Colectie purulenta foliculita complicata cu celulita la nivelul buzei inferioare

Furuncul antracoid cauzat de

Staphylococcus aureus producator de Stafilococie maligna a
leucocidina Panton Valentine fetei pericol de
propagare la nivelul
sinusului cavernos
Sutura chirurgicala infectata
Septicemii
Toxiinfectie
alimentara
stafilococica
Epidermoliza buloasa
stafilococica
Sindrom de soc toxic
stafilococic
Bacteriologie medicala
Bacterii Gram pozitive
Coci Gram pozitivi
Genus Staphylococcus
 I. Prezentare generala
Minidefinitie:
Coci Gram pozitivi cu dispozitie
caracteristica in ciorchine implicati in
infectii invazive si/sau de tip toxiinfectii, de
gravitate medie pana la severa,
amenintatoare de viata

Infectii purulente + toxiinfectii

 II. Incadrare taxonomica si
clasificare
Manual Bergey 2004:
Domeniu: Bacteria
Phylum: B XIII, Firmicutes
Clasa: III, Bacilli
Ordin: Bacillales
Familie: VIII Staphylococacceae
Genul Staphylococcus - este compus pn n
prezent din 40 de specii, dintre care 20 au putut
fi izolate de la om
Apropiati filogenetic de streptococi, enterococi,
Genul Bacillus i Genul Lactobacillus.
 III. Habitat
Ubiquitar = prezent peste tot
Colonizeaz vestibulul nazal i mucoasele
organelor cavitare cu comunicare la exterior
(colon, vagin)
Contamineaz frecvent tegumentul, prefernd
zonele cu umiditate ridicat (axile, perineu,
plici interdigitale etc.)
IV. Implicare in patologia umana
Staphylococcus aureus:
Infectii supurative:
Infectii superficiale ale tegumentelor si mucoaselor (inclusiv anexele
pielii - furuncul, panaritiu etc.), impetigo
Infectii generalizate, sistemice
Abcese profunde, infectii ale organelor interne, seroaselor etc.
Osteomielita, artrita
Toxinoze:
Toxiinfectii alimentare
Necroliza toxica epidermica
Sindromul de soc toxic
Stafilococi Coagulaza Negativi (SCN):
Rol protector in flora normala
Prin depasirea instrumentala a barierelor naturale:
interventii chirurgicale invazive (cateterisme, implante,
protezari vasculare etc.) pot deveni patogeni: S.
epidermidis, S. capitis, S. lugdunensis, S. haemolyticus, S.
warneri etc.
Infectii urinare la femeile tinere (S. saprophyticus)
 Principalele afectiuni infectioase
stafilococice prezentare
detaliata
Staphylococcus aureus - condiionat patogen
Infecii purulente localizate sau generalizate:
Impetigo: infecie superficial la nivelul feei i
membrelor, care afecteaz mai ales copilul mic.
macule, vezicule, pustule, pe fond eritematos,
cruste.
asocierea S.aureus cu streptococul de grup A (n
20 din cazuri).
Aspectul crustelor in asociere cu streptococul seamana cu
mierea (cruste melicerice)
Pericol de complicatii renale
 Foliculita: infecie piogena la nivelul foliculului pilos.

Orgelet infectia pleoapei pornind de la o geana

Furuncul: extinderea infeciei la glanda sebacee,

colecie apreciabil de puroi, nsoit de esuturi
necrozate, durere

Carbuncul sau furuncul antracoid: rezultat al

extinderii infeciei la mai multe glande pilosebacee
i la nivelul esuturilor subcutanate profunde.
 Hidrosadenita: infecie a glandelor
sudoripare cu localizare la nivel axilar,
perineal, sau n zonele genitale

Mastita: infecie a glandei mamare

1-3 din femeile care alpteaz
nodul eritematos i formarea unui
abces canalicular.
 Infecii ale plgilor:
post traumatic
chirurgical,

