Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
(DIFRED-FA)
SPECIALIZAREA: AGRICULTUR
GENETIC
Bucureti
- 2012 -
1
CUPRINS
Tema nr.1. Noiuni introductive ........................................................................................................5
1.1. Obiectul, coninutul i importana geneticii; terminologie ........................................................5
1.2. Teorii care stau la baza dezvoltrii geneticii ...............................................................................6
1.3. Metode de studiu n genetic .......................................................................................................8
Tema nr. 2. Ciclul de via la organisme ............................................................................................11
2.1. Ciclul de via la organismele superioare ....................................................................................11
2.2. Ciclul de via la bacterii i recombinarea genetic ...................................................................12
Tema nr. 3. Ereditatea caracterelor calitative (mendeliene) ...............................................................17
3.1. Gregor Mendel fondatorul geneticii i caracterele calitative ....................................................17
3.2. Monohibridarea i legea segregrii genelor .................................................................................20
Tema nr. 4. Polihibridarea i legea segregrii independente a perechilor de caractere ......................28
4.1. Dihibridarea de tip Pisum ............................................................................................................28
4.2. Test-cross-ul la dihibridare ..........................................................................................................32
4.3.Trihibridarea de tip Pisum ............................................................................................................33
4.4. Verificarea raporturilor de segregare ..........................................................................................38
Tema nr. 5. Intraciuni genice ............................................................................................................42
5.1. Interaciuni ale genelor alele .......................................................................................................42
5.2. Sisteme plurialele ........................................................................................................................45
5.3. Interaciuni ntre gene nealele .....................................................................................................47
Tema nr. 6. Teoria cromozomial a ereditii ....................................................................................54
6.1. Aezarea liniar a genelor pe cromozomi ...................................................................................54
6.2. Transmiterea nlanuit a genelor plasate pe acelai cromozom. Linkage ..................................56
6.3. Schimbul reciproc de gene. Crossing-over ..................................................................................59
Tema nr. 7. Variaii ale numrului de cromozomi. Euploidia ............................................................67
7.1. Ploidia ..........................................................................................................................................67
7.2. Monoploidia i haploidia .............................................................................................................68
7.3. Poliploidia ....................................................................................................................................70
Tema nr. 8. Variaii ale numrului de cromozomi. Aneuploidia .......................................................77
8.1 Aneuploidia ..................................................................................................................................77
8.2. Tipuri de aneuploidie ...................................................................................................................78
8.3. Importana aneuploizilor ..............................................................................................................79
Tema nr. 9. Restructurri cromozomiale .............................................................................................82
2
9.1. Caracteristici i clasificare .........................................................................................................82
9.2. Deleii i duplicaii .....................................................................................................................83
9.3. Inversii i translocaii .................................................................................................................86
Tema nr. 10. Determinismul genetic al sexelor..................................................................................93
10.1. Determinsmul cromozomial .....................................................................................................93
10.2 Determinismul genomial ...........................................................................................................95
10.3. Determinismul genic ................................................................................................................96
10.4. Reglajul genetic al diferenierii sexelor la plante .....................................................................97
Tema nr. 11 . Ereditatea caracterelor sex-linkage ............................................................................102
11.1. Factorii ce influeneaz determinismul genetic al sexelor ......................................................102
11.2. Caractere sex-influenate .........................................................................................................107
11.3. Caractere sex-limitate ..............................................................................................................107
11.4. Ereditatea caracterelor legate de sex ...................................................................................... 108
Tema nr. 12. Ereditatea caracterelor cantitative ...............................................................................113
12.1. Determinsmul geentic al caracterelor cantitative ....................................................................113
12.2. Sisteme de gene multiple .........................................................................................................117
12.3. Variana genetic .....................................................................................................................120
12.4. Ereditatea n sens larg; ereditatea n sens restrns ...................................................................121
12.5. Hibridarea transgresiv ............................................................................................................122
Tema nr.13. Ereditatea citoplasmatic ..............................................................................................126
13.1. Gene extranucleare .................................................................................................................. 126
13.2. Androsterilitatea citoplasmatic ...............................................................................................128
Tema nr. 14. Genetica i evoluia populaiilor ..................................................................................132
14.1. Frecvena genelor i genotipurilor ............................................................................................132
14.2. Principiul Hardy Weinberg ....................................................................................................134
14.3. Factorii care modific structura genetic a populaiilor ...........................................................137
Tema nr. 15. Introducere n genetic molecular ..............................................................................145
15.1. Acizii nucleici: structur i funcii ...........................................................................................145
15.2. Forme structurale de ADN .......................................................................................................148
15.3. Niveluri de mpachetare de ADN;denaturarea i renaturarea ADN .........................................150
15.4. ADN repetitiv caracteristic eucariotelor ...................................................................................151
Tema nr. 16. Transferul i utilizarea informaiei genetice ................................................................155
16.1. Replicarea macromoleculei de ADN ........................................................................................155
3
16.2. Transcripia ...............................................................................................................................160
16.3. Procesarea ARN-m ...................................................................................................................161
16.4. Tipuri de ARN ..........................................................................................................................163
16.5. Codul genetic ............................................................................................................................165
16.6. Translaia ..................................................................................................................................166
Tema nr. 17. Gena, structur i funcii ..............................................................................................172
17.1. Concepii despre gen ..............................................................................................................172
17.2. Structura fin a genei ................................................................................................................173
17.3. Structura genei la procariote .....................................................................................................176
17.4. Structura genei la eucariote ......................................................................................................177
17.5. Elemente genetice mobile ........................................................................................................178
Tema nr. 18. Reglajul genetic ...........................................................................................................182
18.1. Reglajul activitii genelor la procariote ..................................................................................182
18.2. Reglajul activitii genelor la eucariote ....................................................................................186
18.3. Rolul interferenei ARN n reglarea activitii genelor ............................................................188
Tema nr. 19. Mutaia i recombinarea genetic ................................................................................191
19.1. Mutaiile genetice ....................................................................................................................191
19.2. Reparaia genetic ....................................................................................................................194
19.3. Recombinarea la nivel molecular .............................................................................................194
Tema nr. 20. Tehnici de genetic molecular cu aplicaii n ameliorarea plantelor .........................197
20.1. Tehnica PCR .............................................................................................................................197
20.2. Markeri moleculari: RAPD, AFLP, SSR, RFLP ......................................................................203
20.3. Selecia asistat de markeri moleculari ....................................................................................208
Test recapitulativ ...............................................................................................................................212
Bibliografie selectiva ....................................................................................................................... 221
4
Tema Nr.1
NOIUNI INTRODUCTIVE
Uniti de nvare:
Obiectul, coninutul i importana geneticii; Terminologie.
Teorii care stau la baza dezvoltrii geneticii
Metode de studiu n genetic.
Obiectivele temei:
nsuirea definiiei geneticii i fixarea termenilor de baz utilizai n genetic ( cum ar fi
ereditatea i variabilitatea, genotip i fenotip), coninutul geneticii;
trecerea n revist a istoricului privind dezvoltarea geneticii i prezentarea celor mai
importante teorii privind ereditatea i variabilitatea caracteristicilor;
stabilirea metodelor de studiu utilizate n genetic pentru analiza ereditii i variabilitii
diferitelor caracteristici.
Consacrarea geneticii ca tiin este determinat de trei biologi i anume Hugo de Vries ( 1848
1935 ), Carl Correns ( 1864 1933 ) i Erich Tschermac ( 1871 1962 ), care n anul 1900, au
redescoperit independent concluziile lui Gregor Mendel.
Contribuii semnificative la dezvoltarea geneticii au avut experienele lui Thomas Hunt Morgan i
colaboratorilor lui, care au efectuat cercetri la Drosophila melanogaster i au emis trei teze :
plasarea liniar a genelor pe cromozomi; fenomenul de linkage complet i fenomenul de linkage
incomplet, acestea alcatuind teoria cromozomial.
n dezvoltarea geneticii moderne, rolul hotrtor l-au avut cercettorii americani O.T.Avery,
C.M.MacLeod i M.McCarty care descoper rolul genetic al acidului dezoxiribonucleic ( ADN ) din
cromozomi, explicnd astfel fenomenul de transformare genetic la bacterii sesizat de F.Grifftch .
Mai trziu rezultatele se succed rapid, astfel s-a descoperit rolul i structura ARN-ului, existena
unui limbaj genetic codul genetic, structura genelor, sinteza proteinelor i reglajul genetic al
sintezei proteice etc.
Dup anul 1970 s-au dezvoltat considerabil cercetrile de inginerie genetic. Acest nou domeniu a
dus la : izolarea i sinteza artificial a genelor, transferul intra- i interspecific al genelor, uneori
chiar de la organisme procariote la cele eucariote i viceversa, manipularea materialului genetic la
nivel celular prin realizarea de haploizi prin androgenez i ginogenez experimental la plante,
hibridarea ntre celule vegetale i animale, alctuirea hrilor genetice la mai multe specii inclusiv
pentru om (2005) etc.
Ingineria genetic are implicaii profunde de ordin fundamental i aplicativ, mai ales in crearea de
noi forme vegetale i animale de importan economic, n realizarea de microorganisme capabile s
sintetizeze aminoacizi, proteine, hormoni,vitamine, antibiotice etc, n realizarea terapiei genice cu
importan n medicina uman i veterinar.
Putem concluziona pe baza celor prezentate, marea importan a geneticii i faptul c genetica este
o necesitate pentru specilitii din domeniul biologiei, agriculturii, medicinei.
7
1.3. Metode de studiu n genetic
Pentru studiul ereditii i variabilitii organismelor n genetic sunt utilizate n mod separat
sau asociat mai multe metode de studiu.
Vom enuna cteva dintre acestea:
Metoda hibridologic: se realizeaz hibridarea ntre organisme diferite genetic i se
analizeaz descendena obinut privind motenirea diferitelor caracteristici pe baza analizei
matematice. Metoda a fost introdus de ctre G.Mendel i este folosit i astzi.
Metoda genealogic: este cea mai veche metod ( folosit i n antichitate),
presupune nregistrarea i analiza datelor referitoare la indivizi ntr-o succesiune de generaii. Se
poate stabili astfel modul de transmitere i manifestare a unor caracteristici.
Metoda citologic: se bazeaz pe studiul constituenilor celulari cu rol genetic i
interferena modificrile ce apar la nivelul acestora cu manifestarea diferitelor caracteristici.
Metoda biochimic: aplicat n genetica molecular, se bazeaz pe cunoaterea i
manipularea materialului genetic la nivel molecular. Este o metod ce a permis dezvoltarea n ritm
exponenial a geneticii.
Metoda biometric: presupune nregistrarea datelor privind caracteristicile i
prelucrarea statistic a acestor date. Prin prelucrarea datelor se obin informaii privind ereditatea i
mai ales variabilitatea caracteristicilor. Metoda este folosit cu precdere n analiza caracteristicilor
cantitative ( greutatea boabelor/spic , rezistena la ger, coninutul n zahar, etc).
Metoda radiaiilor: utilizarea diferitelor tipuri de radiaii i efectele mutagene pe
care le au asupra materialului genetic, au dezvoltat aceast metod de studiu n genetic.
TEST DE EVALUARE
Definii ereditatea:
Rspuns:
Ereditatea este proprietatea organismelor de a da natere unor descendeni asemntori lor. Mai
poate fi definit ca fenomenul transmiterii din generaie n generaie a caracterelor sau procesul
transmiterii informaiei genetice de la prini la urmai.
1. Definii fenotipul.
Rspuns:
8
2. La ce se refer teoria cromozomial elaborat de ctre T. Hunt Morgan i
colaboratorii?
Exerciii:
Exemplu rezolvat:
1. Unitile ce asigur ereditatea sunt:
a) Organitele citoplasmatice
b) Nucleul
c) Genele i plasmagenele
Rezolvare: c
2. Care sunt tipurile de erediti:
a) Ereditate nuclear
b) Ereditate cromozomal
c) Ereditate citoplasmatic
d) Ereditate nuclear i citoplasmatic
3. Fenotipul este rezultatul interaciunii dintre :
a) Genotip i mediu
b) Genotip i plasmagene
c) Mediu i plasmagena
4. Harta genetic la om a fost realizat n anul:
a) 1989
b) 2005
c) 2000
9
5. n ce an s-a stabilit structura acizilor nucleici?
a) 1970
b) 1963
c) 1953
Rezumatul temei
Genetica este tiina care studiaz ereditatea i variabilitatea organismelor. Genetica explic
mecanismele de nregistrare, de stocare, de modificare i de transmitere a informaiei ereditare din
generaie n generaie, precum i procesul interaciunii genotipului cu mediul.
Ereditatea (hereditas a moteni, lat.) este proprietatea organismelor de a da natere unor
descendeni asemntori lor. Mai poate fi definit ca fenomenul transmiterii din generaie n
generaie a caracterelor sau procesul transmiterii informaiei genetice de la prini la urmai. Unitatea
elementar care condiioneaz transmiterea i manifestarea caracterelor a fost numit gen ( 1906 de
geneticianul danez W. Johannsen). Alturi de genele care se afl n cromozomi i determin
ereditatea cromozomal, exist i uniti ereditare situate la nivelul citoplasmei, denumite
plasmagene, care determin ereditatea citoplasmatic.
Totalitatea factorilor ereditari ai unui organism poart numele de genotip.
Genele i plasmagenele au o mare stabilitate i sunt capabile s se autoreproduc fidel ( funcia
autocatalitic a genei). n acest sens ereditatea constituie elementul conservativ al lumii vii.
Dac se compar descendenii din cadrul unei rase, soi etc, se constat unele deosebiri ntre
indivizi, dar i fa de prini. n natur nu exist doi indivizi identici, unicitatea fiind o caracteristic
de baz a lumii vii. Aceasta nseamn c organismele prezint variabilitate.
Variabilitatea reprezint proprietatea organismelor vii, cu diferite grade de nrudire, de a se
deosebi ntre ele n plan morfologic, fiziologic, biochimic etc. Diferenele ntre indivizi pot fi
determinate de mutaii i recombinri ale materialului genetic (variabilitate ereditar) i de influena
condiiilor de mediu (variabilitate neereditar).
Totalitatea nsuirilor morfologice, fiziologice, biochimice i de comportament ale unui
organism poart numele de fenotip.
Principalele teorii care stau la baza dezvoltrii geneticii sunt: teoria plasmei germinative,
teoria factorilor ereditari, teoria cromozomial a ereditii, teoria molecular.
Uniti de nvare:
Ciclul de via la organismele superioare.
Ciclul de via la bacterii i recombinarea genetic.
Obiectivele temei:
nelegerea proceselor prin care organismele dau natere altora similare lor;
explicarea legturilor dintre generaii;
dobndirea cunotiinelor privind continuitatea informaiei genetice i recombinarea
materialului genetic.
14
TEST DE EVALUARE
1. Ce este macrogametogeneza?
Rspuns:
Macrogametogeneza este procesul de formare a gameilor femeli.
2. Ce este microgametogeneza?
3. Care sunt principalele procese prin care se realizeaz recombinarea genetic la bacterii?
Exerciii
Exemplu rezolvat:
1. Cte oosfere rezult din patru macrosporocii?
a) 2
b) 4
c) 6
Rezolvare: b
1. Cte spermatii rezult din opt microspori?
a) 16
b) 10
c) 12
2. Pentru a prelua ADN exogen o bacterie trebuie sa fie n stare de:
a) Conjugare
b) Competen
c) Donor
3. Conjugonul este un element genetic reprezentat de:
a) Plasmidul F
b) Plasmidul R
c) Plasmidul Col
15
Rezumatul temei
n urma meiozei la plantele superioare rezult spori. n cazul n care din spori, n
procesul de gametogenez urmeaz a se forma gamei masculi, sporii se mai numesc microspori iar
procesul de meioz n urma cruia rezult se numete microsporogenez.
Bacteriile sunt organisme de tip procariot, fiind lipsite de nucleu, avnd un singur
cromozom de form circular, genoforul, care nu este inclus n membran nuclear.
16
Tema nr. 3
EREDITATEA CARACTERELOR CALITATIVE (MENDELIENE)
Uniti de nvare:
Gregor Mendel unul dintre fondatorii geneticii i caracterele calitative.
Monohibridarea i legea segrgrii genelor.
Obiectivele temei:
identificarea caracterelor calitative i nsuirea cunotiinelor privind controlul genetic al
acestora;
explicarea metodei de studiu privind ereditatea caracterelor calitative hibridarea;
trecerea n revista a legilor ereditii caracterelor calitative n cazul monohibridrii, a
mecanismelor citologice;
explicarea test-cross-ului i back-cross-ului.
17
Pflanzenhybriden (Cercetrile privind hibridarea plantelor).
Gregor Mendel 1822-1886
Rezultatele cercetrilor lui G. Mendel publicate, nu au produs senzaie n lumea biologilor de
atunci, care pe de o parte nu au putut sesiza esena i importana descoperirilor, iar pe de alt parte
Mendel era considerat un cercettor amator. Astfel, concluziile lui Mendel au rmas nerecunoscute
pana n anul 1900, cnd au fost descoperite i ridicate la rangul de legi ale ereditii, moment care
marcheaz apariia geneticii ca tiin.
n concepia geneticii clasice caracterele mendeliene (calitative) sunt acelea care prezint
fenotipuri distincte (contrastante) i sunt controlate de gene majore (mendeliene) dup regula o
gen un caracter (condiionare monogenic). Unele gene majore au efecte pleiotropice, adic o
gen controleaz simultan mai multe caractere calitative, ceea ce reprezint, evident, o abatere de la
regula general amintit mai sus.
n F1 toate plantele hibride sunt uniforme, avnd acelai fenotip. n F2, caracterele calitative
segreg n clase discontinue, cu fenotipuri distincte i usor detectabile, datorate ambelor alele. Marea
majoritate a caracterelor calitative au heritabilitatea mare, fiind puin influenate de mediu. Aceasta
confer seleciei posibiliti mari n detectarea indivizilor cu caractere dorite.
Pentru studiul ereditii i variabilitii se folosete pe scar larg metoda hibridologic.
Aceast metod a permis lui Gregor Mendel s formuleze principalele legi ale ereditii i s pun
bazele geneticii, ca tiin biologic.
n cercetrile sale, Mendel a folosit cu precdere mazrea, plant anual care ofer
numeroase avantaje pentru studiul ereditii si variabilitii caracterelor calitative:
are flori hermafrodite cu polenizare strict autogam (cleistogam), mazrea s-a dovedit un
obiect potrivit pentru analizele genetice, folosind la ncruciare forme pure din punct de vedere
genetic;
este o plant anual i se pot urmri relativ repede descendenele n generaii succesive;
structura morfo anatomic a florii permite realizarea cu destul uurin a hibridri sexuate;
mazrea are numeroase soiuri (varieti care se deosebesc prin unul sau mai multe caractere
contrastante).
Mendel a folosit pentru ncruciare 22 de soiuri pure, la care a luat n considerare 7 caractere
alelomorfe (forma bobului, culoarea bobului, forma pstii uscate, culoarea pstii necoapte,
culoarea cotiledoanelor, poziia florilor pe plant i lungimea tulpinii).
Considerm c este util s definim, civa termeni de baz, folosii frecvent n
explorarea acestor fenomene.
18
Hibridarea reprezint metoda care permite obinerea de plante hibride (hibrizi). Ea
const n principal, n dou operaii: castrarea formei mam i polenizarea cu polen de la forma
tat.
Hibridul reperezint un organism rezultat prin hibridarea (ncruciarea) a doi sau mai
muli genitori (prini) diferii prin unul sau mai multe caractere. Hibridul ntrunete caractere de
la prinii folosii la ncruciare. Printele mam se noteaz cu , iar printele tat cu . Prinii se
noteaz cu P1 i, respectiv P2, iar generaiile hibride (filiaiile) cu F0, F1, F2,......, Fn.
Anul I (F0) P1 x P2
n care
P1 i P2 = prinii (genitorii)
Anul II F1 hibridarea
F1 x F1
Anul III F2
19
3.2. Monohibridarea i legea segregrii genelor
Monohibridarea este definit ca fiind ncruciarea ntre genitori ce se deosebesc printr-un
singur caracter. n experienele efectuate la mazre, G. Mendel a observat c pentru structurile
genetice heterozigote, fenotipul este rezultatul interaciunii dintre cele dou alele diferite, i a
enunat relaia de tip Pisum sau relaia de dominan i recesivitate.
P AA aa
G A x a
F1 Aa boabe galbene
F2 P Aa Aa
G A a x A a
F2 AA Aa Aa aa
3.2.2. Testcross-ul
Raportul de segregare fenotipic de 3:1, difer de raportul de segregare genotipic de 1:2:1,
rezult c cele dou genotipuri diferite (AA, Aa) determin acelai fenotip, respectiv culoarea
galben a boabelor. Pentru a putea preciza genotipul unor monohibrizi ce prezint acelai fenotip se
folosete testcross-ul, o ncruciare analizatoare cu un tester
Printele folosit ca tester este ntotdeauna homozigot recesiv pentru toate genele studiate.
Homozigotul produce ntotdeauna un singur tip de gamei, iar un heterozigot monohibrid produce
dou tipuri de gamei cu aceeai frecven. Determinarea structurii genetice a unui monohibrid se
face prin analiza descendenei din F1 (raportul de segregare), care permite s se determine indirect
numrul de gamei al individului testat i respectiv, genotipul acestuia.
Exemplu: a) O plant de mazre cu boabe galbene se ncrucieaz cu o plant cu boabe verzi
(caracter recesiv) i d natere n F1 la plante cu boabe galbene:
n F1 apare numai un singur fenotip- nseamn c individul testat produce numai un fel de
gamei (A) i este obligatoriu homozigot dominant pentru caracterul analizat (AA).
22
b) Considerm cazul cand o plant cu boabe galbene se testeaz cu o plant cu boabe
verzi i rezult plante cu boabe galbene i plante cu boabe verzi n proporie de 1:1 sau 50%:50%.
Individul (planta) testat este heterozigot (Aa) - n F1 au rezultat dou fenotipuri, indicnd
faptul c el a produs dou tipuri de gamei, respectiv A i a.
3.2.3.Backross
ncruciarea unui individ F1 cu unul din prini se numete backross. Uneori n literatura de
genetic, backrossul este utilizat n acelai sens ca testcross- ul. Referindu-ne la exemplul de mai sus
(folosit la testcross), prezentm ncruciarea backross n felul urmtor:
23
Backross-ul spre deosebire de testcross, nu oblig la folosirea printelui recesiv ca
tester. Aa cum se vede n exemplul folosit mai sus, testerul este printele homozigot dominant.
24
Fig 3.2.4.
n cazul n care cei doi prini prezint aceeai alel pe cromozom, n perechea de cromozomi
rezultat dup fecundare, alelele identice vor fi n doza dubla, iar organismul respectiv este
homozigot (dominant AA sau recesiv aa), iar cnd prinii au alele diferite la acelai
cromozom, organismul este heterozigot (Aa). n timpul meiozei (n procesul de formare al
gameilor) organismul heterozigot va produce gamei diferii ntre ei, deoarece ntr-un gamet (la
unul din polii celulei) va trece un cromozom cu alela dominant, iar n cellalt gamet (la cellalt
pol al celulei) va trece cellalt cromozom din pereche cu alela recesiv, devenind astfel
independeni att cromozomii ct i genele localizate pe ei. La o nou fecundare fiecare cromozom
(respectiv alel) din gametul femel se va ntlni fie cu un cromozom cu alel de acelai fel, fie cu
un cromozom cu alt alel din gametul mascul. n felul acesta vor apare indivizi diferii genetic n
combinaii noi de gene, care indic efectul segregrii n procesul de formare al gameilor urmat de
fecundare. Modul cum se realizeaz segregarea cromozomilor i respectiv a genelor (factorilor)
este prezentat n figura 3.2.4.
25
TEST DE EVALUARE
Ce este hibridarea?
Rspuns:
Reprezint ncruciarea ntre doi genitori ce se deosebesc prin unul sau mai multe caractere,
n scopul obinerii de hibrizi ce ntrunesc caracterele prinilor. Presupune dou operaiuni:
castrarea formei mam i polenizarea formei mam cu polen de la forma tat.
