ROMNIA MINISTERUL EDUCAIEI, CERCETRII, TINERETULUI I SPORTULUI UNIVERSITATEA DE TIINE AGRICOLE I MEDICIN VETERINAR CLUJ-NAPOCA DEPARTAMENTUL NVMNT LA DISTAN

I FRECVEN REDUS Str. Mntur Nr.3-5, 400372 Cluj-Napoca, Romnia tel.+ 40-264-596.384; fax + 40-264-593.792

FACULTATEA DE ZOOTEHNIE I BIOTEHNOLOGII SPECIALIZAREA: ZOOTEHNIE ANUL II

CENTRUL UNIVERSITAR I CULTURAL ROMN VITERBO - ITALIA

GENETIC ANIMAL 1

Prof.univ.dr. AUGUSTIN VLAIC

SEMESTRUL I

ACADEMICPRES CLUJ-NAPOCA 2011/2012

1

CUPRINS pag. CAPITOLUL 1 - DEFINIIA, OBIECTIVUL I IMPORTANA GENETICII .............................................................................................. CAPITOLUL 2- STRUCTURI CELULARE CU ROL GENETIC .... CAPITOLUL 3 - DIVIZIUNILE CELULARE .................................... 3.1. Mitoza .......................................................................................... 3.2. Meioza .......................................................................................... CAPITOLUL 4 - TRANSMITEREA CARACTERELOR DE LA O GENERAIE LA ALTA .............................................................. 4.1. Interaciunile genelor alele ........................................................... 4.2. Interaciunea genelor nealele ....................................................... CAPITOLUL 5 - TRANSMITEREA CARACTERELOR DETERMINATE DE GENE SITUATE PE ACELAI CROMOZOM .......................................................................................... CAPITOLUL 6 - TRANSMITEREA NLNUIT CU SEXUL, SAU FENOMENUL DE SEX LINKAGE .......................................... 6.1. Transmiterea nlnuit cu sexul la tipul Abraxas ........................ 6.2. Transmiterea nlnuit cu sexul la tipul Drosophila ................... CAPITOLUL 7 - ACIZII NUCLEICI: STRUCTUR I FUNCII . CAPITOLUL 8 - FUNCIONAREA ADN-ULUI I EXPRESIA GENELOR .......................................................................... CAPITOLUL 9 - STRUCTURA MOLECULAR A CROMOZOMILOR LA PROCARIOTE I EUCARIOTE ............... 9.1. Structura molecular a cromozomului bacterian ......................... 9.2. Structura molecular a cromozomului la eucariote ..................... 9.3. Organizarea secvenelor de nucleotide n ADN-ul cromozomal al eucariotelor ............................................................................... Capitolul 10 - MUTAIILE I MUTAGENEZA ................................. 10.1. Mutaiile genice ........................................................................... 10.2. Mutaiile genomice (de numr) .................................................... 10.3. Mutaiile cromozomiale sau de structur ..................................... CAPITOLUL 11 - NOIUNI DE EREDOPATOLOGIE .................... 11.1. Boli ereditare la taurine ................................................................ 11.2. Boli ereditare la porcine ............................................................... 11.3. Boli ereditare la psri ................................................................. CAPITOLUL 12 - INGINERIA GENETIC I APLICAIILE SALE ......................................................................................................... 12.1. Tehnologia ADN recombinant ..................................................... 12.2. Hibridarea celular ....................................................................... 13.3 Clonarea animalelor ..................................................................... BIBLIOGRAFIE ...................................................................................... 3 4 5 5 7 9 9 13

20 24 25 26 27 31 33 34 34 36 37 38 40 42 44 44 45 46 47 47 50 50 61

CAPITOLUL 1

DEFINIIA, OBIECTIVUL I IMPORTANA GENETICII

G e n e t i c a este tiina biologic ce studiaz fenomenele de ereditae i variabilitate la toate organismele vii. Ereditatea (hereditas = motenire). Este o nsuire tuturor organismelor vii. Ereditatea, ca nsuire a organismelor vii, asigur continuitatea formelor de via n succesiunea generaiilor, sau poate fi definit ca un proces prin care se realizeaz asemnarea dintre prini i descendeni. Ereditatea se motenete, deci se transmite din generaie n generaie, dar poate suferi n decursul generaiilor i unele modificri care conduc la deosebiri ntre indivizii componeni ai diferitelor generaii, sau chiar ntre indivizii aceleiai generaii. Aceasta nseamn c organismelor vii le este proprie nc o nsuire fundamental variabilitatea (prima fiind ereditatea). Variabilitatea fenotipic (VP) manifestat n cadrul generaiilor succesive sau n cadrul aceleiai generaii se datoreaz diferenelor dintre bazele ereditare ale indivizilor (VG) precum i diferenelor provocate de condiiile de mediu (VE). VP VG + VE O b i e c t i v u l cursului de genetic - l constituie cunoaterea mecanismului de transmitere ereditar a diferitelor caractere i nsuiri, adic n ce mod informaia genetic transmis de la o generaie la alta determin deosebiri i asemnri ntre indivizi. I m p o r t a n a cursului de genetic. Cunoscnd i nelegnd legile care guverneaz formarea, dezvoltarea i evoluia organismelor vii, specialistul n creterea animalelor are posibilitatea s acioneze n direcia formrii unor organisme care s satisfac din ce n ce mai mult cerinele omului. Complexitatea aspectelor studiate de genetic a determinat concretizarea unor ramuri ale acesteia, cum sunt: citogenetica, radiogenetica, imunogenetica, fundamental proprie

genetica molecular, ingineria genetic, genetica populaiilor i genetica cantitativ. Genetica populaiilor i genetica cantitativ sunt ramuri care fundamenteaz una dintre cele mai importante tiine aplicative i anume ameliorarea plantelor i animalelor. Genetica molecular i ingineria genetic fundamenteaz biotehnologiile. Genetica a revoluionat ntregi domenii ale tiinelor, avnd implicaii n biotehnologii, agricultur, horticultur, zootehnie, medicin uman, medicin veterinar, industria farmaceutic, industria alimentar etc.

CAPITOLUL 2

STRUCTURI CELULARE CU ROL GENETIC

Cele mai importante structuri celulare cu rol genetic sunt cromozomii, care se gsesc n nucleul celulelor la organismele eucariote. Pe cromozomi sunt aezate genele care determin diferitele caractere ale indivizilor. n metafaz, un cromozom este alctuit din dou cromatide surori, centromer, constricie secundar, satelit i telomere (fig.1). Centromerul leag cele dou cromatide surori la nivelul unei constricii primare i cu ajutorul lui, cromozomii se fixeaz de fibrele fusului de diviziune. La nivelul constriciei secundare se afl aezat regiunea organizatorului nucleolar. Satelitul este prezent numai la cromozomii care prezint constricie secundar. Telomerele sunt situate la capetele cromozomului, conin ADN noninformaional i au rolul de a menine stabilitatea cromozomilor n timpul diviziunilor celulare. n unele faze ale mitozei (anafaz, telofaz) cromozomii au structur monocromatidic, datorit duplicrii lor n metafaz. Setul de cromozomi din celulele plantelor i animalelor prezint trei nsuiri importante: 1. Nucleul fiecrei celule somatice conine un numr fix de cromozomi, caracteristic fiecrei specii (om = 46, taurine= 60, ovine = 54, porcine = 38, cabaline= 64, gru= 42, cartof= 48, mazre= 14 etc); 2. Celulele somatice conin cromozomi care sunt dispui n perechi (2n);

3. Celulele sexuale (gameii) conin n nucleul lor un singur set de cromozomi (n), ele fiind celule haploide (cu numrul de cromozomi redus la jumtate).

Fig.1 Structura fizic a cromozomului metafazic

CAPITOLUL 3

DIVIZIUNILE CELULARE
Diviziunile celulare sunt reprezentate de: mitoz, care menine constant numrul cromozomilor din celulele somatice; meioz, care njumtete numrul cromozomilor din gamei.

3.1. Mitoza reprezint tipul de diviziune celular specific celulelor somatice.

n urma ei, dintr-o celul cu numr diploid de cromozomi (2n) rezult dou celule fiice cu acelai numr de cromozomi (2n) ca i celula din care provin. Mitoza cuprinde dou etape: interfaza i mitoza propriu-zis (profaz, metafaz, anafaz i telofaz) care mpreun alctuiesc ciclul celular sau ciclul de via al unei celule. Interfaza poate fi subdivizat n 3 perioade: presintetic (G1), sintetic (S) i postsintetic (G2).

Cele mai importante fenomene de interes genetic care au loc n faza sintetic (S) sunt: replicarea ADN-ului dup modelul semiconservativ i replicarea cromozomilor. La sfritul acestei faze, fiecare cromozom va fi alctuit din dou cromatide surori.

Fig.2 Fazele mitozei (ciclul celular) Mitoza propriu-zis cuprinde fazele: profaza, metafaza, anafaza i telofaza. Cel mai important fenomen genetic are loc n metafaz: duplicarea cromozomilor, fenomen n urma cruia cromozomii devin monocromatidici. La sfritul mitozei (telofaz), dintr-o celul cu 2n cromozomi rezult dou celule fiice cu acelai numr de cromozomi (2n). n celulele fiice, cromozomii sunt cu structur monocromatidic. Aceste celule fiice cu cromozomi monocromatidici vor intra i ele ntr-un nou ciclu celular i la sfritul fazei S a interfazei vor rezulta cromozomi cu structur bicromatidic i ciclul continu. Rezumat: Datorit replicrii cromozomilor n interfaz i duplicrii cromozomilor n metafaz, mitoza asigur meninerea constant a numrului de cromozomi de la o celul la alta i implicit asemnarea celulelor dintr-un organism.

3.2. Meioza

este un tip special de diviziune care are loc n cursul

gametogenezei (spermatogenez i ovogenez) n urma creia rezult celulele sexuale (gameii) care au un numr de cromozomi redus la jumtate (fig.3).
6

Meioza const n dou diviziuni succesive: meioza I i meioza II. Meioza I este o diviziune reducional n urma creia dintr-o celul diploid (2n) specializat (spermatocitul i ovocitul de ordinul I), rezult dou celule fiice haploide (n), cu numrul de cromozomi redus la jumtate (spermatociii i ovociii de ordinul II). Meioza I conine urmtoarele faze: profaza I, care este o faz mai lung ce cuprinde mai multe stadii (leptonem, zigonem, pachinem, diplonem i diachinez) metafaza I, anafaza I i telofaza I. Cele mai importante fenomene genetice care au loc n meioza I sunt: schimbul reciproc de gene ntre cromozomii omologi sau crossingoverul (n diplonem) i dansul cromozomilor sau repartizarea la ntmplare a cromozomilor de origine matern i patern n spermatociii i ovociii de ordinul I (metafaza I telofaza I). Celulele haploide rezultate dup meioza I conin cromozomi cu structur bicromatidic, deoarece n metafaza I nu a avut loc fenomenul de duplicare a cromozomilor. Meioza II este o diviziune de multiplicaie asemntoare mitozei. Ea conine urmtoarele faze: profaza II, metafaza II, anafaza II i telofaza II. n aceast diviziune, cel mai important fenomen care are loc este duplicarea cromozomilor, care are loc la sfritul metafazei II. n urma duplicrii rezult cromozomi cu structur monocromatidic. La sfritul telofazei II vor rezulta patru celule haploide (patru spermatozoizi n spermatogenez i un ovul i trei globuli polari n ovogenez) n care cromozomii sunt monocromatidici.

Fig.3 Schema spermatogenezei

Crossingoverul i dansul cromozomilor, fenomene care au loc n meioz, reprezint sursele prin care se realizeaz variabilitatea genetic n populaiile de animale.

Teme de control 1. Rspundei cu DA sau NU n funcie de corectitudinea sau de falsitatea afirmaiei. Justificai rspunsurile: a.) Celulele musculare i gameii aceluiai animal au numr egal de cromozomi? Exemplificai la taurine. b.) Cromozomii sexuali se gsesc numai n celulele sexuale (spermatozoid i ovul)? c.) Celulele sexuale (spermatozoid i ovul) conin i autozomi? d.) Din cei 30 cromozomi ai spermatozoidului de taur 20 ar putea fi de provenien patern, dar 34? e.) Celulele epidermului, celulele musculare i cele hepatice ale aceluiai animal au numr diferit de cromozomi, conin informaie genetic diferit i ndeplinesc funcii diferite n organism? 2. Ci autozomi conin celulele somatice i spermatozoizii unui taur? 3. Ci cromozomi de sex (heterozomi) conin celulele somatice i spermatozoizii unui taur? 4. Ci autozomi i ci cromozomi de sex conin celulele somatice la om? 5. Ci autozomi i ci cromozomi de sex conin celulele sexuale (spermatozoidul i ovula) la om? 6. n care faze ale mitozei cromozomul are structur monocromatidic i n care are structur bicromatidic? 7. Cte celule rezult n urma mitozei i ci cromozomi conin aceste celule la taurine? 8. Cte celule rezult n urma meiozei I i meiozei II i ci cromozomi conin acestea la om? 9. Ce structur (monocromatidic sau bicromatidic) au cromozomii rezultai n urma mitozei, meiozei I i meiozei II? 10. Cum se numesc celulele rezultate n urma meiozei (spermatogenezei i ovogenezei) la masculi i femele? 11. Care sunt cele dou procese care au loc n cursul ciclului celular care asigur meninerea constant a numrului de cromozomi n celulele somatice?

CAPITOLUL 4

TRANSMITEREA CARACTERELOR DE LA O GENERAIE LA ALTA

Interaciunile genelor alele, interaciunile genelor nealele, linkage-ul i crossingoverul reprezint cteva modele de transmitere a unor caractere de la o generaie la alta.

