Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Curs Biochimie Medicala
Curs Biochimie Medicala
CUPRINS
1. Proteine
2. Enzime
3. Vitamine
4. Energetica biochimic
5. Metabolismul glucidic
6. Metabolismul lipidic
7. Metabolismul proteic
8. Metabolismul nucleotidelor purinice si pirimidinice
9. Metabolismul cromoproteinelor
9.1. Biosinteza hemoglobinei
9.2. Degradarea hemoglobinei (bilirubinogenez
Abrevieri folosite n text
1. PROTEINE
1.1.AMINOACIZII
Prin hidroliza proteinelor se formeaz 20 de -aminoacizi. Acetia sunt
compui cu greutate molecular mic care conin dou grupri funcionale, carboxil
i amino, legate de acelai atom de carbon ( C ).
Formula general a unui aminoacid este:
R CH COOH
NH2
Glicina (Glicocol)
Gly (G)
Acid aminoacetic
Alanina
Ala (A)
Acid amino-propionic
Valina
Val (V)
Acid amino-izovalerianic
Leucina
Leu (L)
Acid -amino-izocaproic
Izoleucina
Ile (I)
NH2
CH3 CH COOH
NH2
CH3 CH CH COOH
CH3 NH2
CH CH2 CH COOH
CH3
NH2
CH3
CH3
CH2 CH CH COOH
CH3 NH2
Asparagina
Asn (N)
Acid glutamic
Glu (E)
-amida acidului
amino-succinic
Acid -amino-glutaric
HOOC CH2 CH2 CH COOH
NH2
Glutamina
Gln (Q)
-amida acidului
amino-glutaric
(CH2)2 CH COOH
NH2
H2N
CH2
H2N
(CH2)3 CH COOH
NH2
Lizina
Lys (L)
Acid , -diaminocarpoic
Hidroxilizina
Hyl
CH2
H2N
Histidina
Hys (H)
OH
NH2
CH2 CH COOH
NH2
CH2 CH COOH
OH
NH2
CH3 CH CH COOH
OH NH2
(CH2)2 CH COOH
Treonina
Thr (T)
CH
CH2 CH COOH
SH
Acid
- -ditio-( amino-propionic)
NH2
CH2 CH COOH
NH2
S CH2 CH COOH
NH2
Metionina
Met (M)
NH2
CH3
Fenilalanina
Phe (F)
CH2 CH COOH
NH2
Tirozina
Tyr (Y)
CH2 CH COOH
HO
NH2
Triptofan
Trp (W)
CH2 CH COOH
NH2
VII. Iminoacizi
Prolina
Pro (P)
Acid pirolidin-2-carboxilic
Hidroxiprolina
Hyp
Acid 4-hidroxi-pirolidin-2carboxilic
N
H
COOH
HO
N
H
COOH
L glicerinaldehida
COOH
H2N C H
R
L aminoacid
+
H3N C H
R
Cnd un astfel de ion se dizolv n ap, el poate aciona fie ca un acid (donor
de protoni), fie ca o baz (acceptor de protoni):
Ca un acid:
H3N+-CH(R)-COOH+ + H2N-CH(R)- COOCa o baza:
H3N+-CH(R)-COO- + H+
H3N+-CH(R)-COOH
Substanele care au astfel de proprieti se numesc amfotere sau amfolii.
Existenta ionului bipolar explic utilizarea soluiilor de aminoacizi drept soluii
tampon. Dac la soluia unui aminoacid se adaug un acid tare, protonii si vor fi
neutralizai de gruprile carboxil ale aminoacidului, iar dac se adaug o baza tare,
gruprile hidroxil vor fi neutralizate de gruprile NH3+, astfel nct pH-ul soluiei nu
se modific.
c) Toi aminoacizii izolai din proteine absorb slab radiaiile din
domeniul ultraviolet (220 nm). Triptofanul, tirozina i fenilalanina, datorit nucleului
aromatic, dau absorbie specific la 280 nm, proprietate ce st la baza unei metode de
dozare a proteinelor.
1.1.2. Proprieti chimice
Proprietile chimice ale aminoacizilor sunt datorate att celor doua grupri
funcionale ct i prezenei radicalului R. Unele din aceste reacii se petrec i n
organism, altele sunt utilizate n studiul proteinelor (identificarea aminoacizilor din
hidrolizatele proteice, stabilirea secvenei de aminoacizi n proteine, identificarea
aminoacizilor specifici pentru funcia proteinelor, modificarea chimic a resturilor de
aminoacizi din moleculele proteice n vederea modificrii activitii lor biologice),
precum i pentru sinteza lanurilor polipeptidice n laborator.
1-Reacia cu acidul azotos, din care rezulta hidroxiacizi (reacie utilizat
pentru dozarea aminoacizilor prin metoda van Slyke).
R CH COOH + HNO 2
HCl
R CH COOH + H2O + N2
NH2
OH
R CH COO
+N(CH )
3 3
COOH + 3 CH3I
NH2
CH
NH2
COOH + HCHO
CH
COOH + H2O
N CH2
1.2. PEPTIDE
Peptidele sunt compui rezultai din unirea a mai multor molecule de
aminoacizi prin legaturi peptidice (-HN-CO-) i pot fi obinute din proteine prin
hidroliz parial (chimic sau enzimatic).
n funcie de numrul de aminoacizi din molecul peptidele se mpart n:
- oligopeptide conin pn la 10 aminoacizi n molecul;
- polipeptide conin ntre 10 i 100 aminoacizi.
Polipeptidele care conin mai mult de 100 de resturi de aminoacizi n
molecul poart numele de proteine.
Nomenclatura peptidelor se face indicnd numele aminoacizilor n ordinea n
care se gsesc n molecul, ncepnd cu aminoacidul care conine gruparea aminoterminal liber. Denumirile aminoacizilor vor cpta terminaia il, cu excepia
ultimului care conine gruparea carboxil-terminal liber: de exemplu peptidul cu
secvena Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu-Cys se va citi Seril-Glicil-Tirozil-Alanil-LeucilCistein.
Proprietile peptidelor
Peptidele, n special cele cu greutate moleculara mic, sunt solubile n ap,
insolubile n alcool absolut i au caracter amfoter ca i aminoacizii din care sunt
constituite.
Gruprile amino-terminale precum i gruprile R laterale dau aceleai reacii
caracteristice ca i cele din aminoacizii liberi. O reacie caracteristic este reacia
biuretului, care const n tratarea peptidelor i proteinelor cu soluii alcaline de Cu2+,
cu formarea unui complex colorat in violet; aceasta reacie este dat numai de
compuii care conin cel puin dou legturi peptidice n molecul.
Peptide biologice
1- Tripeptide. Glutationul (-glutamil-cisteinil-glicina) este prezent n toate
esuturile vii.
HOOC CH
NH2
CH2
CH2
CO
NH
CH CO
CH2
NH CH2 COOH
SH
10
1.3. PROTEINE
Proteinele sunt biopolimeri macromoleculari care conin n molecul peste
100 de resturi de aminoacizi unii prin legturi peptidice. Numrul, natura i modul
de aranjare al aminoacizilor n molecul variaz de la o proteina la alta. Moleculele
proteice pot adopta diverse conformaii n spaiu, fiind descrise astfel mai multe
niveluri de organizare: primar, secundar, teriar i cuaternar.
1.3.1. Nivele de organizare structural
Structura primar
Structura primar reprezint numrul i ordinea aminoacizilor n molecul.
(CO
CH
R
NH) n
R1
;
+
H3N
CH
C
O
NH
O
CH
R2
R3
N
H
CH
C
O
CH .............CH
R4
COO
Structura secundar
Structura secundar reprezint cel de-al doilea nivel de organizare
structural a proteinelor, reprezentnd aranjarea spaial a moleculei proteice pe o
singur\ ax\. Acest lucru este posibil datorit legturilor de hidrogen formate ntre
resturile carboxil i amino aparinnd legturilor peptidice.
Cea mai mare contribuie la elucidarea structurii secundare a proteinelor au
avut-o lucrrile lui Pauling si Corey care au elaborat dou modele teoretice: modelul
helicoidal (spiralat) i modelul straturilor pliate, modele care explic destul de bine
proprietile fizico-chimice i biologice ale moleculelor proteice.
11
Aceast
structur
este
meninut n spaiu datorit legturilor
de hidrogen n care sunt implicate
toate legturile peptidice. Legturile de
hidrogen sunt paralele cu axul elicei i
se realizeaz ntre gruparea carboxil a
unui aminoacid i gruparea amino a
celui de-al patrulea aminoacid.
Prezena anumitor aminoacizi
provoac
ndoirea
lanului
polipeptidic. Din aceast categorie fac
parte prolina i hidroxiprolina (din
cauza azotului iminic), aminoacizi care
conin grupri R ncrcate electric sau
cu volum mare (arginina, acidul
glutamic, lizina, leucina, izoleucina).
Configuraia de tip -helix
este ntlnit la multe proteine, dar nu
nglobeaz
totalitatea
lanului
polipeptidic. Astfel, n molecula de
paramiozina peste 90% din aminoacizi
sunt implicai n formarea -helixului,
n timp ce n alte proteine spiralarea nu
depete 50%.
Structura sau modelul straturilor pliate se bazeaz pe formarea
legaturilor de hidrogen intercatenare i poate apare n doua variante: modelul paralel
al straturilor pliate (caracteristic -keratinei) i modelul antiparalel (ce poate fi
ntlnit n cazul fibroinei din mtase).
12
13
14
atomii care particip la astfel de legturi sunt cuprinse ntre 3,1 i 4,1 . Aceste
legturi sunt cele mai importante pentru meninerea proteinei n structura
teriar. Resturile nepolare, hidrofobe se gsesc n interiorul ghemului rezultat
prin ncolcirea lanului polipeptidic avnd ca efect stabilizarea din punct de
vedere termodinamic a moleculei, mai mult dect n cazul n care aceste resturi
ar fi orientate spre mediul exterior. Din acest motiv lanurile peptidice introduse
n soluie apoas se ncoltcesc spontan aa fel nct resturile nepolare se
situeaz n interiorul ghemului, iar gruprile polare rmn pe suprafaa
moleculei.
d) Legturi disulfidice S-S-, covalente, pot contribuie la meninerea
structurii teriare a proteinelor globulare limitnd tendina de depliere a
moleculei, ns contribuia lor este mic, deoarece sunt puine.
15
16
17
18
19
20
Papaina
21
22
1.3.3.2. Heteroproteine
Fosfoproteinele sunt proteine conjugate care au drept grupare prostetic
acidul fosforic legat prin legtur esteric de gruparea hidroxil a unui rest de serin din
molecula proteic. Acidul fosforic se gsete sub forma srii sale de Ca sau K.
NH CO CH NH CO
CH2 O_
O P O Ca2+
_
O
NH CO CH NH CO
_
CH2 O K+
O P O
_
O K+
23
porfirin. Ele ndeplinesc diverse funcii biologice, cum ar fi: transportul de oxigen,
transportul de electroni, cataliza enzimatic.
Specificitatea de funcie a acestor proteine se datoreaz apoproteinei legate de
nucleul porfirinic. Sunt reprezentate de mioglobin, hemoglobin, citocromi, hemenzime.
