (clonele anormale se autoelimin);
b. anomaliile mai puin grave permit multiplicarea celulei anormale cu apariia unei clone
anormale.
Trisomiile sunt mai puin grave ca monosomiile, anomaliile gonosomilor sunt mai puin grave ca
anomaliile autosomilor; cromozomii mai mici au mai puine gene i anomaliile lor sunt mai puin grave
ca anomaliile cromozomilor mari.
Anomalii
cromozomiale

Erori mitotice
cauze ale anomaliilor cromozomiale
Nedisjuncia cromatidian

Trisomii
(47,+?)

Monosomii
(45,-?)

Nedisjuncia cromatidian;
ntrzierea anafazic

i (?p)
Clivarea transversal a centromerului
i (?q)

Anomalii
cromosomice viabile

Anomalii
cromosomice letale

47,XXX
47,XXY
47,XYY
47,XX(XY),+21
47,XX(XY),+13
47,XX(XY),+18
47,XX(XY),+8
45,X

Restul
trisomiilor
autozomale

46,X,i (Xp)
46,X,i (Yp)

Restul
anomaliilor crs
46,XX(XY),i (?p)

46,X,i (Xq)
46,X,i (Yg)
46,XX(XY),i (Dq)
46,XX(XY),i (Gq)

Restul
anomaliilor crs
46,XX(XY),i (?q)

Toate
monosomiile
autozomale

Consecinele fenotipice ale clonelor anormale depind de momentul ontogenetic al apariiei lor.
Dac se produc n timpul embriogenezei - este perturbat formarea normal a esuturilor i organelor
producnd anomalii congenitale (fenotip anormal la natere); n caz dac apar postnatal se produce
perturbarea structurii sau funciei anumit esut sau organ i apare o degenerare neoplazic (cancer).
SALVAREA ANEUPLOIDIILOR
Organismul are tendina de a corecta dezechilibrul genetic, ncercnd s elimine cromozomul supranumerar
n cazul trisomiilor sau s ctige un cromozom n plus n cazul monosomiilor.
Corecia unei trisomii n disomie se poate realiza prin urmtoareale mecanisme:
- nedisjuncie mitotic;
- ntrziere anafazic;
- pulverizarea cromosomului supranumerar.
Corecia monosomiei n disomie poate fi realizat prin:
- nondisjuncie mitotic;
- endoreplicare selectiv a cromosomului monosomic;
- clivare transversal a centromerului ce rezult iso q. n cazul acrosomilor.
Consecina unui mecanism de salvare a unei aneuploidii este disomia uniparental. Trisomiile ce sunt
corectate prin pierderea unuia din cei trei cromosomi, 1/3 cazuri - rezult o disomie uniparent (DUP).
Monosomiile sunt corectate prin duplicarea cromosomului monosomic, rezultnd ntotdeauna DUP.

53

n cazul n care corecia se produce doar n anumite celule, rezult mozaicuri cromosomice:
- corecia unei trisomii prin pierderea cromosomului suplimentar determin producerea unui mozaic
47/46;
- corecia unei monosomii prin duplicarea cromosomului fr omolog determin producerea unui
mozaic 46/45.
Mozaicurile cromosomice pot fi mprite n trei categorii:
I. mozaicuri generalizate, prezente n toate esuturile organismului;
II. mozaicuri limitate la anumite esuturi embrionare;
III. mozaicuri limitate la placent.

Consecinele mozaicurilor limitate la placent sunt:

disfuncie metabolic placentar ce afecteaz dezvoltarea embrionar;
ntrziere n dezvoltare i avorturi;
mortalitate perinatal.

