1.

Scurt privire asupra tiintelor fundamentale ale naturii

Fizica studiaz structura i proprietile generale ale materiei. Prin materie se nelege tot ce exist n mod obiectiv. n totalitatea ei, materia alctuiete universul material. nsuirile fundamentale ale materiei sunt micarea, organizarea i proprietatea de a avea mas (figura). Materia se caracterizeaz prin mas, n sensul c substana din care este alctuit manifest inerie la solicitri mecanice. ntre corpurile formate din substan pot exista patru tipuri de interaciuni fundamentale : interaciunea nuclear tare (realizat prin schimb de mezoni), interaciunea nuclear slab (realizat prin schimb de neutrini), interaciunea electromagnetic (prin schimb de fotoni) i interaciunea gravitaional realizat prin gravitoni ipotetici. Interaciunile se manifest prin fore de atracie sau de respingere, fore care realizeaz n spaiu i n timp cmpuri de fore. Interaciunile nu se produc instantaneu ci cu o vitez finit ce nu poate depi viteza luminii n vid. Spaiul, timpul i cmpurile de fore sunt considerate, alturi de substan, drept forme de existen a materiei. Spaiul i timpul depind de cmpul de fore existent. n lipsa corpurilor nu exist cmpuri de fore i, deci, nici spaiu i nici timp. Materia se afl n permanent micare (se mic att particulele elementare ct i atomii, moleculele, corpurile macroscopice, galaxiile etc.). Msura micrii materiei, din punct de vedere calitativ i cantitativ, este energia. Materia este organizat att n ceea ce privete substana din care este alctuit ct i micarea ce o anim. Materia are, deci, o structur i un comportament, iar msura organizrii materiei este informaia. Fizica studiaz sisteme materiale, adic poriuni finite ale universului material, lund n consideraie materia att ca substan sau cmp ct i sub aspectele ei energetice i informaionale. Fizica investigheaz interaciunile substaniale, energetice i informaionale dintre corpurile ce aparin sistemului studiat precum i cele dintre acesta i corpurile din afara sistemului. Deosebiri ntre fizica clasic i fizica modern fizica fizica

Fizica clasic Proprietatea (newtoniana) considerat COSMOS

Fizica modern (cuantic i relativist) MICRO-COSMOS i MEGA-COSMOS

Timpul i spaiul

Masa

Spaiul Apare conceptul de continuum spaiu-timp tridimensional cvadridimensional, fr zone vide, curbat sub este n repaus efectul forelor de gravitaie. Se aplic i absolut, geometrii ne-euclidiene. independent de lumea material, Spaiul i timpul sunt mrimi relative care nu Se aplic exist n lipsa materiei i ale cror valori geometria msurate depind de observator (fiecare observator euclidian. msoar propriul lui timp). Timpul, i el Timpul curge mai ncet pentru obiecte care se absolut, se deplaseaz cu viteze mari sau se afl n scurge uniform apropierea unor corpuri masive. dinspre trecut Trecutul, prezentul i viitorul coexist, spaiul i spre viitor. timpul fiind simple elemente de limbaj pentru observator. Materia nu exist ntr-un anumit loc ci are doar tendina de a exista acolo cu o anumit probabilitate. Locul particulei materiale l ia "paternul dinamic", Substana exist tiparul nuntrul cruia energia, ca msur a micrii materiei, se transform n mas. Se ca particule punctiforme, poate vorbi despre un dans continuu al energiei. avnd mas bine Corpurile au o mas variabil care crete pe msur ce viteza de deplasare crete. definit, izolate Exist mas de micare i mas de repaus. sau aglomerate. Dualitatea particul -und de probabilitate.

Se realizeaz prin fore instantanee de atracie sau de Interaciuni Viteza de propagare a interaciunilor nu poate respingere. materiale depi viteza luminii. Exist cmpuri de fore n jurul particulelor de substan. Relaia Determinism Indeterminism la nivel cuantic. Principiul cauz- efect perfect incertitudinii al lui Heisenberg. La nivel cuantic vorbim doar despre o stare cuantic i de probabilitatea atingerii acelei stri cuantice, fr a putea cunoate simultan poziia i viteza particulei. Proprietile unui obiect depind de ntregul univers i l exprim. Observatorul influeneaza decisiv universul. Holomicarea, teoria holist a universului. Legile,

principiile, ecuaiile fundamentale sunt creaii ale observatorului care ncearc s ordoneze ceea ce observ.

Energia universului

Infinit

Zero. Energia pozitiv a materiei este egal i de semn opus cu energia negativ gravitaional

Studiul sistemelor materiale se poate face pe cale experimental i pe cale teoretic. Abordarea teoretic presupune dezvoltri logice ale unor cunotine acumulate pe cale experimental precum i verificarea experimental a teoriilor astfel construite. Abordarea experimental a sistemelor materiale se face prin observarea pasiv i activ a acestora cu ajutorul simurilor i al instrumentelor. Observatorul pasiv nu intervine n evoluia sistemului studiat, mulumindu-se s aleag momentul observrii i aspectul supus observrii. Observarea activ se numete experiment i presupune stabilirea de ctre experimentator a condiiilor n care s evolueze sistemul cercetat precum i modificarea acestora n momentul dorit. Obiectul observrii poate fi un sistem material macroscopic sau microscopic. Sistemele macroscopice conin un numr foarte mare de molecule i sunt, n general, direct observabile i msurabile; sistemele microscopice au dimensiuni de acelai ordin de mrime cu cele ale atomilor i moleculelor, fiind numai indirect observabile. n lumea microscopic devine manifest caracterul discontinuu al materiei precum i aciunea unor legi speciale cuantice. Rezultatele experimentale sunt afectate de erori subiective (legate de simurile, raiunea i chiar de afectivitatea cercettorului) i de erori obiective, legate de interaciunea instrument-sistem cercetat precum i de cauze intrinseci sistemului cercetat. Erorile inevitabile care apar n cercetrile la nivel microscopic provin din imposibilitatea stabilirii simultane i precise a poziiei i a impulsului unei particule (principiul incertitudinii). Experimentele efectuate la nivel macroscopic sunt afectate de erori provenind din fluctuaiile termice din sistem (rezultnd din agitaia termic a moleculelor), cu att mai mari cu ct sistemul (sau instrumentul de cercetare) conine un numr mai mic de molecule. Erorile provenind din fluctuaiile termice ar putea fi eliminate, teoretic, fie rcind sistemul la 0 Kelvin, cnd agitaia termic nceteaz, fie efectund msurtorile infinit de repede astfel nct timpul de observare s fie egal cu zero i agitaia termic s nu se mai poat reflecta n rezultatul msurrii. Din pcate, nu sunt posibile nici rcirea la zero absolut ("se opune" principiul III al termodinamicii) i nici depirea vitezei luminii de ctre semnalul plecat de la sistemul cercetat ctre observator (principiul relativitii). Aa dar, erorile sunt inevitabile; ele pot fi reduse la minimum dar trebuie cunoscute i recunoscute n lucrrile tiintifice. Interpretarea rezultatelor experimentale se face astzi prin prisma teoriilor fizicii moderne; relativitatea i cuantificarea au nlturat mecanicismul i atomismul lui Newton i Galilei. Astzi, lumea nu mai este privit ca o colecie de particule aflate n micare ntr-un spaiu i ntr-un timp independente ci ca o evoluie a unui complex ordonat substana-cmp

ntr-un continuum spaiu-timp n care timpul i cele trei dimensiuni ale spaiului sunt legate ntr-un sistem tetradimensional. Interpretarea corect a rezultatelor cere pruden din partea cercettorului, care ar putea fi tentat s alunece pe panta reducionismului sau pe cea a emergenei. Reducionismul simplific realitatea, afirmnd c proprietile unui sistem pot fi reduse la o sum a proprietilor elementelor componente ale sistemului; teoria emergenei afirm c unele proprieti, numite emergene ale sistemului, nu mai pot fi n nici un fel explicate pe baza proprietilor prilor componente. Viaa ar fi o astfel de emergen, dup unii, sau ar putea fi redus la proprietile moleculelor din sistemele vii, dup alii. Chimia s-a desprins din fizic, n primul rnd datorit extraordinarei eficiene a tehnicilor de analiz i de sintez chimic ce permit descompunerea i combinarea substanelor, cu schimbarea naturii lor chimice. Chimia studiaz compoziia atomic a moleculelor i modul de dispunere a atomilor n molecule precum i reaciile chimice care duc la modificri n compoziie i n aranjamentul atomilor n molecul. Spre deosebire de fenomenele fizice, n care prile participante la procese nu i schimb natura, n fenomenele chimice natura substanelor se schimb deoarece intervin reacii chimice. Biologia studiaz viaa, organismele vii i pri sau colective organizate ale acestora. Biologia studiaz sisteme biologice, adic sisteme materiale caracterizate prin reactivitate (excitabilitate i motilitate) i capabile de autorenoire prin metabolism, autoreproducere, cretere i dezvoltare. Biologia studiaz o form de micare a materiei avnd un nalt grad de organizare, atins numai de sisteme biologice construite pe baza informaiei genetice. Viaa este cel mai complex fenomen din universul cunoscut iar omul, n special prin creierul su, este cea mai complex form de via. Anatomia descrie formele vii iar fiziologia studiaz fenomenele ce au loc n organismele vii, stabilind legile de funcionare ale acestora. Medicina este o ramur aplicat a biologiei, avnd ca finalitate pstrarea sau dobndirea strii de sntate. Exist un mare numr de ramuri ale biologiei (biologie molecular, genetic, imunologie, etologie etc.) iar acest numr este n continu cretere ca urmare a acumulrii rapide de noi cunotine tiinifice. Nici o tiin (cu att mai mult tiinele naturii) nu se poate constitui i dezvolta fr suport matematic. Matematica este o tiin care se bazeaz pe un sistem universal de simboluri abstracte i ofer cunoaterii posibilitatea de a avansa dincolo de limtele limbajului comun. Ea pune metodele i cunotinele ei la dispoziia tuturor tiinelor.

2. Apariia biofizicii i constituirea ei ca tiina de sine stttoare

nc din cele mai vechi timpuri au existat preocupri legate de investigarea organismelor vii cu metode fizice precum i ncercri de interpretare a datelor astfel obinute prin prisma cunotinelor de fizic. Printre lucrrile care ilustreaz asemenea preocupri se numr cele semnate de Leonardo da Vinci, Galvani, Volta, Borelli, Helmholtz i muli alii. Numrul unor asemenea studii i cercetri a crescut att de mult dup 1900 nct a devenit necesar editarea unor reviste de specialitate (de exemplu, Biophysical Journal SUA ) care s adune n paginile lor acest nou tip de lucrri, publicate pn atunci n reviste cu titlurile cele mai diverse.

nc din anii 1920 au aprut tratate de Biologie fizic i chiar de Biofizic. Specialitii n biofizic s-au organizat n societi naionale iar n 1961 a luat fiin Uniunea Internaional de Biofizic Pur i Aplicat (International Union of Pure and Applied Biophysics - IUPAB) la care s-au afiliat societi naionale din ntreaga lume, inclusiv din IUPAB) ara noastr. n 1984 s-a format Asociaia European a Societilor de Biofizic (European (European Biophysical Societies' Association - EBSA) n 1990 a luat natere Societatea Naional EBSA) na Na Romn de Biofizic Pur i Aplicat (Romanian National Society of Pure and Applied Biophysics - RNSPAB). nvmntul medical de biofizic din Romnia a debutat n 1959, cnd l-a nlocuit pe cel de Fizic medical. Ulterior, au aprut catedre de biofizic i n facultile de fizic, biologie i agronomie.

3. Definirea biofizicii; relaiile biofizicii cu alte tiine

n literatura de specialitate au fost propuse numeroase definiii ale biofizicii, conform crora biofizica ar fi : -studiul sistemelor i al fenomenelor biologice din punctul de vedere al fizicianului; -studiul fenomenelor fizice din sistemele biologice n lumina i cu ajutorul tehnicilor fizico-matematice; -studiul inter-dependenei dintre formele de micare fizic i biologic; -studiul vieii din punct de vedere fizic etc. Dei asemntoare, definiiile propuse nu sunt identice; unele pun accentul pe latura biologic (biologia abordat din punct de vedere fizic) iar altele subliniaz latura fizic (fizica aplicat n biologie). Conform definiiei propuse n acest curs, biofizica este tiina care studiaz aspectele fizice ale structurilor i fenomenelor biologice. Aceast definiie ia n consideraie faptul c sistemele biologice sunt alctuite din structuri biologice (construite pe baza informaiei genetice) i c, prin convenie, fenomenele ce au loc n sistemele biologice sunt denumite fenomene biologice. Aspectele fizice despre care se vorbete n definiie privesc natura, proprietile i interaciunile particulelor subatomice, ale atomilor individuali sau integrai n molecule, ale moleculelor i prilor acestora (cu excepia aspectelor chimice care se refer la modificri ale compoziiei i ale aranjamentului atomilor n molecule), ale radiaiilor care nsoesc tranziiile energetice cuantificate din atomi i molecule, ale corpurilor multimoleculare aflate n stri de agregare gazoas, lichid, solid i mixt, inclusiv transportul la distan al energiei prin ciocniri moleculare, deplasri de sarcini electrice i unde. Biofizica este o tiin de grani cu caracter interdisciplinar; ea s-a nscut la frontiera care desparte fizica de biologie i de matematic, prelund mult de la fiecare dar neidentificndu-se cu nici una. Relaii strnse exist ntre biofizic i disciplinele nscute la frontiera dintre biologie i tiinele tehnico-inginereti (bioinginerie, bionic, biotehnic, biotehnologie etc.)

4. Problematica i capitolele biofizicii

Biofizica predat la facultile de medicin studiaz trei probleme generale: - aspecte fizice ale structurilor i fenomenelor biologice; - tehnici fizice utilizate n explorarea biomedical; - efecte biologice ale factorilor fizici din mediul ambiant.

Primele dou probleme reprezint preocupri ce decurg firesc din definiia biofizicii, n timp ce a treia este preluat de biofizic n msura n care se refer la nivelul fundamental al interaciunii factorilor fizici cu sistemele biologice. Prin factori fizici se neleg fie cmpurile de fore (electrice, magnetice, gravitaionale etc.) fie fluxurile de energie (cldur, curent electric, radiaii corpusculare i fotonice, sunete etc.) Exist biofizic experimental i biofizic teoretic. Biofizica teoretic pleac de la descrierea cantitativ a aspectelor fizice ale sistemelor biologice i ncearc s gseasc noi legiti, prin calcule i raionamente. Prezentarea noiunilor de biofizic n cadrul unui curs se poate face prin dou modaliti. O prim cale este examinarea principalelor structuri i funcii biologice i evidenierea aspectelor fizice ale acestora. Un asemenea curs ar urma s aib capitole de tipul : -biofizic molecular, cuprinznd proprietile moleculelor ce alctuiesc materia vie i fenomenele la care iau parte aceste molecule; -biofizic celular, ce descrie aspecte mecanice, electrice, termice etc. ale fenomenelor desfurate la nivel celular; -biofizica sistemelor complexe, privind fenomenele fizice care intervin n recepia vizual, auditiv, n funcia neuronilor, n contracia muscular etc. O asemenea prezentare are avantajul unei succesiuni armonioase i gradate a capitolelor; ea poate fi abordat ca atare mai ales n cazul n care studenii au deja noiuni de fiziologie i biochimie. n fapt, deoarece biofizica este prevzut n planul de nvmnt n anul I, studentul nu are nc asemenea noiuni; n schimb, el are cunotine de fizic recent nsuite n coal. De aceea, a fost preferat n acest curs cea de a doua modalitate de prezentare a noiunilor i anume, studierea succesiv a principalelor capitole ale fizicii (mecanic, termodinamic, fizic molecular, electricitate, acustic, optic, cibernetic) i evidenierea n fiecare capitol a modului n care se manifest aspectele fizice respective n structura i funcia unor sisteme biologice precum i modul n care factorul fizic respectiv interacioneaza cu sistemele biologice.

5. Biofizica n nvmntul medical

Unii studeni consider c este inutil s-i ncarce memoria cu cunotine de fizic, chimie sau cu orice altceva n afar de ceea ce face parte nemijlocit din specialitatea lor viitoare. Aceti studeni renuna deliberat la ansa de a contribui la progresul medicinii, mulumindu-se s execute gesturi medicale nvate odat pentru totdeauna i a cror semnificaie mai profund le scap. Biofizica ofer studentului posibilitatea de a nelege modul n care particip atomii, moleculele i conglomeratele moleculare n diferite procese biologice n care energia se transfer dintr-un loc n altul sau se transform dintr-o form n alta. Un om care tie ce se petrece n interiorul unui sistem este ferit de nesigurana celui care cunoate doar manifestrile exterioare, aparente, ale acelui sistem i care, de aceea, este neajutorat n situaia n care survine o modificare neateptat a comportamentului sistemului. Biofizica ofer viitorului medic elementele de limbaj i de gndire care s-i permit s discute constructiv cu fizicienii i inginerii. Dei n zilele noastre colaborarea medicinii cu fizica i cu ingineria este din ce n ce mai necesar, bariera de limbaj dintre fiziolog i fizician, dintre medic i inginer, se nal rapid, punnd n pericol chiar i capacitatea lor de a se nelege unul pe cellalt.

