TACTICA IDENTIFICRII I VALORIFICRII PROBELOR GENETICE DIN SCENA

INFRACIUNILOR

Romic POTORAC
comisar de poliie biochimist
Abstract

n aceast lucrare ncercm s explicm principalele tactici de identificare i valorificare a probelor
biologice existente n scena infraciunilor prin metode de analiz genetic judiciar, inclusiv tehnicile de
interpretare a rezultatelor genotiprii. Am utilizat exemple din cazuri reale ale cror rezultate au contribuit sau
pot contribui la probarea infraciuniilor respective incluznd unele din metodele dezvoltate n cadrul Sistemului
de Analize Genetice.
Vom ncerca s demonstrm prin explicaiile date c valoarea unui profil genetic i informaiile aduse
de ctre acesta este o continuare a calitii muncii personalului care efectueaz cercetarea la faa locului i a
celui care instrumenteaz cazul. Toate acestea au ca motivaie faptul c scena infraciunii ofer de cele mai
multe ori informaii preioase despre evenimentele petrecute acolo. Aceste informaii pot fi valorificate dac
sunt fcute corelaii ntre urmele identificate, valoarea lor probatorie i metoda de investigare a acestora.

1. INTRODUCERE

ADN acidul deoxiribonucleic este o molecul care se gsete n celulele nucleate ale oricrui om,
animal, plant sau oricrei alte materii organice vii. Celulele sunt unitile structurale i funcionale ale oricrui
organism viu, fiind coninute de ctre variate tipuri de esuturi (piele, muchi, snge, oase etc.). n interiorul
majoritii celulelor se gsete nucleul care conine sursa i totodat vectorul motenirii genetice - cromozomul.
Prin prisma criminalistului, fiecare celul nucleat din organismul unui individ conine ADN i este o
potenial surs de identificare genetic a acestuia. Structura chimic a ADN nglobeaz codul genetic i se
manifest prin exprimarea caracterelor diferite ale fiecrei persoane: sex, nlime, culoarea prului, ochilor etc.
Acizii nucleici reprezint moleculele care pastreaz, transport si manipuleaz informaia n orice celul vie.
Codul de scriere a acestei informaii este universal valabil, iar mecanismele biochimice implicate sunt pe de o
parte complexe si pe de alta parte foarte precise.
Cea mai utilizat tehnic a analizei genetice judiciare este cunoscut ca fiind Short Tanden Repeat
genotiparea fragmentelor scurte repetitive de un anumit numr de ori, localizate in zonele neinformaionale ale
genomului. Astfel, din fiecare urm sau microurm biologic uman care conine celule nucleate se extrage
ADN ce urmeaz a fi supus unei reacii de amplificare Polymerase Chain Reaction - un proces enzimatic
prin care regiunile sunt replicate (multiplicate) de 28 - 34 ori, generndu-se cca. un bilion (10
9
) copii. Aceast
tehnic evideniaz numrul de repetri ale unitilor de baz i le transform n valori alfanumerice, cunoscute ca
profile genetice.
Probele biologice constituite din celule nucleate sunt eseniale pentru determinarea profilului genetic. Din
acest motiv, trebuie efectuate cercetri sistematice pentru descoperirea acestora, iar ulterior ridicarea,
conservarea si transportul acestora trebuie sa in seam de o serie de reguli pentru a nu le compromite.
Probele biologice care fac parte din aceast categorie sunt:
Snge lichid sau depus pe suporturi n stare uscat
Sperm lichid sau depus pe suporturi n stare uscat
Diverse secreii biologice umane (saliv, sperm) sau amestecuri de secreii provenite n urma
actelor sexuale
esuturi biologice moi formate din celule nucleate
Celule nucleate (epiteliale) transferate pe obiecte (prin frecare , atingere etc.)
esuturi dure (os, dini)
Fire de pr cu foliculi (rdcin)
Saliv
Materii fecale
Urin
Microurme biologice constituite din celule nucleate
Slide-uri i frotiuri citologice
esuturi ncrustate n parafin sau alte ceruri
Prin microurme biologice pot fi definite acele tipuri de urme care pot fi transferate de la o persoan pe
diverse obiecte suport, care nu pot fi observate macroscopic. n toate cazurile, materialul biologic transferat
este constituit din celule nucleate i se formeaz ca urmare a unui contact direct intim sau de la distan.
Microurmele pot fi sub form de celule epiteliale remanente provenite, fie n urma unui contact sub form de
apucare sau frecare, fie sub form de transpiraie, mtrea, saliv etc.
224
De cele mai multe ori n practic ne ntlnim cu cantiti foarte mici de material biologic pretabil a fi
recoltat. Mai mult, sunt frecvente situaiile n care suntem pui n faa unor amestecuri de probe biologice ce
provin de la mai muli contribuitori, n care unul dintre acetia sau mai muli sunt minoritari n amestec. Analiza
genetic a unui numr foarte mic de celule nucleate, respectiv a unei cantiti foarte mici de material biologic, se
face printr-o abordare diferit fa de situaiile uzuale i are ca scop generarea prin reacia de amplificare a unei
cantiti suficiente de copii ale fragmentelor de ADN pentru a se obine un profil genetic valorificabil. Aceast
metod este aplicabil probelor biologice cu un coninut de ADN matri sub 50 pg, microurmelor biologice,
probelor biologice aflate ntr-un stadiu avansat de degradare, cu surs unic sau surse multiple. Este o metod foarte
sensibil, permind obinerea profilelor genetice dintr-o prob biologic constituit din cca. 10 celule diploide (ex.
materialul biologic coninut de un fragment de amprent papilar). Datorit acestei sensibiliti, tehnica necesit
condiii speciale de aplicare deoarece riscul de contaminare i intercontaminare a probelor este foarte crescut.
Profilele genetice pot fi utilizate n scopuri judiciare astfel:
- un profil genetic obinut dintr-o prob biologic de la faa locului poate fi comparat cu cel al
unei persoane suspecte n cauz; dac sunt identice, aceasta poate constitui o prob pentru
acuzare;
- probe biologice obinute de la mai multe infraciuni au profile genetice identice, ceea ce
demonstreaz prezena aceleiai persoane la comiterea infraciunilor; aceste informaii pot fi
utilizate ca probatorii n justiie sau pot fi adugate la soluionarea altor cauze;
- compararea profilelor genetice ale persoanelor arestate cu cele ale urmelor de la faa locului
rmase neatribuite n alte cauze nesoluionate;
- identificarea persoanelor sau victimelor terorismului, dezastrelor i catastrofelor naturale;
- stabilirea afiliaiilor genetice paterne i materne.

2. TEHNICI ANALITICE DE CERCETARE A LOCULUI INFRACIUNII

Totalitatea nsuirilor i a laturilor eseniale n virtutea crora informaiile aduse de un profil genetic pot
fi valorificate corespunztor se bazeaz pe o niruire de etape care ncep din momentul n care a avut loc
infraciunea. Chiar de la intrarea n scena infraciunii a personalului autorizat este bine s se in seama c prin
necunoaterea adecvat a materiei asupra creia este orientat activitatea subiectului, pot fi introduse erori care
odat nglobate sunt foarte greu de corectat.
Procesul de investigare, documentare i examinare a locului infraciunii, din punctul de vedere al
valorificrii urmelor sau microurmelor biologice prin metode de analiz genetic, se bazeaz pe o serie de reguli
de care va depinde calitatea informaiilor aduse de aceste tipuri de investigaii.
Investigatorul tebuie s nceap cercetarea ncet i metodic pentru a reui s identifice i s colecteze
urmele i microurmele prezente n scena infraciunii.
Decizii rapide trebuie luate doar n cazul n care sunt identificate urme n pericol de a fi distruse sau
compromise.
nainte de intrarea n scena crimei este bine ca investigatorul s fi obinut deja ct mai multe informaii
despre scopul cercetrii i valoarea tipului de urme care pot fi prezente. Aceste informaii sunt bazate pe starea
mprejurrilor, date despre victim i autor, precum i alte informaii de la ofierii care au intrat deja n contact cu
locul faptei i au ca scop prevenirea distrugerii sau compromiterii oricror urme.
Investigatorul trebuie s dea un sens logic cercetrii pentru descoperirea urmelor i s utilizeze resursele
cognitive dobndite pentru a face corelaiile logice dintre existenei acelor probe care pot demonstra comiterea
faptului, tipului de urm i zonele int unde pot exista, datorate accesrii acesteia.
Criminalistul trebuie s documenteze i s nregistreze orice aspect sesizat pe parcursul procesului de
investigare a scenei crimei, ncepnd cu observarea i finaliznd cu recoltarea probelor. Aceasta este necesar
pentru a reobserva de cte ori este necesar locul faptei n condiiile de dinaintea intrrii, ridicrii sau modificrii
acestuia.
Examinarea locului faptei ncepe, de regul, cu un tur (screening) al zonei i al traseului crimei. Acest
tur are ca scop marcarea prezenei probelor, punctul de intrare al autorului, localizarea victimei, zona unde
autorul s-a curat sau a lsat anumite obiecte, locul de ieire al autorului, precum i alte detalii care pot fi
valorificate.
Constituirea unei tactici de cercetare a cmpului infraciunii pentru identificarea probelor biologice ce
pot fi valorificate prin genotipare judiciar trebuie s in cont de tipul infraciunii, a scenei (deschis sau
nchis), precum i starea victimei. Vor fi cutate acele suporturi purttoare de urme sau microurme biologice
care au fost accesate de autor sau victim, n funcie de caz, prin intermediul crora a fost posibil realizarea unui
transfer direct i care vor demonstra prezena autorului sau victimei ntr-un spaiu determinat.
Scopul final este acela de a identifica sau deduce obiectele suport purttoare de urme sau microurme
biologice care pot aduce informaii n ancheta judiciar.
225
Prezena probelor biologice de interes pentru anchet, prezente n scena infraciunii, se datoreaz
transferului acestora n mod direct i uneori indirect, presupunnd c acestea nu au ca surs existena unei
contaminri sau intercontaminri.

