Produse normal sterile

Snge
Urin
Produse normal contaminate
Exudat nazo-faringian
Sput
Secreie uretral
Secreie vaginal
Materii fecale
Secreii purulente
Materiale necesare:
Ace
Soluie dezinfectant: alcool iodat 2%, eter
Pense sterile
Tampoane sterile de tifon
Garou
Flacoane sau tuburi cu medii pentru hemocultur
Masc steril
Spirtier
Marcajul recipientelor de recoltare:
Yellow top tube (Blood Culture)
Red top tube (Glass) No additive
Blue top tube (Coagulation)
Gold top tube (SST Gel Sep)
Red top tube (Plastic) With clot activator
Green top tube (Heparin)
Lavender top tube (EDTA)
Pink top tube (Blood bank tube)
Grey top tube (Glycolytic inhibitor)
6
Recipiente folosite pentru colectarea sngelui pentru hemocultur
Momentul prelevrilor:
Prelevrile trebuie fcute naintea tratamentului
antimicrobian.
Hemoculturile trebuie recoltate conform evoluiei predictive a
curbei febrile sau/i n momentul cnd bolnavul semnaleaz
apariia frisoanelor.
Numrul i volumul prelevrilor:
Trei prelevri intermitente n 24 ore cresc sensibilitatea izolrii
aproape de 100%
n bolile cu descrcare bacteriemic continu (ex. endocardite
subacute) sunt suficiente dou prelevri n 24 ore
Pentru adult sunt necesari 20-30 ml snge per prelevare.
La nou-nscui. sugari i copii mici, concentraia realizat de
bacterii n snge fiind semnificativ mai mare, sunt suficieni 1-
3 ml snge per prelevare.
8
Sepsis acut
Meningite
Osteomielite
Artrite i pielonefrite
Pneumonia bacterian acut
3 recoltari la interval de 5 minute
din 3vene diferite
Febre de origine necunoscut
Abcese oculte
Febre tifoide/ paratifoide
Bruceloza
Fungemia
3 recoltri la interval de 15-20
Minute. Daca hemocultura e
negativa dup primele 24h,
recoltarea se repet.

Numrul de prelevri de snge pentru hemocultur n
diferite afeciuni
Zone de puncie.
Electiv: venele de la plic cotului sau, la nou-
nscui i sugari, venele jugulare.
Alternativ: venele antebraului inferior sau
dorsale ale minii
Puncia arterial n endocarditele cu focar septic
pe valvulele mitrale sau aortice

Factori ce contribuie la alegerea zonei de puncie:
Scarring - Avoid areas with extensive scarring.
Bruising - Specimens collected from a hematoma area may cause
erroneous results.
IV Therapy - Do not collect specimen from a site above an IV
site. Preferably, use opposite arm.
Mastectomy - Specimens should not be taken from the side on
which a mastectomy was performed.
Cannulas, Fistulas, or Vascular Grafts - Use arm only after
consultation with the physician.
Feet - Feet should not be used unless approved by a physician.
Consult with the nurse manager/supervisor before drawing a
patient with a foot order.
Blood cultures are not to be drawn from indwelling intravenous
or intraarterial catheter unless specifically ordered by a
physician.
Blood cultures are not to be drawn by heelstick.
Zone pentru recoltarea sngelui n
vederea efecturii hemoculturii
Procedura de recoltare a sngelui
pentru hemocultur
Recoltarea cu
trusa de
hemocultur
Antisepsia trebuie s fie riguroas.
Dup localizarea venei, tegumentul se
decontamineaz cu alcool 70%, cu micri
circulare, apoi cu tinctur de iod.
Tinctura de iod trebuie agitata 1 minut nainte
de folosire.
Tinctura de iod de pe piele se terge cu alcool
70%.
Daca vena trebuie re-localizat, se repet
procedura de dezinfecie.
Procedura de prelevare i transport

Recoltarea se realizeaz la adpost de cureni de aer.
Persoana care recolteaz va purta masc dac nsmnarea
impune scoaterea dopului flacoanelor cu mediu de cultur.
Pacientul se aaz n decubitus dorsal.
Persoana care recolteaz i va decontamina minile prin
splare ngrijit cu ap i spun, urmat de uscare cu prosop
curat.
Se aplic garoul la cea 10 cm proximal de zona punciei i se
strnge pentru a aprecia, prin palpare, dimensiunea i
elasticitatea venei de puncionat.
La nevoie, venele sunt evideniate mai bine dac pacientul
strnge i relaxeaz de cteva ori pumnul.
Se antiseptizeaz degetele cu alcool iodat 2%.
Se decontamineaz larg, concentric, zona de puncie, nti prin splare cu ap i spun lichid,
apoi prin badijonare cu alcool iodat 2%. Dup cca 1 minut se badijoneaz zona, tot concentric,
cu un tampon nmuiat n eter, pentru a ndeprta iodul i a lsa tegumentul ct mai uscat.
Se antiseptizeaz membrana de cauciuc a flacoanelor cu mediu de cultur, eventual
contaminat dup scoaterea capacului protector sau capionului de celofan ori hrtie.
Se fixeaz tegumentul deasupra punctului de puncie prin tensionare pe bra cu degetele
minii libere i, cu seringa poziionat n axul venei, n unghi de cea 30 cu tegumentul i acul
cu bizoul n sus, se puncioneaz pielea i vena subiacent printr-o micare moderat de brusc.
Uzual se resimte o cedare uoar la ptrunderea acului n ven.
Se exercit o uoar presiune negativ prin retragerea pistonului. Sngele trebuie s ptrund
liber n sering sau n tubul setului de transfer. Cnd scurgerea este neregulat, se rotete uor.
Se d drumul la garou pentru a preveni formarea unui hematom.
Dup ce s-a recoltat volumul necesar de snge, se retrage acul din ven i se preseaz imediat
punctul de puncie cu tampon steril. i se continu compresia pn la hemostaza complet.
Se repartizeaz imediat sngele recoltat n 2-3 flacoane cu mediu de cultur (pentru incubare
aerob i anaerob).
Se recomand folosirea unui set de transfer, deoarece permite nsmnarea direct n
flaconul cu mediul de cultur.
Se agit blnd flaconul pentru omogenizarea sngelui n masa mediului.
Se va asigura transportul flacoanelor cu snge recoltat la laborator n cel mai scurt timp.
Cnd hemocultura nu poate fi fcut la patul bolnavului, se folosete pentru prelevarea probei
un tub cu 1 ml soluie 0,25-0,5% liquoid" ca anticoagulant i se expediaz imediat proba la
laborator pentru nsmnare.
15