Semne de inflamatie: edem i eritem

local, durere i acumulare de puroi.
 Bacteriemia:
50 dobndite n mediul spitalicesc
dup proceduri chirurgicale
utilizare de catetere intravenoase
contaminate
se asociaz frecvent cu diseminare
septic secundar, de obicei la nivelul
endocardului i apariia endocarditelor
acute, infecii severe, cu o mortalitate de
aprox. 50.
 Pneumonia i empiemul pulmonar:
frecvent la vrstele extreme
Osteomielita i artrita septic: rezultat al
diseminrii septice secundare unor infecii
stafilococice cu alte localizri, sau
postraumatic
la copii la nivelul zonelor metafizare ale
oaselor lungi
la aduli, localizarea este mult mai frecvent
la nivel vertebral
Artrite septice dup infiltraii intra
-articulare
 Anumite tulpini de S.aureus pot cauza
enterocolite postantibiotice (manifestate
clinic prin febr, diaree apoas profuz,
deshidratare). Pentru prima oar
asemenea enterocolite au fost descrise la
indivizii tratai cu antibiotice cu spectru
larg, administrate pe cale oral, care
distrug flora normal a colonului,
permind creterea S. aureus.
 Toxiinfecii
1. Toxiinfecii sau toxinoze alimentare
consumul de alimente contaminate cu stafilococi producatori de
enterotoxine stafilococice (carne de porc in saramur, unc, salate de
cartofi, ngheate)
frecvent n sezoanele calde (iulie-august).
sursa:
animale crescute pentru carne si/sau lapte
rezultat al contaminrii produsului alimentar de ctre purttori i/sau pacieni cu
infecii purulente
nclzirea sau fierberea ulterioar a alimentului distruge bacteria dar nu
inactiveaz toxina. Alimentul contaminat nu are aspectul sau gustul alterat
Incubaia 1-8 ore, debutul este brusc, evoluia rapid, 12-24 de ore,
caracterizat prin: diaree apoas, greuri, vrsturi, dureri abdominale,
cefalee
Spontan autolimitant; probleme la vrste extreme, instabilitate
hemodinamic i hidroelectrolitic
2. Dermatita exfoliativ (necroliza toxica epidermica,
sindromul pielii oprite stafilococice, maladia Ritter
sau impetigo bulos stafilococic)
- la copiii cu vrsta sub 1 lun
- eritem perioral, care n decurs de 2 zile cuprinde
ntreg corpul
- formarea de vezicule (cu lichid clar, germeni
microbieni i leucocite absente, datorit faptului c
patogenitatea este determinat de toxina bacterian)
- clivaj la nivel intraepidermic
- descuamarea epiteliului.
- refacerea epiteliului are loc n 7-10 zile, cnd apar
anticorpii protectori
3. Sindromul de oc toxic stafilococic

1978 - stafilococi productori de TSST-1 (Toxina Sindromului de Soc

Toxic-1)
febr, hipotensiune
eritem scarlatiniform
evoluia poate fi fatal
la femei tinere, care au utilizat tampoane intravaginale.
Multiplicare si secretie de TSST-1 datorita mediului favorabil
prin continut crescut in celuloza, sange si secreii vaginale.
Aceast toxin se absoarbe i stimuleaz macrofagele care
vor secreta interleukin-1, prostaglandine i TNF- (Tumor
Necrosis Factor). Aceste citokine proinflamatorii sunt
reponsabile de manifestrile clinice.
Poate sa apara si la barbati cu infectii localizate
 Infeciile nosocomiale
S.aureus, care poate fi rezistent la
meticilin (SAMR/MRSA)
Transmiterea se face mai ales prin contact
direct, prin intermediul purttorilor sntoi de
germeni (portaj nazal, prin mini contaminate,
etc)
Localizri: cutanat, respiratorie, renal,
digestiv, osoas, articular, generalizate.
 Stafilococii coagulazo-negativi (CNS)
-patogenie
Endocardita
afecteaza valvele cardiace:
Valve lezate prin malformaii cardiace, reumatism articular acut
Valve artificiale
introdus n organism n timpul interventiilor invazive la nivelul
vaselor de sange sau pe cord
Debutul - lent, la aproximativ 1 an de la intervenia chirurgical
debuteaz la nivelul suturii valvei de esutul cardiac
formarea abceselor cardiace i separarea valvelor la nivelul
liniilor de sutur, cu tulburri de dinamic cardiac.
Prognosticul este rezervat.
Infecii ale materialelor de implant
20-65 din infeciile secundare implanturilor de
dispozitive, catetere, unturi, tuburi de dren sunt
cauzate de SCN (mai frecvent S.schleiferi i
S.lugdunensis).