Exerciii
Exemplu rezolvat:
a) Alele
b) Nealele
c) Alelism
Rezolvare: a
De rezolvat:
Rezumatul temei
Caracterele calitative se deosebesc prin cteva trsturi definitorii. Ele au un determinism genetic
monogenic, exepie fac genele cu efecte pleiotrope; prezint fenotipuri distincte, contrastante;
segreg n generaia F2 n clase fenotipice uor de identificat datorit fenotipurilor distincte i nu
sunt (sau foarte puin) influenate de factorii de mediu.
Primele studii privind ereditatea caracterelor calitative au fost efectuate de ctre
G.Mendel la mazre care prezint o serie de avantaje ( plant cleistogam, anual, numr mic de
cromozomi, etc).
n urma studiilor efectuate folosind monohibridarea i polihibridarea la mazre,
G.Mendel a emis concluzii care ulterior au devenit legi ale ereditii.
Prima lege privind segregarea independent a genelor a fost descoperit la
monohibridare.
Monohibridarea reprezint ncruciarea ntre genitori cese deosebesc printr-un singur
caracter. Hibridarea presupune dou operaiuni: castrarea formei mam i polenizarea acesteia cu
polen de la forma tat. n experienele efectuate la mazre, G.Mendel a reuit s explice rezultatele
obinute pe baza relaiei de dominan total dintre alele. Astfel, n generaia F1, heterozigotul
prezint fenotipul unuia dintre genitori, respectiv dominant, iar n F2 la monohibridare apare un
raport fenotipic de dominant : recesiv.
Structurile genetice homozigote presupun prezena a dou alele de acelai fel, iar
structurile genetice heterozigote presupun existena a dou alele diferite pentru aceeai gen.
27
Tema nr. 4
POLIHIBRIDAREA I LEGEA SEGREGRII INDEPENDENTE A PERECHILOR DE
CARACTERE
Uniti de nvare:
Dihibridarea de tip Pisum;
Testcross-ul la dihibridarea
Trihibridarea de tip Pisum
Verificarea raporturilor de segregare (Testul 2)
Obiectivele temei:
prezentarea i fixarea mecanismelor privind erediatatea n cazul dihibridrii i trihibridrii
explicarea testcross-ului n cazul dihibridrii
deprinderea mecanismelor de emitere a ipotezelor de segregare i verificarea matematic a
acestora.
Unul din soiuri avea boabe galbene i rotunde- pur din punct de vedere genetic (AABB) i
cellalt avea boabe verzi i zbrcite- pur din punct de vedere genetic (aabb). n F1 au rezultat
plante dihibride cu boabe galbene i rotunde dublu heterozigote (AaBb).
Prin autofecundarea plantelor din F1 a rezultat n generaia a doua (F2) patru grupe (clase)
fenotipice n proporie de 9:3:3:1, adic:
Gameii maculi
Gameii femeli AB Ab aB ab
AB AABB AABb AaBB AaBb
galben-rotund galben-rotund galben-rotund galben-rotund
Ab AABb Aabb AaBb Aabb
galben-rotund galben-zbrcit galben-rotund galben-zbrcit
Gamei aB AaBB AaBb aaBB aaBb
i galben-rotund galben-rotund verde-rotund verde-rotund
fem ab AaBb Aabb aaBb aabb
eli galben-rotund galben-zbrcit verde-rotund verde-zbrcit
30
2/16 AaBB
2/16 aaBb
2/16 Aabb
1/16 AABB
1/16 AAbb
Raport genotipic de segregare: 1/16 aaBB
4/16 AaBb 1/16 aabb
2/16 AABb
Deoarece n metafaza I a meiozei fiecare pereche de cromozomi se separ independent i
apoi, migreaz la poli (respectiv n gamei) n toate combinaiile posibile, la ntmplare i cu
aceeai probabilitate , rezult 4 tipuri de gamei femeli i masculi, care n procesul de fecundare
vor forma 16 combinaii genotipice:
B) Metoda ramificaiilor
Aceast metod este utilizat pentru determinarea tuturor combinaiilor genotipice i
fenotipice posibile, fiind o metod rapid i simplificat.
a) proporia genotipurilor
b) proporia fenotipurilor
31
4.2 Testcross-ul la dihibridarea
Testarea dihibrizilor cu dominan complet (toatal). Pentru determinarea genotipurilor
dihibrizilor cu acelai fenotip, dar genotipuri diferite, se procedeaz la ncruciarea fiecrui
dihibrid cu printele dublu recesiv folosit ca tester.
a) Dac n F1 rezult un raport fenotipic de 1:1:1:1 :dihibridul testat este heterozigot pentru
ambele perechi de carctere, producnd 4 tipuri de gameti:
P AABb aabb
G AB AaBb 1/2
Ab x ab Aabb
Cel de al doilea caracter, forma bobului, este heterozigot(Bb), iar primul este homozigot
(AA).
33
Trihibridarea reprezint ncruciarea ntre doi genitori care se deosebesc prin trei perechi de
caractere.
Metodele prezentate la dihibridare se pot generaliza i n cazul ncrucirilor cu trei sau mai
multe perechi de alele localizate pe autozomi diferii.
Dac n reprezint numrul perechilor de alele heterozigote se pot determina proporiile
fenotipice n funcie de principalele relaii alelice (vom vedea n tema urmtoare i alte tipuri de
relaii).
La o trihibridare de tipul AABBCC x aabbcc, se pot folosi aceleai metode de analiz a
descendenilor, metoda ahului de combinaii devine ns complicat i greoaie, fapt pentru care
recomandm metoda ramificaiilor. Adugm al treilea caracter: talia plantelor.
A) metoda ahului de combinaii :schema unei trihibridri se prezint astfel:
P AABBCC x aabbcc
F1 AaBbCc
F2 P AaBbCc AaBbCc
35
Combinaiifenotipice:
Combinaii genotipice:
36
Raportul genotipic este urmtorul: 8:4:4:4:4:4:4:2:2:2:2:2:2:2:2:2:2:2:2:1:1:1:1:1:1:1:1 = 64
La trihibridare combinaiile noi de gene care rezult sunt n proporie mult mai ridicat fa
de dihibridare. Posibilitile de combinare sunt mai mari, datorit numrului de gene independente
implicate. Astfel, dac la dihibridare proporia combinaiilor noi este de 6/16 (30,7 %), la
trihibridare este de 36/64 (56,8 %). Cu ct doi genitori se deosebesc prin mai multe perechi de
37
caractere, cu att combinaiile noi sunt mai numeroase n defavoarea formelor parentale si
variabilitatea organismelor crete.
4.4. Verificarea raporturilor de segregare (Testul 2)
Pentru verificarea unei ipoteze de segregare, trebuie gsit o metod de calcul care permite
estimarea probabilitii (P), a estimrii abaterilor (diferenelor) ntre valorile observate i cele
ateptate.
Aceast metoda trebuie s in cont de numrul de indivizi (descendeni) analizai i de
gradul de libertate (GL).
GL = n-1 n care n= numrul de clase fenotipice
Testul 2 este metoda de calcul care permite evaluarea unei asemenea probabiliti.
La compararea rezultatelor obinute cu cele ateptate (teoretice) n cadrul unei anumite
ipoteze de segregare, se admite n primul rnd c ipoteza considerat este just i c diferena ntre
rezultatele obinute i cele ateptate se datoreaz numai faptului c numrul de descendeni (indivizi)
analizai este limitat.
Testul 2 se calculeaz dup formula urmtoare:
2 = (d2/t) n care: d = diferena dintre valorile experimentale
i cele teoretice; t = valorile teoretice
n funcie de valoarea lui 2 calculat i gradele de libertate se determin probabilitatea P,
folosind datele din tabelul de date (dup R. A. Fisher i F. Yates)
Tabelul 1
Distribuia 2 (dup Fisher i Yates)
GL Probabilitatea
0,95 0,90 0,80 0,70 0,50 0,30 0,20 0,10 0,05 0,01 0,001
1 0,004 0,02 0,06 0,15 0,46 1,07 1,64 2,71 3,84 6,64 10,83
2 0,10 0,21 0,45 0,71 1,39 2,41 3,22 4,60 5,99 9,21 13,82
3 0,35 0,58 1,01 1,42 2,37 3,66 4,64 6,25 7,82 11,34 16,27
4 0,71 1,06 1,65 2,20 3,36 4,88 5,99 7,78 9,49 13,28 18,47
5 1,14 1,61 2,34 3,00 4,35 6,06 7,29 9,24 11,07 15,09 20,52
6 1,63 2,20 3,07 3,83 5,35 7,23 8,56 10,64 12,59 16,81 22,46
7 2,17 2,83 3,82 4,67 6,35 8,38 9,80 12,02 14,07 18,48 24,32
8 2,73 3,49 4,59 5,53 7,34 9,52 11,03 13,36 15,51 20,09 26,12
9 3,32 4,17 5,38 6,39 8,34 10,66 12,24 14,68 16,92 21,67 27,88
10 3,94 4,86 6,18 7,27 9,34 11,78 13,44 15,99 18,31 23,21 29,59
Nesemnificativ Semnificativ
38
Probabilitatea poate fi experimentat n procente sau n fraciuni de unitate. Dac aceast
probabilitate este prea mic inseamn c raporturile de segregare experimentale nu pot fi luate in
considerare pentru demonstarea unei anumite ipoteze. Se elimin o ipotez cnd P< 5% . n acest
caz, se consider c valorile experimentale se abat semnificativ fa de valorile ateptate (teoretice)
n cadrul ipotezei stabilite.
Abaterile mari dintre valorile experimentale i cele teoretice, n cadrul unei anumite ipoteze,
se pot datora urmtoarelor cauze:
- ipoteza privind raportul de segregare nu este just, caz n care se lanseaz o alt ipotez care s
poat fi luat in considerare;
- valorile experimentale au fost afectate de o serie de erori (determinri greite, impurificri
mecanice sau biologice a descendenei analizate, etc.);
- numrul de indivizi cercetai a fost prea mic.
Testul 2 se folosete in cazul variabilelor continui (caracterelor cantitative) cu o distribuie
normal, iar pentru caracterele calitative unde numrul claselor fenotipice este de obicei restrns,
n unele cazuri trebuie s se introduc o corecie pentru a ine cont de absena continuitii.
Aceast corecie implic o uoar diminuare a valorii lui 2 , care poate avea importan mare n
vecintatea valorii critice corespunztoare lui P5%. Aceast corecie este obligatorie cnd anumite
clase fenotipice cuprind ntre 5 10 indivizi. Testul 2 corectat se calculeaz dup formula:
2corectat = [(d 0,5)2 /t]
Exemplu:
La ncruciarea unui soi de mazre cu boabe galbene cu un soi cu boabe verzi rezult n F1
numai plante cu boabe galbene. n F2 din cele 400 plante s-au gsit 90 plante ale cror boabe sunt
verzi. Presupunem c acest caracter este guvernat de o singur gen i boabe galbene (Y. ) este
dominant fa de boabe verzi (yy).
Rezolvare:
P: YY(galbene) x yy(verzi)
F1: Yy(galbene)
39
Fiind vorba de numai dou clase fenotipice se calculeaz obligatoriu 2 corectat:
Clase Valori Valori (e t) 0,5 [(e t) 0,5]2/ t
fenotipice exper. (e) teoretice (t)
Boabe galbene 310 3/4 x 400 = 300 9,5 0,300
Boabe verzi 90 1/4 x 400 = 100 9,5 0,902
Total 400 400 2 = 1,102
GL = 2 1 = 1
Testul 2 nu are valoare semnificativ, ntruct P > 20% i deci, ipoteza privind raportul de
segregare este just.
TEST DE EVALUARE
Rspuns:
Enunai cea de adoua lege a lui G.Mendel:
Cea de a doua lege se refer la combinarea liber a genelor (caracterelor) sau segregarea
independent a perechilor de gene. Ca urmare in F2 apar combinaii (fenotipuri) noi- valabil la
polihibridare.
Exerciii
Exemplu rezolvat:
Cnd se respinge o ipotez de segregare?
a) P=4%
b) P<5%
c) P>5%
Rezolvare: b
1. Cte tipuri de gamei va forma un individ cu structura genetic AABbCcDd?
a) 8;
b) 10;
c) 6.
40
Rezumatul temei
41
Tema nr. 5
INTERACIUNI GENICE
Uniti de nvare:
interaciuni ale genelor alele.
sisteme plurialele; penetran i expresivitate; gene i mediu
Interaciuni ale genelor nealele.
Obiectivele temei:
evidenierea altor interaciuni ale genelor alele i fixarea mecanismelor ereditii caracterelor
sub inflena acestor interaciuni;
prezentarea sistemelor de alele multiple i interactiunile dintre acestea, precum i
comportarea genelor n anumite condiii de mediu;
prezentarea i fixarea diferitelor relaii ce apar ntre gene nealele i efectele pe care le au
asupra transmiterii caractelor n diferitele generaii.
5.1.2. Supradominana
Este relaia interalelic, n care un individ n stare heterozigot (Aa) determin o sporire sau
o intensificare a fenotipului fa de indivizii homozigoi de tip parental (Aa > AA > aa). Acest
fenomen este mai pregnant n cazul unor caractere cantitative ca: talia, fertilitatea, vigoarea, etc,
avnd importan n apariia heterozisului.
n acest caz, n F2, raportul fenotip va fi: fenotipul P1: 2/4 fenotipul supradominant:
fenotipul P2.
5.1.3. Codominana
Sistemului sangvin la om prezint patru grupe de snge notate cu A, B, AB i 0, controlate
genetic de locului I cu trei alele multiple, i anume: IA (alela pentru producerea aglutinogenului
A), IB (alela pentru aglutinogenul B) i I0 (alela pentru lipsa aglutinogenilor).
Alelele IA i IB sunt dominante asupra alelei I0, iar cnd se gsesc mpreun la acelai
individ sunt codominante, determinnd un fenotip nou i, respectiv grupa sangvina AB. Prezentm
n continuare fenotipurile i genotipurile posibile innd cont de relaiile existente.
43
Grupa sangvina (fenotipul) Genotipul
A IA IA sau IA I0
B IB IB sau IB I0
AB (codominanta) IA IB
0 I0 I0
Cunoaterea acestor relaii alelice este necesar pentru realizarea transfuziilor de snge
(persoanele cu grupa 0 sunt donatori universali, iar persoanele cu grupa AB sunt primitori
universali; persoanele cu grupa sangvin A primesc sange de la A i 0, persoanele cu grupa
sangvin B de la B i 0, iar 0 numai de la 0) i n stabilirea paternitii. Cunoscnd grupa sangvin
a copilului i a mamei se pot cunoate grupele sangvine ale tatlui prezumtiv.
Exemplu: Cnd copilul are grupa B i mama 0, tatl nu poate avea dect grupa B
(homozigot sau heterozigot) sau grupa AB.
5.1.4. Letalitatea
Unele alele pot provoca moartea individului n perioada prenatal sau postnatal n stadii
diferite de dezvoltare. Asemenea alele au fost denumite letale. O alel letal dominant poate
determina moartea individului n stare homozigot (LL) i, uneori chiar n stare heterozigot (Ll);
ea se elimin din populaie n momentul cand apare n constituia unui individ. O alel letal
recesiv determin moartea individului numai n stare homozigota (ll). Dup caz, indivizii
heterozigoi sunt n aparen normali sau pot manifesta unele deficiene, care ns nu le afecteaz
viabilitatea.
Putem preciza dou tipuri de letalitate:
a) Letalitatea de dominan cnd o alel dominant n stare homozigot (uneori chiar
heterozigot) provoac moartea indivizilor;
44
Rezult urmatoarele genotipuri i fenotipuri:
Genotipul Fenotipul Raportul de segregare
LL galbeni (letali)
2Ll galbeni(viabili) 2:1
ll alt culoare (viabili)
46
Exemple:
a) Polidactilia (apariia de degete suplimentare) manifestat la om, este determinat de
prezena genei dominante P. Pentru fenotipul normal corespunde genotipul pp. Cu toate acestea,
indivizi cu genotipul Pp nu prezint polidactilie.
Pentru acest caz, spunem c penetrana genei P este
mai mic de 100%.
b) Polidactilia se poate exprima numai la mini
i nu la picioare. Este vorba de o expresivitate diferit
47
5.3.1. Epistaziile
Genele care inhib aciunea altor gene (gene nealele) se numesc epistatice, iar genele inhibate
se numesc gene hipostatice. Pot fi att alele dominante, ct i recesive.
n cazul epistasiei ntre doi loci se obin n F2 raporturi fenotipice diferite de cele de la o
dihibridare. Putem spune c exist trei tipuri de epistazii.
G NC x nc
n F2, rezult :
48
5.3.1.2. Epistazia de recesivitate
O gen recesiv homozigot aa inhib exprimarea fenotipic a alelelor unui locus B, se
consider c genotipul aa exercit o epistazie recesiv asupra locusului B. Aceasta nseamn c aa
inhib pe BB, Bb i bb.
Exemplu:
oarecii albi sunt din punct de vedere genetic de tip slbatic (agouti) deoarece conin
gena A, care ns nu se manifest datorit genei recesive epistatice cc, care inhib formarea
oricrui pigment. Ei au genotipul AAcc sau Aacc.
La ncruciarea unor oareci albi (AAcc) cu oareci negri (aaCC) au rezultat n F1 oareci de
tip slbatic (agouti), iar n F2 un raport de segregare de 9 agouti : 3 negri : 4 albi.
Este vorba de un singur caracter (culoarea prului),dar raportul de segregare indic faptul c
sunt implicate dou gene cu relaie epistatic (gen epistatic recesiv). Notnd cu A . agouti, aa
culoarea alb, C . culoarea neagr, cc culoarea alb (epistatic).
albi negri
Exemplu:
P IICC x iicc
F1 IiCc (alb)
F2 9 I.C. - alb
3 I.cc - alb 13 alb
1 iicc - alb
La incruciarea ntre rasele de gini albe, Leghorn x Wyandotte, n F1 rezult numai gini
albe, iar n F2 segreg n raporul de 13 gini albe : 3 gini negre. Numrul de 16 combinaii n F2
indic prezena a dou perechi de gene ntre care apar interaciuni epistatice. S-a dedus c rasa
Leghorn este genetic de culoare neagr (C .), dar nu se manifest din cauza unei gene epistatice
dominante (I .). Rasa Wyandotte are gena recesiv cc, care la rndul ei inhib gena ii ce produce
culoare. Culoarea neagr apare numai la genotipul iiC .
Complementaritatea presupune interaciunea a dou sau mai multe gene nealele pentru
controlul unui caracter. Genele cu aciune complementar, fie n stare homozigot, fie n stare
heterozigot, conlucreaz i duc la apariia unei caracteristici deosebite.
Complementaritatea a dou gene dominante a fost pus n eviden la dovleac, la care dou
gene dominante ( A i B ) acioneaz aditiv la determinarea formei i mrimii fructului. Astfel
plantele cu genotipul aabb au cea mai mic mrime i forma alungit. Prezena unei singure gene
dominante (A sau B) sub form homo- sau heterozigot determin forma sferic, iar prezena
ambelor gene dominante determin mrimea cea mai mare i forma de disc, efectele celor dou gene
dominante se cumuleaz. Raportul caracteristic al dihibridrii de 9:3:3:1 va deveni n acest caz de
9:6:1.
50
P AABB x aabb
Disc alungit
F1 AaBb
Disc
F2 9/16 A.B. disc
3/16 A.bb sfer
3/16 aaB. sfer
1/16 aabb alungit
La Lathyrus odoratus, exist varieti de plante cu flori roii i varieti de plante cu flori
albe. La ncruciarea a dou varieti cu flori albe, n F1 s-au obinut plante cu flori roii, prin
autopolenizarea acestora n F2 au rezultat plante cu flori roii i plante cu flori albe ntr-un raport de
9:7.
Raportul de segregare indic o dihibridare. Culoarea roie apare cnd sunt prezente ambele
gene dominante, dac exist doar o gen dominant (sau niciuna) nu apare culoarea roie.
F2 9/16 A.B. roie
3/16 A.bb alb
3/16 aaB. alb
1/16 aabb alb
51
TEST DE EVALUARE
Rspuns:
Cum poate fi definit relaia de semidominan?
Relaia n care heterozigotul prezint un fenotip intermediar ntre fenotipurile parentale.
Raportul de segregare n F2 este 1/4P1: 2/4 semidominant: 1/4P2.
4. Definii relaia de tip Zea i indicai raportul de segregare pentru generaia F2.
Exerciii
Exemplu rezolvat:
La ncruciarea ntre doi genitori de Mirabilis jalapa cu flori roz, au rezultat indivizi flori
albe : 2/4 indivizi flori roz :1/4 indivizi flori roii. Raportul confirm relaia de:
a) Supradominan
b) Codominan
c) Semidominan
Rezolvare: c
1. Mama are grupa sangvin AB, tatl grupa 0. Ce grupe sangvine poate avea copilul?
a) A i B
b) AB i A
c) B i 0
2. Culoarea alb a florilor de Primula se manifest la temperaturi de:
a) 35C
b) 25C
52
c) 18C
3. Manifestarea polidactiliei doar la mini se datoreaz:
a) Penetranei
b) Fenocopiilor
c) Expresivitii
4. Mama are grupa sangvin B, copilul grupa O. Ce grup sangvin poate avea tatl?
a) O sau AB
b) O sau A heterozigot, B hetrozigot
c) O sau B homozigot
5. n cazul unei epistazii de recesivitate, raportul de segeregare n F2 este:
a) 9:3:4
b) 15 :1
c) 12 :3 :1
Rezumatul temei
Cercetrile hibridologice efectuate dup redescoperirea legilor mendeliene au relevat cazuri
n care ntre alelele unei gene pot apare i alte relaii dect cea de dominan i recesivitate.
Astfel pentru unele situaii sunt prezentate relaiile de semidominan, supradominan,
codominan i letalitate, cu modificrile caracteristice ale raportului de segregare din generaia F2.
n cazul relaiei de semidominan, heterozigotul prezint un fenotip intermediar fa de
fenotipurile parentale, iar n generaia F2 va apare un raport fenotip de 1:2:1. De asemeni, relaia de
codominan i supradominan presupune un raport fenotip n F2 de 1:2:1. Definirea acestor relaii
se face comparnd fenotipul heterozigotului cu fenotipurile parentale. Astfel, pentru supradominan,
heterozigotul prezint un fenotip ce depete prinii, iar pentru codominan el prezint un fenotip
nou.
De asemenea, pentru determinismul unor caractere pot s apar i interaciuni ntre gene
nealele (epistaziile i complementaritatea), interaciuni ntre gene i mediu. Aceste interaciuni ntre
gene nealele presupun existena unor gene ce au aciune de inhibare gene epistatice i existena
altor gene inhibate gene hipostatice. n funcie de tipul genei epistatice, putem avea epistazie de
dominan ( raport fenotipic 12:3:1), epistazie de dominan i recesivitate ( raport fenotipic
13:3), epistazie de recesivitate ( 9:3:4). Raportul clasic de la dihibridare ( 9:3:3:1) suport o abatere
aparent n cazul interaciunilor dintre gene nealele. Exprimarea unui caracter depinde i de
interaciunea dintre gene i mediu, pot apare devieri fenotipice n funcie de anumii factori de
mediu.
53
Tema nr. 6
TEORIA CROMOZOMIAL A EREDITII
Uniti de nvare:
Drosophila melanogaster obiect de studiu. Aezarea liniar a genelor pe cromozomi.
Transmiterea nlnuit a genelor plasate pe acelai cromozom linkage.
Crossing-over sau schimbul reciproc de segmente cromozomale (gene) ntre cromozomii
omologi.
Obiectivele temei:
enumerarea i prezentarea tezelor emise de ctre Thomas Hunt Morgan i colaboratorii lui n
urma studiilor efectuate la Drosophila melanogaster.
fixarea mecanismelor privind transmiterea genelor linkage i recombinarea genetic ce poate
apare n cazul acestor gene ( completeaz cunotiinele privind ereditatea caracterelor).
trecerea n revist a diferiilor factori ce pot influena manifestarea crossing-over-ului.
Timp alocat temei : 3 ore
Bibliografie recomandat
1. Casian, H., 2006, Genetica suport pentru curs, Ed. Printech.
2. Nicolae, I., Rduoiu, S., Butnaru, G.,Nicolae, F., 2000, Genetica- principii de baz ale
ereditii, Vol. I, Ed. Bioterra, Bucureti.
