Electroforeza proteinelor serice

Electroforeza proteinelor serice reprezinta migrarea spre Anod sau Catod, in functie de sarcina electrica, a unor particule coloidale incarcate electric. Aminoacizii cu caracter amfoter, sub actiunea curentului electric, vor migra spre unul din polii celulei electroforetice. Directia migrarii e data de pH-ul solutiei, astfel, in mediul acid, aminiacizii (baze) migreaza spre Catod, iar in mediu bazic aminoacizii (acid) migreaza spre Anod. Sub influenta curentului electric, migrarea se face in functie de fortele electrice predominante. Daca predomina sarcinile electrice negative migrarea se face spre Anod , iar daca predomina cele pozitive migrarea se face spre Catod. Daca sarcinile electrice pozitive si negative sunt egale, forta electrica este nula iar la o anumita valoare a pH-ului apare punct izoelectric (migrarea nu mai are loc). Daca pH-ul este mai mic decat punctul izoelectric, proteina migreaza spre Catod, iar daca !p"i, migreaza spre anod.Cu electroforeza proteinelor se obtine separarea diferitelor fractiuni proteice plasmatice in functie de macromolecule si sarcinile electrice din albumine. E#ista $ fractiuni globulinice% &', &(, ) si *. Electroforeza pe "artie Aparate: - camera de migrare+ - sursa de curent electric continuu+ - dispozitiv de fotometra,. Reactivi: - solutie tampon (pH-.)+ - solutie coloranta Amido-Sc"/artz+ - acid acetic glacial, metanol, apa distilata+ - "artia 0"atmann% lungime-12cm, latime-(cm. Tehnica de lucru% Se imbiba "artia de lucru 0"atmann cu solutie tampon si apoi se introduce in camera umeda si se conecteaza aparatul la curent electric pentru 13 de minute. Se pipeteaza 4-5 6l ser de cercetat la o distanta de apro#imativ $cm de polul negativ al benzii. Se conecteaza iar la curent electric pentru '5 ore. Se scot benzile si se tin timp de '-( ore la '33 3C pentru precipitarea proteinelor pe banda. Se face colorarea benzii in urmatoarele etape% 7. 8 '3-(3 minute colorarea Amido-Sc"/artz+ 77. 8 decolorarea in ( solutii succesive% - 7 cu acid acetic glacial,metanol si apa distilata+

- a 77-a cu acid acetic glacial si apa distilata. Apoi benzile se usuca la temperatura camerei. 9e benzi vor aparea fractiuni proteice, valoarea procentuala a acestora facandu-se cu a,utorul integralelor. ezultatul este un grafic. Citirea: Din punctul in care curba albuminei intersecteaza abcisa se ridica o perpendiculara ce intersecteaza diagrama. Apoi se prelungesc curbele fractiunilor proteice iar din punctele lor de intersectie se ridica perpendicularele care vor intersecta diagrama. Din punctul superior al diagramei se duce o dreapta cu lungimea de '33mm ce intersecteaza abcisa. Apoi din punctele de intersectie ale prelungirilor curbelor proteice cu diagrama se traseaza linii orizontale ce vor intersecta dreapta respective. Apoi citirea fractiunilor proteice se face procentual.

:etabolismul protidic
Valori normale - proteine totale% 4-5 g;dl din care% - albumine% 23-43<+ - globuline% $3-23< din care% - &'-globuline% $-=<+ - &(-globuline% 4-'3<+ - )-globuline% 5-'1<+ - *-globuline% '(-(3<. - raportul albumine;globuline% ',(-',$. Fractiunile electroforetice I. Proteinele totale Cresterea peste 5g< a proteinelor totale se numeste "iperproteinemie si poate fi% - aparenta% in "emoconcentratii (intalnita in des"idratari)+ - reala% in inflamatii cronice sau mielon multiplu. Scaderea sub 4g< a proteinelor totale se numeste "ipoproteinemie si poate fi% - aparenta% in "emodilatari (intalnita in "iper"idratari)+ - reala% intalnita in% 7. in scaderea aportului% in stari de marasm, in maldigestie, in malabsorbtie+ 77. in pierderi proteice e#cesive% in sindromul nefrotic sau enteropatii e#udative+

777. II. III. -

in deficit de sinteza% in ciroza "epatica, tumori "epatice, citostatice.

Albumine 9realbumina si albumina au rol in% transportul "ormonilor tiroidieni+ mentinerea presiunii coloidosmotice+ transportul medicamentelor, ionilor, bilirubinei indirecte. Globulinele &'-globuline 8 reprezentanti% &'-glicoproteina+ &'-antitripsina% inactiveaza c"emotripsina din sucurile digestive+ &'-lipoproteina% rol in transportul proteinelor si tractiunea C' in"ibitor.

&(-globuline 8 reprezentanti% - &(-macroglobulina% creste in inflamatii+ - "aptoglobina% transporta "emoglobina si creste in inflamatii acute+ - antitrombina 1+ - ceruloplasmina% transporta Cu. )-globuline 8 reprezentanti% - transferina (siderofilina)% transporta >e+ - transcobalamina% transporta vitamina ?'( (ciancobalamina)+ - "emope#ina% fi#eaza "em-ul+ - proteina C reactiva+ - )-lipoproteina% transporta lipide+ - fractiunea C1 a complementului. *-globuline 8 reprezentanti% - imunoglobuline% - @% rol in imunitate+ - :+ - A% rol de protector la nivelul mucoaselor+ - D+ - E. 7munoglobulinele se pot masura% - calitativ prin imunoelectroforeza+ - cantitativ prin imunograma.