Decontaminarea manuscriselor n plasm rece de nalt frecven

Emil Ghiocel Ioanid, Dorina Emilia Rusu, Aurelia Ioanid, Simona Dunca, Marta Ursescu

Introducere Varietile factorilor de mediu afecteaz grav stabilitatea materialelor organice i cu precdere a materialului papetar. Procesele degradative declanate, care induc scderea stabilitii chimice, sau modificarea caracteristicilor mecanice i optice ale manuscriselor, sunt influenate de mai multe elemente cum ar fi: tipul hrtie, a cernelurilor, a pigmenilor, adezivilor etc., precum i a interaciunii acestora cu mediul ambiant. Principalii factori care contribuie la dezvoltarea microorganismelor sunt umiditatea i temperatura ridicat. Problemele cauzate de creterea bacteian i fungic pe suporturi papetare reprezint o preocupare major a arhivitilor1. Materiale organice ce se regsesc n coleciile bibliotecii, cum ar fi fibrele de celuloz, hrtie, aditivi, adezivi, sunt substraturi pe care se dezvolt microorgenisme2. Unele specii de mucegaiuri utilizeaz fibra de celuloza ca un nutrient3, altele metabolizeaz componentele celulozei4, putnd diminua legturile fibrelor, deoarece se hrnesc cu materialele de umplere ale hrtiei. Cele mai rspndite specii de fungi izolate pe hrie sunt, Acremonium, Aspergillus, Cladosporium, Fusarium, Penicillium i Trichosporon. Bacteriile afecteaz hrtia mai rar dect fungii, dar, o serie de specii celulolitice precum cele aparinnd genurile Cytophaga, Cellvibrio i Cellfalcicula au fost izolate pe suporturi celulozice i s-au dovedit a fi mai duntoare dect cele necelulolitice. Ca urmare, decontaminarea manuscriselor este o operaiune obligatorie, ce poate fi realizat prin metode chimice sau fizice. Tratamentele chimice
Adamo, M., Magaudda, G., a.o. Susceptibility of Cellulose to Attack by Cellulolytic Microfungi after Gamma Irradiation and Ageing, vol. 24, 3 September 2003, p. 145-151. 2 M da Silva, M., Moraes, A.M.L., Nishikawa M.M., a.o. Inactivation of fungi from deteriorated paper materials by radiation, International Biodeterioration & Biodegradation, Volume 57, Issue 3, April 2006, p.163-167. 3 H. Y., Jung, T. L., Ward and R. R., Benerito, Textile Res. J., 47, 217 222, 1977.
1

268

Semnatar articol

umede, implic o serie de riscuri legate de stabilitatea cernelurilor sau gradul de fragilizare a suportului papetar. Atenia cercettorilor s-a axat n ultimii ani, pe studierea eficienei unor metode fizice. Literatura de specialitate face astfel referire la aplicarea radiaiilor gama n tratamentul de decontaminare a materialului papetar5. n acest caz se observa formarea de compui nesaturai i de radicali liberi care conduc la ruperea lanurilor polimerice de celuloza proporional cu doza de radiaii absorbit6. Inconvenientele aprute la tratamentele clasice de decontaminare, ce constau n utilizarea unor substane toxice sau generatoare de emanaii toxice, a determinat specialitii din diverse domenii de activitate la studierea altor metode, neconvenionale, ecologice i eficiente. Plasma rece de nalt frecven, aplicat n condiii riguros controlate i la parametrii adecvai reprezent o astfel de alternativ. nc din anul 2001 U. Vohrer de la Institutul Fraunhofer Stuttgard Germania, iniiaz un studiu referitor la posibilitatea aplicrii plasmei reci de nalt frecven ca metod de decontaminare i conservare a suportului papetar7 obinut din celuloz de lemn, subliniind c, n urma tratamentului se constat i o cretere cu 20 % a stabilitii hrtiei. Parte experimental 2.1 Materiale Studiile s-au efectuat pe trei cri vechi, din colecii particulare, dou psaltiri tiprite n sec XVII i vechiul testament, tiptit n 1857, notate prescurtat astfel: P1 i P2 cele dou psaltiri, VT Vechiul Testament. 2.2 Tratamentul de decontaminare Tratamentele de decontaminare s-au efectuat n plasm rece de nalt frecven n instalaia prezentat n figura 1. Elementele importante ale unei astfel de instalaii sunt: vasul de reacie (1), pompa rotativ de vid (3), generatorul de nalt frecven G, i un sistem de comand i control (4) ce servete la urmrire i reglarea parametrilor de lucru i debitul de gaz din incint.
H. Y., Jung, T. L., Ward and R. R., Benerito, Textile Res. J., 52, 256-263, 1982. Branka Katuin-Raem, Duan Raem and Mario Braun, Irradiation treatment for the protection and conservation of cultural heritage artefacts in Croatia, Radiation Physics and Chemistry, Volume 78, Issues 7-8, Pages 423-744 (2009). 6 Eugen Bratu, Ioan V. Moise, Mihalis Cutrubinis, Daniel C. Negut, Marian Virgolici, Archives decontamination by gamma irradiation, NUKLEONIKA 2009;54(2):7784. 7 Vohrer, U., Trick, I., Bernhardt, J., Oehr, C. and Brunner, H., Plasma treatment an increasing technology for paper restoration?, Surface and Coating Tecnology, vol. 142-144, p. 1069-1073, July, 2001.
4 5

