Obiectivele: Obiectivele:

Noiune despre enzime, natura chimic i rolul biologic al enzimelor. Diferena dintre aciunea enzimelor i Noiune despre enzime, natura chimic i rolul biologic al enzimelor. Diferena dintre aciunea enzimelor i
catalizatorilor nebiologici. catalizatorilor nebiologici.
Dovezile naturii proteice a enzimelor. Structura enzimelor. Proenzimele (zimogenii. Noiune despre centrul activ i Dovezile naturii proteice a enzimelor. Structura enzimelor. Proenzimele (zimogenii. Noiune despre centrul activ i
centrul alosteric al enzimelor. centrul alosteric al enzimelor.
!zoenzimele i rolul lor. !zoenzimele i rolul lor.
"ofactorii enzimelor. "oenzimele i ionii metalici. #unciile de coenzime a vitaminelor i microelementelor. "ofactorii enzimelor. "oenzimele i ionii metalici. #unciile de coenzime a vitaminelor i microelementelor.
Natura chimic (structura vitaminelor $%, $&, $', PP i rolul lor ca coenzime. Natura chimic (structura vitaminelor $%, $&, $', PP i rolul lor ca coenzime.
(ecanismul de aciune al enzimelor. "entrul activ al enzimelor i rolul lui )n formarea i transformarea complecilor (ecanismul de aciune al enzimelor. "entrul activ al enzimelor i rolul lui )n formarea i transformarea complecilor
intermediari dintre enzim i substrat. *olul modificrilor conformaionale reciproce ale moleculei enzimei i intermediari dintre enzim i substrat. *olul modificrilor conformaionale reciproce ale moleculei enzimei i
substratului la favorizarea catalizei (reaciei. substratului la favorizarea catalizei (reaciei.
Nomenclatura (denumirea i clasificarea enzimelor. "aracteristica general a claselor i subclaselor principale de Nomenclatura (denumirea i clasificarea enzimelor. "aracteristica general a claselor i subclaselor principale de
enzime. Numrul de cod al enzimei. enzime. Numrul de cod al enzimei.
Enzimele Enzimele
+ cea mai imens + cea mai imens i specializat i specializat clas clas de proteine, care regleaz de proteine, care regleaz i coordoneaz i coordoneaz decurgerea armonioas decurgerea armonioas a reac a reac iilor chimice. iilor chimice.
+ + reprezint reprezint catalizatori catalizatori biologici biologici, , care care m m resc resc viteza viteza reac reac iei iei chimice chimice i i rezult rezult la la sf sf) )r r it it nemodifica nemodifica i i cantitativ cantitativ i i calitativ calitativ. .
+ ac + ac ioneaz ioneaz strict strict ) )ntr+o anumit ntr+o anumit consecutivitate consecutivitate i cu o anumit i cu o anumit specificitate. specificitate.
+ energia substan + energia substan elor reagente trece dintr+o form elor reagente trece dintr+o form )n alta cu o eficacitate mare. Se acumulez )n ,-P ce este utilizat )n alta cu o eficacitate mare. Se acumulez )n ,-P ce este utilizat )n )n
procesele vitale. procesele vitale.
Particularitile comune pentru E Particularitile comune pentru E i catalizatori nebiologici. i catalizatori nebiologici.
,mbii respec aceleai legi ale catalizei. ,mbii respec aceleai legi ale catalizei.
%. catalizeaz numai reaciile posibile din punct de vedere termodinamic %. catalizeaz numai reaciile posibile din punct de vedere termodinamic/ /
&. nu modific direcia reaciilor &. nu modific direcia reaciilor/ /
0. nu modific echilibrul reaciei dar conduc la instalarea mai rapid a strii de echilibru/ 0. nu modific echilibrul reaciei dar conduc la instalarea mai rapid a strii de echilibru/
1. nu se consum )n procesul reaciei 1. nu se consum )n procesul reaciei, , deci se regsesc, din punct de vedere cantitativ i calitativ, )ntr+o stare chimic deci se regsesc, din punct de vedere cantitativ i calitativ, )ntr+o stare chimic
neschimbat, put)nd participa la un nou act catalitic. neschimbat, put)nd participa la un nou act catalitic.
2nzimele 2nzimele au au particulariti prin care se deosebesc de cata particulariti prin care se deosebesc de catal lizatorii nebiologici izatorii nebiologici
%.3iteza reaciei enzimatice crete de milioane de ori. %.3iteza reaciei enzimatice crete de milioane de ori. Ex: Ex: Atomul de Fe posed posibiliti peroxidazice 1 mg de Fe n Atomul de Fe posed posibiliti peroxidazice 1 mg de Fe n
componena catalazei poate nlocui o ton de Fe metalic. componena catalazei poate nlocui o ton de Fe metalic.
&. 2nzimele posed o )nalt specificitate de aciune. Deci fiecare 2 catalizeaz, un anumit tip de reacii sau transformarea &. 2nzimele posed o )nalt specificitate de aciune. Deci fiecare 2 catalizeaz, un anumit tip de reacii sau transformarea
unui anumit S. unui anumit S.
0. 2.catalizeaz reaciile far formarea produselor intermediare adic randamentul este de %445. 0. 2.catalizeaz reaciile far formarea produselor intermediare adic randamentul este de %445.
1. 2nzimele, reacioneaz )n condiii bl 1. 2nzimele, reacioneaz )n condiii bl) )nde+ parametri optimi de aciune a enzimei + soluii apoase diluate, p6 valorii nde+ parametri optimi de aciune a enzimei + soluii apoase diluate, p6 valorii
fiziologice, t anumita i presiune adecvat. fiziologice, t anumita i presiune adecvat.
7. ,ctivitatea 2 i de aici i viteza reaciilor sunt reglate. 7. ,ctivitatea 2 i de aici i viteza reaciilor sunt reglate.
'. 2 catalizeaz reaciile )n ambele direcii '. 2 catalizeaz reaciile )n ambele direcii
8. 3iteza reaciei enzimatice este direct proporional cu cantitatea 2 8. 3iteza reaciei enzimatice este direct proporional cu cantitatea 2
9. 2:ist o anumit dependen a vitezei reaciei enzimatice de concentraia S. 9. 2:ist o anumit dependen a vitezei reaciei enzimatice de concentraia S.
"u creterea concentraiei substratului are loc mrirea proporional a vitezei reaciei ,;ung "u creterea concentraiei substratului are loc mrirea proporional a vitezei reaciei ,;ung) )nd la o concentraie ma:im nd la o concentraie ma:im
mai sus de care viteza nu mai crete. mai sus de care viteza nu mai crete.
Natura chimic Natura chimic
2nzimele 2nzimele sint sint proteine proteine i i posed posed toate toate propriet propriet ile ile fizico fizico+ +chimice chimice, , specifice specifice acestor acestor macromolecule macromolecule ( (solubilitate solubilitate, ,
propriet propriet osmotice osmotice, , sarcin sarcin electric electric net net, , denaturare denaturare termic termic, , reac reac ii ii chimice chimice . .a a. .
