MicroScan

Manual de Proceduri
Paneluri uscate Gram Negativ

Recoltarea i Pregtirea Probelor

Probele trebuiesc recoltate, transportate i plasate n medii de izolare
primare n conformitate cu procedurile recomandate n Manualul de
Microbiologie Clinic1.

Utilizare
A fi utilizat cu panelurile Combo/MIC Gram Negative uscate MicroScan i
cu panelurile Combo Breakpoint Gram Negative uscate. Panelurile
MicroScan sunt realizate pentru a fi utilizate pentru determinarea
sensibilitii la agenii antimicrobieni i/sau pentru identificarea la nivel de
specie a bacililor aerobi i facultativ anaerobi Gram negativi.

Procdur
Materiale prezente n kit
Vezi eticheta ambalajului pentru coninutul specific al kit-ului.

Rezumat i Principii
Testele de sensibilitate antimicrobian sunt proceduri miniaturizate ale
testului de sensibilitate cu diluie de mediu care a fost deshidratat. Diferii
ageni antimicrobieni sunt diluai n mediul Mueller-Hinton suplimentat cu
calciu i magneziu n concentraii ce ating domeniul de interes clinic.21, 31
Panelurile Combo de tip breakpoint folosesc concentraii echivalente cu
breakpoints categorice stabilite de CLSI.21, 31 Mediile cu trimetoprim,
sulfametoxazol i trimetoprim/sulfametoxazol conin timidin fosforilaz
pentru a reduce nivelurile de timidin din mediul de cretere. Dup
inoculare i rehidratare cu o suspensie standardizat de micro-organisme i
incubare la 35C timp de minimum 16 ore, concentraia inhibitorie minim
(MIC) pentru organismele ce vor fi testate este determinat prin observarea
concentraiei antimicrobiene cea mai mic la care se manifest inhibarea
creterii. 1-6, 9-14,18,19,26-31 Pentru identificarea bacililor gram-negativi
fermentativi i non-fermentativi snt folosite teste convenionale modificate
i teste cromogenice. Identificarea se bazeaz pe detecia modificrilor de
pH, utilizrii de substrat i creterii n prezena agenilor antimicrobieni
dup 16-42 de ore de incubare la 35C. 16-17 Panelurile ce conin ceftazidim,
aztreonam, cefotaxim sau ceftriaxon 1g/ml sau cefopodoxim 1-4 g/ml (n
funcie de tipul panelului) pot fi folosite pentru screening-ul tulpinilor de
Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, sau K. pneumoniae suspectate de a
produce betalactamaz de spectru extins (ESBLs). Pentru tulpinile de
Proteus Mirabilis doar ceftazidim, cefotaxim i cefpodoxim pot fi folosite
pentru screening-ul ESBL. Panelurile coninnd ceftazidim/acid clavulanic i
cefotaxim/acid clavulanic pot fi folosite pentru a confirma prezena ESBL.
Testul de confirmare este o scdere de trei ori a diluiei pentru MIC al
organismelor suspectate, la ceftazidim sau cefotaxim n prezena unei
concentraii fixe de acid clavulanic, n comparaie cu MIC cnd sunt testate
singure.

Materiale necesare dar care nu sunt prezente n kit

Standard de turbiditate McFarland 0,5 sulfat de bariu
N,N-Dimetil-alfa-naftilamin 0,5% 30 ml (B1010-45A) sau 250 ml
(B1015-45)
Acid Sulfanilic 0,8% 30 ml (B1010-44A) sau 250 ml (B1015-44)
Ser fiziologic 0,85% autoclavat, 3 ml
Pipet de 100 l cu vrfuri sterile de unic folosin
Clorur feric 10% 30 ml (B1010-48A) sau 250 ml (B1015-48)
Hidroxid de potasiu 40% 30 ml (B1010-43A) sau 250 ml (B1015-43)
Alfa Naftol 5%, 30 ml (B1010-42A)
Cover Trays (B1010-56B)
Echipament elementar de laborator
Set de Inoculator-D (B1013-4)
Inoculum Water (ap inoculare), fl 3 ml (B1015-2)
Ap Inoculum cu PLURONIC*, 25 ml (B1015-7)
Reactiv Kovac, 30 ml (B1010-41A) sau 250 ml (B1015-41)
Formulare pentru raportare manual, MIC (B1014-92) sau
Breakpoint (B1014-47)
Dispozitiv observare microdiluie (B1010-6)
Ulei Mineral, 60 ml (B1010-40)
Ulei Mineral, 250 ml doar pentru analizoarele WalkAway SI i
WalkAway upgradat (B1010-40A)
Reactiv oxidaz
Sistem de Inoculare Prompt** (B1026-10D)
Organisme pentru controlul de calitate (Vezi seciunea controlului
de calitate din acest manual)
Formulare pentru Raportul de Calitate
Kit picurtor reactiv (B1013-12A)
RENOK - Rehidratator/Inoculator (B1018-14) sau dispozitiv
echivalent
Stripuri sigilare (B1010-51)
Turbidimetru (B1018-66)
Vortex
Hrtie pentru etichete Dade Barcode (B1018-129)
Capace tvie WalkAway (B1018-18)

Precauiuni
1. Doar pentru diagnostic in vitro.
2. Respectai o tehnic aseptic i precauiunile stabilite contra riscului
microbiologic n toate procedurile, fiind ndeosebi contieni de
faptul c panelurile inoculate conin organisme potenial patogene.
3. Acest material conine ageni patogeni i trebuie dispozat ca i
substane cu risc biologic.
4. n scopul diagnosticului i tratamentului, rezultatele acestor teste vor
trebui s fie ntotdeauna interpretate n coroborare cu anamneza
pacientului, cu tabloul clinic precum i cu alte rezultate.

* PLURONIC surfactant. Marc nregistrat a BASF Corp., Parsippany, NJ USA

**3M, St. Paul, MN USA.

Procedura de testare

Depozitare
Panelurile Gram Negative trebuie depozitate la 2-25C.

A. Pregtirea panelului
1. Luai din zona de depozitare panelurile ce vor fi folosite. Nu folosii
panelurile dac integritatea ambalajului a fost compromis (desigilat,
gurit, rupt).
2. Tiai punga i scoatei panelul. Dac a fost depozitat n frigider,
scoatei imediat panelul din pung.
3. Panelurile nu trebuie folosite dac este prezent una din condiiile:
a. Absena desicantului.
b. Godeurile panelului sunt decolorate (de ex. DCB, diferite
antibiotice).
4. Lsai panelurile s ajung la temperatura camerei nainte de a le
rehidrata. Panelurile pot fi puse unul peste altul cu condiia ca

Deteriorarea Produsului
Expunerea prelungit la condiii de depozitare altele dect cele recomandate
poate determina pierderea activitii agenilor antimicrobieni sau poate
determina hidroliza substraturilor de identificare. Nu folosii dac data
expirrii a fost depit. Pentru suport tehnic contactai reprezentantul
Siemens local.

panelul superior s fie acoperit de un capac. Toate panelurile

deschise care nu au fost folosite n aceeai zi trebuiesc aruncate.

2. Sistemul Prompt
Sistemul Prompt poate fi folosit pentru a inocula bacili gram negativi. Vezi
manualul de proceduri al sistemului de inoculare Prompt pentru a vedea
modul corect de folosire.