Biofizica familiarizeaz pe studeni cu principalele tehnici fizice cu care se vor ntlni n cariera lor medical, att pe plan teoretic ct i practic. A executa lucrri practice de biofizic nseamn ntotdeauna a realiza o interfa om-aparat, nseamn contactul cu instrumentul care trebuie manevrat, reglat, folosit n mod optim, nseamn a fi contient de erorile de msurare i de cile de a le nltura precum i de necesitatea de a le recunoate cu onestitate existena i a le preciza dimensiunile. Prin ntocmirea unui referat al lucrrii practice executate, studentul face primul pas n arta dificil a redactrii corecte i concise a unei lucrri tiinifice publicabile. Pentru studentul care tie c nvmntul universitar are menirea de a-i forma gndirea necesar exercitrii profesiei alese i de a-i acorda ansa de a se menine n pas cu progresul tiinific i tehnic, apare cu claritate faptul ca biofizica l ajut s gndeasc n termeni precii, s exprime cantitativ i riguros exact ce are de spus n legtur cu fenomenul biologic, cu starea de sntate i de boal, s efectueze cu uurin calcule ntrun sistem de unitti coerent i acceptat internaional. Studentul care nzuiete s fac parte din elita intelectual a generaiei sale tie c trebuie s aib pregatirea necesar pentru a putea trece cu uurin pe trmul altor tiine dect medicina i a pentru a dobndi o viziune larg i perfectibil asupra lumii n general i asupra vieii, n special.

NOIUNI DE BIOMECANIC A FLUIDELOR

1. Definiia fluidelor
Fluidele sunt substane care pot curge cu uurin.

2. Vscozitatea fluidelor
n procesul curgerii, straturile adiacente de fluid se deplaseaz cu viteze diferite, alunecnd unele fa de celelalte, astfel nct la suprafaa lor de contact iau natere fore de frecare intern numite fore de vscozitate. Conform unei legi stabilite de Newton F = A v/x, fora F, care determin alunecarea relativ a straturilor cu viteze al cror gradient este v/x , este proporional cu acest gradient i cu aria A a straturilor glisante, printr-un factor de proporionalitate numit coeficient de vscozitate (sau, mai pe scurt, vscozitate). Dimensiunea (n sistemul internaional de mrimi i uniti) a coeficientului de vscozitate este <Ns/m2>, aa cum se poate deduce din relaia = F dx/ A dv. n cazul curgerii fluidului printr-un tub la ai crui perei ader (pe care i "ud"), stratul periferic al coloanei de fluid va avea o vitez de naintare foarte mic. Stratul urmtor se deplaseaz mai repede, frecndu-se de primul strat. Viteza de deplasare a straturilor de fluid crete pe msur ce ele ocup o poziie mai central, culminnd cu firul central care are viteza maxim. Frontul de naintare al fluidului prin tub are o form care depinde n mare msura de coeficientul de vscozitate al fluidului. Gradientul de vitez v/x poate fi aproximat (n acest caz) cu diferena dintre viteza maxima i cea minim, raportat la raza tubului, adic este (v2-v1) / r.

Coeficientul de vscozitate se msoara printr-o unitate de msur numit poiseuille (se pronun "poazeui") (1 P = 1 Nsm-2) sau n submultiplul poise (se pronun "poaza") (1 p = 0,1 P). Apa are, la temperatura camerei, o vscozitate de 0,001 P iar sngele, la temperatura corpului, are o vscozitate cuprins ntre 0,002 i 0,004 P. Introducerea unui fluid ntre dou corpuri solide aflate n contact micoreaza mult forele de frecare dintre ele; este nlocuit, astfel, frecarea solid-solid cu frecarea intern din fluid. n aceasta situaie, fluidul devine un lubrifiant iar efectul legat de micorarea frecrii se numeste lubrifiere. Un astfel de lubrifiant este, n cazul articulaiilor oaselor, lichidul sinovial .

3. Clasificarea fluidelor
Studiul teoretic al fluidelor se face pe baza unui model fizic idealizat. Acest model atribuie fluidului ideal nsuirea de a fi incompresibil i de a avea coeficientul de vscozitate egal cu zero. Fluidele reale au proprieti i o comportare ce se apropie mai mult sau mai puin de cele ale fluidelor ideale. Fluidele reale care respect legea lui Newton se numesc fluide newtoniene; coeficientul lor de vscozitate ramne constant, indiferent de viteza de curgere a fluidului. Celelalte fluide sunt fluide nenewtoniene i, printre ele, un loc aparte l ocupa fluidele pseudoplastice, ale cror coeficieni de vscozitate scad pe msur ce crete viteza de curgere. Sngele este un astfel de fluid nenewtonian pseudoplastic. Alte tipuri de fluide nenewtoniene sunt fluidul dilatant (de exemplu, mortarul de ciment) la care coeficientul de vscozitate crete odat cu creterea vitezei de curgere i fluidul de tip Bingham (de exemplu, pasta de dini sau maioneza), fluid care ncepe s curg abia dup ce fora de deformare depete o anumit valoare (un prag), dup care, ns, coeficientul de vscozitate nu mai variaz cu viteza de curgere, semnnd, din acest punct de vedere, cu fluidele newtoniene.

4. Curgerea fluidelor
Fluidele pot curge n regim staionar sau n regim nestaionar. Un fluid curge n regim staionar dac, n orice punct cercetat, elementul de fluid se deplaseaz pe aceeai traiectorie pe care au avut-o elementele de fluid care au trecut deja prin acel punct sau care vor trece n viitor. n caz contrar, regimul curgerii este nestationar. Din punct de vedere al modului n care straturile de fluid alunec unele fa de altele, curgerea poate fi laminar sau turbulent. n curgerea laminar, straturile de lichid alunec lin unele faa de altele. n anumite condiii, curgerea devine turbulent i se caracterizeaz prin apariia de vrtejuri care ngreuneaz mult avansarea fluidului pe direcia lui de curgere. Caracterul curgerii unui fluid printr-un tub cilindric cu perei netezi poate fi anticipat dac se cunosc viteza de curgere a fluidului (v), densitatea lui (), coeficientul de vscozitate () i raza tubului (r). Reynolds a constatat c raportul vr/ este o mrime adimensionala (NR sau numrul lui Reynolds). Dac acest numr este mai mic dect 1000, atunci curgerea va fi cu certitudine laminar iar pentru NR > 1500, curgerea va fi sigur turbulent. Pentru valori ale lui NR cuprinse ntre 1000 i 1500, curgerea va fi instabil, avnd tendina de a trece din regim laminar n regim turbulent i

invers. Dac este vorba de alte procese de curgere dect cele ce au loc ntr-un tub (cazul descris mai sus), semnificaia numrului lui Reynolds este diferit, de la caz la caz.

5. Ecuaia de continuitate
n procesul curgerii unui fluid printr-un tub, volumul de fluid care traverseaz ntr-o secund o seciune transversal a tubului poart numele de debit volumic (D) iar spaiul parcurs ntr-o secund de un element de fluid este egal cu viteza de curgere (v). n orice punct al tubului, debitul volumic este egal cu produsul dintre aria seciunii transversale a tubului (A) i viteza de curgere (v) a fluidului, ambele msurate n acel punct. n aceste condiii se pot trage cteva concluzii: -debitul volumic are aceeai valoare n orice punct al tubului, dac fluidul este incompresibil; -dac ntr-un punct al tubului, aria seciunii transversale este A1 i viteza de curgere v1, iar n alt punct al tubului valorile acestor mrimi sunt A2 i v2, atunci A1v1 = A2v2, aceast egalitate purtnd numele de ecuaie de continuitate; -n zonele ngustate ale tubului, viteza de curgere este mai mare dect n zonele largi.

6. Presiunea fluidelor
Un manometru introdus ntr-un fluid care st nemicat n raport cu pereii vasului n care se afl (adic un fluid n repaus) indic valori din ce n ce mai mari ale presiunii, pe msur ce este scufundat la adncime mai mare. Presiunea astfel msurat poart numele de presiune efectiva (pef) i este egala cu suma dintre presiunea atmosferei de deasupra fluidului (po) i presiunea exercitat de ctre coloana de fluid de deasupra manometrului, gl, unde este densitatea fluidului, g este acceleraia gravitaional i l este adncimea la care se afl manometrul. pef = po + gl Daca distana dintre fundul vasului i suprafaa superioar liber a fluidului este H, iar distana dintre fundul vasului i punctul unde este plasat manometrul este h, atunci l = H h i relaia de mai sus se poate scrie: pef = po + g(H-h) sau pef = po + gH - gh sau pef + gh = po + gH Membrul stng al acestei egalitai este suma dintre presiunea efectiv ntr-un punct din fluid i densitatea de energie gravitationala a fluidului aflat n acel punct. Aceast sum poart numele de presiune static i are aceeai valoare n orice punct din fluid, indiferent de adncimea la care se afl punctul respectiv. Presiunea static are o valoare constant, deoarece membrul drept al ecuaiei de mai sus conine numai mrimi constante (po, , g i H). Faptul c presiunea efectiv este mai mare la fundul vasului nu determin (cum, poate, ne-am atepta) deplasarea fluidului ctre zonele superioare, unde presiunea efectiv este mai mic. Fluidul rmne nemicat, deoarece presiunea care l-ar putea deplasa nu este presiunea efectiv ci presiunea static, iar aceasta este identic n toate punctele din fluid. Dac fluidul curge cu viteza v, el va exercita un nou tip de presiune, numit presiune dinamica, egala cu v2/2. Apariia acestei noi presiuni este nsoit de o scdere echivalent

a presiunii efective (uneori chiar sub presiunea atmosferic), astfel nct s fie respectat legea lui Bernoulli : pef + gh + v2/2 = constant Toate consideraiile de mai sus se refer la fluidul ideal a crui vscozitate este nul. Neexistnd frecri care s-i stnjeneasc naintarea n tub, fluidul ideal nu acumuleaz energie poteniala (spre deosebire de cazul curgerii vscoase). n cazul fluidelor reale, ns, energia poteniala a fluidului scade pe msur ce fluidul avanseaz n tub, datorit frecrilor interne ce au loc ntre straturile fluidului. Pe seama acestei scderi a energiei poteniale, fluidul se nclzete (ntr-o foarte mic msur, desigur). Conform legii Poiseuille-Hagen (care nu va fi dedus aici), scderea de presiune de-a lungul distanei l strabtut de fluid ntr-un tub cilindric de raza r este: p1 - p2 = 8lv/r sau p1 - p2 = 8 lD/ r4 deoarece v = D/S = D/ r2. Dac s-ar face o analogie ntre mrimile hidrodinamice i cele electrocinetice, diferena p1 - p2 ar corespunde diferenei de potenial electric, debitul D al curgerii ar corespunde intensitii curentului electric iar mrimea 8l/r4 ar fi echivalenta rezistenei electrice (i, ntr-adevr, msoar rezistena ntmpinat de fluid n timpul curgerii sale prin tub).

7. Aspecte biofizice ale circulaiei sangvine

Sistemul circulator sangvin este un sistem tubular nchis, n care pompa cardiac mpinge un fluid real nenewtonian pseudoplastic ntr-o maniera nestaionara (pulsatil) n vase de diferite calibre, avnd perei nerigizi i parial elastici. Din aceste particulariti rezult cteva consecine ce se aplic circulaiei sangvine : Lucrul mecanic al inimii se regsete n: -energia potenial a sngelui (creia i corespunde o presiune efectiv asupra pereilor vaselor) -energia cinetic a sngelui (care este o msur a micrii sngelui) -nclzirea sngelui (ca urmare a frecrilor dintre straturile de snge). Lucrul mecanic generat de inima n sistol se acumuleaz, parial, sub form de energie potenial elastic a pereilor arteriali i este cedat, apoi, coloanei de snge, n timpul diastolei. Faptul c arterele au perei elastici se dovedete avantajos n condiiile regimului pulsatil n care lucreaz inima, permind curgerea sngelui i n perioada n care inima este n diastol; n acest fel, debitul este cu mult mai mare dect debitul ce ar exista n vase cu perei neelastici. Pereii vaselor trebuie s poata rezista (din punct de vedere mecanic) presiunii efective a sngelui. Legea lui Laplace T = pr permite calcularea tensiunii T generate n pereii vaselor de raza r, supui unei presiuni de distensie p (egal cu diferena dintre presiunea efectiv a sngelui din vas i presiunea exercitat asupra vasului de esuturile din jur). Din legea lui Laplace rezult c, pentru aceeai presiune de distensie, rezistena pereilor vasculari este invers proporional cu raza

vasului de snge. Acest fapt are consecine deosebite n cazul modificrilor patologice ale lumenului vaselor de snge. n zonele n care lumenul vascular se ngusteaz, viteza sngelui crete, iar presiunea efectiv scade; cu toate acestea, rezistena la naintare a sngelui nu crete substanial, att timp ct curgerea rmne laminar, deoarece la viteze mari de curgere, vscozitatea sngelui scade. Dac pereii vaselor ngustate devin rugoi (nu mai sunt netezi), apare pericolul curgerii turbulente a sngelui, fenomen ce duce, printre altele, la creterea marcat a rezistenei la naintare a coloanei de snge i la apariia unor zgomote generate la nivelul ngustrii, numite sufluri. n arterele subiri ce apar prin ramificarea arterelor mari, viteza sngelui nu crete ci, dimpotriv, scade, deoarece debitul prin ele este doar o parte din debitul prin artera din care provin. Viteza sngelui este de aproximativ 40 cm/s n aort i de numai 1 mm/s n capilare, dar trebuie reinut faptul c aria seciunii transversale totale a capilarelor din corpul omenesc este de 700 de ori mai mare dect aria seciunii transversale a aortei. Trebuie subliniat faptul c, n circulaia sngelui, un rol important l joaca fenomenele active de vasoconstricie i vasodilataie, ale cror efecte se suprapun efectelor ce decurg din legile mecanicii fluidelor.

8. Msurarea presiunii arteriale

Presiunea arterial a sngelui poate fi msurat pe cale direct sau pe cale indirect. Modul direct de msurare se realizeaz prin introducerea n aort a unei sonde (cateter), prevzut cu un manometru miniaturizat. Prin reprezentarea grafic a variaiei continue n timp a presiunii arteriale se obine o curba. Poriunea ascendent a curbei ncepe n momentul deschiderii valvulei sigmoide aortice i ptrunderii sngelui n artere, ale cror perei sunt destini, nmagazinnd energie poteniala elastic. Presiunea maxim atins este numit i presiune sistolic. Dup sfritul sistolei ventriculare dar nainte de nchiderea valvulei aortice, presiunea ncepe s scad, revine puin n momentul nchiderii valvulei aortice i scade, apoi, treptat, pn ce atinge o valoare minim, numit presiune diastolic. Metoda direct se folosete rar, ndeosebi n serviciile spitaliceti de reanimare. n mod obinuit, presiunea arterial se msoar prin metode indirecte, n principal prin metoda palpatorie, metoda auscultatorie i metoda oscilometric. n toate aceste metode se aplic pe bra (sau, uneori, pe un deget al minii) un manon pneumatic, n care se pompeaz aer. Presiunea aerului din manon este permanent msurata de un manometru. Metoda palpatorie const n creterea presiunii n manon concomitent cu palparea arterei radiale a aceluiai bra, pn ce pulsul devine imperceptibil ca urmare a nchiderii complete a lumenului arterei brahiale din cauza presiunii exterioare exercitate de manon. Se decomprim treptat aerul din manon pn ce reapare pulsul radial. n acest moment se citete pe manometru presiunea sistolic, apreciindu-se c ea a devenit egal cu presiunea aerului din manon din acel moment, de vreme ce artera brahial a nceput s se deschid. Metoda palpatorie nu permite determinarea presiunii diastolice. n metoda auscultatorie, n loc de palparea pulsului, se ascult cu ajutorul unui stetoscop zgomotele ce apar la nivelul arterei brahiale n imediata vecintate a manonului. Se pompeaz aer n manon pn ce, prin stetoscop, nu se mai aude nici un zgomot, dup care

aerul este decomprimat lent. n momentul cnd presiunea aerului devine egal cu presiunea sistolic, sngele reuete s treac prin artera brahial dincolo de zona comprimat de manon iar stetoscopul surprinde primele zgomote. n acest moment se noteaz valoarea presiunii sistolice citit pe manometru. Zgomotele auzite provin de la vrtejurile ce apar n coloana de snge, care, conform legii lui Bernoulli, curge cu mare vitez. Curgerea se face n regim turbulent, ca urmare a ngustrii lumenului arterial (numrul lui Reynolds este mai mare de 1500). Aproape concomitent cu acest suflu se aude i un alt zgomot, produs de renchiderea brusc a arterei la finele sistolei, cnd presiunea sngelui scade sub valoarea presiunii aerului din manon. Deschiderea i nchiderea arterei brahiale fac ca pereii acesteia s vibreze, producnd zgomotul amintit mai sus, care se adaug suflului de curgere turbulent. Pe msur ce aerul din manon este decomprimat, zgomotele se aud din ce n ce mai tare, deoarece amplitudinea micrilor pereilor arteriali (n procesul de deschidere nchidere a arterei brahiale) crete i, odat cu ea, se intensific vibraiile sonore ale pereilor arteriali. La un moment dat, cnd presiunea aerului din manon devine egal cu presiunea diastolic, artera nu se mai nchide n diastol, iar zgomotele scad brusc n intensitate i dispar. Presiunea aerului din manon, citit n acest moment, este presiunea diastolic. Prin utilizarea unui microfon (cuplat la un amplificator electronic) n locul stetoscopului, devine posibil msurarea semiautomat sau chiar automat a presiunii arteriale. Metoda oscilometric urmarete amplitudinea oscilaiilor pereilor arterei brahiale n timpul decomprimrii n trepte a aerului din manonul gonflabil. Apariia oscilaiilor permite notarea valorii presiunii sistolice iar dispariia oscilaiilor corespunde presiunii diastolice. Metoda oscilometric permite i stabilirea valorii presiunii arteriale medii, care este presiunea citit pe manometru n momentul n care amplitudinea oscilaiilor este maxim. Modificrile curgerii sngelui ce au loc n artera n timpul decomprimrii aerului din manon pot fi sesizate i prin alte procedee fizice. Este vorba de metoda reografic (n care se msoara variaia impedanei electrice a poriunii de esut aflat sub manon, aplicndu-se prin intermediul a doi electrozi un curent de nalt frecven, variaie de impedan datorat reapariiei fluxului sangvin prin arter), metoda ultrasonor (n care se detecteaz variaia frecvenei unui ultrasunet reflectat de pereii arterei n timpul pulsaiei ca urmare a efectului Doppler) i metoda pletismografic (n care se detecteaz variaia volumului unui deget n jurul cruia se aplic o presiune extern prin intermediul unui manon gonflabil).