4.1. Interaciunile genelor alele

omologi).

sunt relaii care se stabilesc ntre

genele alele (genele care ocup aceeai poziie pe o pereche de cromozomi Aceste interaciuni pot fi de: dominan complet, dominan incomplet, codominan i supradominan. Dominana complet este o interaciune n care o gen de la un locus (A) este complet dominant asupra alelei sale (a). Din aceast cauz, indivizii cu genotip heterozigot (Aa sau AaBb) vor manifesta un fenotip asemntor genotipului homozigot dominant (AA sau AABB). Monohibridarea, dihibridarea, trihibridarea etc, sunt cazuri de interaciuni ale genelor alele, n care la fiecare locus exist o gen complet dominant asupra alelei sale. Monohibridarea presupune ncruciarea ntre indivizi care se deosebesc printr-o pereche de caractere (pereche de gene) (fig.4). De exemplu, din ncruciarea unor tauri din rasa Friz blat cu negru, cu vaci din rasa Friz blat cu rou, s-au obinut n prima generaie hibrizi blai cu negru, iar n generaia a doua, 75%indivizi blai cu negru i 25% indivizi blai cu rou. Datorit dominanei complete dintre cele dou alele (A i a), indivizii heterozigoi (Aa) din F1 i F2 manifest caracterul dominant (culoarea blat cu negru). Friz blat cu negru P Gamei A Aa A a AA A x A x a Friz blat cu rou aa a Aa Blat cu negru 100% a

F1 Gamei

F2 Rf = 3 : 1;

AA

Aa Blat cu negru

Aa

aa Blat cu rou

Rg = 1 : 2 : 1

Fig.4 Schema monohibridrii care demonstreaz dominana complet Concluzie: gena determinant a culorii blate cu negru (A) este complet dominant asupra alelei sale care determin culoarea blat cu rou (a). Dihibridarea presupune ncruciarea ntre indivizi care se deosebesc prin dou perechi de caractere (dou perechi de gene), la fiecare pereche de gene existnd interaciune de dominan complet (fig.5). taurine negre fr coarne P Gamei AABB AB AaBb AB x x ab AaBb taurine roii cu coarne aabb

ab negre fr coarne 100%

F1 F2

A B negre fr coarne (9/16) A bb negre cu coarne (3/16) aaB aabb roii fr coarne (3/16) roii cu coarne (1/16)

Fig. 5 Schema dihibridrii care demonstreaz dominana complet Hibrizii heterozigoi din generaia F1 (AaBb) produc fiecare cte 4 gamei (AB, Ab, aB, ab), din combinarea crora, cu anse egale, rezult 16 genotipuri n generaia F2 i un raport de segregare fenotipic egal cu 9:3:3:1. Concluzie: n acest tip de interaciune, gena care determin culoarea neagr (A) este complet dominant asupra alelei sale care determin culoarea roie (a) iar gena care determin lipsa coarnelor (B) este complet dominant asupra alelei sale care determin prezena coarnelor (b). Dominana incomplet (semidominana) este interaciunea dintre dou gene alele, n care o gen de la un locus (A1) este incomplet dominant asupra alelei sale (A2). Din aceast cauz, indivizii heterozigi (A1A2) vor avea un fenotip intermediar formelor parentale homozigote (fig. 6 ).
10

Dup dominana incomplet se transmite culoarea robei (prului) la rasa de taurine Shorthorn, culoarea penajului la ginile de Andaluzia, culoarea florilor la Barba mpratului, garoafe etc. penaj negru P A1A1 x penaj alb A2A2

F1 F2 Rf = 1 : 2 : 1; A1A1 negru Rg = 1 : 2 : 1 A1A2

A1A2 penaj gri-albstrui A1A2 A2A2 alb gri-albstrui

Fig. 6 Schema dominanei incomplete Codominana este interaciunea n care o gen de la un locus nu prezint nici un fel de dominan asupra alelei sale (codominana = lips de dominan ntre alele). Codominant se transmit grupele sangvine la om i animale, proteinele din snge (hemoglobinele, transferinele), proteinele din lapte (k-cazeina, lactoglobulina) etc. Grupele sangvine din sistemul AB0 la om (A, B, AB i 0) sunt controlate de trei gene alele: LA, LB i l. Numai ntre alelele LA i LB exist interaciune de codominan (lips de dominan) astfel c indivizi cu genotip heterozigot ( LALB) vor avea grupa sangvin AB, adic vor manifesta fenotipul determinat de ambele alele (fig. 7).

grupa A P LALA x

grupa B LBLB

F1 F2 LALA grupa A LALB

LALB 100% grupa AB LALB LBLB grupa B

grupa AB

Fig. 7 Schema codominanei

11

n mod asemntor, din mperecherea unor tauri cu tipul A de hemoglobin (genotip HbAHbA) cu vaci cu tipul B (genotip HbBHbB) vor rezulta n generaia F1 descendeni cu tipul AB de hemoglobin (genotip HbAHbB), iar n generaia F2: 1/4 cu hemoglobin A, 2/4 cu hemoglobin AB i 1/4 cu hemoglobin de tip B. Din acest exemplu, rezult c ntre cele dou alele HbA i HbB exist interaciuni de codominan (lips de dominan). Supradominana este o interaciune dintre genele alele care aflate n stare heterozigot se completeaz reciproc. n acest fel, organismele heterozigote prezint un fenotip superior formelor parentale homozigote. Interaciunea de supradominan implic mai muli loci aflai n stare heterozigot care determin caracterele cantitative (producia de lapte, producia de ln, ou etc). Supradominana, mpreun cu dominana complet i cu epistazia, determin apariia efectului heterozis, manifestat de hibrizii rezultai din ncruciarea a dou sau mai multe rase, soiuri sau linii. De exemplu, hibrizii de carne la porcine, hibrizii de carne i ou la psri realizeaz nsuiri de producie superioare formelor parentale (raselor sau liniilor), datorit efectului heterozis. Genele letale sunt gene care n stare homozigot produc moartea unor genotipuri n diferite stadii ale dezvoltrii ontogenetice (zigot, embrion, ft sau postnatal). Genele letale pot fi: dominante (A+) sau recesive (a+) i ele modific raporturile normale de segregare. Letalitatea determinat de gene letale dominante se ntlnete la ovinele din rasa Caracul brumriu, urcan brumrie, vulpile platinate, crapul oglind, oarecii galbeni etc. De exemplu, din ncruciarea unor berbeci Caracul brumriu (A+a) cu oi din aceeai ras (A+a) vor rezulta n prima generaie: 25% miei brumrii (A+A+) care mor postnatal de boala numit timpanism; 50% miei brumrii viabili (A+a) i 25% miei de culoare neagr viabili (aa). Deci, ovine adulte homozigote (A+A+) de culoare brumrie nu exist, ci numai ovine purttoare a genei letale (A+a). Letalitatea determinat de gene letale recesive se ntlnete la taurinele din rasa Dexter cu membre scurte, la unele rase de gini numite "trtoare" etc. De exemplu, rasa de taurine Dexter cu membre scurte este purttoare a unei gene letale recesive n stare heterozigot (Aa+). Din ncruciarea unor tauri cu vaci din rasa Dexter (Aa +) vor rezulta n descenden: 25% viei cu membre
12

normale (AA), 50% viei cu membre scurte (Aa+) i 25% viei care mor (a+a+) de o boal a sistemului osos, numit acondroplazie (lipsa ctorva vertebre).

4.2. Interaciunea genelor nealele

Genele nealele sunt gene situate la loci diferii pe o pereche de cromozomi sau pe perechi de cromozomi diferite. Genele nealele se noteaz cu litere diferite, de exemplu A i B; A i b; a i B sau a i b. Dintre interaciunile genelor nealele fac parte: interaciunea complementar, interaciunea de epistazie i interaciunea aditiv a genelor. n toate cazurile, dou sau mai multe perechi de gene situate la loci diferii interacioneaz pentru determinarea unui singur caracter (fenotip). Interaciunea complementar a genelor este interaciunea n care dou perechi de gene nealele se completeaz reciproc determinnd fenotipuri diferite. Aceast interaciune poate fi de dou feluri: a) Interaciunea complementar ntre gene nealele (A i B) care singure determin fenotipuri asemntoare. n acest tip de interaciune, dou perechi de gene de la loci diferii interacioneaz complementar pentru determinarea unui singur caracter (fenotip). De exemplu, din ncruciarea unei rase de gini cu penajul alb (AAbb) cu alt ras tot cu penajul alb (aaBB), n generaia F1 rezult descendeni cu penajul de culoare rocat, iar n F2 se obin 9/16 psri cu penajul rocat i 7/16 psri cu penajul alb. Negerhn alb P AAbb x Dorking alb aaBB

F1 F2

AaBb penaj rocat A B 9/16 penaj rocat A bb 3/16 aaB aabb 3/16 1/16 7/16 cu penaj alb

n F1 i F2 genele nealele A i B se completeaz reciproc i determin apariia unui nou fenotip (penajul rocat). b) Interaciunea complementar ntre gene nealele (A i B) care singure determin fenotipuri diferite Din ncruciarea unor rase de gini cu creasta btut (AAbb) cu alte

13

rase care au creasta n form de rozet (aaBB) rezult n F1 gini cu creasta nuciform, iar n F2: 9/16 cu creasta nuciform; 3/16 cu creasta btut; 3/16 cu creasta rozet i 1/16 cu creasta dinat. creast btut P F1 F2 AAbb x creast rozet aaBB

AaBb creast nuciform A B 9/16 creast nuciform A bb 3/16 creast btut aaB aabb 3/16 1/16 creast rozet creast dinat

Creasta nuciform rezult din interaciunea complementar a genelor nealele dominante A i B, iar creasta dinat din interaciunea genelor nealele recesive a i b. Interaciunea de epistazie este interaciunea n care o gen de la un anumit locus inhib efectul genelor de la alt locus. Gena care inhib se numete gen epistatic iar genele inhibate se numesc gene hipostatice. Genele epistatice pot fi dominante (A) sau recesive, dar n stare homozigot (aa). Genele inhibate (B i b) sunt de obicei gene cromogene. n funcie de natura genei epistatice, epistazia poate fi de dou feluri: de dominan i de recesivitate. Epistazia de dominan este un tip de interaciune ntre gene nealele n care o gen dominant de la un locus (A) inhib genele nealele (B i b). inhib Gena A B = neagr b = brun cini albi P AABB x AaBb albi A B 9/16 A bb 3/16 aaB 3/16 negri
14

genele B i b gene cromogene

cini bruni aabb

F1 F2

12/16 albi

aabb Rf = 12 : 3 : 1

1/16

bruni

Concluzie: Toate genotipurile care conin gena epistatic (A) vor manifesta culoarea alb, deoarece genele cromogene (B i b) sunt inhibate. Epistazia de recesivitate este interaciunea ntre gene nealele n care o gen recesiv de la un locus, n stare homozigot inhib genele nealele B i b. inhib Gena aa B = gri b = negri cobai gri P F1 F2 A bb 3/16 aaB aabb Rf = 9 : 3 : 4 Concluzie: Toate genotipurile care conin gena epistatic (aa) vor manifesta culoarea alb, deoarece genele B i b sunt inhibate. Culoarea gri i neagr se manifest n lipsa genei epistatice (aa). Interaciunea aditiv a genelor (poligenia) reprezint tipul de interaciune dup care se transmit toate caracterele cantitative (producia de lapte, de ln, talie, spor mediu zilnic etc). Caracterele cantitative sunt determinate de mai multe perechi de gene nealele numite gene aditive, poligene sau gene minore. Aceste gene i adiioneaz (cumuleaz) efectul pentru determinarea valorii unui caracter cantitativ. Fiecare poligen are un efect minor asupra valorii caracterului cantitativ. Cnd un caracter este determinat exclusiv de poligene, valoarea medie a descendenilor n generaia F1 i F2 se va situa pe media prinilor. S presupunem n mod ipotetic c producia de ln la ovine este determinat numai de interaciunea a dou perechi de gene aditive: genele A i B determin fiecare cte 2 kg ln, iar genele a i b determin fiecare cte 1 kg ln. Merinos 8kg AABB igaie 4 kg aabb 3/16 1/16 4/16 albi AABB A B 9/16 x AaBb gri gri negri gene cromogene cobai albi aabb genele B i b

15

F1 F2

AaBb 6 kg AABB (1/16) - 8 kg AABb (2/16); AaBB (2/16) = 4/16 - 7 kg AaBb (4/16); AAbb (1/16); aaBB (1/16) = 6/16 - 6 kg Aabb (2/16); aaBb (2/16) = 4/16 - 5 kg aabb (1/16) - 4 kg

Rf = 1 : 4 : 6 : 4 : 1 kg 8 7 6 5 4 Valoarea fenotipic (producia de ln) manifestat de fiecare genotip este rezultatul adiionrii efectelor pe care le au genele prezente n genotip (de exemplu AABb = 2 + 2 + 2 + 1 kg = 7 kg sau aabb = 1 + 1 +1 + 1 kg = 4 kg).

Teme de control 1. Din ncruciarea unor taurine din rasa Brun fr coarne cu taurine cu coarne din aceeai ras s-a obinut n F2 un numr de 62 viei fr coarne i 20 viei cu coarne. - Stabilii genotipurile prinilor i a hibrizilor F1 i F2. - Stabilii raportul de segregare fenotipic i genotipic n F2, exprimat n pri i ntocmii schema de hibridare. - Precizai dup ce aciune a genelor s-a transmis caracterul. 2. La taurine, culoarea neagr este determinat de o gen dominant (A) iar culoarea roie de alela sa recesiv (a). Un taur negru este mperecheat cu trei vaci: - cu vaca A care este roie a produs un viel de culoare roie; - cu vaca B care este roie a produs un viel de culoare neagr; - cu vaca C care este neagr a produs un viel de culoare roie. Care este genotipul taurului i a celor trei vaci? ntocmii schema de hibridare. 3. La om, ochii cprui sunt determinai de o gen dominant (B) iar ochii albatri de alela sa recesiv (b). Care este probabilitatea ca primul copil dintr-o familie n care ambii soi au ochii cprui s fie cu ochi albatri? Care esta probabilitatea ca din aceast familie s rezulte copii cu ochi cprui? ntocmii schema de hibridare i precizai dup ce aciune a genelor s-a transmis caracterul.

