Cromozomii sexuali; cromatina sexual

Sex gonadic i sex fenotipic Gena SRY Hormoni Receptori hormonali. Hermafroditism i pseudohermofroditism. Inactivarea cz X Aneuploidii gonosomale Sindromul KLINEFELTER Sindromul TURNER

Diferenierea sexual: 4 componente

Sex gonadic Sex somatic (fenotipic) Caracteristici sexuale teriare (contiina apartenenei la unul din sexe) Orientarea sexual.

Determinismul sexual
Regul general: prezena cz. Y diferenierea gonadei masculine i a caracterelor sexuale masculine; Pe cromozomul Y se afl gena trigger a crei activare = primul movens ( la ~ 4 sptmni dup fertilizare) n cascada de evenimente ce declaneaz diferenierea gonadei masculine. Dup difereniere, testiculul, prin secreia androgenilor va determina diferenierea caracterelor sexuale secundare masculine. n absena genei SRY se va diferenia gonada feminin care, prin sintetiza de estrogeni va determin diferenierea fenotipului .

Identitatea sexual
Eveniment
Cromozomial /sexul genetic Sex gonadal XY=brbat XX=femaie Gonada nedifereniat devine testicul sau ovar

Moment al diferenieii
Fertilizrii
6 spt. dup fertilizare

Sex fenotipic

Diferenierea organelor 8 spt dup genitale interne i fertilizare externe pubertate

Contiina apartenenei la un sex Copilrie

Identitatea sexual

Determinism sexual
Gonade indiferente i 2 seturi de ducte genitale

Diferenierea este dictat de informaia genetic a cromozomului Y

Se dezvolt 2 tipuri de ducte genitale .

Cromozomii sexuali
La nivel celular sexul este determinat de prezena cz. sexuali XY XX

Biophoto Associates/Photo Researchers

Sexul cromozomial

XY

XX

X conine sute de gene funcionale Y conine un nr. mult mai mic de gene - Gena SRY, gena trigger care determin transformarea gonadei indiferente n testicul - gene implicate n spermatogenez - gene ce controleaz caractere somatice, - o mare cantitate de ADN repetitiv.

Gene pe cromozomul Y
A fost prima oar vizualizat n 1923 La extremitile braelor se gsesc regiunile pseudoautosomale PAR1 i PAR2 (conin 63 de gene) la nivelul crora pot avea loc recombinri ntre cromozomii X i Y

Cromozomul Y i genele implicate n determinismul sexual prezint 2 regiuni omoloage cu regiuni corespunztoare de pe crz. X situate la ambele extremiti ale braelor (~5% din secv. crz. Y)
=pseudoautosomal regions (PAR) Au loc fenomene de recombinare n timpul gametogenezei Restul de 95% = MSY (male-specific region of the Y)

Cromozom Y

Inversarea sexului gonadic i fenotipic

23,X (+SRY)+23,X46 XX (+SRY) sex gonadic i fenotipic masculin dar infertili 23Y (-SRY)+ 23X 46 XY(-SRY) sex gonadic i fenotipic feminin - aceeai situaie n cazul unei mutaii punctiforme n gena SRY; - Ovare mici ce conin un nr. mic de ovocite

Obinerea oriceilor transgenici pentru gena SRY

Nucleii ovulelor fertilizate, 46,XX au fost injectate cu secvene ADN ce conineau gena Sry i apoi transferate la mame-surogat. Gena Sry s-a ncorporat aleator n cromozomi i s-a transmis subsecvent n cursul diviziunilor celulare. Dup natere, animalele au fost cariotipate pt. stabilirea sexului cromozomial i a prezenei genei SRY.

oricei genotipic de sex , (XX) dar fenotipic masculi

XY male

XX male

Rolul genei SRY 1. Initiaz cascada de evenimente ce determin transformarea gonadei bipoteniale n testicul.
a.Gena SRY este exprimat n creasta genital a embrionului chiar nainte de diferenierea testiculului. b. microinjecia genei Sry n embrionul de oarece XX determin diferenierea sexului ; c. Peptidul SRY este un factor de transcripie ce regleaz expresia altor gene implicate n diferenierea testiculului.

2. Activeaz celulele Sertoli pt a produce hormonul antimullerian ce determin regresia ductelor Mulleriene.
3. Stimuleaz celulele Leydig s secrete testosteron care va determina diferenierea ductelor Wolff n epididim, vase deferente i vezicule seminale - Conversia testosteronului n dihydrotestosteron (DHT) va determina diferenierea uretrei, prostatei i penisului.