Porfirinele sunt derivai de porfirin, un compus ciclic format din patru nuclee
pirolice unite prin grupri metinice (-CH=).
Prin substituirea atomilor de hidrogen din poziiile 1-8 cu diferii radicali se obin
porfirinele, care se denumesc i se clasific n funcie de aceti substitueni n:
24
Protoporfirina IX
Hem
Fierul are ase poziii de coordinare care sunt ndreptate spre vrfurile
unui octoedru regulat. n hem, atomul de Fe se leag de inelele II i IV prin
legturi ionice, realizate prin ndeprtarea celor doi atomi de H de la azot sub
form de H + i de dou legturi coordinative cu atomii de azot din ciclurile I i
III. Celelalte dou poziii, 5 i 6, sunt perpendiculare pe planul determinat de
cele patru legturi ale fierului cu nucleele pirolice i sunt libere. Dac aceste
poziii sunt ocupate, compusul rezultat se numete hemocrom sau
hemocromogen.
Hemul este situat ntr-o cavitate a moleculei proteice. Cele dou resturi
propionat, ionizate la pH fiziologic, sunt orientate spre suprafa, iar restul
hemului n interiorul cavitii, nconjurat de aminoacizi nepolari, cu excepia a
dou resturi de histidin prin care se face legtura cu partea proteic. Un rest
de histidin situat n segmentul F (HisF 8 ) numit histidin proximal se fixeaz
pe poziia 5 de coordinare a Fe 2+. Cellalt rest HisE 7, numit histidin distal se
leag de hem prin intermediul unei molecule de ap (formele neoxigenate de
mioglobin i hemoglobin). Legtura este labil i se desface uor n procesul
de fixare a oxigenului, acesta nlocuind molecule de ap (formele oxigenate ale
mioglobinei i hemoglobinei).
25
26
Nucleoproteine
Proteine simple
(Histone, protamine)
Acizi nucleici
(Polinucleotide)
Nucleaze
Mononucleotide
Mononucleotidaze
Nucleozide
Acid fosforic
Nucleozidaze
Baze azotate
(Purinice, pirimidinice)
Pentoze
(Riboz\, Deoxiriboz\)
27
Nucleoproteinele pot fi izolate din esuturi prin extracie (cu ap, soluii
alcaline diluate, soluii de clorur de sodiu i soluii tampon cu pH = 4,0-11,0),
urmat de precipitarea cu acizi, soluie saturat de sulfat de amoniu sau soluie
diluat de CaCl2.
Prin hidroliz acid sau bazic, nucleoproteinele se descompun n baze
azotate, pentoze, acid fosforic i proteine.
Nucleotide. Un nucleotid, unitatea structural a acizilor nucleici, este
format dintr-un nucleozid fosforilat la una din gruprile OH din riboz sau
deoxiriboz.
Baza azotat\ ^ pentoz\ ^ acid fosforic
Nucleozid
Nucleotid
+
+
+
+
+
NH2
N
N
N
N
H
N
5'
O
H
CH2OH
H H
3'
OH
5'
H H
H
CH2OH
H H
3'
HO P OH
O
HO P OH
O
Acid adenilic
3'-AMP
Acid deoxiadenilic
3'-dAMP
28
NH2
HN
N
O
N
H
CH2OH
H H
OH
CH3
N
H H
CH2OH
H H
O
H
HO P OH
O
HO P OH
O
Acid timidilic
3'-dTMP
Acid citidilic
3'-CMP
H2C
OH
OH
P
O-
AMP
ADP
ATP
P
O-
O
O
P
O-
O-
29
2. ENZIME
Organismele vii, mono- i pluricelulare sunt caracterizate prin unele
activiti ca: micare, producere de energie, lumin etc., activiti care au la baz
reacii chimice. Organismele vii sunt supuse primului principiu al termodinamicii,
adic legii conservrii masei i energiei. Energia pentru sinteza moleculelor
complexe din elemente sau molecule mai mici este furnizat prin degradarea
moleculelor complexe n intermediari i compui mai simpli. n consecin este
necesar cuplarea celor dou aspecte ale metabolismului (anabolism i catabolism)
printr-un transfer de energie. O reacie chimic de forma
A+B
C+D
poate avea loc cnd o parte din moleculele A i B se gsesc ntr-o stare de energie
ridicat, stare activat (stare de tranziie) n care exist o mai mare probabilitate ca
legturilor din compuii A i B s se rup i s se formeze produii C i D. starea
de tranziie este o barier nalt de energie care delimiteaz reactanii de produii
de reacie. Viteza unei astfel de reacie este proporional cu moleculele aflate n
stare de tranziie (activat). Exist dou posibiliti de accelerare a reaciei
chimice:
- creterea temperaturii ce favorizeaz agitaia molecular, creterea
numrului de molecule activate i accelerarea vitezei de reacie care n cele mai
multe reacii este aproximativ dubl pentru o cretere a temperaturii cu 10oC;
- utilizarea catalizatorilor.
Catalizatorul se combin temporar cu reactanii determinnd scderea
energiei de activare. Cu ct energia de activare va fi mai mic cu att catalizatorul
va fi mai eficace. De exemplu, descompunerea apei oxigenate:
2 H2O2 2 H2O + O2
30
31
catalizeaz
interconversiunea
stereoizomerilor L i D;
mutaze transfer grupri ntre atomii aceleiai molecule;
cis-trans-izomeraze interconversiunea izomerilor geometrici;
izomeraze care catalizeaz reacia aldoz
cetoz.
6. Ligaze sau sintetaze unirea a doi compui utiliznd energia eliberat
prin hidroliza unei molecule de ATP.
2.2. Structura enzimelor
Specificitatea mare a unei enzime este strns legat de structura ei fizic i
chimic specific. Din punct de vedere chimic, o enzim este format dintr-o parte
proteic apoenzima i o parte neproteic coenzima sau cofactor.
Partea proteic este termolabil i este responsabil de specificitatea
enzimei, de aciune, dar mai ales de substrat, iar coenzima este termostabil i
dializabil.
Apoenzima. Enzimele simple i apoproteinele enzimelor complexe
sunt formate din catene lungi polipeptidice, avnd aceleai nivele de organizare
structural ca i alte proteine: primar, secundar, teriar i cuaternar.
Dei toate enzimele au structuri primare, secundare i teriare, structura
cuaternar nu este obligatorie.
Coenzime. Coenzima este partea neproteic, care particip efectiv la
reacia catalitic (se modific temporar n timpul reaciei). Frecvent, coenzimele
conin n structura lor vitamine din grupul B.
2.3. Izoenzime forme moleculare multiple ale aceleai enzime. Ele
catalizeaz aceeai reacie enzimatic, dar difer ntre ele n privina proprietilor
fizice, chimice i imunologice.
Interesul medical pentru izoenzime a fost stimulat prin descoperirea n
1957, n serul uman, a mai multor izoenzime LDH, a cror proporii relative se
modific semnificativ n anumite stri patologice.
32
ureaza
2 NH3 + CO2
33
C COOH
H
Fumaraza
H2O
HOOC
CH CH2 COOH
OH
34
Situsul (centrul) activ dintr-o enzim poate fi pus n eviden prin tratarea
cu anumite substane ce au capacitatea de a se combina specific cu aminoacizii
centrului catalitic, inactivnd enzima.
2.6. Factori care influeneaz activitatea enzimatic
Influena concentraiei enzimei
Dac se utilizeaz concentraii crescnde de enzim cantitatea de substrat
transformat n unitatea de timp crete proporional cu concentraia enzimei.
Influena concentraiei substratului asupra vitezei de reacie
Dac se menine constant concentraia de enzim i se mrete
concentraia de substrat S, se constat o cretere rapid a vitezei de reacie pn la
o valoare limit (vmax). Dac [S] continu s creasc, curba capt o inflexiune i
pentru valori mari de S, viteza nu mai crete, curba tinde asimptotic ctre o valoare
maxim (vmax).
35
K1
K2
ES
K3
E ^ P (1)
36
Temperatura optim pentru cele mai multe enzime este de 30oC 40oC.
Exist microorganisme termofile care triesc n ap la 70oC 80oC i a cror
enzime sunt active la aceast temperatur. La 0oC unele enzime i nceteaz reversibil
activitatea, aceast temperatur constituind temperatura de conservare pentru unele
enzime.
Influena pH-ului
Variaiile de pH pot avea efecte att la nivelul enzimei, ct i la nivelul
substratului. Astfel, se poate modifica gradul de ionizare a unor grupri funcionale de pe
enzim a cror sarcin pozitiv sau negativ este necesar fie formrii complexului
enzim-substrat, fie meninerii conformaiei tridimensionale native a protein-enzimei. De
asemenea, la nivelul substratului poate fi modificat gradul de ionizare mpiedicnd sau
favoriznd formarea complexului enzim-substrat. Valoarea pH-ului la care reacia
enzimatic se desfoar cu vitez maxim se numete pH optim.
pH-ul optim pentru cele mai multe enzime are valori cuprinse ntre 6 i 8.
Excepie fac enzimele digestive, pepsina (pH=1,5-2), arginaza (pH= 9,5-10).
Influena efectorilor asupra activitii enzimelor
Efectorii sunt substane care mresc sau scad aciunea catalitic a enzimelor.
Acetia pot fi activatori sau inhibitori.
Activatorii sunt compui de natur organic sau anorganic care n
concentraii mici mresc viteza unei reacii enzimatice atunci cnd se gsesc n mediul
de reacie.
O serie de ioni metalici, cum ar fi K, Cu, Fe, Mg, Mn, Co, Mo, au efecte pozitive
asupra unor reacii enzimatice. Fe, Mo, Cu particip n reaciile de oxido-reducere, Mg
este necesar n reaciile de transfer ale gruprii fosfat, iar Ca este necesar n reaciile
enzimatice ce intervin n coagularea sngelui.
Inhibitorii enzimatici sunt compui care diminueaz sau anihileaz activitatea
enzimelor. Ei au compoziie chimic i mod de aciune diferit. Printre substanele
37
E + P
E
EI
H2N
COOH
H2N
SO2 NH2
sulfonamid\
38
Unele metale grele (Hg, Pb, Cu, Ag) sunt inhibitori deoarece se combin cu
gruprile SH ale enzimei formnd mercaptide
Enzim-SH + Ag+ Enzim-S-Ag + H+
Agenii chelatani de tipul acidului etilendiaminotetraacetic (EDTA) leag Mg2+
sau Ca2+.
Efectori alosterici
Activitatea catalitic a enzimelor poate fi alterat i de compui care se fixeaz
pe enzim n locuri ndeprtate de centrul activ (loc alosteric). Aceti compui pot crete
activitatea catalitic i se numesc efectori pozitivi, sau pot reduce activitatea catalitic i
se numesc efectori negativi.
Enzimele alosterice au o structur cuaternar, oligomer, formate dintr-un numr
variabil de monomeri legai prin legturi necovalente.
n afara situsului catalitic unde se fixeaz substratul, aceste enzime posed unul
sau mai multe situsuri alosterice, care pot fi situate pe acelai lan polipeptidic unde se
afl i centrul activ dar n zone diferite.
