Identificarea i dozarea taninurilor din Tanacetum vulgare i Rhododendron kotschyi

Realizat de:

Aleman Roxana Andrescu Daniela Buricea Gabriela Catrina Andreea

Prof. coordonator: ef lucrri dr. Cecilia Georgescu

Obiective:

Identificarea i dozarea taninurilor din plantele Tanacetum vulgare i Rhododendron kotschyi cu scopul de a semnala diferena cantitativ i calitativa a taninurilor prezente. Numrul relativ redus de date bibliografice referitoare la prezena taninurilor la speciile Rhododendron kotschyi i Tanacetum vulgare sub aspect calitativ n special, cele cantitative lipsind cu desvrire, ne-au determinat s realizm un studiu complet al prezenei acestor substane n frunzele i florile speciei Rh. kotschyi (studiu comparativ) i n partea aerian a speciei Tanacetum vulgare.

Tanacetum vulgare

Vetrice (Tanacetum vulgare), fam. Asteraceae.

Plant erbacee, peren, comun, ntalnit n zon de es i de deal, pe ogoare, n fnee, pe lang drumuri.
Se mai numete aurat, iarba-raiului sau spiculee. Tulpin cilindric, drept, cu striaii fine, foliat, nalt de 40-150 cm. Frunze alterne cu 10-12 perechi foliole ovoide pn la lanceolate. Flori galbene-portocalii, tubuloase, cu miros specific grupate n calatidii. Tanacetum vulgare a fost colectat n timpul nfloririi (VII IX) n anul 2011, identificarea taninurilor fcandu-se pe prile aeriene ale plantei (herba).

Rhododendron kotschyi

Smrdar (Rhododendron kotschyi), fam. Ericaceae.

ntlnit n Munii Carpaii Orientali i Meridionali, ncepnd din Munii Rodnei pn n masivul Godeanu;
Se mai numete i bujor de munte. Tulpin puin ramificat, formnd tufriuri scunde (nalte de maximul 50 cm), cu lujeri bruni. Frunze alterne, mici (1-2cm), eliptice, cu marginile ntregi, lucitoare, persistente, ngrmdite spre vrful lujerului. Flori mari(1,5 cm), roii-purpurii sau roz-aprins. Rhododendron kotschyi a fost colectat n timpul nfloririi (VI-VII) n anul 2011, identificarea taninurilor fcndu-se pe flori i

Caracteristici generale ale taninurilor

Pornind de la faptul tiut c din punct de vedere chimic, taninurile se mpart n dou mari clase i anume: taninuri catechice (catechinice) sau taninuri condensate nehidrolizabile; taninuri galice sau hidrolizabile. Am realizat studiul taninurilor parcurgnd urmtoarele etape de lucru: Identificarea taninurilor prin reacii de culoare i precipitare. Determinarea procentului total de taninuri dup metoda oficial din FR X.

Utilizri ale taninurilor

Efectul de interaciune al taninurilor cu proteinele se utilizeaz n industria alimentar n diferite scopuri: pentru eliminarea proteinelor din alimente lichide (limpezirea sucurilor, vinului i imprimarea culorii caracteristice a berii), ncapsularea substanelor biologic active.

Reduc potenialul redox al vinurilor, inactiveaz radicalii liberi, a oxidanilor.

Cercetrile recente s-au ndreptat ctre studierea posibilelor efecte anticancerigene. Au o apreciabil activitate bacteriostatic. Coagulani n tratarea apei reziduale.
(The Use of Tannins from Turkish Acorns (Valonia) in Water.
Treatment as a Coagulant and Coagulant Aid , Mahmut

Reacii generale pentru taninuri:

Reacia cu soluie de gelatin

1% La 5 ml soluie extractiv se adaug cteva picturi de soluie de gelatin 1%; se formeaz un precipitat solubil n exces de reactiv.

Reacia cu acetat de Pb 10%

La 5 ml extract se adaug 0,5 ml soluie acetat de Pb 10%; se constat formarea de precipitate galbene.

Reacia cu FeCl3 1% n etanol

La 5 ml soluie extractiv se adaug 0,5 ml soluie FeCl3 1% n etanol; se formeaz o coloraie verde-albastr nchis.