SRY activeaz o cascad de evenimente (acioneaz ca factor de transcripie)

Determinismul sexual La momentul fertilizrii - este stabilit sexul genetic n spt 6-7 - diferenierea gonadic - dac gena SRY este prezent -difereniere testicul - absena SRY - difereniere ovar SRY - gen trigger

Receptori hormonali i mecanisme de reglare genic

Receptorii de androgeni sunt codificai de o gen situat pe cromoz.X (AR) Mutaiile n aceast gen determin o form de pseudogermofroditism masculin denumit sindromul testiculului feminizant Genetic: 46XY, cu gena SRY funcional Dei testiculele secret o cantitate normal de androgeni, celulele somatice nu pot rspunde la androgenifenotip feminin i sterilitate; organe genitale externe feminine; absena derivatelor Mulleriene.

Sindromul testiculului feminizant

Gena SRY funcional determin dezvoltarea testiculului ce va produce AMH (ce determin involuia ductelor Mulleriene) i testosteron Celulele somatice nu pot rspunde la androgeni dar pot rspunde la cantitile mici de estrogeni sintetizai de glandele suprarenale. La natere: este declarat sexul feminin. Nu prezint 1/3 sup. a vaginului , uter sau trompe (derivate Mulleriene).

Sex cromozomial XX?

- Diferenierea ovarului n absena genei SRY

- n absena testosteronului ductele Wolff duct degenereaz

- In absena AMH, ductele Mulleriene se difereniaz n uter, trompe i poriunea superioar a vaginului.

Diferenierea sexual

Anomalii fenotipice determinate de mutaii genice.

Mutatii n gena SRY Mutaii n gena hormonului Anti-Mullerian ovare, i fenotip feminin

persistena ductelor Mulleriene la sexul masc

Mutaii n gene implicate n sinteza testosteronului

Mutaiii n gena ce codific enzima 5 reductaza ce transforma T n DHT

dezvoltarea fenotipului feminin masculinizare la pubertate

organe genitale externe feminine organe genitale interne masculine

Strile de intersexualitate la nivelul caracterelor sexuale primare i secundare Hermafroditismul adevrat (intersexualitate la nivelul caract.sexuale primare) - Prezena ambelor tipuri de gonade, ambele fiind funcionale (ovotestis/ovar sau Ovar/testicul) - Mecanism genetic: prezena unui segment de pe cz.Y translocat pe X sau alt cromozom somatic sau existena unor mozaicuri gonosomale. Pseudohermafroditism - intersexualitate la nivelul caracterelor sexuale secundare; - masculin i feminin

Gena SRY
Diagnosticul hermafroditismului a. 46, XX cu fenotip masculin, un fragment de pe crz. Y este transferat pe crz X. b. femei cu formula cromozomial 46, XY prezint mutatii n aceeai regiune pe crz. Y. c. Gena SRY (sex-determining region Y) este deletat n cazurile analizate anterior;

Hermafroditism adevrat = intersexualitate la nivelul caracterelor sexuale primare (gonadic)

Formula genetic 46, XX/ 46, XY: chimera, prin fuzionarea a 2 embrioni de sex diferit mozaic celular ( XX/XY) diferenierea ambelor tipuri de gonade ( ovar/testicul) ambiguiti la nivelul organelor genitale; frecvent ginecomastie (dezvolt. gl. mamare).

Pseudohermafroditismul masculin
Formula cromozomial: 46,XY - Gonade masculine (gena SRY funcional) - Exemplu : deficitul activitii 5a-reductazei - Testiculele produc AMH - degenerarea ductelor genitale interne feminine, - Testiculele produc testosteron dezvoltarea ductelor genitale interne de tip masculin; - Nu se sintetizeaz dihidrotestosteron - nu se difereniaz organele genitale externe masculine - evoluie spre fenotipul indiferent feminin

- sunt declarai la natere de sex feminin - masculinizare dup pubertate prin hipersecreie de testosteron

Sindromul testiculului feminizant - Genetic XY i fenotip feminin - Gonade masculine - sinteza AMH degenerena ductelor de tip feminin - sinteza testosteron i DHT - mutaii n gena ce codific receptorul de androgeni situat pe cz.X - celulele nu rspund la androgeni - difereniere sexual ca i cum nu s-ar sintetiza androgeni - degenerena ductelor Wolff -spre deosebire de deficitul de 5-a reductaz - nu pot rspunde la androgeni la pubertate - dezvoltarea glandei mamare.