- Activatorii alosterici se fixeaz la locul alosteric determinnd o modificare a
conformaiei enzimei, numit tranziie alosteric, care antreneaz o modificare a
conformaiei la nivelul situsului catalitic. Acest situs determin o conformaie mai
propice pentru fixarea substratului, crescnd afinitatea enzimei pentru substrat.
Legarea unui inhibitor alosteric produce o modificare conformaional care
mpiedic legarea substratului la locul activ (locul activ este deformat) i enzima este
inhibat.
2.7. Reglarea metabolismului
Reaciile catalizate de enzime au loc cu viteze anumite, determinate de
concentraia enzimei, a substratului, pH-ului, temperaturii etc. Aceste reacii nu sunt
independente unele de altele, ele sunt grupate i se succed formnd ci metabolice care
funcioneaz simultan i n mod coordonat calitativ i cantitativ.
Principalele mecanisme prin care se moduleaz activitatea enzimelor dintr-o cale
metabolic sunt reprezentate de: reglarea alosteric, transformarea pre-enzimelor inactive
n enzime active i sinteza de noi molecule de enzime.
Reglarea alosteric este mecanismul cel mai complex al coordonrii
metabolice. Enzimele implicate n aceast reglare sunt enzime alosterice.
n unele ci metabolice, unul din produii de reacie poate inhiba prima enzim
din calea respectiv:
X activator
alosteric
Activare
E1
E2
E3
G inhibitor alosteric
Inhibi]ie
39
ATP
ADP
Enzim\
ser
Enzim\
ser O
OH
P
O
_
HPO4
fosfataze
H2O
pepsinogen
tripsinogen
chimotripsinogen
tripsin\
pepsin\
tripsin\
chimotripsin\
40
trombin\
plasmin\
41
3. VITAMINE
Vitaminele sunt substane organice cu greutate molecular mic, cu structuri
chimice, proprieti fizice, chimice i biologice diferite.
Ele sunt aduse din exterior i nu constituie pentru organism surs energetic
sau plastic, dar sunt absolut indispensabile pentru funcionarea normal a
organismului. Din acest motiv, organismul are nevoie de un aport zilnic de vitamine
(cteva mg/zi) asigurat de raia alimentar. Lipsa unor vitamine din alimentaie duce
la declanarea unor stri patologice specifice, numite avitaminoze, care, dac nu sunt
de lung durat, pot fi ndeprtate prin administrarea de vitamine.
Antivitaminele sunt substane cu structur chimic asemntoare cu a
vitaminelor dar cu aciune antagonist, deoarece avnd structur asemntoare cu
vitaminele adevrate, pot intra n competiie cu acestea din urm.
Clasificarea vitaminelor se bazeaz pe criterii de solubilitate:
vitamine liposolubile (solubile n grsimi) A, D, E, K;
vitamine hidrosolubile (solubile n ap) B 1, B2 B6, PP, biotina, acidul
pantotenic, acidul folic, B12, vitamina C.
3.1. Vitaminele hidrosolubile
Vitaminele hidrosolubile aparin complexului vitaminic B (B1, B2, B6, B12, PP,
acid pantotenic, acid folic) i vitamina C.
Fiind solubile n ap nu se acumuleaz n organism n concentraii toxice i se
elimin n principal pe cale renal.
42
H3C
CH2
5'
4'
3'
CH3
Tiamina
Absorbia tiaminei se realizeaz la nivelul intestinului subire, prin procese
active i pasive; absorbia activ presupune formarea TPP (tiamin-PP).
n organism tiamina se gsete liber (plasm, LCR) i esterificat ca TPP
(80%), form sub care se stocheaz pentru scurt timp i sub care este activ biologic.
Tiamin\
Tiamin
pirofosforilazkinaza
ATP
H3C
AMP
CH2
N
N
NH2
CH3
S
TPP
CH2 CH2 O
O
P
OH
O
O P OH
OH
43
CH2 CH CH CH CH2 OH
N
9
10
5
12
4 NH
Flavokinaz\
ATP
ADP
FMN
Flavin-adeninpirofosforilaza
ATP
FAD
PPa
Prin unirea FMN cu acidul adenozin-5-P (AMP), sub influena flavin-adeninpirofosforilazei, se formeaz FAD-ul. Dup nomenclatura strict, FMN-ul nu este un
mononucleotid, iar FAD-ul nu este un dinucleotid, deoarece n loc de pentoz au un
alcool polihidroxilic, ribitolul, iar flavina nu este o baz azotat adevrat.
44
NH2
O
P
CH2
H C OH
H C OH
H C OH
H3C
H3C
O
O
OH
O
H
H
OH
H C H
N
N
CH2
OH
H
OH
O
NH
N
O
AMP
FMN
FAD
R
H3C
H3C
10
O
NH
N
O
FMN sau FAD
^2H^
^2e-2H^
-2e-
H3C
H3C
N
N
H
H
N
O
NH
45
CH2OH
OH
H3C
OH
CH2OH
H3C
1N
CH2NH2
CH2OH
OH
H3C
N
Piridoxal
Piridoxol
CH2OH
N
Piridoxamin\
Rolul metabolic
Piridoxalul i piridoxamina intervin n metabolism sub form fosforilat la
gruparea de alcool primar din poziia 5 (piridoxal-5-P, respectiv piridoxamin-5-P) care se
obin n reacia cu ATP.
CHO (CH2
OH
H3C
1N
CHO (CH2
NH2)
Piridoxal-kinaza
CH2OH
OH
H3C
ATP
NH2)
CH2 O PO3H2
ADP
Piridoxal fosfat
Piridoxal
R
Treoninaldolaza
C
N
C
OH
H3C
COOH
Decarboxilaza
H
Enz
N
H
46
CO
NH
NH2 + O CH
N
CH2OH
Izoniazid
Vitamina B6
HOH
spontan
OH CH3
N
CO NH
CH
N
CH2OH
Piridoxal
hidrazona
47
1'
H N
4
H C
H2C
O
C
H N
N H
A
H C
CH3
C H
B
H2C
C H CH CH CH3
S
COOH
Alfa-biotina
O
2'
C 3'
N H
A 3
C H
B
C H (CH2)4 COOH
1S 2
Beta-biotina
_
O C O
H2C
C H (CH2)4 CO
Biotin-Enz.
Anhidrid\-Pcarbonic\
COO
O
C
O C N
NH
A
HC
CH
NH Enz.
B
H2C
C H (CH2)4 CO
S
O
Pa
CH3
C O
_
COO
CH2
COOH
Piruvat-carboxilaza
Biotin-enzima
48
n snge se gsete sub form de coenzim (80% n globulele roii) i sub form
de amid liber, n plasm.
Vitamina PP se sintetizeaz n organism din triptofan; din 60 mg triptofan rezult
1 mg acid nicotinic.
Rol metabolic
Nicotinamida acioneaz n organism sub forma a dou coenzime,
nicotinamidadenindinucleotid (NAD+) i nicotinamidadenindinucleotidfosfat (NADP+), n
reaciile de oxido-reducere.
NH2
CO NH2
+
CH2 O
H
OH
O
P
OH
OH
O
O
H2C
OH
H
OH
N
N
OH (PO3H2)
49
NAD+ (NADP+)
Acestea sunt formele oxidate ce pot fi reduse n NADH i NADPH, reducere ce
are loc la nucleul piridinic al nicotinamidei:
H
C
^
O
NH2
^2H^
2e
H
C
O
NH2
^2H^
2e
NAD^
NADH^H^
Acid pantoic
Acid pantotenic
50
H3C OH O
H3C
Acid pantoic
O
O
CoASH
tioetanolamina
Acid pantotenic
_
O
NH2
N
O
O
-alanin\
CH2
O
P O
_
O
O
O
H
P O
Adenina
Riboza
H
OH
Rol metabolic
CoA are rol deosebit n metabolismul glucidic, lipidic i proteic fiind
transportor de grupri acil R-CO-. Legtura dintre CoA i restul acil se realizeaz prin
intermediul gruprii SH rezultnd un tioester (R-CO~S-CoA) n care legtura tioesteric
este echivalent ca energie cu o legtur macroergic din ATP.
4-fosfopanteteina legat prin legtur fosfo-diesteric de un rest de serin
din proteina acil transportoare ACP-(Acyl Carrier Protein), din multienzim-complexul
numit acid gras-sintetaza care catalizeaz sinteza acizilor grai.
Tulburrile de aport vitaminic la om sunt cunoscute numai experimental
dup administrarea de antagoniti. Scderea concentraiei acidului pantotenic se
51
H2N
N
N
N
COOH
O
HN
CH2
HN
CH (CH2)2 COOH
OH
Pirimidin\
Pirazin\
Pteridin\
Acid glutamic
Acid pteroic
Acid pteroilglutamic
Rol metabolic
Acidul tetrahidrofolic (FH4), forma activ a acidului folic servete la transferul i
utilizarea fragmentelor de un singur carbon n diferite stri de oxidare: -CH 3, -CH2-,
-CH=, -CHO, -CH=NH, care se pot fixa la N5, N10 sau ca o punte metilenic ntre
N5 i N10.
H
H2N
N
N
5
N
OH
H
H
10
CH2 NH R
H
52
NH2COCH2
H
CH3
N
N
CH3
CH3
CH3
CH3
CH3 CH2CH2CONH2
H
CH2CH2CONHCH2
C
CH3
O HO
O
P
H
H O
H
CH2OH
53
Homocistein\
FH4
HomocisteinCH3-transferaza
(CH3-cobalamina)
Metionin\
Reac]ie de metilare
(citoplasm\)
OH-cobalamina
L-metilmalonil-CoA
5'-deoxiadenozilcobalamina)
Succinil-CoA
Reac]ie de rearanjament
intramolecular
(mitocondrie)
54
Carena de cobalamin este adesea corelat cu cea de folat i din aceast cauz
diferenierea celor dou este dificil.
3.1.9. Vitamina C (acidul ascorbic, factor antiscorbutic)
La nceput, a fost denumit acid hexuronic, avnd o structur asemntoare
monozaharidelor. Forma L este cea mai activ.
O
HO C
O C
HO C
O C
H C
H C
HO C
CH2OH
Forma redus\
(Acid ascorbic))
HO C
CH2OH
Forma oxidat\
(Acid dehidroascorbic)
55
Nu sunt cunoscute efecte toxice, dar supradozarea poate conduce la litiaz renal,
datorit formrii oxalatului de Ca insolubil, ct i datorit efectului nefavorabil asupra
absorbiei vitaminei B1.
3.2. Vitamine liposolubile
Din punct de vedere chimic vitaminele liposolubile fac parte din clasa terpenelor,
compui polienici, constituii din resturi de izopren, unite cap la coad. Vitaminele
liposolubile se gsesc n mod obinuit asociate cu lipidele din alimentele naturale.
Absorbia lor se face n aceleai condiii ca i a lipidelor, adic n prezena
grsimilor, a bilei i a sucului pancreatic. Dup absorbie, vitaminele liposolubile sunt
transportate de chilomicroni pe cale limfatic n snge i apoi depozitate n ficat
(vitamina A, D, K), sau n esutul adipos (vitamina E) pentru diferite perioade de timp.