Transferul urmelor biologice n mod direct poate fi rezultatul urmtoarelor situaii:

A. Transferul urmei biologice a suspectului pe victim (pe corpul acesteia sau pe obiectele sale de
mbrcminte)

Aici pot fi incluse cazurile de viol, cnd sunt recoltate probe vaginale, probe biologice remanente pe
suprafaa corpului victimelor sau pe obiecte vestimentare. Cazurile n care au fost analizate probe biologice ale
autorilor rmase pe corpul victimei sunt foarte numeroase, spre exemplu cele recoltate de pe gt, brbie, piept
(sni), mini, zona unei mucturi sau de pe vestimentaie.

B. Transferul urmei biologice a suspectului pe un obiect de la faa locului.

Pentru exemplificare acestui tip de transfer mai jos sunt prezentate cteva moduri de abordare a
probelor:
a - infraciunea de omor deosebit de grav comis de autori necunoscui. Probele supuse analizelor
au fost:
- material textil reprezentat de un clu cu care
victima a fost legat la gur Foto 1 - probele au fost
prelevate din zonele adiacente nodului care nu
conineau snge provenit de la victim. Examinarea
microscopic a preparatelor citologice efectuate din
aceste probe au evideniat microurme de celule
epiteliale remanente. Profilul genetic obinut a fost
identic cu al uneia dintre persoanele incluse n cercul de
suspeci.
- un cablu electric cu techer, cu care victima a
fost legat la nivelul gtului i la ncheieturile minilor
Foto 2. Au fost prelevate probe din zona nodurilor din
care s-au efectuat preparate citologice care au evideniat
microurme de celule epiteliale remanente al cror profil
genetic a fost identic cu al aceleiai persoane;
- n depozitul subunghial recoltat de la victim
au fost identificate deasemenea celule epiteliale al cror
profil genetic a fost identic cu al aceleiai persoane din
cercul de suspeci.







b - infraciunea de omor calificat. Proba
acuzatoare a fost constituit din dou fragmente de
mnu chirurgical ridicate din scena crimei Foto 3.
Probele au fost examinate separat, pe ambele suprafee (exterior i
interior), identificndu-se la examinarea microscopic microurme de celule
epiteliale remanente rezultate n urma contactului/frecrii dintre acestea i
persoana purttoare sau/i persoana cu care a intrat n contact fizic n timpul
utilizrii. n urma genotiprii s-au obinut urmtoarele:
suprafaa exterioar profilul genetic al victimei;
suprafaa interioar profilul genetic al unuia dintre
persoanele din cercul de suspeci.





Foto 1 material textil reprezentnd cluul cu care victima a
fost legat la gur

Foto 2 - cablu electric cu techer, cu care victima a fost
legat la nivelul gtului

Foto 3 fragment de mnu
chirurgical
226



c. vtmarea corporal prin mpucare. n cmpul
infraciunii a fost identificat un cartu marca WOLF, calibru
5,45x18 Foto 4. Examinarea microscopic a preparatelor
efectuate din probele prelevate de pe suprafaa tubului au
evideniat microurme de celule epiteliale remanente al cror
profil genetic s-a demonstrat a fi identic cu cel al persoanei
suspectate.




d. infraciune de omor n care a fost analizat din punct de vedere genetic un fragment de bt. n
vederea identificrii persoanei / persoanelor care l-au utilizat, acesta a fost mprit n 4 zone, notate cu A, B, C,
i D Foto 5 . Au fost prelevate cte dou probe de pe fiecare zon P1, P2, P3, P4, P5, P6, P7 i P8, din care
au fost efectuate preparate citologice. Examinarea microscopic a evideniat celule epiteliale remanente n
cazurile probelor P1, P2, P3, P4, P5, P6, P7, iar n cazul P8, snge uman.

Foto 4 cartu marca WOLF





Urm de culoare brun -
rocat
Zona A Zona B Zona C
Zona D
Foto 5 - fragmentul de bt

Probele notate cu P1, P2, P3, P4, P5, P6 i P7 din zonele A, B, C i D au demonstrat prezena unei
persoane necunoscute de sex masculin.
Proba notat cu P8 din zona D un profil genetic identic cu cel al victimei.


e. deinere ilegal de arme. Proba analizat a fost un
pistol tip Carpai, md. 1974, calibru 7,65 mm (Foto 6,7 i 8) i
cinci cartue de acelai calibru (Foto 9).
n vederea identificrii persoanelor care deinut sau
utilizat arma, au fost prelevate probe dup cum urmeaz:
- maonul exterior i piedica trgaciului;
- cocoul i patul;
- trgaci;
- ncrctorul i sigurana ncrctorului;

- manonul interior i eava;
Foto 6 Proba 1: pistol Md. 1974, Carpai, calibru 7,65 mm
- gura evii, ina manonului i zonele greu accesibile ale
componentelor interioare;
- arc.

227

Foto 7 pistol Md. 1974, Carpai, calibru 7,65 mm, Foto 8 pistol Md. 1974, Carpai, calibru 7,65
detaliu prelevare manon interior mm, prelevare de pe componentele interioare


Din aceste probe s-au efectuat preparate citologice
care examinate microscopic au evideniat celule epiteliale
remanente n amestec cu diverse substane. Genotiparea
acestora poate demonstra prezena a cel puin patru indivizi
identificai n diverse zone, astfel:
- maonul exterior i piedica trgaciului trei
persoane;
- cocoul i patul - patru persoane;
- trgaci - trei persoane;
- ncrctorul i sigurana ncrctorului - trei
persoane;

Foto 9 cinci cartue calibru 7,65 mm
- manonul interior i eava - patru persoane ;
- gura evii, ina manonului i zonele greu accesibile ale componentelor interioare - trei persoane;
- arc celule epiteliale - dou persoane ;
- cartue - celule epiteliale - dou persoane.

C. Transferul urmei biologice a victimei la suspect (pe corpul sau pe hainele acestuia).


O abordare simpl a acestui gen de transfer poate fi
cea n cazul unei infraciuni de viol comis asupra unei
minore, cnd a fost analizat chilotul persoanei suspecte Foto
10, pe suprafaa cruia au fost identificate urme de snge
uman n amestec cu secreii biologice de tipul celor vaginale
sau spermatice. A fost demonstrat astfel prezena urmelor
biologice (snge) provenite de la victim pe un obiect
vestimentar al suspectului.




Foto 10 chilotul suspectului
228
D. Transferul urmei biologice a victimei pe un obiect de la faa locului.

Prin acest tip de transfer se poate demonstra prezena victimei ntr-un anumit perimetru sau incint, n
condiiile n care aceasta a fost mutat sau este disprut. Pentru exemplificare este prezentat mai jos analiza
efectuat ntr-o cauz de tentativ de omor cu victime multiple, asupra sabiei presupus a fi implicat n
eveniment Foto 11. Urmele identificate pe suprafaa acesteia au fost constituite i identificate astfel:
- pe lam:
o snge uman sub forma a trei urme distincte din care s-au obinut profile genetice ale
victimelor;
o trei fragmente de amprente papilare care au cantitatea de material biologic suficient
pentru obinerea profilului genetic al uneia dintre victime;
- pe suprafaa mnerului: celule epiteliale provenite de la persoana deintoare a acestui obiect.


Foto 11 sabia supus examinrii

E. Transferul urmei biologice a unui martor pe victim sau pe un obiect de la faa locului.
Este ntlnit n cazurile contaminrilor directe sau ncruiate. Aceste tipuri de probe nu aduc informaii
n rezolvarea cazurilor i deseori conduc ancheta judiciar pe o pist greit, prin cutarea unei persoane al crei
profil genetic s fie identic cu cel n litigiu.