,ctivitatea lor e dependent de pstrarea structurii native a proteinei. ,ctivitatea lor e dependent de pstrarea structurii native a proteinei.
Dovezile e:perimentale. Dovezile e:perimentale.
%. Sunt alctuite din ,, %. Sunt alctuite din ,,
&. Prezena macromolecule. &. Prezena macromolecule.
0. <n apa formeaz substane coloidale cu proprietdtile sale specifice 0. <n apa formeaz substane coloidale cu proprietdtile sale specifice
1. Prezintd electroliti amfoliti 1. Prezintd electroliti amfoliti
s. Sunt termolabili s. Sunt termolabili i anume. distru i anume. distrug gerea lan erea lan ului polipeptidic prin fierbere ului polipeptidic prin fierbere ) )n solu n solu ii acide sau bazice ii acide sau bazice (hidroliza sau (hidroliza sau
d denaturarea lor. enaturarea lor.
'. 2nzimele, fiind proteine sunt supuse aciunii altor 2 care scindeaz proteinele 2:. Pepsina )n mediu acid scindeaz '. 2nzimele, fiind proteine sunt supuse aciunii altor 2 care scindeaz proteinele 2:. Pepsina )n mediu acid scindeaz
amilaza. amilaza.
8. "el mai solid argument este c in condii de laborator din ,, 8. "el mai solid argument este c in condii de laborator din ,,
au fost sintetizate. ribonucleaza = au fost sintetizate. ribonucleaza = scindeaz acizii nucleici scindeaz acizii nucleici
lizozima + lizozima + ce distruge capsulele microorganismelor. ce distruge capsulele microorganismelor.
%
Enzim Enzimele ele pot fi : pot fi :
Proteine simple sau con;ugate. Proteine simple sau con;ugate.
"ele simple sint alctuite numai din "ele simple sint alctuite numai din ,, ,,
"ele con;ugate sint asociate cu compui ce au mase moleculare mici, dializabili i termostabili =cofactor "ele con;ugate sint asociate cu compui ce au mase moleculare mici, dializabili i termostabili =cofactor
"ind aceti compui organici sint strins legai )n structura enzimei poart denumirea de "ind aceti compui organici sint strins legai )n structura enzimei poart denumirea de grupari prostetice grupari prostetice. cind, ins . cind, ins
imbinarea lor este usor disociabil+poart denumirea de imbinarea lor este usor disociabil+poart denumirea de coenzime coenzime. .
,ceti biocatalizatori se numesc holoenzime, iar componena proteic + apoenzima de care depinde specificitatea. ,ceti biocatalizatori se numesc holoenzime, iar componena proteic + apoenzima de care depinde specificitatea.
"ofactori pot ti. cationii unor metale, "ofactori pot ti. cationii unor metale,
mai rar unii anioni, mai rar unii anioni,
substanele asemanatoare cu nucleotidele, substanele asemanatoare cu nucleotidele,
precum i vitaminele precum i vitaminele ) )n forma lor activ n forma lor activ . .
Coenzimele Coenzimele ndeplinec diferite roluri : ndeplinec diferite roluri :
%. %. stabilizeaz conformaia activ a moleculei stabilizeaz conformaia activ a moleculei
&. &. prezint veriga de legatur intre S i ", prin legturi coordinative prezint veriga de legatur intre S i ", prin legturi coordinative
0. 0. coenzimele pot indeplini actul de cataliz 2:. transportul electronilor. coenzimele pot indeplini actul de cataliz 2:. transportul electronilor.
*olul ionilor este legat de prezen *olul ionilor este legat de prezen a lor a lor ) )n componenta 2. 2:. "u+citocromo:idaza n componenta 2. 2:. "u+citocromo:idaza
Substrat Substrat ( (S S + este substana asupra creia actioneaz 2. + este substana asupra creia actioneaz 2.
P+ produsul reactiei P+ produsul reactiei
Claificarea coenzimelor Claificarea coenzimelor
"o vitaminice "o vitaminice
-iaminice -iaminice
#lavinice #lavinice
Nicotinamidice Nicotinamidice
Pirido:inice Pirido:inice
#olice #olice
"obamidice "obamidice
$iotinice $iotinice
lipoice lipoice
"o nevitaminice "o nevitaminice
(nucleotidice/ metaloporfirinice,peptidice (nucleotidice/ metaloporfirinice,peptidice
!tructura enzimelor !tructura enzimelor
(asa moleculara a 2 e de mii de ori mai mare dec (asa moleculara a 2 e de mii de ori mai mare dec) )t masa molecular a substratului i deci 2 acioneaz nu cu toat t masa molecular a substratului i deci 2 acioneaz nu cu toat
molecula dar cu o parte, un anumit sector+ acest loc de aciune cu S se numete ", molecula dar cu o parte, un anumit sector+ acest loc de aciune cu S se numete ",
", + combinarea unical )n spaiu i )n timp a anumitor resturi de ,, care asigur interaciunea cu S i transformarea ", + combinarea unical )n spaiu i )n timp a anumitor resturi de ,, care asigur interaciunea cu S i transformarea
ulterioar a acestuia ulterioar a acestuia
"nele particulariti ale centrului activ #C$%: "nele particulariti ale centrului activ #C$%:
"entrul activ este alctuit dintr+un >centru de legare> i un >centru catalitic>. ,dic )n centrul activ unele grupri (sau "entrul activ este alctuit dintr+un >centru de legare> i un >centru catalitic>. ,dic )n centrul activ unele grupri (sau
resturi ale aminoacizilor sint implicate )n legarea substratului, altele asigur resturi ale aminoacizilor sint implicate )n legarea substratului, altele asigur cataliza propriuzis. cataliza propriuzis.
+ ", ocup o parte relativ mic din volumul enzimei i ma;oritatea restului de aminoacizi )n molecula enzimei nu + ", ocup o parte relativ mic din volumul enzimei i ma;oritatea restului de aminoacizi )n molecula enzimei nu
contacteaza cu substratul. contacteaza cu substratul.
+ ", e o structura tridimensionala (nu e punct, linie, sau plan + o structur compus la formarea careia particip grupe ce + ", e o structura tridimensionala (nu e punct, linie, sau plan + o structur compus la formarea careia particip grupe ce
aparin diferitor resturi de aminoacizi, ce )n secvena liniar se afl la deprtare aparin diferitor resturi de aminoacizi, ce )n secvena liniar se afl la deprtare
+ S relativ slab se leag cu 2. + S relativ slab se leag cu 2.
+", are forma de >ad)ncitur> sau >cavitate> (ant, dispictur, unde nu+i acces la apa, cu e:cepia c)nd apa este un reagent +", are forma de >ad)ncitur> sau >cavitate> (ant, dispictur, unde nu+i acces la apa, cu e:cepia c)nd apa este un reagent
al reaciei. al reaciei.
#i:area specific e dependent de poziia bine determinat a atomilor )n ",. S intra #i:area specific e dependent de poziia bine determinat a atomilor )n ",. S intra ) )n ",, dac e asemntor dup forma n ",, dac e asemntor dup forma
lui. lui.