ASPECTE BIOFIZICE ALE CONTRACIEI MUSCULARE

1. Motoarele biologice moleculare
Motoarele biologice moleculare sunt agregate macromoleculare generatoare de for, capabile s converteasc n energie mecanic energia chimic provenit din: - reacii chimice exo-energetice (cel mai adesea reacii de hidroliz ale ATP sau GTP)

- diverse gradiente transmembranare de potenial electrochimic (n mod deosebit gradientul protonic, numit i fora proton-motiv) Motoarele biologice moleculare pot determina deplasri active ale organitelor intracelulare, modificarea formei celulei i locomoia celulei. Motoarelor biologice moleculare, ntlnite mai frecvent n natur, mbrac urmtoarele forme: -simple filamente contractile, care se scurteaz i se relaxeaz n funcie de compoziia ionic a mediului, (aa cum sunt proteinele care alctuiesc spasmonemele coloniilor de Vorticella); -motoare moleculare lineare, care sunt macromolecule proteice capabile s remorcheze organitele celulare i s le transporte de-a lungul unor structuri de tipul microtubulilor (kinezina i dineina) sau de-a lungul filamentelor de actin (miozinele); motoarele moleculare lineare pot produce i deplasarea relativa a microtubulilor; -motoare moleculare rotative (aa cum este F1-F0- ATP-aza pe a crei subunitate s-a ataat un lan scurt de actin, sau cum sunt flagelii monocelularelor)

2. Microstructura aparatului contractil al muchiului striat

n cele ce urmeaz vor fi menionate numai acele structuri ale muchiului striat a cror descriere este strict necesar nelegerii mecanicii contraciei. Muchiul striat este alctuit dintr-un mnunchi de fibre musculare. Fibrele musculare sunt structuri alungite, avnd la periferie o membran citoplasmatic numita sarcolem, care formeaz numeroase invaginri sub forma unor tubi transversali membranari; acetia ptrund n profunzimea fibrei i au raporturi strnse de vecintate cu cisternele reticulului sarcoplasmic. La rndul ei, fiecare fibr muscular conine un mnunchi de miofibrile, formate dintr-un ir de sarcomere, n interiorul crora exist dou seturi de miofilamente (miofilamente groase i miofilamente subiri) care se ntreptrund parial. n spaiul dintre miofibrile se afl mitocondrii, care alimenteaz maina contractil cu acid adenozin trifosforic (ATP) ce urmeaz s fie scindat n acid adenozin difosforic (ADP) i acid fosforic (Pi), pentru a elibera energia chimic necesar contraciei. Tot n spaiul dintre miofibrile exist elemente ale reticulului sarcoplasmic (structuri membranare alctuite din tubi longitudinali i cisterne terminale). Miofibrilele sunt alctuite din sarcomere, separate prin aa numitele linii Z pe care se inser miofilamentele subiri. n zona central a sarcomerului se afl miofilamentele groase. Fiecare filament gros este nconjurat de 6 filamente subiri iar n jurul fiecrui filament subire se afl trei filamente groase. Aceast situaie se ntlnete la muchiul de broasc. La insecte, miofilamentele ocup poziii diferite. Filamentele subiri sunt alctuite din dou macromolecule lungi de actin fibrilar, alipite i uor spiralate. Actina fibrilar este format dintr-un ir de molecule de actin globular, molecule care iau parte la un proces de polimerizare sau de depolimerizare, dup cum sunt legate de ATP sau ADP. Din loc n loc, la distane egale cu circa apte diametre ale moleculei de actin globular, sunt fixate cte dou molecule de troponin. n anurile formate ntre cele dou actine fibrilare se afl molecule alungite de tropomiozin, avnd extremitile ancorate la molecule de troponin. Filamentele groase sunt formate, n principal, din molecule de miozin. Fiecare molecul de miozin este alctuit dintr-o poriune numit meromiozin uoar (coad)

i o alt poriune nzestrat cu dou extremiti globulare (capete), numit meromiozin grea. Moleculele de miozin din sarcomer, n numr de circa 400, se asambleaz astfel nct "cozile " lor s alctuiasc scheletul filamentului gros, din care extremitile globulare cu "gturile" respective, se proiecteaz lateral, pentru a forma aa numitele puni transversale miozinice (numite i expansiuni laterale sau, n engleza, cross-bridges). n zona n care filamentele se ntreptrund, punile transversale ating filamentele subiri, fr, ns, a putea interaciona cu ele (atunci cnd muchiul este relaxat), deoarece ntre locurile de legare cu actina (de care dispun moleculele de miozin) i locurile de legare cu miozina (ale moleculelor de actin) se interpun molecule de tropomiozin. Acest fapt se explic prin concentraia mic n sarcoplasm a ionilor de calciu care, n marea lor majoritate, se afl depozitai n cisternele terminale i legai acolo de o protein numit calsechestrin. n cazul n care fibra muscular este excitat, ionii de calciu ies din cisterne i se fixeaz pe moleculele de troponin (care au o mare afinitate pentru ei), determinndule s deplaseze lateral moleculele de tropomiozin, pentru a permite interaciunea actomiozinic.

3. Succesiunea evenimentelor n contracia fibrei musculare striate

n contractia fibrei musculare sunt implicate trei etape succesive i anume: excitaia fibrei, cuplajul excitaie-contracie i contraia propriu-zis a fibrei. Excitaia fibrei musculare ncepe la nivelul sinapsei neuro-musculare, unde moleculele de mediator chimic eliberate din terminaia nervoas (ca urmare a unei comenzi nervoase) se fixeaz pe moleculele receptoare din membrana post-sinaptic, determinnd, astfel, deschiderea porilor unor canale cationice ale acestei membrane. Prin canale, cationii intr n fibr, al crei interior, iniial negativ electric, se pozitiveaz local, declannd apariia unui potenial electric de aciune, care se va deplasa rapid prin sarcolem n lungul fibrei, iar prin membrana tubilor transversali, n profunzimea fibrei. Aa cum s-a menionat mai sus, tubii transversali se afl ntr-un raport strns de vecintate cu cisternele reticulului sarcoplasmic. Cuplajul excitaie-contracie ncepe odat cu deschiderea canalelor de calciu din membrana cisternelor terminale, n momentul n care potenialul de aciune trece prin dreptul acestor cisterne. Ionii de calciu ies din cisterne, mrindu-i de circa 100 de ori concentraia n sarcoplasm. Troponina fixeaz ioni de calciu i, printr-o modificare conformaional, deplaseaz molecula de tropomiozin din anurile filamentului subire (n care se afl). n acest mod, obstacolul care impiedica formarea actomiozinei este ndeprtat i contracia propriu-zis poate ncepe. Contracia propriu-zis include eliberarea energiei chimice necesare contraciei, precum i fenomenele mecanice care stau la baza producerii forei i /sau scurtrii fibrei. Se cunoate faptul c extremitatea globular miozinic a punii transversale dispune de dou locuri de legare, unul pentru actin i cellalt pentru ATP. O dat fixat, molecula de ATP este imediat scindat n ADP i Pi, aceti produi ai scindrii urmnd s fie eliberai, mai devreme sau mai trziu, n sarcoplasma. Contracia apare numai dac locul pentru ATP al punii transversale este ocupat de ATP i Pi i dac tropomiozina nu mpiedic interaciunea actomiozinic. n aceast situaie, prin legarea punii transversale de filamentul subire, produii de scindare sunt rapid eliberai iar puntea (care pn atunci era orientat perpendicular pe axa filamentului subire) se nclin cu 45o faa de acest filament.

Locul de legare rmnnd liber, o nou molecul de ATP este ataat i acest fapt comand desprinderea punii de filamentul subire. ntruct ATP este imediat scindat, puntea se leag din nou de filamentul subire, ns ntr-o nou poziie, mai apropiat de linia Z, dup care produii de scindare sunt eliberai, puntea se nclin din nou (i aa mai departe). Actualmente se tie ca pivotul acestei nclinri se afla nuntrul extremitii globulare . Procednd astfel, numeroasele puni transversale ale filamentului gros se comport ca vslele unei brci i, n final, sarcomerul se scurteaz (sau tinde s se scurteze). La ncetarea comenzii nervoase, canalele de calciu din membrana cisternelor se nchid iar ionii de calciu sunt readui n cisterne de ctre pompele de calciu aflate n membrana tubilor longitudinali. Lipsite de ioni de calciu, moleculele de troponin permit tropomiozinei s revin n anurile filamentului subire i s devin iarai un obstacol n calea interaciunii actomiozinice. n cazul n care rezerva de ATP din sarcoplasm s-a epuizat iar mecanismele de regenerare ale ATP sunt depite, punile transversale nu se mai pot desprinde de filamentele subiri iar muchiul intr n starea de rigor mortis (rigiditate cadaveric).

4. Cicluri biochimice n contracia muchiului striat

Rezult, din cele de mai sus, c miozina cuplata cu actina (adic actomiozina) are o mare activitate enzimatic (ATP-azic), ntruct catalizeaz hidroliza a numeroase molecule de ATP n unitate de timp. Trebuie menionat faptul c miozina singur, necombinat cu actina, are i ea o mic activitate ATP-azic, reuind s scindeze ATP chiar n timpul strii de repaus a fibrei musculare, dar ntr-un ritm de sute de ori mai lent dect n starea activa (de contracie). Fiecare extremitate globular miozinic ce a fixat un ATP l scindeaz imediat n ADP i Pi, ateptnd, apoi, ocazia de a veni n contact cu vreun loc de legare al actinei, nemascat de tropomiozin. n lipsa acestei ocazii, dup circa 25 de secunde, produii de scindare sunt eliberai n sarcoplasm i o nou molecul de ATP este fixat pe locul rmas liber. Rezult c, n muchiul relaxat, ritmul de scindare a ATP este de 2 - 3 molecule pe minut pentru un loc de legare al miozinei. n stare activ, ns, acest ritm crete de 250 de ori, deoarece activitatea enzimatic a miozinei crete de tot attea ori prin combinarea ei cu actina. Ciclul biochimic al miozinei este continuat de cel actomiozinic, cnd ncepe contracia.. Cele doua cicluri se desfoar chiar i ntr-o fibr muscular lipsit (parial sau total) de sarcolem, de tubi transversali i de reticul sarcoplasmic, dac se modific artificial concentraiile de ATP i de ioni de calciu n soluia n care este imersat fibra. O astfel de fibr plasat ntr-o soluie lipsit de ATP intr n rigor mortis (rigiditate cadaveric); la adugare de ATP se relaxeaz, iar la adugare de ioni de calciu, se contract. ndeprtarea ionilor de calciu (cu ajutorul substanelor chelatoare de tipul EDTA sau EGTA) duce la relaxarea fibrei sau la intrarea n rigor (dup cum exist sau nu exist ATP n soluie).

5. Teorii ale contraciei musculare

n timpul scurtrii sarcomerelor, nici filamentele groase i nici cele subiri nu se scurteaz; cele dou seturi de filamente se ntreptrund, aa cum au artat pentru prima data

n 1954 A. F. Huxley i H. E. Huxley (independent unul de celalalt). Trebuie menionat, ns, c dei teoria glisrii (teoria "sliding") este aproape unanim acceptat, mai exist nc lucrri tiinifice care se refer la scurtri ale miofilamentelor, fie subiri, fie groase. Glisarea miofilamentelor se poate produce, n principiu, n mai multe moduri: prin atracie electrostatic ntre cele dou seturi de filamente groase i subiri, prin repulsie electrostatic ntre cele dou seturi de filamente (teorii ale expansiunii laterale) sau prin intervenia activ a punilor transversale (teoria "cros-bridges"). Ultimul mecanism este acceptat de cei mai muli dintre specialiti, dei tot ei accept un mare numr de neajunsuri ale teoriei "cros-bridges". Pe de alt parte, s-a putut demonstra, cu ajutorul unor variate i ingenioase montaje experimentale (Spudich), c deplasarea relativ acto-miozinic este perfect posibil in vitro, fr a necesita existena celor dou sisteme de filamente.

6. Manifestrile mecanice ale contraciei musculare

Muchiul dezvolt o for de contracie egala i de sens contrar forei creia i se opune. n funcie de mrimea acestei din urm fore, muchiul se poate scurta, se poate alungi sau i poate pstra aceeai lungime. n cazul n care muchiul se contract contra unei fore exterioare constante (ca n cazul ridicrii unei greuti), contracia este izotonic, putnd fi, n acelai timp, i izometric, dac fora exterioar este riguros egal cu fora maxim pe care o poate dezvolta muchiul. Dac, ns, fora exterioar variaz ca mrime n timpul contraciei (ca n cazul ntinderii unui resort elastic), contracia este neizotonic. Prin stimulare cu un impuls electric unic, muchiul se contract, genernd o secus (zvcnire) unic. Stimulat repetitiv, cu o frecven convenabil, muchiul genereaz o contracie prelungit, numit tetanus. Pentru un muchi, fora generat ntr-o contracie (att n secus ct i n tetanus) depinde de distana dintre extremitile sale (cu alte cuvinte, depinde de lungimea la un moment dat a sarcomerelor sale) i este maxim pentru o anumit lungime iniial a muchiului. Dac muchiul este ntins peste aceast lungime i obligat apoi s se contracte sau, dimpotriv, este pus n stare de contracie plecnd de la o lungime mai mic dect cea optim, fora sa de contracie descrete. Explicaia acestei dependene a forei de contracie de lungimea iniial a muchiului este legat de numrul de puni transversale miozinice implicate n contracie. Dac muchiul este ntins, astfel nct sarcomerele sale s depeasc n lungime 3,6 micrometri, seturile de filamente groase i subiri nu se mai ntreptrund, punile transversale miozinice nu mai pot interaciona cu moleculele de actin iar fora de contracie devine egal cu zero. Se obine fora maxim atunci cnd toate punile transversale particip la interaciunea actomiozinic. Caracterul liniar al poriunii descendente a curbei este un argument pentru teoria conform creia fora de contracie este direct proporional cu procentul punilor transversale implicate la un moment dat n contracie. Analiza poriunii ascendente a curbei indic faptul c numrul punilor transversale angajate n generarea forei este n scdere, pe msur ce apare o ntreptrundere a filamentelor subiri aparinnd aceluiai sarcomer, fapt ce reprezint un obstacol n interaciunea actomiozinic. Viteza de scurtare a unui muchi depinde de fora sa de contracie la un moment dat (mai exact, viteza de scurtare depinde de fora exterioar ce trebuie nvins; se tie c obiectele

uoare sunt ridicate cu rapiditate i c, pe msura ce ele sunt mai grele, viteza de ridicare scade). Reprezentarea grafic a dependenei vitezei de scurtare de fora de contracie este o hiperbol a crei ecuaie a fost stabilit de A.V. Hill: (F + a)(v + b) = (Fmax + a)b F -fora de contracie, v -viteza de contracie, a i b -constante Fmax -fora maxim pe care o poate dezvolta un muchi pentru o anumit lungime iniial la care se declaneaz contracia (Fmax este, deci, o constant pentru muchiul investigat, ca, de altfel, ntregul termen drept al egalitii).

EFECTE BIOLOGICE ALE UNOR FACTORI MECANICI

1. Biofizica mecanorecepiei
Interaciunile mecanice ale organismului cu mediul ambiant se realizeaz, de regul, la nivelul pielii i al mucoaselor, unde exist receptori tactili capabili s reacioneze la atingere, apsare, ntindere sau torsiune. Unii receptori tactili sunt formai numai din terminaii nervoase libere (nfurate n jurul unui folicul pilos, acolo unde este cazul). Ali receptori au o structur mai complex, printre ei numrndu-se corpusculii Meissner i corpusculii Pacini. Corpusculii Meissner sunt formai dintr-o terminaie nervoas ncolcit ca un ghem. Numeroase fibrile conjunctive ultrasubiri se inser pe terminaia nervoas, ancornd-o la diferite structuri din vecintate, astfel nct la atingerea pielii s se exercite traciuni asupra fibrei nervoase, determinnd-o s genereze poteniale electrice de aciune (impulsuri nervoase). Corpusculul Pacini are forma unui elipsoid de rotaie i este alctuit din lamele membranare (suprapuse ca foile unui bulb de ceapa), ntre care se afl un lichid vscos. n centrul corpusculului ptrunde o terminaie nervoas nemielinizat a unei fibre senzitive. La apsare, corpusculul se alungete, subiindu-se pe direcia exercitrii forei, ca urmare a deplasrii lichidului spre extremitile elipsoidului. Dac apsarea se face lent, lichidul are timpul necesar s se deplaseze printre lamele, iar terminaia nervoas nu este afectat n nici un fel. Corpusculul este, astfel, scutit s rspund la presiunile esuturilor din jur, precum i la presiunile exterioare constante sau care se instaleaz foarte lent. El este sensibil numai la apsri brute, deoarece ele sunt resimtie i de miezul coninnd terminaia nervoas (ntruct lichidul nu are timpul necesar s se rspndeasc printre lamele). La solicitri mecanice exagerat de intense, receptorii transmit semnale interpretate la nivelul scoarei cerebrale drept semnale dureroase (exist, ns, i receptori nociceptivi, specializei numai pentru recepia durerii). Injuriile mecanice foarte grave pot produce, pe lnga durere, diverse leziuni, contuzii, pgi, fracturi etc., efecte care nu fac obiectul cursului de fa.

