Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Sistem de injecie n flux simplu pentru determinarea nitrailor i nitriilor din apa .. 4 II. 2 Metoda de determinare selectiv a nitrailor i nitriilor din ap folosind cromatografia lichid de nalt performan cu reacii fotochimce n coloan i cu detecia prin chemiluminescen ... 6 II. 3 O nou metod spectrofluorimetric pentru analiza elementelor n urm de nitrai i nitrii din mediile apoase ... 8 II. 4 Determinarea spectrometric a nitrailor i nitriilor din apa de mare cu resorcinol . 10 II. 5 Determinarea nitrailor i nitriilor prin spectrometria UV .. 12 II.6 Determinarea spectrometric a urmelor de nitrii n ap ... 14 Bibliografie .. 17
Cap. I Introducere
De cele mai multe ori, vorbind despre impactul omului asupra mediului ambiant, se fac referiri la poluare. Astzi se tie c mediul natural se deterioreaz ncetul cu ncetul datorit creterii demografice, urbanizrii, industrializrii, factorul hotrtor fiind cel antropic. Odat cu apariia primelor civilizaii urbane a aprut i intervenia brutal a omului prin exploatarea neraional a terenurilor i a alterrii mediului nconjurtor prin poluani provenii din activitile umane, de origine menajer, agricol i industrial. Astzi, peste tot pe Terra, n marile metropole ale lumii civilizate apar urme ale activitii umane - acele deeuri poluante. Poluarea reprezint un pericol iminent pentru viaa omului, flori i fauna de pe Terra, att prin efectul nociv al poluanilor ct i prin dezechilibrele care apar la nivel planetar. Poluarea este procesul de modificare al factorilor de mediu biotici i abiotici prin introducerea n mediu al poluanilor de tipul deeurilor rezultate din activitile umane. Intens afectate de efectele polurii sunt mai ales pdurile, aerul, apele i solul. Apele subterane i cele de suprafa se afl ntr-o stare avansat de poluare. Se evacueaz anual n ruri, din activitile industriale, agricole i urbane, peste 6 milioane tone de poluani ntre care predomin: cloruri, azotai, amoniu, fenol, detergeni i pesticide. Poluarea cu ngrminte chimice, pesticide, ploi acide afecteaz tot mai mult solul contribuind substanial la nrutirea strii de sntate a acestuia. Noiunea de sol este indisolubil legat de noiunea de productivitate. Pentru a prentmpina scderea productivitii acestuia se folosesc ngrmintele chimice. ns chimizarea n exces i unilateral tulbur echilibrul ecologic din sol afectnd procesul de conversie, ceea ce conduce la scderea potenialului productiv. O alt consecin negativ al procesului chimizrii abuzive este acumularea n sol i n apa freatic a unor elemente minerale cum sunt nitraii, n concentraii duntoare. Folosirea n concentraii tot mai mri a ngrmintelor pe baz de azot a avut drept urmare creterea azotailor n sol. De aici, ei sunt levigai i dui n apa izvoarelor de unde ajung n organismul uman, fiind transformai
n azotii de ctre flora bacterian intestinal. Azotiii ptrund n snge i, printre altele, deregleaz respiraia intracelular. Contaminarea apelor cu diverse substane poluante este o problem ce se manifest n prezent la scar planetar. Principalii poluani chimici ai apelor sunt: plumbul, mercurul, azotul, fosforul, hidrocarburile i pesticidele. Problema polurii apelor cu azotaii folosii ca ngrminte chimice n agricultur a devenit foarte important n zilele noastre. Din studiile efectuate de B. Commoner (1970) rezult c n ultimii 25 de ani, cantitatea de azotai deversai n mediu de diferite surse a crescut n mod considerabil. Astfel, cei rezultai din deversrile urbane au crescut cu 70%, cei provenii din eliminrile motoarelor cu combustie intern au crescut cu 300%, iar cei aprui n urm folosirii ngrmintelor chimice azotate au atins valoarea de 1400% n aceeai perioad de timp. Efectul poluant al ngrmintelor rezult din faptul c unele din ele conin numeroase impuriti toxice i de obicei sunt folosite n exces. Fiind solubile n ap, att impuritile ct i excesul de ngrminte neutilizate de plante este splat i ajunge n ape freatice, n apele rurilor, lacurilor, ape potabile i deci la om. Efectul poluant cel mai intens l determin utilizarea n exces a azotailor. Cu ct plantele se apropie de limitele fiziologice ale productivitii, eficiena utilizrii ngrmintelor scade, iar consecina excesului nu s-a lsat ateptat. Concentraia de azotai n mai multe ruri a crescut semnificativ, ca i n apa unor aezri omeneti. Caracterul duntor al excesului de nitrai i al prezenei lor n pnzele freatice, a rurilor, const n intensificarea procesului de eutrofizare (form a polurii ecosistemelor prin introducerea unor cantiti excesive de nutrieni ca urmare a activitii umane) iar prezena lor n ap potabil este periculoas pentru sntatea omului. Nitraii, n condiii reductoare - de pild n timpul trecerii prin intestin - se transform n nitrii care sunt toxici. Ei se combin cu hemoglobin, formnd methemoglobina care nu poate fixa oxigenul. Consecin: apar grave anemii. La copii, nitriii pot da tulburri nervoase. Cercetri recente au artat c ionii NO2 pot reaciona cu diferite compui amnai din intestin dnd nitrozamine care sunt cancerigene. Limita maxim admis de azotai n ap potabil a fost fixat de FAO i OMS la 10 p.p. m iar n alimente la 75p.P.m.