Stafilococii Coagulaza Negativi (SCN) - responsabili

de aceste infecii datorit capsulei lor polizaharidice
care asigur ataarea la nivelul dispozitivelor
protetice, protejndu-i astfel de aciunea
antibioticelor i a celulelor antiinflamatoare.
 Infecii ale protezelor articulare
frecvente la nivelul oldului
Infecii ale tractului urinar
S. saprophyticus
la femeia tnr, activ sexual
Alte infecii
abcese cerebrale
meningite,
infecii vasculare
peritonite,
septicemii
majoritatea cu caracter nosocomial pot fi produse de
speciile de SCN mai sus menionate.
 V. Caracterizare/implicatii in
diagnosticul microbiologic:
Caractere morfotinctoriale:
Forma: coci rotunzi, dimensiuni: 0,5
1m
Tinctorialitate: gram pozitivi
Dispozitie:
- caracteristica, grupati in ciorchine
- extra sau intracelular in prelevate
V. Caracterizare/implicatii in
diagnosticul microbiologic - cont
Caractere de cultivabilitate:
- nepretentios nutritiv: cultiva pe medii nutritive
simple
- adaos de sange, pentru observarea
caracterelor hemolitice
- halofil (iubete sarea)
Medii selective cu concentratie ridicata de NaCl
inhibarea altor bacterii (ex. din fecale, alte
prelevate contaminate)
Tip metabolic i caractere enzimatice

Tip metabolic HETEROTROF (crete

numai n prezena substanelor organice)
Nepretenios nutritiv
Catalaz pozitiv, oxidaz negativ;
Facultativ anaerob
Fermenteaz glucoza fr producere de
gaz; S. aureus i n anaerobioz (# SCN)
 Rezistena la agenti fizici,
chimici i biologici
Ageni fizici:
Relativ rezistent la:
Frig
Uscaciune
Variatii de pH
Agenti chimici eficienti: halogeni, derivati
cuaternari de amoniu
Rezistenta castigata la antibiotice; natural
rezistenti la polimixine si acid nalidixic
Unele tulpini sensibile la bacteriofagi - lizotipie
 VI. Factori de patogenitate
S. aureus:
(1) proteine si/sau mucopolizaharide de suprafata promoveaza
colonizarea tesuturilor gazdei si/sau inhiba fagocitoza (proteina A,
coagulaza legata = receptor pt. fibrinogen, capsula)
(2) supravietuirea in fagocite:
pigment galben cu molecula polinesaturata (S. aureus) reduce radicalii toxici de
oxigen generati de neutrofilul activat
catalaza descompunerea H2O2, radical toxic de O2 folosit pt. distrugerea
microorganismelor;
(3) coagulaza camuflarea antigenelor de suprafata prin acoperire cu
strat de fibrina si utilizarea leucocitelor ca vehicul de transport
(4) invazine promoveaza patrunderea bacteriilor in tesuturi:
hialuronidazele depolimerizeaza acidul hialuronic din structura tesutului
conjunctiv;
toxine cu activitate citolitica care distrug celulele eucariote, inclusiv leucocitele
leucotoxine, leucocidina. hemolizine (alpha, beta, gamma, delta),;
(5) exotoxine care lezeaza tesuturile gazdei sau provoaca simptome de
boala (enterotoxine stafilococice A-G, TSST, ET)
(6) rezistenta la antibiotice intrinseca sau dobandita
Factori de patogenitate
 VII. Patogenie:
Colonizare tegumente, mucoase:
prin structuri speciale de suprafata = adezine
capacitatea de a realiza un biofilm matrice polizaharidica
protectoare in care sunt incluse microorganismele
Invazia si procesul infectios: invazine (hialuronidaza,
leucocidine, leucotoxine), coagulaza, stafilokinaza
Toxine
Mecanisme de evitare a raspunsului imun:
Microcapsula; biofilm (in special SCN)
Proteina A fixeaza Ig G la nivelul fragmentului Fc
Catalaza, pigmenti carotenoizi etc.
Leucocidine omoara leucocitele
 Toxine
Aciunea toxinelor - se manifest specific pentru fiecare dintre
toxinele enumerate:
- aciune citotoxic pentru hemolizine, leucocidina Panton
Valentine;
- activitate de serin-proteaze n cazul toxinelor exfoliative, cu
aciune asupra desmozomilor care constituie structurile de legtur
la nivel intercelular;
- infiltrat leucocitar la nivelul stomacului i jejunului i stimularea
mediatorilor chimici de la nivelul mastocitelor, cu reacie
inflamatorie i senzaie de grea n cazul enterotoxinelor;
- activarea limfocitar policlonal nespecific pentru toate
toxinele care au caracterul de superantigene: enterotoxine, toxina
exfoliativ, TSST-1
- stimularea eliberrii de citokine, avnd ca rezultat creterea
permeabilitii vasculare sau efect citolitic, la concentraii nalte,
precum i efecte sistemice mergnd pn la oc toxic, n cazul
TSST-1
 VIII. Raspunsul imun
Principalul mecanism: fagocitoza
Anticorpi neutralizanti antitoxici
Opsonizare anticorp dependenta
Mecanisme de aparare ale bacteriei:
- Capsula si proteina A interfera cu fagozitoza
- Biofilm la suprafata implantelor jeneaza fagocitoza
- Mecanisme de rezistenta intrafagocitara: carotenoizi,
catalaza neutralizarea speciilor reactive de oxigen,
mecanismele primare de bactericidie intrafagocitara la
nivelul fagolizozomului
- leucocidine
IX. Elemente de epidemiologie si
profilaxie
- Agenti etiologici frecvent implicati in infectiile
nosocomiale
- Infectii extraspitalicesti (comunitare) tulpini cu
tropism pulmonar si capacitate dermonecrotica
(leucocidina Panton Valentine)
Posibilitati de profilaxie si/sau tratament:
Vaccin experimental bivalent anti S. aureus confera
imunitate de aprox. 40 zile pacientilor hemodializati 2002
compus din polizaharide capsulare de S. aureus tip 5 si 8
Ser hiperimun nu se mai utilizeaza
Incercari de antagonizare a factorilor de colonizare
 Stafilococii ubicuitari
toate persoanele au CNS la nivelul tegumentelor
S.aureus - colonizarea tranzitorie a zonelor tegumentare sau
mucoase umede
S.aureus i CNS - izolai n orofaringe, tract gastro-intestinal,
urogenital.
Colonizarea nou-nscutului cu S.aureus ncepe la nivelul
bontului ombilical, suprafeelor tegumentare, ariei perineale
avantajul hranirii la san si contactului direct cu tegumentele
mamei
Portajul de scurt durata- frecvent nazofaringian
 Aderena de epiteliul mucoasei - existena
receptorilor celulari ai gazdei potriviti cu structurile
de suprafata ai stafilococilor rol al acizilor
teichoici ai stafilococului, alte adezine
15 - 25 din adulii sntoi sunt purttori
nazofaringieni persisteni; 50% purttori
intermiteni
procente ridicate de portaj la pacienii ndelung
spitalizai, personal medical (40-70, pn la 90)
portajul este tegumentar sau nazofaringian -
responsabil pentru apariia infeciilor nosocomiale
 Diagnosticul de laborator
1. Prelevarea probelor:

tipul probelor: puroi, LCR, sange, exsudat

nasofaringian, biopsie din leziuni cutanate,
lichid articular, secretie conjunctivala, sputa
etc.
precautii: inainte de inceperea antibioterapiei,
tehnica aseptica etc.
 2. Transport

Transport rapid
Reguli de impachetare (tripla impachetare)
 3. Examen direct:

Macroscopic: aspect purulent puroi

galben

Bacterioscopic:
Coloratii : Gram, albastru metilen, M-G-G
Citologie cantitativa (numaratoare) si calitativa
 4. Izolarea
Medii nutritive simple, 24-48 h, 37 0C; adaos
de sange pentru observarea caracterelor
hemolitice:
Neselective pentru prelevatele normal sterile
(sange, lichid articular etc.): agar simplu cu
adaos de snge defibrinat de berbec 7-10%

Selective pentru produse contaminate (materii

fecale, aliment): agar hiperclorurat tip Chapman
 5. Identificarea
Scop clinic (confirmarea cazului individual)
Aspect microscopic
Caractere de cultura
Diagnostic de gen: Catalaza + (# Streptococcus)
Diagnostic de specie: Coagulaza (S. aureus #
SCN)
Scop epidemiologic diferentiere
intraspecifica: tipizare; lizotipie (tipizare
bacteriofagica), tipizare moleculara
 Morfologia

coci gram pozitivi

cu diametrul de 0,5-1,5m,
dispui n grmezi, imobili,
nesporulati, de regula
necapsulati
Aspect microscopic coloratie AM

Coci in gramezi
Microscopie electronica de baleiaj
Fiziologie si caractere de crestere
aerobi, facultativ anaerobi,
mezofili (se dezvolt ntre 10-42C), cu
dezvoltare optim la 37C
cresc pe medii uzuale pe care formeaz
colonii rotunde, convexe, frecvent pigmentate
galben auriu la S. aureus, care produc frecvent
o hemoliz complet sau incompleta pe geloz
snge, capabili s creasc pe medii
suplimentate cu 10% NaCl si sa fermenteze
manitolul
 Medii de izolare pentru produse necontaminate -
agar nutritiv simplu cu sange

Staphylococcus aureus pigment si hemoliza Staphylococcus epidermidis

Coloratie Gram
Mediu selectiv si diferential hiperclorurat cu
manitol tip Chapman izolare din produse
contaminate cu Gram negativi