B. Pregtirea Inocolului
CLSI recomand controlul periodic al densitii inoculului prin efectuarea
numrrii coloniilor. Vezi documentul CLSI M7-A7, seciunea 10.3.1.3 unde
vei gsi recomandri privind numrtoarea coloniilor. Rezultatele
previzionate pentru E.coli ATCC 25992 ar trebui s fie aproximativ de 5 x 105
CFU/ml pentru concentraiile finale ale testului. Utilizatorul trebuie s fie
foarte atent la pregtirea inoculului, n special la metodele manuale care
sunt dependente de tehnic, ca de exemplu Sistemul Prompt sau pregtirea
inoculului fr ajutorul unui dispozitiv fotometric.
Not: Tehnicile Log i cea de Faz Staionar nu pot fi folosite cu
produsele MicroScan.

C. Testul Oxidazei
Realizai un test oxidaz nainte de a inocula panelurile. Notai rezultatele n
spaiul corespunztor de pe fi sau acolo unde o cere analizorul. Reactivul
oxidaz recomandat este tetrametil-p-fenilen-diamin-dihidroclorid.
D. Rehidratarea / Inocularea Panelului
Rehidratarea i inocularea snt realizate folosind sistemul RENOK cu
Inoculatoarele D. Pentru modul de utilizare vezi manualul de utilizare
RENOK. Dac se folosete un alt sistem, rehidratai cu 115 l 10 l de
Ap Inoculum (PLURONIC). Trebuie s fie atins o concentraie n godeu de
3-7x105 CFU/ml. Pentru a asigura viabilitatea i puritatea organismelor
testate, trebuie pregtit o plac de puritate prin nsmnarea inoculului pe
o plac agar potrivit care va fi incubat n condiii corespunztoare. Dac
snt prezente dou sau mai multe tipuri de colonii pe placa de puritate,
izolai din nou coloniile i apoi reluai testarea.

1. Tehnica Standardului de Turbiditate Metoda Inoculrii primare

Tehnica standardului de turbiditate este recomandat pentru inocularea
direct a tuturor bacililor gram-negativi aerobi.
a. Folosind un aplicator de lemn steril sau o ans bacteriologic,
atingei suprafaa a 4-5 colonii mari sau 5-10 colonii mici, care sunt
similare morfologic i bine izolate din culturi de 18-24 de ore pe agar
non-inhibitor.
b. Emulsificai n 3ml de Inoculum Water (ap distilat autoclavat).
Turbiditatea final trebuie s fie echivalent cu cea Standardului de
Turbiditate Sulfat de Bariu McFarland 0,5. Se poate ajune la o
turbiditate echivalent folosind Turbidimetrul MicroScan, n
domeniul 0,08 + 0,02. Fixai bine capacul.
c. Punei suspensia la Vortex timp de 2-3 secunde.
d. Pipetai 0,1ml (100 l) din suspensia standardizat n 25ml de
Inoculum Water cu PLURONIC. Fixai bine capacul. Amestecai prin
rsturnare de 8-10 ori.

E. Adugarea uleiului
1. Folosind un recipient cu picurtor, adugai cte 3 picturi de ulei
mineral n godeurile GLU, URE, H 2 S, LYS, ARG,ORN i DCB. (Aceste
godeuri sunt subliniate pe panel).
2. Mediul din godeuri trebuie s fie complet acoperite cu ulei mineral, ns
uleiul nu trebuie s ias afar din godeuri.
Not: Analizoarele WalkAway SI (i WalkAway upgradate cu sistemul
automat de adugare a uleiului) adaug automat ulei n godeurile
potrivite.

Indicatori TIpici
Godeul de control limpede; buton mare n godeul de cretere.
Butoane de cretere tipic n coloanele 1 i 2;
Coloana a 2-a are un godeu scpat n irul de godeuri de cretere,
care ar trebui ignorat.
Acest buton unic n coloana a 3-a legat de godeurile limpezi de
deasupra i dedesubt indic o contaminare de tip spot i trebuie
ignorat.
MIC n coloana 1 = 2 g/ml (godeul limpede cu cea mai mic
concentraie)
MIC n coloana 2 = > 16 g/ml (cretere n toate godeurile)
MIC n coloana 3 = 0,12 g/ml (cretere absent n toate
godeurile)
MIC n coloana 4 = 2 g/ml (efect tip trailing n godeurile 2-8; efect
de trailing tipic pentru T/S)
MIC n coloana 5 = 0,12 g/ml (efect de tip trailing n toate
godeurile, astfel c MIC este . Aceasta este tipic pentru cteva
combinaii antibiotic/organism.
MIC n coloana 6 = 0,12 g/ml.

H. Citirea Panelurilor
Panelurile pot fi citite manual folosind Dispozitivul de Vizualizare a
Microdiluiei MicroScan sau n analizorele MicroScan (analizoarele
autoSCAN-4 i WalkAway). Pentru modul de citire al panelurilor cu
MicroScan vezi manualul de operare.
1. Dup o incubare de 16-20 de ore, scoatei panelurile din incubator.
2. tergei partea de jos a panelului cu o pnz fr scame pentru a
ndeprta condensul sau corpurile strine ce ar putea fi prezente.
3. Citii panelurile doar dac godeul godeul de cretere este tulbure. Nu
citii antibiograma dac godeul de control este tulbure sau dac nu este
cretere n godeul de cretere. Creterea n godeurile de antibiogram
apare ca turbiditate, care poate lua forma unei abur alb n tot godeul,
un buton alb n centrul godeului sau o cretere granular fin n tot
godeul. O cretere insuficient sau absena creterii apare ca o uoar
tent albicioas a godeului sau ca transparena mediului.
4. Dac rezultatele sunt citite manual, nregistrai rezultatele pe fia
corespunztoare.
5. Citirea Sensibilitii la Antibiotice.

F. Banda de Sigilare
Doar pentru organismele oxidaz pozitive, lipii o band de etaneizare
peste godeurile CIT, MAL, ONPG, TAR, ACE, CET, OF/G, OF/B i DCB. Orificiul
de localizare de pe band trebuie aliniat cu orificiul DCB.
La sistemele WalkAway n locul benzii se folosete capacul.
G. Incubarea
1. Panelurile pot fi incubate n analizorul WalkAway sau ntr-un incubator
obinuit, urmnd paii de mai jos:
a. Pentru a asigura o distribuie termic egal n timpul incubrii,
punei panelurile unul peste altul n grupuri de 3-5.
b. Plasai un capac de acoperire curat peste fiecare grup de paneluri
pentru a preveni evaporarea. Capacele pot fi refolosite. Nu
decontaminai cu alcool aceste capace. Pot fi curate cu ap i
spun. Cltii bine i lsai la aer s se usuce.
c. Incubai panelurile timp de cel puin 16 ore la 35C ntr-un
incubator fr CO 2 .