F. Transferul urmei biologice a unui martor pe autor
Poate fi o surs de informaii prin care se s se aduc un plus de veridicitate declaraiilor acestuia. Spre
exemplificare v prezentm un caz n care o persoan aflat n apropierea desfurrii unei infraciuni surprinde
autorul i ncearc s l imobilizeze. Prin contactul direct dintre cei doi este realizat un transfer de material
biologic unidirecional: martor autor. Din ancheta judiciar i declaraiile martorului pot fi identificate
obiectele vestimentare ale autorului i zonele de contact pe suprafaa creia a avut loc transferul. Genotiparea
materialului biologic remanent n aceast zon i a probei biologice de referin recoltat de la martor poate duce
la confirmarea evenimentului.

G. Transferul urmelor biologice ale unei persoane pe obiecte n litigiu, pe baza crora poate fi stabilit
un fapt.
Realizarea unor studiii n cadrul laboratoarelor de genetic judiciar ale Poliiei Romne a demonstrat
posibilitatea de genotipare a microurmelor biologice remanente n stratul interstiial al hrtiei pe care au fost
efectuate nscrisuri cu vechime de pn la aproape 26 ani. Aceste rezultate au relevat faptul c analizele genetice
pot completa n anumite condiii determinrile grafoscopice, fie la identificarea falsurilor, fie al persoanei
creatoare.
n acest studiu au fost utilizate nscrisuri executate pe diverse tipuri de hrtii, cu o vechime cuprins
ntre o zi i 26 ani Foto 12, 13 i 14.




Urma 1
Urma 3
Urma 2
229

Foto 12. nscris cu o vechime Foto 13. nscris cu o vechime Foto 14. nscris cu o vechime
de aproximativ o lun de aproape 26 ani de aproape 15 ani


Genotiparea materialului biologic prelevat din stratul superficial n cazul nscrisurilor cu o vechime de
aproape 26 ani a dus la obinerea unor profile genetice n care apare fenomenul LCN (Low Copy Number)
Figura 15, 16, 17 i 18, profilele B, D, F i H - pentru celulele epiteliale prelevate dup ndeprtarea stratului
superficial, au fost obinute profile genetice complete pentru cei 16 loci utilizai - Figura 15, 16, 17 i 18,
profilele A, C, E i G.



C
A
B D
Foto 16. Profilul genetic al celulelor epiteliale remanente n
stratul interstiial C i n stratul superficial D, pentru
markerii D3S1358, TH01, D13S317, D16S539 i D2S1338.


Foto 15. Profilul genetic al celulelor epiteliale remanente
n stratul interstiial A i n stratul superficial B, pentru
markerii D8S1179, D21S11, D7S820 i CSF1PO.




230
E G
H


F
Foto 18. Profilul genetic al celulelor epiteliale remanente n
stratul interstiial G i n stratul superficial H, pentru markerii
AMEL, D5S818 i FGA.
Foto 17. Profilul genetic al celulelor epiteliale remanente n
stratul interstiial E i n stratul superficial F, pentru markerii
D19S433, vWA, TPOX i D18S51.

n cazul nscrisurior cu vechime de aproximativ o lun, genotiparea materialului biologic prelevat din
stratul superficial adiacent nscrisului a determinat obinerea unui amestec de profile genetice. Analiza genetic a
probelor recoltate din stratul urmtor a evideniat profile genetice unice.
Pentru nscrisul creat cu aproximativ 15 ani n urm, rezultatele au fost similare celui cu vechimea de
aproape 26 de ani.
De asemenea i n domeniul balisticii pot fi furnizate o serie de informaii care s duc la identificarea
proprietarului sau/i ale altei persoane care a utilizat o arm, deoarece de pe suprafaa acesteia este posibil s fie
prelevate microurme biologice din care se pot obine profile genetice ale acestora.
Un alt exemplu poate fi cel al unui dispozitiv suspect disimulat ntr-o cutie de conserv marca
NOSTROMO de fabricaie Italian, Foto 19 - 22, care ntrunete caracteristicile tehnice ale unei bombe
confecionate artizanal.


Foto 19 componentele din interiorul dispozitivului suspect Foto 20 spatele cutiei de conserve n care a fost
introdus disimulat ntr-o cutie
de conserv marca NOSTROMO



231

Foto 21 detaliu al poziionrii ncrcturii explozive Foto 22 banda adeziv a ncrcturii
explozive


Rezultatele genotiprii au fost urmtoarele:
- banda adeziv n care a fost mpachetat bateria un profil genetic al unei persoane de sex masculin;
- suprafaa interioar a cutiei un profil genetic al unei persoane de sex masculin identic cu cel al
celulelor epiteliale remanente pe banda adeziv n care a fost mpachetat bateria;
- banda adeziv a ncrcturii explozive un amestec de profile genetice ce provine de la minim dou
persoane. Profilul genetic al microurmelor de celule epiteliale remanente pe banda adeziv n care a fost
mpachetat bateria i respectiv, suprafaa interioar a cutiei, este inclus n acest amestec.

Transferul urmelor biologice n mod indirect (secundar)

Uneori urmele ce conin ADN pot fi transferate (la victim, suspect, martor, obiect) printr-un vector
intermediar. n cazul transferului indirect nu exist un contact fizic nemijlocit ntre sursa de ADN i suprafaa
int. n aceste cazuri vectorul de transfer poate fi o persoan sau obiect. Transferul indirect al urmei nu
constituie o prob care s fac legtura informaional dintre o persoan i o anumit arie infracional.

3. IDENTIFICAREA PROBELOR BIOLOGICE

Factori de risc ce pot compromite probele, fcndu-le inapte pentru analiza genetic judiciar.

Realizarea cu succes a genotiprii probelor biologice ridicate de la faa locului depinde de modul n care
sunt ridicate, ambalate, conservate i transportate. Astfel, tehnica de recoltare i nregistrare a probelor, cantitatea
i natura acestora, modul de manipulare, ambalare, condiiile de conservare i transport au o importan
deosebit pentru obinerea unor rezultate viabile prin analiza ADN.
Dac urmele nu sunt recoltate, nregistrate, ambalate, conservate i transportate corespunztor,
nerespectnd regulile impuse prin managementul de calitate i dispoziiile care reglementeaz aceast activitate,
acestea nu vor satisface condiiile minime pentru a fi admise ca probe n justiie i nu vor fi genotipate pentru
evitarea cheltuielilor nejustificate. Dac probele nu sunt nregistrate, naintea ridicrii, iar custodia acestora nu
este documentat, atunci originea acestora poate fi contestat. Dac recoltarea este incorect probele se pot
distruge. Dac ambalarea este incorect probele se pot contamina sau degrada. Pstrarea n condiii
necorespunztoare poate duce deasemenea la degradarea probelor. Toi aceti factori pot influena negativ, n
mod decisiv, succesul genotiprii probelor sau pot fi contestate ca probe tiinifice n soluionarea cazului.
Sngele, sperma, esuturile biologice moi sau dure (epitelial, conjunctiv, muscular sau osos), firele de
pr i saliva pot fi transferate n mod direct pe corpul unei persoane, pe mbrcmintea acesteia sau pe un obiect
gsit la faa locului. O dat cu depunerea lichidelor biologice, acestea ader sub form de pete pe suprafaa
obiectului purttor. Probele biologice solide (esut, os, pr) se pot, de asemenea, depune pe obiecte prin contact
direct.
esutul biologic
esutul biologic poate fi gsit depus pe o gam foarte variat de suporturi n scena crimei, cum ar fi:
armele implicate n eveniment (de ex.: n/pe eava armei, pe topor, ciocan, fierstru,
etc).
obiecte vestimentare care pot face legtura dintre victim i autor sau autor i scena
crimei;
232
vehicule, pe toate zonele unde a existat un contact fizic dintre persoana implicat sau
victim i obiectul suport (volan, mnere, sub acestea, parbrize deteriorate, pe
interior sau exterior, airbag etc.)
obiecte diverse prezente n cmpul infracional care au fost utilizate de persoane sau
constituie suportul pentru realizarea unui transfer al urmelor sau microurmelor
biologice.

Sngele
Urmele de snge permit identificarea persoanei de la care provine prin intermediul genotiprii ADN
coninut n acesta, din acest motiv, au o valoare probatorie foarte mare. Urmele de snge pot fi examinate i din
punct de vedere al dispunerii pe obiectul suport, obinndu-se informaii traseologice i o posibil localizare n
spaiu a persoanei de la care provine. Urmele de snge pot fi gsite :
pe autor
pe victim
pe obiecte vestimentare
pe diferite obiecte existente la faa locului
pe obiectele implicate n svrirea infraciunii

Saliv i secreii nazale
Probe ce pot fi folosite pentru identificarea unui individ utiliznd genotiparea ADN a celulelor prezente
n saliv/secreii nazale sunt:
resturi de igar
vase de but
erveele
gum de mestecat
timbre
plicuri
urme de mucturi
urme de saliv pe pri ale corpului
alimente parial consumate
mti faciale

Secreii vaginale i sperm
Secreiile vaginale/sperma au un potenial ridicat de identificare prin genotiparea ADN, din aceste
motiv au o valoare probatorie foarte mare, n special n cazurile de viol.
Urmele de sperm au n general o coloraie alb glbuie i un aspect uor rugos. Deseori sunt intuite de
ctre investigator obiectele purttoare de astfel de urme.

