Istoria natural a cancerelor:

cancerogeneza
Prevenia cancerelor
Lucian Miron
Catedra Oncologie., UMF GR.T. Popa Iasi

Cuprins

Etiopatogeneza cancerelor: cancerogeneza prin ageni fizici,

biologici i chimici.

Fazele carcinogenezei: iniiere, promoie i progresie tumoral

Genetica cancerului: oncogene, gene supresoare de tumori, genele

de reparare a ADN

Prevenia primar in cancer

Carcinogeneza

Carcinogeneza este definit ca procesul multistadial prin care o celul

normal dobndete proprieti ce permit dezvoltarea fenotipului malign,
ca rezultat al interaciunilor multiple ntre factori exogeni i endogeni
(genetici, hormonali, imunologici, metabolici).

Carcinogen poate fi definit ca un agent a crui administrare la animalele de

experien determin o inciden semnificativ crescut statistic a
neoplaziilor, de unul sau mai multe tipuri histologice, fa de animalele
neexpuse

Carcinogeneza uman poate fi mprt n trei mari categorii:

- carcinogeni fizici;
- carcinogeni biologici;
- carcinogeni chimici.

Fenotipul malign
Autonomia fa de semnalele de cretere

Independena fa de
semnalele inhibitorii

Reducerea sensibilitii
la apoptoz

Cancer

Dezvoltarea i
meninerea unei
vascularizaii tumorale
(angiogenez)

Invazia i
metastazarea

Potenial nelimitat de cretere

Adapted from Hanahan, et al. Cell 2000

Hanahan & Weinberg: HALLMARKS of cancer: the NEXT generation. Cell, 2011
Cele 6 capaciti definitorii ale celulelor maligne
au rezistat la proba timpului i
permit nelegerea logic a complexitii cancerelor
Capaciti noi

Reprogramarea
metabolismului energetic

Eludarea distrugerii
imune

Instabilitate genomic
i mutaii

Inflamaia
ce promoveaz tumora

Fenomene favorizante
5

Leciile epidemiologiei

2 aspecte sunt relevate de epidemiologie:

Cancerele nu sunt distribuite ntmpltor; factori msurabili

influeneaz distribuia cancerelor n populaii

Cauzalitatea cancerelor este multifactorial- factorii exogeni i

endogeni contribuie la dezvoltarea cancerelor

Factori carcinogeni
Factori de risc contributori la inciden a cancerelor umane:
Alimentaie (35%)
Fumat (30%)
Factori legai de comportamentul sexual ( 7%)
Factori infecioi (15-20%)
Factori ocupaionali ( 4%)
Factori geografici (3%)
Poluarea atmosferic (2%)
Aditivi alimentari (<1%)
Medicamente (1%)
Produi industriali (1%)
Necunoscui (?)

Principiile carcinogenezei

Carcinogeneza este un proces multistadial, n fiecare etap cu numeroase

evenimente genetice

PRINCIPII:
- Exist o variabilitate individual ntre indivizi privind rspunsul la
expunerea de carcinogeni
- Expunerea la carcinogeni este difuz, afectnd suprafee (epitelii) mari
care vor fi predispuse la carcinogenez n sedii multiple, avnd ca rezultat
posibilitatea apariiei unor cancere multiple (teoria carcinogenezei n
cmp descris iniial n 1950, pentru cancerele sferei ORL)

Carcinogeneza -principii

Carcinogeneza uman poate fi mprt n trei mari categorii :

- carcinogeni fizici;
- carcinogeni biologici;
- carcinogeni chimici.
PRINCIPII:
- Exist o variabilitate individual ntre indivizi privind rspunsul la
expunerea de carcinogeni
- Expunerea la carcinogeni este difuz, afectnd suprafee (epitelii) mari
care vor fi predispuse la carcinogenez n sedii multiple, avnd ca rezultat
posibilitatea apariiei unor cancere multiple (teoria carcinogenezei n
cmp descris iniial n 1950, pentru cancerele sferei ORL)

Carcinogeneza

Carcinogenii fizici (3-5%): - radiaii ionizante

- radiaiile solare (UV)
- fibre minerale: azbest i erionit

Carcinogeneza viral (15%-20%)

Carcinogeneza chimica (65%)

I. Factorii fizici (3-5%)

Radiaii ionizante

Radiaile ionoizante- bomba atomic

Un The life Spann Study 80 000 supravieuitorii ai bomei atomice a
relevat 3 importante concluzii:
1.
2.
3.

Leucemiile sunt cele mai frecvente cancere induse de radiaii

Vrsta este un factor de risc important, copii sunt cei mai afectai
Riscul de cancer crete liniar cu doza de iradiere primit

Ex. Persoan de 30 de ani iradiat prezint risc de cancer de 47%

pn la vrsta de 70 de ani.

Radiaii ionizante

Radiatiile ionizante sunt definite ca acele forme de propagare a energiei in mediu, radiatii
cu energie suficient pentru a ioniza moleculele prin deplasarea electronilor din atomi
A. Electromagnetice ( wave):
radiaiile X sau fotonii
radiaii gamma-
B. Particulate formeaz radiaii ionizante.
electroni - radiaii beta sunt facicole de electroni
protoni,
-particles
neutrons i ioni de carbon prinn interaciune cu nucleii atomilor crora le cedeaz energia,
aceste radiaii produc protoni de recul, particule alfa i fragmente nucleare grele ce vor ioniza materia

Radiaii ionzante- mecanism de aciune

A. Aciune direct-generarea de electroni cu rupturi monocatenare (SSB) sau dublucatenare (DSB), deleii i translocai
DNA [DNA+ + e_ ] DNA (efect direct)
B. Aciune indirect prin interaciunea cu molecula de ap i formarea de radicali
liberi oxidativi:
H2O H2 +O2
H2O e -OH e H2O2O2- e02 ( ROS)
radical hidroxil

Aceti

peroxid hidrogen

radical superoxid

radicali (ROS) determin leziuni ale ADN: deleia primar, translocaii,

inversarea secenelor ADN (efectul de radiobioliz a apei)
Ho [ H2O+ + e-] OH + ADNADN + H2O (efect indirect)

Radioliza apei este schematizata prin urmatoarea

ecuaie:
Ho H2, H2O2, eaq- , H ,OH, HO2 , OH, H3O
Acest fenomen are loc in 108 secunde dupa absorbtia energiei radiante.
Cantitatea de radicali liberi formati depinde de natura radiatiei si de tipul
esutului parcurs

Radicalii liberi formai prin radioliza apei sunt foarte reactivi capabili
s produca suplimentar deteriorarea ADN-ului, pe langa deteriorarea
produsa in mod direct prin absorbia direct de energie a ADN. Acest
mecanism este menionat ca " aciunea indirect a radiaiilor, pentru a o
distinge de " aciunea directa a radiaiei. " . In cazul iradierii cu radiatie
gamma ponderea celor doua efecte este egala, in timp ce in urma iradierii
cu neutroni va predomina efectul direct.
Calea directa si calea indirecta de actiune a radiatiilor ionizante sunt
schematizate in ecuatiile de mai jos :
ADN [ADN+ + e_ ] ADN (efect direct)
Ho [ H2O+ + e-] OH + ADNADN + H2O (efect indirect)

Mecanisme de aciune asupra ADN

Leziuni ADN post radioterapie

Single strand
breaks

Double strand
breaks

Pr Y.-J.

Radiatii ionizante- rupturi ADN

Alterarea secvenei ADN = mutaie,

Mutaiile pot fi: subtile o baz nlocuiete pe alta ( tranziii- o purin cu
purin, sau transversii o purin cu pirimidin), sau grosire: translocaii,
deleii, rupturi cromozomale, inserii tranziii i transversii
5-10% din mutaii conduc la cancer
Carcinogenii sunt mutageni !
Leziunile directe ale ADN induse de radiaiile ionizante sunt: deleia primar,
translocaia, inversiunea secvenelor de ADN, rupturi cromozomiale cu defecte de
reparare, sau amplificarea secvenelor de ADN (mecanisme de activare a
oncogenelor).
Aceste mutaii pot afecta gene de control al sintezei ADN sau reparrii ADN,
inducnd instabilitate genic, iar aceasta, la rndul su la creterea probabilitii
erorilor n replicarea ADN n cursul ciclurilor subsecvente. Aceasta are ca finalitate
modificri n expresia oncogenelor sau activarea genelor supresoare tumoral.
Evenimentele finale sunt activarea protoncogenelor i/sau inactivarea GST

Efectul carcinogenezei radice este dependent

de vrst

Inducerea cancerului prin radiaii este dependent de vrst .