16

4. Din ncruciarea unor cocoi de culoare neagr i cu creasta btut (AABB) cu gini de culoare roie i creasta dinat (aabb) rezult n generaia F2, 16 combinaii genotipice. ntre genele alele A i a, pe de o parte i B i b pe de alt parte, exist interaciune de dominan complet. - ntocmii schema de hibridare, stabilii fenotipurile i raportul de segregare fenotipic n F2; - Stabilii raportul de segregare fenotipic rezultat n urma retroncrucirii unui diheterozigot i a unui homozigot dominant din F2 cu un genotip homozigot recesiv; 5. La om, gena B = ochi cprui, gena b = ochi albatri, gena R = dreptaci i gena r = stngaci. Un brbat cu ochii cprui i dreptaci se cstorete cu o femeie cu ochii albatri i dreptace. Primul copil are ochii albatri i este stngaci. Ce caractere i cu ce probabiliti vor apare ceilali copii care se vor nate din aceast familie? ntocmii schema hibridrii i precizai despre ce tip de aciune a genelor este vorba. 6. Taurinele din rasa Shorthorn de culoare piersicie provin din ncruciarea unei rase de taurine cu roba de culoare roie (A1A1) cu o alt ras cu roba de culoare alb (A2A2). Stabilii care este genotipul taurinelor de culoare piersicie i care va fi raportul fenotipic rezultat din urmtoarele ncruciri, tiind c ntre cele dou alele A1 i A2 exist o interaciune de dominan incomplet: a) tauri piersicii x vaci piersicii b) tauri piersicii x vaci roii. c) tauri roii x vaci albe 7. Din ncruciarea unei varieti de garoafe cu flori roii (A1A1) cu o alt varietate cu flori albe (A2A2), n generaia F1 rezult garoafe cu flori roz (A1A2), iar n generaia F2 se produce segregarea n raport de 1 : 2 : 1. ntocmii schema de hibridare pn n generaia F2 i precizai dup ce interaciune a genelor s-a transmis culoarea la garoafe. 8. Tipurile de hemoglobine din sange i tipurile de transferine serice la rasele de taurine europene se transmit dup interaciunea codominant a genelor. Stabilii raportul de segregare fenotipic rezultat din urmtoarele ncruciri: a) Tauri cu tipul A de transferine cu vaci cu tipul D de transferine; b) Tauri cu tipul AD de transferine cu vaci cu tipul AE de transferine; c) Tauri cu tipul AB de hemoglobin cu vaci cu tipul AB de hemoglobin. 9. Din ncruciarea unor taurine ntre ele s-au obinut n generaia F1 100% descendeni cu tipul AB de hemoglobin. Din aceti descendeni, 50% aveau tipul D de transferin i 50% aveau tipul DE. Care sunt genotipurile prinilor i a descendenilor? ntocmii schema de hibridare i precizai dup ce aciune a genelor s-au transmis cele dou caractere. 10. a) Precizai dac paternitatea se confirm sau nu se confirm n urmtorul caz: - copilul, grupa 0; - mama grupa B; - tatl prezumtiv grupa AB.
17

b) Un copil are grupa sangvin A, mama are grupa 0. Ce grupe posibile poate avea tatl? ntocmii schemele de hibridare. 11. Starea de fecunditate a cocoilor din rasa Wyandotte alb este determinat de una din interaciunile genelor alele B i b. Cocoii cu genotip BB au creasta btut i fecunditate sczut, cocoii cu genotip Bb au creasta btut i fecunditate normal i cei cu genotip bb au creasta dinat i fecunditate normal. Acest fenomen nu s-a observat la femele. Despre ce interaciune a genelor alele este vorba i la care genotip al cocoilor este prezent? 12. Dai un exemplu de hibrid de carne trirasial la porcine, precizai ce efect manifest acest hibrid i care sunt interaciunile genelor care determin acest efect. 13. Vulpile platinate sunt purttoare a unei gene letale n stare heterozigot (A+a). a) Care va fi raportul de segregare rezultat din ncruciarea unor masculi i femele de culoare platinat? b) Care va fi raportul de segregare rezultat din ncruciarea unor femele palatinate cu masculi cu argintii (aa) ? Precizai despre ce tip de interaciune a genelor este vorba. 14. Ginile avnd caracterul creeper (membre foarte scurte) sunt heterozigote pentru o gen letal recesiv (Cc+). Care va fi raportul de segregare rezultat din ncruciarea unor cocoi i gini cu caracterul creeper? Precizai despre ce interaciune a genelor este vorba. 15. Acondroplazia este un tip de piticism la om care afecteaz o persoan din 10.000 i este determinat de o alel a unei gene. Dou personae cu acondroplazie (genotipul Aa) se cstoresc i au dat natere la un copil pitic i unul normal. Precizai dac acondroplazia este determinat de ctre o alel recesiv sau de o alel dominant. Stabilii genotipurile prinilor, a descendenilor i ntocmii schema de hibridare pn n generaia F1. 16. S presupunem c, culoarea alb a prului la dou rase de porcine este determinat de interaciunea a dou perechi de gene nealele. Precizai care va fi fenotipul hibrizilor F1 i F2 rezultai din ncruciarea unor vieri din rasa Marele alb (AAbb) cu scroafe din rasa Landrace alb (aaBB), tiind c n F1 hibrizii vor fi de culoare neagr, iar n F2 se produce segregarea, rezultnd descendeni de culoare alb i de culoare neagr. ntocmii schema de hibridare, stabilii raportul fenotipic de segregare n F2 i precizai despre ce tip de interaciune este vorba. 17. Concepei o problem de interaciune complementar ntre gene nealele care singure determin fenotipuri asemntoare, la specia ovine, lund n considerare culoarea lnii, cu meniunea c rasa Merinos alb are genotipul AAbb, rasa igaie alb are genotipul aaBB, iar hibrizii rezultai n generaia F1 au lna de culoare neagr. ntocmii schema de hibridare pn n generaia F2 i stabilii fenotipurile descendenilor rezultai.
18

18. Concepei o problem de interaciune complementar ntre gene nealele care singure determin fenotipuri diferite la iepuri, lund n considerare culoarea blnielor (gri, alb cu extremiti negre, agouti i albinotic). 19. Se ncrucieaz gini dintr-o ras cu penajul alb (AABB) cu cocoi dintr-o ras cu penajul rou (aabb). epist. Gena A B i b B = culoarea porumbac b = culoarea roie ntocmii schema de ncruciare i stabilii raportul de segregare fenotipic n F2. Precizai dup ce tip de interaciune a genelor se transmite acest caracter. 20. Se ncrucieaz porcine de culoare neagr (AABB) cu porcine de culoare alb (aabb). epist. Genele aa B i b B = culoarea neagr b = culoarea roie Cele dou culori se vor manifesta numai n prezena genei A care controleaz sinteza unei enzime cu rol n formarea pigmentului melanic. Precizai despre ce tip de interaciune este vorba. 21. Se ncrucieaz berbeci cu lna alb din rasa Merinos (AABB) cu oi din rasa urcan cu lna alb (aabb). epist. A B i b epist. aa bb B culoare neagr; b culoare brumrie ntocmii schema de hibridare pn n F2 i stabilii raportul de segregare fenotipic. Precizai despre ce tip de interaciune a genelor este vorba. 22. Din ncruciarea unor rase de taurine cu producia de lapte de 6000 kg (AABB) cu rase a cror producie medie este de 4000 kg (aabb) se obin n F1 descendeni cu producii intermediare prinilor, iar n generaia F2 16 genotipuri repartizate n 5 clase fenotipice. S se ntocmeasc schema de hibridare i s se stabileasc raportul de segregare fenotipic n F2. Precizai dup ce tip de interaciune a genelor s-a transmis caracterul. 23. La ovine, gena A determin 2 kg ln, gena B determin 2 kg ln, gena a i b cte 1 kg fiecare. - Stabilii ce producie de ln vor avea descendenii rezultai n F1 din ncruciarea unor berbeci cu 8 kg ln cu oi cu 4 kg ln; - Ce producie vor avea descendenii obinui din ncruciarea hibrizilor F1 (masculi) cu oi cu producia de 4 kg? - Ce producie vor avea descendenii obinui din ncruciarea hibrizilor F 1 (6 kg) cu oi cu producie de 7 kg ln?
19

Cum pot fi explicate aceste rezultate?

CAPITOLUL 5

TRANSMITEREA CARACTERELOR DETERMINATE DE GENE SITUATE PE ACELAI CROMOZOM

n urma experienelor de dihibridare efectuate la musculia de oet (Drosophila melanogaster), Morgan elaboreaz teoria cromozomial a ereditii cu cele dou teze: transmiterea nlnuit a genelor situate pe acelai cromozom (linkage-ul) i schimbul reciproc de gene ntre cromozomii omologi (crossingover-ul).

Linkage-ul
Morgan obine ntr-o experien de dihibridare raportul de segregare de 3 : 1 n loc de 9 : 3 : 3 : 1, datorit aezrii genelor nealele (A i B) pe acelai cromozom i transmiterii lor nlnuite. corp cenuiu aripi normale AABB corp negru aripi vestigiale aabb

F1 F2 AABB

AaBb corp cenuiu, aripi normale AaBb corp cenuiu aripi normale AaBb aabb corp negru aripi vestigiale

Rf = 3 : 1 diferit de 9 : 3 : 3 : 1 Concluzie: La hibrizii F1, genele dominante A i B sunt situate pe un cromozom, iar alelele lor recesive a i b pe cromozomul omolog A B a b .

Datorit linkageului, hibrizii heterozigoi din F1 (AaBb) vor produce numai doi gamei (AB i ab) i nu patru gamei (AB, Ab, aB i ab) ca i n dihibridare, cnd genele erau aezate pe cromozomi omologi diferii i segregau independent.
20

Crossingoverul

sau schimbul reciproc de gene ntre cromozomii

omologi, are loc n cursul meiozei i n urma lui se obin de la un organism dublu heterozigot (AaBb) 4 tipuri de gamei: gamei nerecombinai (AB i ab) i gamei recombinai (Ab i aB). ntotdeauna, gameii recombinai sunt ntr-o proporie mai mic. Crossingoverul se produce ntre genele nealele (A i B) situate pe acelai cromozom (nlnuite).

corp cenuiu aripi normale AABB

x corp cenuiu aripi normale

corp negru aripi vestigiale aabb

F1 Gamei A B R1 a b
cenuiu ar. normale 40%

AaBb Ab

x aB A a b b

aabb retroncruciare ab a a B b

AB

ab

a b a b
negru ar. vestigiale 40%

cenuiu ar. vestigiale 10%

negru ar. normale 10%

20% organisme recombinate

Concluzie: Raportul de segregare obinut n urma retroncrucirii fiind diferit de 1:1:1:1 indic faptul c la hibrizii F1(AaBb) genele dominante sunt situate pe un cromozom, iar cele recesive pe cromozomul omolog A B a b ,

dar ntre ele s-a produs crossingoverul, rezultnd la femel 4 tipuri de gamei. Frecvena cu care apar organismele recombinate indic frecvena crossingoverului dintre genele A i B (20%).

Hrile genetice cromozomiale

ntocmirii unei hri genetice cromozomiale sunt:
21

sunt reprezentri grafice ale

locilor n care se gsesc plasate genele pe cromozomii unei specii. Etapele

a) Identificarea genelor situate pe acelai cromozom (a grupelor de linkage) se face n funcie de raportul de segregare obinut n urma unei retroncruciri dintre un organism dublu heterozigot (AaBb) i un organism dublu homozigot recesiv (aabb). Dac raportul obinut este diferit de 1 : 1: 1 : 1, nseamn c genele A i B sunt situate pe acelai cromozom. Dac raportul este egal cu 1 : 1 : 1 : 1 nseamn c genele A i B sunt situate pe cromozomi omologi diferii. b) Stabilirea distanei dintre genele situate pe acelai cromozom. Distana dintre gene se msoar n centimorgani (CM). Un centimorgan este egal cu 1% din frecvena crossingoverului (1% din frecvena organismelor recombinate). c) Stabilirea succesiunii genelor situate pe acelai cromozom se face n funcie de distana dintre gene, respectiv de procentul organismelor recombinate care apar n urma retroncrucirii. De exemplu, dac exist trei gene situate pe acelai cromozom (A, B i C) i ntre genele A i B s-au obinut organisme recombinate n proporie de 20%, ntre B i C 10%, iar ntre A i C 30%, distanele dintre cele trei gene i succesiunea genelor pe cromozom va fi ABC. A
20 CM

B 10CM C

30 CM

Dac ntre genele A i C s-ar fi obinut organisme recombinate n proporie de 10%, distanele i succesiunea genelor pe cromozom ar fi ACB. A 10 CM C
10 CM

20 CM

Teme de control 1. La unele rase de gini gena F = penaj frizat; f = penaj normal; I = penaj alb i i = penaj colorat. Din ncruciarea unor cocoi cu penajul frizat i alb cu gini cu penajul normal i colorat s-au obinut n F1 descendeni cu caracterele dominante. Din retroncruciarea ginilor hibride F1 cu cocoi dublu homozigoi recesivi s-au obinut n R1 dou fenotipuri cu urmtorul numr de indivizi: 21 capete cu penajul frizat i de culoare alb i 20 capete cu penajul normal i colorat. ntocmii schema de hibridare, explicai fenomenul i stabilii modul n care au fost plasate genele pe cromozomi (pe aceeai pereche de cromozomi sau pe perechi diferite de cromozomi). 2. Din ncruciarea Drosophilelor cu ochii roii i membre neproase (caractere domiannte) cu Drosophile cu ochii purpurii i membre proase (caractere recesive) se obin n F1 hibrizi cu caractere dominante. Prin retroncruciarea
22

hibrizilor cu forma homozigot recesiv s-a obinut n generaia de retroncruciare 42 musculie cu ambele caractere recesive. ntocmii schema de hibridare, stabilii raportul exprimat n pri i explicai fenomenul tiind c cele dou gene nealele se afl pe acelai cromozom. 3. Din ncruciarea unor cocoi cu penaj frizat (zburlit) i colorat (FFii) cu gini cu penajul normal i alb (ffII) n F1 s-au obinut descendeni cu penajul frizat i alb. Prin retroncruciarea hibrizilor dublu heterozigoi din F1 cu indivizi dublu heterozigoi recesivi s-au obinut n R1 patru fenotipuri cu urmtorul numr de indivizi: 63 capete, 63 capete, 18 capete, 13 capete. Intocmii schema de analiz genetic i explicai fenomenul care duce la obinerea celor 4 fenotipuri n proporii diferite, tiind c genele F i i, pe de o parte i genele f i I, pe de alt parte, sunt situate pe acelai cromozom. 4. La Drosophila, genele D = picioare lunfi, d = picioare scurte, B = corp gri, b = corp negru, P = ochi roii, p = ochi purpurii, E = ochi normali i e = ochi barr. Din ncruciarea unor femele heterozigote pe cte dou perechi de gene cu masculi dublu recesivi, s-au obinut urmtoarele rezultate:
a) picioare lungi i corp gri 40% corp gri i ochi roii 9,5% picioare lungi i ochi normali 25% picioare lungi i ochi roii 18% picioare lungi i corp negru 10% corp gri i ochi purpurii 40,5% picioare lungi i ochi barr 25% picioare lungi i ochi purpurii 32% picioare scurte i corp gri 8% corp negru i ochi roii 42% picioare scurte i ochi normali 25% picioare scurte i ochi roii 32,5% picioare scurte i corp negru 42% corp negru i ochi purpurii 8% picioare scurte i ochi barr 25% picioare scurte i ochi purpurii 17,5%

b)

c)

d)

ntocmii harta genetic, stabilind care din cele patru gene nealele sunt situate pe acelai cromozom, distana dintre gene i poziia (cis i trans) a genelor situate pe acelai cromozom.

CAPITOLUL 6

TRANSMITEREA NLNUIT CU SEXUL, SAU FENOMENUL DE SEX - LINKAGE

Unele caractere somatice cum sunt: culoarea penajului la unele rase de gini, gradul de mbrcare cu penaj, piticismul la gini sunt determinate de gene situate pe cromozomul sexului sau pe heterozomul Z. De asemenea, unele boli la om, cum sunt daltonismul i hemofilia sunt determinate de gene recesive situate pe heterozomul X. Genele situate pe heterozomii Z sau X se transmit odat cu acetia, fenomen denumit sex linkage. Heterozomii W de la psri i Y de la mamifere nu conin astfel de gene.

23

Caracterele determinate de gene situate pe heterozomi se transmit la descendeni altfel dect caracterele determinate de gene situate pe autozomi.