Pseudohermafroditismul feminin
Expunerea produsului de concepie la o surs de androgeni > spt 12 de via intrauterin malformaii minore ale

organelor genitale externe (megaclitoris) < spt 12 de via intrauterin malformaii genitale majore Surse de androgeni: Prezena la mam a unei tumori virilizante de ovar; Administrarea de androgeni n timpul sarcinii; Ft cu mutaii n genele ce codific sinteza unor enzime implicate n metabolismul androgenilor (Sdr. adreno-genital congenital)

Corpusculi Barr

46,XX

46,XY

Mecanisme de compensare genetic n cazul genelor situate pe cz. X

Inactivarea cromozomului X - n fiecare celul somatic la sexul feminin doar unul din cei 2 cromozomi X este funcional -Inactivarea este aleatorie; organismul feminin = mozaic celular n care este inactivat fie X-ul matern, fie X-ul patern - Mecanism necesar pt. a menine echilibrul genetic ntre sexe ( au de 2 ori mai multe gene corespunztoare cz. X) - Cromozomul X inactiv este vizualizat ca i corpuscul Barr; - inactivarea are loc precoce n timpul perioadei embrionare. - descoperit de Barr n 1949 n nucleii celulelor somatice ale pisicii

Form corpuscul X
Corpuscul heterocromatic cu dimensiuni de 1-1.5m vizibil n interfaz, aderent de membrana nuclear, de form triunghiular sau ovalar.
Corpuscul X

nuclei ai celulelor epiteliale din mucoasa bucal

Corpuscul Barr Caracteristic doar sexului (46,XX); nu exist la sexul (46,XY) Nr = Nr. cz. (X) 1 XXY () cu 1 corpuscul Barr XXX () cu 2 corpusculi Barr.

Barr Bodies are Inactivated X Chromosomes in Females

0
,
Sdr Turner

1
Sdr.Klinefelter

# corpusculi Barr =N-1

Nr. corpusculi Barr Formule genetice:

45,X 46, XY 47, XXX 47,XXY 48,XXXY 49, XXXXY

Factori ce influeneaz apariia corpusulilor sexuali

Activitatea metabolic a celulei ( activitate metabolic sczut frecven crescut); Activitatea mitotic a celulei (celule aflate n diviziune rapid cel embrionare - frecven redus) Tipul de celul examinat (neuronifrecven ); Vrsta celulei; Vrsta individului (n.n. frecven redus); Administrarea de hormoni i medicamente; Tehnica folosit

Inactivarea unui cromozom X, mecanism de compensare genetic

La mamifere doar nucleii celulelor somatice femele conin un corpuscul Barr (form intens condensat a cromatinei). Mary Lyon a explicat acest fenomen: a. Corpusculul Barr reprezint un cromozom X mult condensat n interfaz i relativ inactiv genetic (lionizare) ; inactivarea unui cromozom X este necesar pt. a se asigura echilibrul genetic funcional ntre cele 2 sexe. b. Inactivarea are loc precoce n timpul vieii intrauterine ( ziua 16 postfertilizare ). c. Este aleatorie (X matern/X patern)

d.

e.

Toate celulele care rezult prin diviziunea unei celule pstreaz acelai pattern de inactivare ca celula mam organismul feminin = mozaic genetic. exemple: i. Pisicile () calico au blana cu pete de culori diferite (negru/orange)

ii. Dispazia ectodermal anhidrotic este o afeciune Xlinkat n care la sexul exist zone de piele cu/ fr glande sudoripare. f. Lionizarea explic de ce prezena cromozomilor X suplimentari este relativ bine tolerat; acest lucru nu este valabil i pt. cromozomii somatici ( moartea produsului de concepie). g. Nr. corpusculi Barr = Nr crz. X -1

Mozaicism ce relev inactivarea aleatorie a unui cromozom X

Femeie heterozigot cu displazie ectodermal anhidrotic

Regiuni unde glandele sudoripare sunt absente

Petele de culoare orange i negre reflect inactivarea aleatorie a unui cromozom X;

Lyon-Hypothesis: X-inactivation celul embrionar

inactivare aleatorie precoce .

Pete de diferite culoari

Dovezi ale inactivrii funcionale a genelor de pe cz. X

Gena G6PDH, situat pe cz. X codific enzima glucozo-6 fosfat dehidrogeneza implicat n metabolismul glucozei; Nivelul enzimei G6PDH este acelai la femeia 46, XX, 47, XXX, dar i n cazul formulelor genetice 46, XY, 47, XXY, 48, XXXY.