Exemple: iradierea gl. mamare n timpul adolescenti i 20 de ani este mai
frecvent asociata cu cancer de san decat dup varsta de 40 de ani.

Distribuia dup vrst de radiaii cancere radioinduse

similar la modelul incidenta natural aprute.
Exist o relaie intre doza i inducerea cancerului. Acest lucru se datoreaz probabil
cantitatea de deteriorarea ADN-ului sunt cauzate; la doze mai mici, celulele pot
supravietui n timp ce la doze mai mari, mutatii letale domina

Radiaiile solare (UV)

Lumina UV pot fi clasificate n trei tipuri, n funcie de lungimea de

und:
- UVC cu lungimi de und cuprinse 240 - 290 nm,
- UVB variind de 290 - 320 nm, - cea mai cancerigen
- UVA cuprinse ntre 320 i 400 nm.
UVC nu este n lumina soarelui, care ajunge pe pmnt, pentru c este
rapid absorbit de atmosfera terestr.
UVB pare a fi n primul rnd responsabil pentru inducerea cancerului
de piele dupa expunerea la soare.
Determin mutaii directe ale ADN-ului mediat de UVB.

n pilea uman penetrarea este superficial, mai puin de

1 mm n profunzime.

Lumina UV- n special UVB!

A) Efectul direct al UVB and UVC este mediat determin apariia

mutailor de tip dimerizare pirimidinelor (ciclobutan- pirimidin i
pirimidin-pirimidon); formarea dimerului de pirimidin creaz o ndoire a
helixului ADN i ADN-polimeraza nu mai poate citi configuraia ADN i
polimeraza include un reziduu A dimerii de ciclobutan-pirimidin
reprezint 80% din mutaiile UVB.

Cel mai important dimerul ciclobutan-pirimidin (fotoprodus 6-4)

B) Efecte indirect prin specii oxidative i imunosupresie aciune asupra
celulelor Langerhans

Melanomul malign

Rolul azbestului i erionit

Azbestul este un grup complex de fibre minerale naturale de siliciu, fiecare cu
structur unic, compoziie i reactivitate chimic diferite. Cele dou subgrupe
distincte principale de fibre sunt chrisotil (serpentinate, lungi) i amfiboli (scurte,
drepte).

Efect direct stres oxidativ- majoritatea acestor efecte sunt datorate proceselor
oxido-reductive (avnd ca suport ionii de fier din structura chimic a fibrelor de
azbest), care elibereaz radicali liberi de oxigen (ROS=) reactivi= induce leziuni
ale ADN (inclusiv mutaii tip DSB i deleii ale crs. 1p, 3p, 6q, 9q, 13q, 15 i 22q),
perturb mitoza i segregarea cromozomilor inactivarea unor GST cu rol crucial n
controlul ciclului celular i apoptozei, fie activarea de protooncogene ( fos, jun,
met, fra-1); acestea stimuleaz proliferarea celulelor mezoteliale prin mecanisme
auto-/paracrine ce implic supraproducia factorilor de cretere tisulari: factor de
necroz tumoral alfa (TNF), factor de cretere epidermal (EGF), plachetar
(PDGF), hepatocitic (HGF), keratinocitic (KGF) etc. GENERAREA DE ROS

Efectul indirect: ca rezultat a fagocitozei fibrelor de azbest i eliberrii de

citokine, cu inducerea unui rspuns inflamator.
Inflamaia poate la rndul su facilita creterea, selecia clonal i expansiunea
celulelor cu mutaii, precum i angiogeneza

Tipuri de azbest

Serpentine

Amphibole

(93% of commercial use)

(7% of commercial use)

Chrysotile

Actinolite, Amosite, Anthophyllite,

Crocidolite, Richterite, Tremolite

Factori de risc
Asbestos is a generic term for a group of six mineral
silicates
Asbestos fibers are:

Very strong

Highly flexible

Resistant to breakdown by acid, alkali,

water, heat, and flame

Non-biodegradable

Environmentally persistent

Factori de risc
Azbestul
ROS
Secreie de TNF> activare NFB (nuclear factor kappalight-chain-enhancer of activated B cells ) > supravieuire
dup mutagenez
Sintez de AP1 (transcription factor activator protein 1)
stimularea proliferrii i favorizarea fenotipului malign
Cocarcinogen: SV40 = inductor al AP1

II. Carcinogeneza biologic (15%)

Virusuri cancerogene: 15-20% din cancere

Virusuri ADN:
Papillomavirusuri [HPV]: col uterin, orofaringe, cancere anale
Epstein-Barr virus [EBV]: limfom malign Burkitt,
hepatitis B virus [HBV]- hepatocarcinomul
Herpes virus - Sarcomul [KSHV]
Virusuri ARN:
Retroviridae:
human T-lymphotropic virus (HTLV)
human immunodeficiency virus (HIV)
Flaviviridae
hepatitis C virus (HCV)
Helicobacter pylori

Human Papillomavirus (HPV)

70 de tipuri distincte genetic de HPV oncogene sunt: 16,18,

33,34, 44
Unele tipuri (de exemplu, 1, 2, 4, i 7) provoca papiloamelor
scuamoase benigne (negi) la om
Geneza a mai multor tipuri de cancer:
carcinom cu celule scuamoase de col uterin
regiunea ano-genitala
cancer oropharyngian i cancer laringian
E6 i E7 spori degradarea p53, provocnd un bloc in apoptoza i
scderea activitii de inhibitor ciclului celular p21. E7 asociaz
cu P21 si impiedica inhibarea acesteia a ciclin

Structura genomului HPV

Carcinogeneza HPV

Efectul de proteine HPV E6 si E7 pe ciclului celular. E6 i E7 spori degradarea p53,

provocnd un bloc n apoptoza i a sczut activitatea inhibitorului ciclului celular p21. E7
asociaz cu p21 si previne sa de inhibare a complexului Cyclin/CDK4; E7 se poate lega la
RB, restricie eliminarea ciclului celular.Efectul net al HPV E6 si E7 proteine este de a bloca
apoptoza i nlturarea restrictionri la proliferarea celulelor

(see Fig. 7-29). (Modified from Mnger K, Howley PM: Human

papillomavirus immortalization and transformation functions. Virus
Research 89: 213-228, 2002.)

Oncogene HPVmutagene prin inserie

Genomul HPV

Cancerul de col uterin

Epstein-Barr Virus

Ilustrarea schemei
prin care EBV induce
limfomul Burkitt.

[TITLE]

Presented By Philip James Johnson, MD at 2013 ASCO Annual Meeting

Virusul hepatiei B

Ciclul HBV

Virusul hepatitei B- mutageneza inserional

HBV este un hepadnvirus - Virionul const[ne ADN dublu spiral
3,5kb cu anvelopa lipidic. Genomul conine 4 gene:
- Gena C core protein= HBc
- gens P- codific ADN polimeraza
- gena S- codific antigenul de suprafa (AgHBs)
- gena X codific proteina X cu funcie necaracterizat- inserie
mutaional integrarea n genom i dereglarea genelor endogene
instabilitate genomic tinte posibile: gena telomerase revers
transcriptase (TERT) i MLL4 gene.
HBx este o secven de 115 aa un acid pleiotropic transcritor- in
citoplasma activeazn cascad expresia a factorilor transcriptori
NF-B, NF AP i AP1 dereglnd mai multe procese celulare precum
proliferarea celular i apoptoza i alte ci de semnal.
HBV lucreaz in cooperare cu aflatoxina cre este un carcinogen chimic

[TITLE]

Presented By Philip James Johnson, MD at 2013 ASCO Annual Meeting

Virusul hepatitei C

HCV este un retrovirus cu un singur lan de ARN care NU se

integreaz n genomul gazdei
Carcinogeneza HCV este determinat de procesul inflamator cronic
indus de distrugerea celular i fibroza hepatic
Activarea cile de semnal precum p38, MAPK i NF-B care
elibeaz alte citokinne i alterarea apoptozei. Alte activri de ci
biologice prin inflamaie includ proteinele non structurale de tipNS3
i NSSA ce acioneaz prin stres oxidativ.
Un rol direct ?- in cooperare cu HCB- core protein E1 i E2+
sttatoza in absena procesului inflamator

[TITLE]

Presented By Philip James Johnson, MD at 2013 ASCO Annual Meeting

[TITLE]

Presented By Philip James Johnson, MD at 2013 ASCO Annual Meeting

Hepatocarcinogeneza- un proces multistadial

HCC
Hepatitis C
Hepatitis B
Ethanol
NASH
Cholestatic

Dysplastic Nodules
Liver Cirrhosis

Normal liver

Carcinogeneza hepatica

Procesul inflamator cronic- inflamatia cronic ca rspuns la obezitatea care

iniiaz sindromul metabolic si stimuleaz progresia de la statoz la
sindromul non achoolic fatty disease (NAFLD)
TNF activeaz proto-oncogene precum NF-B, JNK, mTOR i kinase de
semnal extracelular.
IL-6 extercit efecte proliferative i antiapoptotice prin activarea STAT3.