Titlu articol

269

Pentru evitarea impurificrii uleiului din pomp se introduce n circuit o trap cu azot lichid (2). Reactorul, este confecionat din sticl Pyrex, prevzut cu doi electrozi interiori, plani paraleli (7), din inox i un suport de construcie special (8) care permite rsfirarea unui numr de 8-10, restul crii (9) fiind protejat cu folie de aluminiu. Fiecare set de foi este expus pe rnd, speciilor active din plasm, astfel nct acestea s acioneze suprafaa tuturor paginilor. La stabilirea parametrilor de lucru n plasm s-a inut cont de sensibilitatea materialului papetar la aciunea radiaiilor UV, de gradul de deteriorare a hrtiei i gradul de infestare. Crile au fost introduse n incinta de vid i tratate n plasm rece de nalt frecven timp de 60 minute n dou etape de 30 min fiecare, la urmtorii parametrii: presiune: 3 410-1 mbar; frecvena: 13.5 MHz; intensitatea cmpului electric: 20 V/cm; puterea n descrcare: 50W; mediu de lucru aer. Dup fiecare etap s-a efectuat cte un set de analize microbiologice i fizico chimice (modificri cromatice, analiz elemental i microscopie electronic de baleiaj).

Fig. 1 Instalaie de plasm destinat decontaminrii crilor

270

Semnatar articol

2.3 Metode de analiz Analize microbiologice. Prin tehnici nedistructive (metoda amprentrii) s-au recoltat probe biologice din crile ce urmeaz s fie decontaminate. Acestea au fost amplasate n vase Petri pe medii de cultur specifice microorganismelor (sabouraud pentru fungi i geloz pentru bacterii). Ansablul prob - mediu nutritiv a fost incubat timp de 7 zile pentru fungi, la temperatura de 28 C i 2 zile, la temperatura de 38 C, pentru bacterii. n vederea evidenierii influenei plasmei de HF asupra suportului papetar s-a realizat un set de analize nedistructive sau microdistructive ce includ msuri cromatice, analiz elemental i analize de microscopie electronic de baleiaj. Modificrile cromatice, menite s evidenieze eventualele abateri de la culoarea iniial s-au efectuat cu un spectrofotometru DATACOLOR Spectroflash SF-300. n cazul de fa s-a recurs numai la msurarea gradului de alb. Analiz elemental este o metod fizico-chimic prin care o prob de material este analizat din punctul de vedere al compoziiei elementelor componenete i, n acelai timp, al compoziiei izotopice. Aceast analiz s-a efectuat pe eantioane (martor i tratate o or n plasm de HF). prelevate din vechiul testasment n acest scop s-a utilizat un aparat Perkin Elmer 2400 Series II CHNS/O Systemiar, iar investigarea prin metoda spectroscopic ESCA (XPS) cu un aparat Perkim Elmer PHI model 1600. Analizele de microscopie electronic de baleiaj au un rol deosebit n evaluarea modificrilor de suprafa ce pot fi generate de aciunea speciilor active din plasm. Pentru obinerea imaginilor electrono-microscopice s-a utilizat un microscop electronic de baleiaj (SEM): TESLA BS 301. Rezultate i discuii 3.1 Analize biologice n urma examinrii caracterelor macromorfologice a microorganismelor s-a evideniat faptul c tulpinile bacteriene izolate sunt att de tip S (culoare galben, consisten mucilaginoas, opace), ct i de tip R, care sunt predominante (margini neregulate, filamentoase sau lobate, profil plat sau uor ridicat, consisten uscat sau mucilaginoas, culoare galben, alb, bej sau alb-gri, opace sau transparente) (Fig. 2) La tulpinile bacteriene izolate din probele de hrtie (Tabel 1) s-au evideniat att coci Gram + grupai n tetrade sau n pachete cubice, ct i bacili Gram + i Gram .

