caracterele generale ale microbilor, forma, structura,
activitatea fiziologic i biologia acestora. Microbii = organisme foarte mici, dimensiunea lor fiind exprimat n microni. 1 micron = 1000 mm 1 milimicron = 1 000 000 000 mm (nm) Microbii sunt: patogeni - produc mbolnviri nepatogeni (saprofii) nu produc boala dect ocazional
Rol pozitiv al microbilor: floarea microbian normal din intestin sintetizeaz vitamine din grupul B.
tiin relativ tnr a aprut n strns legtur cu dezvoltarea tiinelelor naturii, a fizicii, chimiei. Microbiologia a contribuit la dezvoltarea biologiei n general i n special a geneticii. Contribuia microbiologiei la fabricarea de vaccinuri i antibiotice care au dus la diminuarea unor epidemii: cium, holer, febr tifoid, etc.
nceputurile microbiologiei inventarea microscopului - olandezul Antonie Van Leeuwenhock ntre 1632-1732. Microscopul mrea de 300 de ori i a observat organisme vii denumite animalicule. ntemeietorul microbiologiei trebuie considerat chimistul francez Louis Pasteur 1822-1895, care a demonstrat rolul microorganismelor n fermentaia alcoolic i lactic. A introdus n practic vaccinul antirabic, anticrbunos i tehnica de sterilizare prin pasteutizare. Robert Koch 1843-1910, medic german, a descoperit agenii etiologici ai tuberculozei, antraxului i holerei. A utilizat pentru prima data medii de cultur solide.
Ilia Mecinikov 1845-1916 printele imunologi- ei a deminstrat existena fagocitelor. Victor Babe 1854-1926 a scris primul tratat de microbiologie din lume. A contribuit la studiul turbrii, al leprei, TBC- ului, holerei, difteriei. A descoperit peste 50 de microbi. A anticipat prin cercetrile sale descoperirea antibioticelor
Ioan Cantacuzino 1863-1934, creatorul colii romneti de microbiologie i de medicin experimental. A fondat n 1921 Institutul Cantacuzino. Definiie: Virusologia (inframicrobiologia) tiina care studiaz virusurile (inframicrobii) i afeciunile provocate de acetia.
Primul virus 1982 Ivanovski virusul mozaicului tutunului Urmtoarele decenii: variola, rabia, poliomielita, hepatita viral, gripa, HIV
Virusurile germeni extrem de mici, foarte puini evoluai cu organizare rudimentar Lipsite de enzime proprii Multiplicarea lor este legat de parazitarea obligatorie a celulelor vii.
Particulariti: Particule de dimensiuni foarte mici (18-400nm), vizibile doar cu microscopul electronic. Posed un singur tip de acid nucleic: ADN, ARN Sunt parazii intracelulari obligatorii nmulirea virusurilor replicare Sunt specifice, fiecare virus provoac o anumit boal Fiecare virus prezint o structur anitigenic specific (omul i animalele infectate cu un virus produc anticopri specifici iar imunitatea dobndit este solid i de lung durat) Virusurile sunt insensibile la antibioticile uzuale
Virion = virus = corpuscul elementar = corpuscul viral unitatea viral, morfofuncional, complet, intact, infecioas, cu diametrul cuprins ntre 18-400 nm, capabil s infecteze bacterii, plante, animale, omul
Se gsesc extracelular: nainte de a infecta celula gazd dup ce s-au asamblat i au fost eliberai din celula n care s-au multiplicat Extrem de mici:
18 30 nm (Parvoviridae, Picornaviridae) 18 30 nm (Parvoviridae, Picornaviridae) 40 80 nm rotavirus, v. rubeolos, v. hepatitei B, v. hepatitei C 90 200 nm V. herpetic, v. rujeolos, v. respirator sinciial, v. rabic 300 - 450 nm (Poxviridae) v. Variolic peste 900 nm lungime, diametru 80 nm (Filoviridae) VIRUS VEGETATIV particula viral aflat n celul, deficitar n unele aspecte ale replicrii,lipsit de capsid.
