CURS GENETIC I.

SCURT ISTORIC AL GENETICII

Lect. dr. Oana DARAB

2012

CAPITOLUL I. SCURT ISTORIC AL GENETICII

1.1. INTRODUCERE

1.2. SCURT ISTORIC AL GENETICII UMANE 1.2.1. ETAPA PRETIINIFIC ( 1865). 1.2.2. ETAPA FUNDAMENTRII GENETICII CA TIIN I INTRODUCERII SALE N MEDICIN (1865 1960) 1.2.3. DEZVOLTAREA GENETICII MEDICALE (1960 1970).
1.3. IMPORTANA GENETICII N MEDICINA MODERN - BOLILE GENETICE

CAPITOLUL I. SCURT ISTORIC AL GENETICII

Genetica (din greac: genno = a da natere) este o ramur a biologiei, care studiaz fenomenele i legile ereditii i ale variabilitii organismelor. Noiunea de ereditate i are originea din latinescul hereditas, care nseamn motenire. Au aprut astfel teoriile corpusculare ale ereditii, care reluau concepia atomist a lui DEMOCRIT i susineau n esen c n fiecare organ, esut sau celul exista nite corpusculi care se acumuleaz n celulele sexuale i asigur transmiterea caracterelor la urmai. Dintre acestea citm: 1. Teoria panagenezei a lui Ch. DARWIN, 2. Teoria plastidelor a lui E. HAECKEL, 3. Teoria micelar a lui K.W. NAEGELI etc. Apogeul teoriilor corpusculare ale ereditii a fost reprezentat de teoria plasmei germinative a lui August WEISMANN. Termenul genetic a fost propus la cel de-al III-lea Congres internaional de hibridare i ameliorare a plantelor (inut la Londra) de ctre biologul englez William BATESON, n 1906.

Primele legi ale eredittii au fost descoperite n a doua jumtate a secolului al XIX-lea de ctre Gregor MENDEL: Legea puritii gameilor Legea segregrii independente a perechilor de caractere. Variabilitatea provine din latinescul variare care nseamn a se schimba. Variabilitatea reprezint calitatea sistemelor biologice individuale, antonim ereditii, care permite schimbarea coninutului informaiei ereditare, n irul de generaii. Biblia conine idei ce pot fi circumscrise geneticii. Spre exemplu, n cartea I a lui Moise, paragraful 11, scrie: iarb cu smn intr-nsa, dup felul i asemnarea ei, i pomi roditori, care s dea rod cu smn n sine, dup fel de pmnt. n capitolul 6, lui Noe i se recomand s ia pe corabie din toate soiurile de psri naripate dup fel, din toate soiurile de animale dup fel i din toate soiurile trtoare dup fel. Prin urmare, se pot descifra, n aceste texte, principiile ereditii i variabilitii, stipulate ulterior n genetic. De asemenea, exist, la poporul roman, proverbe, ghicitori, concept cu tent genetic: Ce nate din pisic, oareci mannc; Achia nu sare departe de trunchi etc.

1.2. SCURT ISTORIC AL GENETICII UMANE

1.2.1. ETAPA PRETIINIFIC ( 1865).

n aceast etap s-au realizat numeroase observaii corecte privind agregarea familial i transmiterea ereditar a unor boli (hemofilie, polidactilie, albinism). Primele observaii privind ereditatea uman au fost realizate n Antichitate. Spre ex: PLATON, n Grecia antic - recomand reproducerea selectiv a oamenilor sntoi, detepi i curajoi, fiind iniiatorul eugeniei platonice ce se practica n cetatea Sparta i prin care se urmrea eliminarea din societate a indivizilor cu defecte fizice sau pshihice. n Sparta, de pe stnca Tarpeian erau aruncai toi copii nscui cu malformaii. Filosoful ANAXAGORA a formulat idei de natur performist (toate organele viitorului organism, la dimensiuni miniaturale, sunt coninute n spermatozoizi), idei care au dominat lumea tiinific pn n vremea lui MENDEL. HIPOCRATE considera c germenii noului individ sunt produi de ctre ntregul organism, att de prile sntoase, ct i de cele bolnave. ARISTOTEL a elaborat o ipotez ereditar, ipoteza hematogen a spermei, potrivit creia sperma se nate din snge.