Procedura de descarcare a sngelui
din sering n flaconul pentru hemocultur
16


Metoda automatizat de monitorizare a hemoculturilor
Din sngele recoltat de pe cateter se realizeaza o
cultur semi-cantitativ (Tcnica de Maki 1977).
nainte de recoltare se taie aseptic ultimii 5 cm din
cateter
Obinerea a mai mult de 15 UFC (Uniti
Formatoare de colonii) atest infecia
Pentru cultur semi-cantitiva se recolteaz snge
de pe cateterele:
Cateter central
Cateter venos profund
Cateter periferic
Cateter arterial
Cateter ombilical
Cateter de nutriie parenteral
Cateter de inim dreapta (Swan-Ganz)

18
19
20
CATETER VENOS CENTRAL
21
Recomandri:
Probele biologice se obin prin puncie-aspiraie, chiuretaj sau biopsie.
Recipientele folosite sunt din plastic, sterile, cu capac etan.
n lipsa containerelor speciale, puroiul recoltat prin puncie cu seringa este transportat la
laborator prin procedeul sering anaerob (aspirarea produsului n sering,
eliminarea bulelor de aer i obturarea acului cu un dop de cauciuc), care asigur
supravieuirea anaerobilor cel puin 30 de minute.
Izolarea bacteriilor anaerobe de pe tampoanele uzuale este imposibil. Cu precauii
speciale (e.g., utilizarea pentru transport a unui mediu stabilizator non-nutritiv, Stuart,
Amies .a., a containerelor anaerobe), tampoanele pot fi utilizate numai pentru prelevarea
puroiului din colecii foarte mici.
Cnd este necesar, irigarea leziunilor se face cu soluii saline non-inhibitorii, cum este
soluia Ringer lactozat.
Leziunile cronice sunt srace n bacterii, de aceea se impun prelevate probe cu volum
mai mare dect din leziunile acute.
n laborator, odat examenele preliminare i nsmnrile fcute, restul probei, corect
etichetat i nchis ermetic, este refrigerat pentru eventualitatea necesitii unor examene
de laborator suplimentare.


Prelevarea din arsuri i plgi :
O arie fr escar este splat cu soluie salin izoton steril pentru
ndeprtarea exsudatului stagnant sau a eventualilor ageni topici
antimicrobieni.
Prelevarea se face cu perforatorul dermic de 4 mm.
Prelevrile intraoperatorii se fac, dup debridarea i excizia esutului
devitalizat. din esut viabil de la baza plgii.
Prelevarea cantitativ cu tamponul. Se alege o arie a plgii lipsit de
esut necrotic care se pregtete ca mai sus. Se umecteaz un tampon
din vat hidrofil cu soluie Ringer lactozat, se nvrte vrful
tamponului, timp de 5 secunde, pe o arie de 1 cm
2
a plgii, suficient de
ferm pentru a determina o uoar sngerare din esutul subiacent.
Aceasta d garania prelevrii din esut viabil. Se imerseaz tamponul n
1 ml bulion tioglicolat.
Proba se expediaz la laborator n tub nchis ermetic pentru examinare
imediat.



Prelevarea din colecii purulente:
Din leziuni accesibile punciei (abcese superficiale,
colecii din cavitile seroase) puroiul trebuie aspirat cu
un ac suficient de gros (pentru a evita puncia oarb n
cazul puroiului vscos) adaptat la sering etan.
n cazul interveniilor chirurgicale, trebuie recoltate
fragmente din peretele abcesului (membrana piogen).
Prelevarea din fistule :
Se indic splarea i antiseptizarea ngrijit a
tegumentului urmat de chiuretarea ct mai profund a
traiectului fistulos cu expedierea imediat la laborator a
produsului obinut.

Indicaii:
Diagnosticul faringitelor i anginelor streptococice;
Confirmarea diagnosticului de difterie;
Diagnosticul altor angine bacteriene, fungice sau
virale;
Depistarea portajului de S. pyogenes i de C.
diphtheriae
Necesar:
tampoane de uz general,
apstor de limb,
surs de lumin,
Masc de protecie.

Tampon pentru
exudat faringian
Recoltarea
exudat ului faringian
Reprezentare schematic
Procedura:
Exudatul faringian se prelev nainte sau dup 3-4 ore de la toaleta gurii ori
ingestia de alimente, naintea administrrii de antibiotice.
Se aaz pacientul pe scaun, cu faa spre sursa de lumin, gtul n uoar
extensie dorsal.
In condiii de iluminare adecvat, se deprim baza limbii cu apstorul steril
i, n timp ce pacientul pronun vocala A, se terg cu tamponul ferm, dar nu
brutal, amigdalele i peretele posterior al faringelui, viznd n special orice
zon inflamat, ulcerat sau cu depozite purulente.
Cnd exist, falsa membran trebuie uor desprins la periferie i tamponat
mucoasa subiacent.
Att la introducerea, ct i la scoaterea tamponului din faringe se evit
atingerea de baza limbii sau de palatul moale.
Se reintroduce tamponul n tubul protector etichetat.
Pentru c prelevarea faringian declaneaz reflex de tuse, operatorul
trebuie protejat cu masc de tifon.
Transport i conservare:
Intervalul de timp n care trebuie efectuat examinarea i modalitle de
conservare a probei sunt funcie de microorganismele urmrite.

Transportul i prelucrarea probelor de exudat faringian:
Tamponul faringian trebuie examinat n interval de maximum 3 ore dup
prelevare. Dac acest interval nu poate fi respectat, se impune fie imersia i
transportul tamponului n bulion de conservare-mbogire, fie transportul
probei uscate pe dreptunghi din hrtie de filtru.
Mediul recomandat de conservare-mbogire este bulionul Todd-Hevvitt cu
azid de sodiu (1:16 000) i cristal violet (1:500 000). La primirea n laborator.
nainte de epuizarea pentru izolare, se incubeaz tamponul n acest mediu
timp de 3-5 ore la 37C.
Transportul probei de exudat faringian pe dreptunghi din hrtie de filtru:
Se impregneaz cu soluie 3% de ovalbumin sau serumalbuinin bovin dreptunghiuri de
2/4 cm din hrtie de filtru. Fiecare dreptunghi se aplic pe o foi de aluminiu 5/7 cm care
se pliaz la 1/2 cu hrtia nuntru.
Se mpacheteaz mai multe dreptunghiuri astfel condiionate n hrtie pergament.
Se sterilizeaz 15 minute la 121C n autoclav cu manta de abur pentru a asigura uscarea
perfect a hrtiei.
Se depliaz cu pensa steril un dreptunghi i descarc tamponul, imediat dup recoltare,
prin rotire pe toat faa intern a dreptunghiului.
Se las cteva minute pentru uscare.
Se pliaz i mpacheteaz dreptunghiul n foia de aluminiu.
Se expediaz proba la laborator, introdus n plic protector din polietilen.
Metoda permite izolarea streptococilor -hemolitici i dup o sptmn de la prelevare.



