SPLICING

= procesul prin care intronii unui ARN pre-mesager sunt indepartati si exonii se unesc.

Intronii = secventele necodificatoare, adica acele secvente care nu au un echivalent in

aminoacizi in proteine, fiind doar transcrise, nu si traduse
Exonii = secventele codificatoare au un echivalent in aminoacizi in proteine, sunt
transcrise si traduse

Structura genelor EK se numeste mozaicata datorita existentei exonilor si intronilor.

Splicing-ul poate avea loc in 2 moduri :
1 introni de grup I self splicing exemplu la ribozima (molecula ARN capabila sa
catalizeze diverse reactii similar actiunii enzimelor ARN catalic)
2 introni de grup II splicing cu ajutorul spliceosomului
Spliceosom = complex ribonucleoproteic (proteine + ARN) implicat in eliminarea intronilor
Format din 5 RNP (ribonucleoprotein); 1 RPN = 1 molecula ARN + 1 proteina
ARN de tip small nuclear : U1, U2, U4, U5, U6
U1 + 1 proteina = U1-snRNP
Deci spliceosomul este un complex format din : U1-snRNP, U2-snRNP, U4-snRNP, U5snRNP, U6-snRNP.
Exemplu pe ARNm :
Transcriptul ARNm are in structura 2 exoni , si intre ei 1 intron ce urmeaza a fi eliminat.
Intronii prezinta secvente ce ghideaza procesul de splicing : in capatul 5 al intronului
exista o secventa GU (GT in ADN), ce va fi recunoscuta de spliceosom si in capatul
3OH exista o secventa AG. Exista si o regiune bogata in pirimidina cu un anumit situs de
A.
Splicing-ul se desfasoara in mai multe etape :
1. U1-snRNP se atasaza la secventa GU si U2-snRNP se atasaza sa branch A si
2. induce o pliere , capatul 5 ajungand aproape de branch A
3. Se formeaza un trimer : U4-snRNP U5-snRNP U6-snRNP care determina
asamblarea intregului spliceosom
4. Odata asamblat, spliceosomul sufera o schimbare conformationala, ce permite
inceperea splicing-ului efectiv.
5. Are loc clivajul la situsul 5
6. prin transesterificare , atasarea capatul 5 la branch A, formand un intron lariat, ce
va fi degradat dupa clivajul din situsul 3OH

7. Clivajul la situsul 3 OH
8. Capul 3OH al exonului 1 se sudeaza de capatul 5OH al exonului 2 tot prin
transesterificare, formandu-se ARNm, pregatit de traducere.
9. Spliceosomul disociaza