n urma studiilor, s-a ajuns la concluzia c cel mai potrivit reactiv pentru reacia de nitrozare este floroglucina, deoarece reacioneaz cu nitraii i formeaz foarte repede nitrii.
Fig. 2 Schema spectometrului cu sistem de injectie n flux simplu pentru determinarea simultan a nitrailor i nitriilor: C- soluie de lucru; R- soluie cu reactivi; P5
micro pomp cu piston dublu; V- supap de injecie m a trepte; RC- coloan reductoare; DC- bobin temporizatoare, MC bobin agitatoare, D detector, W - reziduu n aceast metod s-a propus determinarea nitrailor i nitriilor utiliznd ca reactiv floroglucina. S-a ajuns la concluzia c este o metod simpl, rapid i nu necesit un control riguros a temperaturii i reaciei n timpul procesului de determinare a acestor compui. Aceast metod se poate aplica pentru determinarea nitrailor i nitriilor din apa de la robinet, apa rurilor i determinarea nitrailor i a nitriilor din apele minerale.
II. 2 Metoda de determinare selectiv a nitrailor i nitriilor din ap folosind cromatografia lichid de nalt performan cu reacii fotochimce n coloan i cu detecia prin chemiluminescen
Determinarea nitrailor i nitriilor din ap se poate realiza folosind cromatografia de nalt performan cu reacii fotochimice n coloan i cu detecia prin chemiluminescen a luminolului. Reducerea nitriilor ai nitrailor la NO i generarea peroxinitritului ar putea fi complet doar prin iradierea cu UV, care ar simplifica considerabil metoda de identificare. Pentru aceast determinare s-au preparat soluii stoc standard de azotat i azotit de sodiu. Soluia stoc de luminol s-a preparat prin dizolvarea a 70,9 mg de luminol n 20 ml soluie tampon de carbonat. Soluiile stoc au fost inute la temperaturi de 4 C. Apa utilizat pentru toate soluiile a fost purificat cu sistemul Milli-Q Gradient A10 i Yamato Auto Still WA-200. Soluiile de lucru sunt: apa din ru, apa din lac, apa de ploaie i apa de la robinet. Determinrile HPLC au fost efectuate prin iradiere cu raze UV, urmate de detecia prin chemiluminiscen., dup cum se arat n fig. 3 de mai jos. Pentru a obine condiii adecvate pentru determinrile efectuate i pentru a optimiza parametrii pentru reacia fotochimic i reacia de chemiluminescen, s-au efectuat cteva experimente preliminarii folosind sistemul de injecie n flux. n fig. 4 sunt artate cromatogramele obinute pentru fiecare tip de ap luat pentru analiz. Cu excepia probei ce conine ap de la robinet, nu s-a nregistrat existena altor specii chimice n afar de nitrai i nitrii. Concentraiile nitrailor i nitriilor din probe sunt prezentate n tabelul 1. 6
Fig. 3 Reprezentarea schematic a sistemului HPLC-CL P- pomp, PR- reactor fotochimic, D- detector chemiluminescen, PMT- tub fotomultiplicator, DP- unitatea de stocare si prelucrare a rezultatelor
Fig. 4 Cromatogramele tipice a (A) unei soluii standard de nitrii i nitrai, (B) ap din lac, (C) ap de ru, (D) ap de ploaie si (E) apa de robinet. Picul (1) nitrii, picul (2) nitrai Din fig. 4 se observ c cea mai mare cantitate de nitrai se gsete n apa de la robinet, apoi n ap din lac i apa de ru. Spre deosebire de nitrai, nitriii se afl ntr-o 7
cantitate mult mai mic n toate probele de ap luate pentru analiz. n analiza apei de la robinet s-au nregistrat i alte specii chimice n afar celor studiate. Rezultatele acestei metode sunt comparabile cu rezultatele metodelor de referin i astfel aceast metod este validat.
