Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Genus Staphylococcus
1. Minidefinitie
II. Incadrare taxonomica
III. Habitat
IV. Implicare in patologia umana
V. Microbiologie - principalele caractere si implicatii in patogeneza si
diagnosticul microbiologie
VI. Factori de patogenitate
VII. Patogenie
VIII. Raspunsul imun
IX. Notiuni de epidemiologie si profilaxie a infectiilor nosocomiale
X. Diagnosticul de laborator
1. Minidefinitie
Stafilococii fac parte dintre bacteriile ubiquitare (prezente peste tot În mediul
Înconjurător).
Colonizează vestibulul nazal şi mucoasele organelor cavitare cu comunicare la
exterior (colon, vagin) şi contaminează frecvent tegumentul, preferând zonele cu
umiditate ridicată (axile, perineu, plici interdigitale etc.)
2
-----------------------------------------------------------------------------------------~--------------~
,_+ ~sinusltis
bons, carbun.:::Ies---"""\.
""iI_---+---hlcmatogilnolis spread
endocar d! ti s
toxicshock syndrome
3
cauzate de tulpini producătoare de toxină dermonecrotică prezintă risc de infecţii
pulmonare necrotizante, mai ales în cazul în care dezvoltă în paralel infecţii virale
respiratorii (mai ales cu virus gripal).
Fig. 2 - Carbuncul
• Mastita: infecţie a glandei mamare; apare la 1-3% din femeile care alăptează şi
se manifestă ca un nodul eritematos, cu formarea unui abces canalicular
4
Infecţii ale plăgilor: pot apare post traumatic sau post chirurgical; se manifestă
prin edem şi eritem local, durere şi acumulare de puroi
• Bacteriemia şi endocardita: sunt dobândite în proporţie de cel puţin 50% în
mediul spitalicesc, după proceduri chirurgicale, utilizare de catetere intravenoase
care devin contaminate etc.; se asociază frecvent cu diseminare septică secundară,
de obicei la nivelul endocardului şi apariţia endocarditelor acute, infecţii severe,
cu o mortalitate de aproximativ 50%.
• Pneumonia şi empiemul pulmonar sunt întâlnite mai ales la vârstele extreme
• Osteomielita şi artrita septică: rezultat al diseminării septice secundare unor
infecţii stafilococice cu alte localizări, sau postraumatic; localizarea este diferită
la copii, unde afectează mai ales metafizele oaselor lungi şi la adulţi, unde
localizarea este mai frecventă la nivel vertebral
• Artrite septice după infiltraţii intra -articulare
5
interleukină-I, prostaglandine şi TNF-a (vezi cursuri imunologie). Aceste citokine
sunt reponsabile de manifestările clinice.
• În cazul infecţiilor nosocomiale (apărute în unităţi de îngrijire), dar mai recent şi
în cazul infecţiilor care evoluează În afara unităţilor de Îngrijire (infecţii
comunitare), sunt de temut infecţiile cu S.aureus rezistent la meticilină
(SAMRJengl. MRSA). Transmiterea se face mai ales prin contact direct, prin
intermediul purtătorilor sănătoşi de germeni (portaj nazal, prin mâini contaminate,
etc). Localizările pot fi: cutanată, respiratorie, renală, digestivă, osoasă, articulară,
generalizată etc.
Caractere morfotinctoriale:
Forma: coci rotunzi, dimensiuni: 0,5 - I urn
• Tinctorialitate: gram pozitivi
• Dispozitie: caracteristica, grupaţi în grămezi de forma ciorchinelui de strugure
(staphile, gr. = strugure); în prelevate pot exista extra, dar şi intracelular
6
Sunt nesporulaţi, pot prezenta capsulă, mai ales În cazul tulpinilor foarte virulente,
recent izolate din Iezi uni purulente şi/sau infecţii sistemice
Stafilococii sunt relativ rezistenţi la agenţi fizici, cum sunt frigul, uscăciunea,
variaţii de pH.
Sunt sensibili la dezinfectante din grupa derivaţilor halogenaţi (ex. povidon-
iodine, cloramină) şi la derivaţi de amoniu cuaternar.
Natural sensibili la majoritatea antibioticelor, cu excepţia polimixinelor (colistin)
quinolonelor de generaţia Întâi (acid nalidixic), la care prezintă rezistenţă naturală. În
ultimele decenii, mai ales În spitale s-au selectat clone rezistente la meticilină, atât de S.
aureus, cît şi de SCN. În România, tulpini le de S. aureus rezistente la Meticilină sunt
frecvent rezistente şi la alte antibiotice (polirezistenţă la antibiotice).