Reacii caracteristice pentru taninurile catechice:

Reacia cu soluie de vanilin clorhidric (sau sulfuric) 1% La 1 ml soluie extractiv se adaug 0,5 ml soluie vanilin clorhidric 1%; se formeaz o soluie colorat n rou datorit condensrii derivailor catechinici cu vanilina, compui colorai n rou n mediu acid.

Reacii de difereniere a taninurilor

Reacia cu FeCl3 sau alaun feric 1%

Taninurile catechinice, n funcie de concentraie, conduc la formarea de coloraii sau precipitate de culoare verde nchis. La rndul lor, taninurile galice formeaz coloraii sau precipitate albastre.

Reacii de identificare a taninurilor

Tipul reaciei (natura reactivului) Soluie extractiv 1 gram/30 ml Frunze Rhododendron pp. alb-glbui, parial solubil n exces de reactiv +++ pp. galben-brun +++ pp. verde inchis ++++++ pp. rou +++ pp. verde nchis +++ Flori Rhododendron pp. alb-glbui, parial solubil n exces de reactiv ++ pp. galben-verzui ++ pp. verde nchis +++++ pp. rou +++ pp. verde nchis-negru ++ Herba Tanacetum vulgare pp. alb-glbui, parial solubil n exces de reactiv +++ pp. galben +++ pp. verde nchis-negru +++ pp. rou-brun +++ pp. verde nchis +++

Soluie gelatin 1% Soluie acetat de Pb 10% Soluie FeCl 1% Soluie vanilin HCl

Soluie alaun feriamoniacal 1%

Precipitatele rezultate n urma reaciilor de identificare pentru Tanacetum vulgare

Determinarea cantitativ a taninurilor

Aceast metod se bazeaz pe dozarea polifenolilor totali din produsul vegetal, respectiv a polifenolilor rmai n soluie dup precipitarea taninurilor cu pulbere de piele standardizat cnd, diferena ntre cele dou dozri reprezint chiar taninurile prezente n produsul vegetal analizat.

Metoda are la baz reacia de culoare ntre compuii polifenolici i acidul fosfowolframic, produsul colorat fiind spectrofotometrat la lungimea de und de 715 nm. n paralel se efectueaz un standard ce folosete pirogalolul ca substan de referin i care se trateaz n condiii identice cu proba cu acelai reactiv (acidul fosfowolframic), decelarea compusului colorat n albastru fiind realizat prin spectrofotometrare la aceeai lungime de und.

Calculul coninutului de tanin prezent n produsul vegetal are la baz urmtoarea formul:

A1, A2 absorbana soluiilor colorate obinute n urma reaciei cu acidul fosfowolframic (A1 nainte de reacia cu pulbere de piele, A2 dup precipitarea cu pulbere de piele); A3 absorbana soluiei de pirogalol; mp cantitatea de pulbere luat n lucru

Procentul total de taninuri din produsele vegetale studiate:

Produs vegetal Taninuri % (g taninuri /100 g produs vegetal) Frunze Rhododendron Flori Rhododendron Herba Tanacetum vulgare 8,49 6,84 7,81

Concluzii

Analiza calitativ a taninurilor pe baza reaciilor de culoare i precipitare a permis punerea n eviden n produsele vegetale analizate a ambelor tipuri de taninuri: catechice si galice la Rhododendron kotschyi i doar a taninurilor catechice la Tanacetum vulgare.

Coninutul cel mai mare n taninuri s-a determinat la frunzele de Rhododendron kotschyi . Acest rezultat fiind n concordan cu rezultatul reaciilor de identificare, prin reacii de culoare i precipitare.
Speciile studiate au o compoziie chimic mult mai bogat i variat n principii active cu aplicaii n diferite domenii. Ne propunem ca n cercetrile ulterioare s separm i identificm prin tehnici cromatografice ca CSS i HPLC taninurile catechice si galice pe care le-am dozat n aceast lucrare.

De asemenea ne propunem ca pe viitor s valorificm potenialul nelimitat al plantelor din flora spontan, n special n industria alimentar eliminnd pe cat posibil utilizarea aditivilor alimentari de sintez.

V mulumim!