[TITLE]

Hepatocarcinogeneza

Mecanismul
oncogenezei
retrovirusurilor

Ciclul de replicare retrovirale ncepe atunci cnd glicoproteine retrovirale plic se leaga de receptorii
specifici celulare si medieze fuziune a membranelor celulare virale i, ca rezultat eliberarea de
capsida virale n celul.Retrovirale ARN genomului este apoi neacoperite, inversa transcrise n o
copie ADN dublu catenar, i integrate n genomul celulei gazd, n cazul n care acesta i are
reedina ca un provirus. Transcrierea rezultatelor provirusuri n producerea de ARN viral, care pot fi
traduse in proteine virale. Aceste proteine virale mpacheta, apoi ARN-ului viral genomice n virioni
infectiosi, care sunt eliberate din celula. (Caracteristici generale comune de retrovirusuri sunt
ilustrate, exist variaii ale proceselor de teze de retrovirusuri ntre diferite.)

Carcinogeneza indus de ARN virusuri

Virusul HIV

HIV-1 and HIV-2 are members of the Lentivirus genus of

retroviruses

Mecanismele carcinogenezei virale

Virusul poate provoca modificri directe oncogenetic de numeroase

mecanisme, inclusiv urmtoarele:
- activarea de protooncogeneoncogene n celula normal;
-inhibarea gena supresoare funcie care afecteaz modificrile
epigenetice, de exemplu, de metilare cauznd inhibarea
transcriptiei;
- consolidarea deteriorarrii ADN-ului - care acioneaz sinergic cu
cu mutaiile iie, induse de radiaii
- apoptoza inhibarea celulelor deteriorate;
interfereze cu mecanismele de repararea ADN-ului;
rezistent la gazd ale organismului mecanismelor imune efectoare

Helicobacter pylori

Carcinoame gastrice i limfoame gastrice

Tratamentul infeciei cu H. pylori cu rezultate antibiotice in regresie a
limfomului, n cele mai multe cazuri
Tulpinile de boala cauzatoare de conin o "insul de patogenitate" care
conine cagA (gena citotoxina asociat A), gena i un sistem secretorie, care
injecteaza proteine cagA n celulele gazd
O alt gen asociat cu virulenta este Vaca, care codifica o toxina care
cauzeaza vacuolizare celular i apoptoza.
Infecia este asociat cu adenocarcinoame gastrice de tip intestinal, printr-o
secven care implic gastrite cronice, atrofie multifocala cu secre ia de
acid gastric mai mic, metaplazie intestinal, displazie, si carcinom

III. Carcinogeneza chimic (65%)

Carcinogenii chimic - clasificare

Varitate de substane carcinogene clasificate n 10 grupe:

Hidrocarburile policiclice aromatice (PAH)

Aminele aromatice
Nitrozaminele i nitrozamidele
Azo coloranii
Compuii hidrazo i azoxi
Carbamaii
Compuii halogenai
Produii naturali
Carcinogeni inorganici
Compui diveri ( agenii alkilani, aldehide, fenolii)

Acesti compusi au capacitatea de a fi sau deveni electronofilici (avizi de eletroni) care interacioneaz
cu gruprile nuclofilice ( bogate n electroni) precum ADN i proteine formnd fie aduci covaleni
fie leziuni oxidative.
Aceste tipuri de leziuni ADN, dac nu sunt reparate nainte de urmtorul ciclu de replicare a ADN
determin erori de replicare ADN i fixarea leziunii ca substituie nuclotidic. Dac compuii reactivi
electronofilici lezeaz proteine celulare cheie rezult citotoxicitatea i moartea celular necrotic
sau determin o reacie inflamatorie a micromediului care suine proliferearea i supravieuirea
celulelor iniiate.

Substanele chimice: aminele heterociclice

Diol epoxide

Metabolismul carcinogenilor
Activare i detoxificare prin 2 ci:
ETAPA I: Faza I de OXIDARE (activare metabolic)- prin enzime de faz I
care catalizeaz hiodroxilarea/oxidarea atomilor de carbon, nitrogen i atomii de
sulfur (cum ar fi mono-oxigenases, oxidazelor, reductases, dehidrogenases, i
esterazele) actioneaz introducnd sau mascarea grupe func ionale pe
substratul mam. Cel mai importanta component al fazei I sistemul enzimatic
este citocromul P450 mono-oxigenase CYP) CYP A1 o superfamilie constnd
din formarea de hemoproteine care catalizeaz oxidarea de atomi de carbon,
azot i sulf. Oxidarea prin P 450 enzimele pot produce fie compusi electrophili
instabi (epoxizi) sau compui stabili hidroxilai care pot servi ca substraturi
pentru enzimele de conjugare apoi transferaz. CYP1A2 demonmstreaz
expresie variabil.
FAZA II: faza a II- de CONJUGARE (detoxifierea a compusilor oxidani, polari
din faza I). Intervin Enzime precum: UDP-glucuronozil, sulfontransferaes,
metiltransferaza, glutatione S-transferazele i acetiltransferazele care
catalizeaz conjugarea metaboliilor sau conjugaii instabili astfel nct
produsele lor pot fi excretate . Ex: aflatoxina B1

Fazele carcinogenezei

Faza I-a de activare a unui carcinogen

n faza I, o varietate de enzime acioneaz pentru a introduce grupe

reactive i polare n substraturi lor. Una din modificrile cele mai
comune este hidroxilarea catalizat de citocromul P-450-dependent
care oxidez inte multiple.

Aceste enzime complexe pot aciona pentru a ncorpora un atom de

oxigen n hidrocarburi neactivate, care pot duce fie la introducerea de
grupri hidroxil sau mecanismul de reacie a P-450 oxidaze obinute
N-, O-i S-dezalchilarea substraturi. prin reducerea oxigenului
citocrom-legat i generarea unei specii oxyferryl foarte reactive,
conform schemei urmtoare:

Faza II-a de metabolizare a aunui

carcinogen

Faza II - conjugare

n reaciile ulterioare de faz II , aceti metabolii xenobiotice activate sunt

conjugate cu specii ncrcate cum ar fi glutation ( GSH ) , sulfat , glicin , sau
acid glucuronic . Site-uri pe medicamente care apar reaciile de conjugare sunt
carboxil ( - COOH ) , hidroxil ( - OH ) , amino ( NH2 ) , i sulfhidril ( - SH )
grupuri . Produse de reacii de conjugare au crescut greutate molecular i tind
s fie mai puin activi dect substraturi lor , spre deosebire de faza reac ii I,
care de multe ori produc metabolii activi . Adaosul de grupe anionice mari
( cum ar fi GSH ) detoxifica electrofile reactive i produce metaboli i mai
polari care nu pot difuzeaz prin membrana , i poate , prin urmare , s fie
transportat activ .
Aceste reacii sunt catalizate de ctre un grup mare de transferaze ampl
specificitate , care, n combinaie pot metaboliza aproape orice compus
hidrofob care conine grupe nucleofil sau electrofil [ 1 ] Una dintre cele mai
importante clase de acest grup este . Cea a glutation S - transferazele ( GST ) .
Enzima MechanismInvolved [ 8 ] co-factor [ 8 ] Localitate [ 8 ]
methylationmethyltransferaseS -

Faza III- a de metabolizare a unui carcinogen

Etapa III - modificarea continuare i excreia

Dup reactii de faza II, conjugailor xenobiotice poate fi metabolizat

n continuare. Un exemplu : glutation conjug la acetilcistein
(acidul mercapturic) conjugai Aici, -glutamat i reziduuri glicin n
molecul glutation sunt ndeprtate prin gama glutamil
transpeptidazei i dipeptidases.. n etapa final, reziduul cistina din
conjugat este acetilat.
Conjugai i metaboliii acestora pot fi excretate din celule n faza a
III-a metabolismului lor, cu grupe anionice care acioneaz ca
etichete afinitate pentru o varietate de transportatorii membrana de
proteine rezistenei multidrog (MRP) familie . Aceste proteine sunt
membri ai familiei transportatorilor ATP-casetofon obligatorii i pot
cataliza de transport ATP-dependente de o mare varietate de anioni
hidrofobe i, astfel, s acioneze pentru a elimina produsele de faza
II, la mediul extracelular, n cazul n care acestea pot fi metabolizat
sau excretat mai mult.