Supradozarea vitaminelor liposolubile conduce la instalarea unor stri toxice
(hipervitaminoz) mai ales n cazul vitaminelor A i D.
n snge vitaminele liposolubile sunt transportate de lipoproteine specifice,
nefiind solubile n plasm.
Nu sunt excretate n urin; n cea mai mare parte sunt eliminate pe cale biliar n
fecale.
3.2.1. Vitamina A (Retinol, axeroftol, vitamina antixeroftalmic, vitamina
liposolubil de cretere)
De fapt sunt dou vitamine, A1 i A2, care pot fi oxidate la aldehide sau acizi fr
pierderea activitii biologice.
16
H3C
2
3
17
19
CH3
CH3
20
CH3
H3C
CH2OH
1 6 7
9
11
13
15
10
12
8
14
5
CH3
4
18
CH3
CH3
CH3
CH2OH
CH3
3-dehidroretinol (Vitamina A2)
CH2OH
Retinol
15
CHO
Retinal
15
COOH
Acid retinoic
56
17
2
3
4
4'
18'
16
7
6
11
9
8
10
13
12
14
15
14'
15'
5 18
ionon\
caroten
12'
13' 11'
10'
5'
8'
9'
7'
6'
17'
3'
1' 2'
16'
ionon\
57
CH CH
19
HO
12
1
9
10
2
8
B
A
3
5
7
4
6
CH3
CH CH
CH3
CH
3
18
11
CH
Ergosterol, provitamina D2
(ergocalciferol)
17
13 16
D
14 15
CH3
CH3
CH
CH3
58
25-OH-D
1,25-(OH)2-D
ficat
25
CH2
OH
25-OH-D3
HO
Rinichi
HO
CH2
HO
1,25-Dihidroxi-D3
(calcitriol)
25
OH
CH2
25
OH
HO
24,25-Dihidroxi-D3
(inactiv)
OH
59
60
61
HO
H3C
6
7
5
8
3
2
1
CH3
CH3
CH3
CH3
(CH2)3 CH (CH2)3 CH (CH2)3 CH CH3
CH3
- Tocoferol
62
R-H
R. ^ H .
R. ^ O2
R-OO.
Propagare:
R-H ^ R-OO.
R-OOH ^ R.
~
ntrerupere:
AH ^R-OO.
R-OOH ^ A.
A este un radical stabil (de exemplu, provenit din tocoferol), capabil s inhibe
propagarea reaciilor radicalice n lan din peroxidarea lipidic.
.O
CH3
- Tocoferol
H3C
CH3
R
CH3
H3C
CH3
CH3
R
CH3
Distrugerea membranelor
Eritrocit
(fragilitate crescut\
[i hemoliz\)
Lizozomi
(permeabilitate
crescut\)
Reticul endoplasmatic
(dezintegrarea structurilor
necesare ac]iunii enzimelor
care metabolizeaz\
medicamente [i transport\
electronii)
Eliberarea enzimelor
hidrolitice
Inactivarea enzimelor
Perturb\ri tisulare
(distrofie)
63
64
7
6
CH3
2
5
CH3
CH3
OH
CH3
R
^2H
- 2H
CH3
R
OH
66
COO
CH2
CO2
CH2
Vitamina K
OOC
COO
CH
CH2
C CH NH
C CH NH
Gla
Glu
Acid -carboxi-glutamic
Acid glutamic
_
O
_
Ca2^ O
O
C
CH
CH2
C CH NH
O
67
CH2
C H (CH2)4
COOH
+H
CH2
-H
( L
S
S
CH2
SH
SH
(CH2)4
COOH
SH
SH
CH
68
4. ENERGETICA BIOCHIMIC
Celula vie este considerat o main care transform continuu energia coninut n
structura moleculelor substanelor nutritive din mediu nconjurtor n energie chimic pe
care apoi o folosete n diverse scopuri cum ar fi procesele de biosintez, contracia
muscular, transportul prin membran, excitaie nervoas.
Utilizarea substanelor nutritive de ctre celul se face prin transformri metabolice,
transformri care au loc cu participarea unui numr mare de enzime.
Degradarea enzimatic a substanelor nutritive, cum sunt polizaharidele, lipidele i
proteinele, se petrece printr-un ir de reacii chimice care pot fi schematizate, n trei stadii
principale:
I. - n primul stadiu, macromoleculele substanelor nutritive sunt degradate pn la substana
simpl de baz din care sunt constituite. Astfel, polizaharidele sunt degradate la hexoze i
pentoze, lipidele n acizi grai i glicerol, iar proteinele la aminoacizii din care provin;
II n al doilea stadiu, produii formai n primul stadiu sunt transformai ntr-un numr mic
de produi intermediari, n principal ntr-un compus cu doi atomi de carbon, acetil-CoA;
III n al treilea stadiu aceti compui sunt metabolizai pe o cale comun la CO2 i H2O.
Proteine
Pentoze
Lipide
Polizaharide
Aminoacizi
Macromolecule
Hexoze
Glicerol
Acizi grasi
Glucoza
monomeri
Piruvat
II
Compus de
degradare
comun
Acetil-CoA
Ciclul
Krebs
III
NH3
H2O
CO2
Produs final
de metabolism
69
N
N
OH
H
OH
CH2 O P O ~P
H
OH
OH
O ~P
OH
OH HO
70
cit.Fe3+
71
NAD+
Piridine
FMNH2
Flavine
2 Fe3+
Citocromi
H2O
NADH
FMN
2 Fe2+
1/2O2
H+
2H+
H+
2H+
Substratele respiratorii provin n principal din ciclul Krebs, dar i din alte
reacii metabolice. O serie de substrate, cum ar fi izocitratul, -cetoglutaratul,
malatul, piruvatul, -hidroxi- butiratul, -hidroxi-acil CoA, prolina etc. cedeaz
electronii NAD+-ului.
Electronii provenii de la succinat, acil-CoA, -glicerol-fosfat sunt cedai
CoQ prin intermediul unor flavoproteine (enzime flavinice).
Izocitrat
a-cetoglutarat
Malat
-hidroxibutirat
-hidroxiacil-CoA
Piruvat
Succinat
FAD
FAD
NADH
FMN
CoQ
FAD
-glicerol-P
cit.b
cit.c
cit.a+a3
O2
FAD
Acil-CoA
72
libere de 9 Kcal suficient pentru sinteza a trei molecule de ATP (3 x 7,3 = 21,9
Kcal) ceea ce nseamn c 42% din energia eliberat a fost nmagazinat sub form
de ATP. Diferena de energie servete la termoreglare.
-0,4
NADH
-0,2
2e
Enz.-FMN
2e
0
+0,2
+0,4
+0,6
+0,8
ADP+Pa
_
ATP
CoQ
cit.b
ADP+Pa
2e
ATP
cit.c
cit.a
ADP+Pa
2e
ATP
CO
_
CN
O2
Direc]ia fluxului de electroni
73
5. METABOLISMUL GLUCIDIC
5.1. Digestia i absorbia glucidelor
Aproximativ 50% din caloriile preluate zilnic de organism sunt furnizate de
glucide: amidon (160 g), zaharoz (120 g), lactoz (30 g) glucoz i fructoz libere
(10 g) i urme de maltoz i trehaloz (dou molecule -glucoz unite prin legturi
(11).
Prin digestia glucidelor rezult trei monozaharide: glucoza, fructoza i
galactoza.
6
CH2OH
H H
CH2OH
HO H
HO OH
3
-Galactoza
CH2OH
CH2OH
H H
HO OH
HO H
OH
H OH
H H
-Glucoza
H H HO OH
4
OH
-Fructoza
HOH2C
OH
OH
H H HO CH2OH
H H
OH
CH2OH
OH
-Glucoza
OH
H OH
HOH2C
H OH
H OH
OH
OH
-Fructoza
-Galactoza
H 1
OH
CH2OH
O
O
OH
OH
CH2OH
O
CH2OH
O
O
OH
OH
OH
OH
74
Structura amilozei
O
H
CH2OH
OH
H O
HO
O
CH2OH
O
CH2OH
O
OH
H 1
OH
OH
OH
CH2
O
OH
OH
Structura amilopectinei
n amiloz, moleculele de -glucoz sunt unite prin legturi (1 4)
glicozidice, formnd lanuri lungi, spiralate. Amilopectina are o structur ramificat,
n care unitile de -glucoz sunt unite prin legturi (1 4) i (1 6)
glicozidice.
Digestia glucidelor ncepe n cavitatea bucal i este completat n duoden.
Asupra amidonului pot aciona dou tipuri de enzime hidrolitice: -amilaza
i oligozaharidazele (dextrinaze) n care sunt incluse i dizaharidazele.
Amilaza salivar (n cavitatea bucal) i amilaza pancreatic (n intestinul
subire) hidrolizeaz amidonul ncepnd de la periferia moleculei spre centru,
scindnd numai legturile (1 4), cu excepia legturilor (1 6) i (1 4) din
vecintatea ramificaiilor.
Prin aciunea acestor amilaze, amiloza este transformat n maltoz i
cantiti mici de maltotrioz, iar amilopectina n maltoz i oligozaharide mici, de
aproximativ opt resturi de glucoz, cu una sau mai multe ramificaii (dextrine limit).
Oligozaharidazele completeaz hidroliza oligozaharidelor i dizaharidelor.
Aceste enzime, situate pe suprafaa celulelor epiteliale, ndeprteaz succesiv
unitile glicozidice din captul nereductor (captul C4 liber).
Legturile (1 6) din dextrine sunt scindate de amilo-1,6-glucozidaza.
Dizaharidele provenite direct din alimente, precum i cele rezultate prin
digestia amidonului sunt hidrolizate n intestinul subire sub aciunea dizaharidazelor.
Aceste enzime au specificitate diferit n funcie de structura dizaharidului i de
legtura glicozidic; -glucozidaza din intestinul subire este n exces i n
75
Lactoz\
Intestin
sub]ire
Galactoz\
^
Glucoz\
L actaz\
Vena
port\
Galactoz\
^
Glucoz\
Intestin
sub]ire
Lactoz\
Lactoz\
Bacterii
CO2
}esut
H2O
H2
Compu[i
Co2, C2
Balonare, diaree,
deshidratare
a. Normal
b. Deficit de lactaz\
76
77
78
1. - Glucoza Hexokinaza(HK)
Mg2+
ATP
CH2 O P
OH
H
HO
OH
H
ADP
1 ATP
OH
OH
Glucozo-6-fosfat
(G6P)
2.
G6P
Fosfohexoizomeraza (PHI)
O H2C
O CH2OH
H HO
OH
H
OH H
Fructozo-6-fosfat
(F6P)
3.
F6P
Fosfo-fructokinaza (FFK)
Mg2+
ATP
ADP
O H2C
O CH2 O
H HO
OH
H
OH H
Fructozo-1,6-difosfat
(F1,6DP)
P
- 1 ATP
79
C O
HO C H
4.