Titlu articol

271

Fig. 2 Tulpinile bacteriene izolate de pe suportul papetar al crilor: a Vechiul Testament (VT), b Psaltire (P1), c- Psaltire (P2)

Tabelul 1. Examinarea micromorfologic a tulpinilor bacteriene izolate

Proba analizat VT Tipul Morfologic Coc Bacil Bacil Bacil P2 Bacil Afinitatea Tinctorial Gram + Gram + Gram + Gram Gram + Mod de grupare Tetrad Izolat Lanuri lungi Izolat Lanuri scurte Capacitatea de sporulare Nesporulat Spori terminali nedeformani Spori subterminali nedeformani i complet formai Nesporulat Spori centrali nedeformani i complet formai

P1

Examenul microbiologic iniial a evideniat prezena fungilor (Fig. 3) pe suprafaa papetar a crilor ce urmeaz a fi decontaminate. Speciile de fungi izolate aparin genurilor Aspergillus, Penicillium, Rhizopus, etc.

Fig. 3 Tipuri de fungi prezeni pe crile supuse decontaminrii: a Vechiul Testament (VT), b Psaltire (P1), c- Psaltire (P2)

272

Semnatar articol

Pentru aprecierea ncrcturii fungice s-a procedat la analiza coloniilor dezvoltate pe mediu de cultur, notndu-se pentru fiecare carte numrul de colonii (Tabel 2). Tabel 2 Gradul de ncrcare fungic a probelor
Nr. Crt. 1 2 3 Proba VT P1 P2 Nr. colonii fungi 2 1 3 Nr. colonii drojdii -

Dup decontaminarea Vechiul Testament, n condiiile amintite, se constat o dezvoltarea slab a coloniilor bacteriene dup 30 min de tratament(tabelul 3), ce poate fi atribuit prezenei cocilor Gram + care, probabil sunt mai rezisteni la aciunea speciilor active din plasm. n cazul Psaltirii P1se observ o inhibare total a dezvoltrii bacteriene i fungice dup 30 min de tratament. Dup acelai interval de timp, Psaltirea P2 manifest o dezvoltare fungic slab datorit infestrii iniiale mai pronunat n timp ce dezvoltarea bacterian a fost complet stopat. Dup 60 min de tratament analizele microbiologice indic inhibarea total, n toate cazurile a microorganismelor izolate. Tabel 3. Gradul de dezvoltare microbian i fungic iniial i dup efectuarea tratamentului de decontaminare
Proba Grad de dezvoltate bacterian Dup Dup Iniial 30 min 60 min tratament tratament +++---++----+-----Gradul de dezvoltare fungic Dup Dup Iniial 30 min 60 min tratament tratament ++----+-----+++ +----

VT P1 P2

Legend: +++ dezvoltare foarte bun; ++- dezvoltare bun; +-- dezvoltare slab; --absena dezvoltrii.

Titlu articol

273

3.2 Msurarea modificrilor cromatice Modificrile aprute la hrtia istoric au fost apreciate prin gradul de alb i luminozitate. Gradul de alb scade cu durata de tratament n plasm, n schimb luminozitatea crete (tabelul 4). Modificarea gradului de alb cu 2,2% dup 30 min. de tratament n plasm de HF, nu este sesizabil vizual. Tabel 4. Influena tratamentelor n plasm asupra gradului de alb i luminozitii
Proba VT VT VT Durata de tratare n plasm [min] Netratat 30 60 Grad de alb (%) 69,7 67,5 62,7 x 0,3680 0.3673 0,3658 y 0,3757 0,3755 0,3741 Y 49,6 51,0 52,1