Tot mecanoreceptori pot fi considerai receptorii din organul lui Corti, capabili s genereze impulsuri nervoase n fibrele nervului auditiv (ca urmare a atingerii de ctre membrana tectoria a cililor celulelor receptoare n urma vibraiei membranei bazilare) sau cei din organul vestibular, n care exist celule cu cili, sensibile la deplasarea lichidului prin cele trei canale semicirculare. Principalii mecanoreceptori cu care este echipat muchiul sunt corpusculii lui Golgi, care transmit date privind tensiunea mecanic din tendoane (msoar fora de contracie a muchiului) i fusurile neuro-musculare, aflate n interiorul muchiului i msurnd gradul de scurtare sau de alungire a muchiului. Corpusculii Golgi sunt formai prin reunirea capetelor tendinoase ale unor fibre musculare ntr-un mnunchi, n interiorul cruia ptrund una sau mai multe terminaii nervoase lipsite de teaca de mielin. Fusurile musculare sunt formate dintr-un grup de cteva fibre musculare subiri (fibre intrafuzale), nconjurate de o teac de natur conjunctiv, fixat prin extremitile sale de fibrele extrafuzale sau de aponevroze. Centrul fusului este dilatat i las s ptrund n interior cteva terminaii nervoase . Mecanoreceptorii musculari sunt proprioreceptori, deoarece transmit date despre propria stare a muchiului i nu despre evenimente ce au loc n mediul extern sau intern.

2. Efecte biologice ale presiunilor hidrostatice mari

Fiind, practic, incompresibile, esuturile resist la presiuni hidrostatice foarte mari (se tie c, n mri i oceane, exist forme de via chiar la adncimi la care presiunea hidrostatic atinge sau depete 1000 de atmosfere). S-a constatat experimental c la presiuni de ordinul sutelor de atmosfere, sistemele biologice sunt afectate ntr-o msur mai mic sau mai mare: diviziunea celulara este ncetinit sau blocat, fora i viteza contraciei musculare scad iar excitabilitatea nervoas crete (uneori, pn la autoexcitabilitate).

3. Efecte biologice ale foei de gravitaie

Fora de gravitaie are un efect complex indiscutabil asupra tuturor sistemelor biologice. Sunt cunoscute fenomenele de geotropism negativ (care permit tulpinii plantelor s creasc n sus) i de geotropism pozitiv (care command orientarea n jos a rdcinilor). Ramurile de ordinul 1 ale arborilor cresc oblic fa de vertical, manifestnd plageotropism, n timp ce ramurile de ordinul 2 i 3 sunt ageotrope. Mecanismul geotropismului este bazat pe dependena de forele gravitaionale a eliberrii unui hormon de cretere numit auxin. n navele cosmice i n staiile orbitale, fora gravitaionala (centripet) este anulat de fora centrifug imprimat de micarea de revoluie i se instaleaz starea de imponderabilitate, creia cosmonautul trebuie s i se adapteze pe numeroase planuri, n special n ceea ce privete circulaia sangvin dar i funcia aparatului locomotor (pentru evitarea unor fenomene de atrofie muscular i de decalcifiere osoas)

4. Efecte biologice ale acceleraiilor mari

Exist situaii n care omul este supus unor acceleraii mari (aa cum se ntmpl n aviaie i n cosmonautic). n asemenea mprejurri apare riscul redistribuirii sngelui n patul vascular, cu consecine cum sunt pierderea temporar a vederii din cauza

hipotensiunii cerebrale ("valul negru") sau, dimpotriv, aa numitul "val rou" la acumularea sngelui n extremitatea cefalic. La acestea se adaug stri de ru de natur vestibular.

NOIUNI DE TERMODINAMIC BIOLOGIC

1. Definiia termodinamicii
Termodinamica este acea parte a fizicii care studiaz transformrile reciproce ale diferitelor forme de energie, precum i schimburile de energie n sistemele termodinamice.

2. Definiia sistemelor termodinamice

Sistemul termodinamic este un ansamblu finit de corpuri aflate n interaciune energetic att ntre ele ct i cu mediul exterior. n fapt, orice sistem material poate fi tratat ca un sistem termodinamic, dac predominante n comportarea lui sau interesante pentru cercettor sunt aspectele legate de schimburile i transformrile energetice. Este, ns, necesar ca sistemul s conin un numr suficient de mare de particule (molecule) pentru a putea fi considerat sistem termodinamic.

3. Clasificarea sistemelor termodinamice

Aa cum s-a artat n cursul introductiv, sistemele materiale interacioneaz cu mediul exterior prin interaciuni substaniale (schimb de substan), energetice (schimb de energie) i informaionale (schimb de informaie). Lund n considerare primele dou tipuri de interaciuni, sistemele termodinamice se pot clasifica astfel : -sisteme izolate (nu schimb cu mediul nici substan i nici energie) -sisteme neizolate nchise (schimb cu mediul numai energie, nu i substan) -sisteme neizolate deschise (schimb cu mediul att energie ct i substan)

4. Starea sistemelor termodinamice

Starea unui sistem termodinamic este definit de totalitatea valorilor parametrilor si de stare. Prin parametru de stare se nelege o mrime fizic msurabil. Parametrii de stare ai unui sistem sunt fie intensivi (au valori definite n orice punct al sistemului i nu depind de dimensiunile sistemului, de exemplu, presiunea, concentraia, temperatura absolut), fie extensivi (depind de dimensiunile sistemului i de cantitatea de substan existent n sistem, de exemplu, volumul, masa, numrul de moli). Cnd parametrii de stare sunt constani n timp, sistemul se afl fie n stare de echilibru termodinamic, fie n stare staionara. Un sistem aflat n stare de echilibru termodinamic se caracterizeaz prin : -schimburile de substana i de energie, att ntre componenii sistemului ct i cu mediul exterior, nceteaz;

-parametrii intensivi de stare sunt constani n spaiu, iar entropia atinge o valoare maxim; -producerea ulterioar de entropie nceteaz. Starea staionar se caracterizeaz prin trsturi diametral opuse: -schimburile de substan i energie ntre componenii sistemului precum i cu mediul extern nu nceteaz; -parametrii intensivi de stare nu sunt constani n spaiu; -producerea de entropie este minim fr, ns, a fi egal cu zero.

5. Procese termodinamice
Procesele termodinamice sunt treceri ale sistemului termodinamic de la o stare (staionar sau de echilibru termodinamic) la alt stare (staionar sau de echilibru termodinamic), prin modificarea de-a lungul timpului a parametrilor de stare. Procesele termodinamice se mpart n procese reversibile i procese ireversibile. Procesele reversibile se desfoar cvasistatic, adic infinit de lent, astfel nct n orice moment sistemul este n echilibru termodinamic cu mediul exterior. Dac se schimb semnul de variaie a parametrilor de stare, sistemul evolueaz n sens invers (ctre starea iniial), pe exact acelai drum pe care evoluase ctre starea final. Procesele ireversibile sunt, de regul, necvasistatice; revenirea unui sistem la starea iniial (n cazul n care aceast revenire este posibil din punct de vedere practic) se face pe alt drum i cu preul unei intervenii active din partea mediului exterior (care nu rmne nemodificat dup aceasta). Procesele termodinamice de mic amploare pot fi asimilate cu simple fluctuaii sau perturbaii mici ale sistemului termodinamic. Cnd apare o perturbaie, n sistem ia natere un flux care tinde s anuleze perturbaia. Procesele care se desfoar ntr-un astfel de regim sunt denumite procese "aproape de echilibru". Cnd, ns, amplitudinea unei perturbaii depete o valoare critic, fluctuaiile nu mai pot fi oprite. n aceste cazuri, sistemul termodinamic evolueaz ctre un nou regim, calitativ diferit de starea de echilibru sau staionar iniiale; este vorba de aa numitul "regim departe de echilibru", unde nu mai sunt valabile ecuaiile fenomenologice lineare; are loc un salt calitativ ctre o nou stare de echilibru termodinamic (sau ctre o nou stare staionar).

6. Fluxuri termodinamice i fore termodinamice

ntr-un sistem termodinamic care nu se afl n stare de echilibru termodinamic au loc deplasri de substan i de energie. Fluxurile termodinamice exprim cantitativ aceste deplasri, raportndu-le la unitatea de arie i la unitatea de timp. Astfel, fluxul de substan Js se exprim prin masa (kg) sau cantitatea (moli) de substan care traverseaz o arie de un metru patrat (normal fa de aceast arie) ntr-o secund (kg/m2s sau moli/m2s). Fluxul de electricitate Je se masoar n coulombi pe metru patrat secund (C/m2s), fluxul de cldura JQ se msoar n J/m2s etc. Fluxul exprim o micare; dac aceast micare este ndreptat spre interiorul unui anumit domeniu (de exemplu, o celul), fluxul poart numele de influx. Dac substana sau energia prsete acel domeniu, este vorba de un eflux. Aa cum, n mecanic, micarea corpurilor are drept cauz existena forelor, i n termodinamic fluxurile termodinamice se datoreaz unor fore termodinamice.

Forele termodinamice (X) sunt gradieni ai parametrilor intensivi de stare. Fluxul de substan Js are drept cauz gradientul de concentraie Xc=c/x sau de presiune Xp=p/x; fluxul de electricitate se datoreaz gradientului de potenial electric XV=V/x; fluxul de cldura se produce ca urmare a existenei unui gradient de temperatur XT=T/x etc. Se pot scrie, deci, relaii de tipul Js = f(Xc), Je = f(XV), JQ = f(XT) etc. care exprim faptul c fluxurile sunt funcii ale forelor termodinamice (depind de acestea). Deoarece dependena este liniar, ea se mai poate scrie Ji = LiXi. Dac ntr-un sistem exist mai multe fore termodinamice, vor exista simultan mai multe fluxuri, fiecare flux depinznd de toate forele termodinamice : Ji = f(X1,X2,X3,...) sau J1 = L11X1 + L12X2 + L13X3 + ... J2 = L21X1 + L22X2 + L23X3 + ... J3 = L31X1 + L32X2 + L33X3 + ... . Mrimile notate cu L poart numele de coeficieni fenomenologici. Onsager a stabilit relaia de simetrie a coeficienilor: Lij = Lji (adica L12 = L21, L13 = L31 etc.)

7. Sursa de entropie
Fluxurile sunt asociate unor procese termodinamice ireversibile, care produc inevitabil dezordine (entropie S) n sistem. Entropia produs n unitate de timp poart numele de surs de entropie (S/t). Sursa de entropie se poate calcula utiliznd relaia : S/t = J1X1 + J2X2 + J3X3 + .... = i JiXi Relaiile de mai sus permit verificri ale corectitudinii msurrii fluxurilor i forelor termodinamice ce acioneaza ntr-un sistem (inclusiv n sistemele biologice), precum i estimarea sensului de evoluie a sistemului la un moment dat. Concluzionnd cele afirmate mai sus cu privire la sistemele biologice, rezult c sistemele biologice sunt sisteme termodinamice deschise, n care acioneaza fluxuri termodinamice provocate de fore termodinamice. Sistemele biologice se afl n stare staionar att timp ct parametrii de stare nu se schimb i gzduiesc procese termodinamice ireversibile atunci cnd parametrii variaz n timp. Att n stare staionar ct i n timpul proceselor termodinamice, n sistemul biologic au loc fluxuri i se produce entropie (cu meniunea c producerea de entropie este minima n starea staionar).

8. Principiul I al termodinamicii
De mult vreme a devenit evident (pentru unii..) c pentru obinerea unei energii este necesar consumarea alteia. Cu alte cuvinte, nu se poate crea energie din nimic. n cele din urm s-a admis eecul ncercrii de a construi un perpetuum mobile de spea I. n 1840, H. Hess demonstreaz: cldura absorbit sau eliberat ntr-o reacie chimic nu depinde de etapele intermediare prin care decurge reacia, ci numai de starea iniial i

final a reactanilor. ntre 1842 i 1850, J. R. Mayer, J. Joule, H. Helmholtz stabilesc echivalena dintre lucrul mecanic L i cldura Q i calculeaz echivalentul mecanic al caloriei. Principiul I al termodinamicii se mai numete i principiul conservrii energiei (sau, mai pe scurt, principiul energiei). n cazul unui sistem termodinamic izolat, el se enun astfel : Energia intern a unui sistem izolat este constant (U = 0). n cazul unui sistem neizolat, principiul I al termodinamicii devine : Variaia energiei interne a unui sistem termodinamic neizolat este egal cu suma dintre cldura i lucrul (mecanic, chimic, osmotic, electric etc.) schimbate de sistem cu mediul exterior. U = Q - i Wi. Prin energie intern U a unui sistem se nelege suma energiilor de orice fel (cinetice i poteniale) ce aparin particulelor din sistem (prin particule se neleg moleculele, atomii i constituenii atomici). Cldura Q reprezint o form de variaie a energiei interne a unui sistem, manifestat prin micri dezordonate de agitaie termic ale particulelor din sistem. Lucrul W este o form de variaie a energiei interne, manifestat prin micri ordonate ale unui mare numr de particule din sistem (particule care se deplaseaz n aceeai direcie). Exist lucru mecanic, lucru osmotic, lucru chimic, lucru electric etc. Deoarece exist o gam variat de procese ce au loc n condiii izobare (printre care i procesele biologice), a fost definit o nou funcie, entalpia H, care nlocuiete energia interna U. ntr-un proces izobar, cldura Q primit de un sistem duce la creterea energiei interne a sistemului (U) dar i la dilatarea termic a acestuia (pV), astfel nct se poate scrie : Q = U + pV sau Q = (U + pV) sau, dac se definete entalpia H = U + p V, rezult: Q =H Aplicaii ale principiului I al termodinamicii n biologie Aspecte energetice n contracia muscular Un muchi care se contract mpotriva unei fore F, scurtndu-se cu lungimea x, efectueaz un lucru mecanic egal cu Fx ; n funcie de viteza de scurtare v, muchiul dispune de o putere mecanica P = Fv . Cunoscnd relaia lui Hill dintre fora de contracie i viteza de scurtare, se poate deduce cu uurin c, la rndul ei, puterea P depinde de viteza de scurtare v. Puterea este nul att pentru viteza maxim de scurtare (creia i corespunde o fora de contracie egal cu zero) ct i pentru viteza de scurtare zero (creia i corespunde fora maxim de contracie izometric). Muchiul este nu numai un generator de fora i de lucru mecanic, dar i un important generator de cldur. Cldura este degajat (n rate diferite) att n repaus ct i n contracie. Se poate vorbi de urmtoarele tipuri de cldura disipat de muchi: -cldura de repaus; -cldura de contracie, alctuit din cldura de meninere a forei de contracie i din cldura de scurtare, aceasta din urm fiind direct proporional cu gradul scurtrii muchiului;

-cldura de relaxare, care se nregistreaz imediat dup ncetarea stimulrii muchiului; -cldura de restabilire, care este expresia reaciilor chimice de regenerare a ATP i care dureaz multe minute dup intrarea muchiului n stare de repaus (motiv pentru care nu apare n graficul din figur). Cldura degajat de muchi rezult din reacii chimice, din intinderea unor structuri elastice aflate n muchi, precum i din frecrile interne ce au loc n muchi. Muchiul, ca orice sistem termodinamic, trebuie s respecte principiul I al termodinamicii, astfel nct variaia energiei sale interne s fie egal cu suma dintre cldura degajat Q i lucrul mecanic Fx efectuat (ntr-un interval dat de timp). Variaia energiei interne a muchiului nu poate avea loc dect ca rezultat al unor reacii chimice (hidroliza ATP, reacia creatin-chinazei, reacia miochinazei etc.) deoarece muchiul este un sistem care funcioneaz la presiune, la temperatur i la volum constante. Variaia energiei chimice ntr-un interval dat de timp se calculeaz, pentru fiecare reacie i, nmulind energia molar a reaciei respective (Umol, luat din tabele) cu gradul de avansare al reaciei i (numrul de moli de reactani consumai n acel interval de timp) (U = iUmol i = Q - Fx). A fost efectuat un mare numr de cercetri experimentale pentru verificarea acestei egaliti dar concluzia fiecreia dintre ele a fost c muchiul produce mai mult cldura i mai mult lucru mecanic dect variaia energiei libere provenit din reaciile chimice i din procesele fizice cunoscute ca desfurndu-se n muchi. Evident, aceasta nu nseamn c muchiul ncalc prevederile principiului I al termodinamicii; mult mai probabil este c n muchi au loc i alte procese fizice i chimice, nc necunoscute. Circuitul energiei n biosfer Totalitatea formelor de via existente pe planeta noastr alctuiete biosfera i i datoreaz existena (ntr-o proporie covritoare) energiei solare sosite pe calea radiaiilor electromagnetice. Radiaiile solare din spectrul vizibil sunt captate de cloroplastele aflate n celulele plantelor verzi, organite ce sunt capabile s combine molecule simple ca H2O i CO2 pentru a construi, n procesul fotosintezei, molecule complexe, ndeosebi polizaharide (C6H12O6)n, i s degaje oxigen. Produii rezultai din fotosintez sunt recombinai n mitocondriile celulelor, att cele vegetale ct i cele ale vieuitoarelor din regnul animal, iar energia degajat este folosit pentru sinteza ATP (moleculele de CO2 fiind eliminate i puse la dispoziia plantelor). Moleculele de ATP vor fi scindate enzimatic, iar energia astfel eliberat va fi folosit pentru producerea de lucru (mecanic, chimic, osmotic, electric, radiant etc.).