Centrul aloteric Centrul aloteric #$llo tereo & alt loc% #$llo tereo & alt loc% i efectorii aloterici i efectorii aloterici
(ulte enzime )n afar de centrul activ posed i centrul alosteric sau centrul de reglare. Substanele care se combin (ulte enzime )n afar de centrul activ posed i centrul alosteric sau centrul de reglare. Substanele care se combin
cu centrul alosteric al enzimei i modific activitatea ei poart denumirea de efectori alosterici (inhibitori sau activatori. Sub cu centrul alosteric al enzimei i modific activitatea ei poart denumirea de efectori alosterici (inhibitori sau activatori. Sub
aciunea efectorilor se modific configuraia moleculei enzimatice i simultan i conformaia ", ce la r)ndul su posed aciunea efectorilor se modific configuraia moleculei enzimatice i simultan i conformaia ", ce la r)ndul su posed
proprietatea de a reaciona cu substratul. 2fectorii alosterici realizeaz prin urmare reglarea metabolismului. proprietatea de a reaciona cu substratul. 2fectorii alosterici realizeaz prin urmare reglarea metabolismului.
Ce e caracteritic pentru enzime Ce e caracteritic pentru enzimele le aloteric aloterice e: :
au ca au ca i toate enzimele centru catalitic, unde se fi:eaz i se modific i toate enzimele centru catalitic, unde se fi:eaz i se modific S S, dar mai au un alt centru , dar mai au un alt centru, , pentru fi:are pentru fi:are a a
metabolitului reglator, numit efector sau modulator. metabolitului reglator, numit efector sau modulator.
&
moleculele moleculele 2 2 alosterice sint mai mari, mai comple:e i sint oligomere pare/ alosterice sint mai mari, mai comple:e i sint oligomere pare/
cau cinetica lor + viteza reaciilor )n dependen de concentraia substratului are forma sigmoldal, dar nu hiperbolica, cau cinetica lor + viteza reaciilor )n dependen de concentraia substratului are forma sigmoldal, dar nu hiperbolica,
cauzat cauzat de urm de urm rile interac rile interac iunii iunii ) )ntre protomeri ce leag ntre protomeri ce leag S S )n mod cooperativ (e:emplu mioglobina )n mod cooperativ (e:emplu mioglobina i hemoglobina. i hemoglobina.
Natura chimic #tructura% vitaminei' PP i rolul ei ca coenzim Natura chimic #tructura% vitaminei' PP i rolul ei ca coenzim
*olul. *olul.
Particip )n reaciile de o:ido+reducere. Particip )n reaciile de o:ido+reducere.
Natura chimic #tructura% vitaminei () i rolul ei ca coenzim Natura chimic #tructura% vitaminei () i rolul ei ca coenzim
Derivaii vitaminei $%(tiamiana+ -PP Derivaii vitaminei $%(tiamiana+ -PP
*olul. *olul.
Decarbo:ilarea o:idativ a piruvatului Decarbo:ilarea o:idativ a piruvatului
Decarbo:ilarea o:idativ a Decarbo:ilarea o:idativ a ? ? cetoglutaratului cetoglutaratului
*eacii de transcetolare *eacii de transcetolare
Natura chimic #tructura% vitaminei (* i rolul ei ca coenzim' Natura chimic #tructura% vitaminei (* i rolul ei ca coenzim'
Derivai ai vitaminei $& Derivai ai vitaminei $&
(#(N sau #,D (#(N sau #,D
*olul. *olul.
Particip )n reaciile de o:ido+reducere. Particip )n reaciile de o:ido+reducere.
+ + Dezaminarea ,, (aminoacido:idaza Dezaminarea ,, (aminoacido:idaza
+ + Degradarea aldehidelor (aldehidD6 Degradarea aldehidelor (aldehidD6
+ + Degradarea purinelor (:antino:idaza Degradarea purinelor (:antino:idaza
+ + "iclul @rebs (succinatD6 "iclul @rebs (succinatD6
+ A:idarea ,B (dihidrolipoilD6 + A:idarea ,B (dihidrolipoilD6

Natura chimic #tructura% vitaminei (+ i rolul ei ca coenzim' ,onii de metale -cofactori ai E Natura chimic #tructura% vitaminei (+ i rolul ei ca coenzim' ,onii de metale -cofactori ai E
2 care )n calitate de cofactori conin metale = metaloenzime 2 care )n calitate de cofactori conin metale = metaloenzime
(etalele sunt fi:ate de apoenzim prin legturi electrostatice la care particip resturile de ,, acizi (,sp, Blu sau (etalele sunt fi:ate de apoenzim prin legturi electrostatice la care particip resturile de ,, acizi (,sp, Blu sau
bazici (,rg, CDz, 6is bazici (,rg, CDz, 6is
2:emple. + citocromii, catalaza (#e 2:emple. + citocromii, catalaza (#e
+ "itocromo:idaza ("u + "itocromo:idaza ("u
+ ,milaza salivar ("l + ,milaza salivar ("l
+ alcoolD6 (En + alcoolD6 (En
.ecanimul de aciune al enzimelor .ecanimul de aciune al enzimelor
Pentru Pentru ca ca o o reac reac ie ie i i aib aib loc loc e e necesar necesar ca ca moleculele moleculele de de S S i i 2 2 s s contacteze contacteze ) )ntre ntre ele ele. < . <ns ns nu nu fiecare fiecare molecul molecul contact contact) )nd nd
interac interac ioneaz ioneaz ) )n n condi condi ii ii obi obi nuite nuite. . 2: 2: . .6 6) )rtia rtia este este ) )n n contact contact permanent permanent cu cu 4& 4& dar dar nu nu se se aprinde aprinde decit decit dac dac, , nu nu o o
aprindem aprindem cu cu chibritul chibritul. . Pot interaciona numai acele molecule la care energia de activare = Pot interaciona numai acele molecule la care energia de activare = energie exprimat n calorii energie exprimat n calorii
necesar pentru ca toate moleculele unui mol de substan necesar pentru ca toate moleculele unui mol de substan la o temperatur anumit sa ating starea de trunziie, ce la o temperatur anumit sa ating starea de trunziie, ce
corespunde apixului barieirei energetice corespunde apixului barieirei energetice. .
Pentru ca reacia s aib loc e necesar de )trodus un e:es de energie sau de micorat bariera energetic. 2 Pentru ca reacia s aib loc e necesar de )trodus un e:es de energie sau de micorat bariera energetic. 2
accelereaz, viteza reaciilor chimice (3*" micor)nd barierul de activare i reacia decurge dup alt mecanism, ce se accelereaz, viteza reaciilor chimice (3*" micor)nd barierul de activare i reacia decurge dup alt mecanism, ce se
caracterizeaz printr+o energie de tranziie mult mai mic. caracterizeaz printr+o energie de tranziie mult mai mic.
.ecanimul de aciune al enzimelor. .ecanimul de aciune al enzimelor.
Procesul catalizei enzimatice poate fi divizat convenional )n trei stadii. Procesul catalizei enzimatice poate fi divizat convenional )n trei stadii.