Model conceptual al carcinogenezei prin

fumul de igar:
PKA, protein kinase A.

Benzopyrene DNA
adducts

Aducii ADN

Erori frecvente la nivel ADN

Mutaiile frecvente la nivel sunt:
- Pierderea unei baze purinice sau pirimidinice (AP) site-uri (site-uri
abasic);
- Modificri de baz, cum ar fi alkylarea sau deamidations care
transform citozina, adenina i guanina la uracil, hipoxantin i xantin,
respectiv.
- Mutageneza fotochimic prin lumin UV poate genera dimeri
pirimidinice, dimerii astfel de pirimidin cyclobutane (CPDs) i (6-4)
pirimidin photoproducts pyrimidone (6-4PPs).
- Ageni chimici i specii reactive de oxigen (ROS) poate modifica baze.
Erori de replicare i de conversii de baz pot genera perechi de
nucleotide nepotrivire.
Eecuri n metabolismul ADN-ul normal de topoizomeraze i nucleaz
sau radiaii ionizante poate genera monocatenar i dublu-pauze
Strand.

FAZELE CARCINOGENEZEI

Iniierea

Iniierea- primul pas n carcinogenez

Iniierea este procesul rapid ireversibil prin care se produc modificri
discrete dar permanente ale ADNului celular sau alterarea ireversibil a
structurii genetice a unei celule, rezultnd o celul cu potenial evolutiv
spre o clon malign.
Cel puin trei funcii celulare sunt importante n iniiere:
metabolizarea carcinogenului,
repararea ADN-ului i
proliferarea celular.

Caracteristici iniierii:
- mutaie ireveersibil
- mutaia este fixat n succesiunea generaiilor celulare
- mutaiile sunt cumulative

II. Promoia- al doilea pas

Promoia este al doilea pas al carcinogenezei. Promoia este procesul prin care
celula deja iniiat dobndete capacitatea de diviziune selectiv i de expansiune
clonal prin dereglarea creterii i diferenierii .
Expansiunea clonal a unei celule iniiate ca o consecin a evenimentelor care
modific expresia genelor prin care confer celulelor deja iniiate un avantaj
de proliferare selectiv.
Promorii celulari prezint urmtoarele trsturi
Nu sunt mutageni i nu sunt per se carcinogeni
i mediaz efectele biologice fr activare metabolic
Determin reducerea perioadei de laten pentru formarea tumoral dup
expunererea la un iniiator tumoral.
Cresc numrul tumorilor formate

Determin geneza tumori n asociaie cu un iniiator a crui aciune nu este

suficient singur s induc carcinogeneza .

Fazele carcinogenezei umane

III. Progresia
Progresia tumoral este descris ca stadiul prin care o leziune benign
devine capabil de cretere necontrolat, invazia esuturilor adiacente i a
forma metastaze la distan.
n timpul progresiei, tumorile dobndesc abilitatea de:
- cretere, distrugere a matricii extracelulare
- invazie a stromei
- angiogeneza
- locomoie
- metastazare
Acentuarea instabilitii genice i alterarea cariotipului reprezint emblemele
progresiei

Progresia = invazia local +angiogeneza +

metastazarea

Ruleta mutaiilor genice

GENELE CANCERULUI
- 1. Proto oncogene
- 2. Genele supresoare de tumori (GST)
- 3. Genele de reparare ADN

 Analiza

a)

recent A NTREGULUI GENOM al celulelor

canceroase,
n diferite tipuri de tumori maligne:

Modificrile genetice, foarte numeroase (1.000 !), sunt distribuite aleator n

genom:

unele, relativ puine, afecteaz gene cheie = GENE CANCER (~400)

dereglarea mecanismelor de control a proliferrii celulare tumor
(driver mutations = mutaii conductoare/ transformante);

altele nu influeneaz proliferarea (passenger mutations).

83

1. ONCOGENELE

Genele care contribuie la instalarea fenotipului

malign

Tumorile rezult din suprapunerea proceselor care controleaz: creterea,

localizarea i mortalitatea celulelor. Controlul normal al mecanismelor care conduc
la cancer se produce prin mutaii la nivelul a 3 categorii de gene:
1. Proto-oncogene- acesteaa codific componentele cilor de semnalizare, n
forma lor mutant care le face oncogene dominante stimulnd proliferarea
celular
2. Genele supresoare de tumori (GST) care codific proteine a cror funcie
pierdut conduce la de-reglarea controlului ciclului celular n sensul inhibrii
progrsiei celulelor , degradii proteinelor, aderarea celulkar i mortalitatea; n
general exacerbeaz comportamentul inhibitor.
3. Genele de reparare a ADN- sunt gene ale cror proteine menin
integritatea genomic i mpiedic mutaiile spontane prin pierderea funciilor cu
promovarea instabilitii genice.

1. Oncogenele

Oncogenele sunt gene mutante care joca un rol esential in formarea

tumorilor, acestea actioneaza dominant jucnd un rol esenial n controlarea
proliferrii celulare, codificarea factorilor de cretere i factorii
transcripionali. Acestea promoveaz creterea autonom a celulelor
canceroase iar corespondentul lor celular normal se numesc
protooncogene.
Dominant se refer la caracteristuica prin care o mutaie la nivelul unei
singiure alele poate determina un efect.
Oncogenele se formeaz cnd protooncogenele sunt modificate (mutate).
Genele celulare normale sunt denumite protooncogene, iar variantele lor
activate - oncogene celulare (c-onc). Activarea acestor gene este rezultatul
unor mutaii cu ctig de funcie.
Aceste gene stimuleaz continuu, exagerat creterea conducnd la
creterea necontrolat i la transformarea malign. Oncogenele au efect
dominant la nivel celular ca atare o singur alel mutant (activat) este
suficient pentru modificarea fenotipului celular. n prezent, sunt cunoscute
peste 100 de oncogene.

1. ONCOGENELE

Rezult prin activarea

protooncogenelor mutaii /
hiperexpresie.
Activarea oncogenelor mutaii
dominante ce determin ctig
de funcie
DOMINANT o mutaie ntr-o
alel determin un efect.
Produc cantiti mari de
oncoproteine* proliferare
celular crescut.

activare
ctig
n o x A funcie
Protooncogene
(represate)
Ex. SRC, RAS, MYC,
ERK

ONCOPROTEINE
Proliferare
celular
crescut

Inhibitori ai
transcripiei
oncogenelor:
oligonucleotide
antisens
ribozime

Inhibitori ai:
oncoproteinelor
Ac. Monoclonali
(umanizai)
Ac. scFv
(intracorpi)
aptameri
(oligopeptide
scurte)
89

Celul
strom

Activare de oncogene=semnalizarea
proliferativ susinut
(exacerbarea capacitii proliferative)
Cantiti crescute (ex., VEGF)
Factori de cretere

paracrin

autocrin

Receptori TK
x Activare fr ligand (ex. EGFR)
Hiperpexpresie (ex. HER2)
RAS

Activare fr
receptori

MEK

Cantiti crescute
Proteine
semnalizare
intracelular

MAPK

Factori de
transcripie

AVASTIN

ERBITUX
HERCEPTIN

INHIBITORI:
Ac. Monoclonali
(umanizai)
Ac. scFv (intracorpi)
aptameri
CANTITI
CRESCUTE
ONCOPROTEINE

ACTIVARE GENE

PROLIFERARE CELULAR

ACTIVARE A ONCOGENELOR
90

1. Oncogenele- gene proproliferative

PROTO-ONCOGENE ------------- ONCOGENE
~ 150 de oncogene identificate in cancere
Mecanismele de activare ale oncogenelor sunt:

-Mutaie punctiform;
- Translocaie cromozomial la o parte activ a genomului;
- Amplificarea (realizarea de copii multiple ale c-ONC);
- Inserarea unui virus oncogen la un loc adiacent;
- Eliminarea / pierderea unei gene, segment cromozomiale sau a
unui cromozom ntreg;
- Supresia / pierderea controlului gena supresoare.