54

CURS 6
TRANSMITEREA INFORMAIEI GENETICE DE LA PRINI LA COPII
Perpetuarea speciei i pstrarea caracterelor distinctive sunt determinare pe proprietatea
fundamental a organismelor vii de a se autoreproduce. Pe parcursul evoluiei lumii vii a aprut
necesitatea nmulirii sexuate care asigur diversitatea intraspecific fenomen important pentru
supravieuire: asigur recombinarea materialului genetic, determin apariia indivizilor cu
combinaii noi de caractere cu o susceptibilitate diferit la agresiunile din mediul ambiant i, n
consecin, reprezint un mecanism important n selecia natural.
La organismele cu reproducere sexuat legtura material dintre generaii, transmiterea i
conservarea informaiei genetice de la o generaie la alta este asigurat de dou procese genetice
distincte:
- gametogeneza - producerea celulelor sexuale mature cu set haploid de cromozomi (n=23),
- fecundarea gameilor i formarea zigotului cu set diploid de cromozomi (2n=46) cu o
configuraie genetic nou, unic i constant.

GAMETOGENEZA
Gametogeneza este ansamblul proceselor genetice, biochimice i morfologice, care
determin formarea i maturaia gameilor n gonade (testicule sau ovare).
Ovogeneza este mecanismul de difereniere a ovulelor haploide din celule sexuale primare
diploide (ovogonii); se desfoar n ovare; unele procese se realizeaz n perioada embrio-fetal, iar
alte numai dup pubertate pn la menopauz; populaia de ovocite nu se rennoiete, iar nsi
procesul este discontinuu, cu dou faze de ateptare (dictiotenul profazei I i metafaza II ale
meiozei).
Spermatogeneza reprezint procesul de difereniere a spermatozoizilor haploizi din celule
sexuale primare diploide (spermatogonii); are loc n testicule; se desfoar n mai multe etape, cu
rennoirea permanent a populaiilor de celule sexuale dup pubertate.

Gametogeneza se desfoar n cteva etape:

perioada de nmulire mitotic a celulelor sexuale primare cu formarea unei populaii mari de
gametogonii (2n=2c);

perioada de cretere cu formarea gametociilor de ordinul I (2n=46 crs) prin replicarea ADNului cromozomial, sinteza componentelor necesare pentru meioz i acumularea factorilor ce
asigur formarea i dezvoltarea zigotului;

perioada de maturaie cu formarea gameilor haploizi, realizat prin meioz proces decisiv n
gametogenez:
- pe parcursul ovogenezei dintr-o ovogonie se maturizeaz doar un ovul capabil de fecundaie
i doi/ trei globuli polari;
- pe parcursul spermatogenezei dintr-o spermatogonie se maturizeaz patru spermatide;

!!! perioada de formare, caracteristic doar spermatogenezei, ce asigur modificrile

morfologice ale celulei sexuale masculine, transformnd spermatidele n spermatozoizi capabili
pentru fecundaie (mobilitate i capacitaie).

55

Ovogeneza

Spermatogeneza
Locul desfurrii

n ovare (gonade feminine)

n testicule (gonade masculine)

Perioadele caracteristice
I. De nmulire a ovogoniilor
I. De nmulire a spermatogoniilor
II. De cretere a ovocitelor de ordinul I
II. De cretere a spermatocitelor de ordinul I
III. De maturaie a ovulelor (dintr-un ovocit I se
III. De maturaie a spermatidelor (dintr-un
formeaz un ovul i trei globuli polari)
spermatocit I se formeaz patru spermatide)
IV. De formare a spermatozoizilor
Reglarea procesului
Control neuro-endocrin dependent de factorii de
Autocontrol neuro-endocrin
mediu
Tipul de gamei
Ovule - celule mari rotunde, ce conin vitelius, setul
Spermatozoizi celule mici mobile, formate din
de organite celulare caracteristic i nucleul haploid
cap, gt i flagel, nucleul este haploid ( 23,X sau
(23,X)
23,Y)
Perioada desfurrii
Perioada de nmulire i cretere se desfoar doar
Prenatal, odat cu formarea gonadelor se formeaz o
prenatal;
populaie de spermatogonii;
Ovarul nou-nscutei conine ovocite de ordinul I
Dup pubertate toate cele patru perioade ale
stopate n dictioten (profaza I a meiozei);
spermatogenezei se desfoar continuu, producnd
Perioada de maturaie ncepe dup pubertate, cte
un numr enorm de spermatozoizi.
un ovocit (mai rar dou) se maturizeaz lunar, pn
Spermatozoizii permanent se rennoiesc; perioada
la stadiul metafazei II;
de rennoire este de circa 64 de zile..
Meioza se finalizeaz dup fecundarea ovulului de
ctre spermatozoid.
!!! Ovocitele nu se rennoiesc.
Riscul mutaiilor generative
Crete odat cu vrsta femeii; risc pentru anomalii
Independent de vrsta brbatului, risc pentru mutaii
cromozomiale.
genice.