Exudatul nazo-faringian se prelev cu tamponul, cel mai uor per-nazal.
Se utilizeaz tampon confecionat pe aplicator de srm crom-nichel de 20 cm
lungime i 1 mm diametru. Una din extremiti este ndoit, nmuiat n colodiu i
nfurat strns cu vat hidrofil cu fibra lung pentru a forma tamponul propiu-
zis. Extremitatea liber este ndoit n bucl pentru a facilita manipularea. Se
sterilizeaz la auto-clav n tub 16/160 mm.
Se aaz pacientul pe scaun, cu faa spre sursa de lumin i ceafa sprijinit de
perete pentru imobilizarea capului.
Se introduce blnd tamponul printr-o nar, n lungul planeului nazal, pn atinge
peretele posterior al nazo-faringelui.
Se las tamponul pe loc cteva secunde, apoi se rotete-l uor pentru a-l ncrca cu
exsudat i se retrage.
Cantitatea de prelevat crete dac se retrage tamponul puin i se reinser n
aceeai poziie: prima tamponare stimuleaz secreia de mucus nazo-faringian.
La copilul mic, la care se urmresc germeni patogeni din cile respiratorii
inferioare, este precaut a stimula mai nti un acces de tuse prin prelevarea unui
tampon faringian. Exsudatul proiectat din cile respiratorii inferioare va fi reinut
n nazo-faringe, de unde poate fi prelevat prin tampon nazo-faringian sau
aspiraie nazo-faringian.
Aspiratul nazo-faringian pe cale per-nazal este indicat la sugari i se realizeaz cu
o sond Nelaton introdus printr-o nar i adaptat la o sering etan de 20 ml.
Tamponul nazal. Se terge, pe rnd, vestibulul foselor nazale cu tamponul de uz
general umectat cu soluie salin izoton steril.




Probe de calitate corespunztoare se obin la internarea n spital, de la pacieni
cooperani, prin tuse spontan, profund i supravegheat. Pacientul trebuie s
neleag diferena dintre a expectora" i a scuipa".
Periajul simplu al dinilor, cltirea energic a gurii i gargara cu ser fiziologic
sunt de dorit naintea prelevrii.
Dac proba apare constituit n principal din saliv, trebuie imediat insistat
pentru prelevarea unei noi probe corespunztoare calitativ.
n infeciile acute o prob mucopurulent cu volum de 1-2 ml este suficient.
La tuitorii cronici, pentru diagnosticul tuberculozei sau al infeciilor fungice
bronho-pulmonare, cantitatea de sput examinat trebuie s fie mai mare: toat
sputa de la expectoraia matinal sau cea expectorat n interval de 1-2 ore.
Nu se examineaz ns niciodat probe sumate din 24 ore pentru c
multiplicarea microorganismelor de contaminare falsific rezultatele.
Stimularea expectoraiei prin inhalare de aerosoli calzi cu soluie salin 10% i
glicerinat 15% ofer, de multe ori, probe citologic nesatisfactoare pentru
diagnosticul infeciilor bronho-pulmonare acute, dar utile pentru diagnosticul
tuberculozei.






Uzual, sputa se prelev ntr-un recipient steril de ctre pacient prin
expectoraie n urma unui acces de tuse.
Recipientele folosite trebuie s fie sterile, preferabil din plastic, volum
de cca 100 ml, cu gura larg i capac ermetic.
Recipientele vor fi etichetate i expediate imediat laboratorului pentru a fi
examinate n interval de cel mult o or de la prelevare.
Refrigerarea la 4 C previne multiplicarea contaminanilor, conserv unii
patogeni, dar scade pn la anulare izolarea altora cum sunt Haemophilus
influenzae sau Neisseria meningitidis.


Flacon pentru
recoltarea sputei
Prelevarea sputei n
plac Petri
Splarea sputei:
Probele de sput mucopurulent este indicat s fie decontaminate prin splare
n 3 bi succesive de soluie salin izoton. Splarea dezagreg probele
fluide, care nici nu trebuie examinate n continuare fiind de calitate
necorespunztoare.
Se toarn peste prob, n recipientul de prelevare, o cantitate din fluidul de
splare i se agit pentru separarea exsudatului bronhopulmonar de secreiile
oro-faringiene.
Se plaseaz pe fond negru dou cutii Petri cu diametrul de 8 cm i se
repartizeaz n fiecare cea 20 ml fluid de splare.
Se rstoarn proba presplat n capacul primei cutii.
Se prelev cu ansa sau, mai uor, cu dou mici baghete din lemn poriuni
purulente din prob i se agit 15-20 secunde n fiecare din urmtoarele dou
bi de splare.
Poriunile purulente din ultima baie de splare servesc pentru microscopie i
cultivare.






Fluidifierea sputei:
Fluidifierea permite omogenizarea probelor i este
indispensabil pentru sputo-cultura cantitativ.
ntr-un tub cu perle de sticl, se amestec un volum de sput,
din ultima baie de splare, cu un volum din soluia proaspt
0,5% de N-acetil-L-cistein sterilizat prin autoclavare 20
minute la 121 C i se agit uor.
Fluidifierea se produce n cteva minute.
Se evit agitarea excesiv care, prin aerare, oxideaz acetil-
cisteina i determin repolimerizarea mucinei.






Pentru examenul citobacteriologic se recomand prelevarea unei probe de
urin din jetul mijlociu.
Prelevarea se face n recipiente sterile (urocultoare).
Se va urmri prevenirea contaminarea probei cu microorganisme vehiculate prin
fire de pr, orice fel de particule din regiunea perineal, lenjerie, sau antrenate prin
jetul de urin din uretra distal, labii, pliul balano-prepuial sau de pe mini.
Momentul prelevrii: prima urin matinal sau dup cel puin 3 ore de la miciunea
anterioar.
Volumul necesar: aproximativ 20 ml pentru depistarea cantitativ a
microorganismelor condiionat patogene; cca 50 ml pentru depistarea unor patogeni
specifici (bacil Koch).
Dup toaleta organelor genitale cu ap i spun bolnavul urineaz jetul
mijlociu de urin n recipientul steril.
Metode: aspiraie prin puncie suprapubian, prelevri prin cateter vezical.
Pe recipient trebuie menionat numele pacientului, ora prelevrii,
diagnosticul, analiza solicitat, eventuale tratamente antibiotice n curs
Probele care nu pot fi examinate imediat se refrigereaz la 4 C timp de
maxim 24h probele care nu pot fi puse n lucru.
Prelevarea se realizeaz din scaunul emis spontan (n containere de plastic)
sau din rect folosind sonda Nelaton sau tampoane.
Din scaunul emis spontan, se prelev cu linguria coprocultorului
poriunile lichide, mucoase, sanguinolente, n volum de 3-5 cm
3.

Produsele se supun diagnosticului bacteriologic.
Pentru examene virusologice produsul se prelev n volum de 5-10 cm
3

materii fecale care se refrigereaz sau se pstreaz la +4 C pn n
momentul examinrii.