CH2 OH
CHO
Aldolaza
CH2 O
H C OH
CH2 O
C O
H C OH
H C OH
CH2 O
Glicerinaldehid-3-fosfat
(GA 3P)
(3%)
F1,6DP
Dihidroxiaceton-fosfat
(DHAP)
(97%)
5.
Trioz-P-izomeraza
DHAP
GA3P este produsul activ care se transform mai departe. Cu aceast reacie
de izomerizare se ncheie prima faz a glicolizei, faz consumatoare de energie
(-2 ATP).
6. Prima reacie a celei de a doua faze este reacia de oxidare a GA 3P la
acidul 1,3-difosfogliceric (1,3-DPG), reacie catalizat de GA3PDH. n aceast
reacie are loc un proces de fosforilare cu Pa care urmeaz unui proces de oxidare.
H C OH
CH2 O
Gliceraldehid-3-Pdehidrogenaza (GA-3-PDH)
CHO
Pa
NAD^
GA 3P
O~ P
H C OH
CH2 O
NADH^H^
1,3-Difosfoglicerat
(1,3-DPG)
Enzima poate lega i arsenitul care, n felul acesta, poate decupla oxidarea de
fosforilare deoarece compusul rezultat cu arsen n loc de P nu este macroergic; nu se
sintetizeaz ATP.
7. Energia nmagazinat la C1 a acidului 1,3-DPG este transferat pe ADP cu
formarea ATP n reacia catalizat de fosfogliceratkinaz (PGK).
O
Fosfogliceratkinaz\ (PGK)
O~ P
H C OH
CH2 O
1,3-DPG
Mg2^
ADP
OH
H C OH
CH2 O
ATP
3-Fosfoglicerat
(3-PG)
80
8. Reacia fosfogliceratmutazei.
O
Fosfogliceratmutaz\ (PGM)
OH
H C OH
CH2 O
3-PG
OH
H C O P
CH2 OH
2-fosfoglicerat
(2-PG)
O
C
OH
; H C O~ P
CH2 O
2,3-fosfoglicerat
(2,3-DPG)
81
CH3
Piruvat
Lactat dehidrogenaza
(LDH)
NADH+H+
NAD+
COOH
H
OH
CH3
Lactat
82
O
+ NAD+
PDH
+ CoASH
C ~S
CoA
+ NADH+H+ + CO2
CH3
CH3
_
COO
CO2
1
OH
E1-TPP
E1-TPP
CH CH3
E2-L
SH O
S
CoASH
E2-L
CH3
3
E2-L
SH
SH
S
S
NAD+
E3-FADH2
5
E3-FAD
NADH+H+
CoA-S-C-CH3
83
CH3
Piruvat
COOH
Piruvat carboxilaza
HCO3 ,
Biotina, Mg2+
ATP
ADP+Pa
_
CH2
COOH
Oxalacetat
84
Dei izocitratul este ntr-o proporie mic, el este rapid oxidat mai departe n
ciclul Krebs.
2. Reacia izocitrat dehidrogenazei (ICDH) catalizeaz dou procese
procesul de dehidrogenare a izocitratului i de decarboxilare a acestuia cu formarea
unui compus cu 5 atomi de carbon, acidul -cetoglutaric ( -KG).
CH2 COOH
CH COOH
HO
CH COOH
Acid
izocitric
Izocitrat
dehidrogenaza (ICDH)
NAD+
CH2 COOH
CH2 COOH
CH COOH
O
C
COOH
NADH+H+
Acidul
oxal-succinic
CH2
C O
CO2
COOH
-cetoglutaric
85
Succindehidrogenaza (Succ.DH)
COOH
CH
CH
FAD
FADH2
COOH
Acid fumaric
Acid succinic
COOH
CH
Fumaraza
CH OH
CH
COOH
Acid fumaric
CH2
H2O
COOH
Acid L-malic
86
7. Reacia malat dehidrogenazei catalizeaz de dehidrogenare a Lmalatului n oxalacetat nchiznd astfel ciclul.
Malat dehidrogenaza este NAD dependent i se gsete sub dou forme:
MDH citoplasmatic i MDH mitocondrial ceea ce face posibil reoxidarea NADH
extramitocondrial n lanul respirator.
COOH
COOH
Malat dehidrogenaza
MDH
CH2
CH OH
NAD^
COOH
CH2
C
NADH^H^
COOH
Acid oxalacetic
Acid malic
Bilanul
energetic al metabolismului oxidativ al glucozei
Piruvat
Glucoz\
(Glicogen)
I.
II. Piruvat
CO2 ^ H2O
I.1. Glucoz\
F1,6DP
F1,6DP
(Glicogen)
2. 2 GA3P
3.
4.
-2 ATP
(-1 ATP)
2NADH+H+
2.Ac.: 1,3-DPG(NAD)
2PEP
2 Ac. 3PG
+2ATP
2 Piruvat
+2 ATP
Total
+ 8 ATP
(+9 ATP)
87
II. Piruvat
CO2 ^ H2O
1.
2 CH3CO-SCoA
+6 ATP
2 Oxal-succininat
+6 ATP
2 Succinil-CoA
+6 ATP
2 Acid succinic
+2 ATP
Acid fumaric
+4 ATP
2 Piruvat
2NAD+
2.
2NADH+H+
2 Izocitrat
2NAD+
3.
2NADH+H+
2 -KG
2NAD+
4.
2NADH+H+
2 Succinil-CoA
2 GDP
2 ATP
5.
2 ADP
2 Acid succinic
2 FAD
6.
2 GTP
2 FADH2
Acid malic
+6 ATP
2 Acid oxalacetic
2NAD+
2NADH+H+
Total
30 ATP
Total general:
Glucoz\
CO2 + H2O (calea malat)
Glicogen
CO2 + H2O
5.2.3. Metabolismul glicogenului
38 ATP
39 ATP
Glicogenoliza
Principala rezerv de glucide din organism este glicogenul depozitat n ficat
(1/3) i muchi (2/3). Glicogenul este un polimer nalt, asemntor amilopectinei dar
mai ramificat, realizat prin condensarea a numeroase molecule de -glucoz, unite
n principal prin legturi -14 glicozidice i legturi -16 glicozidice, la
punctele de ramificaie.
Glicogenul din ficat va fi degradat pentru reechilibrarea glicemiei, n timp ce
glicogenul din muchi, pentru obinerea de energie.
Degradarea glicogenului este catalizat de enzime specifice:
fosforilaza rupe fosforolitic (cu fosfat anorganic) legturile -(14)
glicozidice din lanurile laterale ale moleculei de glicogen cu eliberarea G1P.
CH2 OH
O
CH2 OH
O
O
CH2 OH
O
O
CH2
Fosfarilaza a
O
+
O
CH2 OH
O
O P
n
G1P
88
Enzima acioneaz pn cnd rmne un lan format numai din patru resturi
de glucoz pn la ramificaie.
n acest punct intervine enzima de deramifiere, care va transfera mai nti
un trizaharid din captul rmas pe un alt lan, iar
restul rmas legat prin legturi -(16) glicozidice este ndeprtat
hidrolitic, sub form de glucoz liber. Procesul este reluat prin aciunea fosforilazei.
Unii autori susin existena unei enzime cu funciie dubl: att de transferaz
ct i de 1,6-glicozidaz. Aceast enzim se mai numete i enzim de deramifiere.
Adrenalin\,
Glucagon
Prin aciunea celor dou enzime (fosforilaza i enzima de deramifiere) are loc
degradarea aproape total a glicogenului. O mic poriune din molecul (minim patru
Adenilat
ciclaz\
ciclazafragment ce va servi drept primer n
resturi de
glucoz) rmne Adenilat
nedegradat,
inactiv\
activ\
resinteza glicogenului.
G1P sub aciunea fosfoglucomutazei (PGM) trece reversibil n G6P.
n ficat i rinichi (nu i n muchi) exist o fosfataz specific G6P-aza, care
ATP
AMPcglucozei libere. Acesta va strbate
va ndeprta acidul fosforic
din G6P cu formarea
peretele celular trecnd n snge pentru reechilibrarea glucozei sanguine. n muchi,
G6P intr direct n glicoliz pentru eliberarea de energie.
Protein-kinaza
Etapa limitant, reglatoare,
a glicogenolizei esteProtein-kinaza
reacia fosforilazei, enzim
inactiv\
activ\
controlat hormonal (adrenalin i glucagon), la nivelul ficatului. Fosforilaza se
4 ADP
gsete sub dou forme: fosforilaza a - activ i fosforilaza
b inactiv.
4 ATP
Activarea enzimei se realizeaz prin intermediul AMPc, al doilea mesager
care preia mesajul adus de hormon (primul mesager), c n snge a sczut glicemia.
Fosforilaza b
inactiv\
4 Pa
Glicogen + Pa
Fosforilaza a
activ\
4 H2O
n G1P
89
Glicogenogeneza
Glicogenul se sintetizeaz din glucoz, dar i din fructoz, galactoz i
manoz dup convertirea lor la glucoz. n sinteza glicogenului, glucoza este mai
nti fosforilat la G6P i apoi izomerizat la G1P. G1P reacioneaz cu UTP i sub
aciunea UDP-pirofosforilazei se formeaz UDP-glucoz.
90
91
92
Activitatea hexokinazei este inhibat de produsul de reacie, G6P, care, n acest fel,
exercit un control feed-back asupra utilizrii glucozei de ctre esuturile extrahepatice.
Membarna celulei
musculare, adipocit
Glc
Glicogen
Glc
Stimulare a
activit\]ii HK
^
Insulina
^
Induc]ia
de novo
HK
(enzim\
_ G1P
constitutiv\)
G6P
_
Glicoliz\
GK (enzim\
inductibil\)
Glc
Glc
HK
(enzim\
constitutiv\)
Intrarea Mem
glucozei
n ficat nu este supus acestui control deoarece n ficat este
brana celulei
hepatice
activ glucokinaza care lucreaz la concentraii mai mari de glucoz (KM = 2.10-2M)
dect hexokinaza (KM = 1.10-5M). Mai mult, enzima nu este inhibat de G6P i poate
fi indus de insulin.
La o concentraie normal a glucozei n snge (1 g), ficatul apare ca un
productor de glucoz, dar atunci cnd glicemia crete, producia de glucoz n ficat
scade i crete consumul de glucoz.
Cnd glicemia atinge o valoare ridicat, intervine rinichiul care i exercit
rolul reglator. Glucoza este continuu filtrat de ctre glomeruli i este reabsorbit la
nivelul tubilor renali. Procesul de reabsorbie este similar cu absorbia glucozei la
intestin, adic prin fosforilare. Procesul fiind enzimatic, consumator de ATP,
capacitatea de reabsorbie este limitat de concentraia enzimei din celulele tubulare
la 350 mg/min. Cnd concentraia glucozei n snge crete, filtratul glomerular
conine mai mult glucoz dect poate fi absorbit i ca urmare, excesul trece n
urin. Eliminarea glucozei prin urin, glicozuria, se produce atunci cnd glicemia
atinge valoarea de 9,5-10 mmoli/L (1,7-1,8 g/L). Aceast valoare a glicemiei se
numete prag renal de eliminare pentru glucoz i este dependent att de capacitatea
de reabsorbie ct i de viteza de filtrare glomerular. Glicozuria apare n diabetul
zaharat.