acoperit cu ulei. Dac n godeul GLU nu a aprut cretere i fie SUC

sau SOR sunt pozitive, considerai-l a fi un fermentator de glucoz.
c. Non-fermentatorii de Glucoz Non-fermentatorii de glucoz pot fi
citii dup 16-24 de ore de incubare, dac oricare din urmtoarele
combinaii de teste snt pozitive: (1) ARG i OF/G sau ARG i CET (2)
LYS sau (3) ORN. Dac toate aceste reacii sunt negative i n godeul
de cretere exist cretere, notai MIC, CET i antibioticelle folosite
pentru identificare i re-incubai nc 24 de ore nainte de a face
citirea i identificarea finale.
d. Dac dup reincubare organismul pare s fie nc non-reactiv,
controlai dac organismul a crescut n carbohidrai rou-fenol (n
special dac creterea este slab sau absent n mediul de control
Mueller-Hinton). Dac nu exist cretere n carbohidraii rou-fenol,
trebuie s suspectai un organism pretenios precum o specie de
Vibrio sau Yersinia halofilice care cresc mai bine la 25C sau un
membru al grupului Pasteurella/Actinobacillus. Va trebui repetat o
coloraie Gram pentru a confirma c este Gram negativ. Dac se
suspecteaz o afeciune important clinic datorit unui Vibrio
halofilic, retestai prin emulsificarea ctorva colonii n 3ml ser
fiziologic steril 0,85% i realizai deasemenea i testri adiionale
inclusiv cretere pe sare, aa cum se recomand de software.
Turbiditatea final trebuie s fie echivalent cu Turbiditatea Standard
Sulfat de Bariu McFarland 0,5. Rehidratai panelul cu 25ml de
Inoculum Water cu PLURONIC neinoculat, folosind RENOK. Utiliznd
o pipet de transfer steril, adugai o pictur (45-50 l) de
suspensie n ser fiziologic n fiecare godeu de identificare inclusiv n
godeurile de cretere, CI 4 i Cf 8 . Incubai panelul la 35C timp de 1624 de ore.
e. nainte de a citi, adugai urmtorii reactivii:
1. Adugai 1 pictur de Hidroxid de Potasiu (KOH) 40% i apoi 1
pictur de Alfa Naftol 5% n godeul VP. Ateptai cel puin 20 de
minute pentru ca reacia VP s apar.
2. Adugai 1 pictur de Clorur Feric 10% n godeul TDA .
Modificarea de culoare va apare imediat.
3. Adugai 3 picturi de reactiv Kovac* MicroScan n godeul IND.
Modificarea de culoare va apare imediat.
* Reactivul Kovac MicroScan are o formul special realizat special pentru

a. Citii toate antibioticele i CET pe fond negru (iluminare indirect)

b. Notai rezultatele pentru Sensibilitate/Breakpoint dup cum
urmeaz:
1. Rezultatele pentru MIC
a. Dup 16-20 de ore de incubare, nregistrai MIC ca fiind cea
mai mic concentraie antimcrobian care arat inhibiie la
cretere.
b. Atunci cnd la toate concentraiile unui antibiotic apare
cretere, MIC este notat ca fiind mai mare (>) dect cea mai
mare concentraie.
c. Dac nu apare cretere la nici o concentraie a antibioticului,
MIC este notat ca fiind mai mic sau egal () cu cea mai mic
concentraie.
d. Un godeu limpede aprut ntr-un ir de godeuri cu cretere, de
ex. Cretere la 1, 2 i 8 g/ml dar absent la 4 g/ml este
denumit un godeu scpat (skipped)i trebuie ignorat.
2. Rezultate Breakpoint
a. Dup 16-20 de ore de incubare, absena creterii n zona
antibiogram este nregistrat ca S (sensibil).
b. Creterea la nivelul concentraiei mici a antibioticului ns nu la
concentraia mare este notat ca I (intermediar).
c. Creterea la ambele concentraii ale antibioticului sau n
singurul godeu al unui antibiotic cu o singur diluie este
notat ca R (rezistent ).
d. Dac exist cretere la concentraia mare a antibioticului ns
nu la concentraia mic, godeul poate fi contaminat iar testul
trebuie repetat.
3. Creterea n godeuri izolate indic contaminare. Testul trebuie
repetat.
4. Un efect tip trailing poate fi observat la unele combinaii de
organism/antibiotic ca de exemplu Proteus cu Cefuroxim (Crm) i
Imipenem (Imp), Serratia cu antibiotic beta-lactam [de ex.
Imipenem (Imp)] i Piperacilin/Tazobactam (P/T) i B.cepacia i
B.pseudomallei cu Ceftazidim (Caz) i Piperacilin (Pi).
Trailing-ul mai poate fi observat i la Trimetoprim/
Sulfametoxazol (T/S), i Trimetoprim (T) cnd se utilizeaz
sistemul de rehidratare/inoculare RENOK datorit concentraiei
inoculului. Endpoint ar trebui citit ca fiind concentraia cea mai
mic care comparat cu godeul de cretere arat:
a. Aproximativ 80% reducere a creterii (T/S, T)
b. Un buton alb cu diametrul < de 2mm, sau
c. Un buton alb care este semi-transparent.1
6. Citirea Substraturilor de Identificare
a. Citii toate substraturile de identificare pe un fundal alb, cu excepia
CET i a antibioticelor folosite pentru identificare (Cl 4 , Cf 8 , P 4 , K 4 ,
Fd 64 , To 4 ) care trebuiesc citite pe fundal negru (iluminare indirect).
b. Fermentatori de glucoz Dup 16-24 de ore de incubare, dac GLU
este de un galben intens, organismul este un fermentator de glucoz
iar cele 24 de teste de fermentatori de glucoz trebuiesc citite. Dac
reacia la glucoz este portocalie sau roie, organismul este un nonfermentator de glucoz. Unele specii non-fermentatori pot produce o
culoare aurie care trebuie considerat a fi negativ. Unele specii de
Pasteurella nu vor crete n godeul de glucoz dac acesta este

a fi folosit cu analizoarele MicroScan. Este nevoie doar de o pictur dac

panelurile se citesc manual.

4. Pentru toate controalele de calitate i non-fermentatori clinic,

adugai 1 pictur de acid sulfanilic 0,8% i apoi 1 pictur de N,
N-Dimetil-alfa-naftilamin n godeul NIT. Ateptai cel puin 5
minute nainte de citire pentru ca reacia NIT s se dezvolte.
f. Vezi seciunea Rezultate pentru a obine ajutor n interpretarea
biochimic.

Controlul de Calitate
Acceptabilitatea mediilor de identificare i a agenilor antimicrobieni ar
trebui controlat cu organisme de testare cu reacii i domenii MIC
cunoscute. Vezi Tabelul de Referin internaional pentru controlul de
calitate pentru organismele de control i rezultatele endpoint acceptabile.

Rezultate
A. Rezultate Biochimie
1. Interpretare Biochimie
Godeu

Reactiv

Pozitiv

GLU

Negativ

Doar Galben intens.

Portocaliu spre Rou
Unii non-fermentatori pot produce o culoare aurie care trebuie considerat a fi
rezultat negativ.
Galben spre Galben-Portocaliu.
Portocaliu spre Rou
Magenta spre roz
Galben, Portocaliu sau roz deschis
Precipitat negru sau Buton negru
Absena negririi
Roz spre Rou.
Glbui sau Portocaliu.

SUC, SOR, RAF, RHA, ARA, INO, ADO, MEL

URE
H2S
IND
Adugai 3 picturi (sau o pictur dac panelul
este citit vizual) de Reactiv Kovac MicroScan.
Culoarea va apare imediat.

Specii de Providencia pot produce un inel de culoare roz slab ce trebuie s fie
considerat a fi pozitiv.

Comparai LYS, ARG i ORN cu DCB. n godeul DCB trebuie s se adauge ulei pentru ca urmtoarele rezultate s fie valide. Pentru non-fermentatori, un test pozitiv
trebuie s fie semnificativ mai purpuriu dect controlul de baz. Dac controlul de baz este purpuriu, mediul bazal a fost alcalinizat iar LYS, ARG i ORN trebuie s
fie notate ca fiind negativ. Speciile de Achromobacter li Ochrobactrum anthropi au tendina de a face aceasta.
LYS
ARG
ORN
TDA
ESC
VP

Purpuriu Cenuiu
Purpuriu
Orice tent de maroniu

Adugai o pictur de Clorur Feric 10%.

Culoarea apare imediat.

Maro deschis spre negru

Rou.

Adugai o pictur de KOH 40% i apoi o

pictur de 5% Alfa Naftol. Ateptai cel puin
20 de minute pentru ca reacia s aib loc.