Difuzia S spre Difuzia S spre 2 2 i legarea cu ", al 2 (formarea comple:ului i legarea cu ", al 2 (formarea comple:ului 2 2S. Prima etap de scurt durat depinde de S. Prima etap de scurt durat depinde de
concentraia concentraia S Si i de viteza lui de difuzie spre i i de viteza lui de difuzie spre ", ", al al 2 2. (ecanismul interaciunii )ntre S i 2 este e:plicat prin dou . (ecanismul interaciunii )ntre S i 2 este e:plicat prin dou
concepte. concepte.
&. -ransformarea comple:ului primar enzima+substrat )n unul sau c)teva comple:e activate, indicate )n ecuaie prin &. -ransformarea comple:ului primar enzima+substrat )n unul sau c)teva comple:e activate, indicate )n ecuaie prin
2SF i 2SFF. ,ceast etap este cea mai lent i depinde de energia de activare a reaciei chimice respective. Ca aceast 2SF i 2SFF. ,ceast etap este cea mai lent i depinde de energia de activare a reaciei chimice respective. Ca aceast
etap are loc dereglarea legturilor substratului, ruperea lor sau formarea noilor legturi )n urma interaciunii grupelor etap are loc dereglarea legturilor substratului, ruperea lor sau formarea noilor legturi )n urma interaciunii grupelor
catalitice ale enzimei. catalitice ale enzimei.
0. Desprirea produselor reaciei de centrul activ al enzimei i difuzia lor )n mediul ambiant (comple:ul 2P disociaz 0. Desprirea produselor reaciei de centrul activ al enzimei i difuzia lor )n mediul ambiant (comple:ul 2P disociaz
)n 2 i P. )n 2 i P.
Concept Conceptul ul coencidenei inductive coencidenei inductive
coincidena forat !"oc#land$ coincidena forat !"oc#land$
0
care care presupure presupure o o fle:ibilitate fle:ibilitate ( (modificare modificare conforma conforma ional ional a a ", ", c c) )t t i i o o modificare modificare ( (e:tindere e:tindere sau sau comprimarea comprimarea
leg leg turilor turilor , , e el liberarea iberarea dipolilor dipolilor de de ap ap de de ce ce se se atinge atinge repede repede starea starea de de tranzi tranzi ie ie a a S S. .
Din Din punct punct de de vedere vedere termodinamic termodinamic, , a a ezarea ezarea cea cea mai mai potrivit potrivit a a S S ) )n n raport raport cu cu 2 2 reduce reduce la la minimum minimum gradele gradele de de
libertate libertate ) )n n ce ce prive prive te te micarea micarea S S, ) , )i i mic mic oreaz oreaz entropia entropia, , ceea ceea ce ce favorizeaz favorizeaz atingerea atingerea u u oar oar a a st st rii rii de de tranzi tranzi ie ie. .
<n enzima liber ", este GpreformatH (tensionat ceea ce )nseamn c el are o configuraie spaial uor diferit de cea <n enzima liber ", este GpreformatH (tensionat ceea ce )nseamn c el are o configuraie spaial uor diferit de cea
necesar fi:rii S. Substratul induce o modificare conformaional a ",, care favorizeaz fi:area S. necesar fi:rii S. Substratul induce o modificare conformaional a ",, care favorizeaz fi:area S.
Proenzimele #zimogenii%. Proenzimele #zimogenii%.
Inele enzime (proteine se sintetizeaz Inele enzime (proteine se sintetizeaz ) )n forma neactiv n forma neactiv de precursor, care se activeaz de precursor, care se activeaz ) )n anumite condi n anumite condi ii. ii.
2:emplu. 2:emplu.
% enzimele digestiei. pepsinogenul, himotripsinogenul, tripsinogenul, proelastaza, procarbo:ipeptidaza + scindeaza % enzimele digestiei. pepsinogenul, himotripsinogenul, tripsinogenul, proelastaza, procarbo:ipeptidaza + scindeaza
proteinele in stomac Ji duoden. proteinele in stomac Ji duoden.
& coagularea singelui e determinat & coagularea singelui e determinat de cascada de reac de cascada de reac ii cu activitate proteolitic ii cu activitate proteolitic / /
0 hormonii proteici (insulina/ 0 hormonii proteici (insulina/
1 proteinele fibrilare (colagenul. 1 proteinele fibrilare (colagenul.
Inul din mecanismele de activare a proenzimelor este proteoliza limitata. Inul din mecanismele de activare a proenzimelor este proteoliza limitata.
Proteoliza limitata + este scindarea ( Proteoliza limitata + este scindarea () )nl nl turarea unui sector al catenei turarea unui sector al catenei ) )n rezultat enzima se restructureaz n rezultat enzima se restructureaz i se i se
formeaz formeaz ",. ",.
,mportanla biologic ,mportanla biologic a prezen a prezen ei formelor ne ei formelor nea active . ctive .
%. Prote;az %. Prote;az de proteoliz de proteoliz proteinele celulelor produc proteinele celulelor produc toare de 2. toare de 2.
&. 2ste o forma de rezerv &. 2ste o forma de rezerv a 2, care rapid pot fi activate a 2, care rapid pot fi activate i i interv intervi in n ) )n reac n reac ie. ie.
,zoenzimele i rolul lor., ,zoenzimele i rolul lor.,zoenzmele. zoenzmele.
Prezint Prezint forme moleculare de 2Kcare apar ca consecin forme moleculare de 2Kcare apar ca consecin de ordin genetic deosebindu+se de ordin genetic deosebindu+se doar doar prin structura primar prin structura primar i i
mai mult prin propriet mai mult prin propriet ile fizico+chimice. 2le catalizeaz ile fizico+chimice. 2le catalizeaz una una i aceia i aceia i reac i reac ie. Se deosebesc prin aceea c ie. Se deosebesc prin aceea c pot modifica pot modifica
direc direc ia ia i viteza transform i viteza transform rilor deoarece au afinitate diferit rilor deoarece au afinitate diferit fa fa de S. de S.
CD6 care transform CD6 care transform piruvatul piruvatul ) )n lactat. n lactat. ! !zoenzimele prezint zoenzimele prezint tetrameri de & tipuri 6+ heart inima tetrameri de & tipuri 6+ heart inima i ( musculus i ( musculus
mu mu chi. chi.
*aportul dintre aceste catene este diferit in fiecare izoenzima. Ca electroforeza se separa 7 izoenzime. 6666/ *aportul dintre aceste catene este diferit in fiecare izoenzima. Ca electroforeza se separa 7 izoenzime. 6666/
666(/ 66((/ 6(((/ ((((/ 666(/ 66((/ 6(((/ ((((/
*olul acestor 2 consta *olul acestor 2 consta ) )n aceia c n aceia c ele faciliteaz ele faciliteaz adaptarea metabolismului adaptarea metabolismului ) )n diferite n diferite esuturi. esuturi.