Sunt situaii cnd eliminarea glucozei prin urin se poate produce la valori
mai mici ale glicemiei. n acest caz este vorba fie de unele defecte nnscute n
93
_
PEP
PEP-carboxi
kinaza
Oxalacetat
Piruvat
carboxilaza
Piruvat
94
95
96
97
6. METABOLISMUL LIPIDIC
6.1. Digestia i absorbia lipidelor
Lipidele reprezint un grup eterogen de molecule organice insolubile
n ap, care pot fi separate prin extracie cu solveni organici. Lipidele sunt
alctuite din urmtoarele clase de compui: acizi grai liberi (neesterificai);
triacilgliceroli (trigliceride); fosfolipide; sfingolipide; glicolipide; steroizi.
Funciile pe care lipidele le ndeplinesc n organism sunt urmtoarele:
- reprezint sursa major de energie;
- procur componentele necesare formarii barierelor hidrofobe ce
separ coninutul apos al celulelor i structurilor celulare;
-prezint activitate reglatorie sau coenzimatic (hormoni steroizi,
vitamine).
98
Un adult consuma ntre 60-150 g de lipide zilnic din care 90% sunt
trigliceride, restul fiind colesterol liber, colesterol esterificat, fosfolipide i
acizi grai liberi.
Digestia lipidelor este un proces care consta n hidroliza (n
prezena unor enzime specifice fiecrei clase de lipide) i emulsionarea lor
adic meninerea n stare solubilizat a unor componente hidrofobe ntr-un
mediu apos (n prezena bilei i a srurilor biliare).
Hidroliza este realizat de enzime specifice. Astfel, lipazele
acioneaz asupra trigliceridelor, fosfolipazele (PL) asupra fosfatidelor,
colesterolesteraza asupra esterilor de colesterol. De exemplu:
Lipidele sunt prezente n mediul apos sub forma unor picturi i hidroliza enzimatic
se petrece la interfaa picturii lipid-ap. Agenii emulsionani interacioneaz
deopotriv cu aceste picturi i cu apa, aciune ce are ca urmare ruperea picturilor n
altele mai mici, stabilizarea acestora din urma i mpiedicarea reunirii lor. Ca urmare
are loc o mrire a suprafeei picturii astfel ca enzimele s poat aciona ct mai
eficient. Emulsionarea este realizat prin dou mecanisme: folosirea proprietilor
srurilor biliare care au rol detergent i amestecarea mecanic dat de peristaltism.
Digestia lipidelor ncepe n stomac i este catalizat de o lipaz (care se crede
c este de origine lingual) i de o lipaz gastric, care hidrolizeaz n special
trigliceridele ce conin acizi grai cu caten scurt i medie (prezente n special n
lapte). Viteza cu care are loc hidroliza este excesiv de mic deoarece lipidele sunt
neemulsionate i enzimele pot hidroliza doar trigliceridele situate la interfaa. De
aceea se poate spune c lipidele trec n intestin aproape intacte.
Digestia masiv a lipidelor are loc n intestin unde trigliceridele, esterii de
colesterol i fosfolipidele sunt degradate la produi primari.
99
100
Trebuie notat c acizii grai cu lanuri mici i medii parcurg un traseu diferit
de cel al celorlalte lipide. Astfel ei sunt absorbii direct de mucoasa intestinal (nu
necesit formarea miceliilor pentru absorbie), i sunt distribuii prin sistemul portal
hepatic (nu prin cel limfatic). Acest considerent trebuie avut n vedere n dieta
persoanelor care prezint malabsorbie pentru alte tipuri de lipide.
6.2. Metabolismul acizilor grai
Acizii grai exist n organism n form liber (neesterificat) sau sub form
de esteri n molecule complexe cum sunt trigliceridele. Acizii grai au un numr par
de atomi de carbon, saturai sau nesaturai, cu 4-24 atomi de carbon.
Acizii grai liberi pot fi oxidai n multe esuturi (ficat, muchi) pentru a
furniza energie.
Trigliceridele reprezint forma de stocare a rezervelor energetice ale
organismului i de aceea funcia lor principal este aceea energogen. Aceste rezerve
se formeaz pe baza excesului de glucide care este convertit n acizi grai, ce sunt
ncorporai n trigliceride i depozitai n esutul adipos.
101
102
103
104
O
R CH2
CH2
C ~S
CoA
Acil-CoA
Acil-CoA
dehidrogenaza
FAD
R C
3
FADH2
C ~S
2 ATP
CoA
H
2-trans-enoil-CoA
NAD+
NADH+H+
3 ATP
O
R CO
CH2
C ~S
CoA
-cetoacil-CoA
105
este deja activat (acil-CoA cu doi atomi de carbon mai puin) care poate
participa la un nou proces de -oxidare.
Acil-CoA:
aciltransferaza
(tiolaza)
CoA
CH3
O
C ~S
O
C ~S
CoA
CoA
Acil-CoA
106
107
108
CH2
OH
Glicerol
kinaza
CH OH
CH2 OH
Glicerol
Difosfatidil glicerol
(cardiolipina)
ATP
CH2
CH2
CH OH
ADP
O CO
O CO
CH O CO
CH2 O CO
R1
CH2 O
R2
P
Fosfatidil-inozitol
Acil-CoA
CH2 O P
Glicerol-3-fosfat
PPa
R1
CH O CO
CH2
Glicerol-3-fosfat
aciltransferaza
OH
CH O CO
Citidina
R1
CMP
R2
+
CH2 O P O CH2 CH2 N(CH
3)3
Lecitina (Fosfatidil-colina)
CH2
O CO
O CO
CH2 O P
1-Acilglicerol-3-fosfat
Acil-CoA
1 Acil glicerol-3-fosfat
aciltransferaza
CoA
CH2
O CO
R2
CH2 O CO
R3
R1
R2
CH2 O P
1,2 Diacil glicerol fosfat
(fosfatidat)
H2O
Fosfatidat
CDP-colina
fosfohidrolaza
Pi
CH2 O CO R1
CH O CO
R1
CH O CO
R1
CH OH
CH O CO
CDP-Diacilglicerol
O CO
CTP
R2
inozitol
CH2
CoA
CH2
Aciltransferaza
R2
CH2 OH
1,2 Diacilglicerol
R3-COOH
Trigliceride
109
precursorul sintezei corpilor cetonici dar n citoplasm. Acetil CoA necesar sintezei
110
provine din metabolizarea glucozei, a acizilor grai (n cea mai mare parte) i a unor
aminoacizi.
111
112
113
114
115
116
117
118
119
7. METABOLISMUL PROTEIC
n organism are loc un permanent transfer proteic intertisular. La fondul
comun de aminoacizi contribuie att aminoacizii de origine alimentar, ct i cei
provenii din degradarea proteinelor tisulare. Fondul comun de aminoacizi va fi
utilizat pentru sinteza de proteine, pentru sinteza de produi specializai (serotonina,
adrenalina, tiroxina), sau pentru degradare n scopuri energetice.
Cantitatea minim de proteine necesar organismului este de aproximativ
30 g/zi. Cnd consumul de proteine este inadecvat, ficatul nu poate sintetiza
suficiente proteine plasmatice pentru meninerea balanei ntre fluide i esuturi,
favoriznd apariia edemelor.
120
CH
R5
R3
CO
Aminopeptidaza
NH
CH
R2
CO NH
CH
CO
Endopeptidaza
NH
CH
R4
CO
NH CH
CO
OH
Carboxipeptidaza
121
Val-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys
Tripsina
Chimotripsinogen
Proelastaza
Elastaza
Procarboxipeptidaza
Chimotripsina
Carboxipeptidaza
122
123
R1 C
O
COO- + R2 CH COO
+
NH3
124
COOC O
NH3
CH2
-AA
CH2
R C
COO
COO+
CH NH3
CH2
-KA
CH2
COO-
COO-
Transaminarea are
loc cu viteze diferite dup natura aminoacidului.
Glutamat Cel mai
-cetoglutarat
activ donor de grupare amino este acidul aspartic, dup care urmeaz alanina, valina,
leucina, izoleucina, tirozina, fenilalanina, metionina, triptofanul, arginina cisteina.
Glicocolul, serina, histidina reacioneaz mai greu, iar lizina, treonina i iminoacizii
(prolina i hidroxiprolina) nu particip la transaminare.
Dintre cele 13 aminotransferaze identificate, cele mai importante sunt:
aspartat transaminaza (AST sau GOT) care are afinitate pentru perechea
oxalacetat-glutamat:
COO
COO
CH2
C O
CH2
+
CH2
HC
COO
CH2
+
NH3
COOH
glutamat
oxalacetat
COO
COO
HC NH2
CH2
+
CH2
C O
COO
COOH
-cetoglutarat
aspartat
COO
COO
C O
CH3
piruvat
CH2
COO
CH2
CH NH2
HC
NH3
COO
glutamat
CH3
alanin\
CH2
+
CH2
C O
COO
-cetoglutarat
125
-cetoglutarat
L-Glutamat
Glu-DH
H2O
NH4
NAD(P)+
NAD(P)H+H+
Reacia este reversibil i poate lucra fie spre formarea de amoniac din
glutamat (catabolism), fie fixarea lui pe alfa-cetoglutarat (biosinteza), funcie cu
importan n plante i bacterii, care sintetizeaz aminoacizi din glucoz i amoniac.
COO
CH NH3
Gl-DH
CH2
CH2
COO Glutamat
NAD+(P)
NAD(P)++H+
COO-
COO-
NH
CH2
CH2
CH2
H2O
COO Iminoacid
+
NH4
CH2
COO -cetoglutarat
126
O
C
H2O
NH2
NH3
(CH2)2
COOH
(CH2)2
+
CH NH3
_
COO
+
NH3
_
COO
glutamat
CH
glutamin\
CH NH3
-
COO
Glutamat
+ NH3
Glutamin-sintetaza
Mg++
ATP
ADP+Pa
NH2
(CH2)2
CH NH3
-
COO
Glutamin\
127
Ureogeneza
Un adult ce presteaz o activitate moderat consum zilnic aproximativ
300 g glucide, 100 g grsimi i 100 g proteine i excret 16,5 g azot; 95% azot
este eliminat la nivelul rinichiului, iar 5% prin materiile fecale.
Calea major de eliminare a azotului la om este ureea. Ureea este
sintetizat n ficat, trecut n snge i filtrat la rinichi.
Pentru sinteza unui mol de uree dintr-un mol de amoniac sunt necesari
3 moli de ATP (2 moli sunt trecui n ADP, iar un mol n AMP) i participarea
a 5 enzime.
Etapele sintezei ureei:
1. Sinteza carbamoil-fosfatului
Condensarea amoniacului, bioxidului de carbon i fosfatului (din ATP)
cu formarea carbamoil-P este catalizat de carbamoil-P-sintetaz, prezent n
mitocondriile din ficatul tuturor animalelor ureolitice. n aceast reacie se
consum 2 moli de ATP pentru realizarea legturii amidice dintre NH 3 i CO 2
i a legturii anhidridice mixte ntre gruparea carboxil i gruparea fosforic din
carbamoil-P. n plus este necesar prezena Mg ++ i a unui acid dicarboxilic, i
anume, N-acetilglutamic. Rolul exact al acestui aminoacid nu este cunoscut. Se
pare c prin legarea lui, se produc modificri comformaionale profunde n
molecula enzimei, prin care sunt demascate unele grupri sulfhidrilice i este
modificat afinitatea enzimei pentru ATP.