II. 3 O nou metod spectrofluorimetric pentru analiza n urm de nitrai i nitrii din mediile apoase
elementelor
Pentru aceast metod spectrofluorimetrica s-au elaborat mai multe metode de analiz spectrofluorimetrice a nitriilor i nitrailor. Acestea se bazeaz pe reacia nitriilor cu diferii reactivi, cum ar fi: 2,6-diaminopiridina, resorcinol, benzidin, triptofan, acid disulfonic 5,6-diamino-1,3 naftalina (DANDS), 5-aminofluoresceina, etc. Aceste metode prezint i anumite dezavantaje: reproductibilitate sczut, toxicitatea reactivului, proces care ocup mult timp i interval ngust de detectare. Metoda prezentat presupune stingerea fluorescenei purpuratului de amoniu (murexid) n mediu acid. Determinrile au fost realizate cu spectrofluorofotometrul Shimadzu RF-5000. S-au folosit urmtoarele soluii: purpurat de amoniu din 0,0284 g murexid, 0,5 ml acid sulfuric concentrat i 100 ml apa deionizat, soluie de azotit de sodiu, soluie de azotat de potasiu. Apa utilizat a fost distilat de dou ori., iar msurtorile s-au realizat la temperatura camerei. Pentru aceast metod s-a propus mecanismul din fig. 5. Emisiile spectrale maxime ale murexidului n prezena i n absena nitriilor au fost nregistrate la 349 i 444,5 nm. n aceste sistem, acidul sulfuric ofer o gam larg de aciditate pentru meninerea fluorescenei la intensitate maxim. Diferenele maxime ntre intensitile fluorescenei au fost observate n prezena a 0,1-0,7 ml acid sulfuric 4,5 M n 10 ml soluie. Conform mecanismului propus n fig.5, la fiecare molecul de reactiv se consuma dou molecule de nitrit.
Fig. 5 Mecanism propus La concentrtii foarte mici, reacia ntre murexid i nitrit nu este instantanee, deci terminarea reaciei are loc prin introducerea balonului cu substana de lucru n baie ap timp de 10 min. n urma studiului s-a artat c intensitatea fluorescenei depinde liniar de concentraia nitriilor. Aceast metod poate fi aplicat pentru detrminarea nitriilor i nitrailor din apa provenit din panza freatic, apa de suprafa i apa de mare. Rezultatele sunt prezentate n tabelul 1. Tabelul 1. Analiza nitrailor i nitriilor n diferite probe de ap Proba Nitrii adaugai Nitrii gasii Total (nitrii i nitrai) (ng ml 1 ) 89,5 140,0 189,0 221,9 272,0 321,0 Nitrai (ng ml 1 ) 56,5 57,0 57,0 126,1 126.0 125,9 (ng ml 1 ) Ap din pnza 0,0 50,0 freatic 100,0 Ap de 0,0 50,0 suprafa 100,0 (ng ml 1 ) 33,0 83,0 132,0 95,8 146,0 195,2
Ap de mare
10
Fig. 6 Spectrul de absorbie a produsului color format n urma reaciei rezorcinolului cu apa de mare
11
Metoda descris a fost aplicat la determinarea azotailor din apa de mare prin spectometrie la 505 nm. Aceast metod a fost comparat cu cele convenionale i s-a demonstrat c are aplicabilitate practica, ca i metoda de detetminare a nitrailor din apa de mare pe coloan de cadmiu.
