UNIVERSITATEA DE TIINE AGRONOMICE I MEDICIN

VETERINAR
FACULTATEA DE BIOTEHNOLOGII

Carbonic Anhidraza
Coordonator,Doctor,
Asistent
Simion Vasilica
6201

Studenta,
abrea Ioana
Grupa

INTRODUCERE
Enzimele sunt macromolecule de natur
proteic,ce au rol de catalizatori n
reaciile din organismele vii.
Anhidraza carbonica este enzima care
activeaza deshidratarea reversibil a
anhidridei carbonice. Este prezent ntrun numr mare de esuturi i n globulele
roii. Aceast enzim a fost identificat
n anul 1993 n globulele roii ale vacilor.
De atunci, a fost gasit n cantitate mare
n esutul mamar,plante,alge i bacterii.

CAPITOLUL I
Carbonic anhidraza(E.C. 4.2.1.1.) denumit si carbonat
dehidrataza, cu denumirea sistematica carbonat hidro-laza.
Centrul su catalitic conine Zn 2+. Face parte din clasa liaze
care sunt enzime ce catalizeaz reacii de scindare nehidrolitic
a unor legturi chimice din molecula substratului.
Sunt cunoscute apte izoenzime ale anhidrazei carbonice(AC)
izolate din vertebrate ct i unele enzime izolate din plante sau
microorganisme, dintre care patru sunt forme citosolice (AC I, II,
III i IV); doua sunt asociate membranelor (AC IV i V; AC V este
asociat membranei mitocondriale) i AC VI este singura form
secretat (n saliv).

REACTIA DE CATALIZARE

Carbonic anhidrazele fac parte dintr-o familie de enzime care catalizeaz

reacia dintre dioxid de carbon si ap rezultnd acid carbonic.
Reacia reversibil este relativ nceat deoarece lipsete catalizatorul. De
aceea, o bautur carbogazoas nu ii pierde imediat gazul atunci cnd se
deschide sticla,dar gazul se va pierde repede atunci cnd lichidul este
introdus in gur pentru c va intra n contact cu saliva care conine carbonic
anhidraza.
O anhidraz este definit ca fiind o enzim care catalizeaz reaciile n care
se pierde o molecul de ap,aadar reacia reversibil ne arat cum acidul
carbonic pierde o molecul de ap datorit carbonic anhidrazei.

IMPORTANA
Carbonic anhidraza are un rol important n respiraie
pentru c influeneaz transportul dioxidului de carbon
n snge,dar i n secreia gastric i asupra pH-ului
intracelular.

CAPITOLUL II
Principiul metodei
Are ca punct de plecare metoda de determinare
colorimetric a modificrilor de pH. Este msurat timpul
n care pH-ul amestecului de reactani scade de la
valoarea iniial la valoarea final. Urmrirea reaciei se
face spectofotometric utiliznd indicatori de culoare
care variaz n domeniul de pH ales.

REACTIVI I SOLUII

Indicator de culoare:p-nitrofenol n concentraie de 0,2 mM

Soluie tampon:4-2-hidroxietil H 2SO4, s-a utilizat o concentraie de 20mM

Soluia stoc de anhidraza carbonic,s-au preparat soluii stoc de AC I si AC II

n concentraii de 3,44x10 -6M. Concentraiile de AC au fost verificate prin
msurarea spectofotometric la 280nm.

Soluia de CO 2 se obine prin barbotarea pn la saturare a CO 2 gaz n ap

distilat. Soluia astfel obinut este pstrat ntr-un vas nchis,sub
presiune,iar concentraia de lucru este de 15mM.

Na2SO4 n concentraie de 0,1M pentru meninerea constant a triei ionice

Soluii stoc de activatori sau inhibitori preparate n concentraii de 2x10 -2 prin

solubilizarea substanelor respective n ap distilat