2:. in miocard predomin 2:. in miocard predomin 6666 aceasta ezoenzima este inhibata de c 6666 aceasta ezoenzima este inhibata de c tre piruvat deace tre piruvat deacee ea orienteaz a orienteaz o:idarea o:idarea
piruvatului pe cale aeroba. piruvatului pe cale aeroba. Pe cind frac Pe cind frac ia (1 este activat ia (1 este activat de catre piruvat de catre piruvat i orienteaz i orienteaz transformarea piruvatului pe cale transformarea piruvatului pe cale
anaerob anaerob spre lactat. spre lactat.
Claificarea actual a enzimelor. Claificarea actual a enzimelor.
-oate enzimele se )mpart )n -oate enzimele se )mpart )n ae clae ae clae, clasele )n subclase, subclasele )n subsubclase, iar aici 2 )i are numrul su , clasele )n subclase, subclasele )n subsubclase, iar aici 2 )i are numrul su
de ordin. de ordin. "lasele, subclasele, sub+subclasele i enzimele individuale se noteaz prin cifre desprite de puncte. "lasele, subclasele, sub+subclasele i enzimele individuale se noteaz prin cifre desprite de puncte. 2:. CD6 2:. CD6
+ %.%.%.&8 + %.%.%.&8
"lasa reprezint "lasa reprezint tipul de reacie, catalizat de enzime tipul de reacie, catalizat de enzime
Subclasa = precizeaz aciunea 2, deoarece indic natura gruprii chimice a S, atacat de 2 Subclasa = precizeaz aciunea 2, deoarece indic natura gruprii chimice a S, atacat de 2
Subsubclasa = precizeaz natura legturii S atacat sau natura acceptorului care particip la reacii Subsubclasa = precizeaz natura legturii S atacat sau natura acceptorului care particip la reacii
Denumirea 2 = denumirea S Ltipul reaciei catalizate Laza Denumirea 2 = denumirea S Ltipul reaciei catalizate Laza
Nomenclatura #denumirea% Nomenclatura #denumirea%
Sunt cunoscute mai mult de &744 enzime fiecare 2 i Sunt cunoscute mai mult de &744 enzime fiecare 2 i i are denumirea de la denumirea S i are denumirea de la denumirea S ) )n latin n latin cu adi cu adii ionarea onarea
termina termina iei aza. iei aza.
,miloid +amilaza, ureaza. ,miloid +amilaza, ureaza.
S+au p S+au p strat strat i denumi i denumir rile vechi tradi ile vechi tradi ionale pepsina, tripsina. ionale pepsina, tripsina.
2ste utilizat pe larg denumirea sistematic 2ste utilizat pe larg denumirea sistematic
Denumirea SL tipul reaciei (malat D6/piruvat carbo:ilaza Denumirea SL tipul reaciei (malat D6/piruvat carbo:ilaza
Proprietile generale ale enzimelor Proprietile generale ale enzimelor
Obiectivele: Obiectivele:
%. Proprietile generale ale enzimelor (termolabilitatea, specificitatea, aciunea p6+ului asupra activitii enzimatice. %. Proprietile generale ale enzimelor (termolabilitatea, specificitatea, aciunea p6+ului asupra activitii enzimatice.
&. ,ctivarea i inhibarea enzimelor. &. ,ctivarea i inhibarea enzimelor.
a mecanismele de activare (proteoliza parial, activarea alosteric, autostructurarea cuaternar, fosforilarea i a mecanismele de activare (proteoliza parial, activarea alosteric, autostructurarea cuaternar, fosforilarea i
defosforilarea, reactivarea. defosforilarea, reactivarea.
b mecanismele de inhibiie (specific i nespecific, reversibil i ireversibil, alosteric i competitiv. b mecanismele de inhibiie (specific i nespecific, reversibil i ireversibil, alosteric i competitiv.
1
0. Arganizarea enzimelor )n celul (ansamblurile enzimatice, compartimentalizarea. *eglarea activitii enzimatice )n 0. Arganizarea enzimelor )n celul (ansamblurile enzimatice, compartimentalizarea. *eglarea activitii enzimatice )n
celul M importana principiului de retroinhibitie. celul M importana principiului de retroinhibitie.
1. Deosebirea privind componena enzimatic a organelor i esuturilor. 2nzimele organospecifice. (odificarea 1. Deosebirea privind componena enzimatic a organelor i esuturilor. 2nzimele organospecifice. (odificarea
activitii enzimatice )n diferite afeciuni (enzimodiagnosticul. activitii enzimatice )n diferite afeciuni (enzimodiagnosticul.
7. (etodele de obinere i purificare ale enzimelor. "romatografia de afinitate. 7. (etodele de obinere i purificare ale enzimelor. "romatografia de afinitate.
'. '. Itilizarea enzimelor )n practica medical. <ntrebuinarea enzimelor imobilizate )n medicin. Itilizarea enzimelor )n practica medical. <ntrebuinarea enzimelor imobilizate )n medicin.
8. 8. Initile de activitate ale enzimelor. Initile de activitate ale enzimelor.
9. 9. (etodele de determinare a activitii enzimelor. (etodele de determinare a activitii enzimelor.
/ermolabilitatea #&t0% /ermolabilitatea #&t0%
-emperatura influeneaz pronunat activitatea enzimei. Ca t ;oase 2 sunt puin active. -emperatura influeneaz pronunat activitatea enzimei. Ca t ;oase 2 sunt puin active.
Dac lum punctil de plecare 4 grade Dac lum punctil de plecare 4 grade
s+a constatat ca ma;orarea t cu %4 grade dubleaza activitatea. ,a continu p s+a constatat ca ma;orarea t cu %4 grade dubleaza activitatea. ,a continu p) )n n la 14+74 grade. (a;orarea de mai departe la 14+74 grade. (a;orarea de mai departe
duce la micorarea activitii. Ca %44 grade toate 2 organismului sunt inactive. Inele 2 a microorganismelor termofile sunt duce la micorarea activitii. Ca %44 grade toate 2 organismului sunt inactive. Inele 2 a microorganismelor termofile sunt
active la - 94 grade. active la - 94 grade.
"reterea "reterea vitezei reaciei odat cu creterea tN este )nterpretat prin prisma >energiei de activare>. Pentru fiecare vitezei reaciei odat cu creterea tN este )nterpretat prin prisma >energiei de activare>. Pentru fiecare
enzim se poate stabili o tN optim la care viteza a;unge valoarea ma:ima, mai departe viteza scade din cauza distruciei enzim se poate stabili o tN optim la care viteza a;unge valoarea ma:ima, mai departe viteza scade din cauza distruciei
enzimei, denaturarea proteinei. enzimei, denaturarea proteinei.
!pecificitatea !pecificitatea
D Deci fiecare 2 catalizeaz un anumit tip de reac eci fiecare 2 catalizeaz un anumit tip de reac ii sau transformarea unui anumit S. ii sau transformarea unui anumit S.
% % !pecificitatea de reacie !pecificitatea de reacie. 2+catalizeaz un anumit tip de reacie ce st la baza clasificrii enzimelor. o hidroliza, o . 2+catalizeaz un anumit tip de reacie ce st la baza clasificrii enzimelor. o hidroliza, o
reacie redo:, formarea unei legturi, etc. reacie redo:, formarea unei legturi, etc.