56

FECUNDAREA
Contopirea gameilor haploizi de origine parental diferit poart denumirea de fecundare,
iar celula rezultat ce conine materialul genetic al ambilor gamei - zigot. Gameii formai n timpul
ovogenezei i spermatogenezei sunt foarte variai, pentru c rezult n urma unor procese de
recombinare intra- i intercromozomial. Participarea ovulelor i spermatozoizilor la fecundaie este
aleatorie, asigurnd formarea diferitor variante genetice de zigoi, ceea ce reprezint recombinarea
genomic.
Fuziunea celor doi gamei haploizi reface setul diploid de cromozomi, caracteristic speciei.
Mitozele succesive ale zigotului duc la creterea i dezvoltarea organismului pluricelular. ncepnd
cu zigotul, toate celulele somatice vor avea cromozomii n perechi. Cromozomii pereche sau
omologii sunt asemntori ca morfologie i structur genic, dar diferii ca origine.
n concluzie, organismul uman matur posed dou linii celulare:
(i) celule somatice ce alctuiesc diferite esuturi i organe:
- au set diploid de cromozomi (2n=46crs);
- provin de la celula zigot prin mitoze repetate;
- 51% din materialul genetic este de origine matern i 49% de origine patern (deoarece
ADNmt este de origine matern);
- se nmulesc prin mitoz pentru a asigura creterea organismului, rennoire i regenerarea
esuturilor;
(ii) celule sexuale care asigur transmiterea materialului genetic de la prini la descendeni la
formarea zigotului;
- au set haploid de cromozomi (n=23crs);
- provin din gametogonii (celule diploide), care reprezint celule somatice specializate pentru
gametogenez;
- se maturizeaz n gonade prin meioz;
- determin stabilitatea numrului de cromozomi la specia dat.
DINAMICA CROMOZOMILOR N MEIOZ
Meioza (meiosis micorare) este un mecanism complex ce implic desfurarea
succesiv a dou diviziuni, care se termin cu njumtirea setului de cromozomi. Din fiecare
celul cu 46 cromozomi (set diploid) se formeaz 4 gamei cu cte 23 cromozomi (set haploid).
Gameii sunt extrem de variai pentru c, rezultai din meioz, sunt produi ai recombinrii intra- i
intercromozomice.

Particularitile segregrii cromozomilor n meioza

ovogenezei i spermatogenezei

57

Meioza este precedat de o interfaz premeiotic n care are lor replicarea ADN-ului. ntre
cele dou diviziuni exist o perioad scurt interkineza n care ADN-ul nu se replic.
Prima diviziune a meiozei diviziunea reducional asigur njumtirea numrului de
cromozomi n celulele: transform gametocitele de ordin I cu 46 cromozomi bicromatidieni n
gametocite de ordin II cu 23 cromozomi bicromatidieni.
Reducerea numrului de cromozomi este determinat de:
- conjugarea cromozomilor omologi cu formarea a 23 de bivaleni (tetrade) n profaza I;
- aranjarea bivalenilor n plan ecuatorial n metafaza I;
- disjuncia cromozomilor omologi i migrarea spre polii celulei a cromozomilor bicromatidieni,
cte un cromozom din fiecare pereche n anafaza I;
- citokineza asigur separarea masei citoplasmatice cu formarea a dou celule cu numr haploid de
cromozomi dar bicromatidieni (cu cantitate dubl de ADN 1n=2c) gametocite de ordinul II.