Mecanismele de activare a oncogenelor

1. Activarea oncogenelor prin mutaii punctiforme: RET, RAS

2. Activare prin mutaii cromozomlale
3. Activare oncogene pin translocaii cromozomiale- gena BCL-ABL
(LMC)
4. Activarea oncogenelor prin amplificare genic: MYC i ERB
5. Activare de oncogene prin pierderea expresii genelor mARN
(reglarea posttranscriptional a exoresiei genice)
6. Activarea oncogenelor prin nserie viral: HTLV1

Categorii de oncogene
1.
2.
3.

4.
5.
6.

Factori de cretere: PDGFB

Receptori factori de cretere: EGFR (Her2)
Proteine de semnalizare intracelular: a. proteine tirozinkinazicetirozinkinaze- ABL,SRC
b. serintreozinkinazeAKT1,RAF1,MOS,PIM1
c. care cupleaz GTP
Factori de transcripie: AP1 i translaia ADN
De remodelare a cromatinei- modificarea gradului de condensare a
cromatinei: MLT1 (AALL1)
Reglatori ai ciclului celular: BCL2, BCL-XL

Secreia factorilor de cretere celulari

Factorii de cretere celulari

Factorii de cretere celulari (growth factors) sunt polipeptide produse de

celule care stimuleaz sau inhib prolifearea fie pe aceiai celul sau pe
alte celule.

Interacineaz cu celula prin receptori n membrana celular

Factori de cretere: Epidermal (EGF), al Plachetelor (PDGF), Fibroblastic

(FGF), Insulinic (IGF)

Receptorii factorilor de cretere prezint o poriune extracelular,

transmembranar i intracelular)

[TITLE]

Presented By S. Gail Eckhardt, MD at 2011 ASCO Annual Meeting

Exemplu: supraexpresia receptorului HER2

in cancerul mamar
HER2 is overexpressed in
~ 25% of breast cancers

Normal (1x)
~ 25,000-50,000 HER2 receptors

Overexpressed
HER2 (10-100x)
up to ~ 2,000,000
HER2 receptors

Pegram MD, et al. Cancer Treat Res. 2000;103:57-75.

Ross JS, et al. Am J Clin Pathol. 1999;112(suppl 1):S53-S71.
Slamon DJ, et al. Science. 1987;235:177-182.

Excessive cellular division

Activarea EGFR poate implica activarea cilor de

semnal n amonte care includ K-ras

Categorii de oncogene
1.
2.
3.

4.
5.
6.

Factori de cretere: PDGFB

Receptori factori de cretere: EGFR (Her2)
Proteine de semnalizare intracelular: a. proteine tirozinkinazicetirozinkinaze- ABL,SRC
b. serintreozinkinazeAKT1,RAF1,MOS,PIM1
c. care cupleaz GTP
Factori de transcripie: AP1
De remodelare a cromatinei- modificarea gradului de condensare a
cromatinei: MLT1 (AALL1)
Reglatori ai ciclului celular: BCL2, BCL-XL

Transducia semnalului
Transducia semnalului la nivel celular se refer la semnalizarea de la
exteriorul celulei n interiorul celulei pe calea:

micrii ionilor n interiorul sau spre exteriorul celulei prin canalele ionice
cu modificarea potenialului electric al celulei care este convertit n semnal
prin celu

cuplarea ligant-receptor determin evenimente precum fosforilarea prin

intermediul tirozinkinazelor i/sau serine/ troninkinaze; fosforilarea
proteinelor determin modificri n activitatea enzimelor i conformaei
proteice.
Activarea acestor ci conduce la: proliferare celular, diferentiatiere,
migration/motilitate, adeziune, perturbarea apoptozei, supravie uire lung
i activarea transcripiei genice.

Ci de semnal biologic la nivelul celulei

maligne

Mecanismele de control ale ciclului celular

Cile de semnal celulare

O cale a cancerului
cancerului poate fi definit ca un sistem reglator a crui activare sau inactivare de o mutaie genetic
sau sau epigenetic este esenial pentru dezvoltarea unui cancer uman.
uman.
Aceste ci ale cancerului includ:

calea MAPK ( n majoritatea cancerelor) implic oncogenele RAS, RAF, MEK i ERK necesar pentru
proliferarea celulelor normale ca i a multor tipurii de celule canceroase.

calea P13 K ( oncogenele PI3K, AKT i genelke supresoare PTEN, CTMP) funcioneaaz n controlul
metabolismului celular, particular n cel al transportului i utilizrii glucozei i n reglarea creterii celulare,
particular n biosinteza proteinelor i prevenirea apoptozei. Aceste ci implic activarea receptorilor
tirozinkinazici.

calea TP53TP53- proteina p53 este n centrul reelei implicate n activri inactivri; implic oncogenele MDM2,
HDM2 i genele supresoare TP53, ATM,BAX.

Calea RB1 ce implic oncogenele ciclina D1, CDK4(MYC) i genele supresoare p16,p15,p57 .

Calea TGF (n carcinoame, leucemii , sarcoame de pri moi) include inactivarea genelor supresoare
SMAD2, SMAD4, RUNX).

Calea Jak/STAT ( n anumite carcinoame, leucemii i limfoame) implic oncogenele STAT3,i STAT 5 i
genele suprsoare STAT1, SOCS1

Cile NFB ( n leucemii i carcinoame) implic oncogenele REL i gena supresoare CYLD

Calea WNT ( colon, mamar gastric, hepatic) oncogene:WNT1, catenin, genele supresoare APC, AXIN.

Calea SHH ( cancere cutanate, cerebrale, plmn), oncogene SHH, SMO, GLI1, genele supresoare PTCH1,
PTCH2 i SUFU.

Calea NOTCH ( exprimat n limfoamele T, unele carcinoame), implic oncogenele i genele supresoare
NOTCH1.
Activarea acestor c
ci cond
conduce la: proliferare celulara, diferentiatiere, migration/motility, adez
adeziune,
perturbarea apoptozei apoptosis, enhanced survival si activarea transcriptei genice

Proliferarea celular- etape

Celula normala necesit semnale de stimulare a creterii pentru a prolifera.
Aceste semnale sunt transmise pe calea receptorilor transmembranari, care
se leag de liganzi precum factorii de cretere, componentele matricii
extracelulare, molecule de adeziune intercelulare i moleculele de
interaciune
Proliferarea celulelor normale parcurge urmtoarele etape:

1. legarea unui factor de cretere de un receptor specific localizat la nivelul

membranei celulare
2. activarea limitativ i tranzitorie a factorului de cretere care activeaz un
semnal de transducie prin sinteza unei proteine la nivelul feei interne a
membranei
3. transmiterea unui semnal de transducere prin intermediul citozolului prin
intermediul mesagerilor secundari sau a intermediul moleculelor de senal care
activeaz direct transcripia
4.inducia i activarea unor factori reglatori nucleari care iniiaz transcripia ADN.
5.Intrarea i progresia celulei n cadrul ciclului celular, avnd ca rezultat
diviziunea celular.

Cile de semnal eseniale la nivel celular

Calea protein-kinazelor: ligant (factor de cretere receptor

activaredimerizareautofosforilare RAS/RAF/ MEK/
MAPKactivare factor de transcripie nuclear expresie
genic

Calea fosfatidil-inositol-3-kinaza: PTEN/ PI3K/ AKT/ mTOR

Protein kinaze C (PKC)

calea Ras-Raf-MEK-MAPK
calea P13K-Akt-TOR
calea PKC

2. GENELE SUPRESOARE DE TUMORI

(GST)

[TITLE]

Presented By Martine J. Piccart-Gebhart, MD, PhD at 2012 Annual Meeting

Ciclului celular. Un ciclu de diviziune necesit o nalt fidelitate duplicarea ADN-ului n

timpul fazei S a ciclului celular i segregarea corect a cromozomilor in timpul
mitozei duplicate, sau faza M. nainte i dup faza S i M faz, tranzitele de celule,
prin "gap" fazele, numit G1 i G2.Tranziie adecvat prin aceste etape este controlat
de aciunea specifice cyclin / CDK complexe.