6.1. Transmiterea nlnuit cu sexul la tipul Abraxas

Psrile prezint un determinism al sexelor de tip Abraxas, caracterizat prin prezena a doi heterozomi identici (ZZ) la mascul i a doi heterozomi diferii (ZW) la femel. Fenomenul de sex linkage are aplicaii practice n avicultur servind la stabilirea sexului, n prima zi de la ecloziune, pe baza culorii penajului sau a gradului de mbrcare cu penaj. Procedeul de stabilire a sexului dup aceste caractere determinate de gene heterozomale poart numele de autosexare. Autosexarea este posibil numai n generaia F1 i numai atunci cnd se ncrucieaz cocoi cu caracterul recesiv cu gini avnd caracterul dominat. Gena S (silver) determin culoarea argintie, iar gena s determin culoarea roie a penajului. Aceste gene sunt gene heterozomale situate pe cromozomul Z. Astfel, din ncruciarea unor cocoi din rasa Cornish cu penajul de culoare roie (ZsZs) cu gini din rasa Rock cu penajul de culoare argintie (ZSW) se obin n prima generaie F1 pui de carne autosexabili dup culoarea penajului. Astfel, toi cocoeii vor fi de culoare argintie i toate puicuele vor fi de culoare roie. Continundu-se mperecherile ntre hibrizii obinui n prima generaie, n generaia a doua F2 se obine urmtorul raport de segregare: 50% cocoi argintii, 50% cocoi roii; 50% puicue argintii, 50% puicue roii. Se constat c n F2 nu este posibil autosexarea deoarece apar i cocoei i puicue de aceeai culoare. Din hibridarea invers dintre cocoi aparinnd rasei Rock argintiu cu gini din rasa Cornish rou n F1 toi cocoeii i toate puicuele manifest culoarea dominant argintie, nefiind posibil stabilirea sexului dup culoarea penajului. Nici n generaia F2 nu este posibil autosexarea, deoarece se obin cocoei i puicue de culoare argintie. mbrcarea rapid i lent cu penaj la unele rase de gini este determinat de asemenea, de gene heterozomale situate pe heterozomul Z. Gena L determin mbrcarea lent cu penaj, iar gena l determin mbrcarea rapid cu penaj. Din ncruciarea unor cocoi cu mbrcare rapid (ZlZl) cu gini cu mbrcare lent
24

(ZLW) se obin n generaia F1 descendeni autosexabili, respectiv cocoi cu mbrcare lent i puicue cu mbrcare rapid. n F2 nu mai este posibil autosexarea. De asemenea, piticismul la gini este determinat de o gen recesiv heterozomal situat pe cromozomul Z.

6.2. Transmiterea nlnuit cu sexul la tipul Drosophila

Determinismul sexelor la tipul Drosophila (musculia de oet, mamifere) se caracterizeaz prin prezena a doi heterozomi identici la femele (XX) i a doi heterozomi diferii la masculi (XY). La Drosophila melanogaster culoarea roie i alb a ochilor este determinat de dou gene alele situate pe heterozomul X. Gena A determin culoarea roie a ochilor, iar gena a determin culoarea alb. De exemplu, din ncruciarea unor masculi cu ochii roii (XAY) cu femele cu ochi albi (XaXa), n generaia F1 toate femelele vor avea ochii roii i toi masculii vor avea ochi albi. n generaia F2, 50% din masculi au ochii roii i 50% ochii albi, de asemenea, la femele, 50% au ochii roii i 50% ochi albi. Aceste rezultate se obin datorit transmiterii nlnuite a genelor care determin culoarea roie i alb a ochilor, odat cu heterozomul X (fenomenul de sex-linkage). Hemofilia i daltonismul la om sunt boli determinate de gene recesive situate pe heterozomul X (gene sex linkate). La masculi, aceste gene se manifest n stare hemizigot (XhY sau XdY) determinnd apariia bolii, iar la femele ele se manifest n stare homozigot (XhXh sau XdXd). Rezult c frecvena de apariie a acestor boli la brbai este mai mare dect la femei. S-a constatat c fetele hemofilice (XhXh) nu supravieuiesc deoarece gena h n stare homozigot determin moartea acestora, ceea ce nsemn c nu pot exista femei hemofilice mature. Aplicaie: Stabilii ce descendeni vor rezulta n urma unor cstorii ntre un brbat sntos i o femeie purttoare; ntre un brbat hemofilic i o femeie sntoas i nepurttoare a genei pentru hemofilie; ntre un brbat hemofilic i o femeie purttoare. Teme de control 1. La om, daltonismul este determiant de o gen recesiv heterozomal (d), iar vederea normal de alela sa dominant (D). Un brbat cu vederea normal cstorit cu o femeie cu vederea normal au trei copii:
25

un fiu daltonic, care la rndul su cstorindu-se are o fat normal; o fat normal, care cstorindu-se are un fiu daltonic i unul normal; o fat normal, care cstorindu-se are cinci fii normali. Cum se poate explica aceast situaie?

2. S se stabileasc raportul se segregare n F1 i F2 rezultat din ncruciarea unor cocoi din rasa Rhode-Island rou (ZsZs) cu gini din rasa Rock porumbac (ZSW). Precizai despre ce fenomen este vorba i n care generaie se poate determina sexul dup culoarea penajului (autosexarea). 3. La gini, mbrcarea lent cu penaj se datorete unei gene dominante heterozomale (L), iar mbrcarea rapid, aciunii alelei sale recesive (l). S se alctuiasc o schem de mperecheri pentru a se crea un hibrid autosexabil, folosind caracterele amintite. 4. La gini, piticismul este determinat de aciunea unei gene recesive heterozomale (dw), iar creterea normal de alela sa dominant (dw+). Din ncruciarea unui coco cu dezvoltare normal cu gini pitice, s-au obinut n F1 50% din femele pitice i 50% din cocoi normali. Ce fel de descendeni i cu ce probabiliti pot s mai rezulte din aceast ncruciare? Stabilii genotipurile prinilor i ntocmii schema de ncruciare pn n F1. Explicai fenomenul. 5. La rasa de gini Cornish rou, culoarea roie este determinat de o gen recesiv (s) plasat pe cromozomul de sex Z. De asemenea, culoarea argintie a rasei Rock este determinat de o gen dominant (S) plasat pe cromozomul de sex Z. a) ntocmii schema de ncruciare dintre un coco Cornish rou i o gin Rock argintie pn n F1 i stabilii culorile pe sexe. b) Stabilii culorile la descendenii rezultai din ncruciarea hibrizilor F1 ntre ei. Precizai ce aplicaii practice are acest fenomen n avicultur.

CAPITOLUL 7

ACIZII NUCLEICI: STRUCTUR I FUNCII

Acizii nucleici, purttorii informaiei genetice, sunt reprezentai de acidul dezoxiribonucleic (ADN) i acidul ribonucleic (ARN). Ei sunt asociai cu proteinele histonice i nonhistonice, alctuind nucleoproteinele care intr n structura cromozomilor. Gena reprezint un fragment mai mare sau mai mic din macromolecula de ADN sau ARN care deine informaia necesar pentru sinteza unei proteine, enzime etc.

26

ADN-ul este purttorul informaiei genetice la organismele eucariote i la unele organisme procariote (bacterii, dezoxiribovirusuri). ADN-ul are o structur primar i una secundar. Structura primar a ADN se refer la elementele din care este alctuit o singur caten. n structura ADN intr bazele azotate purinice (A-adenina, Gguanina), bazele azotate pirimidinice (C-citozina, T-timina), o pentoz (dezoxiriboza) i un radical fosforic. O caten polinucleotidic este alctuit din uniti mai simple numite nucleotide. O nucleotid este alctuit dintr-o baz azotat purinic sau pirimidinic, o molecul de dezoxiriboz i un radical fosforic. Prin legarea unei baze azotate cu dezoxiriboza rezult un nucleosid. Legarea unui radical fosforic de nucleosid d natere la un nucleotid. Polimerizarea nucleotidelor de pe o caten se face deci prin intermediul radicalului fosforic, care leag dou nucleoside nvecinate prin carbonii 3' i 5' din pentoze. Structura secundar a ADN se refer la structura dublu catenar (dublu helix) a macromoleculei de ADN. Cele dou catene ale ADN sunt nfurate helicoidal n jurul unui ax longitudinal imaginar. Una din catene are direcie ascendent ( 3' 5' ) iar cealalt caten are direcie descendent ( 5
'

3' ).

Cele dou catene sunt legate ntre ele prin legturi de hidrogen, care se realizeaz ntre o baz azotat purinic de pe o caten i o baz azotat pirimidinic de pe cealalt caten. ntre adenin i timin exist legturi de hidrogen duble ( A = T) iar ntre guanin i citozin legturi triple ( G = C). n cadrul fiecrei specii, cantitatea de A este egal cu cantitatea de T, iar cantitatea de G este egal cu cea de C.

27

ADN-ul ndeplinete n celul dou funcii: - funcia autocatalitic capacitatea ADN de a se autoreplica (autosintetiza); - funcia heterocatalitic capacitatea ADN de a determina sinteza de proteine specifice cu o anumit secven de aminoacizi. ADN deine informaia genetic codificat pentru sinteza unei proteine. Fiecrui codon din ADN i corespunde un aminoacid n molecula proteic. Fig.8 Structura bicatenar a ADN Replicarea ADN sau biosinteza lui se face dup modelul semiconservativ. n urma replicrii unei molecule de ADN dup acest model, rezult dou molecule fiice bicatenare, fiecare avnd o caten polinucleotidic veche i una nou. Replicarea macromoleculei de ADN ncepe prin ruperea legturilor de hidrogen dintre cele dou catene la una din extremitile ei. n acest fel, cele dou catene se desfac ca un fermoar. Fiecare caten veche adiioneaz nucleotide pe baz de complementaritate, refcndu-se structura dublu catenar a fiecrei molecule fiice. Replicarea ADN dup acest model cuprinde 3 etape: iniierea replicrii, elongaia i terminarea replicrii.

Pentru replicarea ADN sunt necesare mai multe enzime care intervin pe parcursul celor trei etape (topoizomeraza I, ADN-helicazele, primaza, ADN-polimerazele, ADNligazele).

Fig. 9 Replicarea ADN dup modelul semiconservativ

28

Topoizomeraza I este o enzim de restricie care produce tieturi (bree) la nivelul unei singure catene a ADN-ului. ADN-helicazele ptrund prin breele fcute de ctre topoizomeraza I i rup legturile de hidrogen dintre cele dou catene, dnd natere unui ochi de sintez. Primaza este o ARN-polimeraz care sintetizeaz o secven de ribonucleotide numite primer la capetele 3' ale celor dou catene ale ADN-ului. ADN-polimerazele (ADN-polimeraza III la procariote i ADN-polimeraza delta- la eucariote) sunt enzimele cu rol principal n elongaie. Aceast enzim catalizeaz reacia de formare a unor legturi fosfodiesterice dintre gruparea OH3' liber a primerului i atomul de fosfor 5' ascuns al nucleozidului trifosfat ce este ncorporat la noul capt al primerului. Denaturarea i renaturarea ADN Prin nclzirea unei soluii n care se afl ADN la 90-94oC se rup legturile de hidrogen dintre cele dou catene. Dac rcirea soluiei se face brusc, rezult ADN denaturat (monocatenar), deci nu se refac punile de hidrogen. Dac rcirea soluiei se face lent, se refac punile de hidrogen dintre cele dou catene i rezult ADN renaturat. Fenomenul de denaturare - renaturare servete la formarea hibrizilor moleculari de tip ADN ADN de la specii diferite sau ADN ARN. Aceti hibrizi moleculari servesc la studierea filogeniei speciilor, localizarea mutaiilor aprute prin deleie, sau pentru identificarea prezenei unor gene n unele celule (genele care determin sinteza ARNm, ARNr i ARNt). ARNul este purttorul informaiei genetice la unele ribovirusuri (ARNviral) sau ndeplinete alte funcii n sinteza proteinelor la eucariote i procariote. Cea mai mare cantitate de ARN se gsete n citoplasm (mitocondrii i ribozomi). Are structur monocatenar, spre deosebire de ADN care este bicatenar. Catena de ARN rezult prin polimerizarea mai multor ribonucleotide. O ribonucleotid este alctuit dintr-o baz azotat purinic (A sau G) sau o baz azotat pirimidinic (C sau U), o pentoz (riboza) i un radical fosforic. Deci, n ARN uracilul nlocuiete timina, iar riboza nlocuiete dezoxiriboza. ARN: ARN mesager, ARN de transport i ARN ribozomal. Dup funcia, structura i locul pe care l ocup n celul, exist mai multe tipuri de

29

ARN-mesager (ARNm) se sintetizeaz n nucleu i reprezint 2 5% din cantitatea total de ARN din celul. Are rol n transcripie i reprezint, din punct de vedere al informaiei genetice, imaginea complementar a catenei de ADN matri (3' 5') dup modelul creia a fost sintetizat. n ARN-m direcia 3'. El conine informaia genetic sub form bazelor azotate este 5'

codificat, necesar sintezei unei proteine. La eucariote, ARNm precursor conine i intronii i exonii n timp ce ARNm matur conine numai exonii. El duce informaia genetic la nivelul ribozomilor, n citoplasm. ARN de transport (ARNt) reprezint 10 15% din cantitatea total de ARN din celul i are un rol important n procesul de sintez a proteinelor, transportnd aminoacizii activai la nivelul poliribozomilor. Are greutate molecualr mic, fiind alctuit din 70-90 nucleotide. Este monocatenar, dar prezint i poriuni bicatenare (form de trifoi). La eucariote exist peste 40 tipuri de ARNt care transport pe cei cca 20 aminoacizi eseniali. ARN-ribozomal (ARNr) reprezint 80-85% din totalul ARN din celul. Se gsete localizat, n principal, n ribozomi. Este alctuit din 120-1000 nucleotide. Particip la procesul de sintez a proteinelor (translaie) la nivelul poliribozomilor. Are o compoziie n nucleotide foarte asemntoare la diferite organisme. Teme de control 1. Din ce este alctuit un nucleosid i un nucleotid? 2. Care sunt bazele azotate purinice i bazele azotate pirimidinice care intr n structura ADN-ului? 3. La ce se refer structura primar i cea secundar a ADN-ului? 4. ntre care baze azotate exist legturi duble i ntre care exist legturi triple? 5. Cte molecule fiice de ADN rezult n urma replicrii unei molecule de ADN dup modelul semiconservativ? 6. Ce structur (monocatenar sau bicatenar) are ADN-ul denaturat i ADN-ul renaturat? 7. La ce servete fenomenul de denaturare-renaturare a ADN-ului? 8. Din punct de vedere structural, care este diferena ntre ADN i ARN? 9. Care este diferena ntre o dezoxiribonucleotid i o ribonucleotid? 10. Ce se nelege prin transcripia informaiei genetice? 11. Ce sunt exonii i intronii care intr n structura unei gene i la care organisme se ntalnesc (eucariote sau procariote)? 12. La eucariote numrul tipurilor de ARNt este egal cu numrul de aminoacizi eseniali (20) sau este diferit de acesta?