3. Hartl ,D. L., Jones, E., 2000, Genetica. Principi e applicazioni, Editoriale Grasso.
Thomas Hunt Morgan, profesor la Universitatea Columbia din New York, mpreun cu
colaboratorii si C.B. Bridges, A.H. Sturtevant, H.J. Muller, au
elaborat teoria cromozomial a ereditii, care asociaz genele cu
cromozomii.
Cercetrile efectuate n anii 1910 1915 asupra musculiei
de oet Drosophila melanogaster, au permis concluzii ce sunt
cunoscute astzi ca teze i completeaz tabloul privind ereditatea
caracterelor.
54
Drosophila melanogaster se nmulete foarte repede, la temperatura de 20C se obine o
generaie n 12 zile. Astfel, se puteau studia mai multe generaii pe an comparativ cu mazrea
obiect de studiu la G.Mendel. Fiecare femel produce cteva sute de descendeni ce cresc pe un
mediu minimal, astfel c numrul indivizilor cercetai ntr-un interval scurt este foarte mare.
Numrul de cromozomi n celula somatic este mic la Drosophila melanogaster (2n=8) i pot fi uor
identificai.
T.H.Morgan i colaboratorii au identificat peste 500 de mutaii care afecteaz organele
insectei (vezi fig.5.1 ) :
culoarea ochilor w = alb forma aripilor vg+= normale
pr= purpurie vg= vestigiale
se= sepia
culoarea corpului y+ = cenuiu
y = galben
yb = negru
Fig.nr. 6.1 Diferite mutante la Drosophila melanogaster (culoarea ochilor, forma aripilor, culoarea
corpului)
Prima tez a teoriei cromozomiale a ereditii consider c genele sunt plasate pe cromozomi
n anumite poziii denumite loci ( locus singular). Pe ambii cromozomi este prezent cte o alel
pentru fiecare gen, astfel putem avea starea homozigot ( AA sau aa) sau heterozigot (Aa).
T.H. Morgan i colaboratorii au ajuns la aceast concluzie n urma analizrii unor musculie
ce aveau 2n=7 cromozomi fa de 2n=8. Au sesizat corelaia dintre lipsa unui cromozom i absena
anumitor caracteristici, cum ar fi prezena ochilor. De asemenea ei au identificat la musculia de oet
peste 500 de mutante, iar numrul total de cromozomi este 8, ca urmare pe fiecare cromozom trebuie
s se fie mai multe gene.
56
n cazul testcross-ului unui dihibrid heterozigot cu gene nlnuite (situate pe acelai
cromozom) rezult raportul de segregare de 1:1. reprezentnd formele parentale:
58
6.3. Schimbul reciproc de gene (Crossing-over-ul)
Crossing over-ul apare n meioz, dar poate s apar i n mitoz, n diferite esuturi i
organe.
n cursul meiozei, fiecare cromozom se duplic n dou cromatide surori, identice.
Cromozomii omologi se mperecheaz (conjug) i formeaz tetrade cromatidice; ntre cromatidele
nesurori pot avea loc schimburi reciproce de segmente (gene). n schema de mai jos prezentm
situaia cnd are loc un singur crossing over ntre dou gene, A i B.
Rezult c dou dintre cele patru cromatide nu au suferit crossing over i au genele asociate
ca n cromozomii parentali (cromatide parentale), iar celelalte dou cromatide au suferit crossing
over-ul (schimb reciproc de gene) i prezint asociaii noi de gene (cromatide recombinate sau
remaniate).
Un crossing over n afara intervalului A-B nu produce schimbri ntre cei doi markeri (A i
B). Dac ntre doi loci (A-B) apar dou crossing overe ntre aceleai cromatide surori, cromatidele
rezultate la sfritul meiozei vor fi toate de tip parental. Orice dublu crossing over ntre doi markeri
A i B, nu poate fi decelat dect n prezena unui al treilea marker C situat ntre A i B. Dac ntre A
i C, pe de o parte i ntre C i B, pe de alt parte, probabilitile de apariie a unui crossing over sunt
x i, respectiv y, probabilitatea crossing overe-lor duble (unul ntre A i C i altul ntre C i B) este
egal cu produsul xy.
Crossing over-ul se detecteaz ca i linkage-ul prin testcross-ul heterozigotului F1 i analiza
ralortului de segregare n F2.
a) detectarea crossing over-ului prin testcross (la crossing over-ul ntre doi loci).
59
Un dublu heterozigot care se testeaz cu printele dublu recesiv poate avea dou poziii ale
alelelor: a) poziia cis, cnd ambele alele dominante se gsesc pe un cromozom, iar alelele recesive
pe cromozomul omolog (AB // ab) si b) poziia trans, cnd fiecare cromozom are o alel dominant
i alt alel recesiv (Ab // aB). Analizele hibridologice efectuate la Drosophila de ctre Morgan i
colaboratorii au relevat faptul c heterozigotul F1 folosit ca femel formeaz patru tipuri de gamei n
proporii diferite: gameii de tip parental apar cu o frecven mare, iar gameii recombinai cu o
frecven sczut. Testerul mascul este homozigot i recesiv, formnd un singur tip de gamei. n
descendena testcross apar patru fenotipuri n proporii determinate de cele patru tipuri de gamei.
Combinaiile parentale (non cross overe), care apar n proporia cea mai mare, indic intensitatea
linkage-ului ntre cei doi loci considerai, iar tipurile noi de indivizi reprezint recombinrile genelor
(crossovere). Analiza acestor rezultate i-au permis lui Morgan s constate c frecvena crossing
over-ului ntre cele dou gene (B i Vg) reprezint distana dintre aceste gene localizate n acelai
cromozom. Cnd s-au folosit n analize hibridologice ali loci (gene), frecvena recombinrilor a fost
alta, demonstrnd astfel, corelaia dintre frecvena crossing overe-lor nregistrate i distana ntre
genele implicate.
Exemplu:
La ncruciarea unei femele heterozigote de Drosophila cu corp cenuiu i aripi normale (BVg // bvg)
cu un mascul dublu recesiv (bvg // bvg) au rezultat n descendena acestui testcross 41,5% indivizi cu
corp cenuiu i aripi normale,
60
41,5% cu corp negru i aripi vestigiale, 8,5% cu corp cenuiu i aripi vestigiale i 8,5% cu corp
negru i aripi normale. Primele dou fenotipuri reprezint combinaiile parentale (non crossovere)
care nsumeaz 83%, iar ultimele dou fenotipuri reprezint recombinri ale celor dou gene
(crossovere), datorate schimbului reciproc de gene ntre cei doi cromozomi omologi, nsumnd 17%.
b) detectarea crossing over-ului prin analiza descendenei F2 (la crossing over-ul ntre cei
doi loci).
n cazul a doi loci independeni (nu manifest linkage), segregarea fenotipic n F2 este tipic
mendelian, adic de 9:3:3:1. Dac cei doi loci manifest linkage incomplet, atunci n F2 se vor
manifesta fenotipic n exces combinaiile parentale (non crossoverele), n timp ce recombinrile
(crossoverele) vor apare cu o frecven sczut, dependent de distana dintre genele considerate.
b) dup nivelul la care are loc ruperea i schimbul de segmente cromozomiale, crossing over-
ul poate fi:
62
1) crossing over egal, atunci cnd chiasmele apar ntre loci omologi (la acelai nivel sau
punct) i segmentele cromatidice care se schimb sunt egale (identice); acesta este tipul normal de
crossing over, cu ruperi i schimburi simetrice (egale) de segmente cromatidice:
TEST DE EVALUARE
Cine a elaborat teoria cromozomial a ereditii?
Rspuns:
Teoria cromozomial a ereditii a fost elaborat de Thomas Hunt Morgan mpreun cu
colaboratorii si C.B. Bridges, A.H. Sturtevant, H.J. Muller. Teoria cuprinde trei teze i
asociaz genele cu cromozomii.
64
Exerciii
Exemplu rezolvat:
1. Care este numrul somatic de cromozomi la Drosophila melanogaster?
a) 2n=8;
b) 2n=12;
c) 2n =6.
Rezolvare: a
2. Cte mutante a identificat T.Morgan la musculia de oet?
a) 200;
b) 500;
c) 600.
3. n cazul linkage-ului complet, raportul fenotipic obinut prin testcross este:
a) 3:1;
b) 1:1:1:1;
c) 1:1.
4. n cazul linkage-ului complet n generaia F2 va apare un raport fenotipic:
a) 9:3:3:1;
b) 3:1;
c) 1:1.
Rezumatul temei
T.Hunt Morgan i colaboratorii au evideniat modul de transmitere al genelor plasate pe
acelai cromozom. Ei au obinut rezultate diferite n cazul dihibridrilor fa de G.Mendel, care a
studiat gene independente. Ca urmare au fost elaborate trei teze: 1) plasarea liniar a genelor pe
cromozom; 2) linkage-ul complet i 3) crossing-overul.
n cazul manifestrii linkage-ului complet, raportul de segregare n generaia F2 este de 3:1,
ceea ce demonstreaz c genele plasate pe acelai cromozom se comport ca o singur unitate
ereditar.
n cazul crossing-overului, fenotipurile parentale reapar n proporii egale i mari, iar
recombinrile apar n proporii mai mici n funcie de distana dintre gene.
Pentru punerea n eviden a tezelor sunt utilizate metoda studiului generaiei F2 i testcross-
ul heterozigotului F1.
65
Crossing-overul este influenat de o serie de factori ce pot favoriza sau defavoriza manifestarea
acestuia: sexul, vrsta, zona heterecromatic, modificrile structurale i numerice ale
cromozomilor, factorii de mediu.
Clasificarea crossing-overului se realizeaz dup mai multe criterii, cel mai adesea el este
meiotic ( are loc n pachinem- profaza I), rareori este mitotic.
Recombinarea realizat asigur variabilitatea organismelor, respectiv supravieuirea speciilor.
Frecvena crossoverelor precizeaz distana dintre genele plasate pe acelai cromozom i ca
urmare au putut fi realizate hrile genetice la mai multe specii, inclusiv om.
66
Tema nr. 7
VARIAII ALE NUMRULUI DE CROMOZOMI. EUPLOIDIA.
Uniti de nvare :
Ploidia: definiie i clasificare.
Monoploidia i haploidia: caracteristici, importan i inducere experimental.
Poliploidia: catacteristici, importan i inducerea experimental.
Obiectivele temei :
nsuirea noiunilor referitoare la ploidie : numrul de baz X , starea diploid, euploidie ,
aneuploidie, etc ;
Fixarea caracteristicilor monoploizilor, haploizilor , utilizarea lor n agricultur i metode de
inducere;
Fixarea caracteristicilor poliploizilor, clasificarea poliploizilor, utilizarea n agricultur i
metode de inducere.
7.1. Ploidia
Cel mai adesea , numrul de cromozomi din celule este constant ( diploid n celulele somatice
i haploid n celulele sexuale). Uneori, acest numr sufer modificri (creterea sau reducerea), ceea
ce duce la o variaie a numrului de cromozomi cu implicaii i asupra fenotipului indivizilor
afectai. Aceast modificare a numrului de cromozomi este cunoscut sub denumirea de ploidie.
Variaiile numerice pot apare spontan n natur sau sunt induse de ctre om, unele dintre ele
prezentnd interes pentru producie sau n lucrrile de ameliorare ale speciilor.
67
Pentru aprecierea gradului de ploidie, este necesar s se cunoasc numrul de baz sau X
caracteristic fiecrei specii. Numrul de baz (X) reprezint numrul haploid de cromozomi al
speciei ancestrale.
Exemplu:
Pisum sativum are x=7 ; 2n=2x=14 este un diploid.
Triticum aestivum are x=7 ; 2n=6x=42 este un hexaploid.
Mutaiile numeric cromozomale pot fi clasificate n dou mari categorii :
1) Euploidia variaie ce implic ntreg genomul, putem discuta despre o reducere sau o
multiplicare a acestuia ;
2) Aneuploidia variaie ce afecteaz doar unul, doi cromozomi din genom.
n cadrul acestei teme vom face referire la euploidie, variaie a numrului de cromozomi ce
afecteaz ntreg genomul i se poate referi la o reducere sau o multiplicare a numrului de
cromozomi. Aceasta presupune c euploidia la rndul ei se mparte n dou categorii :
monoploidia respectiv poliploidia.
68
7.2.1.Importana monoploizilor i inducerea experimental
Datorit vigorii reduse i sensibilitii mari fa de factoriii de mediu, monoploizii nu sunt
folosii n producie, interesul lor este n procesul de ameliorare. Astfel, prin dublarea numrului de
cromozomi se obin rapid forme homozigote numite linii izogene.
n cazul speciilor autogame , liniile izogene sunt folosite n procesul de selecie (metod de
ameliorare). Caracteristicile prezentate de aceste linii (manifestarea genelor recesive este posibil
datorit homozigoiei) pot corespunde obiectivelor de ameliorare urmrite de specialiti.
n cazul speciilor alogame, liniile izogene sunt folosite pentru obinerea hibrizilor comerciali
F1, ce manifest efectul heterozis. x
Importana monoploizilor:
Datorit vigorii reduse i sensibilitii mari fa de factorii de mediu, monoploizii nu sunt
folosii n producie, interesul lor este pentru procesul de ameliorare. Astfel, prin dublarea numrului
de cromozomi se obin rapid forme homozigote numite linii izogene.
n cazul speciilor autogame , liniile izogene sunt folosite n procesul de selecie (metod de
ameliorare). Caracteristicile prezentate de aceste linii pot corespunde obiectivelor de ameliorare
urmrite de specialiti. Importana genetic a monoploizilor const n manifestarea integral a
tuturor genelor, inclusiv a celor recesive. Din acest punct de vedere, monoploizii constituie un
material ideal pentru studiile de mutagenez. La monoploizi, mutaiile aprute pot fi decelate chiar
n anul producerii lor, deoarece se manifest n fenotip toate genele, inclusiv cele recesive, contrar
celor de la poliploizi, care trebuie cutate n generaiile segregante.
n cazul speciilor alogame, liniile izogene sunt folosite pentru obinerea hibrizilor comerciali
F1, ce manifest efectul heterozis, aceste linii fiind superioare celor consangvine.
Inducerea monoploidiei :
Formele monoploide pot fi obinute in vivo ct i in vitro.
1. Metodele utilizate pentru inducerea in vivo a haploidiei sunt:
- iradierea polenului cu radiaii ionizante sau ultraviolete n vederea distrugerii unei
spermatii, ce duce la formarea de haploizi dintr-o oosfer nefecundat;
- polenizarea ntrziat i tratamentele cu ocuri de temperatur imediat dup polenizare;
- ndeprtarea staminelor florale, fapt ce mpiedic polenizarea normal;
- inactivarea nucleilor spermatici prin tratamente cu diferite substane chimice, care
favorizez o dezvoltare partenogenetic;
- inhibarea creterii tubului polinic prin tratament cu hidrazida maleic.
69
2. Metodele de inducere in vitro a haploidiei sunt:
- culturi de antere, din grunciori de polen imaturi sau n culturi de ovule nefecundate, pe
medii artificiale.
Tehnica de obinere n culturi de antere sau ovule nu este aplicabil la toate organismele,
deoarece exist unele specii refractare la aceste procedee.
O tehnic deosebit de avantajoas este metoda bulbosum, n care forma diploid de orz
(Hordeum sativum) a fost polenizat cu polen de la forma slbatic Hordeum bulbosum. n
succesiunea diviziunilor mitotice cromozomii speciei Hordeum bulbosum au fost eliminai, dnd
natere unui embrion haploid. Procesul de haploidizare este aproape similar cu fenomenul de
incompatibilitate genetic ntre seturile cromozomale ale celor dou specii, chiar dac fecundarea
are loc. Prin utilizarea metodei bulbosum s-au obinut rapid forme homozigote, fiind posibil
introducerea n cultur a numeroase varieti noi de orz. Metoda se preteaz i la alte specii.
7.3. Poliploidia
Poliploidia: este definit ca variaia numrului de cromozomi ce presupune multiplicarea
numrului de baz X, superioar lui 2. n cadrul poliploidiei categoriile sunt clasificate dup dou
criterii:
1. Dup numrul de multiplicare:
Artioploizi numrul de multiplicare este par (4x, 6x, 8x,etc). Aceti indivizi au meioz
normal datorit homologiei cromozomilor i sunt fertili.
Perisoploizi numrul de multiplicare este impar (3x, 5x, etc) sunt deobicei sterili i se
recomand la speciile cu nmulire vegetativ.
2. Dup modul de obinere:
Autopoliploizi
Alopoliploizi
o Autopoliploizii: rezult n urma multiplicrii propiului numr de cromozomi, cel mai
adesea sunt forme fertile i se recomand utilizarea lor n producie.
2n=2x AA
Dublare nr. cromozomi
2n=4x AAAA
n celulele poliploide apar o serie de modificri care sunt identificate prin investigare
microscopic. Datorit numrului sporit de cromozomi, celulele sunt mai mari, diametrul celulelor
somatice este mai mare i conin un numr sporit de cloroplaste. n celula poliploid numrul
70
cromocentrilor nucleolari este de asemenea mai mare. Diametrul grunciorilor de polen de la
organismele poliploide, ca i numrul porilor germinativi a polenului este mai mare.
Macroscopic se disting mai multe particulariti, habitusul plantelor este mai mare i mai
viguros, cu numr mic de tulpini, lstari sau ramificaii, dar de dimensiuni mult mai mari. Plantele
au flori mai puine dar mari i intens colorate. Aparatul foliar este alctuit dintr-un numr mai mic
de frunze, de dimensiuni mai mari i de un verde intens.
Fertilitatea autoploizilor, n general, este mai sczut, mai ales la perisoploizi, deoarece apar
diferite anomalii n desfurarea meiozei. Anomaliile sunt frecvente n profaza I, deoarece alturi
de bivaleni, se formeaz i uni-, tri- i tetra- valeni. Multivalenii segreg dezordonat (nebalansat)
n anafaza I ceea ce duce la formarea de gamei neechilibrai, pe acest considerent se recomand
utilizarea plantelor poliploide numai atunci cnd din punct de vedere economic, intereseaz masa
vegetativ i nu producia de semine (plante furajere, plante ornamentale, sfecl de zahr etc.).
Pentru natur, aloploidia, n special cea genomal, este deosebit de important, asigurnd
evoluia speciilor.
Un poliploid natural, este grul comun (Triticum aestivum 2n = 6x = 42). Prin studiul
speciilor slbatice diploide sau tetraploide, cu numrul de baz, x = 7, s-a reconstituit evoluia
grului. n meioz, n celulele mam se formeaz 21 de bivaleni, fiecare cromozom fiind
reprezentat de un singur omolog. Formarea bivalenilor este controlat de gena Ph, situat pe
braul lung al cromozomului 5B. Cu toate c specia este hexaploid, comportamentul diploid,
simulat de formarea bivalenilor, este asigurat de gena Ph.
Grul comun ii are originea n trei specii diploide diferite i cu genomuri diferite, AA, BB
i DD (vezi figura 7.1).
71
Originea aloploid a fost stabilit pentru multe alte specii. Prunus domestica este un aloploid
ntre Prunus spinosa (2n=4x=32) i Prunus cerosifera (2n=2x=16). Alte exemple de specii
aloploide: Nicotiana tabacum, 2n = 48 (n. silvestrys, 2n = 24 x N. tomentosiformis, 2n=24),
Brassica napus, 2n = 38 (B. oleracea, 2n = 18 x B.capestris, 2n = 20) etc.
2. Definii monoploidia:
3. Definii poliploidia:
Exerciii:
Exemplu
1. Prin numarul de baza X, se intelege:
a) Numrul de cromozomi din celulele somatice
b) Numrul de cromozomi din celulele sexuale
c) Numrul haploid de cromozomi ai speciei ancestrale.
Rspuns: c
2. Liniile izogene se pot obine din:
a) poliploizi;
b) monoploizi;
c) perisoploizi.
3. Triticum aestivum este o specie:
a) autopoliploid;
75
b) haploid;
c) alopoliploid.
4. n procesul de producie prezint importan:
a) monoploizii;
b) poliploizii;
c) haploizii.
Rezumatul temei
n cazul n care modificrile numrului de cromozomi implic setul de baz X, avem
euploidie. Euploidia se poate referi la o reducere a setului de baz, caz n care avem monoploidie,
sau la o multiplicare a acestuia i este poliploidie.
Monoploizii sunt cu vigoare redus, sensibili la factorii de stress, sterili datorit meiozei
anormale i se pot utiliza n lucrrile de ameliorare; prin diploidizare se obin liniile izogene cu
interes n selecia speciilor autogame sau n obinerea hibrizilor comerciali F1 ce manifest heterozis
la speciile alogame. Formele monoploide pot fi obinute in vivo ct i in vitro.
Poliploizii, datorit numrului crescut de cromozomi prezint efectul de doz, cele mai multe
caractere de interes agronomic fiind amplificate i sunt folosii n producie. Dup modul de obinere
exist autopoliploizii i alopoliploizii. Autopoliploizii rezult n urma multiplicrii propriului numr
de cromozomi i sunt cel mai adesea fertili. Alopoliploizii se obin prin ncruciarea a dou specii
sau genuri diferite. Hibridul obinut este steril, dar prin dublarea numrului de cromozomi rezult
amfidiploidul care este fertil. Exist alopoliploizi naturali ( Triticum aestivum,Prunus domestica) i
artificiali ( Triticale= gru x secar, Batat= tomat x cartof). Inducerea poliploidiei se poate realiza
prin mai multe metode: tratamente cu ocuri de temperatur, metoda centrifugrii i a iradierii,
metoda regenerrii, metoda poliembrioniei, metoda tratamentului chimic.
n programele de ameliorare a plantelor sunt utilizate formele autoploide, valorificndu-se
anumite particulariti, cum ar fi, vigoarea vegetativ, coninut ridicat n proteine sau n vitamine,
pigmenii, precum i rezintena sporit la temperaturi excesive, secet, boli i duntori.
Euploidia
76
Tema nr.8
VARIAII ALE NUMRULUI DE CROMOZOMI. ANEUPLOIDIA.
Uniti de nvare:
aneuploidia: definiie i caracteristici;
tipuri de aneuploidie;
importana aneuploidiei
Obiectivele temei:
trecerea n revist a diferitelor tipuri de aneuploizi ;
evidenierea importanei aneuploizilor i utilizarea lor.
Timp alocat temei: 1 or
Bibliografie recomandat:
1. Casian, H., 2006, Genetica suport pentru curs, Ed. Printech.
2. Nicolae, I., Rduoiu, S., Butnaru, G.,Nicolae, F., 2000, Genetica- principii de baz ale
ereditii, Vol. I, Ed. Bioterra, Bucureti.
8.1 Aneuploidia
Aneuploidia, este fenomenul prin care modificarea numeric afecteaz numai anumite
perechi omoloage de cromozomi, adic n nucleul celulelor exist n plus sau n minus, unul sau
mai muli cromozomi.
Dac ntr-un cariotip alturi de numrul diploid de cromozomi (2n), se afl unu sau mai
muli cromozomi, aneuploidia este de tip hiperploid (polisomie). Dac din garnitura diploid se
pierde unul sau mai muli cromozomi, aneuploidia este de tip hipoploid (oligosomie).
Cu toate c aspectele genetice i citogenetice ale fenomenului de aneuploidie sunt diferite,
n esen toate au cauze comune i anume:
- non-disjuncia cromozomilor n mitoz sau meioz i, n consecin, repartizarea inegal a
materialului genetic la celulele fiice;
- formarea trivalenilor i univalenilor n loc de bivaleni normali;
- apariia aberaiilor n structura unor cromozomi;
- absena sinapsei sau sinapsis parial ntre unii cromozomi, fenomen mai frecvent observat
la cromozomii lungi. n general, vitalitatea i fertilitatea aneuploizilor, este mai redus.
Gametul femel tolereaz mai bine aneuploidia, gameii masculi aneuploizi nu sunt viabili,
aneuploidia transmindu-se pe linie matern.
77
Ca urmare a efectului de doz, polisomii prezint unele particulariti, specifice
cromozomilor suplimentari. La oligosomi, ca urmare a reducerii dozei de material genetic, apar
caracteristici noi fa de formele iniiale 2n, fapt care permite stabilirea importanei fiecrui
cromozom.