2. Gene supresoare de tumori (GST)

Genele supresoare de tumori (GST) determin inhibarea proliferrii

celulare. Versiunile mutante GST din celulele canceroase au activitatea
pierdut. Ambele copii alele trebuie s fie inactivate nainte ca funcia
genei supresoare de tumori s fie pierdut, rezultnd absena unei proteine
normale (recesive). > 40 GST identificate in genom!
GST sunt gene care blocheaz dezvoltarea neoplaziilor maligne
prin reglarea creterii i proliferrii celulare. GST sunt deci gene normale a
cror funcie este inactivat prin mutaii care trebuie s se produc n
ambele alele.
RECESIV= ambele alele alegenei trebuie sa fie mutate (pierdute ) ca
defectul fenotipic s apar
Dou evenimente sau mutaii trebuie s se produc n prima i apoi n a
doua alel . (inactivare alelic)
Sunt gene recesive-. studiile citogenetice au permis identificarea mai
multor mecanisme de inactivare a celei de-a doua copii a unei gene
supresoare a creterii tumorale n cancerele ereditare:

Mecanisme de inactivare a celei de-a doua copii

a alelei unei GST

Deleii
Recombinri somatice
Pierderea unui cromozom asociat cu duplicaia cromozomului restant
Creterea expresei unor gene micro ARN
Pierderea heterozigozitii (LOH)

CLASIFICARE:
- Receptori membranari- PTCH
- Proteine citoplasmatice- APC, NF1
- Proteine nucleare. TP53, RB1,VHL, WT1 ( gene gatekeper- portar)

Genele suprsoare de tumori (GST)antiproliferative

Genele supresoare tumoral (GST) sunt gene gene normale recesiv care
sunt inactivate prin mutaii n dou alele i suprimarea fenotipului malign.
Negativ reglementa promovarea gene. > 40 GST n genomului!
mecanismul de:
- Eliminarea cromozomial
- Somatice recombinrile
- Pierderea cromozomial

Categorii:

GENE GATE KEPPER (Gene portar) de reglare-implicate n controlul

ciclului celular: APC, VHL, p53, Rb, WT, PTEN, NF1, BRCA1, BRCA2
(repararea ADN-ului, transcriere).

GENE CARE TAKER sau ngrijitor - "de reparare", implicate n funcia de

stabilitate genomice, de reparare prin excizie nucleare: XP-A, hMSH2,
hMSH LH1 (ADN mismach de reparaii), WRN-H (genomicstability), BRM
(sensibilitate la rupere cromozom), FANC, TTD-A radiosensibilitate (

GENELE SUPRESOARE TUMORALE (GST)

(GATKEEPERS portar )

GST n mod normal:

blocheaz proliferarea celular
i activeaz apoptoza
GST sunt inactivate prin
dou mutaii recesive
pierderea funciei proteinelor
codificate*
Unele persoane se nasc cu o
mutaie germinal (Na) PG la
cancer cancere ereditare i
familiale

dou mutaii recesive:

NNNaaa
pierdere
funcie

ax xa

ANORMALE

Gene supresoare
Tumorale.
Ex. PTCH, APC,
NF1,TP53

PROTEINE
Proliferare
Reducerea
celular
apoptozei
crescut

Terapie genic:
inseria unor
GST (ex., TP53)

Mutaii germinale
predispoziie
genetic la cancer

114

Sustragerea (insensibilitatea) la supresorii

proliferrii

Program
antiproliferativ

GST :
p53

gena RB gena TP53

*proteine pRB +
ANORMALE

Semnale
inhibitorii
extracelulare

Semnale
inhibitorii
intracelulare

Blocare
Activarea
cicluproliferrii
celular
n interfaz
celulare
Activare
Blocarea
senescen
apoptozeii
apoptoz

matrice celule vecine alterare ADN

116

Inactivarea genelor supresoare - ipoteza celor

dou lovituri

Revisiting the two-hit hypothesis. In Knudson's classic two-hit hypothesis of

retinoblastoma (bottom left), loss of both tumor suppressor alleles is required for tumor
progression. In the PTEN paradigm (top center and bottom right), one hit is sufficient for
cancer susceptibility, whereas a double hit actually opposes tumorigenesis through induction
of irreversible growth arrest (senescence).

3. GENELE DE STABILITATE (reparare, caretakers )

4. GENELE LANDSCAPERS (peisagist)
5. GENELE micro ARN oncomics

CLON

Replicarea ADN i diviziune

Protein

Semnale
inhibitorii
Reparare

ARN
ONCOGENE

MICROMEDIU

PROLIFERARE
CELULAR
INTENS

T
U
M
O
R

oncomirs

(activarea
protooncogenelor)

GENE
SUPRESOARE
DE TUMORI

GENE DE
STABILITATE
(repararea ADN)
(caretakers)

GENE
LANDSCAPER

gatekeepers

micro ARN
GENE DE
REGLARE

INSTABILITATE GENOMIC:
favorizeaz apariia de noi mutaii i
aberaii cromozomiale

SENESCEN /
MOARTE
CELULAR

118

3. Gene de reparare-caretakers

Genele de reparare ale ADN afecteaz proliferarea sau supravieuirea indirect prin influenarea
capacitii organismului de a repara leziuni neletale n alte gene incluznd protooncogenele,
genele supresoare tumoral i genele care regleaz apoptoza .

Unele defecte n mecanismele de reparare a ADN pot predispune la mutaii n genom i astfel, la
transformarea neoplazic. Aceast predispoziie la mutaii se numete fenotip mutator iar
genele implicate n mecanismele de reparare se numesc i gene mutator.
Cu unele excepii, sunt necesare mutaii n ambele alele ale genelor de reparare ale ADN pentru
a induce ceea ce se numete instabilitate genomic - adic capacitatea de achiziii sau reparare
a mutaiilor n absena unor factori cauzatori. n acest sens, genele mutator pot fi considerate
gene supresoare. Incapacitatea mecanismelor de reparare a ADN poate predispune la mutaii
n celulele canceroase mutaiile au fost identificate n genele care regleaz ciclul celular
(protooncogene i genele supresoare de tumori) sau de reparare a leziunilor ADN ( genele de
reparare).
Mutaiile funcionale ale genelor de reparare ale ADN accelereaz acumularea mutaiile genelor
supresoare i protooncogenelor.
De exemplu, gena ATM (pe cromozomul 11) codific o protein implicat n detecia leziunilor
ADN, cu un rol important n progresia celulei n ciclul celular. Rupturile dublu-catenare (DSB)
multiple conduc la o rat crescut a rearanjamentelor cromozomiale determinnd sindroame
precum sindromul ataxie telangiectazie asociat cu ataxie cerebeloas progresiv, creterea
incidenei anumitor maligniti precum: limfoamele i leucemiilor i creterea rspunsului la
tratamentul cu radiaii ionizante .

Rupturi ADN

Single strand
breaks

Double strand
breaks

Pr Y.-J.

Liniile de aprare contra mutaiilor ADN

Sunrt 3 linii de aprare care care protejeaz contra mutaiilor ADN:

fructe)

- alimentaia- consumul de antioxidanti (legume,

- metabolosmul celular- faza de conjugare- enzimele

celulare (ex. superoxid dismutaza)
- genele de reparare ale ADN (genele caretaker)

3. Genele de reparare ale ADN care

taker
Sunt 5 tipuri de reparare a defectelor (mutaiilor) ADN:

1.
2.
3.
4.
5.

Reparare ntr-un singur timp (one step repair)

Reparare prin excizia nucleotidelor (base excision repair)
Reparare prin excizia bazelor (base excision repair)
Repararea defectelor de mperechere (mismatch repair)
Repararea prin recombinare (recombinational repair)

Genele de reparare
protejeaz de aciunea
mutagena si instabilitatea
genica

Eecul mecanismelor de reparare

Fiecare celula are 2 copii ale

BRCA1 si BRCA2

BRCA2

BRCA1

Incidenta mutatiilor BRCA1/2

1 in 800 women in the general population

5-10% of all women with breast cancers

~18% of women with breast cancers <50 and one close relative with
breast cancers <50

2% of all women of Ashkenazi Jewish ancestry

Mutaia BRCA1/2 crete riscul pentru cancerul

mamar debutat precoce
40 ani

Riscul in populatia general

Risc ereditar

50 ani

0.5%
10%-20%

70 ani

2%

7%

33%-50%

56%-87%

Angelina Jolie has double mastectomy due to cancer

gene

14 May
May 2013, Angelina Jolie reveals she had
preventive double mastectomy after discovering
cancer gene
"But it is one I am very happy that I made. My
chances of developing breast cancer have dropped
from 87 percent to under 5 percent. I can tell my
children that they dont need to fear they will lose
me to breast cancer."