Sonde Nelaton
Coprocultor
Prelevarea rectal se recomand n infeciile cu Salmonella i Shigella
folosind sonda Nelaton nr. 14-16 sau tampoane adecvate (cu tij lung si
tampon bine ataat care s nu permit retenia intrarectal).
Tamponul se umecteaz n prealabil cu o soluie izoton, se penetreaz n
sfincterul anal prin rotire lent, introducndu-se aproximativ 15 cm.
n aceli mod se va proceda cu sonda Nelaton, la care se adapteaz o
sering de 10 ml cu care se fac 1-2 aspiraii.
Dup prelevare att sondele ct i tampoanele se introduc n tuburi sterile
cu dop sau eprubete cu mediu de conservare lichid pentru eluare.
Dup recoltare n minim 2 ore se nsmneaz pe medii de izolare. Dac nu
proba nu se poate nsmna imediat, se poate conserva prin refrigerare,
uscare sau conservare n medii speciale: Carry-Blair, Stuart, apa peptonata
alcalin (vibrioni), tampon Tris cu adaos de Ca
2+
(virusuri enterice).

Prelevarea secretiei uretrale trebuie efectuat dimineaa, nainte de miciune sau la
cel puin 2 ore dup.
nainte de recoltare se recomand toaleta local iar persoana care recolteaz s
poarte mnui sterile.
Prelevarea de la nivelul meatului urinar se poate realiza cu tamponul
Dac scurgerea uretral nu este spontan se poate exprima blnd prin compresia
uretrei ntre degetul mare i index.
Pentru prelevarea secreiei din uretr se folosete tamponul, chiureta
oftalmologic tocit sau ansa bacteriologic cu bucl (depistarea Chlamydia
trachomatis sau Mycoplasma). Acestea se introduc blnd intrauretral 2 cm, se rotesc
i se retrag.
n suspiciunea infeciei cu Trichomonas vaginalis dup prelevare tamponul se
imerseaz ntr-un tub cu 1 ml soluie salin izoton nclzit la 37 C pentru examen
extemporaneu.
Pentru izolarea gonococilor tamponul se va descrca imediat pe plac cu mediul
de cultura prenclzit la 37 C sau se folosete mediul de transport Amies sau Stuart.
Pentru C. trachomatis tamponul se descarc n 2 ml mediu SPG (zaharoz-fosfat-
glutamat) sau mediul 2 SP (zaharoz-tampon fosfat i ser de viel).
Pentru Mycoplasma tamponul se descarc n 2 ml bulion tripticaz soia
Orice temporizare a examenului pentru C. trachomatis i Mycoplasma impune
congelarea probelor la -70 C.
Secreia vaginal se recolteaz n cadrul unui cabinet specializat, prevzut cu mas
ginecologic, folosind valvele.
Se prelev 3 tampoane pentru diagnostic microbiologic, parazitologic i micologic.
Tamponul 1 se folosete pentru diagnostic bacteriologic (frotiu, izolare pe medii de
cultur).
Tamponul 2 folosit pentru diagnostic parazitologic (Trichomonas vaginalis), se
descarc n 0,5 ml soluie ser fiziologic steril nclzit la 37 C i se efectueaz preparate
microscopice native i colorate.
Tamponul 3 se folosete pentru diagnostic micologic (frotiu colorat albastru metilen,
nsmnare pe mediul Sabouraud).
Secreia endocervical se prelev de la nivelul colului uterin. nainte de prelevare se
terge suprafaa exocolului cu 2-3 comprese sterile pentru ndeprtarea secreiilor
stagnante.
Din endocol se prelev pe o distan de 1-2 cm 3 tampoane care sunt rotite uor
pentru a permite prelevarea produsului patologic i desprinderea celulelor de pe
suprafaa mucoasei.
Tamponul 1 se folosete pentru efectuarea unui frotiu colorat Gram care va fi
examinat microscopic.
Tamponul 2 va fi folosit pentru izolarea agentilor infecioi bacterieni.
Tamponul 3 se va folosi pentru efectuarea unui frotiu colorat Giemsa (n vederea
depistrii infectiei cu C. trachomatis) i pentru examene virusologice (reacia de IF,
izolare pe culturi de celule, ELISA).

Recoltarea apei

Recoltarea alimentelor
Implementarea standardului HACCP in
firmele de curatenie
Module 1 - Hygiene and Microbiology 41
Alimentele sunt substante organice , sursa de energie, carbonati,
nitrogen, fosfor, sulf, magneziu, potasiu, sodiu, calciu si alte elemente,
cu alte cuvinte substante necesare pentru cresterea microbiana.

Sunt degradate rapid de catre microorganisme daca nu sunt luate
masurile necesare.

Microorganismele pot fi prezente in alimente chiar de la inceput
(Lactobacillus in lape), prin contaminarea cu fecale sau prin
contaminare externa (mucegaiul Penicillium). Contaminarea poate
ramane nedetectata pana la degradarea alimentului.

Fermentatia (degradarea anaeroba) cauzata de unele microorganisme
determinate este uneori folosita la productia alimentelor, de ex.
Saccharomyces in productia berii sau Lactobacillus pentru iaurturi.

Dat fiind ca exista o multitudine de microorganisme se dezvolta pe
alimente unele sunt patogene pentru om.

Microorganismele patogene pot dauna direct organismului uman
prin infectare sau indirect prin producerea de toxine cauzatore de
imbolnavire
42
Ca un specific natural al alimentului, de ex. legumele
Prin contaminarea la sacrificare, de ex. contaminarea prin
excremente
Contaminarea prin maini, matreata, rinite
De catre personalul fabricii
De catre personalul de curatenie
Datorita conditiilor improprii de mediu
Microorganismele sunt prezente in productia alimentelor

Produse alimentare Grup Organisme
Fructe si legume
Bacterii

Fungi
Erwinia, Pseudomonas, Corybacterium

Aspergillus, Botrytis, Geotrichum, Rhizopus,
Penicillium, Cladosporium, Alternaria, Phytophthora,
Produse din carne,
pasari si
fructe de mare
Bacterii



Fungi
Acinetobacter, Aeromonas, Pseudomonas,
Micrococcus, Achromobacter, Flavobacterium,
Proteus, Salmonella, Escherichia,
Campylobacter, Listeria,
Clodosporium, Mucor, Rhizopus, Penicillium,
Geotrichum, Sporotrichum, Candida, Torula,
Rhodotorula
Lapte Bacterii
Streptococcus, Leuconostoc, Lactococcus,
Lactobacillus, Pseudomonas, Proteus
Dulciuri
Bacterii