Aneuploidia, este fenomenul prin care modificarea numeric afecteaz numai anumite perechi
omoloage de cromozomi, adic n nucleul celulelor exist n plus sau n minus, unul sau mai
muli cromozomi.
Exerciii:
Exemplu
1. Nulisomia poate fi letal:
a) pentru organisme diploide;
b) pentru organisme poliploide.
80
Rspuns: a
2. O specie care are 2n=16, ci monosomici diferii poate forma?
a) 16;
b) 32;
c) 8.
3. Aneuploizii prezint importan pentru:
a) ameliorare;
b) producie;
c) producere de smn.
Rezumatul temei
Aneuploidia, este fenomenul prin care modificarea numeric afecteaz numai anumite
perechi omoloage de cromozomi, adic n nucleul celulelor exist n plus sau n minus, unul sau
mai muli cromozomi. n general, vitalitatea i fertilitatea aneuploizilor, este mai redus.
Hiperploidia sau polisomia, se ntlnete n situaia cnd, pe lng perechea de cromozomi
omologi se gsete un cromozom n plus, adic 2n + 1, fenomen numit trisomie sau, cnd unei
perechi de cromozomi i se altur doi cromozomi, 2n + 2, fenomen denumit tetrasomie.
Hipoploidia sau oligosomia reprezint starea unor celule sau a unor organisme care au
pierdut un cromozom din garnitura normal, fenomen denumit monosomie (2n-1) sau o pereche de
cromozomi, fenomen denumit nulisomie (2n-2).
Apariia diferitelor tipuri de aneuploizi se poate datora:
- non-disjuncia cromozomilor n mitoz sau meioz i, n consecin, repartizarea inegal a
materialului genetic la celulele fiice;
- formarea trivalenilor i univalenilor n loc de bivaleni normali;
- apariia aberaiilor n structura unor cromozomi;
- absena sinapsei sau sinapsis parial ntre unii cromozomi, fenomen mai frecvent observat
la cromozomii lungi.
Aneuploizii asigur identificarea rolului genetic al unor cromozomi, legturile dintre
cromozomi, precum i rolul diferitelor gene n expresia fenotipic a unor caracteristici.
n liniile de substiutuie intraspecific, pot fi fixate anumite caracteristici valoroase de la
donori cu gene particulare valoroase n receptori cu structur genetic deficitar pentru o gen
(rezistena la boli i la condiii nefavorabile de mediu).
81
Tema nr. 9
RESTRUCTURRI CROMOZOMIALE
Uniti de nvare:
restructurri cromozomiale: caracteristici i clasificare;
restructurri ce afecteaz numrul de gene : deleii i duplicaii;
restructurri ce afecteaz ordinea genelor pe cromozomi: inversii i translocaii.
Obiectivele temei:
fixarea tipurilor de restructurri cromozomiale ;
identificarea efectelor fenotipice i genotipice ale diferitelor tipuri de restructurri
cromozomiale.
Timp alocat temei: 2 ore
Bibliografie recomandat:
1. Casian, H., 2006, Genetica suport pentru curs, Ed. Printech.
2. Nicolae, I., Rduoiu, S., Butnaru, G.,Nicolae, F., 2000, Genetica- principii de baz ale
ereditii, Vol. I, Ed. Bioterra, Bucureti.
84
2. Duplicaia const n catigarea unui fragment de la un cromzom omolog. n urma
duplicaiei organismul respectiv posed una sau mai multe alele n duplicat, n acelai cromozom.
ntr-o celul diploid o anumit gen sau mai multe gene sunt reprezentate de dou ori.
Apariia duplicaiei presupune ruperea simultan a doi cromozomi, deoarece segmentele
cromozomale se pot uni numai cu alte segmente care prezint cel puin un punct de ruptur.
Segmentele cromozomale nu se pot uni cu cromozomi ntregi. Dup un anumit timp, fragmentele
de cromozomi i pierd capacitatea de reunire. Segmentele de cromozomi pot fi inserate la un
cromozom omolog, parial omolog sau chiar la unui neomolog, n diferite poziii. Cnd segmentul
de cromozom transpus ocup poziia dup segmentul identic (de exemplu GHGH), duplicaia se
numete n tandem. n alte cazuri, duplicaia este dispus n tandem invers (GHHG), nu este
inserat dup segmentul identic (GHIJGH) sau este dispus n cromozomi neomologi
(ABCDEFGHI - MNOPQRGHST).
Cel mai adesea, duplicaia rezult n urma fenomenului de crossing over inegal. Din acest caz,
duplicaia apare ntr-unul din cromozomii omologi, pe cnd n cellalt cromozom omolog va rezulta
o deficien . Un exemplu foarte cunoscut de duplicaie este la Drosophila melanogaster, la locusul
Bar din cromozomul X (vezi fig. 9.4.). La plante (porumb, orz, maare, etc) se cunosc, de
asemenea, mai muli loci duplicai, n diveri cromozomi.
85
Fig. 9.4. Duplicaia segmentului cromozomal cu locusul Bar la Drosophila
Detectarea duplicaiilor se face att prin studii citologice, ct i prin observaii asupra efectelor
fenotipice la indivizii afectai. Studiile citologice pentru evidenierea unei duplicaii se realizeaz
mult mai uor comparativ cu deficiena terminal. Duplicaiile heterozigote mai lungi formeaz
bucle n profaza I a meiozei (stadiul de pachinem). Trebuie stabilit dac aceste bucle sunt
determinate de o deleie (unde face bucla cromozomul normal) sau de inversiune (unde particip
ambii cromozomi la formarea buclei). Organismele care posed duplicaii pot determina un fenotip
nou ce poate afecta uneori, un complex de caracteristici care se transmit la urmai.
Adesea, la realizarea fenotipului nou se adaug influena genelor adiacente (efectului de
poziie), ct i schimbarea balanei genelor.
88
Fig. 9. 7. Translocaia heterozigot i conjugarea meiotic
n urma meiozei, heterozigoii pentru translocaie produc 50% gamei fertili (cei care conin
toate genele) i 50% gamei sterili (cei n care lipsesc gene). Prin fecunadrea liber a gameilor fertili
se obin 25% indivizi homozigoi normali, 50 heterozigoi de traslocaie i 25% homozigoi de
trasnlocaie. n descendena, indivizii homozigoi (att cei normaii, cat i cei de translocaie) vor fi
stabili, iar indivizii heterozigoi de translocaie vor segrega n acelai raport de 1:2:1. Hibrizii de
translocaie se identific relativ uor citologic, prin configuraiile specifice de cercuri sau de inele i
prin procentul de circa 50% polen steril.
Apariia translocaiei a fost studiat la microorganisme (Escherichia, Aspergillus,
Neurospora), la Drosophila, la plantele superioare (orz, porumb, mazre, tomate, gru, tutun etc),
la animale i la om (relevata prin numeroase anomalii ereditare).
Prin translocaie se pot transfera gene de rezisten la factorii de stress sau alte gene dorite
de om. n acest scop, se aplic hibridarea cu specii slbatice sau specii rustice, urmat de inducerea
la hibrizi a unor dislocaii cu ajutorul unor ageni fizici sau chimici i selecia descendenilor
valoroi care posed genele transferate. Metoda a dat rezultate bune la gru, unde E.R.Sears (1956)
89
a reuit s transfere gene de rezisten la rugina brun de la Aegilops umbellulata la grul hexaploid.
De asemenea, translocaiile au fost utilizate la provocarea sterilitii unor specii de plante agricole
i pomi fructiferi.
n cercetrile de genetic teoretic unele translocaii se folosesc drept markeri genetici n
analizele citologice i hibridologice, la fixarea heterozisului i localizarea pe cromozom a unor
gene.
La unele specii un numr mare de cromozomi au suferit translocaii reciproce, formnd aa-
numitele sisteme de translocaie. Aa este cazul celor mai multor specii de Oenothera. n timp ce O.
hookerii formeaz n mod regulat 7 bivaleni, la 0. biennis cei 14 cromozomi se dispun n dou
inele (unul din 6 i altul din 8 cromozomi) datorit unor translocaii multiple, iar la O. muhcata toi
cei 14 cromozomi formeaz un singur inel .
O importan deosebit n ameliorarea plantelor o are inducerea translocaiilor multiple, n
care sunt implicai toi cromozomii din cariotip ntr-un singur inel de translocaie. Acest fenomen,
observat la Oenothera lamarkiana a servit ca model pentru crearea unor genotipuri homozigote la
porumb. Astfel, C.R. Bumham (1946) a sugerat faptul c i la porumb se poate obine o linie de
translocaie multipl care s includ ntr-un singur inel toi cei 10 cromozomi din setul haploid.
Prin ncruciarea acesteia cu o form normal se obine n F1 un hibrid care conine inelul haploid de
translocaie i un set haploid de cromozomi (n = 10 cromozomi normali). Prin autopolenizarea
hibrizilor F1 de translocaie vor rezulta n F2 25 % genotipuri de translocaie, 50 % heterozigoi de
translocaie i 25% homozigoi normali, care reprezint o linie pur genetic (homozigot) obinut
numai n dou generaii.
Prin schimbul de segmente cromozomale cu ajutorul agenilor dislocani se pot obine noi
grupe linkage cu gene favorabile, ducnd astfel, la obinerea de soiuri noi.
Principala metod de detectare a translocaiilor este cercetarea citologic n timpul meiozei
sau mitozei, care pe baza configuraiilor specifice n diferite faze ale diviziunii celulare, permit s
se precizeze localizarea, tipul i frecvena translocaiilor la diferite organisme analizate.
TEST DE EVALUARE
1. Precizai tipurile de restructurri cromozomiale:
Rspuns:
Acestea se pot grupa n principal, n dou categorii distincte, i anume:
I. Schimbri ale numrului de gene (deleii i duplicaii);
II.- Schimbri n succesiunea (aranjarea) genelor (inversii i translocaii).
90
2. Precizai tipurile de deleii:
Exercitii:
Exemplu
1. Restructurrile cromozomiale ce afecteaz numrul de gene, sunt:
a) inversiunile;
b) deleiile;
c) deleiile i duplicaiile.
Rspuns: c
2. Starea de hemizigoie poate fi ntlnit n cazul:
a) deleiilor;
b) duplicaiilor;
c) deleiilor i duplicaiilor.
3. Pentru meninerea efectului heterozis ar putea fi utilizate:
a) deleiile;
b) translocaiile;
c) duplicaiile.
Rezumatul temei
Ocazional, sub influena unor factori naturali sau artificiali (fizici sau chimici), structura
cromozomilor poate s se schimbe. Tipurile de modificri care afecteaz structura cromozomilor
au fost denumite dislocaii (aberaii cromozomiale sau anomalii cromozomiale).
La baza acestor schimbri structurale st nsuirea cromozomilor de a se fragmenta (rupe)
transversal sub aciunea anumitor ageni fizici sau chimici i capacitatea fragmentelor
cromozomale de a se reuni prin capetele lor (n punctele de ruptur) sau de a se alipi la ali
cromozomi care au suferit fragmentri n lungimea lor.
n felul acesta, pot avea loc rearanjri ale materialului cromozomal care, in esen determin
modificri structurale n numr limitat.
Fiecare cromozom poate fi afectat de una sau mai multe rupturi, iar fragmentele rezultate se
pot reuni dnd aranjamente noi, care genereaz formarea de cromozomi noi sau grupe linkage
diferite i, n consecin, cariotipuri modificate.
Restructurrile cromozomiale pot fi clasificate astfel:
1. Restructurri ce afecteaz numrul de gene:
a) deleii - const n pierderea unui fragment de cromozom (cu una sau mai multe gene).
Asemenea nuclei, celule sau indivizi sunt deficieni pentru gena sau genele respective.
91
b) duplicaii - const n catigarea unui fragment de la un cromzom omolog. n urma
duplicaiei organismul respectiv posed una sau mai multe alele n duplicat, n acelai
cromozom, ntr-o celul diploid o anumit gen sau mai multe gene sunt reprezentate de
dou ori.
c) inversiunea const n rotirea unui fragment distinct cu 180 n cadrul aceluiai cromozom.
d) transpoziiile i translocaiile sunt schimbri intra- i, respectiv, inter cromozomale.
Transpoziia reprezint transferul unui segment de cromozom dislocat, ntr-o alt poziie, n
acelai cromozom. Efectul fenotipic major este marcat de efectul de poziie. Translocaia
reprezint schimbul de segmente cromozomale ntre cromozomii neomologi.
92
Tema nr. 10
DETERMINISMUL GENETIC AL SEXELOR
Uniti de nvare:
Determinismul cromozomial al sexelor;
Determinismul genomial al sexelor;
Determinismul genic al sexelor;
Reglajul genetic al diferenierii sexelor la plante;
Obiectivele temei:
prezentarea i fixarea mecanismelor genetice prin care este determinat sexul;
cunoterea reglajului genetic al diferenierii sexelor la plante i influena hormonilor vegetali;
93
n fiecare generaie se asigur astfel, un raport de 1:1 ntre masculi i femele.
La anumite insecte din ordinul Hemiptera i Orthoptera, masculii sunt de asemenea
heterogametici, ns ei conin un singur cromozom X care nu are un omolog Y (au un cromozom
mai puin). Acest determinism este denumit curent tipul XO (tipul Protenor) i se prezint astfel:
94
1 : 1
P: s as b sa
G: sa sb x sa
F1: sa s as a s as b sb
Exerciii:
Exemplu rezolvat
1. Determinismul cromozomial al sexelor cuprinde tipurile:
a) protenor i fluture;
b) drosophila i abraxas;
c) drosophila i protenor.
Rspuns: b.
2. Plantele prezinta un control genetic al sexelor de tip:
a) genic;
b) cromozomial;
c) cromozomial i genic.
3. Genele sex-linkage sunt plasate pe:
a) autozomi;
b) heterocromozomi;
c) autozomi i heterocromozomi.
Rezumatul temei
Caracterele sexuale de ordin morfologic, anatomic, fiziologic, comportamental sunt foarte
bine exprimate la animale i la om. La plantele superioare ele sunt mai puin distincte, deoarece att
n cazul speciilor dioice, ct i unisexuat-monoice, diferenele dintre exemplarele mascule sau
femele i respectiv, dintre ramurile cu flori ma
scule sau female, se limiteaz adeseori numai la structura aparatelor florifere.
Caracterele sexuale primare sunt controlate genetic (cele care asigur formarea unui anumit
gen de celule sexuale, diferene n structura organelor de reproducere), iar caracterele sexuale
secundare sunt sub influena sistemului hormonal ( vocea la om etc).
Sexualitatea prezint importan prin faptul c asigur variabilitatea genetic a populaiilor.
n cursul evoluiei, selecia natural acineaz pe fondul acestei varaiabiliti imense, care permite
supravieuirea i reproducerea indivizilor celor mai bine adaptai la condiiile noi de mediu.
Reproducerea sexuat reprezint tipul de nmulire cel mai rspndit n lumea plantelor i
animalelor, ea realizndu-se foarte diferit pe scara evoluiei organismelor.
Prin reproducerea sexuat alogam se asigur ncruciarea ntre indivizi diferii genotipic, care
determin creterea vigorii i a capacitii de adaptare a organismelor, fenomen cunoscut sub
denumirea de heterozis. n acest sens, plantele alogame s-au adaptat pe diferite ci la prevenirea
autofecundrii (prin decalarea maturitii gameilor, protandrie i protoginie, heterostilie,
monoicitatea i dioicitatea, autoincompatibilitatea sau autosterilitatea etc.).
Cele mai importante mecanisme genetice pentru controlul sexelor sunt: determinismul
cromozomial la care regsim tipul Drosophila ( XX i XY) cu subtipul Protenor ( XX i
XO) i un alt tip Abraxas ( XY i XX) cu subtipul Fluture ( XO i XX); determinismul
genomial unde sexul este determinat de ntreg genomul (haplodiploidie) i determinismul genic la
care rolul revine unor gene sexuale.
Referitor la plante, n controlul genetic al sexelor pot interveni unul sau mai multe mecanisme
din cele prezentate. Pentru diferitele specii sunt precizate mecanismele valabile i se ine cont i de
factorii ce pot influena sexul, astfel prin controlul factorilor putem interveni asupra modificrii
raportului ntre sexe.
101
Tema nr. 11
EREDITATEA CARACTERELOR SEX-LINKAGE
Uniti de nvare:
Factorii care influeneaz determinismul genetic al sexului;
Sex-influenare
Sex-imitare
Ereditatea caracterelor sex-linkage.
Obiectivele temei:
trecerea n revist i fixarea principalilor factor ice influeneaz determinismul genetic
al sexului;
cunoaterea modului n care se realizeaz ereditatea caracterelor sex-linkage
- ginandromorfismul. La unele specii dioice (insecte, animale, om etc.) s-a observat apariia
unor organisme la care unele pri ale corpului sunt de tip femel, iar altele de tip mascul. Dup
extinderea esuturilor femele i, respectiv mascule, pe acelai individ, ginandromorfismul poate fi
bilateral, cnd anomaliile au aprut n diviziunile ulterioare (T. Crciun i colab., 1978).
Fig. 11. 1.
n cazul situaiei cnd pierdera cromozomului X are loc mai trziu (la o diviziune
ulterioar), esutul sau poriunea cu structura XO (mascul) va fi mai mic i va fi integrat n
corpul femelei adulte, fiind observat sub forma de mozaicuri cu caractere sexuale diferite genetic.
104
La alte mamifere i la om, ginandromorfismul bilateral apare tot la prima diviziune a
zigotului la un individ mascul (XY) prin pierderea cromozomului Y cu rol masculinizant (vezi
figura 11. 2.).
Fig. 11.2.
Ginandromorfismul bilateral la om i alte mamifere
Fig.11.3.
Apariia ginandromorfismului bilateral prin fecundarea unei ovule binucleate
105
A treia cauz care determin apariia de organisme ginandromorfe, caracteristic insectelor
din Hymenoptere, cu determinism sexual haplo-diploid, const tot n apariia de ovule binucleate,
fiecare nucleu avnd n cromozomi. Prin fecundarea numai a unuia dintre nucleii acestor ovule cu n
cromozomi, cu un spermatozoid haploid (n) va rezulta jumtate din corp diploid (2n) de tip femel i
cealalt jumtate din corp (rezultat din nucelul nefecundat) haploid (n), de tip mascul (vezi figura
11. 4.).
Fig. 11. 4
Apariia ginandromorfismul bilateral la Hymenoptera
11.2. Sex-influenare
Genele influenate de sex pot fi situate pe orice autozom sau pe poriunile homoloage ale
cromozomilor sexului. Alelele acestor loci influenai de sex se exprim n mod diferit la masculi
i femele: aceiai alel va fi dominant la mascul i recesiv la femel sau invers. Aceasta se
datoreaz n mare parte, mediului intern care este determinat de hormoni sexuali.
Caracterele influenate de sex se gsesc cel mai frecvent la animalele superioare, care
posed un sistem endocrin dezvoltat.
Exemplu:
Gena responsabil de formarea cheliei este dominat la brbai i recesiv la femei (S.
William, 1977).
Genotipuri Fenotipuri
Genotipuri Brbai Femei
bb cu chelie cu chelie
bb cu chelie normal
bb normal normal
11.3. Sex-limitare
Anumite gene se exprim numai la unul din cele dou sexe. De exemplu, taurii (la bovine)
posed numeroase gene ce controleaz producia de lapte, ei pot s le transmit la fiicele lor, ns
nici ei i nici fii lor nu pot exprima acest caracter. Producia de lapte este deci un caracter cu
expresie variabil, limitat numai la femele. Cnd penetrana unei gene la un sex este egal cu zero,
acest caracter va fi limitat la cellalt sex.
Un exemplu se refer la penajul de coco (la psri) care nu se exprim dect la masculi.
107
11.4 Ereditatea caracterelor legate de sex (sex-linkage)
n F2 toate femelele au ochii roii, iar jumtate din masculi au ochii roii i jumtate au ochii
albi. Raportul fenotipic global ntre indivizii F2 (indiferent de sex) este de 3 roii : 1 alb.
La ncruciarea invers (femele cu ochi albi x masculi cu ochi roii), rezult:
108
n acest caz asistm n F1 la o transmitere n cruce (cris cros) a culorii ochilor; masculii
motenesc culoarea alb de la mam, iar femelele motenesc culoarea roie de la tat.
n F2 rezult:
n F2 jumtate din femele i masculi au ochii roii i jumtate au ochii albi. Raportul global
de segregare este de 1 rou : 1 alb.
Analizele hibridologice la Drosophila melanogaster au artat c numeroase alte carctere
sunt determinate de gene X sex linkage i se transmit similar la descendeni ca i culoarea
ochilor (ex. Mutantele: aripi tiate, ochi lozenge, corp galben i multe altele).
Pe lng acest tip general de ereditate a caracterelor legate de sex, exist i unele tipuri
particulare, determinate de existena unor gene pe cromozomul Y care nu au gene (alele)
homoloage pe cromozomul X. Astfel, la om se cunosc cteva gene situate pe poriunea
neomoloag a cromozomului Y denumite gene holandrice. Dintre genele holandrice studiate pn
n prezent menionm gena care produce brbai cu prul aspru i epos, gena pentru urechi
proase, gena pentru degete de la picior sudate prin membran i alte gene mai puin studiate.
n acest caz carcterele respective se exprim numai la masculi i se transmit din tat n fiu. Aceste
gene care sunt total nlnuite pe cromozomul Y sunt denumite gene Y-complet sex-likage (T.
Crciun i colab., 1978).
Separarea timpurie a sexelor la gini, permite aplicarea unui regim de alimentaie difereniat
n funcie de destinaia de consum. Astfel, masculii sunt recombinai pentru broiler (cretere
intensiv), iar femelele pentru producia de ou.
La ncruciarea reciproc (invers) cu cocoi vrgai (XBXB) i femele negre (XbY), n F1
toi indivizii sunt vrgai, iar n F2 segreg n raportul global de 3 vrgai : 1 negru (50% din
femele sunt negre i 50% vrgate, iar masculii sunt toi vrgai).
TEST DE EVALUARE
Rspuns:
1. Definii genele influenate de sex.
Sunt gene plasate pe autozomi sau heterocromozomi, ce se comport ca dominante sau recesive,
n funcie de sexul la care se gsesc.
Exerciii:
Exemplu rezolvat
110
1. Fenomenul de cris-cross se manifest n cazul n care sexul homogametic prezint:
a) XXY;
b) XYY;
c) XY.
3. Procesul de autosexare la psri se bazeaz pe:
a) tipul crestei;
b) culoarea pufului;
c) forma ciocului.
Rezumatul temei
Referitor la plante, n controlul genetic al sexelor pot interveni unul sau mai multe mecanisme
din cele prezentate. Pentru diferitele specii sunt precizate mecanismele valabile i se ine cont i de
factorii ce pot influena sexul, astfel prin controlul factorilor putem interveni asupra modificrii
raportului ntre sexe.
Sexul este sub control genetic, dar pot apare modificri n sensul devierii sexului sub
influena diferiilor factori. Dintre cei mai importani factori putem meniona :
Factorii de mediu. Condiiile de nutriie, lumina, temperatura, umiditatea. Aceti factori sunt
importani din punct de vedere agronomic. Trebuie respectate cerinele diverselor specii fa de
aceti factori pentru a nu se modifica raportul dintre sexe.
Hormonii sexului. La vertebrate, inclusiv om, detreminismul sexelor are dou etape distincte: i)
etapa genetic, care la om ncepe cu zigotul pn la formarea gonadelor (ovare i testicule) i
dureaz pn la a 60-a zi de la fecundare. n aceast etap sexul este determinat n exclusivitate de
cromozomii sexului: ii) etapa hormonal, n care procesul de sexualizare masculin continu sub
influena hormonilor androgeni (testosteronul), iar sexualizarea feminin evolueaz pasiv sub
determinism genetic, pn la formarea ovarelor (gonadelor femele). Diferenierea definitiv a sexelor
se realizeaz n preajma pubertii, cnd producerea de hormoni femeli (foliculina i progesteronul) i
masculi (testosteronul), capt importan deosebit n procesul de sexualizare.