9. Principiul II al termodinamicii
Principiul II al termodinamicii poart numele de principiul creterii entropiei (sau, pe scurt, principiul entropiei). Conform acestui principiu, procesele ireversibile care se desfoar spontan n sisteme termodinamice izolate au acel sens care duce la creterea entropiei. Entropia S este o mrime care msoar gradul de dezordine al unui sistem termodinamic. Conform relaiei lui Boltzmann S = k ln N, k -constanta lui Boltzmann

N -probabilitatea termodinamic a strii sistemului (adic numrul de aranjamente n care pot fi dispuse particulele sistemului pentru a se obine, din punct de vedere macroscopic, una i aceeai stare) . Entropia unui cristal perfect este zero, deoarece exist un singur mod de aranjare a particulelor care s corespund perfeciunii acestui cristal (N = 1; ln N = 0; S = 0). Pe msur ce sistemul devine mai dezordonat, ndeprtndu-se de aceast perfeciune, numrul N crete i, evident, entropia sistemului crete proporional cu ln N. Dac ntr-un sistem izolat adiabatic au loc fluxuri termodinamice, acestea, datorit caracterului lor ireversibil, produc dezordine n sistem, facnd ca entropia s creasc ( S = Sirev ). Dac sistemul este neizolat adiabatic, variaia entropiei sistemului are loc nu numai datorit ireversibilitii fluxurilor (Sirev) ci i ca urmare a schimburilor de cldur cu mediul exterior (Sext = Q/T). Energia intern a unui sistem termodinamic poate fi utilizat n vederea producerii de lucru, dar cu anumite restricii legate i ele de ireversibilitatea proceselor termodinamice. Astfel, numai o parte a energiei interne U a unui sistem poate fi transformat n lucru util n timpul unui proces, restul degradndu-se n cldur (Q=ST). Aceast parte poart numele de energie liber F iar relaia care leag energia liber de energia intern a unui sistem este : U = F + ST Dac este vorba de un proces izobar, este mai convenabil s se foloseasc entalpia liber G, n locul energiei libere, i a entalpiei H, n locul energiei interne : H = G + ST Din cele de mai sus rezult c sensul de evoluie spontan a unui sistem termodinamic izolat este acela care duce la micorarea energie libere (sau a entalpiei libere). Aplicabilitatea principiului II al termodinamicii la organismele vii Principiul II are un caracter probabilistic (spre deosebire de primul principiu), n sensul c, teoretic vorbind, sistemele termodinamice ar putea s-l ncalce (dar probabilitatea de a o face este infim). Cu toate acestea, se pare, la prima vedere, c organismele vii ncalc sistematic principiul II al termodinamicii, deoarece ele, cel puin n prima parte a vieii lor, se organizeaz spontan, mrindu-i gradul de ordine, iar entropia lor n loc s creasc, scade. O asemenea concluzie este posibil numai dac se ignor faptul c sistemele biologice sunt sisteme deschise iar procesele biologice sunt procese ireversibile. Aa cum s-a artat anterior, principiul II postuleaz creterea entropiei ntr-un sistem izolat n care procesele se desfoar de la sine. Este adevrat c procesele biologice se desfoar de la sine dar este, n acelai timp, evident c sistemul biologic nu este izolat. n realitate, organismele vii preiau din mediul nconjurtor (sub form de hran) molecule complexe cu entropie sczut i elimin n exterior moleculele simple ce rezult din arderea primelor. Se poate spune c organismul preia din mediul nconjurtor entropie negativ (sau negentropie) i elimina n mediu entropie pozitiv. Pe de alt parte, procesele biologice sunt ireversibile; formularea local a principiului II al termodinamicii afirm c desfurarea unui proces ireversibil ntr-un domeniu orict de mic al unui sistem termodinamic este nsoit ntotdeauna de producere de entropie n chiar acel loc.

ntr-adevar, n organism, la nivel celular au loc procese termodinamice generatoare de entropie, dar tot acolo, pe seama acestor procese, se desfoar n paralel procese productoare de ordine (care duc la scderea entropiei). Procesul generator de entropie este numit proces cuplant iar procesele care se desfoar pe seama lui i se soldeaz cu scdere de entropie se numesc procese cuplate. Variaia total a entropiei la nivel de celul este, totui, pozitiv, deoarece producerea de entropie n procesele cuplante depete (n valoare absolut) scderea de entropie asociat proceselor cuplate. n organism, procesele cuplante sunt reprezentate de arderile metabolice (care alctuiesc catabolismul), n vreme ce procesele cuplate constau n biosinteze ale macromoleculelor (anabolism) i n construcii de structuri biologice cu mare grad de ordine. n timp ce produii de ardere (CO2, H2O, uree etc) sunt eliminai prin respiraie, excreie etc., produii biosintezelor rmn n organism, devenind pri constituente ale acestuia.

BIOFIZICA MOLECULAR A APEI I A SOLUIILOR APOASE

1. Noiuni de fizic molecular a lichidelor
Starea de agregare lichid Starea de agregare lichid a substanei este posibil numai pentru anumite valori ale presiunii i temperaturii absolute. Unei anumite perechi de valori ale presiunii i temperaturii absolute i corespunde punctul triplu, caracterizat de coexistena celor trei stri de agregare. Altei perechi de valori ale presiunii i temperaturii absolute i corespunde punctul critic, caracterizat de dispariia oricrei deosebiri ntre starea gazoas i cea lichid a substanei. n punctul critic, gazul se transform continuu n lichid iar suprafaa de separare dintre gaz i lichid dispare. Fore i legturi intermoleculare n lichide Principalele fore i legturi intermoleculare n lichide sunt cele de tip Van der Waals. Ele se bazeaz pe calitatea moleculelor de a fi dipoli electrici. Molecula are proprietile unui dipol electric, dac centrul sarcinilor sale pozitive nu coincide cu cel al sarcinilor negative. Pentru intervale de timp extrem de mici, orice molecul este un dipol electric instantaneu, deoarece electronii moleculei se afl, n timpul micrii lor, n cele mai variate poziii n raport cu nucleele, fiind foarte puin probabil, n acele momente, coincidena spaial dintre centrul sarcinilor sale pozitive i centrul sarcinilor negative. Pentru intervale de timp suficient de mari, prin mediere n timp, aceast coinciden spaial se poate realiza n cazul unor molecule cu o structur simetric (de exemplu He, Ne, CH4 etc.). Astfel de molecule sunt lipsite de moment dipolar permanent, putnd, ns, deveni dipoli electrici indui, n prezena unor cmpuri electrice exterioare care le deformeaz norul electronic. Exist i molecule care se comport ca dipoli electrici permaneni chiar n absena cmpurilor electrice. Printre acestea se numr apa, lipidele, proteinele etc.

Comportndu-se ca dipoli electrici (instantanei, indui sau permaneni), moleculele lichidului se atrag electrostatic prin polii ncrcai cu electricitate de semn contrar i se resping prin polii de acelai semn, realiznd, astfel, interaciuni de tip Van der Waals de tip dipol instantaneu - dipol instantaneu, dipol instantaneu - dipol permanent i dipol permanent - dipol permanent. Caracteristic acestor legturi este faptul c energia lor variaz invers proporional cu puterea a asea a distanei dintre moleculele ce interacioneaz. ntre moleculele lichidului pot interveni i legturi mai puternice, atunci cnd norii electronici ai moleculelor se suprapun parial, aa cum se petrec lucrurile n cazul legturilor coordinative. n funcie de natura legturilor intermoleculare, lichidele se mpart n lichide simple i lichide complexe. Lichidele simple sunt formate din molecule care interacioneaz numai prin fore de tip Van der Waals (de exemplu, alcoolul sau heliul lichid). Lichidele complexe conin molecule ntre care exist i legturi diferite de cele de tip Van der Waals (n special legturi coordinative). La temperaturile i presiunile care fac posibil starea de agregare lichid, energia legturilor intermoleculare este de acelai ordin de mrime cu energia de agitaie termic a moleculelor. n aceste condiii, asocierea moleculelor n structuri caracteristice strii de agregare solid se limiteaz la grupuri de cteva sute de molecule, grupuri pe care agitaia termic le destram imediat ce diametrul lor depete cteva raze moleculare. Un loc aparte n rndul lichidelor l ocup cristalele lichide, n care legturile intermoleculare realizeaz structuri ordonate unidimensionale i chiar bidimensionale, extinse pe distane mari. Modele moleculare ale strii lichide Este, n principiu, posibil ca proprietile unui lichid (la nivel macroscopic) s fie deduse, plecnd de la proprietile fizice ale moleculelor sale. Acest lucru se dovedete, ns, a fi extrem de dificil n cazul lichidelor reale. O posibil soluie a problemei const n imaginarea unor modele moleculare simplificatoare, care s permit studiul teoretic al strii de agregare lichid (aa cum modelul gazului ideal a adus clarificri importante n studiul gazelor reale). n cele ce urmeaz, vor fi prezentate numai cteva dintre modelele propuse n literatura de specialitate. Modelele cinetico-moleculare consider lichidele drept gaze foarte comprimate i ncearc s descrie comportarea lichidelor, utiliznd concepte i legi imprumutate din teoria cinetico-moleculare a gazelor. Aceste modele sunt aplicabile numai lichidelor formate din molecule monoatomice. Modelele cristaline descriu lichidele ca structuri cristaline avnd anumite particulariti. Potrivit acestor modele, lichidul este format din "celule" identice, coninnd fiecare cte o molecul ce se agit termic, independent n raport cu alte molecule. Exist, ns, i celule neocupate, numite goluri. Molecula poate prsi o celul (ocupat de ea) pentru a ptrunde ntr-o celul neocupat (n acest timp, golul "se deplaseaz" n sens invers). Un loc aparte printre modelele moleculare ale lichidelor l ocupa modelul vacanelor fluidizate, elaborat de Eyring, care propune existena n lichid a unor goluri numite vacane fluidizate. n concepia autorului, vacanele se mic n lichid n acelai mod n care se mic moleculele unui gaz ideal (adic prin agitaie termic), numrul de vacane n

unitatea de volum de lichid fiind egal cu numrul de molecule n unitatea de volum a unui gaz perfect, n aceleai condiii de presiune i temperatura. Toate aceste modele sunt aplicabile, ntr-o msur mai mare sau mai mic, numai lichidelor simple. Deoarece apa nu este un lichid simplu, pentru explicarea structurii i comportamentului ei au fost elaborate modele speciale. Structura i proprietile cristalelor lichide Printre lichidele complexe exist o categorie special, care manifest proprieti comune att strii lichide ct i celei solide de agregare. Aceste lichide poart numele de cristale lichide. Mielina extras din esutul nervos este un astfel de cristal lichid, aa cum sunt i numeroase polipeptide sintetice, spunuri, esteri ai colesterolului etc. Unele cristale lichide au fost denumite termotrope, deoarece ele manifest numai ntr-un anumit interval de temperatur proprieti caracteristice unei faze intermediare ntre faza solid i cea lichid, numit faz mezomorf sau mezofaz. Alte cristale lichide sunt soluii care devin mezofaze numai la anumite concentraii, ntrun interval mai larg de temperatur. O mezofaz se poate realiza i imprimnd moleculelor unui lichid o ordine poziional pe una sau pe dou dimensiuni. Cristalele lichide se mpart n cristale lichide nematice, cristale lichide smectice i cristale lichide colesterice. n cristalele lichide nematice, moleculele sunt orientate dup o anumit direcie (nematos nseamna n grecete fir) i se organizeaz n entiti structurale avnd forma unor bastonae. n cristale lichide smectice (smecma nseamn spun), moleculele se dispun dup dou direcii, realiznd straturi suprapuse, moleculele fiind perpendiculare pe planul stratului. n cristalele lichide colesterice, moleculele sunt dispuse tot n straturi, dar sunt paralele ntre ele i cu planul stratului. O proprietate important a cristalului lichid este aceea de a manifesta activitate optic, adic de a roti planul luminii polarizate. Activitatea optic a cristalelor lichide se intensific mult n prezena unui cmp electric exterior, datorit orientrii n cmp a moleculelor, care se comporta ca dipoli electrici. Cristalele lichide aflate n cmp electric absorb puternic lumina polarizat i apar ntunecate (negre), dac direcia cmpului electric este perpendicular pe planul de polarizare al luminii. Cristalele lichide sunt utilizate la realizarea sistemelor de afiare a datelor (ceasornice electronice, monitoare, televizoare etc.), deoarece permit transformarea semnalelor electrice n semnale optice. Cristalele lichide sunt folosite i pentru msurarea temperaturii, deoarece au proprieti termo-optice. Fenomene ce se petrec la nivelul interfeelor Interfaa este o suprafa ce separ dou corpuri (n cazul nostru, dou lichide transparente nemiscibile) numite faze, aflate n contact. Moleculele aflate la nivelul interfeei sunt atrase cu forte diferite de ctre moleculele din cele dou faze. Ca urmare, interfaa tinde s se curbeze, astfel nct s dobndeasc o arie minim n condiiile date. n tendina ei de a avea o arie minim, interfaa se afl ntr-o stare de tensiune mecanic numit tensiune interfacial, fora de tensiune fiind orientat tangenial la interfa. Aceste proprieti mecanice ale interfeelor se manifest mai evident n cazul n care este vorba de suprafee de separare ntre lichide i gaze, imprejurare n care tensiunea interfacial poart numele de tensiune superficial.

Fora de tensiune a unei astfel de suprafee, raportat la conturul suprafeei, poart numele de coeficient de tensiune superficial. O consecin a existenei forelor de tensiune superficial este ascensiunea (sau coborrea) lichidelor n tuburi subiri (capilare) ca urmare a jocului dintre forele de coeziune (fore de atracie ntre moleculele lichidului) i cele de adeziune (fore de atracie ntre moleculele lichidului i cele care intr n componena pereilor tubului). Capilaritatea joac un rol important n numeroase fenomene biologice, ncepnd cu ascensiunea sevei n plante i terminnd cu accidentele vasculare de tipul emboliilor gazoase.

2. Structura molecular a apei i a soluiilor apoase

Structura i proprietile fizice ale moleculei de ap Molecula de ap este alctuit dintr-un atom de oxigen i doi atomi de hidrogen. Atomul de oxigen este legat de cei doi atomi de hidrogen prin legturi covalente, distana dintre nucleul de oxigen i nucleul de hidrogen fiind 0,99 , iar unghiul dintre direciile celor dou legturi covalente este de 105. ntr-o molecul de ap exista zece electroni, distribuii dup cum urmeaz: -doi electroni se afl n permanen n vecintatea nucleului de oxigen; -dou perechi de electroni se "rotesc" de-a lungul unei orbite ce nconjoar nucleul de oxigen i cte unul dintre nucleii de hidrogen, orbite situate n planul moleculei de apa; aceti electroni asigur realizarea legturilor covalente n molecula de ap; -dou perechi de electroni se "rotesc" pe dou orbite situate ntr-un plan perpendicular pe planul moleculei de ap, nucleul de oxigen aflndu-se n focarul ambelor orbite; aceti electroni nu particip la legturile covalente din molecula de ap i se numesc electroni neparticipani . Electronii moleculei de ap petrec cea mai mare parte din timp n vecintatea nucleului de oxigen, astfel nct densitatea sarcinilor negative este mai mare n aceast regiune dect n zona ocupat de nucleele de hidrogen. Din aceast cauz, centrul sarcinilor pozitive nu coincide n spaiu cu cel al sarcinilor negative iar molecula de ap se comport ca un dipol electric permanent, avnd, deci, un pol pozitiv i unul negativ. Tridimensional, molecula de ap realizeaz un tetraedru . n aceste condiii, ntre moleculele de ap intervin legaturi Van der Waals de tipul dipol permanent - dipol permanent, moleculele atrgndu-se prin extremitile ncrcate cu sarcini electrice de semn opus. Ca urmare a acestei fore de atracie, moleculele se apropie suficient de mult pentru a permite electronilor neparticipani ai unei molecule s se roteasc i n jurul unui nucleu de hidrogen aparinnd unei molecule vecine. Acest fapt duce la micorarea n continuare a distanei dintre molecule i la creterea forei de atracie dintre ele. ntre molecule ia natere, astfel, o legtura coordinativa de hidrogen, distana dintre nucleul oxigenului dintr-o molecul de ap i nucleul unui hidrogen din cealalt molecul fiind de 1,76 . Legtura de hidrogen se deseneaz n scheme printr-o linie ntrerupt .O molecul de ap poate lega prin intermediul legturilor de hidrogen, patru molecule de ap. Legturile de hidrogen stau la baza formrii structurilor supramoleculare din ghea i din apa lichid i permit explicarea proprietilor neobinuite ale apei (densitatea apei mai mare dect cea a gheii, clduri latente de vaporizare i de topire foarte mari, coeficient de tensiune superficial mare etc.)