& 2nzimele cu o anumit specificitate de reac & 2nzimele cu o anumit specificitate de reac ie poate avea specificitate de substrat relativ sau absolut. ie poate avea specificitate de substrat relativ sau absolut.
a. specificitate a. specificitate relativa + asigura transformarea unui grup relativa + asigura transformarea unui grup de substante inrudite chimic i se int)lnete )n diferite de substante inrudite chimic i se int)lnete )n diferite
ipostaze ipostaze. .
+ transforma un numar mare de substrate (proteazele. chimotripsina + legatura peptidica, formata de "AA6 a + transforma un numar mare de substrate (proteazele. chimotripsina + legatura peptidica, formata de "AA6 a
Phe, -Dr, -rp/ tripsina + de "AA6 ai CDz si ,rg. Phe, -Dr, -rp/ tripsina + de "AA6 ai CDz si ,rg.
+ transform mai puine substrate. alcooldehidrogenaza + dehidrogenaza un grup de alcooli monohidro:ilici, + transform mai puine substrate. alcooldehidrogenaza + dehidrogenaza un grup de alcooli monohidro:ilici,
recunoscind gruparea A6 (specificitatea de grup recunoscind gruparea A6 (specificitatea de grup
+ lipazele digestive specific recunosc pozitia legaturii esterice intre glicerina i acizi grai. + lipazele digestive specific recunosc pozitia legaturii esterice intre glicerina i acizi grai.
b. specificitate absoluta. 2 recunoate un singur substrat ,nhidraza carbonica, Ireaza. b. specificitate absoluta. 2 recunoate un singur substrat ,nhidraza carbonica, Ireaza.
0 0 Stereospecificitatea de substrat i de reacie. 4 enzima poate ataca numai un izomer D sau C.. (a;oritatea Stereospecificitatea de substrat i de reacie. 4 enzima poate ataca numai un izomer D sau C.. (a;oritatea
biomoleculelor poseda un atom de " asimetric i fiind chirali pot e:ista sub forma celor & enantiomeri. 2:. ,milaza biomoleculelor poseda un atom de " asimetric i fiind chirali pot e:ista sub forma celor & enantiomeri. 2:. ,milaza
scindeaz legturile ,lfa %+1 glucozidice din amidon sau glicogen i nu influenteaz asupra legturilor beta din celuloza. scindeaz legturile ,lfa %+1 glucozidice din amidon sau glicogen i nu influenteaz asupra legturilor beta din celuloza.
,c ,c iunea p6 asupra activit iunea p6 asupra activiti ii enzimatice i enzimatice
#iecare enzim are un p6 optim la care ii manifest activitatea ma:imal. #iecare enzim are un p6 optim la care ii manifest activitatea ma:imal.
!n ", al 2 se afl grupri ionizabile, acide sau bazice, acestea interacioneaz direct cu ionii 6L si A6+, rezultatul !n ", al 2 se afl grupri ionizabile, acide sau bazice, acestea interacioneaz direct cu ionii 6L si A6+, rezultatul
fiind creterea sau scderea gradului lor de disociere, acion)nd ca adevrai inhibitori ai enzimelor (amilaza )n sucul gastric. fiind creterea sau scderea gradului lor de disociere, acion)nd ca adevrai inhibitori ai enzimelor (amilaza )n sucul gastric.
!onii 6L si A6+ au un efect denaturant asupra enzimelor + rup legturile, ce determin structura teriar. !onii 6L si A6+ au un efect denaturant asupra enzimelor + rup legturile, ce determin structura teriar.
(a;oritatea enzimelor celulare au p6+ul optim )n ;urul p6ului fiziologic de 8,1 cu e:cepii ca hidrolazele acide (a;oritatea enzimelor celulare au p6+ul optim )n ;urul p6ului fiziologic de 8,1 cu e:cepii ca hidrolazele acide
lizozomale, pentru care este )n ;ur de 7 sau monoaminoo:idaza din membrana mitocondriala e:terna, circa %4. Ca enzimele lizozomale, pentru care este )n ;ur de 7 sau monoaminoo:idaza din membrana mitocondriala e:terna, circa %4. Ca enzimele
digestive p6+lui optim este cel al sediului lor de actiune. %,7 = & al pepsinei, 8 al amilazei pancreatice, 9 al tripsinei, etc. digestive p6+lui optim este cel al sediului lor de actiune. %,7 = & al pepsinei, 8 al amilazei pancreatice, 9 al tripsinei, etc.
Deci mrind sau micorind p6+ul mediului, se poate regla activitatea catalitica a enzimelor. Dependena activitii Deci mrind sau micorind p6+ul mediului, se poate regla activitatea catalitica a enzimelor. Dependena activitii
enzimatice de variaia p6+ului este deseori descris de o curb )n forma de clopot. enzimatice de variaia p6+ului este deseori descris de o curb )n forma de clopot.
.ecanimele de activare a E .ecanimele de activare a E
Sunt Sunt . . %. nespecifice. temperatura , iradierea %. nespecifice. temperatura , iradierea
&. &. s specifice pecifice
+ + Se activeaz la ma;orarea concentraiei S c)nd este insuficient Se activeaz la ma;orarea concentraiei S c)nd este insuficient
+ + Ca ma;orarea cantitii 2 Ca ma;orarea cantitii 2 (crete (crete num numrul de molecule de produs, )n+tr+o unitate de timp rul de molecule de produs, )n+tr+o unitate de timp
- - Ca introducerea coenzimelor c)nd sunt insuficiente Ca introducerea coenzimelor c)nd sunt insuficiente
- - !ntroducerea ionilor metalelor #e, "u !ntroducerea ionilor metalelor #e, "u
- - (odificarea chimica (odificarea chimica s sa au covalent a u covalent a 2. 2.
- - proteoliza limitata (pepsinogen + pepsin in 6"! proteoliza limitata (pepsinogen + pepsin in 6"!
- - ,ctivarea ,ctivarea prin prin efectori efectori alosterici alosterici
- - ,utoasamblarea cuaternara . ,utoasamblarea cuaternara .
- - ,ici se mai refer i r ,ici se mai refer i re eactivarea dar noi ne vom opri la mecanismele de inhibiie. activarea dar noi ne vom opri la mecanismele de inhibiie.
7
Reglarea covalent (fosforilare-defosforilare) Reglarea covalent (fosforilare-defosforilare)
,ctivitatea unor 2 se modific prin fosforilare. #osforilarea se face prin transferul unui rest fosfat de la ,-P pe ,ctivitatea unor 2 se modific prin fosforilare. #osforilarea se face prin transferul unui rest fosfat de la ,-P pe
gruprile hidro:il ale unor resturi de Ser, -re/ -Dr din componena lor. gruprile hidro:il ale unor resturi de Ser, -re/ -Dr din componena lor.
*eaciile de fosforilare s)nt catalizate de Oinaze specifice. *eaciile de fosforilare s)nt catalizate de Oinaze specifice.