3. Gene de reparare: BRCA-1 caretaker

Rolurile genei BRCA-1:
-

Repararea ADN-ului defecte

Inactivarea cromozomului X
Repararea mutatiilor TP53
Instabilitate genic

4. Gene de stabilitate- gena supresoare p53

gardianul genomului
gatekeeper

Gena p53 este inactivat in 70% din tumorile maligne prin:

- deleie i mutaie punctual
- inactivare prin oncogena celular
- inactivare prin oncogenez viral

ZILELE ONCOLOGIEI IEENE

U.M.F IAI

CARACTERISTICI FAVORIZANTE
INFLAMAIA TUMORAL

INSTABILITATE GENOMIC

Caracteristica esenial a
tumorilor achiziia celor 8
capaciti distinctive
Determin creterea ratei
mutaiilor:
creterea sensibilitii la
agenii mutageni;
alterarea unor componente a
sistemului de meninere a
integritii genomului;
compromiterea sistemului
supresor care monitorizez
integritatea genomului i
declaneaz apoptoza.

Inflamaia tumoral, prezent din stadiile

iniiale ale tumorii (!), are efect
paradoxal de stimulare a progresiei
tumorilor incipiente furnizeaz
molecule bioactive:
factori de cretere proliferarea
factori de supravieuire apoptoza
factori proangiogenetici
Favorizeaz
enzime extracelulare
angiogeneza,
invazia,
metastazarea

132

5. Genele landscaper (peisagist)

Genele landscaper codific produsul genelor care controleaz micromediul n care

celulele cresc. Creterea celulelor depinde att de interaciunile intercelulare ct i
interaciunea dintre celul i proteinele matricii extracelulare. Aceste mecanisme i
exercit controlul prin reglarea proteinelor matricii extracelulare, a markerilor
celulari de suprafa, moleculelor de adeziune celular i factorilor de cretere
celular.

Produsul codificat de aceste gene contribuie la creterea tumoral prin

supravegherea micromediului stromal conducnd la proliferarea celular
necontrolat

Celulele comunic unele cu altele att prin contact direct ct i prin intermediul
moleculelor implicate n transducia semnalului biologic. Anomalii ale celulelor
stromale provenind din produsul genelor codificate de defectul genelor landscaper
pot induce anomalii ale creterii celulare n epitelii, conducnd la la apariia
carcinoamelor.

N CANCER SUNT IMPLICATE 5 CATEGORII DE GENE

(driver mutations mutaii conductoare)

CLON

Replicarea ADN i diviziune

Protein

MICROMEDIU

PROLIFERARE
CELULAR
INTENS

Semnale
inhibitorii

T
U
M
O
R

Reparare

ARN
ONCOGENE

GENE
SUPRESOARE
DE TUMORI

(activarea
protooncogenelor)

GENE DE
STABILITATE
(repararea ADN)
(caretakers)

GENE
LANDSCAPER

(gatekeepers)

micro ARN
GENE DE
REGLARE

SENESCEN /
MOARTE
CELULAR

134

Activare de oncogene, inactivare de gene

supresoare= cancer

Cancerul o boal a perturbrii semnalelor

biologice

Creterea celulara, metabolismul, moarte, difereniere, invazia circula ie i sunt

controlate de cai de semnalizare intracelulara.
Semnalizare intracelular este mecanismul prin care indicii prezente n mediul
extracelular sunt transmise / interpretate de celula.
Aceste indicii externe pot fi factori de cretere care semnaleaz o celula pentru
a imparti, proteine extracelulare matrice care promoveaz supravie uirea,
hormoni care schimba metabolismul celular, de citokine care instrui celula
pentru a diferenia, sau semnale care promoveaz motilitatea si capacitatea de
invazive.
Aceste cai sunt iniiate de liganzi obligatorii la, i ac ionnd receptorii lor
inrudit, care sunt, de obicei, proteinele membranare plasmatice.
Activarea receptorilor iniiaz o cascad de evenimente de semnalizare,
inclusiv activarea kinazelor proteice i / sau lipide, precum i recrutarea de
proteine adaptor, activarea factorilor de transcriptie i schimbri n
citoscheletului.

BOALA CANCEROAS ESTE O BOAL A GENELOR LA

NIVEL CELULAR !

produs de multiple mutaii somatice i

modificri epigenetice, dobndite;
2 tipuri de mutaii genice:
- a) activarea genelor responsabile de coordonarea proceselor
celulare- activarea de oncogene
-

b) inhibarea proliferrii celulare- inactivarea de GST

prin aceste evenimente, o clon celular capt un set comun

de capaciti distinctive i

formeaz o tumor,

care evolueaz multistadial, crete necontrolat i disemineaz.

137

Derereglarea oncogenelor i genelor

supresoare n cursul progresiei tumorale
I. ONCOGENE activate prin:
- mutaii punctuale
- amplificare genic
Caracter dominant
- translocaii cromozomiale
1 eveniment este
- expresia unei oncogene virale
suficient
II. GENE SUPRESOARE DE TUMORI (GST) sunt inactivate de:
- dubla deleie genic
Caracter recesiv
- mutaii punctiforme i deleia genic 2 evenimente
- pierderea expresiei genice
sunt necesare
. Interaciune cu o oncogen celular activat
- interaciune cu o oncogen viral activat

CLON

Replicarea ADN i diviziune

DEZVOLTAREA
EMBRIONAR
CRETEREA

NORMAL

Protein

MICROMEDIU

Semnale
inhibitorii

NLOCUIREA CELULELOR
SENESCENTE I
REPARAREA LEZIUNILOR

Reparare

ARN
GENE
PROLIFERATIVE

GENE ANTIPROLIFERATIVE
(supresoare)

(protooncogene)

GENE DE
STABILITATE
(repararea ADN)
GENE
LANDSCAPER

micro ARN
GENE DE
REGLARE

CONTROLUL
PROGRESIEI
PRIN
CICLUL
CELULAR

SENESCEN /
MOARTE
CELULAR

CONTROL GENETIC AL PROLIFERRII I CRETERII CELULARE

139

A). n CANCER se produc multiple

mutaii somatice i modificri epigenetice,
dobndite
MUTAIILE SOMATICE:

modificri n secvena de nucleotide/ structura ADN

(informaia genetic);
se produc:

postnatal (dobndite),

spontan n cursul replicrii ADN sau diviziunii i/sau

sub aciunea unor ageni mutageni exogeni sau endogeni;

sunt definitive,

se acumuleaz n timp creterea frecvenei cancerelor la vrsta a

III-a.
140

MODIFICRILE EPIGENETICE= Modularea expresiei

genelor fr mutatii ! Modificrile epigenetice sunt REVERSIBILE !!!

NU intereseaz secvena de nucleotide a ADN (informaia

genetic) (epi= n plus) ci modifica expresia genelor.

Acestea remodeleaz conformaia cromatinei (ADN+histone),

producnd:

2 cai majore de epigenez:

1. modificarea proteinelor asociate ADN care ajuta la
impachetarea in nucleu

decondensarea cromatinei ACTIVAREA unor gene

o

acetilarea histonelor,

2. adaugarea de radicali metil la bazele de cistein lng

guanin n regiunea promotoare- regiunile inactivate sunt
hipermetilate cele cu dommenii active sunt hipometilate.
141

Modificri epigenetice

Termenul de epigenetic se refer la orice informaie implicat n

reglarea expresiei genelor ce NU codific secvena nsi a ADN i care
poate fi transmis n succesiunea generaiilor de celule odat cu
diviziunea celular.

Epigenetica implic reglarea proceselor critice intracelulare care

modific informaia genetic n genom utiliznd alte informaii dect
secvena ADN.

Reglarea epigenetic implic cel puin trei mecanisme interconectate:

(1) metilarea ADN
(2) modificrile posttranslaionale ale histonelor i
(3) alterrile cromatinei ce acioneaz la distan precum
modificrile proteinelor specifice care se leag de secvenele
insulatorii.

b)

Modificrile epigenetice (potenial reversibile !) sunt mai numeroase

dect mutaiile somatice.

b)

Numai un numr limitat de modificri genetice (mai puin de 10) sunt

absolut necesare iniierii creterii tumorale (obinuit 2-4 mutaii) i
supravieuirii / expansiunii tumorii (5-6 mutaii)

Nu se tie nc dac este important ordinea achiziiei sau combinaia

lor

143

MODIFICRI EPIGENETICEmodificare expresiei genelor:

INACTIVARE GENE
(de ex., genele
antiproliferative)

Metilarea ADN
promotor

condensarea
cromatinei
INACTIVAREA
GENEI

MODIFICRI
REVERSIBILE !!!

Inhibitori ai:
metilrii ADN (azacitidina; decitabina).
histon-dezacetilazelor HDAC (ex., acidul hidroxamic)
144

EVOLUIA MULTISTADIAL A CANCERELOR

Nu exist

gene specifice a cror mutaii s conduc la dezvoltarea

unui anumit tip de cancer.