Lionizare = mecanism de compensarea genic

Asigur expresia egal a genelor situate pe crz.X la cele 2 sexe; n fiecare celul somatic la sexul doar un singur crz.X este activ. Femeile sunt heterozigote pentru genele situate pe crz. X (mozaicism genetic)

Mecanismul compensrii genetice n cazul genelor X-linkate

Nucleii celulelor somatice ale organismelor de sex la mamifere conin un corpuscul Barr-un cromozom X mult inactivat n interfaz i inactiv genetic.

Majoritatea genelor situate pe cz. X ce va deveni heterocromatic sunt inactivate; inactivarea nu este definitiv.
Inactivarea este aleatorie i ncepe n ziua 16 post-fertilizare. Celulele fiice ale unei anumite celule pstreaz acelai patern de inactivare ca i celula-mam mozaic celular. Formarea corpusculului Barr asigur o tolerabilitate bun a cz. X suplimentari; (XXY posed 1 cz. X inactivat; XXX posed 2 cz. X inactivai, etc.).

n mecanismul inactivrii in rol esenial l are regiunea denumit X -inactivation center (Xic). Gena Xist codific un tip particular de ARN care acoper i inactiveaz cz. X.
Corpusculul Barr poate fi uor de evideniat n celulele epiteliale i PMN din sngele periferic.

Mecanismul Inactivrii cromozomului X

Xq- X-inactivation center (Xic) ~ 1 million pb. localizat gene Xist (X-inactive specific transcript) ce codific un tip special de ARN cu rol important n inactivare gena Xist este activ doar pe crz. X ce va deveni inactiv
Deleii n aceast zon determin imposibilitatea inactivrii crz.X

Alte mecanisme implicate n inactivarea funcional a cz.X: metilarea ADN-ului ( cultivarea cel. n prezena 5-azocitozinei care previne metilarea ADN reactivarea cz.X inactivat). Acetilarea histonelor

Aneuploidiile cromozomilor sexuali

Aneuploidii= aberaii cromozomiale numerice 4 tipuri de aneuploidii gonosomale: Sindromul Klinefelter: 47, XXY; 48, XXXY, 49, XXXXY Sindromul Jacobs: 47,XYY Sindromul Turner 45,XO Sindromul triplo-X: 47,XXX sau 48, XXXX

Rezultatul unor nondisjunctii:

Anomalii de segregare ale cromozomilor n timpul meiozei sau mitozei Non-disjuncii n meioza I sau IIgamei nulisomici sau disomici care, prin fertilizare cu gamei normali formeaz zigoi cu trisomie, 47 cromozomi sau cu monosomie, 45 de cromozomi.

Non-disjuncii n mitoz mozaicuri celulare de tipul 46,XX/45,X

Gamei aneuploizi

Sindromul Klinefelter (47,XXY)

cromatina X ( corpuscul Barr )

E posibil: formula genetic XY i fenotip feminin?

2 situaii:
1. Gena SRY inactivat prin mutaienu se difereniaz gonada nu se sintetizeaz androgenifenotip feminin. 2. Sindromul testiculului feminizant, exist o rezisten la aciunea androgenilor (mutaie n gena ce codific receptorul de androgeni): cariotip XY, gen SRY funcional, gonad , dar celulele somatice nu pot rspunde la androgeni fenotip feminin dar lipsa derivatelor Mulleriene (uter, trompe uterine, poriunea sup. a vaginului).

Care din urmtoarele aneuploidii sunt caracterizate de prezena corpusculilor Barr n celulele somatice:
a. b. c. d. Sdr. Turner; Sdr. Triplo X Sdr. Klinefelter; b i c

Gena situat pe cromozomul ... are un rol major n determinismul sexual. a. SRY, X b. SRY, Y c. Xist, X; d. AZF, Y

Pseudohermafroditismul masculin este definit de prezena urmtoarelor caracteristici: a. Fenotip feminin, gonade masculine, formula genetic 46, XY; b. Fenotip masculin, gonade feminine, formula genetic 46, XX c. Fenotip feminin, gonade feminine, formula genetic 46, XX; d. Fenotip masculin, gonade masculine, formula genetic 46, XX

Inactivarea unui cromozom X poate fi utilizat n cazul genelor X linkate pentru a identifica femeile care sunt:
a. Homozigote neafectate; b. Heterozigote; c. Homozigote afectate.

Care este probabilitatea ca un brbat s moteneasc cromozomul Y de la bunicul su matern?

Pisicile calico sunt n general femele (cu genotipul XBXb) dar uneori acest fenotip apare i la motani. Care este genotipul masculilor calico?

a. b. c. d.

XBXB XBY XbYY XBXbY