Fungi
Clostridium, Bacillus, Flavobacterium

Saccharomyces, Torula, Penicillium

Mai multe microorganisme sun capabile sa se dezvolte pe produsele alimentare.
Acestea actioneaza fie prin alterarea alimentelor, fie ca patogeni. Cele mai multe dintre
ele sunt bacterii si fungi, dar si protozoarele si virusurile pot cauza alterarea alimentelor
sau infectii.
44
Produsele alimentare contaminate cauzeaza diverse boli din cauza
microorganismelor sau a toxinelor. In SUA se rapoteaza un numar de 4,2
milioane de cazuri de imbolnavire datorata deteriorarii bacteriene a alimentelor.
Bacterii Boli
Cazuri
anuale
Produse alimentare
Bacillus cereus FP, FI 27.000
orezul sau alte produse alimentare care contin indulcitori,
amidon ori lapte praf
Campylobacter jejuni FP 1.9 Mil produse din pasare sau lactate
Clostridium perfringens FP, FI 248.000 carnea gatita si reincalzita sau produse din carne
Escherichia coli O157:H7 FI 63.000 carne, indeosebi carnea tocata
E. Coli patogen, alte tipuri FI 110.000 carne, indeosebi carnea tocata
Listeria monocytogenes FI 2.500 carne, lactate
Salmonella spp. FI 1.34 Mil pasare, carne, lactate, oua
Staphylococcus aureus FP 185.000 carne, desert
Streptococcus spp. FI 50.000 lactate, carne
Yersinia enterolitica FI 87.000 carne de porc, lapte
Alte bacterii FP, FI 102.000
Total bacterii 4.177.500
FP= alterarea alimentelor, FI= infectii asociate alimentatiei
Produse din carne i pete:

carne macr refrigerat sau congelat ;
carne tocat i semipreparate din carne tocat;
preparate din carne srate i afumate ;
mezeluri (prospturi, salamuri semiafumate);
salamuri crude, uscate;
produse de carne gata preparate care se consum reci (piftii, aspicuri,
pateuri);
mncruri gtite calde;
mncruri gtite congelate;
semipreparate;
gelatin alimentar.
PRODUS CANTITATE
carne, organe, subproduse 100 g
carne tocat 100 g
preparate carne (salamuri,
crnai)
150 g
extract de carne supe un ambalaj
mincruri calde i reci o porie sau un ambalaj
gelatin alimentar o porie sau un ambalaj

Cantitile necesare pentru analiza microbiologic
a produselor din carne i pete
Recoltarea probelor din produse din carne i pete:

n mod obligatoriu, probele pentru examenul microbiologic vor fi
recoltate separat de oricare alte probe.
Probele din carnea proaspt vor consta din esut muscular, oase lungi,
organe sau pri de organe suspecte sau indemne.
Probele din preparate in membran se recolteaz din mijlocul
batonului, iar din preparate fr membran se recolteaz att din stratul
superficial, ct i din cel profund.
Probele trebuie transportate la laborator in maximum 6 ore de
la recoltare i la temperatura la care a fost pstrat produsul.
Probele trebuie introduse imediat n lucru, cu excepia produselor
congelate care se vor pstra pentru decongelare la temperatura +4-5C
timp de cca 12 h.
Probele de carne sau produsele se cntresc in mod steril, n
cantitatea solicitat, n raport cu specia microbian ce trebuie
determinat.
Probele se mojareaz n mojar cu nisip steril i se dilueaz cu ser
fiziologic peptonat.
Recoltarea produselor lactate:

Examenul microbiologic se adreseaz mai ales laptelui pasteurizat sau
sterilizat.
Pentru laptele crud, examenul microbiologic se execut mai ales pentru
cercetarea unor microorganisme patogene provenite de la animale
bolnave, sau se determin ncrctura iniial a laptelui supus prelucrrii.
Pentru produsele n ambalaje pn la 1 kg, proba va fi constituit din
ambalajul original.
Din ambalajele mai mari de 1 kg se recolteaz n mod aseptic n
recipiente sterile cte o prob de 250-500 ml produs.
Transportul la laborator trebuie fcut n minimum de timp, 1-2 ore, sau
n condiii de refrigerare.
Probele trebuiesc introduse n lucru imediat i dac nu este posibil se
pstreaz la 2-4C i se vor introduce n lucru astfel :
n maximum 4 ore pentru produse proaspete (lapte, iaurt, smntn,
kefir, sana, brnz de vaci etc.) ;
n maximum 24 ore pentru celelalte produse (brnzeturi, unt, lapte
praf etc).
Prelucrarea probelor de produse lactate:

Laptele i derivatele se omogenizeaz prin agitare nainte de recoltare.
Smntna, mai ales dac este ngroat, se fluidizeaz n baia de ap la 47C i
se omogenizeaz. Diluiile se execut cu soluie citrat de sodiu 2% steril.
ngheata se topete ntr-un recipient la temperatura de 47C i se omogenizeaz,
sfrmnd eventualele glazuri sau adaosuri, diluiile efectundu-se cu ser fiziologic
peptonat 1%.
Brnzeturile se tritureaz n mojar steril, se omogenizeaz, fie cu soluie de citrat
de sodiu 2%, fie cu fosfat de potasiu bibazic 2%, nclzite la 47C, diluiile
efectundu-se cu acelai diluent.
Produsele lactate sub form de pulbere (lapte praf, zar i zer praf), ca i cazeina
alimentar, se reconstituie cu citrat de sodiu 2%, tampon fosfat, fosfat de potasiu
bibazic 2%. Reconstituirea se face n vase sterile cu perle de sticl i diluantul
adecvat, la temperatura de 47C n baia de ap.
Din proba de unt se iau 10 g i se adaug 20 ml ser fiziologic peptonat 1%.
Eprubeta se menine la baia de ap (47C) pn la topirea complet i prin rotirea ei
se obine i omogenizarea amestecului. Se menine n continuare eprubeta la baie
pn la separarea complet a grsimii de plasm. Analiza se execut asupra
plasmei tiind c 2 ml lichid corespunde la 1 g unt. Diluiile se fac cu ser fiziologic
peptonat 1%, steril.
Conservele:

Se examineaz aspectul exterior:
Pentru cutii:
deformarea capacelor sau a corpului cutiei ;
prezena ruginii, gradul de rspindire i ptrundere a ruginii ;
bombarea capacelor sau a corpului cutiei ;
ermeticitate necorespunztoare (scurgerea de coninut, existena unor eventuale
perforaii) ;
defecte de sudur.
Pentru borcane:
bombarea capacului ;
ermeticitate necorespunztoare (capace care nu sunt bine fixate, scurgere de coninut).
Proba termostatrii:
La recipientele gsite corespunztoare n urma examenului exterior, se ndeprteaz
eticheta, apoi se cur i se introduc n termostat.
Incubarea se face la temperatura de 35C pentru punerea n eviden a microganismelor
mezofile, timp de 7 zile, iar pentru microorganismele termofile, incubarea se face timp de
5 zile la temperatura de 45C, n cazul recipientelor de sticl i la temperatura de 55C, n
cazul recipientelor de tabl.
n cursul incubrii, recipientele se examineaz zilnic considerndu-se
necorespunztoare i eliminandu-se cele cu bombaj biologic (persistena bombajului i la
apsarea cu degetul), precum i cele la care se observ scurgerea de coninut.
La sfritul termostatrii, recipientele se scot din termostat i se rcesc la temperatura
camerei, dup care se supun examenului microbiologic propriu-zis.
Recoltarea probelor din conserve:

n vederea deschiderii i prelevrii probei pentru analiz, se cura si se
degreseaz suprafaa exterioar a recipientelor, se agit pentru
omogenizare, se dezinfecteaz capacul cu alcool i se flambeaz.
Deschiderea recipientului se face prin: perforarea capacului cu
perforatorul metalic (n prealabil flambat) n cazul produselor cu
consisten fluid sau prin tierea unei poriuni circulare din capac cu
ajutorul dispozitivului de deschis cutii de conserve n cazul produselor cu
consisten solid.
n tot timpul acestei operaii, se ndreapt flacra unui bec de gaz spre
locul deschiderii, pentru a steriliza aerul ce poate fi absorbit n interiorul
recipientului.
Din recipientul deschis se recolteaz 4-5 g produs cu ajutorul unei
pipete cu orificiul larg, dac produsul este fluid sau semifluid, sau cu-
ajutorul unei spatule de sticl din zona central a recipientului, dac
produsul este solid.
Recoltarea probelor din ou
Recoltarea de pe coaja oulor: cu un tampon steril se terge
foarte bine suprafaa cojii oului, dup care se introduce n 10
ml ser fiziologic steril.
Recoltarea coninutului oulor: se spal bine cu peria coaja
oului, dup care se introduce n spirt medicinal timp de 30
minute. Se scoate oul, se sparge n apropierea flcrii de gaz,
cu un bisturiu steril i se golete de coninut ntr-un vas
Erlenmayer cu perle de sticl.
Dup omogenizare se fac diluii decimale, din care se fac
nsmnri pentru determinarea: numrului total al
germenilor (NTG) i a prezenei Salmonella.

Recoltarea probelor de fin i cerealelor
Singurul indicator microbiologic este numrul de spori de
Bacillus mesentericus.
Se cntrete 1 g fin care se introduce ntr-o eprubet cu 2
ml ser fiziologic steril i se omogenizeaz foarte bine. Se fac
apoi diluii decimale pn la 1 : 10 000.
Pentru distrugerea formelor vegetative se inactiveaz diluiile
prin meninerea la temperatura de 100C timp de 20 minute.
Dup inactivare se fac nsmnri prin ncorporare n geloz
nutritiv.
Prezena a mai mult de 20 spori la 100 g fin este un indiciu
asupra calitii nesatisfctoare a finii.

Recoltarea probelor de pe legume i fructe
Se utilizeaz metoda splrii unei cantiti de legume sau fructe
ntr-o cantitate cunoscut de ap steril. Se fac diluii decimale,
dup care se fac nsmnri pentru :
1. determinarea numrului total de germeni aerobi mezofili ;
2. determinarea bacteriilor din grupul coliformilor ;
3. determinarea Escherichia coli ;
4. determinarea Salmonella la 25 g produs ;
5. determinarea Stafilococcus aureus coagulazo-pozitiv;
6. determinarea drojdiilor i mucegaiurilor.

Recoltarea probelor din produse conservate prin
acidifiere
Lichidul n care stau legumele se recolteaz cu ajutorul unei pipete
sterile 50-100 ml (dac recipientul cu produse este mai mic), sau cu o
sond metalic special lung de 60-80 mm. Lichidul recoltat se trece
ntr-un borcan steril cu dop de sticl.

Cnd legumele snt tiate se recolteaz i o cantitate de aproximativ
250 g din acestea.

Transportul i pstrarea probelor se face la temperaturi joase i ntr-
un timp ct mai scurt.
Recoltarea probelor
Produsele alimentare lichide se recolteaz n ambalajele originale proprii
sau se toarn n borcane sterile de 200300 ml.

Produsele alimentare solide se recolteaz in cantiti de 2530 g ntr-o
pung de staniol flambat cu alcool, fiecare fiind atent mpachetat.

Legumele recoltate se introduc n pungi de polietilen sau de staniol
sterilizate. Pungile de polietilen se lipesc cu leucoplast. Proba recoltat
n staniol se mpacheteaz cu atenie i se eticheteaz.
Prelucrarea probelor de produse alimentare lichide (lapte,
derivate lactate, acidulate, sucuri)
Procedeul 1 : n proba de produs de 100 ml se adaug PEG cu pondere
molecular 4 000 sau 6 000 n cantiti de 5 g i NaCl n cantitate de
1,8 g; ingredientele se dizolv uor agitnd manual flaconul; dup
dizolvarea ingredientelor se las proba n repaus la temperatura de + 4
C timp de 1 or, apoi se centrifugheaz la 3 000 t/min timp de 10
minute, iar lichidul supernatant se ndeprteaz; se obine un sediment
n cantitate de aproximativ 25 g. n continuare se procedeaz ca pentru
produsele alimentare semisolide.
Procedeul 2 : proba de produs de 100 ml se adaug 0,3 g citrat de
sodiu; lichidul din balon se amestec ntr-un agitator magnetic timp de
20 minute, apoi se adaug 10 ml freon 113 cu pondere molecular 1,36
i se omogenizeaz amestecul de ingrediente la 4 0005 000 t/min timp
de 1-2 minute ; omogenatul se centrifugheaz la 3 000 t min timp de 30
minute; lichidul supernatant, cu un aspect uor opalescent, se trece
ntr-un balon steril, se purific de flora microbiana cu freon 113 sau cu
eter etilic i se conserv la -20C pn la inocularea pe gazde de
laborator.

Prelucrarea probelor de produse alimentare semisolide (brnzeturi,
smntn, semifabricate de carne i pete, pine)
Procedeul 1 : proba de produs alimentar n cantitate de 25 g se introduce ntr-
un balon steril de 250 ml se adaug 100 ml 0,1 M soluie de tampon-glicol pH
8,8. Balonul cu lichid se agit ntr-un agitator timp de 5 minute; dup
depunerea sedimentului la temperatura de 4C timp de 15 minute, lichidul
supernatant se filtreaz printr-o plnie cu vat de sticl aplicnd presiune
pozitiv sau negativ de 0,5 atmosfere ; filtrul este folosit pentru concentrarea
particulelor virale.
Procedeul 2 : proba de aliment n cantitate de 25 g se introduce ntr-un pahar
steril n vederea omogenizrii ; se adaug 25 ml 0,5 M tampon fosfat pH 8,2
sau 0,1 M soluia tampon glicol pH 8,8 (tamponul glicol se folosete pentru
produsele mai acide : smntn, brnz de vaci, pine) ; totodat, se mai adaug
n prob 25 ml freon 113 i 0,5 g clorur de magneziu uscat; proba se
omogenizeaz la 4 000-3000 t min timp de 2 minute ; omogenatul este apoi
centrifugat la 3 500 t/min timp de 30 minute; lichidul supernatant are un
aspect transparent uor opalescent; n cazul n care este tulbure se repet
tratarea cu freon 113 fr a se mai aduga tamponul i clorura de magneziu ;
sedimentul este nlturat ; lichidul supernatant se transfer ntr-un flacon de
50 ml urmnd a fi folosit pentru concentrarea particulelor virale cu PEG.