Bej spre incolor

Incolor

Unele specii non-fermentatoare pot produce o culoare roz-pal dup 18 ore de

incubare, rezultat care trebuie considerat a fi negativ.
Galben.
Incolor
Comparai orice godeu ONPG care pare a fi limpede cu godeul cetrimide. Dac
ONPG are o tent glbuie n comparaie cu godeul cetrimide, notai-l ca fiind
pozitiv.
Verde spre Galben
Albastru spre albastru-verzui. Orice
nuan de albastru este considerat
pozitiv.
Cretere
Absena creterii

ONPG

CIT, MAL, TAR, ACE

CET
OF/G

Fermentatori:
Galben
Non- Fermentatori
Incolor spre Cenuiu
Galben spre Portocaliu

NIT

NOT: Comparai cu controlul de baz OF

Dac baza OF este verde:
Dac baza OF este albastru sau albastru-verde:
Adugai o pictur de Acid Sulfanilic 0,8% i
apoi o pictur de N,N-Dimetil-alfa-naftilamin
0,5%. Atgeptai cel puin 5 minute pentru ca
reacia s aib loc

P 4 , K 4 , Cl 4 , Fd 64 , To 4 , Cf 8
LOC

Cretere (rezistent)
Pentru sistemele autoSCAN-4 i WalkAway doar recunoaterea panelului

Galben
Galben spre Verde
Rou

2. Principiile identificrii reaciilor

Fermentarea carbohidrailor - Glucoz, Sucroz, Sorbitol, Rafinoz,
Ramnoz, Arabinoz, Inozitol, Adonitol, Melibioz (GLU, SUC, SOR, RAF,
RHA, ARA, INO, ADO, MEL): Fermentarea unui anumit carbohidrat
determin formarea de acid i deci o scdere a pH-ului care este detectat
de un indicator de culoare (rou fenol).
Uree (URE): Enzima ureaz desface urea formnd amoniac. Rezult o
cretere a pH-ului care este detectat de indicatorul fenol rou.
Hdrogen sulfurat (H 2 S): Hidrogenul sulfurat (gaz) este produs din tiosulfatul
de sodiu i reacioneaz cu ionii ferici din mediu pentru a produce un
precipitat negru.
Indol (IND): Metabolismul triptofanului determin formarea indolului care
este detectat prin adugarea reactivului Kovac. Dac indolul este prezent,
apare o culoare roie.
Lizina, Arginina, Ornitina (LYS, ARG, ORN): Decarboxilarea acestor
aminoacizi determin formarea aminelor bazice care sunt detectate prin
indicatorul bromcresol purpuriu.
Triptofan Deaminaza (TDA): Bacteriile capabile de a deamina triptofanul
produc acid indolpiruvic care reacioneaz cu amoniu citrat feric din mediu
dup adugarea clorurii ferice pentru a produce o culoare maronie.
Hidroliz Esculin (ESC): Hidroliza esculinei este detectat de amoniul feric
citrat din mediu, care reacioneaz cu produii de hidroliz pentru a forma
un precipitat negru.
Voges-Proskauer (VP): Acetoina este produs din piruvat de sodiu i este
indicat prin formarea unei culori roii dup adugarea de hidroxid de
potasiu 40% i apoi de Alfa Naftol 5%.
Galactozidaza (ONPG): b-galactozidaza hidrolizeaz ortonitrofenil--Dgalactopiranozida care elibereaz orto-nitrofenolul de culoare galben.
Citratul, Malonatul, Acetamida, Tartratul (CIT, MAL, ACE, TAR): Utilizarea
acestor substrate ca singur surs de carbon pentru metabolism determin
o cretere a pH-ului care este detectat prin indicatorul bromtimol albastru.
Oxidare-Fermentare (OF/G): Oxidarea glucozei determin formarea
acidului iar scderea corespunztoare de pH este detectat de indicatorul
bromtimol albastru. OF/G este comparat cu OF/B (baz) pentru a identifica
producerea de acid.
Nitratul (NIT): Abilitatea organismului de a reduce nitratul la nitrit este
detectat prin adugarea de acid sulfanilic i apoi de N,N-Dimetil-alfanaftilamin, care produce o culoare roie n prezena nitritului.
Cetrimid (CET): Tolerana la cetrimid este demonstrat prin cretere n
mediu Mueller-Hinton suplimentat cu cetrimid.
Penicilin, Kanamicin, Colistin, Cefalotin, Tobramicin (P 4 , K 4 , CI 4 , Cf 8 ,
Fd 64 , To 4 ): Rezistena la concentraii specifice ale acestor ageni
antimicrobieni este demonstrat prin cretere.

Verde spre Albastru

Albastru
Incolor spre Roz-pal

Absena creterii (sensibilitate)

3. Identificarea Organismului
Programul de Cutare a Biotipului din Programul Manager de Informaie
LabPro i cel de pe site-ul Siemens Healthcare Diagnostics este folosit
pentru identificarea unor organisme testate necunoscute. Rezultatele la
cele 23-24 de teste incluse n panelurile Gram Negative Uscate snt
transformate ntr-un numr de biotip cu 8 cifre. Programul listeaz
identificarea organismului i probabilitile relative pn la un total
cumulativ de 99,9%. Dac apare un numr de biotip care este interpretat ca
fiind Very Rare Biotype (biotip foarte rar), consultai programul LabPro
[Utilities (utilitare)>System>Biotype Lookup (cutare biotip], programul de
cutare a biotipului de pe site-ul Siemens sau luai legtura cu
reprezentantul sau distribuitorul local al Siemens.
B. Interpretarea Rezultatelor MIC
Sensibilitatea la antibiotice este determinat comparnd MIC al unui
organism cu nivelul sanguin sau urinar al antibioticului. Tabelul urmtor
listeaz criteriile interpretative aa cum sunt indicate n documentul CLSI i
n Raportul Comitetului de Antibiograme al Socit Franaise de
Microbiologie (CA-SFM). Unele dintre acestea difer de breakpoints
interpretative ale productorului i care sunt listate n Manualul de
Referin pentru medici.
C. Interpretarea Rezultatelor ESBL
1. Anumii membri ai Enterobacteriaceelor, n special Klebsiella spp,
Escherichia coli, i Proteus mirabilis,prezint noi enzime Betalactamaz, care sunt capabile de a hidroliza cefalosporinele cu spectru
extins (de ex. cefotaxim, ceftriaxon, ceftizoxim i ceftazidim) i
aztreonamul. Aceste noi enzime, au adesea tipare de sensibilitate
neobinuite pentru clasa beta-lactam de antibiotice. Izolatele clinice de
Klebsiella oxytoca, K. pneumoniae, i Escherichia coli cu MIC crescut
(2 g/ml) pentru ceftazidim, aztreonam, cefotaxim, ceftriaxon sau MIC
2 sau 8 g/ml (n funcie de tipul de panel) pentru cefpodoxim,
trebuie suspectate c au beta-lactamaz cu spectru extins. Pentru
tulpinile de P.mirabilis, doar ceftazidim, cefotaxim i cefpodoxim pot fi
folosite pentru screeningul ESBL. Un izolat clinic este considerat a fi
pozitiv la testul de confirmare ESBL dac o scdere a diluiei 3 (de
exemplu o scdere cu 3 godeuri) a valorii MIC pentru antibioticul testat
mpreun cu acidul clavulanic n comparaie cu valoarea MIC a acelui
antibiotic testat singur. Chiar dac cefotaximul i ceftazidimul, cu i
fr acid clavulanic, trebuie testate, un rezultat pozitiv (de ex. o scdere
a diluiei 3 n MIC) cu orice combinaie de antibiotic este considerat a
fi pozitiv pentru confirmare de fenotip ESBL.31

Teste de Confirmare ESBL

Agent
Antimicrobian
Caz
Caz/CA
Cft
Cft/CA

Agentul Antimicrobian
Caz
Caz/CA
Cft
Cft/CA

2.
3.
4.