Dinamica cromozomilor n meioz

58

Paralel cu procesele ce asigur segregarea cromozomilor pe parcursul diviziunii meiotice

reducionale are loc recombinarea materialului genetic:

Conjugarea omologilor i recombinarea intracromozomial crossing-overul

recombinarea intracromozomial crossing-overul, care reprezint schimbul reciproc de

fragmente (gene) ntre cromozomii omologi materni i paterni i se desfoar datorit
conjugrii lor (Profaza I);
recombinarea intercromozomial, care reprezint asortarea independent a cromozomilor
neomologi materni i paterni la polii celulei n timpul Anafazei I, datorit aranjrii aleatorii a
bivalenilor la ecuator i migrrii spre polii celulei.

Nr. de cromozomi

Nr. de cromatide

Dublarea
mat.
genetic

Recombin
area

Segregarea
mat. genetic

Interfapa
premeiotic

46
(gametocit I)

92

PI

46

92

MI

46

92

AI

46

92

46 + 46

Citokineza

MEIOZA I
reducional

Perioadele ciclului
celular

TI

MEIOZA II
ecvaional

Inerchineza

23 + 23
(gametocii II)
23

23

46

46

P II

23

23

46

46

M II

23

23

46

46

A II

46

46

46

46

T II

23+23

23+23

23+23

23+23

Citokineza

(gamei)

A doua diviziune a meiozei diviziunea ecvaional asigur repartizarea egal i identic

a materialului genetic n celulele-gamei. Formarea gameilor haploizi (1n=1c) din gametociii de
ordinul II (1n=2c) este asigurat de:
- maturizarea a doi kinetokori pentru fiecare centromer;
- aranjarea la ecuator a cromozomilor ntr-un singur plan;
- clivarea longitudinal a centromerului i disjuncia cromatidelor surori;
- migrarea simultan i sincron a cromatidelor (cromozomilor monocromatidieni) spre polii
celulei;
- separarea masei citoplasmatice cu formarea a cte doi gamei haploizi din fiecare gametocit I, n
total 4 din fiecare celul ce a intrat n meioz.
59

ROLUL BIOLOGIC AL MEIOZEI

i. Meioza are un rol esenial pentru reproducerea organismelor i conservarea nsuirilor prinilor,
asigurnd legtura material ntre prini i copii;
ii. Meioza are i rolul de a produce i a menine variabilitatea genetic n populaiile umane prin
fenomenele de recombinare intra- i intercromozomic, ce se realizeaz n profaza meiozei I
schimbul reciproc de fragmente egale ntre cromozomii omologi (procesul crossing-over)
i n anafaza meiozei I asortarea independent a cromozomilor neomologi;
iii. Meioza demonstreaz corelaia dintre dinamica cromozomilor i legile ereditii ale lui Mendel
(legea segregrii caracterelor, legea motenirii independente a caracterelor).
ERORILE MEIOZEI I CONSECINELE LOR

n cursul meiozei se pot produce diferite anomalii de distribuie a materialului genetic:

crossing-over inegal cu formarea gameilor purttori de deleii sau duplicaii cromozomice;

nedisjuncie cromozomial sau cromatidian cu formarea gameilor nulisomici i disomici;

ntrziere anafazic cu formarea gameilor nulisomici;

nesepararea gametocitelor cu formarea gameilor diploizi.;

clivarea transversal a centromerului cu formarea isocromozomilor.