2ste un proces reversibil 2ste un proces reversibil
2+A6 L ,-P ++++++++++++++P 2+A+P L,DP 2+A6 L ,-P ++++++++++++++P 2+A+P L,DP
Defosforilarea are loc sub aciunea fosfotazei specifice Defosforilarea are loc sub aciunea fosfotazei specifice
2+AP L6&A ++++++++++++++P 2+A6 L6&PA0 2+AP L6&A ++++++++++++++P 2+A6 L6&PA0
unele enzime s)nt active )n forma fosforilat 2:. glicogen fosforilaza, unele enzime s)nt active )n forma fosforilat 2:. glicogen fosforilaza,
altele )n forma defosforilat 2:.glicogen sintaza. altele )n forma defosforilat 2:.glicogen sintaza.

Pro Prot teoliz limitat eoliz limitat
Proteoliza limitata + este scindarea ( Proteoliza limitata + este scindarea () )nl nl turarea unui sector al catenei turarea unui sector al catenei ) )n rezultat enzima se restructureaz n rezultat enzima se restructureaz i se i se
formeaz formeaz ",. ",.
6L 6L
Pepsinogen ++++++Ppepsin Pepsinogen ++++++Ppepsin
+1&,, +1&,,
$utotructurarea cuaternar $utotructurarea cuaternar
2ste caracteristic 2 ce posed structur cuaternar 2ste caracteristic 2 ce posed structur cuaternar
#iecare protomer )n parte nu posed activitate enzimatic #iecare protomer )n parte nu posed activitate enzimatic
Ca asamblarea lor = se modific conformaia fiecrui protomer i corespunztor se modific i conformaia ",, Ca asamblarea lor = se modific conformaia fiecrui protomer i corespunztor se modific i conformaia ",,
devenind astfel favorabil pentru fi:area i transformarea S devenind astfel favorabil pentru fi:area i transformarea S
,nhibi ,nhibi ia activitii enzimelor. ia activitii enzimelor.
Deosebim Deosebim. .
inhibiie specific inhibiie specific
inhibiie inhibiie nespecific (-, p6, agenisii denaturrii nespecific (-, p6, agenisii denaturrii
!nhibiiia st la baza aciiunii substanielor !nhibiiia st la baza aciiunii substanielor medicamentoase, agenilor to:ici. medicamentoase, agenilor to:ici.
!nhibiia poate fi reversibil i ireversibil. !nhibiia poate fi reversibil i ireversibil.
Ca inhibiiia ireversibil inhibitorul covalent se fi:eaz de enzim sau se leag at)t de puternic )nc)t disociaia are loc Ca inhibiiia ireversibil inhibitorul covalent se fi:eaz de enzim sau se leag at)t de puternic )nc)t disociaia are loc
foarte incet. foarte incet.
2:emple. Diizopropilfluorfosfatul (to:ina neuroparalitica se fi:eaz de A6+serinei )n ", a acetilholinesterazei 2:emple. Diizopropilfluorfosfatul (to:ina neuroparalitica se fi:eaz de A6+serinei )n ", a acetilholinesterazei
(scindeaz acetilcolina cu formarea enzimei neactive. (scindeaz acetilcolina cu formarea enzimei neactive. <n rezultat se menine efectul acetilcolinei )n permanen ce duce la <n rezultat se menine efectul acetilcolinei )n permanen ce duce la
paralicii musculare i moarte.. paralicii musculare i moarte..
Ca o inhibiiie reversibil + inhibitori se fi:eaza slab, necovalent de Ca o inhibiiie reversibil + inhibitori se fi:eaza slab, necovalent de 2 2
1etroinhibiie 1etroinhibiie
Sistemele polienzimatice Sistemele polienzimatice
#iecare celul a organismului conine setul su specific de enzime. Inele se gsesc )n toate celulele, altele sunt #iecare celul a organismului conine setul su specific de enzime. Inele se gsesc )n toate celulele, altele sunt
prezente doar )n anumite celule sau anumite compartimente celulare. #uncia fiecrei enzime, nu este izolat, ci strins legat prezente doar )n anumite celule sau anumite compartimente celulare. #uncia fiecrei enzime, nu este izolat, ci strins legat
de funcia altor enzime. ,stiel din enzime aparte se formeaza sisteme polienzimatice sau conveiere. de funcia altor enzime. ,stiel din enzime aparte se formeaza sisteme polienzimatice sau conveiere.
#un #unc ctia sistemelor polienzimatice depinde de particularitatile de organizare a lor in celule. tia sistemelor polienzimatice depinde de particularitatile de organizare a lor in celule.
Se cunosc urmatoarele tipuri de organizare a sistemelor polienzimatice. Se cunosc urmatoarele tipuri de organizare a sistemelor polienzimatice.
+ funcional, + funcional,
+ structural+funcional i + structural+funcional i
+ mi:t. + mi:t.
/ /ipuri ipurile le de organizare a itemelor polienzimatice: de organizare a itemelor polienzimatice:
Organizarea funcional Organizarea funcional + enzimele sunt asociate )n sisteme polienzimatice, care )ndeplinesc o anumit func + enzimele sunt asociate )n sisteme polienzimatice, care )ndeplinesc o anumit func ie. ie. Produsul Produsul
reaciei prirmei enzime a lanului servete drept substrat pentru enzima urmtoare etc. reaciei prirmei enzime a lanului servete drept substrat pentru enzima urmtoare etc.
2:.de organizare funcional + enzimele glicolizei, unde toate 2 participante se gsesc )n stare solubil/ #iecare reacie 2:.de organizare funcional + enzimele glicolizei, unde toate 2 participante se gsesc )n stare solubil/ #iecare reacie
este catalizat de enzime aparte. Drept verig de legtura aici servesc metaboliii. este catalizat de enzime aparte. Drept verig de legtura aici servesc metaboliii.
Organizarea tructural&funcional Organizarea tructural&funcional consta )n faptul ca enzimele formeaz sisteme structurale cu o anumit funcie. consta )n faptul ca enzimele formeaz sisteme structurale cu o anumit funcie.
2:.+ comple:ul polienzimatic piruvatdehidrogenazic, constituit din c)teva enzime, care particip la o:idarea acidului 2:.+ comple:ul polienzimatic piruvatdehidrogenazic, constituit din c)teva enzime, care particip la o:idarea acidului
piruvic, sau sintetaza acizilor grai constituit din apte enzime legate structural, care )n ansamblu )ndeplinesc funcia de piruvic, sau sintetaza acizilor grai constituit din apte enzime legate structural, care )n ansamblu )ndeplinesc funcia de
sinteza a acizilor grasi. sinteza a acizilor grasi.
'
,far de comple:ele multienzimatice e posibila i o alt varianta de organizare structural+funcional. ,stfel enzimele ,far de comple:ele multienzimatice e posibila i o alt varianta de organizare structural+funcional. ,stfel enzimele
se pot aran;a )n lan, fi:indu+se de membrana biologic. 2:.enzimele lanului respirator mitocondrial, care particip la se pot aran;a )n lan, fi:indu+se de membrana biologic. 2:.enzimele lanului respirator mitocondrial, care particip la
transferul de electroni i protoni i la generarea de energie. transferul de electroni i protoni i la generarea de energie.