Secvene de Diluie ESBL Pozitive

4->16
0,25/4
8->32
0,5/4

16->16
0,25/4 - 2/4
32->32
0,5/4 - 4/4

Secvene de Diluie ESBL Negative

1
0,25/4
2
0,5/4

Secvene de Diluie ESBL

Imposibil de interpretat

1, 4 8
2/4
2, 8 16
4/4

Exemplul 1:
Confirmare Pozitiv

Exemplul 2:
Confrimare Pozitiv

Exemplul 3:
Confirmare Negativ

8
0,25/4
16
4/4

16
0,25/4
32
0,5/4

4
2/4
16
4/4

>16
>2/4
>32
>4/4
Exemplul 4:
Posibil ESBL, imposibil de intrepretat testul
de confirmare. Organismul are MIC > dect
cea mai mare diluie de pe panel
>16
>2/4
>32
>4/4

Versiuniel de LabPro 1.1 ofer de asemenea un ecran de particularizare ESBL. Acest ecran folosete MIC a antibioticelor Ceftazidim (Caz),
Aztreonam (Azt), Cefotaxim (Cft), Cefopodoxim (Cpd) i Ceftriaxon (Cax). Pentru mai multe detalii vezi manualul -Lactamaze cu Spectru Extins
(ESBL) MicrScan.
Descoperirea unor izolate care snt pozitive la screening dar negative la testul de confirmare se datoreaz prezenei altor beta-lactamaze precum
ampC.33.
Pentru toate tulpinile confirmate ca productoare de ESBL, interpretarea testului trebuie raportat ca fiind rezistente pentru toate penicilinele,
cefalosporinele i aztreonam. 21, 31, 32

Breakpoints Interpretative*

Ageni Antimicrobieni
Amikacin
Amoxicilin/Clavulanat K - Enterobacteriaceae
Amoxicilin7 - Enterobacteriacee
Ampicilin4-Enterobacteriaceae i V. cholerae
Ampicilin/Sulbactam Enterobacteriaceae i Acinetobacter spp.
Aztreonam5
Cefaclor - Enterobacteriacee
Cefazolin1-Enterobacteriaceae
Cefepim
Cefixim - Enterobacteriaceae
Cefoperazon
Cefotaxim1,5
Cefotaxim/Clavulanat K3,6
Cefotetan - Enterobacteriaceae
Cefoxitin1 -Enterobacteriaceae
Cefpodoxim5- Enterobacteriaceae
Ceftazidim1,5
Ceftazidime/Clavulanat K3,6
Ceftazidime/Clavulanat K3
Ceftriaxon1,5
Cefuroxim axetil (oral)-Enterobacteriaceae
Cefuroxim sodium (parenteral)-Enterobacteriaceae
Cefalotin-Enterobacteriaceae
Chloramfenicol 4,8- V. cholerae i ali Gram-negativi, alii dect P.
aeruginosa
Ciprofloxacin
Colistin9,10 gram negative inclusiv P.aeruginosa
Ertapenem - Enterobacteriaceae
ESBL-a3 (Cefpodoxim)
ESBL- b3 (Ceftazidim)
Fosfomicin10
Gatifloxacin-Enterobacteriaceae
Gentamicin
Imipenem
Levofloxacin
Meropenem8
Mezlocillin1
P. aeruginosa
Ali Gram-negativi
Minociclin - ali Gram-negativi, alii dect P. aeruginosa
Moxifloxacin4,10-Enterobacteriaceae
Nalidixic, acid-Enterobacteriaceae
Netilmicin1
Nitrofurantoin9-Enterobacteriaceae
Nitrofurantoin2,9-Enterobacteriaceae
Norfloxacin9
Ofloxacin
Pipedimic, acid2,9

Abrev
Ak
Aug
Amx
Am
A/S
Azt
Cfr
Cfz
Cpe
Cfe
Cfp
Cft
Cft/CA
Ctn
Cfx
Cpd
Caz
Caz/CA
Caz/CA (BSE)
Cax
Crm
Crm
Cf

Sensibil
16
8/4
8
8
8/4
8
8
8
8
1
16
8
-16
8
2
8
--8
4
8
8

Intermediar
32
16/8
16
16
16/8
16
16
16
16
2
32
16-32
-32
16
4
16
--16-32
8-16
16
16

Rezistent
64
32/16
32
32
32/16
32
32
32
32
4
64
64
-64
32
8
32
--64
32
32
32

16

32

Cp
Cl
Etp
ESa
ESb
Fos
Gat
Gm
Imp
Lvx
Mer
Mz

1
2
2
32
2
4
4
2
4

2
4
4
8
8
4
8

4
4
8
>32
8
16
16
8
16

64
16
4
1,5
16
8
32
25
4
2
8

-32-64
8
1
16
64
100
8
4
16

128
128
16
2
32
32
128
>100
16
8
32

Min
Mxf
NA
Nt
Nf
Nf
Nxn
Ofl
PpA

Piperacilin
P. aeruginosa
Ali Gram-negativi
Piperacilin/Tazobactam
P. aeruginosa
Ali Gram-negativi
4
Tetraciclin -V. cholerae i Gram-negativi, alii dect P. aeruginosa
Ticarcilin1
P. aeruginosa
Ali Gram-negativi
Ticarcilin/Clavulanat K1
P. aeruginosa
Ali Gram-negativi
Tigeciclin10 - Enterobacteriacee
Tobramicin
9
Trimetoprim - Enterobacteriaceae
4
Trimetoprim/Sulfametoxazol -V. cholerae i Gram-negativi, alii dect P.
aeruginosa

Pi
P/T
Te
Ti
Tim
Tgc
To
T
T/S

64
16

-32-64

128
128

64/4
16/4
4

-32/4-64/4
8

128/4
128/4
16

64
16

-32-64

128
128

64/2
16/2
1
4
8

-32/2-64/2
2
8
---

128/2
128/2
4
16
16

2/38

---

4/76

* Bazat pe Breakpoints Interpretative aa cum sunt ele indicate de Documentul CLSI M100-S18. Antibioticele incluse n acest panel nu s-a dovedit c snt sigure i
eficiente n tratarea infeciilor clinice pentru toate organismele testate. Pentru raportarea unor rezultate la antibiogram care s-au dovedit a fi active mpotriva
grupurilor de organisme in vitro sau n infeciile clinice, vezi CLSI M100, Tabelul 1 i 2 din insertul farmaceutic.
1. Breakpoint interpretativ al CLSI pentru acest medicament difer de breakpoint-ul productorului.
2. Bazat pe breakpoint interpretativ aa cum se arat n Raportul din 2005 al Comit de lAntibiogramme de la Socit Franaise de Microbiologie (CA-SFM). 32
3. Nu exist breackpoint pentru acest test.
4. Interpretrile pentru V.cholerae exist doar pentru antibioticele specifice pentru V.cholerae.
5. Izolatele clinice pentru Klebsiella oxytoca, K. pneumoniae i Escherichia coli cu MIC crescute (2 g/ml) de ceftazidim, aztreonam, cefotaxim, ceftriaxon sau MIC 2
sau 8 g/ml (n funcie de tipul de panel) de cefopodoxim ar trebui suspectate de a avea beta-lactamaz cu spectru extins. Pentru tulpinile de Proteus Mirabilis,
doar ceftazidim, cefotaxim i cefopodoxim pot fi folosite pentru screening ESBL21
6. Izolatele clinice de Klebsiella oxytoca, K. pneumoniae, Escherichia coli i Proteus mirabilis su scdere a diluiei mai mare de 3 ori (de ex. o scdere cu 3 godeuri) a
unei valori MIC pentru antibioticul testat cu acid clavulanic comparat cu valoarea MIC a antibioticului testat singur, se consider a fi confirmate pozitive fenotipic
ESBL pozitiv (CLSI)31.Pentru detalii suplimentare, vezi Ghidul Utilizatorului LabPro.
7. Bazat pe Liniile Directoare Mensura.33
8. Va fi raportat doar terapia sistemic.
9. Va fi raportat doar terapia urinar.
10. Bazat pe EUCAST.37