 n Roma, poetul TITUS LUCREIUS CARUS (98 55 .e.n.), n poemul De Rerum Natura, referindu-se la motenirea caracterelor la copii, afirm c acetia pot semna cu mama sau cu tata, dup cum smna uneia sau altuia a fost mai tare. Mult mai trziu, MENDEL a demonstrat principiul dominanei i recesivitii. Figuri proeminente i promotori ai cercetrilor n domeniul geneticii au fost: - P. BELON (1517 1564), - ULISE ALDROVANDI (1522 1605), - GASPAR BAUHIN (1550 1625) etc. n 1651, W. HARWEY a stabilit un adevr incontestabil: toate vieuitoarele provin din ou fecundate. ANTONY van LECUWENHOECK (16321723) descoper (cu microscopul perfecionat de el nsui) i descrie multe microorganisme i spermatozoizi de om, cine i iepure. J. GOSS i W. HERBERT, 1822 au sesizat i descris fenomenele dominanei i segregrii la plante, fenomene ce au reprezentat punctual forte n concepia lui MENDEL.

1.2.2. ETAPA FUNDAMENTRII GENETICII CA TIIN I INTRODUCERII SALE N MEDICIN (1865 1960)

Fundamentarea geneticii ca tiin a fost fcut de ctre G. MENDEL (1865), care introduce conceptul genei i formuleaz legile ereditii. La nceputul secolului XX, prin contribuia mai multor cercettori dar mai ales a lui T. H. MORGAN (primul premiu Nobel pentru genetic) se formuleaz teoria cromosomic a ereditii. Astfel, apar primele studii de genetic n medicin: F. Galton (1890) analizeaz unele caractere umane complexe, "cantitative" (talia, inteligena), introduce conceptul interaciunii dintre ereditate i mediu, iniiaz studiul gemenilor i dermatoglifelor; A. Garrod (1902) introduce mendelismul n medicin prin studiul primelor "erori nnscute de metabolism" (alcaptonuria, albinismul, cistinuria i pentozuria) precum i ideea individualitii biochimice, prin care explic rspunsurile diferite la droguri i infecii ale unor persoane diferite. n secolul al XIX-lea NASSE a studiat regulile dup care se manifest familial hemofilia, o cunoscut boal a sngelui. La evrei, nc din Antichitate - n Talmud scrie c n familiile unor membri la care se observa pierderi de snge dificil de oprit, se interzicea circumcizia.

LANDSTEINER, n 1900, descoper grupele de snge din sistemul ABO demonstrnd c tipurile respective sunt ereditare. Mai trziu, prin lucrrile lui LANDSTEINER i ale altor cercettori, s-a descoperit factorul sangvin Rh, precum i faptul c bolile hemolitice ale nou-nscutului se datoreaz incompatibilitii imunologice dintre mama i ft. n deceniile cinci i ase ncepe era geneticii moleculare, prin demonstrarea rolului genetic al ADN (AVERY i colab., 1944) i descoperirea modelului structurii ADN (WATSON i CRICK, 1953). Apariia geneticii medicale a fost determinat de dou descoperiri remarcabile: 1. L. PAULING (1949) demonstreaz c o boal ereditar, anemia hemolitic cu hematii n secer (sicklemia sau drepanocitoza) este produs de o hemoglobin anormal (Hb S), prin nlocuirea unui singur aminoacid; sicklemia devine prima boal molecular identificat la om; 2. J. LEJEUNE (1959) descoper prima anomalie cromosomic la om, trisomia 21, n sindromul Down. n prima decad a secolului al XX-lea se dezvolta ideea eugeniei n Europa i SUA, prin care se considera c trebuie ncurajate cstoriile ntre persoanele cu caractere utile (eugenie pozitiv) i descurajate cele ntre persoanele bolnave, ntrziate mintal (eugenie negativ).

n Canada, G. LANBERGE a demonstrat c toi bolnavii de tirosinemie (exces de tirosin n snge), maladie care determin tulburri hepatice grave, au ca stramoi un cuplu de normanzi care au emigrat n Canada n secolul al XVII-lea. O excepie de la transmisia mendelian a unei maladii genetice este acondroplastia, maladie responsabil pentru unele tipuri de nanism. Un exemplu este neurofibromatoz care n unele cazuri se manifest prin pete "cafea cu lapte" pe piele i tumori ale pielii, iar n alte cazuri numai prin pete ale pielii. ncepnd din a doua jumtate a secolului al XIX-lea, a nceput utilizarea metodei gemenilor mono i dizigoi. S-a demonstrat pe aceast cale c, de pild, hipertensiunea arterial este parial determinata genetic. De asemenea, unele tipuri de cancere apar cu frecven mai mare la gemenii monozigoi. Se utilizeaz n acest sens i cunotinele de genetic cantitativ prin care se urmrete s se descopere cum sunt determinate genetic caracterele cantitative (talia, greutatea, pigmentaia etc).