30

CAPITOLUL 8

FUNCIONAREA ADN-ULUI I EXPRESIA GENELOR

Structura genelor la procariote i eucariote La procariote, genele au o structur continu fiind alctuite numai din secvene informaionale (exoni). La eucariote, genele au structur discontinu fiind alctuite din secvene informaionale (exoni) i din secvene noninformaionale (introni). Exonii sunt secvene de nucleotide din ADN care conin informaia genetic pentru sinteza unei proteine cu o anumit secven de aminoacizi. La fiecare aminoacid din protein i corespunde n ADN un codon sau triplet (secven de trei nucleotide). La procariote, de pe mai multe gene se sintetizeaz o singur molecul de ARNm numit ARN policistronic, n timp ce la eucariote, de pe fiecare gen se sintetizeaz o molecul de ARNm. Intronii sunt secvene de ADN noninformaional (ADN repetitiv). La eucariote, n urma transcripiei se sintetizeaz de pe fiecare gen o molecul de ARNm precursor ce conine i exonii i intronii, apoi intronii sunt eliminai, rezultnd ARNm matur, care migreaz n citoplasm la nivelul ribozomilor, unde duce informaia genetic pentru sinteza proteinelor. Codul genetic este asemntor unui alfabet n care cu ajutorul celor 4 baze azotate (A, G, C, U) se pot forma 43 = 64 cuvinte de cod (codoni). Deci, codul genetic din ARNm cuprinde 64 codoni, din care numai 61 codoni specific pe cei 20 aminoacizi eseniali. Trei codoni (UAA, UAG i UGA) sunt numii codoni stop sau nonsens, deoarece nu specific nici un aminoacid i ei se gsesc la sfritul unui mesaj genetic (gene). Caracteristicile codului genetic: 1. Codul genetic este universal, deci aceeiai codoni codific acelai aminoacid la toate speciile; 2. Codul genetic este degenerat, adic mai muli codoni pot codifica acelai aminoacid; 3. Codul genetic este nesuprapus, deci doi codoni vecini nu-i mprumut unul altuia nucleotide; 4. Codul genetic este lipsit de virgule, adic ntre codonii vecini nu exist semne de punctuaie, nu exist spaii.
31

ntre succesiunea codonilor din catena polinucleotidic a ADN sau ARNm i succesiunea aminoacizilor dintr-o caten polipeptidic (protein) exist o Sinteza proteinelor se realizeaz la nivelul poliribozomilor din citoplasm i cuprinde dou etape: 1. Transcripia, care const n copierea informaiei genetice (secvenei nucleotidelor) din catena matri a ADN-ului n molecula de ARN mesager. Are loc n nucleu. 2. Translaia, care const n decodificarea informaiei genetice din ARN mesager i sinteza unei proteine cu o anumit secven de aminoacizi. La fiecare codon din ARNm n protein i corespunde un aminoacid (din cei cca 20 aminoacizi eseniali). Teme de control 1. La ce se refer structura continu a genelor de la procariote i structura discontinu a genelor de la eucariote? 2. Ce diferen exist ntre ARNm matur i ARNm precursor la eucariote? 3. Din cei 64 codoni ai codului genetic din ARNm, ci codific pe cei 20 aminoacizi eseniali? 4. Ce se nelege prin cod genetic universal i prin cod genetic degenerat? corespondent numit colinearitate.

CAPITOLUL 9

STRUCTURA MOLECULAR A CROMOZOMILOR LA PROCARIOTE I EUCARIOTE

Sistemele biologice cuprind dou tipuri de organizare: organizarea acelular (viral) i organizarea celular, ntlnit la procariote i eucariote. Virusurile au organizare acelular i prezint ca i material genetic fie ADN (dezoxiribovirusuri) fie ARN (ribovirusuri) care intr n structura cromozomului viral. Unele virusuri conin o singur molecul de ADN monocatenar (fagul X 174, fagul M 13) care intr n structura cromozomului viral. Majoritatea virusurilor au cromozomul alctuit dintr-o molecul de ADN bicatenar (fagul T2,
32

Fagul T4, SV 40, fagul lambda () etc). Un numr mic de virusuri (ribovirusuri) au cromozomul alctuit din ARN monocatenar (virusul turbrii, virusul gripei, virusul poliomielitei, virusul MS2, virusul mozaicului tutunului etc). Celulele procariote (bacterii, actinomicete, alge albastre-verzi,

microorganismele unicelulare etc) nu au nucleul organizat, materialul lor genetic se gsete n citoplasm, fiind nedelimitat de o membran nuclear i se numete nucleoid. De exemplu, bacteriile conin un singur cromozom mare i cteva plasmide (ADN circular). Celulele eucariote au nucleul nconjurat de membran nuclear ce conine mai muli cromozomi, fiecare din acetia coninnd o molecul de ADN complicat mpturit. Cele mai mari diferene n structura i organizarea molecular exist ntre cromozomii eucariotelor i cei ai procariotelor.

9.1. Structura molecular a cromozomului bacterian

Cromozomul de la E. coli este o unitate condensat obinut prin pliere i superspiralizare numit nucleoid sau cromozom pliat, care conine o singur molecul de ADN bicatenar de form circular. Cromozomul bacterian nu poate exista dect sub form superspiralizat (superpliat), deoarece lungimea lui este de 1300 m (1,3 mm), n timp ce celula are un diametru de 1-2 m. Cromozomul pliat al bacteriei E. coli conine 40-50 bucle, iar la cromozomul superpliat fiecare bucl prezint rsuciri secundare alctuite din cca 400 perechi nucleotide. Buclele sunt meninute cu ajutorul unei ARN cu rol de linker. Pe lng ADN i ARN, cromozomul bacterian conine i cantiti mici de proteine (lipsesc cele histonice), care sunt responsabile de aranjamentul cu bucle multiple a ADN.

Fig. 10 Structura molecular a cromozomului bacterian a) cromozom nepliat; b) cromozom pliat; c) cromozom superpliat
33

9.2. Structura molecular a cromozomului la eucariote

Fiecare cromozom la eucariote conine o singur molecul de ADN de lungime enorm, care se gsete sub form pliat i superpliat. Cromozomii sunt alctuii din cromatin, care conine un agregat complex format din ADN i proteine histonice i nonhistonice. Histonele sunt proteine bazice ce conin 100-200 aminoacizi i sunt responsabile de meninerea structurii cromozomului. Exist 5 tipuri de histone, notate cu: H1, H2A, H2B, H3 i H4. Proteinele nonhistonice sunt reprezentate de unele polipeptide cum sunt: ADN-polimerazele, ARN-polimerazele, ligazele, helicazele, unele proteine reglatoare ale transcripiei, proteinele structurale (actina, tubulina). La microscopul electronic, cromatina din cromozomi arat ca un irag de perle, fiecare perl reprezentnd un nucleozom. Unitatea organizatoric a firului de cromatin este nucleozomul. Un nucleozom este alctuit dintr-un octamer de histone (cte 2 molecule din histonele H2A, H2B, H3 i H4) i un segment de ADN nucleozomic (alctuit din cca 145 perechi de nucleotide) care nconjoar octamerul de histone de aproximativ 1,75 ori. n structura nucleozomului intr i ADN internucleozomic (alctuit din cca 55 perechi de nucleotide) care este asociat cu histona H1. Acest tip de ADN face legtura ntre 2 nucleozomi vecini.

Fig. 11 Structura nucleozomului Fibrele de cromatin din cromozomul metafazic al eucariotelor prezint mai multe nivele de organizare: fibra nucleozomal, fibra solenoidal, cromatida. Fibra nucleozomal are diametrul de 11 nm i rezult prin alturarea nucleozomilor unul dup altul.

34

Fibra solenoidal este mai scurt i mai groas, avnd diametrul de 30 nm i apare prin mpachetarea fibrei nucleozomale cu ajutorul histonei H1, cu cte 6 nucleozomi pe rnd. Cromatida cromozomului metafazic reprezint ultimul nivel de organizare a cromatinei. Ea se obine prin condensarea (superplierea) fibrei solenoidale. Aceast fibr are diametrul de cca 700 nm.

9.3. Organizarea secvenelor de nucleotide n ADN-ul cromozomal al eucariotelor

Aproximativ 60% din ADN-ul eucariot este reprezentat de ADN informaional (gene), iar restul de 40% din ADN noninformaional (care nu codific aminoacizi). Secvenele de ADN noninformaional sunt secvene alctuite din cteva zeci, sute sau mii de perechi de nucleotide care se repet. ADN-ul din genomul eucariot conine 3 fraciuni: ADN cu secvene unice, ADN cu secvene nalt repetate i ADN cu secvene mediu repetate. ADN cu secvene unice include secvenele de nucleotide ale genelor structurale i secvenele adiacente ale acestora (promotorul, operatorul, terminatorul etc). Cromozomul viral i cel al procariotelor conine, cu mici excepii, numai secvene unice (informaionale). La om, aceste secvene reprezint cca 50% din genom, iar la Drosophila melanogaster 70%. ADN cu secvene nalt repetate reprezint 5-45% din genom. Aceste secvene, de obicei sunt foarte scurte i sunt aranjate n blocuri care se repet n tandem. Ele sunt localizate mai ales n regiunea telomerelor i a centromerului i constituie ADN satelit. n funcie de numrul perechilor de nucleotide care compun monomerii din structura ADN nalt repetat putem avea: ADN satelit, cuprinznd monomerii alctuii din mii perechi de nucleotide; minisateliii, care au monomerii formai din cteva sute de perechi de nucleotide; microsateliii, care cuprind 1-6 perechi de nucleotide repetate sub form de tandem. Microsateliii i minisateliii, avnd un polimorfism accentuat, servesc la stabilirea amprentei genetice (amprenta ADN), la studiul biodiversitii speciilor i raselor i la cartarea genic.
35

ADN cu secvene mediu repetate reprezint 1-40% din genomul eucariotelor. Acesta include secvene de nucleotide care se repet de la cteva ori pn la 100.000 ori pe genom. n acest ADN, monomerii nu sunt asociai n tandem, ci sunt dispersai n tot genomul. Genele care controleaz sinteza ARNr, ARNt, cele care controleaz sinteza histonelor, sunt alctuite din secvene mediu repetate. Aceste gene se gsesc ntr-un numr mare de copii per celul (500-2000 copii). Tot din aceast categorie de ADN fac parte i elementele genetice mobile (transpozomii), care sunt secvene de nucleotide care se pot mica n cromozom dintr-o poziie n alta i ntre cromozomi diferii. Transpozomii pot determina ruperea i rearanjarea cromozomului, modificarea expresiei genelor, mutaii stabile, inactivarea genelor. Ei pot fi folosii ca i vectori n ingineria genetic. Teme de control 1. Ci cromozomi conine bacteria E. coli? 2. Din ce este alctuit cromatina care intr n structura cromozomilor la eucariote? 3. Din ce este alctuit un nucleozom? 4. Cum rezult fibra nucleozomal i ce diametru are? 5. Ce este ADN-ul satelit, de cte feluri este i la ce poate fi utilizat? 6. ADN-ul cu secvene nalt repetate i mediu repetate intr i n structura genelor de la procariote? CAPITOLUL 10

MUTAIILE I MUTAGENEZA
Definiia i clasificarea mutaiilor Mutaia reprezint orice modificare n structura i funcia materialului genetic (cromozomi i gene) i ca urmare, orice modificare aprut n fenotip. O schimbare n structura sau n numrul cromozomilor reprezint o aberaie cromozomial, iar o schimbare n structura chimic a ADN-ului dintr-o gen reprezint o mutaie genic. Mutaiile pot fi clasificate dup mai multe criterii, n urmtoarele categorii: a) dup natura materialului genetic implicat n mutaii, mutaiile pot fi: mutaii genomice (de numr), mutaii cromozomiale (de structur), mutaii genice;

36

b) dup natura celulelor n care au loc mutaii, mutaiile pot fi: mutaii somatice i mutaii germinale sau gametice. Mutaiile somatice apar n celulele corpului unui organism i sunt transmise la toate celulele care provin din celula mutant original. Niciodat mutaiile somatice nu se transmit la descendeni. Mutaiile germinale sau gametice apar n celulele germinale ale unui organism (ovogonii i spermatogonii). Aceste mutaii se regsesc i n gamei i se transmit la descendeni. c) dup modul de apariie, mutaiile pot fi spontane i induse sau provocate cu ajutorul agenilor mutageni. Mutaiile spontane sunt produse de radiaiile cosmice i variaiile brute de temperatur i apar cu o frecven de 1/100000 1/1000000. d) dup direcia de realizare, pot s existe mutaii nainte (directe), cnd gena normal (A) se transform n gen mutant (a) si mutaii napoi (inverse), cnd gena mutant se transform n gen normal e) dup aciunea genei mutante, mutaiile pot fi dominante sau recesive. f) dup efectul fenotipic sau gradul de viabilitate,mutaiile pot fi:duntoare, letale si viabile.

10.1. Mutaiile genice

Gena este un fragment din macromolecula de ADN i intr n structura unui cromozom. Fiecare gen este alctuit de la 900 - 1500 nucleotide. Numrul i secvena nucleotidelor dintr-o gen reprezint informaia genetic sau mesajul genetic. Dac din diferite cauze se produc modificri n numrul i secvena nucleotidelor dintr-o gen rezult o gen mutant. Aceste modificri se pot realiza prin nlocuirea, pierderea sau adugarea unui nucleotid sau grup de nucleotide sau prin inversarea ordinii nucleotidelor din structura unei gene. Astfel de modificri care se produc n numrul i secvena nucleotidelor dintro gen poart numele de mutaii genice sau punctiforme. Mutaia la nivelul genei se manifest i prin modificarea funciei acesteia. O gen mutant va determina un caracter diferit fa de cel determinat de o gen normal. Agenii mutageni i mecanismul de producere a mutaiei genice

37

Orice agent sau substan care prin aciunea sa asupra materialului genetic produce o mutaie se numete agent mutagen. Agenii mutageni pot fi de trei tipuri: chimici, fizici i biologici. Agenii mutageni chimici sunt reprezentai de substane chimice care acioneaz asupra genelor (acizilor nucleici), modificndu-le structura normal. Aceti ageni produc mutaii n structura genelor prin urmtoarele mecanisme: substituie, cnd o baz azotat este nlocuit cu alt baz. deleie, cnd se pierde una sau mai multe nucleotide din structura ADN-ului sau genei; adiie, cnd se adaug una sau mai multe nucleotide n structura unei gene; inversie, cnd se inverseaz ordinea nucleotidelor din structura unei gene. Substanele chimice mutagene pot fi de trei feluri: - substane chimice mutagene care acioneaz direct asupra ADN-ului n faz stabil; - substane chimice mutagene care acioneaz n momentul replicrii ADN-ului i a sintezei ARNm; - substane chimice mutagene radiomimetice. a) Substanele chimice mutagene care acioneaz direct asupra ADN-ului n faza stabil sunt reprezentate de acidul azotos, hidroxilamina. Acidul azotos sau nitros (HNO2) are proprietatea de a dezamina citozina, adenina i guanina. Prin dezaminare, citozina este transformat n uracil, adenina n hipoxantin, iar guanina n xantin. Prin dezaminarea citozinei i transformarea ei n uracil, n molecula de ADN, rezult n loc de perechea CG, perechea de baze AT. Acidul azotos produce substituia de baze azotate prin tranziie. Efectul mutagen al acidului azotos const n formarea unei molecule de ADN n care o caten este mutant (A-T) iar cealalt este normal (G-C). b) Substane chimice mutagene care acioneaz n momentul replicrii ADN sau sintezei ARNm sunt cunoscute sub numele de analogi ai bazelor azotate, ei avnd structur asemntoare bazelor azotate. Analogii bazelor azotate sunt reprezentai de: 5bromuracil, 5

bromdeoxiuridina, fluoruracilul, 2- aminopurina. Dac n cursul replicrii ADN n loc de timin sunt ncorporate aceste substane analoage, atunci dup cteva replicri ale ADN se vor produce modificri n secvena nucleotidelor. ncorporarea 5bromuracilului sau 5 bromdeoxiuridinei va duce la apariia n catena de ADN a perechii adenin - bromuracil n loc de perechea