Limitele Procedurii
1. Bacterii pretenioase Haemophillus i alte bacterii pretenioase gramnegative nu vor crete n mediul Mueller-Hinton care nu a fost suplimentat
cu factori de mbogire pentru cretere.
2. Bacterii Anaerobe Panelurile antibiogram i procedurile descrise acolo
sunt potrivite doar pentru bacilii facultativi anaerobi i gram negativi aerobi.
3. Dac pentru un anumit numr de biotip sunt listate mai mult de o specie
identificat, pot fi necesare testele suplimentare menionate n Programul
de Cutare a Biotipului pentru a determina identificarea final.
4. Interpretarea acestor rezultate ale testelor necesit personal clinic
special pregtit care s foloseasc judecata, cunotinele i testele de
confirmare adiionale nainte de a accepta identificarea unui organism.
5. Numerele de Biotip nu trebuiesc folosite pentru identificarea fenotipului
tulpinilor izolate din probe variate de la acelai pacient.
6. Rezultatele obinute cu combinaiile de organism / agent antimicrobian
listate mai jos au artat MIC discrepante atunci cnd sunt comparate cu o
metod de referin de incubare lung. Dac agentul microbian este critic
pentru tratarea pacientului, ar trebui aleas o alt procedur.
7. Rezultatele testelor comparative dintre Panelurile uscate Gram Negative
MicroScan i panelurile de referin congelate CLSI nu snt n concordan
cu Domeniile de Control de Calitate CLSI pentru E. coli ATCC 25922, E. coli
35218 i P. aeruginosa ATCC 27853 cu anumite tulpini bacteriene.
Organism

Shigella spp.

Medicamente care dac

sunt critice pentru
tratament, vor trebui
testate cu o metod
alternativ
Ampicilin

2. Nu raportai un rezultat sensibil sau intermediar pentru Imipenem. Rezultatele rezistente pot
fi raportate.

8. Performana metodelor alternative a fost comparat cu rezultatele

obinute cu panelurile uscate citite manual folosind metoda inoculului cu
turbiditate standard.
9. Este posibil ca rezultatele identificrii pentru P.aeruginosa din izolatele
de la pacienii cu fibroz cistic s nu fie fiabile datorit diferenelor
reaciilor chimice ale acestor izolate i a altor P.aeruginosa. Trebuiesc
folosite metode alternative pentru identificarea P.aeruginosa suspectate la
pacienii cu fibroz cistic.
10. Rezultatele obinute la analizorului autoSCAN-4 pentru P.aeruginosa
izolat de la pacienii cu fibroz cistic au artat MIC discrepante atunci cnd
au fost comparate cu o metod de referin de incubare lung. Datorit
potenialului unei creteri minime a P.aeruginosa din izolatele pacienilor cu
fibroz cistic, rezultatele la MIC pentru aceste probe trebuie obinute prin
citirea panelurilor manual sau cu analizorul WalkAway.
11. MIC crescute la antibiotice beta-lactam (de ex. aztreonam) pot fi
observate dac panelurile sunt supra-inoculate cu microorganisme precum
Pseudomonas aeruginosa, Serratia spp., Proteus spp, Morganella
spp. sau Providencia spp. Concentraia inoculului este critic pentru aceste
antibiotice deoarece mecanismul de aciune presupune ntreruperea
sintezei peretelui celular bacterian. Utilizatorul trebuie s fie foarte atent cu
pregtirea inoculului, n special la metodele manuale care sunt dependente
de tehnic, precum sistemul Prompt sau inoculului pregtit fr ajutorul
unui dispozitiv fotometric.
12. Oficialii de sntate public ar trebui anunai despre toate izolatele
presupuse identificate ca B. anthracis, Y. pestis, B. mallei sau
B. pseudomallei sau F. tularensis. Confirmarea izolatelor de la aceste
bacterii poate necesita testare specializat disponibil doar n laboratoarele
de sntate public sau n cele de referin. Raportai doar ceftazidim,
tetraciclin, imipenem i trimetoprim-sulfametoxazol pentru
B.pseudomallei i doar gentamicin, tetraciclin, ciprofloxacin,
cloramfenicol i trimetoprim-sulfametoxazol pentru Y.pestis. 31
13. Abilitatea panelurilor Gram Negative uscate MicroScan de a detecta
rezistena la Acidul Nalidixic la tulpinile de Salmonella este necunoscut
deoarece tulpinile rezistente nu erau disponibile n momentul efecturii
testelor comparative. Trebuie folosit o metod alternativ.

Medicamente care nu
vor fi raportate1

Acinetobacter spp.

S. maltophilia
P. aeruginosa

Imipenem
Piperacilin/Tazobactam
Tigeciclin
Piperacilin/Tazobactam,
Tigeciclin, Mezlocilin,
Piperacilin, Ticarcilin,
Cefoperazone
Gatifloxacin,
Moxifloxacin, Tigeciclin

E.cloacae

Acid Nalidixic

K.pneumoniae

Acid Nalidixic

Proteus mirabilis

Tigeciclin

Nonenterobacteriacee

Tigeciclin

Rezultate Eronate
Standardul M7-A7 al CLSI afirm c rezultate periculos de eronate pot apare
atunci cnd anumite antibiotice sunt testate pentru anumite organisme.
Aceste combinaii includ:
a. Prima i a doua generaie de cefalosporine i aminoglicozide contra
speciilor de Salmonella i Shigella.

1. Atunci cnd printarea rezultatului nu este anulat de LabPro, va trebui s anulai rezultatul
manual. Pentru instruciuni consultai Manualul LabPro.

b. Antibiotice Beta-lactam pentru Y.pestis

Sistemul LabPro va raporta doar MIC nu i interpretarea, atunci cnd vor
apare combinaiile de antibiotic / organism listate mai sus.

Screening ESBL
Panelurile MicroScan Uscate Gram-Negative au fost evaluate ca test de
screening pentru producia de ESBL cu izolate clinice de K. oxytoca, K.
pneumoniae, Proteus mirabilis i Escherichia coli. n evaluarea K. oxytoca, K.
pneumoniae i Escherichia coli, populaia bacterian a fost alctuit din 141
de tulpini. Sensibilitatea a fost calculat cu 80 de tulpini ESBL pozitive n
timp ce specificitatea a fost calculat cu 61 de tulpini ESBL negative inclusiv
20 cu ampC beta-lactamaz. Tulpinile cu ampC beta-lactamaze pot avea
MIC crescute la cele 5 medicamente indicatoare i nu pot fi deosebite de
tulpinile ESBL cu antibioticele de screening ESBL fr confirmare. n
evaluarea P.mirabilis, populaia bacterian a fost alctuit din 35 de tulpini.
Sensibilitatea a fost calculat cu 13 tulpini ESBL pozitive n timp ce
specificitatea a fost calculat cu 22 de tulpini ESBL negative. Pentru tulpinile
de P.mirabilis, doar ceftazidim, cefotaxim i cefpodoxim pot fi folosite
pentru screening ESBL. Urmtorul tabel prezint rezultatele pentru
sensibilitate i specificitate n funcie de organism i breakpoint la
cefpodoxim. Performana specific panelului va varia, n funcie de
antibiotice i concentraiile incluse n panel.