Stg. SCN, manitol negativi; Dr. Staphylococcus aureus, manitol pozitiv

 Diferentiere
Staphylococcus -Streptococcus:
Catalaza + la stafilococi
 Diferentiere Staphylococcus aureus
de ali stafilococi , coagulaza-negativi (SCN):

prezena coagulazei
enzim care are proprietatea de a coagula plasma
Restul stafilococilor sunt denumii SCN
prezena dezoxiribonucleazei termostabile
(termonucleaza) la S. aureus
prezena proteinei A n structura peretelui
celular la S. aureus
caracterele culturale la S. aureus
colonii pigmentate galben-auriu, spre deosebire de S.
epidermidis i S. saprophyticus care prezint pigment
alb
produce mai frecvent decat SCN pe agar snge o
hemoliz clar spre deosebire de restul speciilor, rar
hemoliza incompleta de tip cald rece
Coagulaza libera activeaza
protrombina

S. aureus coagulaza pozitiv

S. epidermidis coagulaza negativ

 Dezoxiribonucleaza metoda cu HCl
clarificarea mediului cu ADN din jurul culturii
pozitive prin adaugare de HCl, care dizolva ADN
depolimerizat

Dezoxiribonucleaza pozitiv Dezoxiribonucleaza negativ

student.ccbcmd.edu/.../lab15/dnaspos.html
Termonucleaza metoda cu albastru de bromtinol:
modificarea raporturilor spatiale in complexul ADN-
Albastru de Bromtimol continut in mediu, prin
hidroliza acizilor nucleici duce la shimbarea culorii
din albastru inchis in roz

https:/.../catalog2/hugo/DNaseMedia.htm
 Identificare de specie
cu ajutorul kit-urilor sau galeriilor
de microteste biochimice

API 20

API ID 32 STAPH
 Teste rapide latexaglutinare
pentru S. aureus

Evidentiaza:
-coagulaza legata sau receptorul
pentru fibrinogen
- Proteina A
- Antigenul capsular
Tipizarea bacteriofagica
 6. SENSIBILITATEA LA ANTIBIOTICE

Natural sensibil la aproape totalitatea familiilor de

antibiotice
Natural rezistent la polimixine (colistin) quinolone de
generaia nti (acid nalidixic)
Majoritatea tulpinilor sunt rezistente la Peniciline prin
secreia beta-lactamazelor - codificate plasmidic (inhibate de
inhibitorii de -lactamaze - acidul clavulanic din augmentin,
sulbactamul, tazobactamul care le inactiveaz)
Tulpinile circulante in unitati de ingrijire castiga
rezistente multiple este obligatorie antibiograma
 Rezistente la antibiotice de
importanta clinica

Test D
Rezistenta la meticilina Rezistenta inductibila la macrolide,
(subpopulatii rezistente) lincosamide si streptogramine B
reducerea diametrului de inhibitie la
Clindamicina in vecinatatea Eritromicinei
 Tulpinile MRSA de provenienta
nosocomiala in Romania, de obicei
multirezistente

Tulpini MRSA in comunitate mai

sensibile la alte antibiotice
Rezistenta la Meticilina
Rezistena la meticilina (tulpini meticilino-
rezistente MRSA sau Meti-R) prin sinteza unei
noi proteine de legare a penicilinei (PLP)
codificate de o gena castigata = gena mecA
apariia unei PLP adiionale se manifest fa de toate
beta-lactaminele (peniciline, cefalosporine,
carbapeneme).

Rezistenta la Vancomicina nu a aparut inca in

Romania (doar cazuri de import atentie la
izolarea pacientilor) = antibiotic de rezerva in
infectiile stafilococice
 Testarea sensibilitatii la
antibiotice S. aureus
Testarea sensibilitatii la oxacilina screening difuzimetric
cu disc de cefoxitin + PCR pentru gena mecA
Test D pentru detectarea rezistentei inductibile la MLSb
(Macrolide, Lincozamide, Streptogramine b): discuri
Eritromicina si Clindamicina la o distanta de 10 mm:
Eritro R si turtirea zonei de sensibilitate la Clindamicina
(antagonism)
Semnificatia rezistentei inductibile: desi diametrul la
Clindamicina poate fi in zona de sensibilitate, daca testul
D este pozitiv, rezistenta se va instala rapid
 Cuvinte cheie stafilococ:

Coc gram pozitiv, dispozitie in ciorchine

Leziuni purulente si toxiinfectii
Halofilie
Catalaza pozitiv
Coagulaza pozitiv S. aureus
Proteina A
Fermenteaz glucoza fara producere de gaz
(S. aureus si in anaerobioza)
Infectii nosocomiale
Rezistenta la meticilina, rezistenta inductibila
la MLSBi