Unghii i depozite subunghiale
Unghiile pot fi o surs de material probatoriu (material biologic, fibre, lac de unghii) atunci cnd provin
de la victim i/sau autor i pot avea un potenial mare de identificare (profil ADN, creste verticale, orice
fragmente).
Infraciunile n care unghiile i/sau depozitele subunghiale pot avea importan, includ faptele comise
cu violen, infraciunile sexuale (ex. unghii rupte sau crpate, urme de zgriere prezente pe victim i/sau autor,
etc).

Fire de pr
Prul uman, corporal sau capilar, este important pentru genotiparea ADN.
Aplicaii criminalistice ale acestor tipuri de probe:
genotiparea ADN a celulelor prezente n bulbul firului de pr, analiza mitocondrial
a firelor de pr;
examinri morfologice (aspect, culoare, canalul medular, keratina, boli ale prului,
pr smuls/colorat).

Fecale i urin
Aceste tipuri de probe biologice pot fi examinate din punct de vedere al geneticii judiciare pentru
identificarea persoanei de la care provin i parial din punct de vedere chimic sau toxicologic (urina).
233
Este tiut faptul c fecalele, indiferent de origine, sunt un mediu bacteriologic foarte bun. Acesta poate
duce la distrugerea oricrei microurme biologice, care ar putea sta la baza stabilirii unui profil genetic. Dar, n
anumite situaii i cu o prelevare corect a microurmelor care conin material genetic, acestea pot fi genotipate.

Urmele de mucturi
Urmele de mucturi pot fi gsite pe piele, pe mncare parial consumat, pe gum de mestecat etc. De
regul se ntlnesc n cazurile infraciunilor sexuale, cnd provin de la victim i/sau autor.
Urmele de mucturi pot fi analizate att din punct de vedere al formei ct i prin examinarea genetic a
salivei prezente n zonele adiacente.

Urme sau microurme biologice de transfer. Probe provenite din contactul cu pielea/transpiraia
Prin manipularea de mai multe ori a unui obiect vor fi transferate pe suprafaa acestuia celule epiteliale
care se vor depune stratificat. Acestea sunt probe care pot fi folosite pentru a identifica un individ prin
intermediul genotiprii celulelor nucleate transferate prin contact sau transpiraie (contact tegumentar).
La recoltarea acestui gen de microurme biologice, trebuie inut cont de aceast dispunere n straturi,
deoarece ofer posibilitatea prelevrii microurmelor sau urmelor biologice ce provin de la persoane diferite, n
funcie de modul de prelevare.

Aceste tipuri de probe pot fi gsite pe cele mai variate suporturi, cum ar fi:
haine (nclminte)
mnui
plrii sau mti
arme folosite la comiterea faptei (cuit, arm de foc, piatr), unelte folosite la spargere
(urubelni, levier, etc) sau alte obiecte
piele (de ex. pielea victimei)
vehicule (volan, schimbtor de viteze, etc)
amprente papilare latente

Urmele sau microurmele biologice depuse pe suporturi atipice
La identificarea urmelor sau microrumelor biologice se va ine seama de proprietile morfologice sau
fizico-chimice ale acestora, iar identificarea se realizeaz diferit n funcie de natura materialului biologic i de
suport.
Spre exemplificare vom prezenta cteva dintre acestea:
- sol care conine urme biologice (snge, saliv sau alte secreii);
- uleiuri sau vaseline amestecate cu urme biologice (snge, saliv sau alte secreii);
- urme biologice (snge, saliv sau alte secreii) depuse pe suprafee ruginite sau se afl n amestec cu alte
tipuri de substane.

4. RISCUL PRIVIND CONTAMINAREA LOCULUI FAPTEI

Analiza genetic n scop judiciar a probelor biologice provenite de la faa locului (genotiparea judiciar)
reprezint din ce n ce mai frecvent o provocare n cadrul laboratoarelor de specialitate, presupunnd abordarea
unor tehnici adaptate cantitii i strii de conservare a materialului biologic pus la dispoziie.
Mijloacele din ce n ce mai sofisticate de comitere a infraciunilor, se traduc prin prezena la faa locului
a unor cantiti foarte mici de material biologic care s constituie suportul analizei genetice i implicit a
posibilitii identificrii infractorilor. Mai mult, probele biologice de tipul fragmentelor osoase vechi, la care
degradarea s-a produs datorit aciunii nucleazelor i efectelor proceselor hidrolitice si oxidative, cazurile de viol
caracterizate de cele mai multe ori prin prezena unui numr mic de copii ADN provenite de la suspect
(contribuitor minor, brbat) n amestec cu un numr mare de copii ADN provenite de la victim (contribuitor
major, femeie) sunt adesea mai complicate i presupun abordarea unor tehnici de analiz genetic adaptate.
Obinerea profilelelor ADN dintr-o cantitate foarte mic de material biologic (sub 100 pg ADN
matri) a fost definit ca fiind genotiparea ADN low copy number (tehnica LCN).
Trebuie menionat c la ultima ntlnire a grupului de lucru ENFSI (European Network of Forensic
Science Institute), a fost anunat renunarea la termenul tiinific de tehnic low copy number, ntruct s-a
constatat c parametrii de lucru i modul de abordare a probelor biologice cu un coninut mic de ADN matri
(ex. 34 de cicluri ale reaciei de amplificare) pot fi aceiai i n cazul probelor cu un coninut suficient de
material biologic. Prin urmare termenul tiinific acceptat de comunitatea tiinific ENFSI este genotiparea
probelor biologice cu un coninut mic de ADN matri.
Astfel analiza genetic a probelor biologice cu un coninut mic de ADN matri implic gsirea unor
soluii de cretere a sensibilitii metodei, rezultatele obinute fiind caracterizate prin modificri semnificative n
234
morfologia profilelor electroforegramelor, astfel nct metodele standard de interpretare devin inadecvate n
unele cazuri, fiind astfel necesare metode noi de interpretare i precauii suplimentare. De asemenea prezentarea
rezultatelor impune o atenie deosebit.
Este necesar o abordare complex a intregului proces, de la ridicarea probelor de la faa locului i pn
la interpretarea rezultatelor.
O cantitate foarte mic de material genetic (10 - 17 celule diploide) lsat accidental la faa locului de
ctre o persoan care nu are legatur direct cu infraciunea, poate fi ridicat, analizat i implicit introdus n
ecuaia investigrii criminalistice, cu toate consecinele de ordin interpretativ ce decurg din aceasta.
n sprijinul celor prezentate mai sus, facem referire la un studiu realizat de ctre Rutty et al. care
prezint observaiile fcute n cadrul unui numr redus de experimente realizate n scopul de a investiga
potenialul contaminrii cu ADN strin de ctre persoanele ce realizeaz cercetarea la faa locului. De asemenea
acest studiu prezint importana utilizrii de ctre personalul implicat n cercetarea la faa locului a
echipamentului de protecie adecvat, n scopul reducerii riscului privind contaminarea.
Experimentele au fost realizate de ctre un singur subiect de sex masculin, cunoscut ca fiind good
shedder - persoan care n contact cu un suport inert las suficient material genetic pentru a se obine un
profil genetic complet. Persoanele care n contact cu un suport inert las o cantitate de material genetic
insuficient pentru a se obine un profil genetic complet sunt denumii poor shedder.
Experimentele au fost mprite n patru grupe generale: Fr micare, Cu micare (micri ale
subiectului ca acelea pe care investigatorul de la faa locului le-ar putea face), Vorbind i Tuind, n
picioare i n genunchi, cu i fr purtarea echipamentului de protecie.
Cnd subiectul a purtat echipament de protecie acesta a fost compus din salopet pentru corp cu glug,
protecie de plastic antistatic pentru picioare i mnui chirurgicale. Atunci cnd a fost utilizat protecie
pentru gur aceasta a constat din masc de unic folosin.
Pentru fiecare test, zona de testare a constat din dou suprafee din polietilen (non-absorbante) avnd
dimensiunile de 46 cm x 57 cm, ce au fost plasate pe podea (dimensiuni: 114 cm lungime si 47 cm laime),
peste care au fost aezate coli de hrtie pentru a simula aria din imediata apropiere a investigatorului care
realizeaz cercetarea la faa locului (colile de hrtie au fost aezate de ctre un voluntar pentru a preveni
contaminarea acesteia de ctre subiect). Dup fiecare test, coala de hrtie a fost ridicat i de pe aceasta au
fost prelevate probe cu ajutorul unui tampon de bumbac steril umezit cu ap steril deionizat (a fost
utilizat cte o fiol pentru fiecare test) de pe toat suprafaa celor cinci zone ale acesteia, aa cum este
prezentat n figura de mai jos.