Unele tulpini sunt sensibile la bacteriofagi, ceea ce permite tipizarea
bacteriofagică (lizotipia), de mai mică valoare În cazul tulpinilor rezistente, care sunt
frecvent netipabile prin lizotipie sau sunt sensibile la majoritatea bacteriofagilor din setul
internaţional, ceea ce nu permite Încadrarea lor În grupe fagice distincte, pentru
d iferenţi ere. .
• S. aureus:
Factori structurali (endocelulari):
(1) proteine şi/sau mucopolizaharide de suprafaţă - promovează
colonizarea tesuturilor gazdei (ex. acidul teichoic, care se ataşează la
fibronectină; coagulaza legată care se ataşează la fibrinogen etc.) şi/sau
inhibă fagocitoza şi accesul antibioticelor (capsula)
7
(2) pigmenţi carotenoizi localizaţi la nivelul peretelui cellular-
supravieţuirea în fagocite - S aureus, pigment galben cu moleculă
polinesaturată - reduce radicalii toxici de oxigen
y;.. IgG
ml cro- P,""'~~,
capsute , . ')., .
cellwal~'
InVi!lsi ns:
hya! ur ont das e
staphylysl n
,1eukocl di n
,leukoto:1d n
<coagul ase
staphyl old nase
8
VII. Patogenie
9
r
X. Diagnosticul de laborator
10
Examenul direct
Izolarea
Pentru izolarea stafilococilor din produse normal sterile (sânge, LCR etc.) se
utilizează medii nutritive simple, însămânţate şi incubate timp de 24-48 h, la 36 ± lOC;
adaosul de sânge înlesneşte observarea caracterelor hemolitice.
În cazul prelevatelor cu floră mixtă )materii fecale, alimente contaminte etc.) se
utilizează medii selective, ca de exemplu agarul hiperclorurat tip Chapman
II
Fig. 5. Frotiu colorat C4 albastru de metilen din cultură pură coci dispuşi în grămezi
,
~@
'1."
,.
'1Si
12
Fig. 7. S. aureus Ca) şi S. epidermidis - aspectul coloniilor pe agar nutritiv simplu cu
adaos de sânge
a. b.
Fig. 7 bis - S. aureus: culturi pe agar nutritiv simplu cu adaos de sânge şi frotiu colorat
Gram
13
--------------------------------------------------------------,
- caracterele culturale
• colonii pigmentate galben-auriu la S. aureus, spre deosebire de S.
epidermidis şi S. saprophyticus care prezintă pigment alb
S. aureus produce pe agar sânge mai frecvent o hemoliză clară sau
o hemoliză incompletă
- producerea de coagulază liberă de către S. aureus - enzimă care are proprietatea de
a coagula plasma oxalatată prin activarea protrombinei (Fig. 10). Restul
stafilococilor sunt denumiţi SCN
14
- S. aureus produce dezoxiribonuclează termostabilă, care rămâne activă pnn
fierberea supernatantului de cultură (Fig. 11 şi 12).
- prezenţa proteinei A în structura peretelui celular - cu ajutorului reactivului rapid
(Fig. 13)
Medtoda cu H CI
15
Fig. 12. Testul termonucleazei - metoda Lachica, cu albastru de bromtimol (ABT) -
schimbarea culorii complexelor acizi nucleici - ABT, de la albastru la roz, ca
urmare a modificării structurii spaţiale după digestia acizilor nucleici
Pentru diferenţierea SCN Între ei, utilizăm kit-uri sau galerii de microteste (ex.
API 20 (Fig. 14) sau API ID 32 STAPH.
16
Fig. 14. Identificarea SCN cu ajutorul galeriei API 20
Fig. 15. Lizotipia utilizată pentru diferenţierea tulpini lor într-un focar de infecţii
stafilococice
17
Tulpinile MRSA din comunitate sunt mai sensibile la alte antibiotice.
Rezistenţa prin apariţia unei noi proteine de legare a penicilinei, cu ajinitate joasă
pentru beta-lactamine (tulpini meticilino-rezistente MRSA sau Meti-R),
apariţia unei PBP adiţionale şi se manifestă faţă de toate beta-lactaminele
(peniciline, cefalosporine, carbapeneme). Singurele antibiotice active faţă
de aceste tulpini sunt glicopeptidele (vancomicina). Dar şi faţă de acestea
au apărut tulpini rezistente. Antibiograma este deci obligatorie.
Testarea sensibilitatii la oxacilina - screening difuzimetric cu disc de cefoxitin, însoţit
de al doilea test: evidenţierea PLP2a sau PCR pentru gena mecA
Test D pentru detectarea rezistentei inductibile la MLSb (Macrolide, Lincozamide,
Streptogramine b): discuri Eritromicina si Clindamicina la o distanta de 10 mm:
Eritro R si turtirea zonei de sensibilitate Ia Clindamicina (antagonism) - Fig. 16.
18