PROVIRUS genom viral integrat n cromozomul celulei gazd, multiplicndu- se sincron cu acesta. sferic v.gripal, v.herpetic, adenovirus, v. polio cilindric, bastona v. mozaicului tutunului, fagi paralelipiped v. variolic, v. vaccinia Cartu v. rabic filamentos v. Ebola sferic cu coad bacteriofag este alctuit dintr-o molecul de acid nucleic viral Fie ARN RIBOVIRUSURI Fie ADN DEZOXIRIBOVIRUSURI
poart informaia genetic necesar replicrii determin capacitatea infectiv a virusului.
Conine ntreaga informaie genetic necesar replicrii Asigur infectivitatea viral Este capabil de autoreplicare n absena celorlali constitueni virali Excepie ARN viral izolat, m.c., sens negativ (virusuri cu genom divizat orthomyxovirus)
complex de structuri proteice care mbrac acidul nucleic viral
are arhitectur i compoziie specifice fiecrui tip viral protejeaz genomul de aciunea factorilor externi, de nucleazele celulare; asigur forma virionului; fixeaz virionii nuzi de receptorii celulari specifici; subunitile structurale ale capsidei sunt antigene care induc formarea i reacioneaz cu anticorpii neutralizani. peplos, anvelop deriv din membranele celulei gazd: din membrana plasmatic v. gripal, v. paragripal, retrovirusuri din membrana nuclear herpesvirus protejeaz nucleocapsida; intervine n iniierea ciclului infectant prin recunoaterea i ataarea v. de receptorii celulari; intervine n procesul de asamblare a noilor particule virale; intervine n activiti specific virale (hemaglutinare, hemadsorbie, hemoliz, fuziunea membranelor celulare);
Structuri proprii virale:
Proteina M (matrix) Spiculi: Hemaglutinine Neuraminidaze Profactori de fuziune
Hemaglutininele Prezente la virusurile invelite Form de bastonae prismatice cu baza triunighiular Funcii: Recunoate receptori celulari, ataarea i penetrarea virusului n celul Induc rspuns imun Rol n hemaglutinarea hematiilor
Neuraminidazele Prezente la orthomyxovirus i paramyxovirus Sunt glicoproteine ancoarte n dublu strat lipidic Funcii: Faciliteaz ptrunderea virusului n celula gazd prin scindarea acidului sialic din glicoproteinele suprafeei celulare Intervin n procesul de ieire a noilor particule din celul
Profactorul de fuziune Poate fi situat pe nveliul viral Prezent la herpes virus, paramyxovirus Este glicoprotein Funcii: Fuzionarea nveliului viral cu membrana celular favoriznd penetrarea virusului n celula gazd Diseminarea infeciei Producerea hemolizei
Enzimele virale Sinteza de proteine-enzime codificate de virus este restrns (nr. mic de gene din genomul v.) Sunt proteine
Structurale - n nveliul viral rol interrelae cu celula gazd Nestructurale - asociate nucleocapsidei rol replicarea genomului viral sinteza de proteine virale Structur: Cap Coad
Capul form sferic, alungit, prism hexagonal are o poriune central dens, format din ADN i capsida.
Coada - cilindru axial rigid nvelit ntr-un manon contractil - plac terminal cu 6 fibre cu rol de fixare pe celula gazd (bacteria)
Elementele de baz Proteine Glucide Lipide Ac. Nucleici Virusuri simple: protein + ac. nucleic (v. polio, Pr+ ARN); bacteriofagi- Pr. + ADN Virusuri complexe: - genom viral, ptura pr. intern, ptura externa lipoproteic. (v. gripal) Proteinele virale - parte comp. a capsidei - proteine cu rol enzimatic
Pt. stabilirea dg. unei viroze sunt necesare izolarea i identificarea ag. patogen n prod. patologice recoltate de la bolnav, cadavru. Cultivarea lor e posibil prin inoculare n o gazd receptiv: Animale de laborator Ou embrionate Culturi de celule Multiplicarea virusurilor se autoreproduc folosind mecanismele celulare din interiorul celulelor vii, de unde iau: hrana,enzimele,energia necesar multiplicrii.
Etape: Adsorbia - faza de adeziune i fixare la celula- gazd Ptrunderea v. n celula-gazd Faza de eclips - v. ptruns n cel. se dezintegreaz n ac. nucleic i proteine i nu mai poate fi pus n eviden. Faza de multiplicare activ ac. nucleic separat i capsida separat se multiplic pt. ca n final s se asambleze - formnd particule virale complete. Faza de eliberare .v. formate prsesc celula treptat pe msura formrii sau se acumuleaz - explozia celulei -gazd, eliberndu-se - infectnd alte celule.