114 cm
Reprezentarea schematica a zonei de testare

Au fost utilizate controale negative constnd din ase tampoane de bumbac mbibate cu acelai lot de ap
steril deionizat.
Toate probele prelevate au fost imediat congelate la -20
0
C, fr uscare prealabil, procesate de ctre o alt
persoan dect subiectul: extracie cu QIAmp DNA mini kit - Qiagen, amplificare kit AmpFlSTR SGM
Plus - Applied Biosystems, interpretare.

46 cm
57 cm 57 cm
14.2 cm 14.2 cm 14.2 cm 14.2 cm
z
o
n
a
z
o
n
a
z
o
n
a
z
o
n
a
zona 5
subiect

1 2 3 4
235
Rezultatele sunt exprimate prin numrul de alele ale donorului, respectiv nedonorului pentru fiecare zon
de testare i numrul de alele observate n fiecare control negativ (Tabelul nr. 1), care practic se pot traduce prin
gradul de contaminare existent n fiecare situaie n parte (cu ct numrul de alele donor/nedonor este mai mare
cu att gradul de contaminare este mai mare).
+a masc cu vizor
Msuri
protecie
Numr alele donor / nedonor
Exp
.
Nivel
activitate
Corp Fa
n
picioare(S)
n
genunchi
(K)
vorbin
d
tuin
d Zona
1
Zona
2
Zona
3
Zona
4
Zona
5
Alele
n
control
negativ
1 fr - - S - - 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0
2 fr - - K - - 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0
3 normal - - S - - 21(0) 1 (0) 1 (0) 0 (0) 2 (0) 0
4 normal + - K - - 21 (0) 20 (0) 19 (0) 21(0) 16 (0) 0
5 fr + - S - - 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0
6 fr + - K - - 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0
7 intens + - S - - 0 (0) 0 (0) 0 (0) 21 (0) 18 (0) 0
8 intens + - K - - 21 (0) 21 (0) 6 (2) 7 (1) 1 (0) 1
9 fr + - S + - 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0
10 fr + - K + - 19 (0) 20 (0) 9 (0) 11 (0) 0 (0) 0
11 fr + - S - + 2 (0) 7 (0) 0 (0) 1 (0) 21 (0) 0
12 fr + - K - + 0 (1) 17 (0) 10 (0) 4 (0) 1 (1) 0
13 fr + + S + - 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0
14 fr + + K + - 21 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 2
15 fr + + S - + 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (1) 1 (0) 0
16 fr + + K - + 0 (0) 1 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0
17 fr + +a S + - 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0
18 fr + +a K + - 5 (4) 10
(12)
0 (0) 1 (0) 1 (1) 8

Tabel nr. 1. Condiiile experimentale i rezultatele obinute. (adaptat dup Rutty, G.N., Hopwood, A., Tucker,
V, The effectiveness of protective clothing in the reduction of potential DNA contamination of the scene of
crime, Int. J.Legal. Med.(2003), 117: 170 174)

Recomandri
Purtarea echipamentului de protecie specific (costum, protecie pentru cap i gur, manui sterile)
reduce, dar nu implicit elimin, contaminarea accidental cu ADN a locului faptei.
Referitor la masca de protecie pentru gur, se recomand a nu se vorbi i nici a o atinge n mod repetat
pe timpul utilizrii acesteia.
Referitor la costumul de protecie, se recomand ca acesta s nu interfere cu hainele purtate n mod
uzual ntr-o manier n care s afecteze locul faptei.
Modalitatea de micare la locul faptei trebuie s fie minim astfel nct s permit desfurarea optim
a activitilor specifice.
Manuile i masca de protecie pentru gur trebuie schimbate regulat n afara locului faptei pentru a
reduce contaminarea i intercontaminarea.
Accesul la locul faptei trebuie strict limitat i permis numai persoanelor care au motive legitime s fie
prezente.
Comunicarea verbal la locul faptei trebuie s fie la un nivel minim.
Ca msur de precauie, ar trebui considerat posibilitatea de a se recolta probe de referin pe la
persoanele care particip la cercetarea locului faptei, precum i de la cele care au avut acces la locul
faptei, n vederea gestionrii corecte a cazului n situaia existenei unei contaminri.
n acest context aspectele legate de riscul privind contaminarea, respectiv intercontaminarea accidental
a probelor biologice de ctre echipa care efectueaz cercetarea la faa locului trebuie abordate cu maximum de
profesionalism, pe baza dispoziilor i ghidurilor specifice in vigoare, care trebuie aplicate i respectate cu
strictee.


236
5. INTERPRETAREA REZULTATELOR ANALIZELOR GENETICE

Rezultatele analizelor genetice, respectiv profilele obinute sunt prezentate sub form tabelar i pot fi
interpretate prin:
- identitate - ntre genotipurile probelor de referin i cele ale urmelor sau microurmelor biologice litigiu
nu exist deosebiri;
- includere - profilele genetice ale probelor biologice de referin sunt incluse n amestecurile de profile
obinute n urma genotiprii probelor biologice litigiu;
- excludere prin compararea genotipurilor probelor biologice de referin i a celor litigiu, rezult
diferene care pot fi explicate numai prin faptul c acestea provin din surse diferite;
- transmiterea ereditar a caracterelor - jumtate din genotipul prinilor este transmis la copii.
Fiecare identificare implic analize biostatistice aferente care sunt prezentate sub form de frecven a
genotipului respectiv i / sau grup populaional n care profilul genetic la care se adreseaz este unic.
Pentru populaia Romniei a fost efectuat un astfel de studiu n urma cruia au fost obinute frecvenele
fiecrei alele utilizate actual n Sistemul de Analize Genetice. Rezultatele obinute pot fi folosite n calculele
biostatistice pentru populaia din Romnia, la estimarea frecvenei profilelor genetice, att n cazuistica judiciar
ct i cea civil.
Au fost studiai 15 loci STR tetramerici (D8S1179, D21S11, D7S820, CSF1PO, D3S1358, TH01,
D13S317, D16S539, D2S1338, D19S433, vWA, TPOX, D18S51, D5S818, FGA) corespunztori kit-ului
multiplex AmplFI STR Identifiler (Applied Biosystems) utiliznd 682 de profile de referin ale persoanelor.
Frecvenele alelelor corespunztoare celor 15 loci STR studiai i puterea de discriminare a persoanelor
(PD) pe baza acestora au fost publicate n Revista de Criminalistic.
Profilele genetice analizate pentru persoanele nenrudite genetic din eantionul de indivizi studiat,
respect echilibrul Hardy-Weinberg, neobservndu-se deviaii, iar puterea de discriminare pentru cei 15 loci
studiai este de 0.9999999978.
Dac interpretarea i exprimarea rezultatelor n cazul profilelor genetice unice este mai puin laborioas,
deoarece se calculeaz frecvena regsirii acestuia n grupul populaional studiat, n cazul amestecurilor sunt
necesare abordri din punct de vedere statistic mai complexe.
n calculele statistice efectuate expertul folosete o estimare a proporiei din populaie care are un
anumit genotip pentru a aprecia probabilitatea ca un anumit profil genetic s poat aparine unei alte persoane
dect cea n cauz.
S presupunem c profilul unei urme biologice de la faa locului este identic cu al unei persoane din
cercul de suspeci i are frecvena de 2,8x10
-13
, ceea ce semnific un grup populaional n care este unic de
3,57x10
12
indivizi. Pentru explicarea acestui rezultat poate fi folosit cazul ipotetic a dou insule, populate fiecare
cu cte 3,57x10
12
indivizi, iar persoana n cauz locuiete pe insula A i conform calculelor biostatistice are un
profil unic n acest grup populaional (Figura 23). Dac sunt reunite populaiile celor dou insule obinndu-se
2x3,57x10
12
indivizi, atunci, vor exista dou persoane cu acelai profil genetic, conform teoriei probabilitilor.




