38

A-T. Bromuracilul se leag de G. Aceasta are ca efect nlocuirea n noua molecul de ADN a perechii A-T cu perechea de baze G-C. c) Substane chimice mutagene radiomimetice - acioneaz asemntor radiaiilor Din aceast categorie fac parte substanele alchilante: dietilsulfatul, dimetilsulfatul, metilmetansulfonatul, etilmetansulfonatul, iperita. Aceste substane posed gruparea alchil. Substanele alchilante acioneaz asupra moleculelor de ADN prin: - alchilarea radicalului fosforic, ceea ce duce la ruperea legturilor dintre dezoxiriboz i radicalul fosforic cu dezagregarea moleculei de ADN; - alchilarea bazelor azotate i transformarea lor n analogi ai acestora, ceea ce are ca urmare erori de replicare a moleculei de ADN; - eliminarea bazelor purinice si nlocuirea cu baze pirimidinice (depurinizarea ADN), ceea ce duce la mutaii prin substituie de tipul transversiei. Ageni mutageni fizici Radiogenetica este ramura geneticii, care studiaz efectele mutagene i teratogene ale radiaiilor naturale i ale celor artificiale. Agenii mutageni fizici sunt reprezentai de dou categorii de radiaii: ionizante i neionizante. Radiaiile ionizante pot fi clasificate n: - radiaii electromagnetice - razele X i Gamma, a cror lungime de und este mic i au o putere de penetraie foarte mare, producnd mutaii la toate organismele, prin fenomenul de ionizare; - radiaii corpusculare - razele Alfa, Beta, protonii, neutronii leni i rapizi i particule grele, care sunt particule cu energie mare dar cu putere de penetraie mic. Razele Alfa, Beta penetreaz esuturile moi doar o fraciune de mm sau civa mm (razele Beta). Cantitatea de radiaie primit de esuturile iradiate este numit doz de iradiere i se msoar n razi. Un rad reprezint cantitatea de energie absorbit de un gram de esut. Radiaiile neionizante (ultraviolete) produc mutaii atunci cnd acioneaz asupra unor celule aezate n strat subire, cum sunt culturile de microorganisme (bacterii, mucegaiuri, alge, etc.). Cea mai mare absorbie pentru razele ultraviolete pe care o prezint molecula de ADN se realizeaz la lungimea de und de 2600 . ionizante provocnd rupturi i restructurri ale acizilor nucleici.

39

10.2. Mutaiile genomice (de numr)

Mutaiile genomice (de numr) se pot clasifica n dou categorii: euploidia, care presupune existena unui set sau mai multor seturi de cromozomi n celele i aneuploidia, care presupune existena unuia sau mai multor cromozomi n plus sau n minus fa de numrul normal. Euploidia poate fi de mai mute feluri: monoploidia (n nucleul celulelor somatice exist un singur set de cromozomi), diploidia (indic existena a dou seturi de cromozomi -2n), triploidia (3n), tetraploidia (4n), hexaploidia (6n). Cnd n celule exist mai mult de dou seturi de cromozomi este vorba despre poliploidie. Poliploidia este mai frecvent ntlnit la plante. Proporia plantelor poliploide din flora spontan crete de la ecuator spre poli. Aceasta dovedete c poliploidia este o modalitate de adaptare a plantelor la condiiile aspre de clim. Poliploidia este de dorit la plantele furajere, deoarece aceste plante poliploide au partea vegetativ mai bogat i n acest fel ele asigur producii mai mari de furaje la hectar. La animale, poliploidia este rar ntlnit. Se ntlnete la organisme ce se reproduc asexuat. Poliploidia este de dou feluri: autopoliploidia i allopoliploidia. Autopoliploidia presupune existena n celulele somatice a unor seturi de cromozomi identice. Formele autopoliploide rezult n urma multiplicrii garniturii cromozomiale proprii n timpul diviziunii meiotice, fenomen numit endoreplicare cromozomial. Allopoliploidia presupune existena n celulele somatice a unor seturi de cromozomi care nu sunt identice. Allopoliploizii apar n urma unor ncruciri ntre indivizi care aparin unor specii diferite. Aneuploidia presupune existena unuia sau mai multor cromozomi n plus sau n minus fa de starea normal (2n). Aneuploidia poate fi de dou feluri: hipoploidie i hiperploidie. Hipoploidii: - monosomia, lipsa unui cromozom dintr-o pereche de cromozomi omologi (2n1); - nulisomia, lipsa unei perechi de cromozomi omologi (2n 2); - dubla monosomie, afecteaz mai multe perechi de cromozomi (2n 1 1). Hiperploidii: - trisomia, apariia unui cromozom n plus, identic cu cromozomii unei perechi oarecare de omologi (2n + 1); - dubla trisomie (2n + 1 + 1);
40

- tetrasomia, prezena unei perechi de cromozomi n plus (2n +2). Aneuploidia este frecvent ntlnit la plante i rar la animale. La animale, cazurile de aneupolidie determin stri anormale, duc la letalitate. Aneuploidia poate avea trei cauze: nondisjuncia unor perechi de cromozomi n timpul meiozei, fenomenul de fuziune - fisiune centromeric i ntrzierea anafazic a unor cromozomi. n timpul diviziunii meiotice, dac are loc fenomenul de nondisjuncie cromozomial sau nesegregare la nivelul unei perechi de cromozomi, vor rezulta la sfritul meiozei gamei care au un cromozom n plus, iar alii care au un cromozom n minus. Participarea la fecundare a unor gamei neechilibrai genetic conduce la obinerea de organisme aneuploide. Prin fuziunea centromeric a doi cromozomi telocentrici rezult un cromozom metacentric (duce la micorarea numrului de cromozomi din celul). Prin fisiunea unui cromozom metacentric vor rezulta doi cromozomi telocentrici (mrirea numrului de cromozomi din celul). Unii cromozomi n timpul anafazei meiozei migreaz cu ntrziere spre polii celulei i nu vor mai intra n nucleul celulei sexuale, avnd ca efect reducerea numrului de cromozomi din celulele rezultate n urma fecundaiei.

10.3. Mutaiile cromozomiale sau de structur

n timpul diviziunii celulare i n special n timpul meiozei, anumii factori externi pot duce la fragmentarea cromozomilor. Fragmentele rupte pot s se realipeasc de unde s-au rupt i atunci totul reintr n normal, dar altele pot s se realpipeasc greit, ceea ce duce la modificri ale nsuirilor pe care le determin genele coninute n fragmentele respective de cromozomi. Mutaiile cromozomiale care afecteaz structura cromozomilor, sunt: deleia, duplicaia, inversia i translocaia. Deleia presupune ruperea i pierderea unui segment intercalat dintr-un cromozom. Deleia pot avea loc n meioz i mitoz, ns cnd se produce, la nivelul celulelor germinale au repercursiuni grave i duc la obinerea de gamei neviabili sau nefuncionali. Deleia poate fi heterozigot, cnd numai un cromozom din perechea de omologi pierde fragmentul respectiv i homozigot, cnd ambii cromozomi omologi pierd acelai fragment.

41

n 1977 s-a constatat n Belgia, c fenomenul numit culard (crup dubl), pe care-l manifest rasa de carne belgian Blanc Blue Belge se datoreaz unei deleii de 11 nucleotide din gena miostatinei (hormon tisular ce mediaz reflexele muchilor). Duplicaia presupune ruperea unui fragment dintr-un cromozom i realipirea lui la cellalt cromozom omolog. Cromozomul care primete fragmentul respectiv va avea dou seturi de gene de acelai fel. Deoarece genele de pe un cromozom se afl n doz dubl, nsuirile acestor indivizi se vor dezvolta altfel dect la organismele fr duplicaie. Duplicaiile pot provoca la indivizii care le posed, accentuarea puternic a nsuirilor determinate de genele duplicate. Duplicaia genelor care determin rezistena la unii duntori sau la unele boli criptogamice (determinate de ciuperci) la plante poate duce la obinerea unor descendeni deosebit de valoroi pentru practic. Inversia presupune ruperea unui fragment dintr-un cromozom i realpirea lui la locul de unde s-a rupt dup ce a fcut o rotaie de 180o. Inversia poate fi homozigot i heterozigot. Inversia homozigot afecteaz ambii cromozomi dintr-o pereche, iar cea heterozigot doar un cromozom. Inversiile homozigote nu au urmri grave n mersul meiozei. Din acest motiv, inversiile homozigote constituie un factor de evoluie, deoarece prin schimbarea poziiei genelor ntr-un cromozom, se modific i funcia. Inversiile heterozigote care au loc n cursul meiozei conduc la obinerea de gamei neviabili i de aici la cazuri de infecunditate. Translocaia const n detaarea unui fragment de la un cromozom dintr-o pereche i alipirea lui la un cromozom dintr-o alt pereche. Translocaia poate fi terminal, cnd segmentul de cromozom translocat se ataeaz la unul din capetele cromozomului neomolog i intercalat, cnd segmentul de cromozom translocat se ataeaz la alt cromozom neomolog n zona mijlocie a braului. Translocaia poate fi nereciproc, cnd transferarea unui segment de cromozom este unidirecional i reciproc, cnd au loc interschimburi de segmente cromozomiale ntre cromozomi neomologi. Translocaia reciproc poate fi homozigot, dac sunt afectai ambii cromozomi dintr-o pereche de omologi sau heterozigot, dac este afectat numai unul. n translocaia homozigot reciproc sinapsa cromozomilor n meioz este normal i gametogeneza decurge normal. n cazul translocaiei reciproce heterozigote de obicei se obin gamei neviabili. Gameii viabili se obin atunci cnd
42

ntr-un gamet ajung ambii cromozomi care au suferit translocaia, iar n cellalt gamet ajung cromozomii ce nu au suferit translocaia. Translocaia heterozigot are ca efect semisterilitatea.

Teme de control 1. Ce sunt mutaiile genice sau punctiforme? 2. Prin ce mecanisme se pot realiza mutaiile n structura genelor de ctre agenii mutageni chimici? 3. Dezaminarea unei nucleotide duce duce la substituia de baze azotate sau la deleie? 4. Ce rol au analogii bazelor azotate n producerea mutaiilor? 5. Care este diferena dintre poliploidie i aneuploidie? 6. Care sunt avantajele poliploidiei la plantele furajere? 7. Care sunt cauzele aneuploidiei? 8. Care este diferena ntre mutaiile genomice (de numr) i cele cromozomiale (de structur)? 9. Care sunt principalele efecte negative ale mutaiilor de structur?

CAPITOLUL 11

NOIUNI DE EREDOPATOLOGIE

11.1. Boli ereditare la taurine

Brevignatismul inferior malformaie a sistemului osos, care se manifest prin scurtarea mandibulei, caracterul fiind letal. Este determinat de o gen recesiv heterozomal (aezat pe cromozomul X). Brevignatismul superior se manifest prin scurtarea maxilarului superior, vieii au cap de Buldog sau tiuc. Este determinat de o gen recesiv, este o anomalie neletal. Cataractul congenital anomalie neletal, care se transmite recesiv, este caracterizat prin opacitatea cristalinului, defect care se constat la natere sau dup primele luni de via.

43

Hidrocefalia anomalie letal, care se transmite recesiv, const n acumularea de lichid n cutia cranian, fapt care afecteaz esuturile cerebrale, provocnd n special atrofia creierului. Achondroplazia anomalie a scheletului, se poate prezenta sub mai multe forme. O astfel de anomalie, la care moartea survine n lunile 68 de gestaie, urmat de expluzarea imediat a ftului, se caractetzeaz prin scurtarea coloanei vertebrale, hernie inghinal, fruntea rotund i umflat, capul de buldog, vlul palatin despicat i membre scurte. Aceast stare anormal se transmite parial dominant, astfel de cazuri fiind ntlnite la rasele Jersey, Hereford i Friz britanic. n alt form de achondroplazie, vieii se nasc, ns mor la cteva zile dup natere, datorit dificultilor de respiraie. Anomalia este determinat de gene letale recesive. Hidropizia const n acumularea de lichid n cavitatea abdominal, toracic i subcutanat. Vieii se nasc mori sau mor imediat dup natere. Este o anomalie letal, care se transmite recesiv, fiind determinat de o gen autosomal. Herniile constau n deplasarea total sau parial a unui organ n afara nveliului su normal sau a cavitii n care se afl n mod fiziologic. Sunt hernii cervicale, inghinale, ombilicale, diafragmatice. La taurine se semnaleaz mai frecvent hernia ombilical, care apare la 810 zile dup ftare i este determinat de gene recesive. Hipotricoza se manifest prin lipsa prului de pe anumite regiuni corporale sau de pe ntregul corp al animalului. Este determinat de gene recesive. Polimastia i politelia const n prezena uneia sau mai multor glande mamare sau mameloane, frecvena este de 15 50%, tipul de transmitere fiind cel dominant. Epilepsia este o boal ereditar a sistemului nervos. Se pare c este determinat de o gen autosomal cu ereditate dominant. Nanismul se manifest sub forma unei creteri reduse a tuturor prilor corpului, datorit unui defect de proliferare al celulelor la nivelul cartilajului de cretere. Este determinat de o gen recesiv. Polidactilismul se manifest prin apariia unor ongloane supranumerare. Anomalia este dat de o gen dominant.

44

Anchiloza se caracterizeaz prin curbarea membrelor anterioare, datorit sudrii oaselor la nivelul articulaiilor. Este o anomalie ereditar care se transmite recesiv. Paralizia afecteaz n special membrele posterioare. Vielul moare imediat dup natere. Se transmite recesiv. Sindactilia se manifest prin prezena unui singur onglon, de regul la membrele posterioare. Anomalia este determinat de o gen recesiv.

11.2. Boli ereditare la porcine

Atresia anal lipsa orificiului anal. Moartea survine n cteva zile de la natere, ntruct animalele nu pot elimina fecalele. Dup unele date sa pare c aceast anomalie este provocat de dou perechi de gene alelice, cu interaciune epistatic. Herniile ombilicale i ingvino-scrotale, apar evident imediat dup ftare sau pn cel mult la 30 zile i afecteaz mai mult partea stng. Unii cercettori consider c sunt determinate de doi factori recesivi, iar herniile ombilicale se datoresc tipului de transmitere dominant. Polidactilia sunt afectate cel mai des membrele anterioare. Transmiterea este dominant. Sindactilia este o anomalie ereditar cu transmitere dominant. Se caracterizeaz prin prezena unui singur onglon cu poziie vertical. Membrele anterioare ngroate se datoresc unei infiltraii gelatinoase de esut conjunctiv n locul esutului muscular. Este o anomalie letal i se transmite recesiv. Amelia este o anomalie caracterizat prin absena tuturor membrelor. Se transmite recesiv.