Bazele citologiei umane au fost puse n 1956 prin lucrarea lui H. J. TJIO i A. LEVAN -The cromosome number of man care, folosind socul hipotonic i colchicina ce blocheaz diviziunea celular n metafaze, au reuit s descopere c numrul exact de cromozomi umani este de 2n=46. Imediat, cercetrile lor au fost confirmate de C. E. FORD i J. L. HAMERTON (1956), care examinnd metafaza I din esutul testicular au identificat 23 de cromozomi bivaleni.

La noi, genetica a fost tratat pentru prima dat mai dezvoltat la cursul de biologie general inut de R. CODREANU la Facultatea de tiine din Cluj, apoi la Timioara n timpul refugiului (1941-1945) i la catedra nfiinat la Universitatea din Bucureti (1945). Problemele de genetic sunt dezbtute n volumul Probleme de eredopatologie publicat de S. Cupcea (1944), n articolele scrise de TR. SVULESCU i I. BIBERI (1944) i n Tratatul elementar de antropobiologie scris de V. PREDA (1947). Medici celebri ca C.I. PARHON (1874-1969) i T. M. MILCU au studiat factorii ereditari n cazul unor endocrinopatii i a ereditii hipertiroidice.

1.2.3. DEZVOLTAREA GENETICII MEDICALE (1960 1970). n aceast scurt perioad (deceniul de aur) se acumuleaz numeroase dovezi privind rolul important al factorilor genetici n producerea bolilor umane. S-au amplificat aplicaiile practice ale geneticii medicale, care capt o pondere tot mai important n practica medical : perfecionarea diagnosticului bolilor metabolice i a depistrii sistematice la nou nscui a unor boli frecvente i tratabile (fenilcetonuria, hipotiroidia congenital); ameliorarea tehnicilor de analiz cromosomic, prin metode noi de marcaj n benzi, care permit identificarea precis a unor anomalii structurale minime; dezvoltarea sfatului genetic (evaluarea riscului de apariie a unor boli genetice n familii); introducerea i amplificarea diagnosticului prenatal; optimizarea tratamentului simptomatic i patogenic n diferite boli genetice, care nceteaz s mai fie "fr sperane terapeutice".

Primul sindrom provocat de o deleie cromozomial a fost descoperit n 1963 de J. LEJEUNE i colaboratorii, este vorba de sindromul "cri du chat". n perioada 1968 - 1970 se pun bazele tehnicilor de bandare cromozomiale. Primele experimente de acest fel au fost fcute de T. CASPERSON i colaboratorii, care au elaborat tehnica benzilor Q, benzi fluorescente vizibile dup colorarea cu quinacrina sau unii compui ai acesteia. Ulterior, au fost elaborate i alte tipuri de benzi cromozomiale, cum sunt: benzile G (giemsa), benzile R (reversie), benzile C (heterocromatina constitutiv), benzile T (Telometrice) etc. De asemenea, au fost elaborate i alte metode eficiente pentru studiul complementului cromozomial uman: tehnica SCE (sister chromatid exchange), testul cromatinei sexuale, tehnica amniocentezei pentru realizarea diagnosticului prenatal etc.