II. 5 Determinarea nitrailor din apa potabil, rezidual i a rurilor prin spectometria UV
Cea mai rapid i simpl metod de determinare a nitrailor este spectrofotometria direct n regiunea UV, dar domeniul este limitat de interferene. Aceast lucrare i propune lrgirea acestui domeniu prin utilizarea unui filtru activ la un pH nalt ce elimin interferenele pentru materia organic, substane care, n general, sunt responsabile pentru o absorbana n domeniul 200-300 nm. Se va msura absorbana la 275 nm ca indicator al prezenei sau absenei materiei organice. Acesta metod implic reducerea chimic a ionului nitrat, coagularea materiei organice cu sulfat de aluminiu i absorbia acesteia pe un filtru de carbon activ. Metoda are ca limit de detecie 0,006 mg l mg l
1 1
Metoda investigat urmrete: - Adiia granulelor sau a pudrei de carbon activ urmat de filtrare i ndeprtarea carbonului; - Utilizarea carbonului columm; - Construcia filtrelor folosind material impregnat cu carbon. Mai nti metod este dezvoltat utiliznd carbon activ ADC 33 potrivit pentru membrana filtrant i adiia carbonului pulbere (0,5 g) la 100 ml filtrat cu un pH ajustat (pH>12) cu soluie NaOH. Acest amestec este meninut 5 minute naintea nlturrii carbonului prin filtrare. PH-ul filtratului este redus la mai jos de 2 i absorbana se msoar la 210 nm fa de apa distilat.
12
Reactivi utilizai sunt: hidroxid de sodiu, soluie 3,5 % m/v, reactiv acid mixt, soluie standard de nitrai. Se trec 30 ml soluie pe un filtru i se arunc, apoi se filtreaz 50 ml soluie pe acelai filtru i acetia se pstreaz. Se pipeteaz 40 ml din filtrat ntr-un vas calibrat de sticl coninnd 5 ml reactiv acid mixt, se dilueaz prob la 50 ml cu ap distilat i se msoar absorbanta la 210 nm n celule de referin. Se msoar absorbanta fa de o prob zero i se exprim rezultatul n mg/l NO 3 . Graficul de calibrare este liniar pn la 0 concentraie de 2,0 mg/l NO 3 . Ecuaia dreptei este y = mx+c, coeficientul de corelaie dat de graficul de calibrare este de 0,9996. Eroarea standard estimat a fost de 0,016 mg/l NO 3 . Absorbana citit a corespuns unor concentraii ntre 0,4 si 1mg/l NO 3 . Rezultatele obinute n urma testrii metodei apei rurilor, a apelor de suprafa i a unor afluenti sunt date in tabelul 2. Tabel 2. Coninutul de nitrai n diferite probe de ap Proba ap de ru Lamaload Alwen Goyt Canclough Arnfield Ape tratate de suprafa Sutton Hall Lamaload Alwen
Coninut n mg/l NO 3 1,11 0,47 0,80 0,50 0,70 Coninut n mg/l NO 3 2,70 1,04 0,52
Absorbana la 210 nm 0,104 0,151 0,180 0,080 0,048 Absorbana la 210 nm 0,030 0,064 0,044
Interferenele ionilor nitrii, au fost eliminate prin folosirea acidului sulfamic. Prin ajustarea pH-ului la 1,8 au fost eliminate interferenele ionilor hidroxil i carbonat.
13
Metoda se bazeaz pe reacia nitriilor cu acidul 4-amino-1-naftalensulfonic cu formarea ionului de diazonin care se cupleaz apoi cu 1-naftol, n mediu bazic, formnd un colorant azo stabil, care are absorbana maxim la 530 nm. Legea Beer este respectat pe domeniul 3,3-98,6 NO 2 mg ntr-un volum final de 20 ml, cu o absorbtivitate molar de 30,5 x 10 l mol cm . Eroarea relativ a fost de +0,24 pn la -1,0% i deviaia standard relativ ntre 0,2 - 4,0%. Reactivii utilizai sunt: - Soluie standard de nitrii (3285 ml ). Se dizolv 1,4990 g nitrit de sodiu n ap g distilat, se adug 1ml cloroform, o pelet de hidroxid de sodiu i se dilueaz totul la 1000 ml. - Se prepar soluii etalon de lucru de concentraii mai mici prin diluia soluiei standard. - Soluie acid 4-amino-1-naftalensulfonic 0,05%. Se dizolv 0,05 g sarea de sodiu a acidului 4-amino-1-naftalensulfonic n ap distilat, se adaug 8 ml soluie acid clorhidric 1M i se dilueaz totul la 100 ml ap distilat. - Soluie 1-naftol 0,5%. Se dizolv 0,5 g n 100 ml dioxan. - Soluie de amoniac, 2M ntr-o serie de vase calibrate de 20 ml coninnd 3,3 - 98,6 mg nitrit ntr-un ml soluie se adaug 8 ml soluie 0,05% acid 4-amino-1-naftalensulfonic, 0,25 ml soluie 1naftol i 1,5 ml soluie 2M amoniac i se dilueaz pn la semn cu ap distilat. Culoarea se formeaz imediat i este stabil 30 de ore. Se msoar absorbana fa de proba martor la 530 nm n cuve de 1 cm. Curba de etalonare se traseaz pentru un domeniu de concentraie unde este respectat i legea Beer, 3,3 - 98,6 mg nitrit ntr-un volum final de 20 ml corespunztor la 0,16 - 4,9 ppm. Spectrul de absorbie - cnd nitriii sunt tratai ca n procedeul descris anterior, se formeaz un anion azo purpuriu al crei spectru de absorbie este prezentat n fig. 7 . Se observ c absorbana maxim se nregistreaz pentru o lungime de und de 530 nm.