3.3 Analiz elemental Datele obinute n urma efecturii analizelelor de compoziie elememntal procentual, pe eantioane de mici dimensiuni prelevate din Vechiul Testament nainte i dup tratamentul n plasm, sunt nserate n tabelel 5 i 6. Din valorile procentuale nregistrate n tabelul 5 - ce reflect compoziia n masa materialului - se observ c diferenele procentuale ale elementelor C, H, O, ntre probele iniiale i cele tratate o or n plasm de HF, sunt insesizabile, deci blocul de polimer nu este afectat de acest tratament. Analize ESCA (tabel 6), evideniaz modificri de suprafa ale materialelor, deci speciile active din plasm pot induce modificri numai de suprafa, la nivel nanometric. Tabelul 5. Analiza elemental pentru probele martor de hrtie prelevate din VT i cele tratate n plasm de HF, realizat pe analizor automat de elemente
Mostra Proba de referin (VT) Prob tratat 60 min n plasm de aer remanent C (%) 45.0 45.1 H (%) 6.5 6.4 N (%) S (%) O (%) 48.5 48.5

274

Semnatar articol

Tabelul 6. Analiza elemental pentru probele martor de hrtie prelevate din VT i cele tratate n plasm de HF, prin metoda ESCA (XPS)
Mostra Proba de referin (VT) Prob tratat 60 min n plasm de aer remanent C (%) 43 38 H (%) 6 4 N (%) S (%) O (%) 51 58

3.4 Analize prin microscopie electronic de baleiaj Imaginile electronomicroscopie obinute nainte i dup tratamentul n plasm pe probele prelevate din Vechiul Testament, sunt prezentate n figurile 7, 8, i 9.

Fig. 7. Hrtie VT proba martor

Fig. 8. Hrtie VT, tratat n plasm timp de 30 minute

Titlu articol

275

Fig. 9. Hrtie VT, tratat n plasm timp de 60 minute

Se tie c hrtia fabricat pn la nceputul secolului XIX, are la baz past fibroas din crpe sau bumbac, ncleiate n sistem alcalin i conin, ca material de umplere, carbonatul de calciu. Pe imaginile examinate se disting buci de fibre de bumbac dispuse n pasta de ncleiere. Aspectul global al suprafeei papetare este identic att pentru eantionul netratat n plasm, ct i pentru cele tratate n plasm 30 respectiv 60 de minute. Examinnd detalii de pe suprafaa fibrelor, la mriri mari, nu se observa modificri n topografia lor. 4. Concluzii n cele mai multe cazuri, un tratament de 30 min n plas rece de nalt frecven efectuat n aer remanent, este suficient pentru inhibarea complet a dezvoltrii microorganismelor (bacterii i fungi) Analiza elemental demonstreaz clar c modificrile apar numai la un nivel nanometric, biopolimerul celulozic nefiind afectat. Imaginile electronomicroscopie efectuate probei martor i cele realizate pe eantioane prelevate dup tratamentul n plasm nu relev modificri n topografia lor. n final, se poate concluziona ca plasma rece de nalt frecven reprezint o metod viabil, eficient i ecologic de decontaminare a suporturilor papetare, n condiiile respectri cu strictee a parametrilor de lucru. Utilizarea unui gaz inert (N2 sau Ar) cu o cantitate mic de O2 reduce la minim riscurile degradrilor.

276

Semnatar articol

ABSTRACT
Decontamination of Manuscripts in High Frequency Cold Plasma

Paper, obtained from cotton cellulose or wooden cellulose, is often invaded by biological contaminants (bacteria or fungi), which are difficult to remove by classical treatments especially if it is a composing element of a book. The removal of the above contaminating agents is done by physical-chemical means, which are often aggressive both to the material and the operator, limiting therefore their application possibilities. The high frequency plasma decontamination, a method tested for the last years in several research nucleuses, becomes an efficient, ecological, non-destructive alternative for the treatment of paper support. This work aims at studying the biocide effect of high frequency plasma on the micro-organisms specific to the museum items on paper support, setting the plasma working parameters in order to achieve the expected results while preserving the integrity of the paper support as well as establishing the time necessary for such a treatment, pending on the extent of the biological contaminating agent and degree of infestation. The results pointed out by micro-biological analyses confirm the biocidal action of high frequency plasma and the fact that the integrity of the paper support is maintained.