La noi n ar, (1948-1989), avntul cercetrii n domeniu a fost frnat prin prelucrarea fr reserve a miciurinismului, care a provocat exagerri duntoare i a condus la o criz n cercetarea genetic din ara noastr (E. POP i R. CODREANU, 1975). Dup anul 1965 a urmat o perioad de fals libertate, cnd cercettorii puteau s scrie din nou n strintate i s trimit lucrri la publicat, dar numai cenzurate, i s participe la manifestri tiinifice, dar numai cu aprobare de la partid. ncepnd cu 1964 au aprut culegeri de lucrri publicate sub titluri ca: Metode noi n genetic (1962), Genetica (1964, 1965, 1974), Introducere n genetica molecular (1964), Genetica n actualitate (1966), Genetica uman (1966), Ereditatea uman (1969), Citogenetica (1969) avnd ca autori sau coordonatori pe I. MORARU, S. ANTOHI, M. MANOLIU, TR. CRCIUN, P. RAICU, S. BRATOSIN, T. M. MILCU, C. MAXIMILIAN i alii.

n diferite ramuri ale geneticii au lucrat colective de cercettori care au adus contribuii nsemnate n domeniile: o genetic teoretic (N. BOTNARIUC, I. MORARU, V. SHLEANU, V. PREDA, M. ERBAN, etc); o genetic molecular (R. PORTOCAL, N. CAJAL, C. NICOLAU, etc); o genetic vegetal (N. CEAPOIU, N. GIOSAN, P. RAICU etc); o genetic animal (N. TEODOREANU, GH. RADU, V. VOICULESCU, M. MANOLACHE, B. VLDESCU etc) o genetic uman (t. M. MILCU, I. MORARU, M. MAXIMILIAN, O. COSTCHEL, N. SIMIONESCU i alii). Cu toate acestea, n volumul Istoria biologiei n date (GH. MOHAN et al., 1996) n capitolul Genetica, printre sutele de evenimente din toat lumea sunt incluse doar patru lucrri romneti pentru perioada 1948-1989, scrise de I. TARNAVSCHI (1948) i L. GAVRIL (1978, 1980, 1987).

1.2.4. NOUA GENETIC UMAN I MEDICIN MOLECULAR (1980 ) a) Revoluia metodologic a geneticii moleculare Pn n anul 1970 genele erau entiti virtuale, inaccesibile analizei biochimice. La nceputul deceniului opt se descoper tehnici performante de analiz direct a ADN, a genei. Ele au permis: identificarea i localizarea unor gene; izolarea i clonarea lor; descifrarea "mesajului" genelor (prin secvenializarea ADN) i, eventual, expresia lor n diferite celule "gazd", n care se obin proteinele codificate de gen. Aceste tehnici de "manipulare genetic" sau "ADN recombinant" reprezint o veritabil "inginerie genetic". Genetica iese din cadrul su abstract i ncepe o nou er a geneticii moleculare. Iniial, noile metodologii ale geneticii moleculare, au fost receptate de ctre lumea tiinific cu justificat team, atribuindu-li-se pericolul unor consecine nefaste i necontrolabile. Rezervele s-au dovedit ulterior puin justificate i, treptat, "ingineria genetic", simplificndu-i procedurile iniiale i crescndu-i gradul de accesibilitate, a "invadat" toate sectoarele biologiei i n special medicina.

Tabelul 1. Lista laureailor Premiilor Nobel pentru descoperiri n domeniul geneticii

ANUL 1933 1946 1958 1959 1962 Thomas Hunt Morgan H J Muller G W Beadle, E L Tatum, J Lederberg S Ochoa, A Kornberg Francis Crick, James Watson, Maurice Wilkins Structura molecular a ADN LAUREAI DESCOPERIRE

1965
1968

Francois Jacob, Jacques Monod, Andre Kwoff

Robert Holley, Gobind Khorana, Marshall Nirenberg

Reglarea genetic
Descifrarea codului genetic

1975

Renato Dulbecco, Howard Temin, David Baltimore

Interaciunea dintre virusurile tumorale i ADN nuclear

1978 1980 1980 (chimie) 1983 1985

William Arber, Daniel Nathans, Hamilton Smith Baruj Bernacerraf, George Snell, Jean Dausset F Sanger, Paul Berg, W Gilbert Barbara McClintock Michael Brown, Joseph Goldstein

Endonucleazele de restricie Controlul genetic al rspunsului imun

Genele mobile (transposonii) Receptorii celulari n hipercolesterolemia familial

1987
1989 1993 1993 (chimie) 1995

Tonegawa Susumu
Michael Bishop, Harold Varmus Richard Roberts, Philip Sharp K B Mullis, M Smith Edward Lewis, Christiane Nusslein-Volhard, Eric Wieschaus