11.3. Boli ereditare la psri

Ataxia puilor de gin apare frecvent i constituie o consecin a tulburrilor funcionale ale cerebelului. Se transmite recesiv i este letal. Alopecia se caracterizeaz prin absena total a penelor sau prin prezena unor pene rudimentare pe cap, gt i vrful cozii. Este o anomalie semiletal recesiv. Polidactilia anomalie frecvent la psri, se caracterizeaz prin prezena unor falange n plus i este determinat de factori letali recesivi.

45

Malformaii ale ciocului ciocul de papagal, alungirea sau curbarea n sus a ciocului. Nanismul este produs de o gen recesiv (dw) Z-lincat. Nomalia apare evident la vrsta de 8-10 sptmni i devine pregnant la vrsta de 5 luni cnd greutatea masculilor (ZdwZdw) este mai mic cu 40% i a femelelor (ZdwW) cu 30% fa de psrile normale de aceeai vrst.

CAPITOLUL 12

INGINERIA GENETIC I APLICAIILE SALE

Definiie: Ingineria genetic este un ansamblu de operaii i tehnologii efectuate in vitro cu gene, cromozomi i uneori cu celule ntregi , n scopul obinerii unor organisme cu proprietii ereditare premeditate sau prestabilite. Tehnologiile ingineriei genetice sunt: 1. Tehnologia ADN recombinat 2. Hibridarea i cibridarea celular

12.1. Tehnologia ADN recombinant

presupune introducerea i

funcionarea unei gene numite pasager, ntr-o celul sau organism numit receptor, care sufer un proces de transformare. Pentru ca o gen strin (pasagerul) s poat ptrunde ntr-o celul receptoare i s nu fie degradat enzimatic, ea trebuie introdus ntr-un vehicul adecvat (plasmid, virus), rezultnd o molecul de ADN recombinat. Pentru obinerea pasagerului ce conine informaia genetic necesar sintezei unei molecule specifice, se pot utiliza urmtoarele metode: a) izolarea pasagerului cu ajutorul enzimelor de restricie din celulele specializate n care pasagerul este funcional (gena insulinei umane poate fi izolat din celulele pancreatice). Aceast metod presupune extragerea ADN,

46

scindarea ADN izolat cu ajutorul enzimelor de restricie, identificarea, izolarea i pregtirea pasagerului pentru a fi inclus n vehicul. b) metoda enzimatic de obinere a pasagerului n acest caz pasagerul sau gena dorit se sintetizeat pornind de la ARNm care a transcris informaia genetic a genei respective. Transcripia invers se face cu ajutorul unei enzime, revers transcriptaz i se obine la nceput o molecul de ADN complementar monocatenar (ADNc). Cu ajutorul ADN polimerazei se sintetizeaz cea de-a doua caten a ADN, rezultnd un ADNc dublu catenar (gena). Prin aceast metod a fost sintetizat gena insulinei umane i gena ovalbuminei de gin, folosind matrie de ARNm extrase din celulele pancreatice i respectiv din celulele zonei albuminifere a oviductului de pasre. c) sinteza chimic a pasagerului se face cunoscnd compoziia i secvena aminoacizilor, ce alctuiesc o protein, un hormon sau o enzim. n acest fel a fost sintetizat gena somatostatinei umane. Somatostatina este alctuit dintr-o secven de 14 aminoacizi. Gena somatostatinei umane conine 42 nucleotide (14 x 3). Prin aceast metod a fost sintetizat i gena insulinei umane. Metode de sintez chimic: metoda fosfodiesterilor, metoda fosfotriesterilor, sinteza chimic n faz solid. Ca vectori sau vehicule pentru transferul genelor, pot fi utilizate plasmidele bacteriene sau anumite virusuri (fagi sau bacteriofagi). Utiliznd plasmide ca vectori pentru transferul genelor, s-a reuit transferul unor gene de origine uman sau animal n celulele bacteriene de Escherichia coli, care devin capabile s sintetizeze proteine de origine uman sau animal: insulina uman, somatostatina, hormonul de cretere, interferonul, ovalbumina. Prin utilizarea ca vectori a virusurilor bacteriene (bacteriofagi), s-a reuit transferul unor gene de la bacterii n celulele umane. Gena care permite metabolizarea galactozei a fost transferat de la Escherichia coli n celulele umane, provenite de la un bolnav ce prezenta galactozemie. n tehnologia ADN recombinant se folosesc mai multe tipuri de enzime, cum sunt: - enzime de restricie, care au rolul de a tia moleculele de ADN ale vectorului i ale pasagerului la anumite situsuri sau locuri de restricie.; - ADN ligazele, care au rolul de a lega sau suda fragmentele de ADN ale vectorului i pasagerului;
47

- revers transcriptaza, care copiaz informaia genetic din ARNm n ADN; - terminal transferazele, care au rol n formarea unor cozi poli A la capetele vehicolului i pasagerului.

Aplicaiile tehnologiei ADN recombinant

n obinerea animalelor transgenice; n mutageneza in vitro; n modificarea genetic a microorganismelor industriale prin transferul de gene sintetizatoare de antibiotice de la tulpini de streptomicete la tulpini de E.coli; modificarea genetic a unor bacterii care produc proteine biologice active; terapia genic. Obinerea animalelor transgenice Prin animal transgenic se nelege un animal modificat genetic (OMG), respectiv un organism cruia i s-a transferat o gen strin. Tehnologia de obinere a animalelor i plantelor transgenice poart numele de transgenez. Transgeneza presupune nu numai transferul unor gene, ci i nlocuirea sau inactivarea unor gene. Metode de transfer a genelor n vederea obinerii organismelor transgenice 1. Transferul de gene n gonade. 2. Transferul de gene n gamei. 3. Microinjecia genelor n embrioni (pronucleul spermatizoidului) a dat cele mai bune rezultate. 4. Metode de introducere mecanic a ADN-ului n embrioni: metode biolistice i electroporarea. 5. Transferul genelor prin intermediul celulelor embrionare. 6. Transferul genelor cu ajutorul vectorilor retrovirali. Aplicaiile animalelor transgenice 1. Aplicaii n cercetarea fundamental pentru studiul modului de funcionare a genelor transferate i a mecanismului de reglaj a funciilor biologice. crearea de modele animale utilizate pentru studiul unor boli genetice la om: hemofilia, ateroscleroza. Astfel, s-au obinut cini i ovine transgenice cu hemofilie, iepuri, porcine cu ateroscleroz. 2. Aplicaii practice producerea de proteine recombinate n laptele animalelor transgenice.
48

Aceast direcie vizeaz trei obiective: modificarea componemilor naturali ai laptelui, adugarea de noi componente n lapte, producerea de proteine de interes farmaceutic n lapte. Dintre proteinele de uz farmaceutic i veterinar produse n laptele animalelor transgenice putem aminti: hormonul de cretere uman, ce se folosete n tratamentul piticismului; factorii VIII, IX de coagulare a sngelui, care sunt folositi n tratamentul hemofiliei A i B; interleukina 2, care este folosit n tratamentul unor boli ale sistemului imunitar; 1 antitripsina, care este medicament pentru tratamentul emfizemului pulmonar; factorul 1 de cretere, asemntor insulinei (IGF1), care este un regulator de cretere. modificarea organelor de la porcii transgenici, care s fie destinate grefelor la om. terapia genic vizeaz lupta contra bolilor, prin transferul de gene in vivo n celulele somatice ale unui animal ce sufer de o anumit boal. ameliorarea genetic a performanelor de cretere la animale.

12.2. Hibridarea celular

Hibridarea celular presupune fuzionarea unor celule somatice provenite de la specii diferite, n prezena unor ageni care mresc frecvena celulelor care fuzioneaz: polietilenglicolul, virusul Sendai inactivat. Prin hibridare celular s-a reuit obinerea unor hibrizi celulari: om nar, celule umane protoplati de morcov, tomate cartofi. Celulele hibride nu pot regenera organisme hibride, ci ele pot numai s se nmuleasc i s formeze clone celulare hibride. Aplicaii ale hibridrii celulare n alctuirea hrilor genetice cromozomiale; formarea unor celule hibride numite hibridoma, care sintetizeaz diverse tipuri de anticorpi monoclonali. Celulele hibridoma sunt celule hibride ntre celulele limfocitare, productoare de anticorpi i celulele tumorale sau mielomatoase. Aceste celule au capacitatea de a crete pe mediile de cultur.

49

13.3 Clonarea animalelor

Este considerat o biotehnologie asociat transferului de embrioni, iar dup unii o tehnic a ingineriei genetice prin care se manipuleaz genomul la animale. Clonarea este o metod foarte frecvent ntlnit la plante i la microorganisme ce se nmulesc. Clonarea la animale presupune transferul nucleului unei celule somatice embrionare sau de adult ntr-o ovocit enucleat. n acest fel un embrion sau un animal adult poate fi multiplicat ntr-un numr mare de copii. Toate animalele rezultate prin clonare sunt identice din punct de vedere genetic. La animale, clonarea vizeaz multiplicarea unor animale foarte valoroase ntr-un numr mare de exemplare. Exist dou metode de clonare: 1. Clonarea embrionar prin transferul unor nuclei diploizi provenii din celule embrionare (blastomere) n ovocite enucleate. Primele rezultate s-au obinut la oaie, apoi la taurine, porcine, iepuri. 2. Clonarea animalelor prin transferul de nuclei diploizi provenii din celule de animal adult. Prin aceast metod s-a obinut la sfritul anului 1996, oaia Dolly. A fost obinut prin transferul unor nuclei diploizi provenii din celulele epiteliale ale glandei mamare n ovocite enucleate. Celulele epiteliului mamar au fost la nceput multiplicate pe medii de cultur. Aceste celule au fost oprite n faza G0 a ciclului celular. Aceasta s-a fcut prin nfometarea celulelor aflate n cultur, adic s-a redus serul fetal de viel, determinnd celulele s intre n faza G0. Celulele sunt stimulate prin electrofuziune i ncep s se divid, rezultnd un embrion care este apoi transferat ntr-o femel receptoare.

50

TEST 1 1. Care sunt structurile celulare cu rol genetic din nucleul i citoplasma celulelor animale? a) cromozomii, nucleolul, reticulul endoplasmatic; b) cromozomii, nucleolul, mitocondriile, centrozomul; c) cromozomii, sucul nuclear, aparatul Golgi, cloroplastele. 2. a) b) c) 3. a) b) c) Cromozomul metafazic conine: dou cromatide, centromer, organizator nucleolar, satelit i telomere; o cromatid, centromer, satelit, telomere i centrozom; o cromatid, centriol, satelit i telomere. Cai autozomi i ci cromozomi de sex conin celulele somatice la om? 44 + X; 44 + Y; 22 + XX; 22 + XY; 44 + XX; 44 + ZZ; 22 + XY; 44 + XX; 44 + XY.

4. Cai autozomi i cai cromozomi de sex (heterozomi) conin celulele sexuale (gameii) de la taur? a) 58 + XY; 28 + XY; 58 + XX; b) 29 + X i 29 + Y; c) 29 + XY; 29 + XX. 5. Cate celule rezult n urma mitozei i cai cromozomi conin aceste celule la om? a) 4 celule cu 46 cromozomi; b) 2 celule cu 23 cromozomi; c) 2 celule cu 46 cromozomi. 6. Cate celule (gamei) rezult n urma meiozei II i cai cromozomi conin acestea la vac? a) 4 celule cu cate 30 cromozomi; b) 2 celule cu cate 60 cromozomi; c) 2 celule cu cate 30 cromozomi.
51

7. Ce structur (monocromatidic sau bicromatidic) au cromozomii rezultai n urma: - mitozei; - meiozei I; - meiozei II; 8. a) b) c) Cum se numesc celulele rezultate n urma meiozei la mascul i femel? spermatocit de ordinul I i ovocit de ordinul I; spermatozoid i ovul; spermatogonii i ovogonii.

9. Care sunt cele dou procese care au loc n cursul ciclului celular care asigur meninerea constant a numrului de cromozomi n celulele somatice? a) replicarea cromozomilor i transcripia; b) replicarea i duplicarea cromozomilor; c) duplicarea cromozomilor i dansul cromozomilor. 10. Ce gamei vor produce indivizii cu urmtoarele genotipuri, ca urmare a gruprii independente a materialului genetic care are loc n meioz? - AABB; AABb; Aabb; AaBb, AABbCC. 11. tiind c gena A determin culoarea roie a florilor la garoafe iar gena a determin culoarea alb, precizai ce culoare vor avea descendenii heterozigoi (Aa) din generaia F1 i F2, dac acest caracter se transmite dup: a) dominana complet, culoarea va fi ................................... b) dominana incomplet, culoarea va fi................................. 12. Din ncruciarea unei rase de gini cu penajul negru i creast btut (AABB) cu alt ras cu penaj alb i creast dinat (aabb), n generaia F1 rezult hibrizi negri cu creast btut iar din ncruciarea hibrizilor F1 ntre ei, n F2 rezult 16 combinaii genotipice grupate n 4 clase fenotipice. Ce caractere prezint cele 4 clase fenotipice i n ce proporii se obin ele? AB aaB Abb aabb Dup ce interaciune a genelor s-au transmis caracterele? 13. Dup ce interaciuni a genelor se transmit grupele sanguine din sistemul ABO la om i ce grupe sanguine vor avea copiii rezultai din cstoria unui brbat cu grupa sanguin A (LALA) cu o femeie cu grupa B (LBl). 14. Ce se nelege prin letalitate determinat de gene letale recesive? Ce caractere vor avea descendenii rezultai din ncruciarea unor gini i cocoi cu membre scurte (creeper) purttoare a unei gene letale (Aa+)? 15. n interaciunea complementar a genelor (la nurc) cei doi prini prezint fenotipuri diferite: AAbb (culoare platinat) i aaBB (culoare aleutin). n
52

F2, din interaciunea genelor nealele (A i B) i genelor recesive (a i b) rezult indivizi cu fenotipuri diferite de ale prinilor: culoarea standard i culoarea safir. Ce culori vor avea indivizii din F2? 16. Dac exist o gen recesiv n stare homozigot (aa) care este epistatic i genele cromogene nealele B = negru i b = rou, ce fenotipuri (culori) vor avea indivizii cu urmtoarele genotipuri: A B 9/16 A bb 3/16 aaB 3/16 aabb 1/16

17. Caracterele cantitative sunt determinate n principal de: a) gene epistatice; b) gene complementare; c) gene aditive (poligene); d) gene letale. Dac cele dou perechi de gene nealele determin urmtoarele producii: A = 6 kg lapte/zi, a = 4 kg lapte/zi, B = 6 kg lapte/zi i b = 4 kg lapte/zi, ce producii de lapte vor avea vacile cu urmtoarele genotipuri? AABB aaBb AaBb aabb 18. n urma unei retroncruciri dintre un individ heterozigot (AaBb) i un individ homozigot recesiv (aabb) se pot obine trei rapoarte de segregare diferite. Cum sunt aezate cele dou perechi de gene pe cromozomi (pe o pereche de cromozomi sau pe dou perechi diferite) i cum se transmit la descendeni (linkage, crossingover sau segreg independent) dac: Rf = 1 : 1 : 1 : 1 Rf = 1 : 1 Rf 1 : 1 : 1 : 1 19. Cai gamei produce femela dublu heterozigot din F1 dac nu se produce crossingoverul (a) i dac se produce crossingoverul (b) ntre genele nealele plasate pe acelai cromozom: a) A B a b b) A B a b

20. Definii fenomenul de sex-linkage i precizai ce aplicaii are n avicultur. Efectuai schema de ncruciare pentru obinerea unui hibrid autosexabil la gin, tiind c gena heterozomal L determin mbrcarea lent cu penaj iar gena l determin mbrcarea rapid cu penaj. 21. Prin replicarea semiconservativ a ADN-ului, care are loc n faza S a interfazei mitozei, se nelege c:

53

a) dintr-o molecul de ADN (bicatenar) rezult dou molecule fiice, fiecare avand o caten de la molecula mam, care a funcionat drept matri i una nou sintetizat; b) dintr-o molecul de ADN rezult tot o molecul de ADN, format din dou catene identice cu ale moleculei mam. 22. O caten polinucleotidic de ADN este rezultatul polimerizrii mai multor nucleotide. Care sunt elementele care intr n structura unei nucleotide din ADN?