Figura 23. Teoria insulelor pentru exprimarea prupului populaional

Mulimea A+B: 2x(3,57x10
12
)
persoane suspectul 3 i o alt
persoan pot avea acelai profil
genetic
Mulimea A: 3,57x10
12
persoane -
profilul genetic al suspectului 3
es ic te un
Mulimea B: 3,57x10
12

persoane
237
Raionamentul Bayesian este cel mai bun model de care dispunem pentru interpretarea probelor
tiinifice. El permite nelegerea unor aspecte altfel greu de sesizat. Desfurarea procesului n instan impune
respectare a trei principii:
1. evaluarea incertitudinii oricrei propoziii se face comparativ cu examinarea a cel puin unei
propoziii alternative - vor exista minimum dou puncte de vedere opuse: unul al aprrii i cellalt al acuzrii.
n aceast situaie este valabil forma teoremei lui Bayes n care sunt menionate ansele fiecrei dintre acestea
i posibilitatea calculrii veridicitii acestora, una n raport cu cealalt;
2. n interpretarea tiinific a probelor exist ntrebri de genul: Care este probabilitatea datelor
obinute dac se accept ca real o anumit propoziie?
3. interpretarea tiinific a rezultatelor este condiionat nu numai de propoziiile opuse ci i de cadrul
circumstanelor n care acestea sunt evaluate.
Pentru interpretarea amestecurilor de profile genetice se consider ntotdeauna dou ipoteze: ipoteza
acuzrii (Hp) i ipoteza aprrii (Hd). Aceasta semnific faptul c putem folosi forma de calcul a anselor,
conform teoremei lui Bayes, iar informaiile aduse de analiza genetic judiciar se pot trata separat de celelalte
informaii, care sunt evaluate prin ansele anterioare (preliminare).
Interpretarea unui amestec depinde foarte mult de mprejurrile crimei. Calculele care se efectueaz
trebuie s in cont c trebuie s se demonstreze prezena materialului biologic al unui individ (victim sau
suspect) pe un obiect n litigiu sau pe o alt persoan (suspect sau victim).
Pentru interpretarea acestor rezultate sunt formulate dou ipoteze :
i. suspectul sau victima, n funcie de caz, este contribuitor n amestecul de profile genetice obinut din
materialul biologic studiat;
ii. nu suspectul sau respectiv victima a fost cea care a contribuit la crearea urmei biologice genotipate,
ci o alt persoan necunoscut, al crei profil genetic n combinaie cu cellalt considerat inclus, a determinat
obinerea amestecului.
n urma calculelor de biostatistic aferente i al raportului dintre ipoteza i. i ii. se concluzioneaz
printr-o valoare numeric varianta posibil. Aceast valoare este denumit LR (Likelihood Ratio) i exprim
raportul celor dou anse.
Pot fi totui situaii n care aceast prezumie nu este valabil, de exemplu o prob n cazul unui viol
care poate fi constituit dintr-un amestec de snge i sperm. Dac profilul genetic al probei include genotipurile
victimei i suspectului, iar victima identific obiectul respectiv, propoziia acuzrii va fi similar cu cea de mai
sus:
Hp: proba n litigiu conine ADN provenind de la victim i de la suspect,
iar pentru propoziia aprrii pot fi admise urmtoarele variante:
Hd1: proba n litigiu conine ADN provenind de la victim i de la o persoan necunoscut;
Hd2: proba n litigiu conine ADN provenind de la suspect i de la o persoan necunoscut;
Hd3: proba n litigiu conine ADN provenind de la dou persoane necunoscute.
Raportul anselor poate fi folosit analiznd simultan dou ipoteze:
- urma conine ADN provenind de la victim i de la o persoan necunoscut.
- urma conine ADN provenind de la dou persoane necunoscute.
Evaluarea raportului anselor se face ca n cazurile de mai sus, astfel c specialistul va avea posibilitatea
s concluzioneze: Probele pledeaz pentru faptul c este de LR ori mai probabil ca prima dintre aceste
ipoteze s fie adevrat dect ca cea de-a doua ipotez s fie adevrat.
Stabilirea faptului c victima a fost sau nu violat pe obiectul respectiv pe care exist urma depinde nu
numai de probele biologice genotipate, ci i de alte circumstane pe care instana le va lua n considerare. Dac
instana va stabili c, ntr-adevr obiectul de pe pat este asociat cu violul, atunci este util s se analizeze
urmtoarele ipoteze:
- urma conine ADN provenind de la victim i de la suspect;
- urma conine ADN provenind de la victim i de la o persoan necunoscut.
Evaluarea raportului anselor pentru aceast alternativ decurge ca mai nainte. Concluzia specialistului
va fi de forma: Probele ADN demonstreaz faptul c este de LR ori mai probabil ca prima dintre aceste
afirmaii s fie adevrat.
Pentru exemplificare s lum amestecul de profile genetice provenit de la dou persoane, notate cu P1 i
P2, prezentat mai jos i s calculm ansele ca P2 s fie contribuitor la crearea acestuia. n acest sens putem
formula urmtoarele ipotez a acuzrii:
Hp: Proba n litigiu conine ADN provenind de la persoana 1 i de la persoana 2.
n acest caz pentru propoziia aprrii pot fi admise urmtoarele variante:
Hd1: Proba n litigiu conine ADN provenind de la persoana 1 i de la o persoan necunoscut.
Hd2: Proba n litigiu conine ADN provenind de la persoana 2 i de la o persoan necunoscut.
Hd3: Proba n litigiu conine ADN provenind de la dou persoane necunoscute a cror profile genetice
combinate determin obinerea amestecului respectiv.
238
Pentru exprimarea raportului anselor vor fi anlizate simultan cte dou ipoteze:
- urma conine ADN provenind de la persoana 1 i de la o persoan necunoscut.
- urma conine ADN provenind de la dou persoane necunoscute.
sau
- urma conine ADN provenind de la persoana 2 i de la o persoan necunoscut.
- urma conine ADN provenind de la dou persoane necunoscute.
Electroferogramele obinute sunt prezentate n Figurile 24 27.



Figura 25. Amestec de profile genetice ce provine de la doi
contributori pentru markerii D3S1358, TH01, D13S317,
D16S539iD2S1338.
Figura 24. Amestec de profile genetice ce provine de la doi
contributori pentru markerii D8S1179, D21S11, D7S820 i
CSF1PO.
239


Figura 26. Amestec de profile genetice ce provine de la doi
contributoripentrumarkeriiD19S433,vWA,TPOXiD18S51.
Figura27.Amestecdeprofilegeneticereproductibileceprovine
de la minim doi contributori pentru markerii AMEL, D5S818 i
FGA.

Conform calculelor biostatistice efectuate, se poate afirma c prima ipotez, aceea c persoana 2 a
contribuit la crearea urmei biologice genotipat, este de 2,14x10
13
ori mai posibil dect a doua. Aceasta
semnific faptul c un individ necunoscut al crui profil genetic poate substitui pe cel al persoanei 2 din amestec,
va fi regsit la un numr mai mare de 2,14x10
13
persoane.
Am ignorat n explicaiile date mai sus orice informaie, cum ar fi intensitatea (aria) sau nlimea
picurilor care ar putea fi un indicator al cantitilor relative de ADN ce provine de la un contributor din cadrul
unui amestec. Lund n calcul diferenele de intensitate dintre picurile unei electroforegrame ce conine un
amestec de dou profile genetice, se poate crete capacitatea de discriminare a analizei.
Studiile recente au demonstrat utilitatea interpretrii amestecurilor de profile genetice utiliznd pe lng
metodele numerice, cunoscute ca Linear Mixture Analysis (LMA) i tehnica Least Square Deconvolution
(LSD), pentru separarea persoanelor contributoare.
Least-square deconvolution este un algoritm matematic prin care se pot stabili cu certitudine
combinaiile numrului de participani (date sub form de vectori), funcie de masa materialului genetic al
fiecruia din amestec.
La interpretarea amestecului prin tehnica LSD, se obin separat cele dou profile genetice, iar
specialistul poate utiliza n calculele biostatistice frecvenele profilelor genetice deoarece cele dou ipoteze se
reduc la:
Hp1: Persoana 1 a creat urma de la faa locului,
iar aprarea:
Hd1 : o alt persoan a creat urma existent la faa locului.
i
Hp2: Persoana 2 a creat urma de la faa locului,
iar aprarea:
Hd2 : o alt persoan a creat urma existent la faa locului.
n mod clar, Hp i Hd se exclud reciproc i sunt exclusive (nu mai poate fi o alt propoziie adevrat).
Specialistul va folosi o estimare a proporiei din populaie cu genotipul G pentru a aprecia probabilitatea ca
proba de la locul faptei s fi fost creat de ctre persoana 1 i 2.
Utiliznd frecvenele alelelor markerilor genotipai se poate afirma c:
- frecvena profilului genetic al persoanei 1 n populaia caucazian este de 9,18x10
-22
, ceea ce nseamn c ntr-
un grup format din 2,78x10
22
de indivizi, profilul genetic al persoanei 1 este unic;
240
- frecvena profilului genetic al persoanei 1 n populaia caucazian este de 4,05x10
-23
, ceea ce nseamn c ntr-
un grup format din 3,59x10
22
de indivizi, profilul genetic al persoanei 2 este unic.