2. Sinteza citrulinei
Transferul restului carbamoil de pe carbamoil-P la ornitin, cu formarea
citrulinei este catalizat de ornitil-carbamoil-P-transferaza (OCT), o enzim
128
Carbamoil-P-
CO2
1 sintetaza
+
+ NH
4
H2 N C
Mg ++
2ATP
O
O
P
O
2 ADP+Pa
NH3
CH2
carbamoil-P
(CH2 )2
CH
COO
OCT
Pa
NH3
-
Ornitin\
NH2
C
Argininosuccinat-sintetaza
CH2 NH
Mg ++
(CH2 )2
CH
COO
NH3
Citrulin\
COO -
NH
COO
CH
C NH CH
CH2 NH
CH2
(CH2 )2
COO
CH
ATP
AMP+PPa
COO
NH2
NH3
Argininosuccinat
COO -
NH2
CH2 NH
(CH2 )2
+
NH3
COO-
Arginin\
CH
-OOC
Fumarat
Aspartat
COO CH
CH2
CH
Arginino-
4 succinaza
NH
Arginaz\
NH2
C
NH2
H2 O
Ornitin\
Uree
129
130
Dintre cele 5 enzime care particip la acest proces, reacia arginazei este specific
acestei ci metabolice i deci specific animalelor ureotelice. Ea se gsete numai n ficat,
organ unde are loc sinteza ureei.
OCT este, de asemenea, o enzim strict hepatic i apariia ei n plasm va constitui
un indicator de lezare a parenchimului hepatic.
Cantiti mici de uree se pot forma i n creier i rinichi, dar fr semnificaie pentru
metabolismul amoniacului.
Anomalii genetice n ciclul ureei
Au fost descrise defecte pentru toate cele 5 enzime implicate n sinteza ureei:
1. Defectul de carbamil-fosfat-sintetaz, hiperamonemia tip I;
2. Defectul de OCT , hiperamonemia tip II;
3. Defectul de argininosuccinat-sintetaz , citrulinemie;
4. Defectul de argininosuccinaz, argininosuccinaturie;
5. Defectul de arginaz, hiperargininemie.
Oricare dintre aceste defecte se manifest prin simptome specifice intoxicaiei cu
amoniac a crui concentraie seric poate crete de la 10-20 g% la 500 g%.
Subiecii cu astfel de defecte genetice au o intoleran i o repulsie fa de
alimentele bogate n proteine.
Intoxicaia cu amoniac se manifest prin tremurturi ale membrelor, dificulti n
vorbire, tulburri de vedere, iar n cazuri severe, coma i moartea. Simptomele se instaleaz
atunci cnd nivelurile hepatice i cerebrale de amoniac sunt crescute. Intoxicaia cu amoniac
este considerat factor important n etiologia comei hepatice, motiv pentru care tratamentul,
n asemenea situaii, este orientat spre scderea amoniacului sanguin.
7.2.2.2. Catabolismul scheletului de carbon al aminoacizilor
n funcie de compuii ce pot fi sintetizai din produii finali ai cilor de degradare,
aminoacizii pot fi grupai n trei categorii:
1. aminoacizii glucogenici care sunt degradai la piruvat sau la intermediari din
ciclul Krebs, compui ce vor fi convertii la glucoz, via fosfoenolpiruvat
(alanina, arginina, acidul aspartic, cisteina, acidul glutamic, glicina, histidina,
Ala metionina, prolina, serina, treonina i valina);
hidroxiprolina,
Phe
2. aminoaciziGly
cetogenici care sunt catabolizai fie la
acetil-CoA, fie la acetoacetilLys
Cys
CoA, din care vor rezulta corpi cetonici (leucina);
Ser
Ile
Trp
3.
aminoaciziThr
glucogenici Leu
i cetogenici
care
pot
genera
Glucoz\
Leu
Trp
Tyr att glucoz ct i corpi
cetonici (izoleucina, lisina, fenilalanina, triptofanul i tirozina).
Punctele
Krebs sunt acetil-CoA,
-cetoglutarat,
succinilAcetoacetil-CoA
Fosfoenol
piruvat de intrare
Piruvat n ciclul
Acetil-CoA
CoA, fumarat i oxalacetat:
Glucogenici
Asp
Asn
Phe
Tyr
Asp
Oxalacetat
Cetogenici
Gluco-, cetogenici
Citrat
Fumarat
Succinil-CoA
Ile
Met
Val
Alfa-Cetoglutarat
Glu
Gln
His
Pro
Arg
131
CH2
+
NH3
CH2 COO
(CH2 )2
CH
COO
+
NH3
_
Arginin\
Glicocol
Arginin-glicintransamidinaza
(rinichi)
NH2
HN C
NH
Ornitin\
CH2
_
COO
Glicociamin\
(Guanidinacetat)
132
ATP
Guanidin acetatmetil-transferaza
(ficat)
S-Adenozilmetionin\
HN C
S-Adenozilhomocistein\
NH P
N
_
CH2 COO
CH3
creatin- P
NH C O
neenzimatic HN C
(mu[chi)
N H2C
Pa + H2O
CH3
creatinin\
133
_
OOC
O
CH
+
NH3
CH2
CH2 C
O
HN CH
C NH CH2
COO
CH2
SH
-Glutamil-cisteinil-Glicin\
Glutation (GSH)
GS-R + 2 H
Reacia de conjugare
Muli metabolii i medicamente hidrofobe sunt conjugate, n ficat, cu
glicocolul, fiind transformate n compui hidrosolubili care se pot elimina din
organism.
134
CH
NH3
(CH2)2
S
Metionin-adenoziltransferaza
ATP
CH3
Metionina
NH2
N
N
Pa+PPa
Hipermetioninuria
N
N
O
+
CH2 S
COO
CH2 CH2 CH
+
CH3
NH3
HO OH
S-Adenozilmetionin\
("metionin\ activat\";SAM)
COO
Transmetilaz\
Acceptor
Acceptor-CH3
CH
_
+
NH3
CH2
CH2
SH
Homocistein\
Succinil-CoA
135
NADP+
II
Tetrahidrobiopterin\
O2
Dihidrobiopterin\
I
CH2 CH COO
H2O
HO
CH2 CH COO
NH3
Fenilalanina
NH3
Fenilcetonuria
(PKU)
Tirozina
136
OH
Alfa-KG
Glu
6
1
Tirozintransaminaz\
CH2
+
CH NH
3
COO
Ti rozi nemi a
ti p II
Tirozina
OH
7
O2
8
4
3CH2
vit.C,
Cu2+
Hidroxilaz\
(dioxigenaz\)
2CH O
1COO
p-hidroxifenil-piruvat
Fe2+
Al captonuri a
-OOC4 C5 H
+
7 COO
Fumarat
Glucoz\
4
OH
2 9 3
CH2 COO
Ti rozi nemi a
neonatal \
C 8
Fumaril-acetoacetat
C 8
7 CH2
7 CH2
Izomeraz\ 6
2 - 4 hidrolaz\
2 3
3
9
9
C CH2 COO
O C CH2 COO
5
- 4
COO
O
OOC
4
Maleilacetoacetat
6
H C
OH
7
Homogentizinc
(dihidroxifenilacetat)
O
Homogentizat
oxidaz\
CO2
Fumarilacetoacetat
2
8
9 3
CH3 C CH2 COOH
O
Acetilacetat
Ti rozi nemi a ti p I
Beta-cetotiolaz\
SCoA
CO
CHnosi
(ti rozi
s)
3
CoASH
CH3COO-
137
Dopamina
Tirozina
L-Dopa
Dopamina
Tiroxina
Norepinefrina
Melanina
Epinefrina
7.2.2.3.5.2.Biosinteza catecolaminelor
Celulele neuronale convertesc tirozina la norepinefrin i epinefrin prin
urmtoarea succesiune de reacii:
OH
1
CH2
+
CH NH3
_
COO
Tirozina
OH
Tirozinhidroxilaza
OH
Tetrahidrobiopterin\
CH2
Dihidrobiopterin\
DOPAdecarboxilaza
2
(PLP)
CO 2
+
CH NH3
_
COO
OH
O2
CH OH
OH 4
CH2
NH2
Norepinefrina
OH
CH2
CH2
NH2
Dopamina
DOPA
Dopamin3 beta-oxidaza
(Cu2+ , O 2 )
OH
Fenol-etanolaminaN-metil-transferaz\
S-Adenozilmetionina
S-Adenozilhomocisteina
OH
OH
CH OH
CH2 NH
Epinefrina
CH3
138
I
HO
CH2
MIT
CH
+
NH3
_
COO
HO
CH2
T3
CH COO
+
NH3
Tirozina
DIT
I
HO
CH2
I
DIT
CH
+
NH3
_
COO
I
HO
CH2
I
T4
CH COO
+
NH3
139
O
CH2
N
H
CH COO
+
NH3
Triptofan oxigenaza
Fe
O2
COO
CH2 CH
NH3
NHCHO
N-Formil-kinurenina
Triptofan
O
Kinureninformilaza
C
NH2
_
HCOO
H2 O
COO
CH2 CH
Kinureninhidroxilaza
NADPH
NH3
O2
Kinurenina
O
C
COO
CH2 CH
NH2
NH3
OH
O2
OHC
NH2
Alanin\
H2 O
OH
3-Hidroxi-antranilat
3-Hidroxi-kinurenin\
3-Hidroxi-antranilatoxidaza
COO
Kinureninaza
P5 P
_
COO
CH
C
HC
_
OOC
NH3
Vit.PP
(NAD^)
3%
2-Acroleil-3-aminofumarat
97%
CO2
Acetoacetil-CoA
140
OH
CH2
CH
_
+ COO
NH3
+
NH4
COO
OH
Acid xanturenic
3-Hidroxi-kinurenin\
+
CH2
N
H
CH
COOH
NH2
Triptofanhidroxilaza
O
NADPH+H+
Triptofan
HO
CO2
CH2
N
H
Serotonin\
HO
CH2
N
H
NADP+
CH2 NH2
CH
NH2
5-Hidroxi-triptofan
COOH
141
Serotonina
Monoaminoxidaz\ (MAO)
O2
HO
N
H
NH3
CH3
CH2 COOH
Acid 5-OH-indol-acetic
H3CO
CH2 COOH
N
H
Acid 5-Metoxi-indolacetic
7.2.2.3.6.3.Biosinteza melatoninei
Melatonina este un hormon produs de glanda epifiz care are efecte asupra
sistemului hipotalamus-hipofiz.
Se formeaz prin acetilarea la azot a serotoninei, urmat de metilarea la
gruparea OH din poziia 5.