Prelucrarea probelor de produse alimentare solide (crupe, carne,
unele brnzeturi etc.)
La o prob de produs de 50 g se adaug 100 ml 0,1 M soluie de
tampon glicocol pH 8,8 sau 100 ml 0,5 M soluie tampon fosfat pH 8,2.
Balonul cu lichid i produsul se agit la agitator timp de 20 min; se las
proba s se sedimenteze la temperatura de +4C timp de 15 min, apoi
lichidul supernatant se filtreaz prin plnia cu vat de sticl, filtratul
este folosit pentru concentrare.
Dezadsorbia particulelor virale de pe suprafaa legumelor in faz
lichid: 4-5 rdcinoase, constituind o prob, se introduc ntr-un
borcan steril cu gtul larg cu capacitate de 1 litru; se toarn 100 ml
soluie tampon fosfat pH 8,2, se acoper la gur cu staniol steril i se
agit manual timp de 5 min.
Lichidul este separat i centrifugat la 3 000 t/min timp de 20 min;
sedimentul se nltur; lichidul supernatant se debaraseaz de flora
microbian cu ajutorul freonului 113 sau eterului etilic i poate fi
folosit pentru inoculare pe gazde de laborator, sau concentrat cu
ajutorul filtrrii sau sedimentrii cu sulfat de aluminiu.

Concentrarea particulelor virale din produse alimentare cu PEG
La extract se adaug PEG cu pondere molecular 4 000-6 000 pn la
obinerea concentraiei de 10% i clorur de sodiu (NaCl) pn la obinerea
soluiei de 0,5 M.
Proba este agitat manual timp de 1-2 minute pn la dizolvarea complet a
ingredientelor i meninut la +4C timp de 60 minute, centrifugat la 3 000
t/min timp de 15 minute ; lichidul supernatant se scurge atent i se nltur,
sedimentul se resuspend n 2 ml sol Eagle pH 7,6 sau n 2 ml soluie Hanks
pH 7,4.
Concentrarea particulelor virale din produse alimentare cu ajutorul filtrrii
Pregtirea instalaiei de filtrare : filtrul este introdus n fixatorul Seitz sau
ntr-un oricare alt fixator; diametrul filtrului poate fi egal cu 3-14 cm.
Filtrarea : proba lichid este trecut prin filtru cu ajutorul unei presiuni
pozitive sau negative de 0,5 atmosfere; dup ce tot lichidul a trecut prin
filtru, acesta este scos din fixator cu o pens steril i depus n plac Petri
steril.
Eluia : peste filtrul din placa Petri se toarn soluie de NaCl 1 M (eluent)
calculnd cte 2 ml de lichid peste 10 cm
2
de suprafa a filtrului (2 ml de
eluent pentru un filtru cu diametrul de 3 cm)

Recomandri generale:

Cantitatea de apa recoltat variaz ntre 500 ml pentru analize uzuale i
10 l pentru analize speciale.

Recipientele pentru colectare trebuie cltite de 3-4 ori folosind apa din
care se va recolta proba.

Se va urmri ca proba de ap s nu conin sedimente (ml, nisip etc.).
n acest sens containerul va fi imersat la o adncime mic, nu pn la
fundul apei.

Dup colectare, probele trebuie refrigerate sau inute ntr-un loc
rcoros, la umbr, pentru a preveni multiplicarea bacteriilor.

Dac este posibil, la recoltarea probelor secundare containerul trebuie
introdus n ap n poziie vertical, astfel nct s se colecteze doar apa
de la suprafa.


Materiale necesare pentru colectarea probelor de ap:

Un recipient steril de 1 litru cu dop de sticl.
Recipiente sterile de 250 ml pentru probele secundare.
Container de transport a probelor prevzut cu refrigerare.
Mnui
Sterilizarea se face dup splare i uscare. Flaconul este nchis cu dop iar
partea superioara se va nfura cu un capac de hrtie legat cu sfoara de
gtul flaconului, dup care se aplica dopul.
Sterilizarea se face folosind etuva sau autoclavul.
Flaconul se va steriliza mpreun cu suportul metalic n care este montat,
ambele fiind mpachetate n hrtie.



Recoltarea din instalaii centrale:

Proba de ap de suprafa sau subteran tratat sau dezinfectat: se recolteaz
de la robinete montate n puncte reprezentative fiecrei trepte de tratare.
Pentru recoltarea acestor probe, inclusiv a acelora din reeaua de distribuie,
se deschide robinetul i se las s curg apa 510 minute. Se nchide robinetul
i se flambeaz. Se deschide din nou robinetul i se regleaz debitul n aa fel
nct s se formeze o coloan de ap continu de maximum 1 cm diametru.
Se scoate dopul flaconului mpreun cu capacul de hrtie. Flaconul inut cu
mna de partea lui inferioar se aaz drept sub coloana de ap i se umple pn
la aproximativ 1 cm sub dop. Se astup cu dopul, se pune capacul de hrtie care
se leag din nou cu sfoar, apoi se noteaz.
Cnd nu exist posibilitatea recoltrii apei de la robinet, flaconul, mpreun cu
suportul metalic, sterilizate, se scot din hrtie, se scoate dopul mpreun cu
capacul de hrtie i inut de sfoar, se introduce vertical n bazin sau rezervor,
unde se umple pn la 1 cm sub dop, se astup cu dopul i capacul de hrtie care
se leag cu sfoara, apoi se noteaz.




Recoltarea din surse locale (fntni, izvoare):

Proba de ap de fntn se recolteaz direct din apa fntnii cu flaconul sau
prin turnare din gleata fntnii n flacon.
Pentru izolarea i identificarea enterobacteriilor patogene se recomand
recoltarea unor volume mari de ap, datorit faptului ca aceste bacterii patogene
pentru om i animale snt rspndite inegal sub influna micrilor apei de
suprafa i snt supuse aciunii rapide a factorului de diluie.

n timpul recoltrii probelor de ap, se va evita orice
posibilitate de contaminare accidental a apei.