Valori Previzionate
Pentru valorile predicionate, vezi tabelul procentual din Manualul de
Microbiologie.
Caracteristicile Performanei
Performana Panelurilor Uscate MicroScan a fost stabilit prin evaluri
desfurate n cteva laboratoare clinice. Antibioticele au fost testate pe un
panel uscat MicroScan folosind metoda turbidimetric de realizare a
inoculului iar citirea a fost manual. Aceste rezultate au fost comparate cu
un sistem de referin MIC cu microdiluie.
Reproductibilitate
n mai multe clinici au fost realizate studii de reproductibilitate, care s
confirme o performan acceptabil pentru metodele descrise n Manualul
de Proceduri.

Screening ESBL Performana Panelului cu toi Agenii Antimicrobieni pentru Screening ESBL inclusiv Breakpoints Cefpodoxim de 2 sau 8 g/ml
(M100-S17)
Breakpoint Cefpodoxim (g/ml)
2
8

Organism(e)
1

E. coli, Klebsiella spp.

P. mirabilis2
E. coli, Klebsiella spp.1
P. mirabilis2

Sensibilitate ESBL Tulpini Pozitive

Nr. (%)
80/80 (100)
12/13 (92,3)
80/80 (100)
12/13 (92,3)

Specificitate ESBL Tulpini Negative

Nr. (%)
40/61 (65,6)
22/22 (100)
41/61 (67,2)
22/22 (100)

1. Include 80 tulpini ESBL pozitive, 41 tulpini ESBL negative i 20 tulpini productoare de ampC. Datele include i screening cu Caz, Azt, Cax i Cft folosind un
breakpoint de 2 g/ml.
2. Include 13 tulpini ESBL pozitive i 22 tulpini ESBL negative. Datele includ i screening cu Caz i Cft folosind un breakpoint de 2 g/ml.

Confirmare ESBL
Panelurile Microscan Gram Negative uscate au fost evaluate cu diluii de
cefotaxim (2, 16 g/ml), cefotaxim/acid clavulanic (0,5/4, 4/4 g/ml),
ceftazidim (1, 8 g/ml) i ceftazidim/ acid clavulanic (0,25/4, 2/4 g/ml) ca i
test de confirmare pentru producia de ESBL cu E. coli, K. oxytoca, K.
pneumoniae i P. mirabilis. Sensiblitatea i Specificitatea au fost evaluate
comparnd MIC a panelurilor MicroScan cu rezultate caracterizate molecular
ca metod de referin. Populaia bacterian a fost alctuit din 95 de
tulpini evaluate ntr-un centru extern de validare. Sensibilitatea a fost
calculat cu 42 de tulpini ESBL pozitive i a demonstrat 93% echivalen cu
rezultatele caracterizrii moleculare. Specificitatea a fost calculat cu 53 de
tulpini ESBL negative i a demonstrat 96% echivalen cu rezultatele
caracterizrii moleculare. Documentul CLSI M100-S17 afirm c testarea de
confirmare ESBL necesit utilizarea att a cefotaximului ct i a ceftazidimului, singure sau n combinaie cu acidul clavulanic.

9. Gavan, T. L., N. W. McFadden, Jr., and E. L. Cheatle. 1971. Antimicrobial

Susceptibility Testing. Am. Soc. Clin. Path. Comm. on Cont. Ed., Chicago,
IL.
10. Gavan, T. L., and M. A. Town. 1969. Microdilution method for
antibiotic susceptibility testing. Bacteriol. Proc. 73.
11. Gavan, T. L., and M. A. Town. 1970. A microdilution method for
antibiotic susceptibility testing. Amer. J. Clin. Path. 53:880.
12. Gavan, T. L., and D. A. Butler. 1974. An automated microdilution
method for antimicrobial susceptibility testing p. 88. In A. Balows (ed)
Current Techniques for Antimicrobial Susceptibility Testing. C. C.
Thomas, Springfield, IL.
13. Gerlach, E. H. 1974. Microdilution I: A comparative study, p. 63. In A.
Balows (ed) Current Techniques for Antibiotic Susceptibility Testing. C.
C. Thomas, Springfield, IL.
14. Gerlach, E. H., R. J. Taylor, and B. Bauman. 1969. The comparison of a
manual and an automated method of routinely performed serial
dilution antibiotic sensitivity tests in a large hospital. Am. J. Clin. Pat
52:748.
15. Harwick, H. J., P. Weiss, and F. Fekety, Jr. 1968. Application of
microtitration techniques to bacteriostatic and bacteriocidal antibiotic
susceptibility testing. J. Lab. Clin. Med. 72:511.
16. Klastersky, J., D. Daneau, G. Swings, and D. Weerts, 1974.
Antibacterial activity in serum and urine as a therapeutic guide in
bacterial infections. J. Infect. Dis. 129:187.
17. MacFaddin, J. F. 2000. Biochemical Tests for Identification of Medical
Bacteria, 3rd ed., Williams and Wilkens, Baltimore, MD.
18. MacLowry, J. D., and H. H. Marsh. 1968. Semiautomatic
microtechnique for serial dilution antibiotic sensitivity testing in the
clinical laboratory. J. Lab. Clin. Med. 72:685.
19. Marymont, Jr., J. H., and R. M. Wentz. 1966. Serial dilution antibiotic
sensitivity testing with the microtiter system. Am. J. Clin. Path. 45:548.
20. McCabe, W. R., and G. G. Jackson. 1965. Treatment of pyelonephritis:
bacterial, drug and host factors in success or failure among 252
patients. N. Eng. J. Med. 272:1037.
21. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria
that Grow Aerobically. 2006. Approved Standard M7-A7. Clinical and
Laboratory Standards Institute, Wayne, PA.
22. Musher, S. M., J. N. Minuth, S. B. Thorsteinsson, and T. Holmes. 1975.
Effectiveness of achievable urinary concentrations of tetracyclines

Bibliografie
1. Murray, P.R., E.J. Baron, J.H. Jorgensen, M.L.. Landry, and M.A. Pfaller
(eds), 2007. Manual of Clinical Microbiology, 9th ed. American Society
for Microbiology, Washington D.C.
2. Barry, A. L. 1976. The Antimicrobic Susceptibility Test, Principles and
Practices. Lea and Febiger, Philadelphia, PA. p. 26.
3. Barry, A. L., F. Garcia, and L. D. Thrupp, 1970. An improved single disc
method for testing the antibiotic susceptibility of rapidly growing
pathogens. Am. J. Clin. Path. 53:149.
4. Barry, A. L., and L. J. Effinger. 1974. Evaluation of a semi-automated
system for preparing microdilutions for antibiotic susceptibility testing.
Abst. Annu. Meet. Am. Soc. Micro. #109.
5. Barry, A. L., R. N. Jones, and T. L. Gavan. 1978. Evaluation of the MicroMedia System for quantitative antimicrobic susceptibility testing: a
collaborative study. Antimicrob. Agents Chemother. 13:61.
6. Chitwood, L. A. 1969. Tube dilution antimicrobial susceptibility testing:
efficacy of a microtechnique applicable to diagnostic laboratories. Appl.
Microbiol. 17:707.
7. Ericcson, H. M., and J. C. Sherris. 1971. Antibiotic sensitivity testing:
Report of an international collaborative study. Acta Path. Microbiol.
Scand., Suppl. 217:1.
8. Fuchs, P. C., R. N. Jones, and H. M. Sommers. 1976. A Manual on the
Replicator Method for Bacterial Speciation and Biotyping. ASCP
Workshop, Chicago, IL.

against tetracycline-resistant pathogenic bacteria. J. Infect. Dis.