1 3 1 1
14
Fig. 7 Spectrul de absorbie al: (A) 32,85 mg nitrit tratat conform procedeului descris i cu absorbana msurat fa de o prob martor; i (B), proba martor msurat fa de apa distilat. Concentraia compusului diazo - efectul concentraiei acidului 4-amino-1naftalensulfonic asupra intensitii culorii a fost studiat prin adugarea a 1 ml soluie acid 0,005 - 0,1% ntr-o soluie de acid clorhidric 0,05M ntr-o serie de soluii de nitrit. Concentraia optim a acidului 4-amino-1-naftalensulfonic a fost stabilit la 0,04 - 0,07%. Concentraia acidului clorhidric - similar experimentelor anterioare a fost variat concentraia acidului clorhidric pe domeniul 0,02 - 0,12M. S-a constatat c o concentraie optim a acidului clorhidric de 0,06 - 0,09M d o intensitate maxim a culorii. Pentru acest procedeu a fost adoptat concentraia de 0,08M pentru acidul clorhidric. Au fost testai i ali acizi minerali dar rezultatele au fost nesatisfctoare. A fost testat i volumul optim al celor doi componeni (amino plus acid) pe domeniul 1 - 11 ml i s-a stabilit pentru acest procedeu un volum optim de 8 ml. Concentraia amoniacului - efectul concentraiei amoniacului asupra absorbanei a fost studiat i s-a recomandat pentru acest procedeu a se folosi 1 - 2 ml amoniac de concentraie 2M. Alegerea agentului de cuplare - au fost alei mai muli ageni de cuplare, acid 5naftol-1,3-disulfonic, acid 4-naftol-1,3-disulfonic i 1-naftol. Dintre acetia doar 1-naftolul a dat rezultate satisfctoare. ntr-o serie de soluii cu volume cuprinse ntre 0,1 - 1,5 ml au
15
fost adugate volume cuprinse ntre 0,2 - 0,4 ml 1-naftol 0,5%. Se constat c maximul de absorban se obine la adugarea a 0,25 ml 1-naftol de concentraie 0,5%. A fost studiat efectul concentraiei amoniacului asupra absorbanei. Investigaiile au artat c un volum de 1 - 2,0 ml amoniac de concentraie 2M d o absorban maxim. Acurateea, precizia i sensibilitatea metodei Dup construirea graficului de calibrare au fost studiate acurateea i precizia metodei propuse. Rezultatele sunt date n tabelul 3. Tabelul 3. Acurateea i precizia metodei (n=5) Nitrit (mg) 3,28 32,85 65,70 98,60 Eroare relativa (%) 0,00 +0,24 0,00 -1,00 Deviatia relativa standard (%) 4,0 0,01 0,01 0,20
Bibliografie
16
1. Rodjana Burakham, Mitsuko Oshima, Kate Grudpan, Shoji Motomizu, Simple flow-injection system for the simultaneous determination of nitrite and nitrate in water samples, 2004; 2. Hitoshi Kodamatoni, Shigeo Yamazaki, Keitsu Saito, Takashi Tomiyasu, Yu Komatsu, Selective determination method for measurement of nitrate and nitrite in water samples using high-performance liquid chromatography with post-column photochemical reaction and chemiluminescence detection, 2009; 3. Droic Andreja, Vrtovsek Janez, Nitrate determination in drinking water, waste water and rivers waters using UV spectometric method, 2009 4. Jia-Zhong Zhang, Charles J. Fischer, A simplified resorcinol method for direct spectrophotometric determination of nitrate in seawater, 2006; 5. Nawratii B., Marcantonatos M., Monnier D., A spectrophotometric method for the determination of traces of nitrate : aplication to water samples, 2001; 6. Suchandra Biswas, Bhaskar Chowdhury, Bidhan Chandra Ray, A novel spectrofluorimetric method for the ultra trace analysis of nitrate and nitrite in aqueous medium, 2004;
17