111
Anomalii n structura i numrul cromozomilor sexuali. O serie de modificri n structura i
numrul cromozomilor sexuali, cum ar fi deleiile, duplicaiile, inversiile i translocaiile, care apar
la sexul homogametic (XX), non-disjuncia cromozomilor sexului n meioz etc., pot determina
apariia unor genotipuri anormale ce altereaz expresia fenotipic a sexului. Ereditatea caracterelor
sex-linkage este asemntoare celei mendeliene cu excepia cris-cross-ului, fenomenul de
transmitere n cruce a caracterelor ce apare n cazul n care sexul homogametic prezint alelele
recesive n stare homozigot. Fenomenul are utilizare pentru autosexare. Dac nu se ndeplinete
condiia pentru cris-cross, atunci caracterul sex linkage se va transmite mendelian pstrnd
raportul caracteristic (uniformitatea indivizilor din F1 i raportul de 3:1 n F2).
112
Tema nr. 12
EREDITATEA CARACTERELOR CANTITATIVE
Uniti de nvare:
Determinismul genetic al caracterelor cantitative
Sisteme de gene multiple;
Variana aditiv; variana de dominan; varian de epistazie;
Eritabilitatea n sens larg; eritabilitatea n sens restrns;
Hibridarea transgresiv (segregarea sau variaia transgresiv)
Obiectivele temei:
fixarea noiunilor folosite n biometrie;
prezentarea controlului genetic al caracterelor cantitative i regulile privind ereditatea acestora;
trecerea n revist a diferitelor sisteme de alele multiple i raportul fenotipic n cazul fiecrui
sistem;
prezentarea varianei genotipice i categoriile de variane aferente;
dobndirea cunotinelor privind eritabilitatea caracterelor cantitative sau coeficientul de ereditate;
explicarea hibridrii transgresive.
Timp alocat temei: 3 ore
Bibliografie recomandat:
1. Andrei P.,1998, Genetic Ed. Museum, Chiinu
2. Prnu Ghe.,2010, Genetica i ameliorarea arborilor- Ed. Silcic, Bucureti.
114
Fig. 12. 1. Ereditatea culorii bobului
Rou intens Alb
P R1R1R2 R2 r 1r 1r2r2
G R1R2 x r 1r2
F1 R1r 1R2r2 - rou intermediar
Autofecundare
F2
G R1R2 R1r2 r1R2 r1r2
R1R2 R1R1R2R2 R1R1R2r2 R1r1R2R2 R1r1R2r2
R1r2 R1R1R2r2 R1R1r2r2 R1r1R2r2 R1r1r2r2
r1R2 R1r1R2R2 R1r1R2r2 r1r1R2R2 r1r1R2r2
r 1r 2 R1r1R2r2 R1r1r2r2 r1r1R2r2 r1r1r2r2
Fiecare alel activ R1 i R2 contribuie cu o anumit parte la determinarea culorii roii, fiind
denumite gene active (contribuitoare sau favorabile), n timp ce alelele r1 i r2 determin numai
culoarea alb (fenotipul rezidual), fiind denumite gene inerte (neutrale). Deci, distribuia genotipurilor i
fenotipurilor calculate pe baza alelelor active i a celor neutrale este de 1:4:6.4.1, adic 1/16 posed 4
alele active, 4/16 posed 3 alele active, 6/16 posed 2 alele active, 4/16 prezint o singur alel
activ i 1/16 nu au nici o alel activ.
115
n alte experiene similare s-a gsit c la gru, culoarea boabelor este controlat de trei perechi de
gene. n acest caz, raportul general de segregare a fost de 63 boabe roii de diferite nuane: 1 bob alb,
rezultnd 47 clase fenotipice de la rou la alb n proporie de 1:6:15:20:15:6:1. Din cele prezentate mai
sus, rezult c pe masur ce numrul de gene implicate n determinismul unui caracter cantitativ
crete, numrul claselor fenotipice crete progresiv dup o distribuie binomial, n timp ce frecvena
claselor extreme descrete.
Obiectul biometriei l constituie variaiiie care se prezint sub form de valori numerice
rezultate din msurtori, numrtori, cntriri, analize etc, efectuate asupra organismelor ntregi sau a
unor pri ale acestora (spice, boabe, inflorescene, frunze, ramuri etc). Biometria opereaz cu date
biologice i permite compararea populaiilor experimentale (soiuri, linii, hibrizi, sue, cloni etc) cu
populaiile ideale, formulnd concluzii teoretice i practice pe baza datelor experimentale.
Analiza genetic a caracterelor cantitative trebuie s raspund unor exigene care s sporeasc
eficacitatea seleciei n procesele de ameliorare. Astfel, orice analiz genetic trebuie s rezolve n
principal, urmatoarele probleme:
- s calculeze principalele valori (indici statistici) care furnizeaz informaii ct mai precise asupra
gradului de variabilitate al caracterelor analizate;
116
- s permit compararea valorilor empirice calculate pe probe medii cu valorile teoretice ale
populaiilor statistice, care s indice corespondena ntre, datele experimentale i cele teoretice;
- s stabileasc tipul i gradul de corelaie dintre caracterele analizate;
-s calculeze diferenele de selecie, progresul genetic i indexul de selecie pentru caracterele cu
importan economic.
n perioada 1910-1913 EM. East i colaboratorii (citai de T.Crciun i colab., 1978) au
studiat ereditatea dimensiunilor tiuletelui la porumb, ajungnd la concluzii similare cu cele ale lui
Nilsson-Ehle. Pentru relevarea ereditii lungimii tiuletelui de porumb, E.M. East a ncruciat un soi
de porumb zaharat cu tiulete lung cu un alt soi de porumb de floricele cu tiulete mic, obinnd n F1
tiulei de lungime intermediar ntre cei doi prini. Studiul generaiei F2 a evideniat o mare
variabilitate a lungimii tiuletelui ntre limite foarte largi, avnd o frecven maxim indivizii din clasele
de lungime mijlocie, in timp ce variabilele extreme au avut o frecven foarte mic. Gruparea
indivizilor din F2 n clase fenotipice (dup lungimea tiuleilor) a dus la obinerea a 5 clase ntr-un
raport de 1:4:6.4:1, sugernd faptul c acest caracter este controlat de dou perechi de gene multiple.
Tot E.M. East (1916) a pus n eviden ereditatea cantitativ a lungimii corolei la florile de
tutun. Pentru aceasta el a ncruciat dou soiuri pure de N. longiflora cu un soi cu tubul corolei lung i
cellalt cu tubul corolei scurt. n F1 plantele aveau flori cu lungime mijiocie a corolei, iar n F2 s-a
observat o mare variabilitate a acestui caracter, fr a se gsi indivizi cu valorile extreme ale prinilor.
Autorul a explicat acest fenomen prin implicarea unui numar relativ mare de gene multiple, ceea ce a
determinat apariia cu frecvent redus a formelor extreme. Reapariia formelor parentale ar fi posibil
n contextul unei populaii hibride F2 mult mai numeroase.
Ulterior, au fost studiate numeroase caractere cantitative determinate de sisteme de gene
multiple cu efecte aditive la mazre, soia, gru, gura leului, tomate, etc.
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 6 + 6 + 6 + 6 = 24
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 6 + 6 + 6 + 6 = 24
P2: a1a1a2a2a3a3a4a4 =2+2+2+2= 8
F1: A1 a1A2a2A3a3A4a4 = 6 + 4 + 4 + 4 = 18
n scest caz, valoarea hibridului F1 nu mai este intermediar (este mai mare), iar n F2 rezult tot 9
clase, ns curba de variaie va fi asimetric, deviat spre printele P1.
118
n acest caz, alelele din sistem au contribuii diferite (inegale) la realizarea fenotipului. Dac n
exemplul folosit locusul A1 are efecte triple fa de locii A2, A3 i A4 (n lipsa dominanei totale),
modelul anisomeric se prezint astfel:
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 18 + 6 + 6 + 6 = 36
P2: a1a1a2a2a3a3a4a4 = 6 + 2 + 2 + 2 = 12
F1: A1a1A2a2A3a3A4a4 = 12 + 4 + 4 + 4 = 24
F1:A1A1A2A2A3A3A4A4 a1a1a2a2a3a3a4a4
1/256 1/256
i n scest caz, n F1 hibrizii prezint valori intermediare, iar n F2 ei se distribuie tot dup o
curb simetric, cu un numr mai mare de clase fenotipice i cu o frecven mai redus a indivizilor cu
valori mijlocii. Dac una dintre perechile de gene manifest dominan total (de exemplu, A1 > a1),
atunci n F1 i n F2 curba de variaie sufer o deviaie spre printele P1 cu alela dominant:
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 18 + 6 + 6 + 6 = 36
P2: a1a1a2a2a3a3a4a4 = 6 + 2 + 2 + 2 = 12
F1: A1 a1A2a2A3a3A4a4 = 12 + 4 + 4 + 4 = 24
Deci hibridul F1 > (P1 + P2) / 2
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 54 - 6 - 6 - 6 = 36
P2: a1a1a2a2a3a3a4a4 = 18 - 2 - 2 - 2 = 12
F1: A1a1A2a2A3a3A4a4 = 36 - 4 - 4 - 4 = 24
Se observ c i n aceast situaie, fenotipul este intermediar n F1, iar n F2, anumite genotipuri
(combinaii de gene) depsesc valorile extreme, datorit segregrii transgresive. Astfel, genotipul
A1A1a2a2a3a3a4a4 cu fenotipul 54 -2-2-2-2 = 48, care depaete cu mult parintele cu fenotipul
maximal (P1 = 36) i este dublu comparativ cu F1 = 24, n timp ce genotipul a1a1A2A2A3A3A4A4 cu
fenotipul 18 - 2 6 - 6 = 4 este cu mult inferior printelui minimal (P2 = 12). O situaie similar
apare i n F1, n situaia n care la unii loci din sistemele opoziionale sunt implicate gene majore
119
cu dominan complet. Astfel, dac perechea de alele multiple cu efecte pozitive A1a1 manifest
dominan total n F1, atunci genotipul din F1 (A1a1A2a2A3a3A4a4 a4) cu fenotipul 54 4 4 4 = 42
depete printele maximal, P1 cu fenotipul 54 6 6 6 = 32.
Variana genetic a interaciunii genelor complic foarte mult analiza statistic a ereditii
cantitative. Evidenierea interaciunii genelor nealele sau a rolului lor n modificarea manifestrii
genelor prezente n ali loci este dificil. Din aceast cauz calculul statistic al valorii varianei
interaciunii adesea nu se efectueaz.
mprirea varanei genetice n categoriile menionate are mai mult un caracter teoretic.
Separarea componenilor de dominan i interaciune se efectueaz printr-o tehnic destu de
complicat care necesit un mare numr de observaii
P: AAbb x aaBB
F1: AaBb
F2: 1/16 AABB - este variaia transgresiva pozitiv ( cu toate alele pozitive), cu un fenotip superior
ambilor parini.
1/16 aabb - este variaia transgresiv negativ (cu toate alele negative), cu un fenotip inferior
ambilor prini.
ntre aceste fenotipuri extreme sunt cuprini indivizi cu 3 alele pozitive (4/16), cu dou alele
pozitive (6/16) i cu o alel pozitiv (4/16). Deci, raportul fenotipic de segregare este de 1:4:6:4.
La o hibridare transgresiv de tipul AABBCCdd x aabbccDD n F1 rezult heterozigotul
AaBbCcDd cu un fenotip intermediar, iar n F2 pot aprea variaii transgresive pozitive cu o
frecven de 1/256 AABBCCDD care depete printele maximal i variaii transgresive negative
cu o frecvent de 1/256 aabbccdd, care au fenotipuri inferioare printelui minimal.
Frecvena variaiilor transgresive este cu att mai mare cu ct numrul genelor multiple ce
determin caracterul luat n considerare este mai mic i invers. Aceasta nseamn c la caracterele
determinate de un numr relativ mare de gene trebuie s avem o descenden foarte numeroas n
generaiile de segregare.
Probabilitatea de a se ncrucia indivizi cu alele opuse, care s dea forme transgresive n
generaiile segregante (F2, backcross, etc.) depinde de numrul combinaiilor hibride. Cu ct numrul
i diversitatea partenerilor de ncruciare este mai mare, cu att ansa de a se ntlni "parteneri ideali"
este mai mare. n acest scop, hibridrile dialele cu parteneri foarte diferii genetic i numeroi sunt
cele mai recomandate i folosite n acest scop.
123
TEST DE EVALUARE
1. De cine sunt influenate caracterele cantitative?
Rspuns :
Caracterele cantitative sunt influenate putemic de factorii de mediu, care pot determina deviaii ale
fenotipului ntr-un sens sau altul.
Exerciii
Exemplu rezolvat
1. Ce exprim eritabilitatea?
a) gradul de transmitere al unui caracter datorit genotipului
b) gradul de transmitere al unui caracter datorit factorilor de mediu
Rspuns: a
2. Variana fenotipic reprezint:
a) variana genotipic i variana mediului
b) variana genotipic i variana aditiv
3. Biometria analizeaz caracterele:
a) calitative
b) cantitative
4. Variaia transgresiv are efecte asemntoare cu:
a) consangvinizarea
b) homozigoia
c) heterozisul
Rezumatul temei
Caracterele mendeliene sunt denumite caractere calitative, controlate de gene majore
(mendeliene), cu efecte marcante asupra fenotipului i care practic, nu sunt influenate de condiiile de
mediu. Cel mai adesea, un caracter calitativ este controlat de o singur gen major (mendelian).
Genele care intervin n controlul caracterelor cantitative pot avea efecte aditive i egale,
efecte aditive i inegale i efecte opoziionale. Pe lnga genele multiple cu efecte aditive care au
ponderea cea mai mare n cadrul varianei genetice, pot interveni i unele gene nealele cu moduri de
aciune diferite.
124
n genetica cantitativ, ca de altfel i n genetica calitativ, se folosesc frecvent noiunile de
"caracter" i "nsuire". Considerm necesar s precizm c prin caracter se nelege o particularitate
morfologic sau anatomic, iar prin nuire se nelege o particularitate fiziologic, biochimic,
tehnologic sau adaptativ.
tiina care indic metodele de calcul, de sintez i de interpretare a rezultatelor experimentale
privind modul de transmitere al caracterelor cantitative de la prini la urmai, poart denumirea de
biometrie, genetic cantitativ, biostatistic sau genetic statistic. Karl Pearson a definit biometria ca
fiind "tiina ce utilizeaz metodele matematice n studiul ereditii i variabilitii vieuitoarelor".
Biometria deriv de la cuvintele greceti "bios" - via i "metros"- a msura.
Variabiliatatea unei populaii se apreciaz prin msurarea varianei. n acest scop se alege o
prob medie de indivizi dintr-o populaie, se msoar caracterul cantitativ ce se studiaz.
Valoarea varianei unei populaii de plante sau animale, reprezint variana totala sau
fenotipic a unui caracter oarecare, indiferent dac aceast variabilitate este determinat genetic sau
este cauzat de condiiile de mediu.
Eritabilitatea exprim proporia varianei totale atribuit efectului mediu al genelor, respectiv
gradul n care o anumit caracteristic este transmis descendenilor, deci msura n care aceasta este
reproductibil.
Condiia esenial pentru apariia variaiilor transgresive (pozitive sau negative) este ca
formele parentale s nu reprezinte extreme ale unui caracter poligenic, adic prinii s nu fie saturai
n gene active (AABBCCDD) i, respectiv gene inactive (aabbccdd).
125
Tema nr. 13
EREDITATEA CITOPLASMATIC
Uniti de nvare:
Gene extranucleare din citoplasm
Androsterilitatea citoplasmatic
Obiectivele temei:
prezenarea i dobndirea cunotiinelor privind diferenele dintre ereditatea nuclear si
ereditatea citoplasmatic;
cunoaterea mecanismului privind ereditatea caracterelor citoplasmatice;
nsuirea noiunilor privind androsterilitatea citoplasmatic la plante.
Ptate
Frunze
mendeliene, acetia semnnd cu forma maternal, cu excepia florilor de pe ramuri cu frunze ptate,
Frunze
care, independent de forma mascul, determin apariia unor descendeni cu frunze normale, albe i
Frunze
ptate.
Un alt caz a fost descries de ctre Gregory (1915) la Primula sinensis, la care florile de pe
ramuri cu frunze verzi produc numai descendeni verzi, cele de pe ramuri cu frunze albe numai
descendeni albi, iar cele pe ramuri cu frunze variegale - descendeni verzi, albi sau ptai.
Explicaia fenomenului, care ulterior a mai fost confirmat i la numeroase alte plante (peste
20 de genuri), const n aceea c sacul embriomar matern conine primordiile cloroplastelor, n
timp ce grunciorii de polen, fiind mult mai mici, sunt lipsii aproape total de citoplasm i de
primordii ale cloroplastelor, aa nct zigotul motenete tipul de cloroplaste al florilor female.
Cloroplastele i deci coloraia frunzelor sunt transmise pe cale extranucleara, numai pe baz
posibilitilor ereditare de care dispune citoplasma.
127
n sfera aceluiai fenomen de ereditate citoplasmatic pe linie matern se ncadreaz i
diferenele care apar la ncruciri ntre anumite animale sau plante, n funcie de form matern.
La plante, din ncruciarea reciproc dintre dou specii de muchi, Funaria higrometrica i
F. mediterranea, deosebite destul de mult prin forma i mrimea frunzelor, prin tipul organelor de
reproducere .a. au rezultat hibrizi asemntori mult mai mult cu genitorul matern dect cu cel
patern.
Fenomenul de transmitere a unor caractere prin intermediul citoplasmei materne se numete
matroclinie.
Faptul este explicabil avnd n vedere c celulele sexual femele conin o cantitate mult
sporit de citoplasm, n comparaie cu cele mascule, ceea ce asigur transmiterea ereditar a unor
anumite nsuiri. n afar de aceasta, la mamifere, organismul matern poate influena dezvoltarea
hibridului n cursul vieii intrauterine. De asemenea, la plantele superioare, zigotul ncepe s se
divid imediat dup fecundare, formnd embrionul nc din perioada cnd acesta se afl n
organismul matern. Pe de alt parte, la Angiospermae endospermul, depozitarul substanelor nutritive
de rezerv ale embrionului, este format din celule triploide (3n), cu dou garnituri de cromozomi (2n)
de origine matern i numai o garnitur (n) de origine patern, ceea ce face ca influenarea
endospermului s fie mai pronunat pe linie matern. Esenial ns n ereditatea extranucleara este
faptul c n citoplasm se localizeaz genomuri specifice (cloroplastic, mitocondrial) sau factori
genetici necromozomiali, cu aparat genetic propriu, care au rol direct n ereditate.
Influena genelor citomplasmei la animale, crora le lipsesc plastidele, s-a pus n eviden la
Lymantria dispar, la care plasma spermei i ovulei se deosebete la diferite rase. n cazul cnd
diferenele sunt mici sau lipsesc are loc o segregare obinuit, mendelian, a genelor; dac ns
deosebirile sunt mari, atunci citoplasma ovulei fecundat determin apariia n proporii excedentare
a unor fenotipuri i, deci, modificarea raporturilor normale de segregare (Goldschmidt i col., 1924).
O serie de fenomene de ereditate extranuclear se datoresc prezenei n citoplasma celulelor
a particulelor simbiotice de tip infecios (Kappa, Lambda, Miu etc.).
TEST DE EVALUARE
1. Cum se numete fenomenul de transmitere a unor caractere prin intermediul
citoplasmei materne?
Rspuns:
129
Fenomenul de transmitere se numete matroclinie.
2. Ce este androsterilitatea?
1. Exerciii
Exemplu rezolvat:
1. La plante, prin tipul organelor de reproducere au rezultat hibrizi asemantori cu :
a) genitorul patern
b) genitorul matern
Rspuns : b)
2. n F1 prin polenizarea plantelor androsterile (S) cu polen de la plante androfertile
apar plante:
a) androsterile
b) androfertile
c) androsterile i androfertile
3. Materialul genetic de la nivelul citoplasmei, poart denumirea:
a) gene
b) plasmagene
c) subgene
Rezumatul temei
Exist o ereditate nuclear (cromozomial) de tip mendelian, care a explicat relaiile din F1 n
urma hibridrii, raporturile de segregare, transmiterea independent i cea nlnuit a genelor,
relaiile ntre gene neomogene, etc. i o ereditate citoplasmatic (extracromozomial) de tip
mendelian cu transmitere uniparental a caracterelor i care a explicat fenomene eseniale ale
practicii cum ar fi: unele tipuri de androsterilitate la plante, ereditatea plastidic, ereditatea la hibrizii
reciproci, predeterminarea, etc..
Fenomenul de transmitere a unor caractere prin intermediul citomplsmei materne se numete
matroclinie.
Prin citoplasm, la unele plante se transmite nsuirea de a fi lipsite de polen sau de a produce
polen neviabil, steril, fenomenul fiind cunoscut sub numele de androsterilitate.
Androsterilitatea este o nsuire ereditar care se poate transmite prin factori ereditari recesivi
localizai n citoplasm, ca i prin factori din nucleu i din citoplasm.
130
Androsterilitatea nuclear, observat la plante autogame, nu prezint importan practic din
cauza apariiei descendenilor sterili n proporii mari i, ca urmare, nu este folosit n procesul de
producere a seminelor hibride.
Androsterilitatea citoplasmatic este determinat de factori citoplasmatici S, care se
comport ca factori dominani fa de factorul citoplasmatic de fertilitate F al plantelor cu aceeai
formul genotipic.
Androsterilitatea nuclear - citoplasmatic este determinat de factorul citoplasmatic S care
se manifest n prezena factorilor nucleari n stare recesiv rr. Plantele care conin aceti factori au
posibilitatea de a releva att fenomenul de androsterilitate, ct i pe cel de restaurare a fertilitii, ca
urmare a faptului c n citoplasm, pe lng factorul de sterilitate S, dein i factorul de fertilitate F,
iar n nucleu intervin factorii dominani ai restaurrii fertilitii RR.
131
Tema nr.14
GENETICA I EVOLUIA POPULAIILOR
Uniti de nvare:
Frecvena genelor i genotipurilor;
Principiul Hardy-Weinberg;
Factorii care modific structura genetic a populaiilor.
Obiectivele temei:
dobndirea cunotinelor privind elementele de genetica populaiilor;
explicarea principiului Hardy-Weinberg;
trecerea n revist a diferiilor factorii care modific structura genetic a populaiilor.
P(A) q(a)
AA 25% A 25%
Aa 50% A 25% a 25%
aa 25% a 25%
AA 64% A 64%
Aa 32% A 16% a 16%
aa 4% a 4%
14.3.1. Migraia
Migrarea indivizilor nspre i dinspre populaie afecteaz frecvena alelelor la un locus
datorit eliminrii i respectiv, achiziionrii de alele noi.
Pentru a identifica efectul migrrii indivizilor se determin rata migrarii proporia alelelor
din populaia analizat care este nlocuit de alele migratoare n fiecare generaie. Considerm c
intr-o populaie frecvena alelelei etse egal cu p, iar n populaia donatoare este egal cu P. Daca
migraia are loc ntr-un singur sens intr-o porporie egala cu m pentru fiecare generaie, atunci
diferena ntre frecvenele celor dou populaii va descrete de m ori in fiecare generaie.
Se constat c schimbarea frecvenei unei alele ntr-o populaie n care are loc migrarea indivizilor
depinde de proporia indivizilor implicai i de frecvenele acesteia n populaiile donor acceptor.
Prin migrarea indivizilor ntr-o alt populaie se schimb componena acesteia, iar prin transmiterea
noilor alele la descendeni se realizeaz o mbogire a fondului genetic al populaiei.
14.3.2. Mutaia
Mutaia reprezint o modificare n structura i funciile materialului genetic, care nu este
determinat prin recombinare i se transmite la descendeni din generaie n generaie. Sunt
reproductibile la descendeni acele mutaii care afecteaz materialul genetic din gamei , n timp ce,
la plante, modificrile genetice existente doar n celulele somatice pot fi transmise urmailor direci
137
doar n cazul nmulirii vegetative. Descendenii care au dobndit de la prini o mutaie somatic n
urma multiplicrii vegetative vor putea ns transmite modificarea genetic respectiv i prin
nmulire sexuat, cu condiia s fie fertili.
Indivizii purttori ai unei mutaii sunt denumii mutani, iar genele aprute prin mutaie sunt
denumite mutante. Gena normal care suport o modificare prin mutaie se numete gen de tip
slbatic. Anumite gene sunt predispuse la mutaii i sunt denumite mutabile, iar alte gene denumite
mutatoare determin sporirea considerabil a ratei mutaiilor altor gene.
