Micropropagarea clonală la varză decorativă

(Brassica oleracea var. acephala)

Principiul metodei: micropropagarea clonală la varză decorativă

(Brassica oleracea var. acephala) poate fi realizată
prin utilizarea meristemelor primordiale
(promeristeme), care iniţial se află la nivelul
embrionului şi ulterior se găsesc la nivelul plantei
(în apexurile caulinare şi radiculare, respectiv atât
în vârful tulpinii şi cel al rădăcinii cât şi în vârfurile
ramificaţiilor laterale ale tulpinii şi cele ale
rădăcinilor secundare de diferite ordine).

Scopuri:
a) micropropagare şi
b) cercetare fundamentală

Protocolul de lucru

1. sursa de material biologic vegetal: seminţe de Brassica oleracea

var. acephala L. procurate din sursă comercială

2. sterilizarea de suprafaţă:
a) pentru seminţele de Brassica oleracea var. acephala L. se
realizează cu o soluţie de NaClO 0,5% , timp de 30 minute;
b) pentru plantulele de Brassica oleracea var. acephala L. se
realizează cu o soluţie de NaClO 0,5% , timp de 10 minute
3. îndepărtarea agentului de sterilizare: atât pentru seminţele cât şi
pentru plantulele de Brassica oleracea var. acephala L. se face prin
clătirea cu H2O ds de 3x 10’

1
4. sursa de explante:
a) - plantule obţinute prin germinarea seminţelor de Brassica
oleracea var. acephala L. în condiţii aseptice, pe mediul nutritiv
bazal MS (1962), gelificat cu agar 8,0 g/l;
b) - plantule obţinute prin germinarea seminţelor de Brassica
oleracea var. acephala L. în condiţii septice de laborator (după 3
săptămâni de la data semănării).

5. tipurile de explante:
- apex caulinar;
- apexuri radiculare (vârful rădăcinii principale
şi vârfurile rădăcinilor secundare)

6. medii nutritive:
a) - MS (1962), modificat prin adăugarea de agar 8.000 mg/l,
sucroză 15.000 mg/l şi TDZ 1mg/l;
b) - MS (1962), modificat prin adăugarea de agar 8.000 mg/l,
sucroză 15.000 mg/l şi BAP 1 mg/l;
c) - MS (1962), modificat prin adăugarea de agar 8.000 mg/l,
sucroză 15.000 mg/l şi TDZ 2 mg/l;
d) - MS (1962), modificat prin adăugarea de agar 8.000 mg/l,
sucroză 15.000 mg/l şi BAP 2 mg/l

7. parametri fizici de incubare:

- t° = +25°C ± 2°C şi
- fotoperioada de 16 h

8. transferuri periodice pe medii nutritive proaspete la intervale de 3 –

4 săptămâni.