6. LIMITELE METODEI DE ANALIZ GENETIC

n momentul actual, limitele metodei i mai pot face simit prezena doar n cazurile unde urmele
biologice se gsesc ntr-o stare de degradare biologic sau chimic total sau se gsesc ntr-un amestec, unde
numrul de contribuitori este mai mare de patru persoane sau contribuitorul de interes este n cantitate foarte
mic (minoritar) n amestec cu unul sau mai muli contribuitori care sunt n cantitate mare (majoritar). Aceasta
are ca rezultat o cretere a valorii LR (Likelihood Ratio) pentru profilul genetic vizat, concomitent cu o scdere a
grupului populaional n care acesta este unic.
Vom analiza comparativ cteva amestecuri de profile genetice analiznd rezultatele calculelor
biostatistice obinute.
Vom considera c pe suprafaa unui mner al unei ui de acces ntr-o incint am identificat urme de
celule epiteliale remanente n urma contactului cu minile persoanelor care l utilizau pentru deschiderea sau
nchiderea acesteia. S presupunem c n incinta respectiv aveau acces n mod normal, trei persoane, notate aici
cu persoana 1, 2 i 3. n urma unei infraciuni, autorul a deschis ua, lsndu-i pe aceeai suprafa celule
epiteliale de pe palm.
Recoltarea celulelor a fost efectuat din trei regiuni ale mnerului, iar genotiparea ADN extras din
acestea au evideniat trei amestecuri de profile genetice:
- urma a - un amestec de profile genetice ce provin de la minim dou persoane;
- urma b - un amestec de profile genetice ce provin de la minim trei persoane;
- urma c - un amestec de profile genetice ce provin de la minim patru persoane.
Profilele genetice ale probelor de referin recoltate de la cele trei persoane i de la suspect sunt prezentate n
tabelul nr 2.
Tabel 2. Profilele genetice ale probelor de referin recoltate de la cele trei persoane i suspect

Categoria
Profil genetic
Persoana 1
Profil genetic
Persoana 2
Profil genetic
Persoana 3
Profil genetic
suspect
Marker Al. 1 Al. 2 Al. 1 Al. 2 Al. 1 Al. 2 Al. 1 Al. 2
D8S1179 12 14 13 15 13 14 12 15
D21S11 29 30 30 32.2 29 30 30 32.2
D7S820 8 11 10 11 12 13 10 11
CSF1PO 10 11 10 13 10 14 11 11
D3S1358 18 18 14 15 15 17 15 18
TH01 7 7 8 9.3 9 9.3 7 9.3
D13S317 8 9 11 11 8 12 8 12
D16S539 11 13 11 12 11 12 12 13
D2S1338 17 23 19 23 20 25 19 20
D19S433 14 15 14 15 16 17 14 14
vWA 16 17 15 18 17 18 15 16
TPOX 8 9 8 8 8 11 8 11
D18S51 13 16 15 19 13 17 12 14
AMEL X Y X X X X X Y
D5S818 11 12 11 11 11 13 12 12
FGA 22 26 23 24 20 21 20 25

Frecvena de regsire a profilului genetic al suspectului, n populaia european este de 3,82x10
-21
,
calculat pentru rezultatele obinute cu kitul Multiplex ABI IDENTIFILER. Probabilitatea de regsire a
acestui profil genetic n populaia european este de 1 la un numr de 2,62x10
20
persoane, calculat pentru
rezultatele obinute cu kitul Multiplex ABI IDENTIFILER.
Vom analiza i efectua calculele biostatistice aferente, separat pentru cele trei amestecuri de profile
genetice.
a. n amestecul de profile obinut din ADN extras din urma a prelevat de pe mner sunt regsite la
locii corespunztori profilele genetice ale probelor de referin recoltate de la persoana 1 i suspect Tabelul 2.


241
Tabelul 3. Amestecul de profile genetice obinut din ADN extras din urma a prelevat de pe mner i profilele
de referin ale persoanei 1 i suspect.

Categoria
Profil genetic
Persoana 1
Profil genetic
suspect
Amestecul rezultat
Marker Al. 1 Al. 2 Al. 1 Al. 2
D8S1179 12 14 12 15 12 14 15
D21S11 29 30 30 32.2 29 30 32.2
D7S820 8 11 10 11 8 10 11
CSF1PO 10 11 11 11 10 11
D3S1358 18 18 15 18 15 18
TH01 7 7 7 9.3 7 9.3
D13S317 8 9 8 12 8 9 12
D16S539 11 13 12 13 11 12 13
D2S1338 17 23 19 20 17 19 20 23
D19S433 14 15 14 14 14 15
vWA 16 17 15 16 15 16 17
TPOX 8 9 8 11 8 9 11
D18S51 13 16 12 14 12 13 14 16
AMEL X Y X Y X Y
D5S818 11 12 12 12 11 12
FGA 22 26 20 25 20 22 25 26

n urma calculelor de biostatistic aferente i al raportului dintre prezumia i. i ii. se poate concluziona
c suspectul are de 1,7x10
16
mai multe anse s fie prezent n amestecul obinut dect o person necunoscut
din populaie. Altfel spus, o alt persoan necunoscut care n combinaie cu profilul genetic al persoanei 1 s
rezulte acelai amestec, poate fi regsit la un numr mai mare de 1,7 x10
16
persoane.
Pentru rezultatele obiunute cu kit-ul SGM+ (10 loci utilizai pentru calcule), grupul populaional este
3,8x10
12
.
b. n amestecul de profile obinut din ADN extras din urma b prelevat de pe mner sunt regsite la
locii corespunztori, profilele genetice ale probelor de referin recoltate de la persoanele 1, 2 i suspect
Tabelul 4.
Tabelul 4. Amestecul de profile genetice obinut din ADN extras din urma b prelevat de pe mner i profilele
de referin ale persoanei 1, 2 i suspect.

Categoria
Profil
genetic
Persoana 1
Profil genetic
Persoana 2
Profil
genetic
suspect
Amestecul de profile rezultat
Marker Al. 1 Al. 2 Al. 1 Al. 2 Al. 1
Al.
2
Al. 1 Al. 2
Al.
3
Al. 4 Al. 5 Al. 6
D8S1179 12 14 13 15 12 15 12 13 14 15
D21S11 29 30 30 32.2 30 32.2 29 30 32.2
D7S820 8 11 10 11 10 11 8 10 11
CSF1PO 10 11 10 13 11 11 10 11 13
D3S1358 18 18 14 15 15 18 14 15 18
TH01 7 7 8 9.3 7 9.3 7 8 9.3
D13S317 8 9 11 11 8 12 8 9 11 12
D16S539 11 13 11 12 12 13 11 12 13
D2S1338 17 23 19 23 19 20 17 19 20 23
D19S433 14 15 14 15 14 14 14 15
vWA 16 17 15 18 15 16 15 16 17 18
TPOX 8 9 8 8 8 11 8 9 11
D18S51 13 16 15 19 12 14 12 13 14 15 16 19
AMEL X Y X X X Y X Y
D5S818 11 12 11 11 12 12 11 12
FGA 22 26 23 24 20 25 20 22 23 24 25 26

242
Rezultatele obinute n urma calculelor biostatistice afirm c ansele suspectului sunt de 5,98x10
10
mai
mari dect ale altei persoane necunoscute din populaie. Altfel spus, o alt persoan necunoscut care n
combinaie cu profilele genetice ale persoanelor 1 i 2 s rezulte acelai amestec, poate fi regsit la un numr
mai mare de 5,98x10
10
persoane.
Pentru rezultatele obiunute cu kit-ul SGM+ (10 loci utilizai pentru calcule), grupul populaional este
4,34x10
8
.
c. n amestecul de profile obinut din ADN extras din urma c prelevat de pe mner sunt regsite la
locii corespunztori profilele genetice ale probelor de referin recoltate de la persoanele 1, 2, 3 i suspect
Tabelul 5.

Tabelul 5. Amestecul de profile genetice obinut din ADN extras din urma c prelevat de pe mner i profilele
de referin ale persoanei 1, 2, 3 i suspect.