Dei mutaiile sunt considerate sursa primar a variabilitii organismelor, totui rata
mutaiilor natuarle nu este foarte mare. Acest lucru se datoreaz faptului c, ntr-o generaie, la un
locus respectiv o gen din 10 mii pn la un milion, se poate produce o modificare genetic de
origine mutagen.
Driftul genetic reprezint schimbarea frecvenei alelelor de la o generaie la alta, unde un rol
important l joac modul arbitrar sau hazardul prin care aceste alele se transmit de la prini la
urmai.
Tot ansa este cea care, n unele cazuri, stabilete dac un individ supravieuiete i se
reproduce.
138
Cnd forele selective sunt absente sau relativ slabe, frecvena alelelor tinde s creasc sau s
scad. Astfel, driftul genetic poate s conduc la dispariia anumitor alele n favoarea altora, o
populaie ajungnd s se separe n dou populaii divergente cu seturi diferite de alele.
14.3.5. Consangvinizarea
Consangvinizarea reprezint autofecundarea forat a plantelor alogame sau ncrucisarea ntre
indivizi nrudii, la animale i om, ( frate x sor, tat x fiic, mam x fiu).
Descendena consangvin timp de mai multe generaii succesive a unei plante alogame sau a
unei perechi de indivizi ( la animale ) este cunoascut sub denumirea de linie consangvinizat.
Efectul major al consangvinizrii este obinerea de genotipuri noi, homozigote, ca urmare a
desfacerii populaiei autofecundate n genotipurile componente. Astfel, consangvinizarea reprezint
o alt surs important de variabilitate genetic.
Consangvinizarea constituie o metod utilizat in ameliorarea numeroaselor specii de plante
alogame (porumb, floarea soarelui, sfecl, ceap, varz, morcov, castravei etc.), precum si la unele
specii de animale (psri, porci etc.).
EFECTELE FENOTIPICE ALE CONSANGVINIZRII
Datorit consangvinizrii, are loc o reducere puternic a vitalitii, care afecteaz capacitatea
de cretere, de reproducere i de adaptare, mai ales dup prima autofecundare forat ( C1). Acest
fenomen cunoscut i sub denumirea de de depresiune de consangvinizare, variaz foarte mult cu
specia de plante. Astfel, este nul la dovleac, foarte mic la sfecl i foarte puternic la porumb,
floarea soarelui, varz, salat, ceap, morcov, etc. Reducerea vitalitii are loc pan la C7 C8 , cnd
se ajunge la un minim de consangvinizare.
Scderea vitalitii este marcat de reducerea taliei, a suprafeei foliare, diminuarea
elementelor de productivitate i, respectiv, scderea evident a produciei, apariia unor deficiene
clorofiliene etc.
Un efect fenotipic important l reprezint scderea rezistenei liniilor de consangvinizare la
anumii factori de mediu datorit gustrii bazei genetice. Odat cu creterea numrului de generaii
consangvine se realizeaz uniformitatea fenotipic a liniilor consangvinizate, care practic dup 7-10
generaii sunt homozigote la majoritatea locilor.
EFECTELE GENOTIPICE ALE CONSANVINIZRII
Cele mai importante efecte genotipice sunt urmtoarele:
1) segregarea puternic in primele generaii de autofecundare si desfacerea populaiei
n biotipurile componente care pot fi : homozigot-recesive, homozigot-dominante,
homozigot-recesive pentru anumii loci i homozigot-dominante pentru ali loci.
139
Genotipurile homozigot-recesive se identific relativ uor i prezint n unele
cazuri caracteristici duntoare, cum ar fi: plante pitice, debile, sterile, cu deficiene
clorofiliene etc. Ele pot fi identificate n C1 sau C2 i pot fi eliminate uor.
2) creterea homozigoiei odat cu numrul de generaii consangvine. Indicele folosit
frecvent pentru aprecierea gradului de homozigoie ntr-o populaie autopolenizat
n funcie de numrul locilor luai n considerare, generaia de consangvinizare i
numrul indivizilor dintr-o generaie de consangvinizare, este coeficientul de
consangvinizare.
IMPORTANA LINIILOR CONSANGVINIZATE
Aa cum s-a artat, liniile consangvinizate au n general, vitalitate redus, motiv pentru care
nu pot fi folosite direct n producie. Cu toate acestea, la majoritatea speciilor alogame anuale,
obinerea i folosirea liniilor consangvinizate n ameliorarea acestor specii, este o metod eficace din
urmtoarele considerente majore:
1. unele linii consangvinizate sunt valoroase datorit manifestrii unor gene recesive n star
homozigot, care controleaz caractere si insusiri dorite de om, cum ar fi: port erect, tuf
compact, frunze sesile, coninut redus in alcaloizi, rezisten mare la anumii factori de mediu,
etc.;
2. obinerea efectului heterozis prin ncrucusarea liniilor consangvinizate i obinerea
hibrizilor comerciali F1, care treptat tind s nlocuiasc soiurile la numeroase specii de plante.
Exerciii
Exemplu :
1. De cine este dat structura genetic a unei populaii ?
a) de frecvena alelelor i a genotipurilor existente n cadrul su;
b) de frecvena alelelor i a fenotipurilor existente n cadrul su;
c) de fenotipul i genotipul acestora.
Rspuns: a
2. Ce reprezinta mutaia?
a) reprezint o modificare n structura materialului genetic;
b) reprezint o modificare n structura i funciile materialului genetic;
c) reprezint o modificare fenotipic.
3. Mutaia se transmite la descendeni din generaie n generaie?
a) da;
b) nu;
c) doar atunci cnd ambii prini sunt heterozigoi.
4. Cum sunt denumite genele care sunt predispuse la mutaii?
a) mutatoare;
b) multiple;
c) mutabile.
142
5. Cine sunt considerate surs primar a variabilitii organismelor ?
a) migraiile;
b) mutaiile.
6. Liniile consangvinizate pot fi folosite:
a) n producie
b) n ameliorare
7. Efectul heterozis se poate menine:
a) dou generaii;
b) o singur generaie;
c) mai multe generaii.
Rezumatul temei
Noiunea de populaie a fost utilizat i introdus n biologie de ctre W. Johannsen, n anul
1903, care a definit-o ca un grup de indivizi care aparin unor biotipuri diferite (Ceapoiu, 1976).
Din punct de vedere genetic, populaia reprezint o grupare de indivizi aparinnd aceleiai
specii care ocupa un areal geografic limitat, au aceeai structur i pun bazele geneticii populaiilor.
n cadrul unei populaii, setul complet de informaii genetice (toate alelele existente) pe care
le posed indvizii acesteia poart numele de fondul de gene al populaiei. n decursul timpului, acest
fond de gene se poate modifica, dar el se afl n echilibru dinamic permanent.
n anul 1908, matematicianul englez G.H. Hardy i medicul german W. Weinberg, studiind n
mod independent frecvena genelor i a genotipurilor ntr-o populaie panmictic, au ncercat s dea
un rspuns la ntrebarea ce se ntmpl cu frecvena acestora n generaia descendent, n absena
forelor evolutive, punnd astfel bazele geneticii populaiilor. Conform Legii Hardy Weinberg, ntr-o
populaie panmictic aflat n echilibru i avnd un efectiv numeros, frecvena genelor i a
genotipurilor se menine constant de-a lungul generaiilor. Cu alte cuvinte, frecvena alelelor dintr-o
populaie se menine constant n diferite generaii, n absena influenei factorilor evolutivi externi
sau interni. O populaie poate crete sau se poate micora prin migraia indivizilor sau prin
modificarea natalitii i a mortalitii. Legea Hardy-Weinberg face abstracie de efectele mutaiei,
migraiei i seleciei la nivelul unei populaii, referindu-se la un caz ipotetic, practic inexistent n
natur, deoarece nu exist populaii n echilibru perfect.
Factorii modificatori ai structurii genetice a populaiei pot fi grupai n dou categorii:
143
1) factori care prin aciunea lor in procesul reproduciei modific frecvena genelor si
implicit a genotipurilor, acetia fiind: migraia, mutaia, selecia natural si driftul
genetic;
2) factori care prin aciunea lor n procesul reproducei modific frecvena
genotipurilor, chiar daca nu schimb frecvena genelor: deriva genetic i
consangvinizarea.
Consangvinizarea reprezint autofecundarea forat a plantelor alogame sau ncrucisarea ntre
indivizi nrudii, la animale i om, (frate x sor, tat x fiic, mam x fiu).
Descendena consangvin timp de mai multe generaii succesive a unei plante alogame sau a
unei perechi de indivizi (la animale ) este cunoascut sub denumirea de linie consangvinizat. Efectul
major al consangvinizrii este obinerea de genotipuri noi, homozigote, ca urmare a desfacerii
populaiei autofecundate n genotipurile componente. Astfel, consangvinizarea reprezint o alt surs
important de variabilitate genetic.
Heterozisul este fenomenul opus consagvinizrii, care reprezint expresia genetic favorabil
a hibridrii. Cu alte cuvinte, heterozisul reprezint cresterea vigorii hibride n F1 n urma ncrucisrii
ntre forme (linii consagvinizate, soiuri, etc.) diferite genetic. ncepand cu generaia F2, efectul
heterozis scade datorit segregrii. Fenomenul de heterozis are un rol deosebit n ameliorarea
plantelor alogame, el putandu-se fixa la plante cu nmulire vegetativ. De asemenea, heterozisul se
manifest i la plantele autogame (tomate, ardei, etc.).
144
Tema nr.15
INTRODUCERE N GENETICA MOLECULAR. ACIZII NUCLEICI I
SEMNIFICAIA LOR GENETIC.
Uniti de nvare:
Acizii nucleici: structur i funcii;
Forme structurale de ADN;
Niveluri de mpachetare a ADN; Denaturarea i renaturarea ADN;
ADN repetitiv caracteristic eucariotelor;
Obiectivele temei:
nsuirea termenilor de baz utilizai n genetic ereditar ( cum ar fi acizi nucleici, ADN,
ARN) i rolul acestora;
trecerea n revist a formelor structurale de ADN respectiv monocatenar i bicatenar;
cunoaterea semnificaiei termenilor de denaturare i renaturare a ADN-ului i utilizarea lor
n hibridare, precum i nelegerea noiunii de ADN repetitiv.
Timp alocat temei: 3 ore
Bibliografie recomandat:
1. Gallia Butnaru, Ion Nicolae, Elena Tma, 1999. Genetic molecular. Ed. Mirton, Timioara;
2. Paula Iancu, 2008. Genetic - Ed. Sitech, Craiova;
3. Victor Stnescu, 1983. Genetica i ameliorarea speciilor forestiere.Ed. Didactic i pedagogic,
Bucureti.
Fig. 15.1. Bazele purinice i pirimidinice. Structura chimic a principalelor baze azotate care
intr n componena moleculei acizilor nucleici (ADN i ARN)
Se constat c bazele purinice sunt aceleai n ambii acizi nucleici , ns dintre bazele
pirimidinice, numai citozina este comun, timina gasindu-se numai n ADN, iar uracilul numai n
ARN.
146
b) Funciile acizilor nucleici
Acizii nucleici reprezint substratul ereditii. Ei au inscris, sub form de codificare
biochimic informaia ereditar n catena polinucleatidic. Acetia au rol i n pstrarea informaiei
genetice (atat ADN-ul, ct i ARN-ul), dar i n sinteza proteinelor (numai ARN-ul).
Acizii nucleici ndeplinesc dou funcii: funcia autocatalitic i heterocatalitic.
1. Funcia autocatalitic (replicaie, sintez sau copiere). Se realizeaza n nuclei n interfaza
ciclului celular i are 3 faze:
1) Faza G1: cromozomii sunt monocromatidici, au 2 cromoneme, are loc sinteza
enzimelor necesare replicaiei.
2) Faza S: cromozomii devin bicromatidici, au 4 cromoneme n prezenta enzimei
ADN polimeraza, se dubleaz cantitatea de ADN.
3) Faza G2 : are loc sinteza proteinelor necesare organizrii fusului de diviziune.
147
TRANSLAIA
Are loc n citoplasm la nivelul ribozomilor, const n transferul informaiei din molecula de
ARN mesager n lanul protidic.
ETAPELE TRANSLATIEI:
Un lan polinucleotidic are o polaritate: o extrem 3', cu un grup hidroxil i o alta 5' , cu un
grup fosfat. O singur caten (lan) de acid nucleic este un polimer fosfat-pentoz cu bazele purinice
i pirimidinice ataate sub forma de grupri laterale.
Structura secundar a AND a fost stabilit n anul 1953 de ctre J.D.Watson i F.H.C. Crick
i corespunde tipului B de ADN, prezent n regiunile de eucromatin, cu gene active metabolic.
Conform acestui model, molecula de ADN este alcatuit din dou catene macromoleculare,
antiparalele, cu direcie diferit de naintare, rsucite n jurul unui ax comun, avnd forma unei scari
n spiral. Dublul helix prezint rsucirea spre dreapta, fiind uor asimetric i prezint dou scobituri
(una mare, una mic) .
148
Fig. 15.2. Structura primar a ADN-ului
Molecula de ADN este format din doua catene polinucleotidice nfaurate una n
jurul celeilalte, ntr-un dublu helix de dreapta. Bazele azotate i implicit cele dou catene ale
moleculei de ADN se leaga ntre ele prin puni de hidrogen. Punile de H dintre A-T sunt duble, iar
cele dintre C-G sunt triple. Coloana zahar-fosfat se afl la exteriorul helixului, iar bazele azotate sunt
orientate spre interior (centru) n planuri aproximativ perpendiculare pe axa (lungimea) moleculei.
Molecula de ADN are forma unei scari n spiral: balustradele sunt constituite din
coloanele zahar-fosfat, iar treptele fiind reprezentate din bazele azotate.
Cele doua catene polinucleotidice sunt: antiparalele, un lan fiind orientat n directia 3' -5'
,iar celalalt n directia 5' -3 ' i complementare, secvena nucleotidelor dintr-o caten "dictnd"
secvena nucleotidelor din cealalta caten.
De exemplu dac o caten conine secvena TACGTA, cealalt caten trebuie s conin secvena
ATGCAT, din cauza regulilor de mperechere menionate aici.
149
15.3. Niveluri de mpachetare a ADN; denaturarea i renaturarea ADN
TEST DE EVALUARE
1. Care este funcia principala a acizilor nucleici?
Rspuns:
Cu ajutorul determinrilor chimice si citologice, s-a descoperit c acizii nucleici ndeplinesc
funcia genetic de a nregistra, conseva i transmite informaia ereditar de la o celul la alta, de
la un individ a altul i de la o generaie la alta. Astfel, este unanim acceptat afirmaia, conform
careia, baza material a ereditaii este reprezenta de acetia.
Exerciii
Exemplu rezolvat
1. Care baze pirimidinice nu sunt comune ADN-ului i ARN-ului:
a) T,C;
b) U,T;
c) G,U;
Rspuns: b
2. Acizii nucleici ndeplinesc dou funcii:
a) funcia autocatalitic i heterocatalitic;
b) funcia autocatalitic i ereditar;
c) funcia autocatalitic, heterocatalitic i ereditar.
3. Ct reprezint ADN nalt repetitiv din totalul ADN-ului celular?
a) 4 10% ;
b) 5 - 10% ;
c) 15 40%.
152
4. O nucleotid este alcatuita din:
a) o baza azotat, un zahar i radical fosforic
b) o baz azotat i un zahar
c) o baz azotat i un radical fosforic
5. Ribovirusurile prezinta ca material genetic:
a) ADN
b) proteine
c) ARN
6. Bazele azotate ce intra in alcatuirea AND sunt:
a) A, G, C, T
b) A, G, C, U
c) A, G, C
7. Complementaritatea catenelor de AND se refera la legaturi de tip:
a) A-T; C-G
b) A-G; C-T
c) A-C; T-G
8. O solutie de AND supusa la temperaturi ridicate duce la separarea catenelor,
proces denumit:
a) degivrare
b) degradare
c) denaturare
Rezumatul temei
Acizii nucleici reprezentai de acidul dezoxiribonucleic (ADN) si cel ribonucleic (ARN) sunt
substante chimice cu o structur macromolecular, alcatuite din unuiti mai simple, numite
nucleotide. Un nucleotid este alctuit dintr-un nucleozid i un radical fosforic. Un nucleozid este
alctuit dintr-o baza azotat i o pentoz: riboza i dezoxiriboza.
Bazele azotate din macromolecula acizilor nucleici de la toate vieuitoarele sunt de dou
tipuri:
- baze purinice: adenina (A) i guanina (G);
153
- baze pirimidinice: citozina (C), timina (T), uracil (U).
Pentozele care intr n alctuirea acizilor nucleici sunt dezoxiriboza, la AND i riboza, la ARN.
Acizii nucleici reprezint substratul ereditii. Ei au inscris, sub form de codificare
biochimic informaia ereditar n catena polinucleatidic. Acetia au rol i n pstrarea informaiei
genetice (atat ADN-ul, ct i ARN-ul), dar i n sinteza proteinelor (numai ARN-ul).
ADN-ul prezint doua tipuri structurale: structura monocatenar (reprezint structura
primar a ADN-ului) i structura secundar a AND-ului.
S-au propus mai multe modele de mpachetare a moleculei de ADN. Cel mai acceptat este
acela propus de Pettijohn i Hecht (l974), n acord cu care, mpachetarea se face printr-un proces de
pliere i supraspiralizare (formare de suprahelice). Se formeaz astfel o structur condensat,
meninut prin aciunea asociat a proteinelor din nucleoid.
Modelul de mpachetare prin pliere i supraspiralizare ncearc s explice mecanismul
molecular al drumului invers, de la structur circular relaxat a macromoleculei de ADN, la
arhitectura corpuscului dens existent n celul.
ADN-ul repetitive este format din secvene nucleotidice (de tip A - T sauG - C), repetate de
ordinul a zecilor sau sutelor de mii ntr-un lan polinucleotidic. n general aceste secvene sunt
considerate lipsite de informaie genetic.n funcie de numrul repetrilor, ADN repetitiv se
clasific n: ADN nalt repetitiv i ADN moderat repetitiv.
154
Tema nr.16
TRANSFERUL I UTILIZAREA INFORMAIEI GENETICE
Uniti de nvare:
Replicarea macromoleculei de ADN (sinteza ADN);
Transcripia (sinteza ARN);
Procesarea ARN-m;
Tipuri de ARN;
Codul genetic;
Translaia (sinteza proteinelor);
Obiectivele temei:
dobndirea cunotinelor privind modelul semiconservativ de replicare a moleculei de
ADN;
trecerea n revist a diferitelor tipuri de ARN, sinteza acestora i rolul lor;
explicarea proceselor de transcripie i translaie referitoare la sinteza proteic;
trecerea n revist a codului genetic.
ADNpolimeraza
H-P-P-P-Nn OH + H-P-P-P-Nx-OH Nn+1 + H2O + PP
2) Pentru a menine starea monocatenar necesar replicrii, proteinele SSD (single stranded-
DNA) se ataeaz la cele dou catene sub form de octameri.
157
3) Primazele, avnd la dispoziie nucleotidele sub form de trifosfai (dATP, dCTP, dGTP,
dUTP), ncep s le ataeze la catenele matri, pe baz de complementaritate, sintetiznd un fragment
scurt de ARN (50-75 nucleotide), numit primer. Reinem c, datorit orientrii antiparalele a celor
dou catene matri, primerii trebuie s fie i ei antiparaleli.
4) ADN polimeraza III (POL III), avnd la dispoziie captul 3-OH de la fiecare primer
ncepe s adauge la acesta noi nucleotide. Helicazele nainteaz de-a lungul ADN-ului separnd din
ce n ce mai mult cele dou catene iar, n urma lor, vine Pol II care i realizeaz funcia
polimerazic: adugarea de nucleotide la captul 3-OH utiliznd ca matri vechea caten de ADN.
Este important de reinut c, datorit orientrii antiparalele a celor dou catene matri i, datorit
faptului c, datorit orientrii antiparalele a celor dou catene matri i, datorit faptului c sinteza
de ADN are loc doar n direcia 5 3,una dintre catenele fiice, i anume cea care nainteaz n
aceeai direcie 5 3, se va sintetiza continuu (catena conductoare leading), pe cnd
cealalt, fiind antiparalel, se va sintetiza discontinuu (catena lagging), sub form de fragmente
scurte, denumite fragmentele Okazaki. Deoarece viteza de replicare este foarte mare, din cnd n
cnd, Pol III integreaz greit nucleotidele n catena fiic (de exemplu A n loc de C). n acest caz,
intervine enzima ADN polimeraza I (Pol I) care, datorit funciei sale exonucleazice n direcia
3-5, denumit i cea de corectur (proofreading), ndeprteaz nucleotida greit ncorporat, iar
Pol III i reia activarea de la acel punct.
6) Pe catena discontinu, prin eliminarea primerilor ARN ramn poriuni din catena matri
nefolosite pentru replicare (goluri). Acestea sunt umplute de ctre Pol I prin funcia sa polimerazic.
7) Fragmentele Okazaki sunt unite cu ajutorul enzimei ADN-ligaza care formeaz legtura
covalent ntre C5al unui fragment i C3' al urmatorului fragment.
158
Fig.16.2. Etapele sintezei ADN
Majoritarea organismelor procariote posed ADN dispus n form circular, ceea ce complic
oarecum procesul de replicare, innd cont de faptul c ADN este un dublu helix. Replicarea acestuia
ncepe dintr-un singur punct (ORI) i nainteaz n ambele direcii -replicare bidirecional.
La E.coli a fost demonstrat prin autoradiografiere c replicarea cromozomului su are loc tot
circular, acesta lund forma literei greceti theta () - replicarea tip (vezi figura 5.3.). La ORI,
cele dou catene se desfac, furca de replicare nainteaz n ambele direcii i, pentru a evita
suprarsucirea i tensionarea celor dou catene la polul opus lui ORI, enzimele numite
topoizomeraze creaz tieturi n una din cele dou catene, aceasta se rsucete, iar tensiunea este
eliminat.
Anumite virusuri cu ADN-ul circular, datorit faptului c au nevoie de un numr foarte mare
de copii ale acestuia, au adoptat o alt strategie de replicare a cromozomului lor. Modelul lor de
replicare poart numele de cercul rotativ i este prezentat n figur. Una dintre cele dou catene este
tiat la ORI i se creaz cele dou capete: unul 5' cu P i cellalt cu 3'-OH.
159
Fig. 16.3. Replicare de tip i cercul rotativ
Avnd la dispoziie captul 3'-OH, enzima ADN polimeraza ncepe s adauge noi nucleotide
folosind ca matri catena netiat, circular. Prin adugare de nucleotide la captul 3', captul 5' este
mpins nainte fapt care conduce implicit, la rotirea catenei din interior (cercul rotativ). De cele mai
multe ori, prin rotirea catenei din interior se formeaz lanuri lungi de ADN bicatenare cuprinznd
mai multe copii ale ADN-ului iniial. n final, enzimele vor tia acest lan n fragmentele
corespunztoare fiecrui cromozom, acestea se unesc i sunt identice cu ADN-ul circular pe baza
cruia au fost sintetizate.
La eucariote, ADN-ul este liniar, deci replicarea decurge n mod normal. Datorit lungimii
foarte mari a cromozomilor eucariotelor i vitezei mari de replicare a acestora, este necesar ca
procesul s nceap n mai multe puncte, mai multe ORI, de la fiecare dintre acestea, furca de
replicare naintnd n ambele direcii (replicare bidirecional).
Din analiza secvenelor de baze azotate din exoni i din introni s-a constatat c exist dou
secvene consens: una donor (capatul 5') i alta acceptor (capatul 3). n figur este prezentat
schematic mbinarea a doi introni prin eliminarea intronului. n urma eliminrii, intronul ia forma
unui lasso i, apoi, este fragmentat n secvene foarte mici. Legtura care se formeaz la nivelul
intronului, ntre A i G, este una atipic; C5 de la G se ataseaz la C2' de la A deoarece C3'este
ocupat de restul lanului nucleotidic.
Numrul intronilor variaz foarte mult de la o gen la alta, dar, n general, eucariotele
inferioare au mai puini introni comparativ cu cele superioare. Majoritatea intronilor par s nu aib
o anume funcie, aceasta deoarece genele sintetizate artificial fr introni, au aceeai funcie ca i
cele cu introni. Dar, uneori, acetia pot include secvene reglatoare ale genei i, deci, reglatoare ale
transcripiei. n orice caz, ei au un rol esenial n evoluia genelor.