Cancerul

este determinat de mutaii multiple care afecteaz ns

numai anumite gene (oncogene + GST)

Fiecare

tip celular este caracterizat printr-o combinaie de mutaii,

n care o anumit gen gatekeeper are un rol dominant (ex., APC
cancere acolo-rectale; VHL cancere renale.

145

CRC: Understanding progression

Presented By Alan Venook at 2014 ASCO Annual Meeting

 Cancerele au o

evoluie multistadial determinat, probabil, de o

secven de evenimente genetice, n care anumite evenimente sunt
mai frecvent asociate cu un anumit stadiu evolutiv (ex., cancerele
acolo-rectale).

147

Cancerogeneza in cancerul colo-rectal

Colon cancer carcinogenesis

Loss of
APC

Normal
epithelium

Hyperproliferative
epithelium

Activation Deletion Loss of Other

of K-ras of 18q TP53 alterations

Early
adenoma

Intermediate
adenoma

Adapted from Fearon ER. Cell 61:759, 1990

Late
adenoma

Carcinoma

Metastasis

Slide 8

Presented By Alan Venook at 2014 ASCO Annual Meeting

Cancerul mamar-fazele carcinogenezei

Cancerul bronho-pulmonar

Furnizarea i integrarea informaiilor moleculare complete n tratamentul

cancerului
153

CONFIDENTIAL

Tumor-Tissue Samples

Tissue Bank

Pathology Lab

Biomarker

The New Family of Diseases Perception / Molecular

Portraits

Slide 10

Presented By Roman Thomas at 2014 ASCO Annual Meeting

EXACT chemosensitivity testing Ergebnis

Tehnologia de secveniere

Secveniere tip next-generation

Folosind platforma Illumina HiSeq2000 NGS
Sunt necesare programe bioinformatice sofisticate,
putere semnificativ a calculatorului i capacitate de
stocare a datelor
Poate detecta simultan:

nlocuitori de baz ai mutaiilor

Mici deleii/inserii
Rearanjamente
Copii ale numrului de modificri

Sensibilitatea i specificitatea pentru esutul FFPE

este >99%, pentru > 5% frecven alelic
158

Secvenierea de ultim generaie poate fi utilizat pentru a

identifica toate modificrile prezente n genele cancerului
Fluxul de lucru al genomului de cancer profilat

14-21 zile
159

Folosirea secvenierii de ultim generaie pentru a oferi un profil

genomic optimizat n vederea lurii deciziilor clinice
Testul bazat pe secveniere Next-Generation al companiei
Fondation Medicine
Un profil molecular complet
Analiz molecular optimizat pentru a detecta toate categoriile
de modificri cunoscute

Precis i de ncredere
> 99% sensibilitate i specificitate

Cantitate mic de esut, probe de rutin

Necesit doar o cantitate mic de ADN aflat de regul n probele
de tip FFPE, de rutin

Acionabil (driver)
Raport interpretativ, aprobat de ctre experii n oncologie i
genomic, ce facilitez includerea celor mai recente descoperiri
molecurare n vederea ngrijirii pacientului

Ofer mai multe opiuni de tratament

Identific ~ 3X mai multe modificri genomice fa de panelurile
intite obinuite sau teste hotspot.
160

161

CONFIDENTIAL

[TITLE]

Presented By Martine J. Piccart-Gebhart, MD, PhD at 2012 Annual Meeting

Cancerogeneza- rezumat

Carcinogeneza uman este un proces multistadial att la nivel fenotipic ct

i genotipic, care reflect acumularea unui numr de alterri genetice ce
conduc la transformarea progresiv a celulei normale spre o celul malign .
Acest proces de durat poate fi arbitrar mprit n mai multe etape:
iniierea tumoral, promoia tumoral, conversia malign i progresia
tumoral.
Cancerul este o boal cu mecanism genetic activ la nivel celular. Alterrile
genetice pot lua forma mutaiilor, deleiilor sau amplificrilor ADN, dar pot
fi ntlnite i rearanjri cromozomiale sau alterarea numrului de
cromozomi.
n acelai timp, cancerul este o boal a alterrii expresiei genice, incluznd o
arie complex de evenimente epigenetice (modificri n statusul de metilare
a ADN, rezultnd n activarea/supresia unor gene din regiunea respectiv).
Progresia de la un esut normal spre un cancer invaziv are loc n decurs de
5-20 ani i este influenat att de factori de mediu, ct i de factori genetici
(ereditari sau nu), metabolici, hormonali sau imunologici

Concluzii

Cancerul este o boal a genelor la nivel celular

Majoritatea carcinogenilor sunt mutageni
Acumularea mutaiilor n timp este responsabil pentru transformarea unei
celule normale n celua malign.
Mutaia n promoter-ul genei determin alterarea reglrii sale iar mutaia
regiunii de codare altereaz funcia sa prin modificaea produsului.
Carcinogenii includ: radiaiile, ageni infecioi i substanele chimice
Activarea oncogenelor (mutaii ale protonocogenelor) & inactivarea genelor
supresoare de tumori
Apoptoz, autocrinie, independena la semnalele replicative, angiogenez,
invazie i metastazare
Celula trebuie considrat n micromediul su-rolul micromediului (stromei) n
progresia tumoral
Analiza genomului n totalitate
Celula stem

PROFILAXIA CANCERULUI

Prevenia primar

Prevenia primar, conform definiiei Organizaiei Mondial

a Sntii (OMS) este depistarea pacienilor nainte de
declanarea bolii.
Scopul principal al preveniei primare l reprezint
diminuarea frecvenei cancerelor prin identificarea i,
eventual, suprimarea factorilor de risc
Prevenia primar se poate concentra pe ntreaga populaie
(strategia populaional) ca i spre populaiile cu risc (strategii
populaionale cu risc crescut) i strategii individuale (la persoanele
cu risc crescut).

Metode de prevenie primar

Educaie sanitar
Norme de reglare a carcinogenilor profesionali
Msuri fiscale
Restricii publicitare la factori carcinogeni
Restricii temporo-spaiale a consumului de toxice

Un pachet de tigri din Australia

The European Code Against Cancer o capanie de

reducere a cancerelor cu 15% prin educaie !
Prevenie primara:
1.
A nu fuma
2.
Limitarea consumului de alcool la 28g/zi adic sticl de vin i din
aceast camtitate la femei
3.
Evitarea expunerilor exagerate la razele de soare.
4.
Respectarea normelor de igien i protecie la locul de munc.
5.
A se mnca pete, fructe i legume ca i alte alimente bogate n fibre.
6.
Combaterea obezitii (efort fizic zilnic) i scderea grsimilor din
alimente.
Depistare precoce:
7. A se prezenta la medic n prezena celor 7 semne de alarm.
8. A se prezenta la doctor pentru aciunile curente de screening .

Recomandri de prevenie a cancerului prin

msuri de diet
Condiia corporal

A fi ct mai slab posibil fr a atinge valori ale greutii sub limite normale
Activitatea fizic

A fi activ fizic cel puin cte cel puin 30 de minute n fiecare zi

Alimente i buturi care favorizeaz creterea ponderal

A se limita consumul de alimente cu coninut energetic crescut ( alimentele bogate n gsimi i /sau adugarea de zahr i/sau
srace n fibre)
Alimentele din plante

A mnca o cantitate ct mai mare de legume, fructe, cereale totale i psti (ex. fasole)
Alimente animale

Limitarea consumul de carne roie ( precum vit, porc i miel) i evitarea crnii procesate (conservate, prjite)

Buturile alcoolice

Dac totui se consum alcool se va limita cantitatea la dou pahare/zi la brbat i un pahar/zi la femei ( 1pahar = 10-13 g de
etanol))
Conservarea, procesarea i prepararea alimentelor

A se limita consumul de alimente srate i conservarea alimentelor prin srare (clorur de sodiu)
Suplimentele alimentare

A nu se utiliza vitamine, cofactori, microminerale, etc. pentru protecia mpotriva cancerului

Alptarea la sn

Este recomandat pentru femei s alpteze exclusiv la sn cel puin 6 luni i apoi s se diversifice alimentaia sugarului cu alte lichide
i alimente
Pacienii vindecai de cancer

Dup ncheierea tratamentului oncologic, pacienii vindecai trebuie s urmeze msurile de prevenie i supraveghere recomandate

Adaptat dup World Cancer Research Fund in Colaboration with AmericanInstitute for Cancer
Research in in Kampman E ESMO Nutrition and Cancer, 2011