CROSSING-OVERUL INEGAL se poate produce ca rezultat al unei conjugri anormale a

cromozomilor omologi i, n consecin, schimbului inegal de fragmente ntre comatidele nesurori
ale bivalentului. Aceast eroare va fi cauza apariiei unor cromozomi cu deleie i cu duplicaie, iar
gameii respectivi purttori de aberaii cromozomiale [de ex.: 23,X(Y),1p- i (23,X(Y),1p+] vor da
natere la zigoi cu monosomii i trisomii pariale [de ex.: 46,XX(XY), 1p- i 46, XX(XY), 1p+].
NEDISJUNCIA CROMOZOMIC poate avea loc n anafaza I, cnd ambii cromozomi
omologi nimeresc la acelai pol al celulei i ca urmare n acelai gametocit sau n meioza II cnd
din diverse motive nu are loc clivarea centromerului i cele dou cromatide nu se separ,
migrnd mpreun la un pol se poate produce nedisjuncia cromatidian. n ambele cazuri se
formeaz gamei cu aneuploidii cromozomice disomii i nulisomii, care dup fecundare vor da
natere unor zigoi anormali: trisomici i monosomici.
NTRZIEREA ANAFAZIC a unui cromozom sau a unei cromatide se poate produce ca
urmare a separrii anafazice asincrone a cromozomilor n meioza I sau a cromatidelor n meioza
II, urmat de ntrzierea unui cromozom la polul celulei i pierderea acestuia n momentul
citochinezei (cromozomul ntrziat rmne n afara nucleului n citoplasm i degradeaz). Ca
rezultat al ntrzierii anafazice se formeaz gamei nulisomici, ct i gamei normali.
NESEPARAREA GAMETOCITELOR reprezint fenomenul cnd dup segregarea
cromozomilor n meioz nu se separ masa citoplasmatic i ca rezultat se produc gamei diploizi
(2n), care dup fecundare cu gameii normali vor forma zigoi triploizi (3n).
CLIVAREA TRANSVERSAL A CENTROMERULUI, cauzat de defecte ale ADN-ului
centromeric sau de asamblarea anormal a proteinelor centromerice, se poate produce n Anafaza II.
Ca rezultat se vor forma gamei cu isocromozomi p i izocromozomi q. La fecundarea gameilor
23,ip sau 23,iq vor rezulta zigoi 46,ip (cu materialul genetic al braului p a cromozomului respectiv
dublat i lipsa materialului genetic al braului q a cromozomului respectiv sau zigoi 46,iq (cu
materialul genetic al braului q a cromozomului respectiv dublat i lipsa materialului genetic al
60

braului p a cromozomului respectiv), iar dup fecundare se vor forma zigoi cu monosomie parial
i trisomie parial.
Astfel toate erorile de distribuie a materialului genetic n cursul meiozei duc la formarea
gameilor aneuploizi, iar dup fecundare formeaz zigoi aneuploizi (monosomici, trisomici), care n
consecin sunt cauza tulburrilor de reproducere: sterilitate, avorturi spontane, nou nscui mori
sau malformaii, copii cu tulburri de cretere pre i postnatal, ntrziere n dezvoltarea
psihomotorie.
ERORI LA FECUNDARE
Fecundarea dubl este posibil cnd ovarul elibereaz n momentul ovulaiei dou ovule i
prin fecundare, ele vor forma doi zigoi, care pot evolua independent; sau se pot uni, formnd o
singur structur embrionar denumit himer; n ultimul caz, dac zigoii vor avea acelai sex
genetic, se realizeaz o sexualizare normal i numai unele studii a caracterelor vor evidenia o
populaie celular dubl; dac zigoii care s-au unit au sexe genetice diferite, se realizeaz o
constituie XX/XY cu tulburri de sexualizare hermafroditism adevrat.
Dispermia este posibil cnd un ovul este fecundat de doi spermatozoizi, rezultnd zigoi
triploizi (69,XXX sau 69,XXY sau 69,XYY).
Diginia sau diandria reprezint fenomenul cnd unul din gamei este diploid i cellalt este
haploid, rezultnd zigoi triploizi; zigoii triploizi evolueaz cu dereglri severe n dezvoltarea
embrionar.
Consecine
Fecundarea dubl

Gemeni
dizigoi
Himer

Dispermie

Triploidie

Diginie

Triploidie

Diandrie

Triploidie

Constituia
genetic
46,XX
i
46,XX
46,XX
i
46,XY
46,XX/46,XX
46,XX/ 46,XY
69,XXX sau
69,XXY sau
69,XYY
69,XXX sau
69,XXY
69,XXY sau
69,XYY

61

Evoluie
Evoluie normal

Evoluie normal
Hermafroditism adevrat
Dereglri
severe
n
embrionar

dezvoltarea

Dereglri
severe
n
dezvoltarea
embrionar, placent mic de form
anormal, avort precoce
Mol hidatiform parial, placent mare,
polichistic, embrion malformat.