131:S40.
23. Stamey, T. A., W. R. Fair, M. M. Timothy, M. A. Miller, G. Mihara, and
Y. C. Lowery. 1974. Serum versus urinary antimicrobial concentrations
in cure of urinary tract infections. N. Engl. J. Med. 291:1159.
24 Stamey, T. A., D. E. Govan, and J. M. Palmer. 1976. The localization and
treatment of urinary tract infections: the role of bacterial urine levels as
opposed to serum levels. Medicine. 44:1.
25. Swartzberg, J. E. 1987. Antimicrobic Therapy Guide. 4th ed.,
MicroScan, West Sacramento, CA.
26. Tilton, R. C., and L. Newberg. 1974. Standardization of the
microdilution susceptibility test, p. 77. In A. Balows (ed.) Current
Techniques for Antimicrobial Susceptibility Testing. C. C. Thomas,
Springfield, IL.
27. Tilton, R. C., L. Lieberman, and E. H. Gerlach. 1973. Microdilution
antibiotic susceptibility test: examination of certain variables. Appl.
Microbiol. 26:5, 658.
28. Turck, M., R. Lindemeyer, and R. Petersdorf. 1963. Comparison of
single-disc and tubedilution techniques in determining antibiotic
sensitivities of gram negative pathogens. Ann Int. Med. 58:56.
29. Washington, J. A., E. Warren, and A. G. Karlson. 1973. Stability of
barium sulfate turbidity standards. Appl. Microbiol. 24:6, 1013.
30. World Health Organization. Standardization of methods for
conducting microbic sensitivity tests. Second Report of the Expert
Committee on Antibiotics. Technical Report Series #210, p. 1. Geneva,
1961.
31. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. 2007.
CLSI Document M100-S17. National Committee for Clinical Laboratory
Standards, Wayne, PA.
32. Comit De LAntibiogramme De La Socit Franaise De
Microbiologie. Communiqu 2008 (Edition de Janvier 2008). Socit
Franaise de Microbiologie, Paris.
33. Mesa Espaola de Normalizacin de la Sensibilldad y Resistencia a los
Antimicroblanos (MENSURA). 2001. Recomendaciones del Grupo
MENSURA para la seleccin de antimicrobianos en el estudio de la
sensibilidad y criterios para la interpretacin de antibiograma. An Clin
2001;26(4):109-126.
34. Mesa Espaola de Normalizacin de la Sensibilldad y Resistencia a los
Antimicroblanos (MENSURA). 2001. Recomendaciones del Grupo
MENSURA para la seleccin de antimicrobianos en el estudio de la
sensibilidad y criterios para la interpretacin de antibiograma. Rev Esp
Quimioter. 2000 Mar;13(1):73-86.
35. Thomson, K.S. 2001. Controversies about Extended- Spectrum and
AmpC Beta-Lactamases. Emerg. Infect. Dis. 7: 1-4.
36. NCCLS. 1998. NCCLS ESBL Working Group, As reflected in the revised
and distributed minutes of the Annual Meeting, Subcommittee on
Antimicrobial Susceptibility Testing. National Committee for Clinical
Laboratory Standards, Wayne, Penn.
37. EUCAST: European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing,
ESCMID: European Society of Clinical Microbiology and Infectious
Diseases, 2009, http://www.escmid.org/research_projects/
eucast/clinical_breakpoints/
Declaraie de Garanie
Aceste produse snt garantate s se comporte aa cun este descris pe
etichet i n literatura MicroScan atunci cnd snt folosite n conformitate
cu aceste instruciuni.
NU EXIST ALTE GARANII CARE S SE EXTIND DINCOLO DE ACEAST
GARANIE EXPRES IAR SIEMENS RESPINGE ORICE GARANIE PRESUPUS
DE VNZARE SAU POTRIVIRE PENTRU UN ANUMIT SCOP. Singura obligaie
asumat de Siemens i reparaia exclusiv fa de cumprtor pentru
nclcarea acestei garanii va fi, conform opiunii Siemens s repare sau s
nlocuiasc produsele. n nici un caz Siemens nu va fi responsabil pentru o
pagub de proximitate, incidental sau consecvent legat de produse.

Riscuri i Siguran
Cod
Catalog
B1010-45A
B1015-45

Denumire Reactiv
MicroScan 0.5% N,NDimetilalfanaftilamin

Abrev.
Pericol
C

Identifica
re Pericol
Coroziv

B1010-44A
B1015-44

MicroScan 0.8% Acid Sulfanilic

Coroziv

B1010-48A
B1015-48
B1010-43A
B1015-43

MicroScan 10% Clorur Feric

Xi

Irritant

MicroScan 40% Hidroxid de Potasiu

Coroziv

B1010-42
B1010-42A

MicroScan Alfa Naftol

Xn

Periculos

B1010-41A
B1015-41

MicroScan Reactiv Kovac's

Xn

Periculos

Xn, XI

R20
R21/22
R22
R34
R35
R36
R36/37/38
R37/38
R41
S22
S26
S37/39
S36/37/39
S45
S46

Cod Risc i
Siguran
R34,
S26,
S36/37/39
S45
R34,
S26,
S36/37/39,
S45
R36 S46
R22,
R35,
S26,
S36/37/39,
S45
R21/22
R41
R37/38
S22
S26
S37/39
R20
R36/37/38

Coninut
Acid acetic

Acid acetic

Hidroxid de
Potasiu

1-Naftol

3-metilbutan-1-ol

Periculos la inhalare
Periculos n contact cu tegumentul sau dac este nghiit.
Periculos dac este nghiit
Provoac arsuri
Provoac arsuri severe
Irit ochii
Irit ochii, arborele respirator i tegumentul
Irit arborele respirator i tegumentul
Risc rnire sever a ochilor
Nu inhala praful
n cazul contactului cu ochii, cltii cu ap i consultai un medic
Purtai mmui i protecie de ochi/fa
Purtai haine de protecie, mnui i protecie de ochi/ fa
n caz de accident sau dac nu v simii bine, consultai urgent un medic
Dac nghiii, consultai un medic; artai flaconul i eticheta

Fiele cu date de siguran (MSDS) pot fi gsite pe site-ul: www.siemens.com/diagnostics.

Interpretare Simboluri
Data Expirrii n formatul an-lun-zi
Cod Lot
Numr de Catalog
Productor
Reprezentant autorizat n Comunitatea European
Conine Suficient pentru n teste
Dispozitiv Medical de Diagnostic In Vitro
Limite de Temperatur pentru Depozitare
Consultai Instruciunile de Utilizare
Coninut
Prescurtare ageni antimicrobieni
Prescurtare substraturi de identificare
Marca CE
Volum de reconstituire
MicroScan, RENOK, WalkAway, i autoSCAN are snt mrci nregistrate ale Siemens Healthcare Diagnostics.

Siemens Healthcare Diagnostics Inc.

West Sacramento, CA 95691 USA
www.siemens.com/diagnostics

Siemens Healthcare Diagnostics Ltd.

Sir William Siemens Sq.
Frimley, Camberley, UK GU16 8QD

2009 Siemens Healthcare Diagnostics Inc.

10