HO
Trp
CO2
HO
CH2
N
H
Acetil CoA
CoA
NH
C O
CH3
5-HO,N-acetiltriptamin\
SAM
SAH
H3CO
CH2
N
H
NH
C O
CH3
Melatonin\
142
Aspartat
C
N1 6 5 C
2
C
N10-Formil-FH4
Glicin\
N
7
N
H
Glutamin\
8C
N5-N10-Metenil-FH4
N
143
O H2C
H
OH
H
H
OH
OH
PRPPPO H2C
sintetaza
O H
H
H
Mg2+
O
H
ATP
AMP
OH OH
1
R5P
Amidotransferaza
P P Gln
PO H2C
H
PPa Glu
OH
NH2
3
H
H
OH
5'-FosfoRibozil-Amino
PRPP
O
..........................
11
HN
N
AMP
ADP
ATP
GMP
GDP
GTP
R5P
Acid inozinic
Adenina
PRPP
AMP
PPa
144
PPa
PRPP
Hipoxantina
IMP
HGPRT
Guanina
GMP
PPa
PRPP
Absena total sau aproape total a HGPRT determin sindromul LESCHNYHAN, care se manifest prin tulburri neurologice foarte grave, deficien
mental, agresivitate, hiperuricemie, tendin la automutilare.
Reutilizarea ribonucleozidelor este realizat la om numai de
adenozinkinaz, enzim ce nu este capabil s fosforileze guanozina i inozima.
Adenozina
Adenozin-kinaza
ATP
AMP
ADP
145
N
5'
HOH2C
Adenozindeaminaz\
NH3
HOH2C
N
H
Pa
R1P
Hipoxantina
Purinnucleotidfosforilaza
R1P
xantinoxidaza
(Mo,Fe)
O2
Inozina
Pa
O
HO OH
O
Purin-ribonucleotidfosforilaza
HN
1'
H2N
HN
HOH2C
HO OH
Adenozina
HN
O
HN
H2N
O
N
Guanaza
N
H
NH3
Guanina
HN
O
N
H
Xantina
HO OH
Guanozina
146
Acidul uric este foarte puin solubil la pH acid. Sarea sa de Na este mai
solubil (7 mg% dl ser la 37 0C). Concentraia plasmatic de acid uric este de
aproximativ 6 mg% dL.
La nivelul tubilor renali, acidul uric este iniial reabsorbit din filtratul
glomerular, fiind apoi eliminat prin secreie tubular.
Afeciunea caracteristic dereglrii metabolismului purinnucleotidelor
este guta, o maladie destul de rspndit, caracterizat prin hiperuricemie
7 mg % dL ser.
Creterea concentraiei de acid uric duce la depunerea de cristale de acid
uric n articulaii (artrita gutoas), n rinichi (nefrolitiaza uratic) i n alte
esuturi sub form de tofi.
Hiperuricemia poate fi cauzat de un consum exagerat de carne sau de o
tulburare genetic n sinteza ribonucleotidelor.
Guta metabolic primar. Cauza poate fi activitatea crescut a
PRPP-sintetazei, fie insuficiena mecanismelor de reglare a sintezei (datorit
rezistenei PRPP-amino transferazei la inhibiia feed-back), fie perturbrii
reutilizrii purinelor.
n unele cazuri, producia de urai este normal dar exist un defect
nnscut n mecanismele de secreie tubular a acidului uric guta primar
renal.
Guta metabolic secundar este asociat unor boli ca urmare a unui
metabolism intens al acizilor nucleici cum ar fi leucemii, iradierea cu raze X,
defect de glucoz-6-fosfataz (glicogenoza de tip I sau boala von Gierke).
Cele mai bune rezultate n tratarea gutei se obin prin administrarea
allopurinolului, inhibitor competitiv pentru xantin-oxidaz (XO).
O
HN
N
N
N
H
Allopurinol
147
148
9. METABOLISMUL CROMOPROTEINELOR
Cromoproteinele porfirinice sunt formate dintr-o protein i o grupare
prostetic, reprezentat de o structur porfirinic.
Porfirinele sunt compui ciclici, formai din patru nuclee pirolice unite
prin legturi metenil (-C= ). O proprietate caracteristic a porfirinelor este
formarea de complexe cu ionii metalici, care se leag de atomii de azot din
nucleele pirolice.
Printre porfirinele naturale care ndeplinesc funcii biologice importante
se numr: hemoglobina, mioglobina, citocromii, catalaza, peroxidazele,
triptofan-pirolaza, clorofila etc., hemoglobina fiind porfirina major din
organism.
9.1. Biosinteza hemoglobinei
_
_
Sinteza
hemoglobinei are loc n celuleleCOO
eritropoietice
din mduva
COO
+
osoas, ficat i splin.H N
CH2
3
CH
2 Biosinteza
hemului1se-ALA-sintaz\
realizeaz din succinil-CoA
i glicocol.
+
; ntr-o
(P5P)
CH
CH
2
2
prim CH
reacie,
n mitocondrie,
2
_ are loc condensarea succinil-CoA cu glicocolul
COO
C CH2 NH
CO
sub aciunea
(ALA-sintaza)
concomitent
cu
2
2
C SCoA -aminolevulinat-sintazei
HSCoA
eliminarea CO2 i formarea acidului -aminolevulinic
O (ALA). Reacia necesit
O
vitamina B6 pentru activarea glicinei (este posibil ca glicina s se fixeze la
Acid-Aminolevulinic (ALA)
Glicocol
Succinil-CoA (P-5-P)
piridoxal-5-fosfat
prin legtur de baz Schiff). Activitatea -ALA
controleaz ntreaga sintez. n continuare, prin condensarea a dou molecule de
_
acid -amino-levulinic (reacia 2), se formeaz un nucleu
pirolic,
COO
porfobilinogen
_
_
_ (PBG).
COO
COO
COO
Din patru molecule de porfobilinogen (reacia 3)CHse
2 formeaz un
(CH2)legat
tetrapirol
care rmne
de enzim.
CH2
CHlinear
CH2
2
2
2ciclizeaz,
ALA-dehidrataz\
Tetrapirolul
linear
se
prin
pierderea
gruprii amino la
+
O C
C H2
C
C
uroporfirinogen III, n care aranjamentul
este asimetric (reacia 4).
2 H2lanului
O
H
CH
C
O
Reacia se petrece prin cooperarea a dou enzime, Curoporfirinogen
sintaza i
CH
H
N
N
cosintaza.
CH2
CH2
H
Rolul
cosintazei
este
de
a
izomeriza
unul
din
nucleele
pirolice pentru a
NH2
H
NH2
se forma uroporfirinogen III. n aceast reacie se formeaz i mici cantiti de
-ALA
Porfobilinogen (PBG)
izomer-ALA
simetric, uroporfirinogen
I, biologic inactiv.
4PBG
Uroporfibilinogen
3
sintaz\
3NH3
A
H2N CH2
P
N
H
CH2
P
N
H
Tetrapirol liniar
CH2
P
N
H
CH2
P
N
H
149
N
M
Coproporfirinogen- M
A
P
Uroporfirinogen
6 oxidaza
NH HN
sintaz\
C
C H2
H
2
^
A
N
A
N
P
V
H
2 CO2 4 H2
4 cosintaz\
5
N H HN
H
NP
M
P
C H2 P
NH3
H2C
Protoporfirinogen IX
P
A
M
Uroporfirinogen
III
M
8
Ferochelataz\
Fe2^
Protoporfirinogen- M
7 oxidaza
MP
Uroporfirinogen6H
decarboxilaza
N
P
V
M
Hem
NH
P
HN
NN
MV
H
NH HN
H
P N
M
P
Protoporfirina IX
M
Coproporfirinogen III
N Fe2+ N
P
4 CO 2
A - acid acetic
P - acid propionic
M - metil
V - vi
150
Succinil-CoA ^Glicocol
ALA-sintaza
ALA
Prin decarboxilarea
resturilor de acid acetic din uroporfirinogen III se
ALA-dehidrataza
2
ajunge
la coproporfirinogen III (reacia 5), apoi prin decarboxilarea i
dehidrogenarea a dou resturi de acid propionic (reacia 6) protoporfirinogenul
Porfobilinogen (PBG)
IX, sub aciunea porfirinogen-oxidazei (reacia 7) se formeaz protoporfirina IX
+ - I Porfiria acut\ intermitent\, PAI (hepatic\)
urin\: PBG^
3 Uroporfirinogen
care
fixeaz Fe 2 I sub
aciunea hem-sintetazei (ferochelatazei)
(reacia
8) se
uroporfirinogen^
sintaza
dureri abdominale, simptome neuropsihice
ajunge la hem. Ultimele dou reacii, formarea protoporfirinei IX i a hemului,
+
Tetrapirol liniar
au loc n mitocondrie,
ionul de Fe2 necesar activitii ferochelatazei este
transportat n plasm de
transferin, o protein care leag doi ioni ferici.
4 Uroporfirinogen III- II Porfiria eritropoietic\ congenital\ (eritropoietic\) urin\: PBG Reglarea sintezei
hemoglobinei
uroporfirinogen^
f\r\ fotosensibilitate
cosintaza
Activitatea -ALA-sintetazei este reglat n principal prin inhibiia
Uroporfirinogen III
feed-back exercitat de hem care represeaz sinteza enzimei. urin\: uroporfirin\^
Uroporfirinogendecarboxilaza
PBG-
fecale: protoporfirinogen^
Ferochelataza
Fe2^
VI Protoporfiria (eritropoietic\)
Fotosensibilitate
Hem
Protein\
Hemoprotein\
fecale: protoporfirin\^
eritrocite: protoporfirin\^
151
152
153
154
155
156
157
158
159
N5-formil-FH4 = N5-formil-FH4-tetrahidrofolat
N10-CH3-FH4 = N10-CH3-FH4 -tetrahidrofolat
N10-metenil-FH4 = N10-metenil-FH4 tetrahidrofolat
NAD (NAD+) = Nicotin adenin dinucleotid(forma oxidat)
NADH (NADH + H+) = Nicotin adenin dinucleotid (forma redus)
NADP (NADP+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma oxidat)
NADPH (NADPH + H+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma redus)
Pa = Fosfat anorganic
PDH = Piruvat dehidrogenaz
PEP = Fosfoenol piruvat
PEP-carboxikinaza = Fosfoenol piruvat-carboxikinaza
3-PG = Acid 3-fosfogliceric
PGK = Fosfoglicerat kinaz
PGM = Fosfogliceratmutaz
Phe = Fenilalanin
PHI = Fosfohexo-izomeraz
PK = Piruvat-kinaz
PKU = Fenilcetonurie
Pro = Prolin
PRPP= Fosforibozil-pirofosfat
PTH = Parathormon
OCT = Ornitin carbamoil-transferaz
QPRT = Chinoleat-fosforibozil-transferaz
RBP = Proteina de legare a retinolului(Retinol binding protein)
R-1-P = Riboz-1-fosfat
SAM = Sulf-adenozil-metionin
SAH = Sulf-adenozil-homocistein
Ser = Serin
SHMP = untul hexoz-monofosfatilor
SNC = Sistem nervos central
Succ.DH = Succinil dehidrogenaz
T = Timin
Thr = Treonin
Trp = Triptofan
TPP = Tiamin pirofosfat
Tyr = Tirozin
U = Uracil
160