/ipul mi2t de organizare /ipul mi2t de organizare a sistemelor polienzimatice reprezint o )mbinare a ambelor tipuri de organizare, adic o parte a sistemelor polienzimatice reprezint o )mbinare a ambelor tipuri de organizare, adic o parte
din sistemul polienzimatic are organizare structurala, iar cealalt din sistemul polienzimatic are organizare structurala, iar cealalt parte + organizare funcional. parte + organizare funcional.
2:.+ ciclul @rebs, unde o parte din enzime sunt asociate )n comple: structural (comple:ul &+ 2:.+ ciclul @rebs, unde o parte din enzime sunt asociate )n comple: structural (comple:ul &+
o:oglutaratdehidrogenazic, )ar alt parte se leag funcional prin metaboliii de legtur. o:oglutaratdehidrogenazic, )ar alt parte se leag funcional prin metaboliii de legtur.
3eoebirea privind componena enzimatic a organelor i euturilor. Enzimele organopecifice. .odificarea activitii 3eoebirea privind componena enzimatic a organelor i euturilor. Enzimele organopecifice. .odificarea activitii
enzimatice n diferite afeciuni #enzimodiagnoticul%. enzimatice n diferite afeciuni #enzimodiagnoticul%.
Enzimele indicatorii Enzimele indicatorii = sunt localizate intracelular. )n citoplasm (lactatdehidrogenaza, aldolaza, )n mitocondrii = sunt localizate intracelular. )n citoplasm (lactatdehidrogenaza, aldolaza, )n mitocondrii
glutamatdehidrogenaza, )n lizosomi ( glutamatdehidrogenaza, )n lizosomi ( +glucoronidaza, fosfataza alcalin. +glucoronidaza, fosfataza alcalin. ,cestea enzime )n norm )n plasm se gsesc ,cestea enzime )n norm )n plasm se gsesc
)n concent )n concentr raii foarte mici. Ca afeciunile celulare activitatea acestor enzime )n plasm este brusc mrit. aii foarte mici. Ca afeciunile celulare activitatea acestor enzime )n plasm este brusc mrit.
"nitile de activitate ale enzimelor. "nitile de activitate ale enzimelor.
Initatea !nternaional (I.!. = cantitatea de 2 care catalizeaz transformarea % Initatea !nternaional (I.!. = cantitatea de 2 care catalizeaz transformarea %Q Qmol de S )ntr+un minut )n condiii mol de S )ntr+un minut )n condiii
standard standard
@atal (Oat = cantitatea de 2 care asigur transformarea unui mol de S )ntr+o secund )n condiii standard (%I.!.R%','8 @atal (Oat = cantitatea de 2 care asigur transformarea unui mol de S )ntr+o secund )n condiii standard (%I.!.R%','8
nOat nOat
-erapia cu enzime -erapia cu enzime
2nzimele sunt ageni terapeutici unici ce produc efecte importante i specifice. 2nzimele sunt ageni terapeutici unici ce produc efecte importante i specifice.
(otivele care au limitat folosirea larg a enzimelor ca medicaie sunt legate de natura proteic. (otivele care au limitat folosirea larg a enzimelor ca medicaie sunt legate de natura proteic.
+ distribuie redus )n organism dependena de dimensiuni, sarcina i de fenomenele de glicozilare (prin glicozilare + distribuie redus )n organism dependena de dimensiuni, sarcina i de fenomenele de glicozilare (prin glicozilare
proteinele sunt recunoscute de receptori i fi:ate )n anumite locuri proteinele sunt recunoscute de receptori i fi:ate )n anumite locuri
+ posibilitate mic de diri;are e:trahepatic, ficatul av)nd tendin de a cptta i reine proteinele strine/ + posibilitate mic de diri;are e:trahepatic, ficatul av)nd tendin de a cptta i reine proteinele strine/
+ inactivarea lor sub aciunea proteazelor digestive )n cazul administrarii orale, iar proteazele tisulare le scurteaza de + inactivarea lor sub aciunea proteazelor digestive )n cazul administrarii orale, iar proteazele tisulare le scurteaza de
asemeni actiunea/ asemeni actiunea/
+ potentialul lor antigenic, anticorpii formati pot genera reacii de hipersensibilizare adesea grave i pot inactiva + potentialul lor antigenic, anticorpii formati pot genera reacii de hipersensibilizare adesea grave i pot inactiva
enzima. enzima.
/ehnici propue pentru optimizarea proprietilor terapeutice ale enzimelor. /ehnici propue pentru optimizarea proprietilor terapeutice ale enzimelor.
+ prin N+acilare a fost crescut semiviata asparaginazei, folosit )n leucemie + prin N+acilare a fost crescut semiviata asparaginazei, folosit )n leucemie
+ S+au incercat de asemeni metode de obinere a + S+au incercat de asemeni metode de obinere a enzimelor imobilizate. enzimelor imobilizate.
De e:. prin reticularea enzimei, ce conduce la agregate insolubile, prin adsorbie pe polimeri sintetici ori prin ataare De e:. prin reticularea enzimei, ce conduce la agregate insolubile, prin adsorbie pe polimeri sintetici ori prin ataare
covalent, sau prin incorporare )ntr+un gel in cursul polimerizarii. covalent, sau prin incorporare )ntr+un gel in cursul polimerizarii.
,ceste preparate catiga rezistena la enzimele proteolitice i sunt mai putin imunoactive dar pot fi alterate ,ceste preparate catiga rezistena la enzimele proteolitice i sunt mai putin imunoactive dar pot fi alterate
proprietaisile farmacocinetice. ,semenea avanta;e au dovedit con;ugatii cu polietilenglicol (P2B ai arginazei, ai proprietaisile farmacocinetice. ,semenea avanta;e au dovedit con;ugatii cu polietilenglicol (P2B ai arginazei, ai
glutaminasparaginazei sau ribonucleaza supusa reticularii, enzime cu efect antitumoral. In succes )n terapia defectelor glutaminasparaginazei sau ribonucleaza supusa reticularii, enzime cu efect antitumoral. In succes )n terapia defectelor
genetice a fost imobilizarea enzimelor din ciclul ureogenetic pe un suport de fibrina. genetice a fost imobilizarea enzimelor din ciclul ureogenetic pe un suport de fibrina.
S+au propus noi forme farmaceutice prin incapsularea enzimelor in lipozomi + S+au propus noi forme farmaceutice prin incapsularea enzimelor in lipozomi + microsfere cu membrana bistratificata microsfere cu membrana bistratificata
lipido proteica, in hematii umane, in fantome eritrocitare sau in alti transportori celulari. Noile forme obinute prezint un lipido proteica, in hematii umane, in fantome eritrocitare sau in alti transportori celulari. Noile forme obinute prezint un
potenial de )ntire tisular. De e:. in cazul unor boli genetice cauzate de deficitul unor enzime lizozomale se impune o terape potenial de )ntire tisular. De e:. in cazul unor boli genetice cauzate de deficitul unor enzime lizozomale se impune o terape
de substitutie, enzima trebuind tintita direct in lizozomi. de substitutie, enzima trebuind tintita direct in lizozomi.
8