Importana pentru via a acestor proprieti este uria: valorile mari ale capacitii calorice i conductibilitii termice ale apei fac ca eliberarea masiv de caldur n efortul muscular intens s nu produc nclzirea semnificativ a organismului iar valoarea mare a cldurii latente de vaporizare permite rcirea corpului prin transpiraie i evaporare pulmonar. Modele moleculare ale apei La temperaturi mai mici de 0C, agitaia termic a moleculelor de ap scade suficient de mult pentru a permite formarea unui numr maxim posibil de legturi de hidrogen ntre molecule. Acest numr maxim se realizeaz prin dispunerea moleculelor de ap n colul unor prisme hexagonale, fiecare molecul legnd, astfel, alte patru molecule de apa. Exist i alte tipuri de reele cristaline ale gheii (de exemplu, cubice) care sunt caracteristice gheii la anumite valori ale temperaturii i presiunii; reeaua hexagonal este caracteristic gheii la presiune i temperatur normale . Pentru descrierea structurii moleculare a apei n stare lichid au fost propuse mai multe modele moleculare, cteva dintre ele fiind menionate n continuare. -modelul reelei cristaline parial distruse se bazeaz pe modelul reelei cristaline a gheii; la temperaturi mai mari de 0C, agitaia termic a moleculelor de ap determin ruperea unor legturi de hidrogen i apariia unor molecule libere, precum i a unor fragmente de reea de dimensiunea ctorva nanometri. Grupurile moleculare microcristaline i moleculele libere se pot deplasa unele fa de celelalte, oferind lichidului posibilitatea de a curge. O parte a moleculelor libere ptrund n interiorul prismelor hexagonale rmase nc intacte i, din aceast cauz, densitatea apei este mai mare dect densitatea gheii (n ghea prismele sunt goale). Acest proces continu pn la temperatura de 4C, cnd densitatea apei atinge valoarea maxim. La temperaturi superioare celei de 4C, efectele dilatrii termice devin observabile i densitatea apei ncepe s scad. -modelul grmezilor temporare de molecule (flickering clusters) se bazeaz pe ipoteza cooperativitii legturilor de hidrogen, n sensul c formarea unei legturi de hidrogen ntre dou molecule de ap faciliteaz formarea altor legturi i ataarea altor molecule de ap, avnd ca rezultat apariia unor grmezi de cteva sute de molecule; desprinderea unei molecule dintr-o asemenea grmad (prin ruperea legturii de hidrogen) faciliteaz desprinderea altor molecule, pn la dispariia grmezii. n acest fel, n apa lichid se formeaz i se distrug nencetat i cu mare rapiditate, grmezi de molecule, astfel nct n orice moment o mare parte din ap este organizat n reea cristalin (fapt confirmat de analizele efectuate prin difracia razelor X) -modelul clatrailor se bazeaz pe ipoteza c, n anumite condiii, o molecul de ap se poate comporta ca o molecul hidrofob, devenind centrul unui dodecadron cu fee pentagonale, n ale crui coluri se afl molecule de ap. Un astfel de dodecadron este unitatea fundamental a unui clatrat -modelul legturilor flexibile introduce ipoteza conform creia rearanjarea moleculelor de apa se face mai curnd prin ndoirea legturilor de hidrogen dect prin ruperea lor. Modificarea structurii moleculare a apei n prezenta solviilor Structura moleculara a apei se modific n urma dizolvrii unor substane, deoarece ntre moleculele de apa i moleculele (sau ionii) substanei dizolvate apar interaciuni de diferite tipuri. Aa cum se va arta n continuare, structura moleculara a apei sufer modificri

chiar dac moleculele de solvit i cele de ap nu interacioneaz; n acest din urm caz, modificrile au drept cauz chiar incapacitatea moleculelor de a interaciona n vreun fel. Electroliii (dar chiar i un mic procent din moleculele de ap) formeaz, prin disociere, ioni negativi i ioni pozitivi, care atrag moleculele de ap din jurul lor. Moleculele de ap se comport ca dipoli electrici permaneni i se orienteaz astfel nct extremitile ncrcate cu electricitate de semn opus sarcinii ionului s priveasc spre acesta. Apa din jurul ionilor capt o structur molecular diferita de cea a restului apei, structur caracterizat de orientarea radial a moleculelor, devenind ap de hidratare. Proprietile apei de hidratare difer de cele ale apei obinuite; printre altele, densitatea ei crete, datorit fenomenului de electrostricie. Se modific, deasemenea, temperaturile de solidificare i de fierbere, constanta dielectric etc. Moleculele care au moment electric dipolar permanent, precum i moleculele capabile sa realizeze legturi de hidrogen, se integreaz cu uurin n structura moleculara a apei. Moleculele incapabile de a efectua legturi de hidrogen i lipsite de moment dipolar nu pot interaciona cu moleculele de ap dect prin interaciuni Van der Waals slabe de tip dipol permanent - dipol instantaneu. Asemenea molecule sunt denumite molecule hidrofobe (de exemplu, moleculele gazelor nobile, CH4 etc.) Conform principiului II al termodinamicii, un sistem tinde spre nivelul cel mai mic al energiei sale libere ceea ce, n cazul dizolvrii, presupune formarea unui numr maxim de legturi ntre componenii sistemului. Deoarece moleculele hidrofobe nu pot realiza legturi cu moleculele apei, singura modalitate de scdere a energiei libere este mrirea numrului de legturi de hidrogen ntre moleculele de ap din jurul moleculei hidrofobe. Prin urmare, moleculele de ap se vor organiza n structuri cristaline de forma unor poliedre cu 12 fee pentagonale (dodecadroane) sau cu 16 fee (hexacaidecadroane) numite clatrai, in centrul crora se afl cte o molecula hidrofob . n consecin, o parte din apa capt o structura cristalin asemntoare gheii (ice-like) dar nu identic cu a gheii, devenind ap de clatrare. Toate aceste consideraii sunt valabile n situatia n care, din diferite motive, moleculele hidrofobe sunt mpiedicate s se mite liber prin ap. n caz contrar, devine posibil ca micorarea energiei libere a soluiei s se realizeze prin apropierea moleculelor hidrofobe una de alta i apariia consecutiv a unei legturi de tip special ntre ele, numit legatur hidrofob. Legturile hidrofobe exista numai atta vreme ct moleculele hidrofobe se afl n mediu apos, deoarece formarea lor se datoreaz nu att atraciei dintre ele ct mai ales respingerii lor de ctre moleculele de ap (n sensul termodinamic al cuvntului, adic n legatur cu faptul c introducerea de molecule hidrofobe n apa duce la creterea energiei libere i nu la scderea ei). Legturile hidrofobe joac un rol deosebit de important n realizarea structurii spaiale a macromoleculelor dizolvate n ap. Macromoleculele, ndeosebi proteinele i acizii nucleici, au proprietatea de a structura puternic apa din jur, deoarece ele dispun att de grupri ionizabile (de exemplu, COOH i NH2), ct i de grupri hidrofobe (de exemplu, grupri metilice CH3). Pe de alt parte, o macromolecul aflat n mediu apos va adopta o astfel de conformaie spaial nct gruprile hidrofobe s se apropie unele de altele, pentru a realiza legturi hidrofobe, iar gruprile ionizate s formeze legturi prin atracie electrostatic.

Rmn, ns, numeroase grupri hidrofobe sau ionizate care, din considerente sterice, nu se pot angaja n legturi intermoleculare. Aceste grupri sunt silite s modifice structura apei din vecintate, prin formare de ap de hidratare n jurul ionilor i ap de clatrare n jurul gruprilor hidrofobe. O anumit cantitate de ap este, astfel, legat de macromolecul; dac gruprile hidrofile i hidrofobe ale macromoleculei se succed n spaiu periodic, la distane convenabile, apare posibilitatea ca macromolecula s poat structura masiv apa din jur (mai mult dect suma efectelor simple ale gruprilor). O astfel de ap se numete ap legat. Structura moleculara a apei n sistemele biologice O bun parte a apei care intr n alctuirea sistemelor biologice (n mod deosebit n structura celulelor) manifest proprieti fizice neobinuite (se evapor extrem de greu, nu nghea nici la temperaturi cu mult sub 0C, nu dizolv cristaloizii, nu particip la osmoz etc.). Acest tip de ap legat se explic prin prezena n interiorul celulei a unui mare numr de specii de molecule, macromolecule i ioni care restructureaz apa din jur, genernd ap de hidratare, ap de clatrare i ap legat. Cercetrile efectuate demonstreaz ca apa intracelular (sau cel puin o mare parte a ei) are un grad superior de ordonare, semnnd mai mult cu gheaa dect cu apa lichid. Deoarece apa legat nu poate dizolva substanele nutritive, medicamentele, gazele i nu permite desfurarea normal a reaciilor chimice, este important cunoaterea compartimentalizrii apei celulare (adic ponderea procentual a apei legate, a apei parial legate i a apei libere n celul). n acest scop se utilizeaz un mare numr de tehnici fizice care se adreseaz proprietilor specifice ale apei. Unele dintre aceste tehnici afecteaz brutal preparatul biologic, dovedindu-se distructive (printre ele se numr tehnicile de congelare a preparatelor biologice n scopul determinrii punctului de nghe precum i tehnicile de deshidratare a esuturilor) Sunt preferate, desigur, tehnicile nedistructive, care interacioneaza suficient de slab cu apa celular nct s nu lezeze semnificativ celula vie. Printre tehnicile nedistructive de estimare a gradului de structurare al apei se numr : -spectrofotometria n infrarou, care se bazeaz pe faptul c spectrul de absorbie n infrarou al apei difer mult de cel al gheii; -calorimetria, bazat pe faptul c apa lichid are o cldura specific mult mai mare dect apa solid; -determinarea permitivittii electrice n regim de microunde, bazat pe faptul c moleculele de ap sunt dipoli i se rotesc n ritmul alternanelor curentului electric alternativ cu att mai uor cu ct sunt mai puin legate unele de altele sau de structuri neapoase; la frecvenele nalte ale microundelor, curentul electric este condus numai de moleculele de ap din preparatul biologic, singurii dipoli electrici cu inerie suficient de mic pentru a se putea roti ntr-un asemenea ritm; -rezonana magnetic nucleara (RMN), prin care se pot obine informaii despre starea apei, msurnd valoarea induciei magnetice la care au loc tranziiile cuantice ale momentelor magnetice aparinnd nucleelor de hidrogen; aceste tranziii au loc la valori diferite ale induciei magnetice, n funcie de starea legat sau liber a moleculelor de ap. Din pcate, rezultatele obinute prin metodele enumerate mai sus nu sunt identice, deoarece fiecare metod constat comportamentul liber sau legat al apei n raport cu

proprietatea fizic investigat. Toate rezultatele, ns, susin concluzia conform creia apa celular are un grad superior de ordonare n comparaie cu apa obinuit. Ordonarea apei intracelulare joac un rol important n desfurarea proceselor celulare (excitaie, contracie, diviziune, secreie etc.). Pentru a afla n ce const acest rol se pot utiliza dou ci. Prima dintre ele este urmrirea prin tehnici nedistructive a modificrilor structurii apei, ce apar n timpul desfurrii proceselor celulare. Cealalt cale const n urmrirea modului n care se desfoar procesele celulare n situaia n care apa este nlocuit, parial sau total, cu ap grea. Apa grea are formula D2O i se deosebete de apa uoar (H2O) prin faptul c locul protonilor H este luat de deuteroni D (nuclee de deuteriu). Legtura de hidrogen va fi nlocuit cu legtura de deuteriu care este mai puternic, astfel nct deuterizarea apei duce la creterea gradului de ordonare a apei. Deuterizarea celulelor se soldeaz cu blocarea transportului activ prin membrane, dispariia contractilitii, inhibarea diviziunii celulare etc. Un fenomen interesant (care nu poate fi explicat dect prin prisma rolului jucat de structura molecular a apei n procesele celulare) este efectul anestezic al gazelor nobile care, fiind hidrofobe, ar putea crea ap de clatrare ce ar produce obstrucia canalelor ionice. Efectele deuterizrii se realizeaz i prin aa numitele efecte chimice izotopice, legate de schimbarea proprietilor chimice ale moleculei n care un atom sau mai muli atomi au fost nlocuii cu izotopi ai lor.

3. Noiuni de fizic a sistemelor disperse

Sistemul dispers este un amestec de dou sau mai multe substane. Substana care se afla n cantitatea cea mai mare se numete substana dispersant, celelalte fiind substane dispersate. Din punct de vedere al dimensiunii particulelor dispersate, sistemele disperse pot fi soluii adevrate (diametrul particulei este mai mic de 1 nm (10-9m)), soluii coloidale (particulele au diametrul cuprins ntre 1 nanometru i 100 de nanometri) i suspensii (particule cu diametru mai mare de 100 nm). Din punct de vedere al strii de agregare a componenilor, sistemele disperse sunt gazoase dac substana dispersant este un gaz (cu variantele gaz n gaz, lichid n gaz i solid n gaz), lichide, dac mediul dispersant este lichid (gaz n lichid, lichid n lichid i solid n lichid) i solide, dac mediul dispersant este solid (gaz n solid, lichid n solid i solid n solid). Din punct de vedere al existenei sau al inexistenei unor suprafee de separare ntre componenii soluiei, sistemele disperse pot fi omogene (cnd lipsesc asemenea interfee iar proprietile sunt identice n orice punct al sistemului), neomogene (cnd lipsesc interfeele dar proprietile difer de la un punct la altul) i heterogene (cnd exist suprafee de separare ntre componeni, care capt, n aceste condiii, denumirea de faze). Sistemele omogene i neomogene sunt monofazice (formeaz o singur faz), n vreme ce sistemele heterogene pot fi bifazice, trifazice sau multifazice (n funcie de numrul fazelor existente n sistem). n sfrit, din punct de vedere al afinitii dintre componeni, sistemele disperse pot fi liofile sau liofobe, dup cum exist sau nu exist afinitate ntre solvii i solvent. n continuare vor fi analizate numai soluiile adevrate. Din punct de vedere cantitativ, soluiile se caracterizeaz printr-un parametru intensiv de stare numit concentraie. Conform sistemului internaional de mrimi i unitti,

concentraia unei soluii se msoar prin numrul de moli de solvit pe unitatea de volum a soluiei (mol/m3). Energia liber a unei soluii ne-electrolitice, numit i energie chimic, este egal cu i i , unde i este numrul de moli din fiecare specie molecular aflat n soluie, iar i este potenialul chimic al respectivei specii. Potenialul chimic al unei specii moleculare se exprim prin relaia = o + RT ln c/co , unde o este potenialul chimic al unui solvit aflat ntr-o concentraie egal cu unitatea, la 25C ( o se mai numeste potenial standard; valoarea lui pentru diferite specii moleculare se afl din tabele), c este concentraia reala a solvitului iar co este concentraia unitate. Dac solvitul este un electrolit disociat, la energia chimic a ionilor si se adaug energia electric a ionilor, care se exprim prin zFE , unde este numrul de echivalent-gram de ioni de un anumit tip, z este valena acestor ioni, F este numrul lui Faraday (egal cu 96.400 C/eq) iar E este potenialul electric al soluiei. n aceste condiii, eqg de ioni vor contribui la energia liber a soluiei cu potenialul electrochimic W = ( + zFE).

FENOMENE DE TRANSPORT N SOLUII

1. Difuzia simpl
Difuzia este un fenomen de transport de substana din regiunile n care soluia este mai concentrat (este vorba de concentraia pe care o atinge acea substan n soluie), ctre zonele n care concentraia este mai mic, fenomen datorat exclusiv agitaiei termice a moleculelor i avnd ca rezultat final, egalizarea concentraiilor. n termeni termodinamici, difuzia este un flux de substan J produs de o for termodinamica Xc , numit gradient de concentraie c / x. ntre J i Xc exist relaia J = DXc , unde D este un coeficient fenomenologic, numit coeficient de difuzie al substanei respective prin mediul prin care se deplaseaz. Difuzia se desfoara n conformitate cu legile difuziei, stabilite de Fick. Conform primei legi a difuziei, cantitatea de substan care difuzeaz n unitatea de timp printr-o suprafaa este direct proporionala cu aria A a acelei suprafee i cu gradientul de concentraie c / x, printr-un factor de proporionalitate D, numit coeficient de difuzie: / t = DA c / x Dup cum se vede, deoarece J = / t , aceast relaie este identic cu relaia J= DXc . Gradientul de concentraie c / x exprim variaia concentraiei c a soluiei de-a lungul unei distane x i, dac variaia este liniar, este egal cu raportul dintre diferena de concentraie c dintre dou puncte (c = c2 c1) i distana x dintre aceste puncte. Concentraia soluiei n punctul spre care se ndreapt solvitul este c2 i este mai mic dect

c1, astfel nct c < 0 (aa se explic necesitatea introducerii semnului minus n relaiile matematice prezentate mai sus). Reprezentarea grafic a variaiei concentraiei cu distana ofer o imagine a gradientului de concentraie, care sugereaz o pant de-a lungul creia "coboar" mai repede sau mai ncet solvitul. Coeficientul de difuzie D al unui solvit, printr-un mediu de vscozitate este, conform relaiei lui Einstein, D = kT6r, unde k este constanta lui Boltzmann, T este temperatura absolut iar r este raza particulelor solvitului, particulele fiind considerate sferice. Conform legii a doua a lui Fick, variaia n timp a concentraiei ntr-o regiune a soluiei este proporional cu variaia n spaiu a gradientului de concentraie, printr-un factor de proporionalitate numit coeficient de difuzie (dc / dt = D d2c / dc2)

2. Difuzia prin membrane permeabile

n cazul n care o membran (permeabil pentru solvit) separ compartimente coninnd soluii de concentraii diferite, gradientul de concentraie se manifest aproape n totalitate numai n grosimea membranei, deoarece viteza de deplasare a moleculelor de solvit prin membran este mult mai mic dect prin soluie. Prima lege a difuziei se scrie, n acest caz: / t = DA (c2 c1) = (D) A c D - coeficientul de difuzie al sovitului prin membran - grosimea membranei. n general, solubilitatea solvitului n solvent difer de cea din membran, raportul lor fiind i purtnd numele de coeficient de partiie. Presupunnd c solvitul este de ori mai solubil n membran dect n solvent, concentraia solvitului n membran va fi tot de ori mai mare dect cea din soluie. n noua situaie descris, legea difuziei se scrie: / t = (D) A (c2c1) = (D) c = PA c unde P = D este coeficientul de permeabilitate al membranei pentru solvit. Coeficientul de difuzie D se msoar n m2/s iar coeficientul de permeabilitate P, n m/s. n funcie de particularitile difuziei prin membrane se poate vorbi de : -membrane egal permeabile pentru toi componenii soluiei; -membrane inegal permeabile, avnd permeabiliti diferite pentru diferiii componenti ai soluiei; -membrane selectiv permeabile, care permit trecerea unor componeni dar nu a altora; -membrane semipermeabile, care permit trecerea solventului dar nu i a solviilor; -membrane ireciproc permeabile, care permit trecerea solvitului ntr-un sens dar nu i n cellalt sens.

3. Osmoza
Osmoza este fenomenul de difuzie a solventului printr-o membran semipermeabil care separ soluii de concentraii diferite. Aparent paradoxal, solventul difuzeaz dinspre soluia mai diluat ctre soluia mai concentrat; dac s-ar putea vorbi de concentraie a solventului ntr-o soluie, situaia ar deveni fireasc, solventul difuznd din zona n care este mai concentrat, ctre zonele n care este mai diluat, aa cum prevd legile difuziei.