162
Fig. 16.5. Schema eliminrii intronilor
164
ARN ribozomal (ARN-r) reprezint circa 85% din cantitatea total de ARN din celul, fiind
localizat n ribozom unde este asociat cu proteinele. Ribozomii sunt particule ribonucleoproteice
(alctuite din ARN-ribozomal i proteine), de form relativ sferic, prezente att la procariote, ct i
la eucariote. Se afl, deasemenea, n constituia mitocondriilor i a cloroplastelor, organite celulare
de origine endosimbiont.
Ribozomii din mitocondrii i cloroplaste de la eucariote prezint caracteristici similare cu
cele ale ribozomilor de la procariote.
165
O alt caracteristic extrem de important a codului genetic o reprezint degenerarea sa. Se
observ n tabel c toi aminoacizii, cu excepia metioninei i triptofanului, sunt codificai de cel
putin doi codoni. Dac analizm structura bazelor azotate ce intr n componena codonilor care
codific acelai aminoacid, observm c prima i cea de a doua sunt aceleai pentru toi (excepie
face leucina la care se poate schimba i cea de a doua baz). Cea care se schimb este baza azotat
numrul 3, care mai poart numele i de poziia labil. Raionamentul existenei bazei labile este
unul de natur energetic: sinteza proteic trebuie s decurg cu vitez foarte mare, iar formarea
celor trei legturi de hidrogen ntre codon i anticodon necesit timp i energie mai mult,
comparativ cu formarea doar a dou legturi.
Cea mai important caracteristic a codului genetic o reprezint universalitatea sa. Indiferent
de natura sau de gradul de evoluie al organismului pe care l analizm, aceeai triplet de baze
azotate codific acelai aminoacid. Prin urmare, codul genetic are o origine foarte veche, la nceputul
existenei primelor organisme.
16.6. Translaia
Reprezint procesul final de expresie al unei gene, respectiv acela de sintez a unei catene
polipeptidice avnd drept surs de informaie ADN. Translaia se desfaoar n citoplasm la
166
eucariote sau n citosol la procariote dar, ntotdeauna, la nivelul ribozomilor. Aa cum am vazut,
informaia genetic prezent la nivelul ADN ajunge la ribozomi sub forma codificat ARNm.
Dup ataarea ARNt ce transport metionina la situsul A, ribozomul nainteaz din nou pe ARNm.
Astfel, nct ARNt-Metionina se mut n situsul P, situsul A ramnnd liber. Aici se va integra
urmtorul ARNt ce corespunde din punct de vedere al anticodonului (n figur, ARNt ce transport
prolina i are anticodonul GGC). Se constat c, acum, ambele situsuri sunt ocupate cu cte un ARNt
ce transport cte un aminoacid. ntre acetia din urm se formeaz legatura peptidic (COOH de la
metionin i NH2 de la prolin). Formarea acestei legturi nu mai permite medoninei s rmn
ataat i la ARNt-ul care a transportat-o, motiv pentru care acetia se separ. ARNt pentru
metionin, rmnnd fr aminoacid prsete situsul P. La situsul A rmne ARNt cu prolina dar,
de care, acum este legat i metionina prin legatura peptidic. Ribozomul se deplaseaz pe ARNm cu
nc o triplet de nucleotide astfel nct conformaia iniial prezent n situsul A ajunge n situsul P.
Situsul A rmne din nou liber pentru ataarea urmtorului ARNt i aa mai departe. Elongarea
reprezint de fapt, un ciclu de evenimente prezentate mai sus care se repet din nou i din nou, pn
cnd se ajunge la codonul de terminare a sintezei proteice.
n ARNm exist trei triplete de baze azotate: UAA, UAG i UGA pentru care nu exist nici un ARNt
cu anticodonul corespunztor. Aceste triplete se numesc codoni stop. n momentul n care ribozomul
ajunge pe ARNm la nivelul lor, nemaiexistnd nici un ARNt care s aduc un alt aminoacid, nu se
mai formeaz o alt legatur peptidic i, n consecin, sinteza proteic nceteaz. Catena
polipeptidic este eliberat, iar cele dou subuniti ribozomale se separ de ARNm.
Translaia prezint o caracteristic important i anume, aceea c are loc ntr-o anumit direcie.
Primul aminoacid are liber radicalul NH2, iar ultimul are liber radicalul COOH. n figura de mai jos
168
(fig.5.8.) este ilustrat procesul de expresie al unei gene innd cont de orientrile transcripiei i
translaiei.
TEST DE EVALUARE
1. Cine a emis modelul semiconservativ privind replicarea ADN i ce presupune acesta?
Rspuns:
Watson i Crick au emis ipoteza replicrii ADN dupa modelul semiconservative. Conform
acestui model, iniial are loc ruperea puntilor de hydrogen, rezultand AND monocatenar.
Ulterior, fiecare catena original servete drept matri pentru sinteza unei catene noi. Vor
rezulta doua molecule noi, fiecare avnd o catena veche i o caten nou-sintetizat. Datorit
punilor de hidrogen complementare de tipul A=T, GC i invers, secvena nucleotidelor din
cele dou molecule rezultate este identic cu secvena de nucleotide din molecula original.
Astfel cele dou molecule, respective cele doua celule fiice, vor avea aceeai baz ereditar.
2. n ce const transcripia ?
169
3. Care e diferena dintre ADN-polimeraza i ARN-polimeraza?
Exerciii
Exemplu rezolvat
Ct reprezint ARN-ul ribozomal (ARN-r) din cantitatea totala de ARN din celula:
a) circa 85%;
b) sub 70%;
c) Peste 95%.
Rspuns: a
1. Translaia se desfaoar ntotdeauna la nivelul :
a) aparatului Golgi;
b) mitocondriilor;
c) ribozomilor.
2. Transcripia se realizeaz:
a) n citoplasm;
b) n nucleu;
c) n nucleu i citoplasm.
3. Codonul reprezint:
a) dou baze azotate;
b) o baz azotat i un zahar;
c) un triplet de baze azotate.
4. Aminoacizii liberi se ataeaz de
a) ARNm;
b) ARNr;
c) ARNt.
5. Se poate spune despre codul genetic c este:
a) universal, degenerat;
b) specific, suprapus.
170
Rezumatul temei
Replicarea macromoleculei de ADN (sinteza ADN) - Watson si Crick au emis ipoteza
replicrii ADN dupa modelul semiconservativ. Conform acestui model, iniial are loc ruperea
puntilor de hidrogen, rezultnd ADN monocatenar. Ulterior, fiecare caten original servete drept
matri pentru sinteza unei catene noi. Vor rezulta dou molecule noi, fiecare avnd o catena veche
i o caten nou-sintetizat. Datorit punilor de hidrogen complementare de tipul A=T, GC i
invers, secvena nucleotidelor din cele dou molecule rezultate este identic cu secvena de
nucleotide din molecula original. Astfel cele dou molecule, respective cele dou celule fiice, vor
avea aceeai baz ereditar.
Sinteza proteic, controlat de ADN existent n cromozomi i coninnd informaia genetic
necesar sintezei proteinelor, debuteaz prin sinteza n nucleu a acidului ribonucleic mesager (ARN-
m, copie negativ fidel a unei catene polinucleotidice a ADN). Fenomenul se numete transcripie
i const n transferarea informaiei genetice din ADN n ARN-m.
Tipuri de ARN: ARN viral, ARN nuclear mic, ARN mesager, ARN de transport, ARN ribozomal
(ARN-r)
Cea mai important caracteristic a codului genetic o reprezint universalitatea sa. Indiferent
de natura sau de gradul de evoluie al organismului pe care l analizm, acelai triplet de baze azotate
codific acelai aminoacid. Prin urmare, codul genetic are o origine foarte veche, la nceputul
existentei primelor organisme.
Translaia reprezint procesul final de expresie al unei gene, respectiv acela de sintez a unei
catene polipeptidice avnd drept surs de informaie ADN. Translaia se desfaoar n citoplasm la
eucariote sau n citosol la procariote dar, ntotdeauna, la nivelul ribozomilor. Aa cum am vzut,
informaia genetic prezent la nivelul ADN ajunge la ribozomi sub forma codificat - ARNm.
171
Tema nr. 17
GEN, STRUCTUR I FUNCII
Uniti de nvare:
Concepii despre gen
Structura fin a genei
Structura genei la procariote
Structura genei la eucariote
Elemente genetice mobile: transpozoni, retrotranspozoni
Obiectivele temei:
dobndirea cunotinelor necesare nelegerii modului de funcionarea a genelor;
trecerea n revist a formelor structurale ale genei la procariote i eucariote;
cunoaterea semnificaiei termenilor genetici:transpozoni si retrotranspozoni;
Timp alocat temei: 3 ore
Bibliografie recomandat:
1. Casian H., 2006, Genetica suport pentru curs, Ed. Printech
2. Szilagyi L., 2007, Genetic, Ed. Amanda Edit
n cazul n care gena a suferit mai multe procese mutaionale n aceti loci se pot gsi gene
polialele. n funcie de plasarea lor n autozomi sau heterozomi, genele pot fi autozomale sau
heterozomale. n cazul plasrii lor n heterozomi, genele manifest fenomenul de sex-linkage,
transmindu-se cu frecven mai mare la unul dintre sexe. Dup funcia lor, genele sunt divizate n:
gene structurale, gene reglatoare i gene operatoare.
Genele structurale codific diferite proteine cu rol structural sau enzimatic. Cele operatoare
declaneaz sau nu activitatea genelor structurale. Genele reglatoare controleaz i dirijeaz
activitatea genei operatoare i a genei structurale.
173
Dup apariia geneticii moleculare, n anii 50-60, gena este definit drept un segment de
ADN sau ARN care conine informaia genetic necesar sintezei unei catene polipeptidice. Gena
este alctuit dintr-o secven de codoni care codific succesiunea aminoacizilor ntr-o caten
polipeptidic.
Conform concepiei o gen o caten polipeptidic, unele proteine sunt sintetizate pe baza
informaiei genetice din dou sau mai multe gene. De exemplu; hemoglobina A de la om este
alctuit din dou catene polipeptidice a i b i este determinat de dou gene diferite. V. M. Ingram
(1957) pune n relief particularitile de structur a hemoglobinei (HbS), diferit de cea normal
(HbA), prin substituia glutaminei cu valina n poziia a 6-a a lantului ).
S. Benzer (1957), cercetnd mutaiile r ale fagului T4 ce paraziteaz pe E . coli, a dovedit c
mutaiile i recombinrile pot avea loc la nivel intragenic, adic la nivelul codonilor i a nucleotizilor
aparte. El propune o serie de noiuni noi, i anume:
muton cea mai mic subdiviziune a genei, echivalent dup mrime cu un
nucleotid, a crui schimbare se soldeaz cu o mutaie;
recon cea mai mic subdiviziune a genei care poate fi separat i schimbat
prin crossing-over;
cistron cea mai mic parte funcional a materialului genetic reprezentat de
ADN (sau ARN viral).
W. Gilbert (1978) a propus termenii de exon (fig.17.2.) pentru denumirea fragmentelor
informaionale, numrul acestora variaz de la o gen la alta (ntre 2 i mai mult de 50) i
intron(fig.17.3.) pentru fragmentele neinformaionale.
Figura.17.2. Exoni
174
Figura.17.3.Introni
gena reprezint segmentul de ADN (sau ARN viral) format n medie din 1000-1500 de
nucleotizi dispui liniar;
175
17.3. Structura genei la procariote
Materialul genetic la procariote se caracterizeaz printr-o serie de particulariti i anume:
genomul bacterian este alctuit din dou categorii de determinani genetici:
genele eseniale (eucromozomiale), localizate n cromozomul bacterian;
genele accesorii, localizate n afara cromozomului bacterian, exist, mai mult sau mai puin,
autonom (plasmidele, elementele genetice transpozabile, fagii);
molecula de ADN este circular (marginile ei sunt unite prin legturi covalente);
molecula de ADN nu formeaz complexe cu proteinele histonice si nehistonice (este nud);
genomul bacterian este reprezentat printr-un numr relativ restrns de gene;
genomul bacterian contine un singur grup linkage (caracteristic cromozomului bacterian
sau nucleoidului);
bacteriile sunt organisme haploide (atunci cnd nu are loc replicarea ADN), dar pot fi
diploide i parial diploide, n funcie de sinteza ADN);
transmiterea caracterelor ereditare este diferit de cea a eucariotelor, ntruct lipsete
procesul clasic al reproducerii sexuale.
Cromozomul bacterian este alctuit dintr-o molecul de ADN dublu catenar circular.
Lungimea ei variaz ntre 1000-1400 m, diametrul fiind de 2,5 nm. Numrul de nucleotizi la E.coli
este de 4,1 106, iar masa molecular de circa 2,5 109 daltoni. Schema general a reglrii activitii
genelor procariote a fost propus de geneticienii F. Jacob si J. Monod n 1961 si expus n lucrarea
Mecanismul reglajului genetic n sinteza proteinelor. Dup schema de mai jos, genele cu funcii
nrudite, care funcioneaz asociat, sunt organizate n operon (fig.17.4.).
La eucariote materialul genetic are o organizare cu mult mai complex. Moleculele liniare de
ADN, dublu catenare, formeaz complexe cu proteinele histonice, alctuind fibra elementar
nucleohistonic (nucleozomal). Aceste substane, completndu-se cu ARN i proteinele
nehistonice, formeaz cromatina, materialul din care se difereniaz, n procesul de diviziune,
cromozomii.De menionat c la eucariote materialul genetic se caracterizeaz printr-o discontinuitate
genetic (n molecula de ADN se succed secvene informaionale (exoni) i neinformaionale
(introni), care sunt eliminate n procesul de transcripie a informaiei genetice (fig.6.5). Purttorii
materiali ai informaiei ereditare sunt considerai cromozomii. Termenul a fost propus n anul 1888
de ctre W. Waldeyer. Acesta a descoperit nite corpusculi cromatici n celulele n diviziune.
Cromozomii (din gr. chroma culoare, soma corp) reprezint uniti structurale compacte,
constante, alctuite din acizi nucleici i proteine, vizibili n timpul diviziunii celulare la o tratare cu
colorani bazici. Cromozomii au un rol deosebit n viaa celulei (organismului), deoarece asigur
transmiterea caracterelor la descendeni. La organismele eucariote, genele nu sunt organizate n
operoni, sistemele de reglaj fiind mult mai complicate dect la bacterii. n general, reglarea activitii
genelor la eucariote este mai puin studiat. Intronii i exonii ntr-o gen ocup poziii stabile, i sunt
variabili n numr i mrime.
177
17.5. Elemente genetice mobile: transpozoni, retrotranspozoni
Fig.6.6. Transpozonii
Transpozonii sau genele sltree (jumping genes) sunt secvene de ADN care se pot
insera repetat n mai multe situsuri ale unui genom. Mecanismul prin care un transpozon se
deplaseaz dintr-un situs n altul este de tipul cut and paste. Acest tip de gene a fost descoperit de
ctre Dr. Barbara McClintock de la Cold Spring Harbor Laboratory, New York, descoperire ce i-a
adus in 1983 Premiul Nobel pentru Medicin. Implicaiile acestor gene sltree se pot dovedi n
timp de amploarea descoperirii structurii ADN-ului de ctre Watson i Crick.
Dr. McClintock a pornit de la observaia c unele dintre boabele roii de porumb indian
prezentau dungi sau pete albe de diverse forme, pe cnd altele erau colorate uniform n rou, galben
sau erau complet albe. Prezena dungilor sau petelor albe nu putea fi explicat folosind legile
mendeliene i a dus la identificarea transpozonilor. Aceste gene pot inhiba sau bloca producerea de
pigment n anumite celule. Spre exemplu, dac transpozonul se deplaseaz pe o poziie adiacent
unei gene care codific producerea unui anumit pigment, celula va deveni incapabil s produc
pigmentul respectiv (de culoare roie, n cazul boabelor de porumb). Aadar, acestea vor
prezenta dungi sau pete albe sau vor fi n ntregime albe, n funcie de durata n care transpozonul se
situeaz n vecintatea genei de interes.
TEST DE EVALUARE
1. Enumerai cele trei caracteristici de baz ale genei, conform concepiei clasice.
Rspuns:
Cele trei caracteristici de baz ale genei sunt:
unitate functional (determin caracteristicile ereditare);
unitate mutational (structura chimic a genei se schimb prin mutatie, ceea ce duce la
aparitia caracterului nou);
unitate de recombinare (n cadrul procesului de crossing-over are loc un schimb de gene
corespunztoare ntre cromatidele nesurori ale cromozomilor omologi).
Exerciii
Exemplu rezolvat:
1. Poziia pe care o ocup o gen pe cromozom, se numete:
a) muton;
b) cistron;
179
c) locus.
Rezolvare: c
2. Cea mai mic subdiviziune a genei este:
a) recon;
b) muton;
c) situs.
3. Exonul este prezent n gena de la :
a) procariote;
b) eucariote;
c) procariote i eucariote.
4. Transpozonii cuprind clasele:
a) reverstranspozonii i retrotranspozonii;
b) retrotranspozonii i transpozonii autonomi.
Rezumatul temei
181
Tema nr.18
REGLAJUL GENETIC LA PROCARIOTE I EUCARIOTE
Uniti de nvare:
Reglajul activitii genelor la procariote;
Reglajul activitii genelor la eucariote;
Rolul interferenei ARN n reglarea activitii genelor;
Obiectivele temei:
dobndirea cunotinelor privind mecanismele de reglaj genetic la procariote i
eucariote;
trecerea n revist a rolului interferenei ARN n reglarea activitii genelor;
Timp alocat temei: 2 ore
Bibliografie recomandat:
1. Casian H., 2006, Genetica suport pentru curs, Ed. Printech
2. Szilagyi L., 2007, Genetic, Ed. Amanda Edit
3. Nicolae, I., Rduoiu, S., Butnaru, G.,Nicolae, F., 2000, Genetica- principii de baz ale
ereditii, Vol. II, Ed. Bioterra, Bucureti.
represia enzimatic;
retroinhibiia enzimatic.
Inducia enzimatic este fenomenul prin care celulele au capacitatea de a produce enzimele
necesare metabolizrii unor substane, care nu sunt de obicei prezente n mediu. Acest fenomen de
inducie se realizeaz numai n prezena n mediu a substratului sau inductorului, iar enzimele
corespunztoare lor sunt numite enzime inductibile i au rol catabolic fiind implicate n degradarea
substratului.
De exemplu, dac n mediul nutririv al bacteriei E.coli se introduce galactoza, bacteria va
ncepe s produc enzima galactozidaza, care degradeaz specific galactoza. n acest caz, galactoza
acioneaz ca inductor, contribuind la sinteza enzimei de degradare.
Represia enzimatic este fenomenul opus induciei enzimatice, prin care este inhibat sinteza
proteic datorit unui represor. Represorul este o substan ce inhib sinteza uneia sau mai multor
proteine prin blocarea genelor. Represorul poate interaciona att cu un metabolit particular numit
efector, ct i cu o gen din operon, numit operator. Interaciunea dintre represor i operator
previne aciunea genelor structurale din operon.
Retroinhibiia enzimatic sau inhibiia prin feedback sau efectul Novick Szilard este un alt
sistem de control al sintezei proteice, care const n inhibarea sau blocarea activitii unei enzime n
urma interaciunii cu produsul final al acesteia. n cazul unui lan metabolic, unde intervin mai multe
enzime, produsul final prezent n cantitate mare inhib moleculele existente ale enzimei, controlnd
prima etapa a lanului metabolic. Un exemplu interesant care ilustreaz deosebirea dintre represia
enzimatic i retroinhibiia enzimatic a fost studiat la E.coli, bacterie la care prezena n mediu n
exces a aminoacidului L-izoleucina are un efect dublu asupra cii metabolice respective:
1) blocheaz activitatea enzimei L-treonin deaminaz, prima dintre cele cinci enzime care
transform L-treonina n L-izoleucin;
2) blocheaz producerea de ctre celule a tuturor enzimelor (inclusiv L-treonina deaminaz)
necesare pentru sinteza L-izoleucinei.
Cercetrile privind reglajul genetic la procariote, au dus la concluzia c genele ce acioneaz
asupra unei ci metabolice nu au o activitate independent, ci ele fac parte din uniti mai mari
denumite operoni ce funcioneaz coordonat.
La E.coli se aproximeaz c exist circa 200 operoni, din care numai activitatea unora este
mai bine cunoscut. Posibilitatea utilizrii lactozei din mediu se realizez cu ajutorul a trei enzime, a
183
cror sintez este determinat de trei gene structurale ce intr n alctuirea operonului lac. Aceste trei
gene se gsesc dispuse n ordine de-a lungul cromozomului bacterian.
n absena lactozei, genele structurale care determin sinteza celor trei enzime sunt inactive.
Adugndu-se lactoza n mediu, cele trei gene sunt din nou active i imediat ncepe sinteza celor trei
enzime. Activitatea celor trei gene structurale este controlat de o gen reglatoare 1+, care acioneaz
asupra lor prin intermediul unui represor. Absena lactozei duce la sintetizarea unei proteine
represoare, care se cupleaz cu un segment de ADN, denumit operator dispus naintea celor trei gene
structurale, iar activitatea genelor respective este blocat.
Exist mutante la care s-a pierdut controlul produciei celor trei enzime si acestea sunt
sintetizate permanent, chiar i in lipsa lactozei. Acestea sunt mutante de tip i care afecteaz gena
reglatoare.
Exist mutante ale celor trei gene structurale notate cu z, y i a, care determin sinteza
unor enzime modificate funcional i structural. Genele structurale determin fiecare sinteza unei
enzime, conform modelului o gen-o enzim.
Operonul lac este alctuit din urmtoarele subuniti dispuse n ordine: promotorul (p),
operatorul (o) si cele trei gene structurale z, y, a. Prima dintre aceste subuniti se numete
promotor este reprezentat de o secven de nucleotide, care servete ca loc de recunoatere pentru
enzima ARN polimeraza, determinnd, astfel, iniierea transcripiei. Operonul este, de asemenea,
format dintr-o secven de nucleotide care servete pentru cuplarea sa cu represorul elaborat de gena
reglatoare.
Operatorul lac este nonfuncional, pentru c n absena lactozei din mediu, gena reglatoare
sintetizeaz represorul care se cupleaz cu operatorul, inactivnd genele structurale. n prezena
lactozei, represorul se modific structural, iar el devine incapabil de a se cupla cu operatorul.
Operatorul lac devine funcional, cele trei enzime sunt sintetizate i lactoza poate fi metabolizat.
184
Inductori i corepresori. Moleculele represorilor pot fi i de form activ, dar i de form
inactiv. Aceast aspect depinde de combinarea lor cu moleculele mici de inductori si de corepresori.
Din alturarea inductorului cu corepresorul rezult un represor inactiv, n timp ce ataarea molecului
corepresoare de represor modific represorul inactivat ntr-o form activ. n concluzie, inductorul i
corepresorul au o aciune antagonist.
Enzimele alosterice. Prin enzime alosterice se neleg acele enzime care posed urmtoarele
caracteristici: prin fixarea unui inductor sau a unui inhibitor are loc modificarea conformaiei enzimei
i ele devin active sau inactive. Locul n care se fixeaz inductorul sau inhibitorul nu posed nici o
analogie structural cu substratul, fapt care a determinat ca acest tip de enzime s fie numite
alosterice. Inductorul i inhibitorul au primit denumirea de efectori alosterici.
Operonul cuprinde:
1) Gene structurale un anumit numr, ce conin informaia genetic pentru sinteza unei
polipeptide (vezi fig. de mai sus).
2) Operator se afl naintea genelor structurale, ea permite sau nu funcionarea genelor
structurale. Operatorul blocheaz activitatea genelor structurale cnd este cuplat cu represorul.
3) Promotor- reprezint punctul de iniiere a sintezei ARNm.
4) Gene reglatoare produsul genei reglatoare este o substan cu rol represor. Represorul
poate bloca gena operatoare i deci ntreg operonul.
n sistemele represibile, represorul este activ, acioneaz gena operatoare i ca urmare ARN
polimeraza nu poate sintetiza ARNm de-a lungul genelor structurale.
n sistemele inductibile, reepresorul este inactiv, operonul este liber i se sintetizeaz ARNm.