23. Transcripia const n: a) decodificarea informaiei genetice din ARN-ul mesager i sinteza unei proteine; b) copierea informaiei genetice din ADN n ARN-ul mesager cu ajutorul enzimei ARN polimeraza. 24. Codul genetic este asemntor unui alfabet cu ajutorul cruia se pot forma cuvinte de cate trei litere. Ce nelegei prin caracteristica codului genetic de universalitate: a) acelai aminoacid este codificat de mai muli codoni; b) acelai codon codific acelai aminoacid la toate speciile. 25. Cum se numesc secvenele informaionale i cele noninformaionale din structura unei gene eucariote? 26. Care este ordinea corect a intrrii n funcie a enzimelor n procesul replicrii ADN: a) ADN-polimeraza, ADN-helicazele, primaza, ADN-ligaza; b) Topoizomeraza, ADN-helicazele, primaza, ADN polimeraza, ADN-ligaza; c) ARN-polimeraza, ADN-ligaza, primaza, ADN-helicazele. 27. Cum se numete la procariote catena de ADN care se sintetizeaz discontinuu? a) caten conductoare; b) caten progresiv; c) caten decalat (ntarziat). 28. ADN-polimeraza catalizeaz: a) reacia de transcripie; b) reacia de formare a unor legturi fosfodiesterice ntre gruparea OH 3 i atomul P - 5 a doua nucleotide nvecinate (polimerizare); c) reacia de dezaminare. 29. ADN-ul denaturat se obine prin: a) denaturarea termic, urmat de rcirea brusc a soluiei n care se afl ADN-ul i este monocatenar; b) prin rcirea brusc a soluiei n care se afl ADN-ul i este bicatenar; c) denaturarea termic, urmat de rcirea brusc i este bicatenar. 30. Minisateliii i microsateliii sunt:
54

a) secvene de ADN unice i servesc la genotipizare; b) secvene nalt repetate i servesc la ntocmirea amprentei genetice; c) secvene mediu repetate i servesc la studiul mutaiilor.

TEST 2 Legea gruprii independente a materialului genetic acioneaz n: gametogenez; fecundare; gametogenez i fecundare; nici un rspuns corect.

1. a) b) c) d)

2. Care sunt cele dou procese care au loc n cursul ciclului celular care asigur meninerea constant a numrului de cromozomi din celule de la o generaie la alta: a) duplicaia cromozomilor n interfaza ciclului celular i replicarea cromozomilor n metafaza mitozei; b) replicarea cromozomilor n interfaz i duplicaia cromozomilor n metafaz; c) duplicaia cromozomilor ntre dou diviziuni succesive i replicarea cromozomilor la sfritul metafazei. 3. a) b) c) d) Chiasmele sunt fenomene genetice care sunt implicate n: linkage; crossing-over; duplicaia cromozomilor; toate rspunsurile sunt corecte.

4. Care este numrul de cromozomi n celulele sexuale i n cele somatice la taurine: a) 30 autosomi i 1 heterosom i 58 autosomi i 2 heterosomi; b) 29 autosomi i 1 heterosom i 58 autosomi i 2 heterosomi; c) 28 autosomi i 2 heterosomi i 58 autosomi i 2 heterosomi. 5. a) b) c) d) La tipul de determinare a sexelor Drosophila, femela este sexul: homogametic; heterogametic; homozigotic; heterozigotic.

6. Cte celule rezult n urma mitozei i a meiozei secundare i care este numrul de cromozomi din aceste celule: a) dou celule cu 2n i respectiv dou celule cu n cromozomi:
55

b) o celul cu 2n i respectiv dou celule cu n cromozomi; c) dou celule cu 2n i respectiv patru celule cu n cromozomi; d) dou celule cu 2n i respectiv dou celule cu 2n cromozomi. 7. a) b) c) d) Artai n ce moment al diviziunii meiotice se realizeaz crossing-over-ul: diplonem; metafaza I; zigonem; metafaza II. Numrul de cromozomi este caracteristic: fiecrui individ; fiecrei specii; categoriilor nrudite de specii; toate rspunsurile sunt corecte. Genele epistatice acioneaz: intensificnd manifestarea unei gene; inhibnd manifestarea unei gene alele; inhibnd manifestarea unei gene nealele; toate rspunsurile sunt corecte.

8. a) b) c) d) 9. a) b) c) d)

10. La taurine prezena coarnelor este determinat de o gen recesiv, iar absena de cel puin o gen dominant (P-). De cte generaii avei nevoie pentru a ecorna genetic produii la o turm de 100 de vaci cu coarne, folosind un taur fr coarne, dar homozigot? a) trei generaii; b) dou generaii, c) o generaie; d) nu se poate ecorna genetic. 11. Transcripia reprezint: a) sinteza hidrailor de carbon, b) sinteza ATP; c) sinteza ARN d) sinteza proteinelor. 12. Albinismul: a) este rezultatul unei mutaii cromozomiale; b) este rezultatul unei mutaii genice; c) se exprim n stare heterozigotat; d) se exprim numai n stare de homozigoie dominant. 13. De recunoaterea iniierii transcripiei la procariote rspunde: a) factorul ; b) factorul ; c) factorul ; d) factorul . 14. ARN mesager reprezint din totalul cantitii de ARN din celul: a) 80 85%;
56

b) 50 55%; c) 10 15%; d) 2 5%. 15. Nucleolul este ataat de: a) cromozom la nivelul centromerului; b) cromozom la nivelul constriciei secundare; c) centrosom; d) ribozomi. 16. Transpozomii reprezint: a) elemente genetice mobile; b) materialul genetic al virusurilor; c) materialul genetic al unor bacterii; d) nici un rspuns nu este corect. 17. n procesul de transcriere a informaiei genetice intervine enzima: a) ADN-polimeraza; b) ARN-polimeraza; c) ADN-transcriptaza; d) ARN-replicaza. 18. Rezultatul procesului de translaie a mesajului genetic este: a) sinteza unei molecule de ARN mesager; b) sinteza unui lan polipeptidic; c) sinteza unui lan de ADN; d) sinteza unui precursor ribozomal. 19. Codul genetic este degenerat pentru c: a) un anumit aminoacid este codificat de mai muli codoni; b) nu la toate organismele acelai codon codific acelai aminoacid; c) ntre codoni nu exist suprapunere; d) totdeauna un codon codific un singur aminoacid. 20. Reprezentarea grafic a poziiei genelor n structura unui cromozom prezint: a) idiogram; b) hart cromozomal; c) cariogram; d) cariotip. Testul 3 1. Catrul i bardoul rezult din ncruciarea reciproc a cabalinelor i asinilor. Ci cromozomi are un astfel de hibrid: a) 60; b) 61; c) 62; d) 63. 2. Ce este genomul:
57

a) b) c) d)

totalitatea genelor dintr-un organism; totalitatea genelor dintr-o celul; totalitatea genelor dintr-un gamet; toate rspunsurile sunt corecte.

3. Ci gamei rezult dintr-un spermatocit de ordinul I: a) 4; b) 8; c) 12; d) 16.

4. n cazul nlnuirii incomplete a genelor n poziia cis, dintr-o ncruciare a ginilor cu pene frizate albe (dublu heterozigoi), cu cocoi cu pene normale i colorate, dublu homozigoi, ce combinaii pot iei la descendeni: a) indivizi cu pene frizate colorate; b) indivizi cu pene albe normale; c) indivizi cu pene frizate colorate i albe normale; d) indivizi cu pene frizate albe; normal colorate; frizate colorate; normal albe. 5. La unele rase de cini lipsa cozii este determinat de o gen cu dominan incomplet. O cea cu coada normal a ftat opt pui din care trei aveau coada mai scurt. Ce fel de genotip a avut cinele: a) homozigot dominant; b) heterozigot; c) homozigot recesiv; d) hemizigot. 6. Care din elementele enumerate mai jos mrete variabilitatea genetic ntr-o populaie: a) disjuncia cromozomilor; b) selecia; c) consangvinizarea; d) toate rspunsurile sunt corecte. 7. n cazul interaciunii complementare a genelor, n descenden va rezulta: a) un fenotip nou diferit de al formelor parentale; b) se va intensifica manifestarea caracterelor parentale; c) va fi inhibat manifestarea caracterelor parentale; d) toate rspunsurile sunt corecte. 8. Codul genetic reprezint: a) limbajul necesar traducerii informaiei genetice dintr-o gen ntr-o protein; b) modul de nregistrare a informaiei genetice; c) succesiunea nucleotidelor n genom; d) toate rspunsurile sunt corecte. 9. Teoria cromozomial a ereditii explic: a) modul de organizare al genomului; b) linkage-ul i crossing-overul;
58

c) structura cromozomilor. 10. Duplicarea cromozomului (centromerului) n diviziunea meiotic are loc n: a) zigonem; b) metafaza I; c) telofaza I; d) metafaza II. 11. La taurine absena coarnelor este dat de o gen dominant P, iar prezena coarnelor de alela sa recesiv p. Culoarea neagr este dat de gena dominant B, iar culoarea roie de alela sa recesiv b. Ce fel de descendeni i cu ce probabiliti se vor obine din mperecherea unui taur negru, fr coarne (dublu heterozigot) cu vaci roii cu coarne: a) toi descendenii negri i fr coarne; b) 25% descendeni negri i fr coarne, 25% descendeni roii i fr coarne, 25% descendeni negri i cu coarne, 25% descendeni roii i cu coarne; c) 50% descendeni negri i fr coarne, 50% descendeni roii i cu coarne; d) 50% descendeni negri i cu coarne, 50% descendeni roii i fr coarne. 12. Codul genetic este universal pentru c: a) un anumit aminoacid este codificat de mai muli codoni; b) la toate organismele acelai codon codific acelai aminoacid; c) ntre codoni nu exist suprapunere; d) are un grad redus de ambiguitate. 13. Cte categorii de genotipuri exist ntr-o populaie la un locus heterosomal, cu alelism simplu: a) 2; b) 3; c) 4; d) 5. 14. Heterosomii reprezint: a) cromozomi care se gsesc doar n celulele somatice; b) o pereche de cromozomi care difer la cele dou sexe; c) cromozomi care se gsesc doar n celulele gametice; d) o pereche de cromozomi care se gsete doar la masculi. 15. Structura primar a unei proteine este dat de: a) tipurile de aminoacizi implicai; b) numrul lanurilor polipeptidice; c) legturile de sulf i hidrogen prezente; d) numrul i secvena aminoacizilor implicai. 16. Codonii reprezint o secven de trei nucleotide din structura: a) ADN-ului; b) ARN-ului de transfer; c) ARN mesager; d) ARN viral; e) toate rspunsurile sunt corecte.

59

BIBLIOGRAFIE Obligatorie 1. VLAIC, A., T. OROIAN (2005) Elemente de genetic pentru zootehniti. Ed. AcademicPres Cluj-Napoca; 2. VLAIC, A. (2007) Genetica petilor, Ed. Risoprint Cluj-Napoca 3. COIER VIORICA, A. VLAIC (2007) Abordarea practic a problemelor de genetic animal. Ed. Todesco Cluj-Napoca; 4. VLAIC, A. (1997) Inginerie genetic. Realizri, sperane i neliniti. Ed. Promedia Plus Cluj-Napoca; 5. PETRE, A, A. VLAIC (1991) Genetic animal. Tipo Agronomia ClujNapoca; 6. PETRE, A., E. NEGRUIU (1975) Genetica animal. Ed. Didactic i Pedagogic Bucureti; 7. PETRE, A., A. VLAIC, MARIOARA POP (1989) Lucrri practice de genetic animal. Tipo Agronomia Cluj-Napoca; Facultativ 1. BENCSIK, I. (2005) Genetica general. Ed. Mirton, Timioara; 2. BROWN, T.A. (2002) Genomes 2 nd. Ed. Bios Oxford UK; 3. CARLAN, M. (1996) Elemente de genetic animal normal. Ed. Polirom Iai; 4. COIER VIORICA (2007) Inginerie genetic. Ed. Risoprint Cluj-Napoca; 5. CREANG TF., CRLAN, M. (2005) Ereditate i variabilitate. Ed. Alfa Iai; 6. DRGOTOIU TOMIA (2001) Eredopatologie animal. Ed. Xant Bucureti; 7. POPESCU-VIFOR, T., N. PIPERNEA, A. PETRE, I. VINTIL (1979) Genetica animal. Ed. Didactic i Pedagogic Bucureti; 8. POPESCU-VIFOR, T., (1990) Genetica populaiilor de animale domestice. Ed. Ceres Bucureti. Site-uri de internet http://www.contexo.info/DNA_Basics/Mitosis.htm http://www.bio.miami.edu/dana/mov/mitosis.mov http://www.bio.miami.edu/dana/mov/meiosis.mov http://www.cellsalive.com/cell_cycle.htm http://www.lcusd.net/lchs/mewoldsen/ebiolink.htm http://www.fli-leibniz.de/~sweta/genetic_code_and_evolution/ http://old.ournet.md/~biochim/ghid/genele/genele.html http://www.phschool.com/science/biology_place/biocoach/dnarep/helix.html http://seqcore.brcf.med.umich.edu/doc/educ/dnapr/pg2.html http://ghr.nlm.nih.gov/BrowseGenes http://www.biology.arizona.edu/Mendelian_genetics/mendelian_genetics.html

60

61