Presiunea mecanic necesar pentru a impiedica osmoza poart numele de presiune osmotic (). Presiunea osmotic se datoreaz, exclusiv, micrilor de agitaie termic a moleculelor de solvit. Presiunea osmotica la o temperatur dat este direct proporionala cu concentraia molal c : T = kT c kT - constant. Pentru o concentraie dat, presiunea osmotic depinde direct proporional de temperatura absolut: c = kc T kc - alt constant, care se exprim n N/m2K. Aceste dou relaii sunt denumite i legi ale presiunii osmotice. Reunind cele dou legi, se obine: =kTc k - o nou constant, a crei valoare este identic cu cea a constantei gazelor perfecte R, adic 8,31 J/molK. Deoarece concentraia c este egal cu / V, unde este numrul de moli de solvit iar V este volumul solventului, rezult: = R T / V sau V=RT Aceasta este legea Van't Hoff, a crei asemnare cu legea gazelor perfecte este evident. n cazul soluiilor de electrolii al cror indice de disociere este i, legea devine: V=iRT i = 1 + (n1) , -raportul dintre numrul de molecule disociate i numrul total de molecule dizolvate n-numrul de ioni furnizat de o molecul. Deoarece presiunea osmotic depinde numai de numrul de particule (molecule sau ioni) n unitatea de volum i nu de natura acestor particule, concentraia unei soluii care conine mai multe specii de molecule i ioni se poate exprima cu ajutorul unei uniti speciale numit osmol / litru de solvent. Un osmol este cantitatea de substan care, dizolvat n solvent, se disperseaz ntr-un numr de particule osmotic active egal cu numrul lui Avogadro (NA = 6,023.1023 particule / mol). Deplasndu-se n mod ordonat i unidirecional prin membrana semipermeabil, solventul efectueaz un lucru osmotic: W = RT ln c1 / c2 - numrul de moli de solvent care traverseaz membrana, c1 - concentraia molal iniiala a soluiei c2- concentraia final a soluiei (dup ce n ea au ptruns cei moli de solvent) . Transportul de ap printr-o membran se poate exprima prin fluxul de ap Jap , care reprezint numrul de moli de ap ce traverseaz un metru patrat de membran ntr-o secund : Jap = Pap (p ) Pap - coeficientul hidrodinamic de permeabilitate al membranei (depinznd de grosimea membranei i de mobilitatea apei prin membran),

p - diferena dintre presiunile efective ale lichidului de o parte i de cealalt parte a membranei - diferena dintre presiunile osmotice ale soluiilor aflate de o parte i de cealalt parte a membranei. Deoarece = RTc iar = RT c, relaia se scrie: Jap = Pap ( p RT c) c - diferena dintre concentraiile osmolale ale soluiilor aflate de o parte i de cealalt parte a membranei. Aceasta relaie este valabil n cazul n care membrana este perfect semipermeabil (adic este total impermeabil pentru toate speciile de solvii). Dac membrana nu este total impermeabil pentru un solvit oarecare (adic nu este perfect semipermeabil n raport cu acest solvit), se utilizeaz un coeficient de semipermeabilitate , care exprim raportul dintre fluxul osmotic real prin acea membran i fluxul osmotic care ar fi avut loc printr-o membran perfect semipermeabil, n aceleai condiii de temperatur i de concentraie ale soluiei. Pentru o membran perfect semipermeabil, = 1 iar pentru una deloc semipermeabil (total permeabil pentru solvitul n cauz), = 0. Dac n soluiile separate de membran se afla i specii de solvii, membrana va avea pentru fiecare specie i un coeficient de semipermeabilitate i. Diferenele de concentraie de o parte i de cealalt parte a membranei sunt, pentru fiecare specie de solvit, ci. Relaia devine: Japa = Papa ( p RT i ci ) Dac diferena presiunilor efective este mai mare dect diferena presiunilor osmotice (p > ), atunci transportul de ap are loc prin ultrafiltrare; n caz contrar, transportul se face prin osmoz. Membranele, n general, i membranele biologice, n special, nu sunt perfect semipermeabile, permind trecerea cristaloizilor (adic a substanelor care, prin dizolvare, dau natere la soluii adevrate) dar nu i a coloizilor. n acest sens, membranele pot fi utilizate pentru separarea cristaloizilor de coloizi, fenomen numit dializ i ntlnit, de exemplu, la nivelul rinichiului. Pe aceast proprietate a membranelor se bazeaz i funcionarea rinichiului artificial.

4. Msurarea presiunii osmotice

Pentru msurarea presiunii osmotice a soluiilor au fost imaginate cteva metode. Una dintre aceste metode utilizeaz osmometre, prevzute cu o membran semipermeabil care separ soluia cercetat de solventul pur; solventul ptrunde n compartimentul ce conine soluia, pn ce presiunea hidrostatic a soluiei devine egal cu presiunea osmotic. O alt metod este metoda crioscopic, prin care se determin diferena T dintre temperatura de nghe (congelare) a soluiei i cea a solventului pur, diferen care este direct proporionala cu concentraia osmolal a soluiei : T = kcrC kcr - constanta crioscopic, numeric egal cu valoarea cu care scade temperatura de nghe a unei soluii, avnd concentraia de un osmol la litru de solvent, fa de temperatura de nghe a solventului pur. Combinnd aceast relaie cu prima lege a presiunii osmotice i mprindu-le, se obine:

 = kT C T = kcrC , / T = kT / kcr i, deci : = T kT / kcr n cazul apei, o soluie cu concentraia de un osmol nghea la 1,86 C, kcr = 1,86.103 m3K/mol iar kT este 22,4.102 Nm/mol, astfel nct result c: = 12.105 (N/m2K) . T (K) sau = 12 T atmosfere Un procedeu similar este metoda ebulioscopic, n care se msoar diferena dintre temperatura de fierbere a soluiei i cea a solventului pur, diferen care depinde direct proporional de concentraia osmolal, printr-o constant ebulioscopic (keb). Modalitatea de calcul a valorii presiunii osmotice este aceeai cu cea utilizat n metoda crioscopic (desigur, n locul lui kcr se introduce keb). Presiunea osmotic a unei soluii ce urmeaz a fi injectat unui pacient se poate aprecia printr-o metoda biologic, ce urmrete modul n care se comport hematiile dac sunt introduse n soluia investigat. Dac hematiile se umfl i se sparg (hemoliza), aceasta nseamn ca presiunea osmotic a soluiei este mai mic dect cea a plasmei sangvine, adic soluia este hipo-osmotic sau hipotonic. Dac, dimpotriv, hematiile se zbrcesc, micorndu-si volumul, soluia este hiperosmotic sau hipertonic. Dac forma i dimensiunile hematiilor rmn neschimbate, soluia este isotonic sau izo-osmotic i poate fi injectat. Rolul jucat de osmoz n unele procese biologice Fenomenele de osmoz asigur schimburile de ap ntre celule i mediul extracelular i, mpreun cu fenomenele de ultrafiltrare, asigur schimbul de ap (mpreun cu unele substane dizolvate) ntre compartimentul vascular i cel interstiial. Plasma sangvin nghea la 0,56C i are, la aceast temperatur, o presiune osmotic = 12 . 0,56 = 6,72 atmosfere. La temperatura de 37 C, presiunea osmotic a plasmei crete la 7,6 atm i este generat de micromoleculele, de ionii i de macromoleculele dizolvate : pl = micromolecule + ioni + macromolecule Presiunea osmotic generat de macromoleculele din plasm poart numele de presiune coloid-osmotic sau presiune oncotic i reprezint numai 0,5% din presiunea osmotic a plasmei. Exprimat n mm coloan de mercur, presiunea coloid-osmotic este egal cu 28 mm col Hg. Cu toate c este att de mic, presiunea coloid-osmotic joac un rol important n schimburile de ap la nivelul capilarelor, deoarece endoteliul capilar se comport ca o membran semipermeabil numai n raport cu proteinele din plasm, crora le interzice traversarea, n timp ce apa, mpreun cu ionii i cu micromoleculele dizolvate, pot trece cu uurin prin pereii capilarelor. La captul arterial al capilarului, diferena dintre presiunile efective intravascular i extravascular (p) este de 32 mm Hg, scznd la captul venos la 12 mm Hg. Diferena de presiune osmotic () ntre lichidul vascular i cel interstiial este constant pe toat lungimea capilarului i egal cu 28 mm Hg.

La captul arterial, unde p > , va avea loc ultrafiltrarea apei, mpreun cu moleculele i ionii dizolvai, ctre spaiul extravascular; la captul venos al capilarului, unde p < , va avea loc rentoarcerea n compartimentul vascular a apei, mpreun cu produii de catabolism, prin fenomenul de osmoz. n capsula lui Bowmann (din rinichi), presiunea efectiv a urinei primare este de 5 mm Hg, n timp ce n capilarul sangvin ea este de 75 mm Hg. Rezult ca p =75 5 = 70 mm Hg i, deoarece este de 28 mm Hg, la nivelul capsulei va avea loc un fenomen de ultrafiltrare sub o presiune de 70 28 = 42 mm Hg.

5. Fenomene de transport prin membrana celular

Structura membranei celulare Membrana celular este un ansamblu de structuri aflat la periferia celulei i avnd ca principale funcii transportul moleculelor i ionilor (dinspre mediul extracelular ctre celul i invers) precum i recepia informaiilor aduse de stimuli de diferite naturi (mecanici, electrici, electromagnetici, chimici, termici, imunologici etc.). Membrana celular este format dintr-un bistrat lipidic, ntrerupt din loc n loc de macromolecule proteice i glicoproteice. n componena bistratului lipidic intr fosfolipide (fosfatidilserina, fosfatidilcolina, fosfatidilinozitol), glicolipide i colesterol. Toate aceste molecule sunt amfifile, avnd o extremitate hidrofil i una hidrofob. Introduse n ap, ele se organizeaz spontan n structuri n care "cozile" lor hidrofobe sunt ferite de contactul cu apa. Altfel spus, ntre extremitile hidrofobe ale moleculelor lipidice iau natere legturi hidrofobe. Exist cteva modaliti de realizare a unor asemenea structuri, sub forma de micele, micele inversate i sub forma de bistraturi. Mediul intracelular favorizeaz formarea veziculelor membranare (aa cum se ntmpl n fenomenele de endocitoz i exocitoz, implicate n secreie i n transmiterea sinaptic) i a membranelor plane (cum este membrana celular). Modelul mozaicului fluid proteolipidic, elaborat de Nicolson i Singer n 1972; el este cvasi-unanim acceptat i astzi. La temperatura la care se desfoar procesele vitale, membrana celulara este fluid, n sensul c moleculele lipidice i cele proteice se afl n continu micare de flexie, translaie i rotaie. Moleculele lipidice se rotesc i se indoaie cu mare rapiditate, se deplaseaz prin translaie prin jumtatea de bistrat n care se afl, schimbnd locul cu vecinele lor, i basculeaz dintr-un monostrat lipidic n cellalt. Micrile moleculelor ce alctuiesc membrana sunt de tip Brownian, avnd drept cauz propria lor agitaie termic. Moleculele proteice pot sta ntr-o singur jumtate de bistrat (de exemplu, proteinele cu rol antigenic i imunologic, receptorii membranari etc.) sau pot traversa ntregul bistrat (proteine transportoare implicate n transportul pasiv i activ). Lanurile proteice pot traversa bistratul o singur data (cum este glicoforina din membrana hematiilor) sau de mai multe ori (rodopsina traverseaz de apte ori membrana discurilor din bastonaele celulelor retiniene). Membrana se sprijin pe un citoschelet alctuit din proteine fibrilare (aa cum sunt, n eritrocite, spectrina, anchirina i actina fibrilar).

Modaliti de transport membranar Substanele pot intra n celul sau pot iei din ea fie sub forma unor conglomerate multimoleculare (macrotransport prin fagocitoz si pinocitoz), fie sub form de molecule sau ioni individuali (microtransport pasiv i activ). n procesul de fagocitoz, celula nglobeaz particule de substan solid, nvluindu-le, n prealabil, cu prelungiri citoplasmatice, numite pseudopode, prelungiri care fuzioneaz, apoi, n spatele particulelor fagocitate. Lichidele, dispersate n picturi fine, precum i macromoleculele, sunt introduse n celul sau scoase din aceasta prin pinocitoz dup ce, n prealabil, au fost nvelite ntr-un bistrat lipidic, devenind vezicule. Fenomenele de exocitoz au loc frecvent n terminaiile nervoase i n celulele secretorii, iar cele de transcitoz au loc ndeosebi n celulele endoteliului capilar, facilitnd trecerea proteinelor plasmatice din snge ctre spaiul extravascular. n toate cazurile, membrana veziculelor fuzioneaz cu membrana celular i expulzeaz coninutul lichid al veziculei, ca efect al forelor de tensiune superficial manifestate de bistratul lipidic, n tendina sa de a avea o suprafaa minim. Traversarea membranei de ctre moleculele i ioni poart numele de microtransport. Moleculele i ionii traverseaz pasiv membrana, atunci cnd nu apeleaz la energia celular metabolic ci utilizeaz exclusiv energia micarilor lor de agitaie termic precum i cea derivat din atracia sau respingerea electrostatic. Rezult c, n transportul pasiv, moleculele i ionii se deplaseaz n sensul gradientului potenialului lor electrochimic, supunndu-se ntocmai legilor fizicii. n transportul activ, moleculele i ionii se deplaseaz n sens opus gradientului potenialului lor electrochimic, adic din compartimentul n care concentraia lor este mai mic, spre regiunile unde concentraia lor este mai mare sau spre regiuni care, din punct de vedere electrostatic, ar trebui s i resping. Transportul activ se realizeaz pe seama unor reacii chimice exoenergetice (cum sunt reaciile de hidroliz a ATP i GTP) sau exploatnd o parte din energia electronilor transportai de-a lungul lanurilor de oxido-reducere sau o parte din energia fotonilor implicai n funcionarea unor sisteme fotosensibile. Aa cum s-a menionat deja, contribuia unei specii moleculare sau ionice la energia liber a unei soluii este potenialul electrochimic W care, pentru un mol de ioni de un anumit tip, este : W = o + RT ln c + zFE o- potenialul chimic standard al ionului, c- concentraia acestuia n solutie, z- valena ionului, F- numrul lui Faraday E- potenialul electric la care se gsete soluia. Notnd compartimentul intracelular cu "in" i pe cel extracelular cu "ex", valorile potenialului electrochimic al unei anumite specii de ioni vor fi urmtoarele: Win = o + RT ln cin + zFEin Wex = o + RT ln cex + zFEex iar diferena de potenial electrochimic W dintre cele dou compartimente va fi: W = Win Wex = RT ln(cin / cex) + zFE

Dac W > 0, adic dac potenialul electrochimic al ionului este mai mare n celul dect n afara ei, ionii au tendina de a prsi celula i i vor materializa aceast tendin dac membrana se dovedete permeabil faa de ei. Pentru cazul n care W < 0, ionii au tendina de a ptrunde n celul. Transportul pasiv al unei specii de ioni nceteaz n momentul n care potenialele electrochimice ale ionului n celul i n afara ei devin egale (W = 0). n aceste condiii : zFE = RT ln(cin / cex) = RT ln(cex / cin) i, deci : E = (RT / zF) ln(cex / cin) Aceasta este relaia lui Nernst, care permite calcularea diferenei de potenial electric de o parte i de alta a membranei, dac se cunosc concentraiile unei anumite specii ionice (ce i-a atins echilibrul electrochimic) n mediul celular i n mediul extracelular. Spre deosebire de transportul pasiv, n transportul activ o anumit specie molecular sau un anumit ion pot fi introduse n celul, n ciuda faptului c acolo potenialul su electrochimic este mai ridicat, dac ionul utilizeaz energia unei reacii chimice (pompare ionic sau transport activ primar). Acelai ion (sau molecul) poate, ns, ptrunde n celul i pe alt cale i anume, asociindu-se cu un alt ion sau cu o molecul care intr firesc n celul, mpinse de propriul lor poential electrochimic (transport activ secundar). i n acest caz, transportul se face cu cheltuial de energie, deoarece ionul sau molecula la care se ataeaza ionul nostru au un potenial electrochimic sczut n celul, ca urmare a unei activiti prealabile de evacuare prin pompare activ. Difuzia prin dizolvare (difuzie simpl) depinde de coeficientul de partiie ulei-ap al substanei transportate, adic de raportul dintre solubilitatea substanei n ulei (sau n lipidele membranare) i solubilitatea substanei n ap. Pe aceast cale traverseaz membrana gazele precum i substanele liposolubile. Difuzia facilitat a ionilor i a moleculelor presupune utilizarea de ctre acetia a unor molecule transportoare T existente n membran, cu meniunea c energia necesar transportului nu este furnizat de ctre moleculele transportoare ci de nsei moleculele transportate, care trec de la un potenial electrochimic mai mare la unul mai mic. Se accept astzi c molecula transportoare poate avea dou stri conformaionale, T1 i T2, reprezentate schematic (i intuitiv) prin imagini de forma unor cupe cu concavitatea ctre exteriorul celulei (T1) sau ctre interiorul celulei (T2). Exist o multitudine de molecule transportoare, care asigur difuzia facilitat a glucozei, a colinei, a multor tipuri de ioni pozitivi i negativi etc. O asemenea molecul transportoare poate fi i artificial inserat ntr-un bistrat lipidic, aa cum se ntmpl cu antibioticul valinomicina care devine un ionofor (transportor de ioni) pentru K+, permindu-i acestuia s prseasc celula bacterian i s-i provoace, prin aceasta, moartea. Difuzia prin canale presupune existena n membran a unor proteine speciale, ce strbat ntreaga grosime a bistratului lipidic i creaza ci de trecere pentru moleculele (i ionii) substanelor neliposolubile. Filtrul recunoate un anumit tip de ion i l las s treac n vestibul. Senzorul primete informaia din exterior, fie din partea unei molecule receptoare, fie direct de la un semnal electric, i, dac informaia este corespunztoare, command deschiderea porii permind ionului s intre sau s ias din celul, mpins de potenialul su electrochimic. n anumite situaii, accesul ionului este interzis, chiar dac poarta este deschis, datorit interveneiei inactivatorului I.