186
Exist dou tipuri de baz de reglare a activitii genelor la eucariote:
2. reglajul genetic pe termen lung, care este ireveribil i implic fenomene de difereniere
celular, ce are loc n cursul dezvoltrii ontogenetice, pornind de la celula ou (zigotul).
Acesta este un reglaj genetic ntiprit n memoria celulei i este ereditar i stabil.
1. Reglajul genetic la nivel transcripional, la eucariote, ca i la procariote este nivelul cel mai
important la care se realizeaz controlul activitii genelor. Reglajul genetic transcripional
nseamn determinarea exact a unor gene transcrise din genom (ADNARN). La eucariote,
acest control transcripional este pozitiv, realizndu-se cu ajutorul unor proteine activatoare,
ce indic unde, cnd i pentru ct timp trebuie s funcioneze gena.
3. Reglajul genetic la nivelul migrrii ARNm n citoplasm este acela care decide ce secvene
de ARNm vor fi degradate n nucleu i care vor fi exportate n citoplasm, unde se realizeaz
sinteza proteic. Este vorba de enzime diferite ce opereaz n tipuri diferite de celule, fapt
care determin ce sinteze proteice caracteristice vor realiza celulele respective.
5. Reglajul genetic la nivelul degradrii ARNm are rolul de a selecta moleculele de ARNm
matur migrate n citoplasm, care vor urma s fie degradate. ARNm-ul din cazul genelor
hemoglobinei are o mare stabilitate n timp, astfel c el servete repetat pentru sinteza
proteic.
188
TEST DE EVALUARE
1. Definii retroinhibiia enzimatic:
Rspuns:
Retroinhibiia enzimatic sau inhibiia prin feedbackeste un alt sistem de control al sintezei
proteice, care const n inhibarea sau blocarea activitii unei enzime n urma interaciunii cu
produsul final al acesteia.
Exerciii
Exemplu rezolvat:
1. Punctul de iniiere a sintezei ARNm este reprezentat de:
a) operator
b) operon
c) promotor
Rspuns: c
2. La eucariote ARNm este:
a) policistronic
b) monocistronic
3. Interferena ARN presupune existena:
a) ARN monocatenar
b) ARN ribozomal
c) ARN bicatenar
Rezumatul temei
Celula se comport ca un sistem autoreglat. Nucleul sau nucleoidul din celul este centrul de
comand i control al ntregii activiti celulare. Nucleul primete printr-un sistem enzimatic
informaii despre evenimentele ce au loc n citoplasm i intervine n controlul activitii celulare
prin declanarea, intensificarea sau stoparea producerii (funciei) unor proteine specifice. Mesajele
189
nucleului sunt expediate prin intermediul ARNm. Ca urmare putem spune ca sinteza proteinelor i a
enzimelor celulare nu este constant n timp, ea variaz n funcie de necesitile celulei. La
organismele procariote exist operonul - un segment continuu de ADN, de pe cromozomul bacterian
ce corespunde unui grup de gene, el se comport ca o singur unitate de transcripie genetic (produce
o singur molecul de ARNm) i de reglare genetic. Cile de reglaj genetic sunt asigurate prin:
inducia enzimatic; represia enzimatic; retroinhibiia enzimatic.
La eucariote reglajul genetic este mai complex, el se poate realiza la nivelul nucleului prin
reglaj genetic la nivel transcripional i reglaj genetic la nivelul maturrii ARNm. Tot la
eucariote reglajul poate s apar la nivelul citoplasmei, respectiv : reglaj la nivelul migrrii
ARNm; la nivelul degradrii ARNm i la nivelul translaiei ( se selecteaz moleculele de ARN
translate).
Recent s-a stabilit c n celula eucariot poate exista ARN bicatenar ce duce la apariia
interferenei, un proces prin care se suprim expresia genelor i implicit sinteza proteic
corespunztoare.
190
Tema nr. 19
MUTAIA SI RECOMBINAREA GENETIC
Unitile de nvare:
Mutaiile genetice;
Reparaia genetic;
Recombinarea la nivel molecular.
Obiectivele temei:
trecerea n revist a istoricului privind mutaiile genetice, definiia i importana
cunoaterii lor;
fixarea mecanismelor moleculare ce duc la apariia mutaiilor genice i consecinele
acestora;
AG i TC;
b) transversia, cnd o baz purinic nlocuiete o baz pirimidinic sau o baz pirimidinic
nlocuiete una conform schemei urmtoate:
TG i AC
GT i GC
Mutaiile genice duc, fie la pierderea total sau parial a capacitii de sintez a uneia din
proteinele specifice, fie la sinteza unei proteine diferite ca propieti, din cauza nlocuirii uneia sau a
mai multor aminoacizi. Prin modificarea proteinelor apar noi caractere metabolice sau chiar
morfologice. Genele mutante se transmit la descendeni conform legilor mendeliene, iar raportul de
segregare este condiionat de caracterul dominant, codominant sau recesiv al genomutaiei. n unele
cazuri, modificarile la nivelul macromoleculelor de ADN nu se reflecta asupra ordinii aminoacizilor n
lanul polipeptidic din cauza codului genetic degenerat.
193
19.2. Reparaia genetic
Prin reparaie genetic se nelege refacerea de la nivelul molecule de ADN. Integritarea
materialului genetic este protejat prin mecanisme de reparare enzimatic, care minimizeaz sau
anuleaz efectele mutagenilor. Toate sistemele de reparare de la nivelul moleculelor de ADN, se
grupeaz n: mecanisme de reparare prereplicative i mecanisme de reparare postreplicative.
Repararea prereplicativ: fenomenele reparatorii au loc naintea sintezei moleculei de
ADN, acestea fiind relativ specifice diferitelor grupe de organisme.
Repararea postreplicativ: are loc la ntuneric i implic att replicarea ct i recombinarea
catenelor de ADN. Activitatea de reparare postreplicativ, este activ atunci cnd sunt continue, sau
cnd are loc ruperea complet a structurii bicatenare a AND-ului. Prin acest tip de reparare se refac
leziunile provocate de radiaiile X, se elimin efectele secundare ale dimerizrii, cauzat de radiaia
ultraviolet, precum i de unele procese fiziologice. Dimerii apar ca o consecina a alterri induse de
radiaiile UV.
Repararea AND prin inducerea sistemului SOS: Sistemul SOS intr n aciune atunci cnd
n molecul de ADN s-a format un numr mare de leziuni, pe care mecanismele anterioare nu au avut
capacitatea de a le repara. Reacia SOS provoac sinteza unei ADN-polimeraze speciale, care
tolereaz leziuni i permite replicarea ADN-ului modificat.
Repararea genetic este un proces de contracarare a efectelor mutagene, prin care se reface o
leziune a materialului genetic. Se poate realiza n faza prereplicativ prin reacia fotoenzimatic sau
prin excizie, n faza postreplicativ, precum i prin inducerea sistemului SOS
Exerciii
Exemplu rezolvat:
1. Care din urmtoarele substituii este tranziie:
a) A G;
b) A- C;
c) A T.
Rspuns: a
2. Mutaiile genice sunt fenomene ce apar:
a) rar;
b) frecvent.
3. Reparaia genic se realizeaz:
a) postrepicativ;
b) prereplicativ;
c) prereplicativ i postreplicativ;
4. Recombinarea genetic se realizeaz prin:
a) test-cross;
b) back-cross;
c) crossing-over.
195
Rezumatul temei
Cercetarea mutaiilor a contribuit la dezvoltarea cunotinelor despre ereditate, la cunoaterea
tainelor evoluiei i la elaborarea unor sisteme de clasificare a plantelor pe baz genetic. De
asemenea, prin mutaii s-a ajuns la descifrarea codului genetic, care reprezint una din cele mai
senzaionale descoperiri ale secolului nostru.
Mutaiile reprezint o surs substanial de variaie, care nu numai c mbogaete populaia
cu genotipuri noi,dar, n urma recombinrilor ntre ele, mresc gradul de heterozigoie al populaiilor
i sporesc capacitatea de adaptare a acestora. Prin mutaie se nelege orice schimbare brusc
ereditar, n structura i funciile materialului genetic, adic a genelor i cromozomilor, care se
transmit de la o generaie la alta i care se datoreaz recombinrilor genetice sau segregri factorilor
ereditari.
Mutaiile genice sunt denumite genomutaii sau punctiforme, cnd sunt determinate de
schimbri structural la nivelul unei nucleotide sau cel mult a unei perechi de nucleotide din ADN.
Cnd schimbrile depesc o pereche de nucleotide, mutaiile sunt mari. Mutaia este un eveniment
rar, pentru c genele sunt relativ stabile. Mutaiile genice duc, fie la pierderea total sau parial a
capacitii de sintez a uneia din proteinele specifice, fie la sinteza unei proteine diferite ca
propieti, din cauza nlocuirii uneia sau a mai multor aminoacizi.
Principala caracteristica a mutaiilor genetice const n faptul c fenomenul se ntlnete rar.
Faptul acesta este deosebit de avantajos cel puin, din dou puncte de vedere: n primul rnd, confer
constan ereditii, asigurnd asemnarea descendenilor cu prinii, iar n al doilea rnd, dac
inem cont c majoritatea mutaiilor sunt duntoare, rata mic a mutaiei menine la un nivel sczut
proporia indivizilor letali, prevenind moartea genetic a populaiei sau a speciei. Specificitatea este
o alt trstur, n sensul c ele afecteaz, n principiu,o singur caracteristic ereditar. Mutaiile
genice se produc att in celulele sexuale ct i n cele somatice.
Prin reparaie genetic se nelege refacerea de la nivelul molecule de ADN. Integritarea
materialului genetic, este protejat prin mecanisme de reparare enzimatic, care minimizeaz sau
anuleaz efectele mutagenilor. Toate sistemele de reparare de la nivelul molecule de ADN, se
grupeaz n: mecanisme de reparare preplicative i mecanisme de reparare postreplicative.
Repararea genetic este un proces de contractare a efectelor mutagene, prin care se reface o leziune a
materialului genetic. Se poate realiza in faza prereplicativ prin reacia fotoenzimatic sau prin
excizie, n faza postreplicativ, precum i prin inducerea sistemului SOS.
196
Tema nr.20
TEHNICI DE GENETIC MOLECULAR CU APLICAIE N AMELIORAREA
PLANTELOR
Uniti de nvare:
Tehnica PCR (Polymerase Chain Reaction);
Markeri moleculari: RAPD, AFLP, SSR; RFLP;
Selecia asistat de markeri moleculari.
Obiectivele temei:
nsuirea noiunii de Polymerase Chain Reaction i etapele metodei de amplificare
enzimatic a unei secvene de ADN;
cunoaterea diferitelor variante tehnice i aplicaii ale tehnologiei PCR;
cunoaterea semnificaiei termenilor markeri moleculari, precum i ntelegerea tipurilor de
markeri;
prezentareaa seleciei asistat de markeri moleculari;
Timp alocat temei: 3 ore
Bibliografie recomandat:
1. Gheorghe Prnu. Genetica i ameliorarea plantelor. Ed. Silvic, Bucureti, 2010.
2. Rodica Pop, Studiul variabilitii somaclonale la via de vie cu ajutorul markerilor
moleculari
3. http://www.usamvcluj.ro
4. http://www.bio.unibuc.ro
Markerii microsatelii au fost introdui mai recent pentru identificarea viei de vie. THOMAS
i SCOTT (1993), citai de ULANOVSKY i colab. (2001) au reuit s caracterizez 20 de varieti de
vi de vie utiliznd markeri microsatelii. Ei au propus utilizarea microsateliilor pentru stabilirea
unei baze de date internaionale referitoare la descrierea varietilor de vi de vie, datorit nivelului
mare de polimorfism, a codominanei, simplicitii i repetabilitii analizelor moleculare SSR.
BOTTA i colab. (1995), citai de ULANOVSCY i colab. (2001), au dovedit c markerii
microsatelii posed o buna capacitate pentru identificarea varietilor, dar nu i a clonelor de vi de
vie, concluzie la care au subscris i SILVESTRONI i colab. (1997) care au analizat la nivel
molecular clone din cultivarele Sangiovese i Fortana. SEFC i colab. (1998) utiliznd 10 loci
microsatelitari au obinut diferite benzi paterne pentru fiecare dintre cele 60 de varieti de vi de vie
din colecia de germoplasm analizat.
Astfel, a fost observat variabilitate ntre clonele de Merlot, clona original din Chile i
proveniena din Frana, rezultatele sugernd c cele dou clone reprezint genotipuri diferite. n
207
schimb, pentru celelalte cultivare, cele dou tehnici demonstreaz uniformitatea populaiilor din
Chile.
Tehnica SSR i AFLP a fost utilizat n amprentarea genetic a unor varieti de vi de vie,
pentru rezolvarea cazurilor de omonimie i sinonimie, precum i pentru identificarea genotipurilor
parentale la unele varieti remarcabile, cum este de exemplu soiul Cabernet Sauvignon (BOWERS,
MEREDITH, 1997).ntr-un alt studiu AKKAK i colab. (2005), au analizat diversitatea genetic a
unor soiuri i varieti de vi de vie autohtone provenite din bazinul Mrii Mediterane si Algeria,
folosind 12 markeri SSR. Dintre cele 60 de cultivare analizate au fost identificate 34 de genotipuri
diferite, ceea ce arat faptul c tehnica SSR poate fi utilizat cu succes i n studiul relaiilor
intraspecifice la aceast specie.
Tehnicile RAPD, AFLP i SSR au fost utilizate cu succes i n studiile de cartare genetic la
via de vie. Astfel, n anul 2002, THIS i colab. s-au preocupat de ntocmirea unei hri genetice de
referin n cazul descendenilor obinui n cazul ncrucirii dintre soiurile Syrah x Grenache.
ntocmirea hrii genetice s-a bazat pe utilizarea markerilor microsatelii polimorfi VNI i VMC.
Hrile genetice ntocmite pe baza markerilor SSR sunt extrem de interesante, deoarece permit
evidenierea grupelor de linkage la nivelul unor combinaii hibride.
De asemenea, markerii SSR VMC au fost testai att n cazul unor soiuri de Vitis vinifera, ct
i Vitis riparia. Aproximativ 80% dintre locusurile identificate cu ajutorul markerilor SSR la Vitis
vinifera fiind reproductibile i la Vitis riparia. Aceti markeri sunt interesani pentru studiile
filogenetice la unele specii nrudite.
Perfecionarea metodelor de analiz a ADN-ului, cum ar fi RAPD, AFLP i SSR au deschis
noi posibiliti de caracterizare i comparare a genotipurilor, independent de fenotip i, respectiv, de
exprimarea genelor n funcie de condiiile de mediu. Utilizarea tehnicilor de analiz bazate pe PCR
au permis detectarea polimorfismului ADN n loci dispui randomizat (RAPD, AFLP) sau specific
(SSR) n genom. Utilizarea markerilor ADN a crescut enorm potenialul pentru caracterizarea
soiurilor cultivate i a descendenilor acestora.
TEST DE EVALUARE
1. Ce reprezinta reacia PCR?
Rspuns:
Reacia PCR (Polymerase Chain Reaction = Reacie de Polimerizare n Lan) este o metod de
amplificare enzimatic in vitro a unei anumite secvene de ADN.
209
Exerciii
Exemplu:
5. Markerii moleculari sunt:
a) influenai de condiiile de mediu;
b) n numr limitat;
c) o msur obiectiv a variabilitii.
Rspuns: c
4. Primerii sunt :
a) zaharuri;
b) oligonucleotide;
c) enzime.
5. n domeniul agricol markerii moleculari prezint importan deosebit pentru:
a) consangvinizare;
b) poliploidie;
c) selecie.
6. Rezultatul reaciei PCR se numete:
a) replicon;
b) amplicon;
c) splicon.
Rezumatul temei
Reacia PCR (Polymerase Chain Reaction = Reacie de Polimerizare n Lan) este o metod
de amplificare enzimatic in vitro a unei anumite secvene de ADN. O reacie PCR este format din
n cicluri (ntre 25 i 40), n fiecare ciclu fiind parcurse 3 etape principale: denaturarea termic a
matriei (deci, desfacerea dublului helix ADN), ataarea primerilor i polimerizarea propriu-zis.
Componentele reaciei PCR sunt: Matria ADN, Primerii oligonucleotidici, ADN polimeraza
termostabil
210
Treptele de temperatur ale unei racii PCR standard sunt: Denaturarea iniial, Treapta de
denaturare din cadrul fiecrui ciclu, Ataarea primerilor, Polimerizarea propriu-zis, Numrul de
cicluri, Polimerizarea (extensia) final.
Marele avantaj al tehnicilor PCR l reprezint faptul c permite obinerea unei cantiti mari
dintr-o anumit secven ADN, fr a necesita clonarea acesteia n prealabil ntr-o molecul de tip
vector. Pe de alt parte, tehnologia PCR a revoluionat i implicarea geneticii moleculare n domenii
n care se apeleaz la cantiti foarte mici de ADN.
Pentru conservarea eficient a resurselor genetice vegetale este necesar stabilirea ct mai
exact a variabilitii genetice a acestora, ce poate fi determinat la dou nivele, fenotipic i
genotipic. Variabilitatea fenotipic se bazeaz pe analiza morfologiei plantelor, cea genetic pe
markerii moleculari.
Markerii ADN (moleculari) evideniaz polimorfismul la nivelul ADN-ului nuclear i
citoplasmatic.
Markerii RAPD sunt rezultai prin amplificarea PCR a unor segmente necunoscute de ADN
genomic cu ajutorul unei amorse decamere aleatoare.
Markerii AFLP const n digestia ADNului cu enzime de restricie, iar la capetele
fragmentelor rezultate se ataeaz secvene dublu catenare specifice (adapters) cu ajutorul ADN
ligazelor.
Markerii RFLP pun n eviden mutaiile ntr-o populaie clonat
Markerii SSR constituie repetiii n tandem ale unor secvene di, tri sau tetra nucleotidice.
Selecia asistat de markeri moleculari (MAS) este o metod de selecie indirect care
presupune selecia plantelor purttoare a regiunilor care sunt implicate n expresia caracterelor de
interes (plante rezistente) prin markerii moleculari.
211
TEST RECAPITULATIV
a) 3:1
b) 2:2
c) 1:2:1
11. Cte tipuri de gamei va forma un individ cu structura genetic AABbCcDd?
a) 8;
b) 10;
c) 6.
12. Mama are grupa sangvin AB, tatl grupa 0. Ce grupe sangvine poate avea copilul?
a) A i B
b) AB i A
c) B i 0
13. Culoarea alb a florilor de Primula se manifest la temperaturi de:
a) 35C
b) 25C
c) 18C
14. Manifestarea polidactiliei doar la mini se datoreaz:
a) Penetranei
b) Fenocopiilor
c) Expresivitii
15. Mama are grupa sangvin B, copilul grupa O. Ce grup sangvin poate avea tatl?
a) sau AB
b) sau A heterozigot, B hetrozigot
c) sau B homozigot
16. n cazul unei epistazii de recesivitate, raportul de segeregare n F2 este:
a) 9:3:4
b) 15 :1
213
c) 12 :3 :1
17. Cte mutante a identificat T.Morgan la musculia de oet?
a) 200;
b) 500;
c) 600.
18. n cazul linkage-ului complet, raportul fenotipic obinut prin testcross este:
a) 3:1;
b) 1:1:1:1;
c) 1:1.
19. n cazul linkage-ului complet n generaia F2 va apare un raport fenotipic:
a) 9:3:3:1;
b) 3:1;
c) 1:1.
20. Liniile izogene se pot obine din:
a) poliploizi;
b) monoploizi;
c) perisoploizi.
21. Triticum aestivum este o specie:
a) autopoliploid;
b) haploid;
c) alopoliploid.
22. n procesul de producie prezint importan:
a) monoploizii;
b) poliploizii;
c) haploizii.
23. O specie care are 2n=16, ci monosomici diferii poate forma?
a) 16;
b) 32;
c) 8.
24. Aneuploizii prezint importan pentru:
a) ameliorare;
b) producie;
c) producere de smn.
214
25. Starea de hemizigoie poate fi ntlnit n cazul:
d) deleiilor;
e) duplicaiilor;
f) deleiilor i duplicaiilor.
26. Pentru meninerea efectului heterozis ar putea fi utilizate:
d) deleiile;
e) translocaiile;
f) duplicaiile.
a) gene
b) plasmagene
c) subgene
39. Ce reprezinta mutaia?
a) reprezint o modificare n structura materialului genetic;
b) reprezint o modificare n structura i funciile materialului genetic;
c) reprezint o modificare fenotipic.
40. Mutaia se transmite la descendeni din generaie n generaie?
a) da;
b) nu;
c) doar atunci cnd ambii prini sunt heterozigoi.
41. Cum sunt denumite genele care sunt predispuse la mutaii
216
a) mutatoare;
b) multiple;
c) mutabile.
42. Cine sunt considerate surs primar a variabilitii organismelor ?
a) migraiile;
b) mutaiile.
43. Liniile consangvinizate pot fi folosite:
a) n producie
b) n ameliorare
44. Efectul heterozis se poate menine:
a) dou generaii;
b) o singur generaie;
c) mai multe generaii.
45. Acizii nucleici ndeplinesc dou funcii:
a) funcia autocatalitic i heterocatalitic;
b) funcia autocatalitic i ereditar;
c) funcia autocatalitic, heterocatalitic i ereditar.
46. Ct reprezint ADN nalt repetitiv din totalul ADN-ului celular?
a) 4 10% ;
b) 5 - 10% ;
c) 15 40%.
47. O nucleotid este alcatuita din:
a) o baza azotat, un zahar i radical fosforic;
b) o baz azotat i un zahar;
c) o baz azotat i un radical fosforic.
48. Ribovirusurile prezinta ca material genetic:
d) ADN
e) proteine
f) ARN
49. Bazele azotate ce intra in alcatuirea AND sunt:
a) A, G, C, T
b) A, G, C, U
c) A, G, C
217
50. Complementaritatea catenelor de AND se refera la legaturi de tip:
a) A-T; C-G
b) A-G; C-T
c) A-C; T-G
51. O solutie de AND supusa la temperaturi ridicate duce la separarea catenelor,
proces denumit:
a) degivrare
b) degradare
c) denaturare
52. Translaia se desfaoar ntotdeauna la nivelul :
a) aparatului Golgi;
b) mitocondriilor;
c) ribozomilor.
53. Transcripia se realizeaz:
a) n citoplasm;
b) n nucleu;
c) n nucleu i citoplasm.
54. Codonul reprezint:
a) dou baze azotate;
b) o baz azotat i un zahar;
c) un triplet de baze azotate.
55. Aminoacizii liberi se ataeaz de
a) ARNm;
b) ARNr;
c) ARNt.
56. Se poate spune despre codul genetic c este:
a) universal, degenerat;
b) specific, suprapus.
57. Cea mai mic subdiviziune a genei este:
a) recon;
b) muton;
c) situs.
58. Exonul este prezent n gena de la :
218
a) procariote;
b) eucariote;
c) procariote i eucariote.
59. Transpozonii cuprind clasele:
a) reverstranspozonii i retrotranspozonii;
b) retrotranspozonii i transpozonii autonomi.
60. La eucariote ARNm este:
a) policistronic
b) monocistronic
61. Interferena ARN presupune existena:
a) ARN monocatenar
b) ARN ribozomal
c) ARN bicatenar
62. Mutaiile genice sunt fenomene ce apar:
a) rar;
b) frecvent.
63. Reparaia genic se realizeaz:
a) postrepicativ;
b) prereplicativ;
c) prereplicativ i postreplicativ;
64. Recombinarea genetic se realizeaz prin:
a) test-cross;
b) back-cross;
c) crossing-over.
65. n tehnica PCR, polimerizarea se realizeaz n prezena enzimei:
a) Taq pol;
b) ADN polimeraza;
c) ARN polimeraza.
66. Primerii sunt :
a) zaharuri;
b) oligonucleotide;
c) enzime.
219
67. n domeniul agricol markerii moleculari prezint importan deosebit
pentru:
a) consangvinizare;
b) poliploidie;
c) selecie.
68. Rezultatul reaciei PCR se numete:
a) replicon;
b) amplicon;
c) splicon
220
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
221