Aspectele genetice ale anticorpilor

Studiul oncogenelor Structura discontinu a genelor

Genele homeotice si alte gene implicate n dezvoltare

b) Noua genetic uman i medicina molecular. Genetica medical - ca parte a geneticii umane a devenit o specialitate clinic distinct care se ocup de diagnosticul i ngrijirea pacienilor cu boli genetice precum i de familiile lor prin: sfat genetic, diagnostic prenatal, screening neonatal sau diagnostic presimptomatic. n fiecare an se nasc n Romnia circa 7200 copii cu anomalii congenitale iar 12.000 vor fi afectai de diferite boli genetice nainte de 25 de ani. Deci circa 20.000 de copii i familiile lor (n care i alte persoane au un risc genetic) au nevoie anual de diagnostic, explorri i sfat genetic. Cu ajutorul tehnicilor de analiz molecular a nceput descifrarea i cartografierea genomului uman. Pn n prezent au fost identificate i localizate pe cromosomii umani peste 10000 de gene normale i mutante. S-au studiat efectele unor gene "importante" n fiziologia i patologia uman: genele pentru imunoglobuline, interferoni, factori de cretere, receptori hormonali, lipoproteine, colagen, oncogene, etc. n anul 1980 s-a iniiat "Proiectul genom uman", n februarie 2001 s-a finalizat schita secvenei ntregului genom uman i se estimeaz c n prezent, toate cele circa 30.000 - 40.000 de gene ar fi identificate i analizate.

1.3. IMPORTANA GENETICII N MEDICINA MODERN - BOLILE GENETICE

Bolile genetice sunt numeroase; se cunosc peste 10.000 de boli determinate sau condiionate genetic; ele au o mare diversitate, se manifest la orice vrst, orice sistem de organe i de aceea se regsesc n aproape toate specialitile medicale. Bolile gentice sunt frecvente; ele afecteaz cel puin 5-8% din nou-nscui (1 din 20) i probabil 30 40 % de indivizi n tot cursul vieii (tabelul 2)

Tabelul 2. Incidena bolilor genetice (modificat dup Connor & Ferguson-Smith, 1997 i Jorde et al. 2000)

Tipuri majore de boli genetice

Numr de subtipuri

Incidena la 1000 nou-nascui vii

Boli cromosomice (ex.: sindrom Down) Boli monogenice (mendeliene) Autosomal dominante (ex.: boala polichistic renal a adultului = ADPKD; Autosomal recesive (ex., fibroza chistic) Legate de X (ex.: hemofilia; daltonismul)

> 600

6-9 24

8544* 527*

20 2 2

Boli mitocondriale Boli multifactoriale (debut nainte de 25 ani) Malformaii congenitale majore (ex., spina bifida, DSV, despicturile labio-maxilopalatine) Boli comune ale adultului (ex.: hipertensiunea arterial, diabetul zaharat, boala ulceroas, schizofrenia)

60

Rare 20 - 50

>50

>50

Total (nainte de 25 ani) Boli genetice ale celulelor somatice Total >100

50 - 83 250 300 - 383

Sindrom Down

Polichistic renal a adultului = ADPKD

Fibroza chistic

Daltonismul

Spina bifida

Despicturile labio-maxilo-palatine

Hipertensiunea arterial

Diabetul zaharat

Boala ulceroas Schizofrenia

n sec. XX sntatea public s-a mbuntit i, ca rezultat, mortalitatea infantil s-a redus, iar bolile genetice au devenit o cauz major a deceselor la copil. De exemplu, n Marea Britanie, decesele prin boli genetice erau: 16,5% n 1914 i 50% n 1976. 30-50 % din internrile n spitalele de copii sunt determinate de afeciuni genetice sau anomalii congenitale; circa 10 % din internrile n spitalele de aduli sunt produse de boli genetice sau condiionate genetic. circa 50% din avorturile spontane din trim. I sunt produse de anomalii cromosomice. aproximativ 2-3% din nou-nscui au o anomalie congenital major, deseori produs de factori genetici; ali 2% nou-nscui au o anomalie cromosomic sau o boal monogenic. Bolile genetice sunt boli cronice care realizeaz frecvent un handicap fizic, senzorial, motor sau mintal. Bolile genetice produc peste 50% din cazurile severe de retard mintal, de surditate sau cecitate la copil. Ingrijirea pacienilor cu boli genetice implic cheltuieli importante.