Determinarea concentraiei germenilor coliformi din apa prin metoda filtrrii.
(a) Testul pentru coliformi totali: mediul bulion MF M-Endo. Se observ coloniile purpuriu
spre rou-nchis cu luciu metalic. (b) Testul pentru coliformi fecali: mediu bulion M-FC. Se
observ colonii albastre. (c) Testul pentru streptococi fecali: mediul geloz KF streptococcus. Se
observ colonii roz. (d) Mediul bulion HACH m-ColiBlue 24 : Suma coloniilor roii i albastre
indic coliformii totali, iar cele albastre numrul de E. coli.
limite, prezenii strep- |i, sau
modificarea ra it la 22C n
favoarea le cu constituirea unui
\ pentru apa din bazi- pentru not
pe ruri,
jerapeutice i la apele lacuri (tabelul
nr. V).
I ncadrare pentru apa
Tabel nr. Vil
Tabel nr. V
t (STAS 12 583/87)
sub 300
sub 100
sul) 20
absente
de ncadrare pentru finse n
tabelul nr. VI.
Tabel nr. V f rare
pentru apa
[ snt :
10 000
1 000
200
absent
or agricole presupune ^ calitii
apei i folo- funcie de
indicatorii fie se clasific n trei
le i plantele ; i plantele cu excep-
tinaie alimentar i Igelare,
murare, fr
ile cu nivelul freatic rile ale cror
produse u produsele vegetale
! de ncadrare pentru
Denumirea indica/oruUd Categoria
Bacterii colifo:m.^ totale, i u mr probabil /dm
3 may. 100
peste 100 . . . 100 000 peslc 100 000 . . . 10 000 000
Bacterii colitorme fecale, nu mr probabil/dm
3
absent max. 10 000
peste 10 000 . . . 1 000 000
Stafiloeoci fecali, numr pro babil/dn.
3
absent max. 10 000
peste 10 000 . . . 1 000 000
Bacterii din genul Salmo- nella
absent/1 000 cm
3
absent/300 cm
3
absent/100 cm'
2.4, ANALIZA MICROBIOLOGIC A APEI
2.4.1. Recoltarea, transportul i pstrarea probelor de ap
In vederea efecturii unei analize microbiologice, probele de ap se recolteaz i se transport cu anumite precauii.
Cantitatea de ap nece sar variaz de la 500 cm
3
, pentru analizele curente, pn la 100 m
3
pentru analize speciale.
Frecvena recoltrii probelor este condiionat de sistemul de insta laie i de mrimea colectivitii care este
aprovizionat de aceast in stalaie (STAS 1342/84).
Sterilizarea flacoanelor se face dup ce au fost splate, limpezite i. uscate. Partea superioar a flaconului nchis cu dopul
de sticl se nf oar cu un capac de hrtie care se leag cu sfoar de gtul flaconului,, dup ce ntre dop i gtul
flaconului se interpune o fie ngust de hrtie. Sterilizarea se face in etuv la cldur uscat, la 180C, timp de 1 or,
sau. n autoclav la 121C timp de 20 minute. n cazul recoltrii apei din bazine rezervoare i fntni, flaconul de sticl
pregtit ca mai sus i legat cu o sfoar se sterilizeaz mpreun cu suportul metalic n care este montat,, amndou fiind
mpachetate n hrtie.
RfcCOLTAREA APEI
Din instalaii centrale
Proba de ap de suprafa sau subteran tratat sau dezinfectat: se recolteaz de la robinete montate n puncte
reprezentative fiecrei trepte de tratare.
Pentru recoltarea acestor probe, inclusiv a acelora clin reeaua de distribuie, se deschide robinetul i se las s curg apa
510 minute. Se nchide robinetul i se flambeaz. Se deschide din nou robinetul i se regleaz debitul n aa fel nct s
se formeze o coloan de ap continu
63.
ele maximum 1 cm diametru. Se scoate dopul flaconului mpreun cu ca pacul de hrtie. Flaconul inut cu'mna de
partea lui inferioar se aaz drept sub coloana de ap i se umple pn la aproximativ 1 cm sub dop. Se astup cu dopul,
se pune capacul de hrtie care se leag din nou cu sfoar, apoi se noteaz.
Cnd nu exist posibilitatea recoltrii apei de la robinet, flaconul, mpreun cu suportul metalic, sterilizate, se scot clin
hrtie, se scoate dopul mpreun cu capacul de hrtie i inut de sfoar, se introduce n bazin sau rezervor, unde se
umple pn la 1 cm sub dop, se astup cu dopul i capacul de hrtie care se leag cu sfoara, apoi se noteaz.
n cazul cnd apa de analizat este colorat, nainte de sterilizarea flaconului pentru recoltarea probei, se introduce n
flacon 1 cm
3
soluie 0,5Vo de tiosulfat de sodiu pentru 100 cm
3
prob ele ap ce urmeaz a fi recoltat.
Din sursele locale (fntni, izvoare)
Proba de ap de fntn se recolteaz direct clin apa fntnii cu fla conul sau prin turnare din gleata fntnii n flacon.
Pentru izolarea i identificarea enterobacteriilor patogene se reco- m a rul recoltarea unor volume mari de ap, datorit
faptului ca aceste bacterii patogene pentru om i animale snt rspndite inegal sub influ ena micrilor apei de
suprafa i snt supuse aciunii rapide a factoru lui de diluie.
Pentru prelucrarea mai uoar a acestor volume mari de ap, se re comand concentrarea lor n volume mici folosindu-
se n acest scop : fie filtrarea unui volum de 100 dm
3
prin perni de tifon tip Moor (recoman dat de Institutul de
Igien i Sntate Public Bucureti), fie filtrarea unor volume cunoscute, mai mici (l5 dm
3
) prin membrane filtrante,
fie prin intermediul unui tampon de tifon tip Mocre care se scufund la locul recoltei timp de 2448 ore.
n timpul recoltrii probelor de ap, se va evita orice posibilitate de contaminare accidental a apei.
NOTAREA PROBELOR
Flacoanele cu probele de ap se prevd cu etichete pe care se n scriu datele necesare identificrii probei :
numrul probei sau lotului ;
denumirea punctului de recoltare ;
data i ora recoltrii i eventuale caracteristici ale locului de ^recoltare ;
TRANSPORTUL l PSTRAREA PROBELOR
Probele se transport la laborator, ct mai repede posibil (maximum 6 ore) dup efectuarea recoltrii. Transportul se face
n lzi compartimen tate, refrigerate sau cu ageni frigorifici. n funcie de distan, n special n anotimpul cald, probele
se transport mai uor, n geni frigorifice, astfel ca temperatura s nu depeasc +4C. Dac probele de ap recol tate
nu pot fi aduse n laborator n timp util, datorit unor distane prea mari care trebuie parcurse, se pstreaz la frigider
maximum 24 ore.
64
2.4.2. De {UR
Metod; JNSMNARE
Din pr torii ale flac steril de
2 - cutii Petri.
n caz mare de bac IO"
2
etc, r
n fie
10^cr*
zeaz conir ambele sens fiilor
Petri peratura de
EFECTUAREA
ntr-o
steril sau
mm*-i se
easi pipet plci, se tr 9 cm
3

solu zndu-se
astf rea unor dilu
1NCUBAREA
Cutiile termostat, dup 37C,
iar ceala
STABILIREA NUd
Se num i n interior peste
300 colc ia
numrarea 300
colonii (UI
* UFC '
5 Microbiologie