Categoria
Profil
genetic
Persoana 1
Profil
genetic
Persoana 2
Profil
genetic
Persoana 3
Profil
genetic
suspect
Amestecul de profile rezultat
Marker Al. 1 Al. 2
Al.
1
Al.
2
Al. 1 Al. 2
Al.
1
Al.
2
Al.
1
Al.
2
Al. 3 Al. 4 Al.5
Al.
6
Al.
7
D8S1179 12 14 13 15 13 14 12 15 12 13 14 15
D21S11 29 30 30 32.2 29 30 30 32.2 29 30 32.2
D7S820 8 11 10 11 12 13 10 11 8 10 11 12 13
CSF1PO 10 11 10 13 10 14 11 11 10 11 13 14
D3S1358 18 18 14 15 15 17 15 18 14 15 17 18
TH01 7 7 8 9.3 9 9.3 7 9.3 7 8 9 9.3
D13S317 8 9 11 11 8 12 8 12 8 9 11 12
D16S539 11 13 11 12 11 12 12 13 11 12 13
D2S1338 17 23 19 23 20 25 19 20 17 19 20 23 25
D19S433 14 15 14 15 16 17 14 14 14 15 16 17
vWA 16 17 15 18 17 18 15 16 15 16 17 18
TPOX 8 9 8 8 8 11 8 11 8 9 11
D18S51 13 16 15 19 13 17 12 14 12 13 14 15 16 17 19
AMEL X Y X X X X X Y X Y
D5S818 11 12 11 11 11 13 12 12 11 12 13
FGA 22 26 23 24 20 21 20 25 20 21 22 23 24 25 26
Efectuarea calculelor biostatistice aferente demonstreaz c suspectul are de 10,1x10
6


mai multe anse
s fie contribuitor la forarea amestecului dect o alt persoan necunoscut din populaie. Altfel spus, o alt
persoan necunoscut care n combinaie cu profilele genetice ale persoanelor 1, 2 i 3 s rezulte acelai amestec,
poate fi ntlnit la un numr mai mare de 10,1x10
6


persoane.
Pentru rezultatele obiunute cu kit-ul SGM+ (10 loci utilizai pentru calcule), grupul populaional este
6,33x10
5
.
Calculele comparative pentru
situaiile utilizrii kit-ului Identifiler sunt
prezentate n Fig. 28. Se poate observa o
scdere semnificativ a grupurilor
populaionale n care profilul suspectului este
unic.
Utilizarea kit-ului SGM+, care
conine un numr de 10 loci, duce deasemeni,
la o scdere a grupurilor populaionale Fig.
29.
Dac se vor lua n calcul, din anumite
considerente de siguran, doar 8 loci atunci
grupul populaional va fi de 3311 persoane. n
condiiile utilizrii n calcule doar a 5 loci,
grupul populaional va fi de 181 persoane, iar
pentru 3 loci 44 persoane Fig 30.


Fig.28.CalculelecomparativencazulutilizriikituluiIdentifilerpentruamestecuri
deprofilegeneticeprovenitedelaminim2,3irespectiv4persoane.
243

Dac mprim populaia studiat n gupuri
de cte P, unde P este grupul populaional n care suspectul este unic, vom obine numrul de alte profile
genetice, respectiv persoane, care mai pot fi regsite astfel nct n combinaie cu cel al persoanelor 1, 2 sau 3, pe
care le-am considerat incluse, deoarece utilizau frecvent acel mner, se va obine acelai amestec pentru locii
analizai.


Fig. 30. Calculele comparative n cazul utilizrii unui numr de 8, 5 i
respectiv 3 markeri genetici pentru un amestec de profile genetice
provenitedelaminim4persoane.
Fig. 29. Calculele comparative n cazul utilizrii kitului SGM+
pentruamestecurideprofilegeneticeprovenitedelaminim2,3i
respectiv4persoane.

7. CONCLUZII

Genetica judiciar poate furniza informaii individuale despre evenimentele petrecute n scena
infraciunilor sau s suplimenteze alte metode de identificare criminalistic.
Corelarea probelor biologice prezente n scena crimei cu identificarea, selectarea i factorul probant
urmrit, este primul aspect de care trebuie inut seama n procesul de analiz genetic judiciar.
Pentru a intra n scena infraciunii i n mod expres pentru a efectua cercetarea n vederea identificrii i
recoltrii probelor biologice, este obligatoriu purtarea mijloacelor de protecie anticontaminare.
n prezent, este posibil genotiparea tuturor tipurilor de urme sau microurme biologice care conin
celule nucleate, dac acestea nu sunt n totalitate distruse chimic sau bacterian.
Puterea de discriminare a persoanelor n funcie de profilul genetic al acestora este cuprins ntre 1/10
12
-
1/10
23
, n funcie de numrul de loci utilizat pentru genotipare. Aceasta semnific faptul c la un numr de 10
12
-
10
23
persoane, un profil este unic.
O mrire a numrului de profile genetice aflate ntr-un amestec, duce la o cretere a valorii LR i
implicit o micorare a grupului de persoane n care care profilul suspectului este unic. Peste acest numr de
persoane, n grupuri de cte P a populaiei interogate, vor fi regsite alte persoane a cror profile genetice n
combinaie cu al persoanelor cunoscute incluse, se va obine acelai amestec de profile genetice.
Au fost dezvoltate metode care ofer posibilitatea de genotipare a microurmelor biologice remanente n
diverse tipuri de suporturi. Un exemplu este cel al hrtiei pe care au fost efectuate nscrisuri cu vechime de pn
la aproape 26 ani. Aceste rezultate relev faptul c analizele genetice pot sprijini n anumite circumstane
determinrile grafoscopice, fie la identificarea falsurilor, fie al persoanei creatoare.










244
245
Bibliografie

1. Interpreting DNA evidence. Statistical Genetics for Forensic Scientists, Ian W. Evett and Bruce S. Weir
2. Butler, J. M., Schoske, R., Vallone, P. M., Redman, J. W., and Kline, M. C.(2003). Allele frequencies for 15
autosomal STR loci on U.S. Caucasian,
3. Evett, I., Gill, P., and Lambert, J. (1998). Taking account of peak areas when interpreting mixed DNA profiles.
Journal of Forensic Sciences, 43,
629.
4. Mortera, J., Dawid, A. P., and Lauritzen, S. L. (2003). Probabilistic expert systems for DNA mixture profiling.
Theoretical Population Biology, 63,
191205.
5. Perlin, M. and Szabady, B. (2001). Linear mixture analysis: a mathematical approach to resolving mixed DNA
samples. Journal of Forensic Sciences, 46, 13728.
6. Wang, T., Xue, N., and Wickenheiser, R. (2002). Least square deconvolution(LSD): A new way of resolving
STR/DNA mixture samples. Presentation at the 13th International Symposium on Human Identification, October
710, 2002, Phoenix, AZ.
7. Mixture STR/DNA Interpretation Using the Least-Square-Deconvolution (LSD) Method by Tsewei Wang,
Ph.D. Associate Professor Laboratory of Information Technology Department of Chemical Engineering The
University of Tennessee, Knoxville, TN
8. MANUALUL CALITATII LABORATOARELOR, Cod: MCL IC-01, Editia 1, revizia 0.
9. ISO/IEC 17025/2005 General requirements for the competence of testing and calibration laboratories
10. SR EN-ISO 9001/2001 - Sisteme de management al calitatii. Cerinte.
11. Standardele de asigurare a calitii n laboratoarele de analize ADN recomandate de EDNAP Departamentul
de Standardizare.
12. Genetic Judiciar, 2005, Ed. ETEA, Romic Potorac, Magdalena Potorac
13. Hofreiter M, Serre D, Poinar HN, Kuch M, Pbo S., Ancient DNA.Nat Rev Genet 2001;2:353-9.
14. Antonio Alonso, Pablo Martn, Cristina Albarrn, Pilar Garca,Dragan Primorac, Oscar Garca, Lourdes
Fernndez de Simn, Julia Garca-Hirschfeld, Manuel Sancho, Jose Fernndez-Piqueras, Specific Quantification of
Human Genomes from Low Copy Number DNA Samples in Forensic and Ancient DNA Studies. Croatian Medical
Journal, 44 (3): 273 280 (2003).
15. Gill P., Whitaker J., Flaxman C., Brown N., Buckleton J. An investigation of the rigor of interpretation rules
for STRs derived from less than 100 pg of DNA.Forensic Sci Int 2000;112:17-40.
16. Budowle, B. Et al, Low copy number consideration and caution. In Twelfth International Symposium on
Human Identification, 2001; Biloxi, Mossouri.
17. Gill, P. et al, Application of low copy number DNA profiling, Croat. Med. J, 2001; 42; 229 - 232
18. Buckleton J., Triggs C.M., Walsh S.J., Forensic DNA Evidence interpretation, CRC Press 2005
19. Rutty, G.N., Hopwood, A., Tucker, V, The effectiveness of protective clothing in the reduction of potential
DNA contamination of the scene of crime, Int. J.Legal. Med.(2003), 117: 170 174
20. Lowe, A., Murray, C., Whitaker, J., Tully, G., Gill, P., Forecsic Sci. Int. (2002), The propensity of individuals
to deposit DNA and secondary transfer of low level DNA from individuals to inert surfaces.
21. Cotton, E.A., Allsop, R., Guest, J., Frazier, R., Koumi, P., Callow, I.P., Seager, A., Sparkes, R. (2000),
Validation of the AmpFlSTR SGMplus system for use in forensic casework. Forensic Sci. Int. 112: 151 161
22. Gill, P., Whitaker, J.P., Flaxman, c., Brown, N., Buckleton, J. (2000) An investigation of the rigor of
interpretation rules for STRs derived from less than 100 pg of DNA. Forensic Sci. Int. 112: 17 40
23. Gill, P., comunicare oral n cadrul grupului de lucru ENFSI (European Network of Forensic Science Institute),
aprilie 2007, Polonia