Cldura factori: tip de virus, prezena substane protectoare 18-25C sensibile: v.rujeolos, v.gripal etc. moderat sensibile: v.Ebola, v.Marburg, v.Epstein- Barr etc. rezistente: v.coxsackie, v.variolic etc 56-100C 30 minute inactivarea majoritii virusurilor Cldura cldura umed: fierberea (100C) cteva minute VHA, v.rabic 30 minute VHB autoclavarea: 121C, 1 atm, 30 minute toate virusurile Frigul conserv virusurile 4C (refrigerare) cteva sptmni enterovirusuri doi ani v.rabic n fragmente de nevrax -20C (congelare) insuficient pt pstrarea v.gripale, v.respirator siciial -70C (congelare) / pstrare n azot lichid la -190C prezervarea infectivitii pt ani de zile pH sub 5 deterioreaz infectivitatea peste 9
stabile la pH extrem acid 3 enterovirusuri alcalin 9 v.gripal B IONIZANTE aciune direct: pe acizi nucleici i proteine virale indirect: ionizarea mediului nconjurtor producere de compui toxici
vibraii peste 20 kHz/sec folosite pt: eliberarea virusurilor din celule obinerea unor substructuri virale omogenizarea suspensiilor virale etc. ageni oxidani 1%, oxidri n proteinele virale peroxid de hidrogen (H2O2( 3-6%, inactivare virus, agent antiseptizant ozon dezinfecia apei, f.scump, puin utilizat permanganat de potasiu 1% aldehide formaldehida (formol) 1-8%, atac acizii nucleici i proteinele virale agent decontaminant aerosoli pt decontaminarea aerului
glutaraldehida 2% tamponat cu bicarbonat de Na, la pH 7,5-8,5 sterilizarea la rece: instrumentar medical delicat HIV, HBV halogeni/compui halogenai clorul tratarea apei potabile hipoclorit de calciu / hipoclorit de sodiu 10%, deterioreaz acizii nucleici virali, dezinfectani antivirali universali cloramina 2-5%, 20% detergeni sintetici afecteaz virusuri cu peplos dezoxicolat de Na dodecilsulfat de Na Tween 80 cationici aciune virulicid + aciune spumant sruri de amoniu cuaternar 20% clorura de benzolcarmin pt. tegumente mucturi de animale 1% inactivare v.rabic glicerol soluie tamponat 50% conserv infectivitatea v.polio 6 ani v.herpetic 5 ani v.rabic 9 luni v.urlian 7 spt. sruri de Mg, Na soluii molare de MgCl, NaCl lizozim n secreiile nazale, lacrimale, salivare efect virulicid v.gripal suc gastric aciune virulicid prin pH-ul acid enzime proteolitice: tripsin, pepsin bil inactiveaz virusurile cu pelos PATOGENEZA INFECIEI VIRALE RELAII VIRUS-CELUL GAZD Aderen (ataare, adeziune) procesul prin care microorganismul se leag de suprafaa celulei int principalul pas n iniierea procesului infecios. Diseminare (invazie) procesul prin care microorganismul se rspndete de la poarta de intrare n tot organismul Infecie multiplicarea unui agent infecios patogen n interiorul organismului, chiar dac este nensoit de manifestri clinice de boal. Microorganism nepatogen face parte din flora normal; nu produce mbolnvire Microorganism patogen microorganism care ntotdeauna cauzeaz boal. Microorganism potenial patogen (oportunist) microorganism capabil s cauzeze mbolnvire doar atunci cnd este afectat sistemul de aprare al macroorganismului Microorganism saprofit care triete n natur se stabilesc rar n organism au importan redus ca factori patogeni Patogenitate capacitatea unui microorganism de a cauza boal prin virulen sau toxigenitate Purttor asimptomatic persoan care adpostete microorganismul fr a prezenta semne clinice de boal care poate transmite microorganismul celor din jur include iniierea procesului infecios mecanismele care duc la instalarea semnelor i simptomelor bolii infecioase interaciunea microorganism - gazd depinde de: capacitatea microorganismului de a se stabili n macroorganism i de a cauza leziuni mecanismele de aprare ale macroorganismului