n membrana celular exist canale pentru ionii de Na+, K+, Ca++, Cl, pentru ap etc. Fiecare tip de canal poate fi blocat n mod specific de anumite toxine, fapt care uureaz studiul experimental al proprietilor lor. Astfel, canalul de Na+ poate fi blocat cu tetrodotoxina sau cu saxitoxina, canalul de K+ cu tetraetilamoniu etc. Unele canale, n mod deosebit cele aflate n membranele postsinaptice, sunt controlate de mesageri chimici de tipul acetilcolinei, acidului gama-aminobutiric etc., fiind cuplate cu receptorii specifici ai acestor mediatori. Alte canale i deschid sau i nchid porile ca rspuns la variaii ale potenialului electric de membran. Exist i canale care, avnd sediul la nivelul jonciunii a dou celule, pun n comunicare nemijlocit citoplasmele acestora. Este posibil inserarea n bistratul lipidic membranar a unor molecule proteice care formeaz canale ce permit trecerea ionilor. Un exemplu n acest sens este molecula de gramicidina (antibiotic izolat de la bacillus brevis). Un studiu comparativ al transportului pasiv prin difuzie facilitat i al transportului prin canale, permite cteva concluzii : 1. Moleculele transportoare au o specificitate mai mare pentru moleculele sau ionii transportai dect canalele, fiind capabile nu numai s disting precis ntre o molecul i alta ci i ntre diferiii izomeri ai unei molecule. Astfel, numai glucoza dextrogira i aminoacizii levogiri pot ptrunde n celul prin difuzie facilitat. 2. Canalele se remarc printr-o foarte mare vitez de lucru. Astfel, un canal permite trecerea a aproximativ zece milioane de ioni pe secund, n vreme ce transportorii pot facilita trecerea a numai o mie de ioni pe secund. Rezult c, atunci cnd sunt necesare variaii brute ale compoziiei i concentraiei ionice (de exemplu, n excitaia celular), canalele sunt cile preferate pentru transportul ionilor implicai. 3. Viteza mai mic de lucru a transportorilor este compensat de numrul lor mult mai mare dect cel al canalelor. 4. Transportorii, aa cum se va arta mai departe, pot participa i la fenomenele de transport secundar. Transportul activ primar se realizeaz cu ajutorul pompelor membranare. Cea mai cunoscut pomp ionic este pompa de Na+ i de K+, present n membranele majoritii celulelor. Aceast pompa extrage trei ioni de Na+ din celul i introduce n celul doi ioni de K+ pentru fiecare molecul de ATP hidrolizat enzimatic. Pompa de Na+ i de K+ este alctuit din patru subuniti proteice (dou i dou ), una dintre subunitile fiind nzestrat cu capacitatea de a scinda ATP. Rezult c pompa de Na+ i de K+ este, de fapt, o enzim, mai precis, o ATP-az sensibil la Na+ i la K+. Aceast enzim poate exista n dou stri conformaionale: E1 i E2. Trecerea de la E1 la E2 se face prin fosforilarea enzimei, iar trecerea invers se face prin defosforilare. Pentru a avea loc fosforilarea enzimei, este necesar ca aceasta s lege n prealabil o molecul de ATP, s o descompun n ADP si Pi i s se debaraseze, apoi, de ADP. Aceste operaii nu pot fi efectuate dect dac n interiorul celulei se afl ioni de sodiu, pe care enzima aflat n forma E1 s-i poat lega. Defosforilarea are loc numai dac n exteriorul celulei exist ioni de potasiu, care s poat fi legai de forma E2 a enzimei. Trebuie remarcat faptul c, n condiii speciale, cnd concentraiile de sodiu extracelular i de potasiu intracelular sunt excesiv de mari iar n celula exist mult ADP i

Pi, sensul de desfurare a evenimentelor (marcat pe aceast schem) se inverseaz iar pompa ncepe s sintetizeze ATP (n general, pompele membranare sunt reversibile). Pe lng pompa descris mai sus, exist numeroase alte pompe; n membrana celulelor mucoasei gastrice exist pompa de H+- K+ iar n membrana celulelor musculare precum i n cea a reticulului sarcoplasmic exist pompe de calciu. Toate aceste pompe sunt ATP-aze sensibile la ionii menionati. Ele pot fi inhibate cu diferite substane ca ouabaina, azide, cianuri etc. n anumite mprejurari, celula fabric pompe menite s elimine anumite substante toxice, droguri sau chiar medicamente. Astfel, n chimioterapia cancerului apare rezistena la medicamentele administrate. Transportul activ secundar Unele molecule sau ioni ptrund ntr-un compartiment (intracelular sau extracelular) mpotriva gradientului potenialului lor electrochimic, deoarece se asociaz cu molecule sau ioni care se deplaseaz normal, conform propriului lor gradient. Astfel, moleculele de glucoz ptrund n celulele mucoasei intestinale (dei concentraia glucozei n aceste celule este mai mare dect n mediul intestinal) deoarece se asociaz cu ionii de sodiu care intr pasiv n celule. Acest fenomen de transport se numete cotransport sau simport i este un fenomen de transport activ, deoarece gradientul de potenial electrochimic al ionilor de sodiu este meninut n permanen la valori mari de ctre pompele de sodiu care, consumnd energia reaciei de hidroliz a ATP, evacueaz sodiul pe msur ce acesta ptrunde n celul (far a evacua, ns, i glucoza intrat odat cu ionii de sodiu). Un alt tip de transport activ secundar este cel de contratransport, numit i antiport. Se tie ca difuzia facilitat a unui ion presupune o modificare conformaionala T1 - T2 a transportorului, n urma creia ionul este introdus n celul (desigur, pentru cazul n care difuzia facilitat lucreaz n acest sens). Pentru a putea s-i ndeplineasc n continuare funcia, transportorul trebuie s revin la conformaia sa iniial, realiznd spontan transformarea T2 - T1. Contratransportul const n ataarea unui alt ion la moleculele de transportor n timpul transformrii T2 - T1 , urmat de evacuarea acestui alt ion din celul (n ciuda faptului c potentialul lui electrochimic este mai mare n mediul extracelular dect n cel intracelular). Un asemenea contratransport are loc n celula muscular, unde intrarea prin difuzie facilitat a ionilor de sodiu este asociat cu eliminarea concomitent a unui numr egal de ioni de calciu. Energia care asigur eliminarea calciului este furnizat de pompele de sodiu care, consumnd ATP, menin un gradient de potenial electrochimic al sodiului suficient de mare pentru a acoperi energetic i ieirea ionilor de calciu. Abordarea termodinamic a fenomenului de transport activ n termeni termodinamici, fluxul de substana J (substan transportat activ) depinde de cel putin dou fore termodinamice i anume, de gradientul de potenial electrochimic X1 = / x i de o alt for termodinamic, numit afinitate A a reaciei chimice de hidroliz a ATP (reprezentnd lucrul maxim pe care l poate da reacia n condiiile date). Se tie c: J = L11X1 + L12X2 unde L11 i L12 sunt coeficieni fenomenologici. n cazul transportului activ se poate scrie : J = L11 x + L12A

NOIUNI DE BIOELECTRICITATE I BIOEXCITABILITATE

1. Noiuni de electrostatic i de electrocinetic
Sarcini electrice, cmp electrostatic, potenial electric i capacitate electric Un atom sau o molecul nceteaz de a mai fi neutre din punct de vedere electric, dac pierd sau ctig electroni. Corpurile din care fac parte astfel de atomi i de molecule dobndesc sarcini electrice pozitive sau negative, ale cror mrimi se msoar n coulombi (C). Sarcinile electrice genereaz n jurul lor un cmp electrostatic, prin intermediul cruia atrag alte sarcini electrice de semn contrar i resping sarcinile cu acelai semn. Forele de interaciune electrostatic depind de mrimea sarcinilor q1 i q2 care interacioneaz, de distana dintre ele r i de permitivitatea mediului : F = q1q2 / 4r2 Cmpul electrostatic generat de o sarcin electric punctiform q are, la distana r de sarcin, intensitatea E: E = q / 4r2 newtoni/coulomb (N/C) Intensitatea cmpului generat ntr-un punct de mai multe sarcini este egal cu suma vectorial a intensitilor cmpurilor fiecrei sarcini n punctul respectiv. Dac ntr-un punct situat la distana r de o sarcin q se plaseaz un corp de prob ncrcat cu sarcina q', acel corp va avea o energie potenial : W = qq' / 4r jouli (J) astfel nct, dac este lsat liber s se mite, se va pune n micare, apropiindu-se sau deprtndu-se de sarcina q i efectund un lucru mecanic. Se spune c n punctul situat la distana r de sarcina q exist un potenial electric V : V = q / 4r voli (V) Spre deosebire de intensitatea cmpului electrostatic, care este o mrime vectorial, potenialul este o mrime scalar, astfel nct potenialul ntr-un punct aflat n vecintatea mai multor sarcini este egal cu suma potenialelor generate n acel punct de fiecare sarcin n parte. Dac dou puncte din spaiu au poteniale diferite, ntre ele exist o tensiune electric U egal cu diferena dintre potenialele lor electrice. Diferena de potenial electric raportat la distana dintre puncte se numete gradient de potenial electric. Un corp are o capacitate C de a acumula sarcini electrice, capacitate ce depinde de dimensiunea i de forma corpului i care este egal cu raportul dintre sarcina electric q acumulat i potenialul V la care a ajuns : C = q / V farazi (F) Condensatorul electric este un dispozitiv format din plci metalice separate de un dielectric. Capacitatea lui electric depinde de suprafaa armturilor S, de distana d dintre ele i de permitivitatea dielectricului (C = S / d). Un condensator de capacitate C, avnd diferena de potenial ntre armturi U, are o energie potenial W = CU2 / 2 jouli.

Capacitatea unui sistem format din condensatoare legate n paralel este egal cu suma capacitilor fiecrui condensator (C = Ci); inversul capacitii unui sistem format din condensatoare legate n serie este egal cu suma inverselor capacitilor fiecrui condensator: 1 / C = (1 / Ci) Curent electric, energia curentului electric i conducia electric Sarcinile electrice se pot deplasa n spaiu de la un punct la altul, att n vid ct i prin materiale bune conductoare de electricitate, dac ntre puncte exist o diferen de potenial electric. Apare, astfel, un curent electric, a crui intensitate I este egal cu sarcina electric q care traverseaz o seciune transversal a conductorului n unitatea de timp: I = q / t amperi (A) Conductorul opune curentului o rezisten R care, conform legii lui Ohm, depinde direct proporional de U i invers proporional de I : R = U / I ohmi () Pentru un conductor n form de fir, avnd aria seciunii transversale s i lungimea l, rezistena R este : R = l / s unde este rezistivitatea materialului conductor i se msoar n m. Inversul rezistenei electrice este conductana electric care se msoar n -1 sau n siemens (S) iar inversul rezistivitii este conductivitatea, care se msoar n -1m-1. Rezistena unui sistem format din rezistori legai n serie este egal cu suma rezistenelor fiecrui rezistor n parte (R = Ri); inversul rezistenei unui sistem format din rezistori legai n paralel este egal cu suma inverselor rezistenelor rezistorilor: 1/R = (1/Ri). O sarcin q care se deplaseaz de la un potenial la altul de-a lungul unei diferene de potenial U efectueaz un lucru mecanic egal cu energia curentului electric : W = qU = UIt = U2t / R = I2Rt jouli (J) Din punctul de vedere al rezistenei pe care o opun curentului electric, corpurile se mpart n conductori, semiconductori i izolatori electrici. Conducia electric poate fi de tip electronic, aa cum se ntmpl n conductorii metalici (se realizeaz prin deplasarea electronilor) sau de tip ionic ca n conductorii ionici (sruri topite, soluii apoase de acizi, sruri i baze), unde cei ce se deplaseaz sunt ionii. n sistemele biologice, conducia electric este predominant de tip ionic. n semiconductori, electronii se deplaseaz dintr-o poziie n alta, lsnd n urma lor goluri, care par a se mica n sens invers. Un electrolit dizolvat n ap sufer un fenomen de disociere electrolitic, n sensul c unele dintre moleculele sale se descompun n ioni pozitivi i ioni negativi. Dac se introduc n soluie electrozi metalici legai la bornele unei baterii electrice, ionii pozitivi se vor deplasa ctre electrodul negativ (numit catod), motiv pentru care se mai numesc i cationi, n timp ce ionii pozitivi (anioni) se deplaseaz ctre electrodul pozitiv numit anod. Ajuni la electrozi, ionii devin atomi neutri i alctuiesc substane chimice care precipit, se depun pe electrozi sau se degaj sub form gazoas. Acest fenomen se numete electroliz i respect legea lui Faraday, conform creia masa m de substan separat la un electrod este direct proporional cu intensitatea curentului electric I, cu echivalentul electrochimic al substanei i cu timpul t: m = (A / zF)It A / zF - echivalentul electrochimic,

A - masa atomic a ionului, z- valena ionului F -numrul lui Faraday. Un caz special de deplasare a sarcinilor n cmp electric este electroforeza, care const n deplasarea particulelor coloidale aflate n soluie ctre unul din electrozi. Particulele coloidale au la suprafaa lor sarcini electrice adsorbite din soluie sau provenite din disocierea unor grupri aparinnd particulei i se nconjoar de un strat de ioni de semn contrar, atrai din soluie, realiznd, astfel, un ansamblu neutru. Sub influena unui cmp electric, o parte din aceti contraioni sunt sustrai din acest ansamblu, care dobndete un potenial electrocinetic i se deplaseaz ctre electrodul de semn contrar.

2. Potenial electric celular de repaus

Diferena de potenial electric ntre citoplasma unei celule aflat n repaus i mediul apos extracelular poart numele de potenial de repaus (PR) i are o valoare de ordinul zecilor de milivoli, interiorul celular fiind negativ n raport cu lichidul extracelular. n cele ce urmeaz, pentru a nelege mai uor modul n care ia natere potenialul de repaus, va fi analizat mecanismul de producere a electricitii n cteva sisteme bicompartimentale simple, ultimul dintre ele fiind destul de asemntor cu sistemul celul vie - lichid extracelular. Primul sistem bicompartimental se realizeaz printr-un montaj constnd din dou compartimente separate unul de cellalt printr-o membran. n compartimentul 1 (din stnga) se toarn o soluie de KCl iar n cel din dreapta (compartimentul 2), ap distilat. Membrana este impermeabil att la ionii de K+, ct i la ionii de Cl-. Se plaseaz cte un electrod metalic n fiecare compartiment iar electrozii sunt conectai la un voltmetru E. Se constat c nu apare nici o diferen de potenial electric ntre cele dou compartimente. Deoarece membrana este, ns, permeabil pentru ap, se mai constat c apa ncepe s se deplaseze ctre compartimentul 1, unde presiunea osmotic este mai mare. Al doilea sistem bicompartimental se realizeaz printr-un montaj constnd, de asemenea, din dou compartimente separate unul de cellalt printr-o membran. n compartimentul 1 (din stnga) se toarn o soluie de KCl iar n cel din dreapta (compartimentul 2), ap distilat. Membrana este permeabil la ionii de K+ dar impermeabil pentru cei de Cl-. Anionii Cl-, fiind nedifuzibili prin membran (PCl- = 0), sunt constrni s rmn n compartimentul 1, dar ionii de K+ ptrund (difuzeaz) n compartimentul 2, pn ce ajung la un echilibru termodinamic, caracterizat de concentraiile [K+]1 i [K+]2, iar ntre cele dou compartimente apare, n conformitate cu legea lui Nernst, o diferen de potenial electric: RT [K + ] E = ln + 1 + 1F [ K ]2 compartimentul 2 fiind pozitiv n raport cu compartimentul 1. De remarcat c diferena de potenial atinge aceast valoare odat cu instalarea echilibrului termodinamic pentru ionii de K+ i se menine indefinit n timp. Trebuie menionat, de asemenea, c apare, i un dezechilibru osmotic, apa tinznd s se deplaseze din compartimentul 2 ctre compartimentul 1, datorit caracterului semipermeabil al membranei n raport cu ionii de Cl-.

S presupunem, ns, c n cele dou compartimente se toarn, de aceast dat, dou soluii de KCl de concentraii diferite (c1 > c2) iar membrana este permeabil pentru ambii ioni. S mai presupunem c membrana are coeficieni diferii de permeabilitate pentru cei doi ioni (i anume, PK+ > PCl-). Ionii de K+ i de Cl- din compartimentul 1 vor traversa membrana i vor ptrunde (aa cum prevede legea difuziei) n compartimentul 2, deoarece acolo concentraia lor este mai mic. Cu toate c ambele specii de ioni sunt mpinse de acelai gradient de concentraie, fluxul de K+ va fi mai mare dect cel de Cl-, pentru c membrana este mai permeabil pentru ionii de potasiu dect pentru cei de clor. Compartimentul 2 va avea, mult vreme, un surplus de sarcini pozitive (aduse de ionii de K+ ce sosesc n numr mai mare dect ionii de Cl-) i va fi pozitiv n raport cu compartimentul 1. ntre cele dou compartimente apare o diferen de potenial electric; aceast diferen de potenial electric va accelera, ntr-o oarecare msur, plecarea ionilor de Cl- din compartimentul 1 (i va reduce sosirea ionilor de K+ n compartimentul 2), ajungndu-se ntr-o stare staionar, n care diferena de potenial electric poate fi numit potenial de difuzie. Valoarea potenialului de difuzie scade cu timpul i dispare n momentul n care soluia de KCl ajunge s aib aceeai concentraie n ambele compartimente. Valoarea potenialului de difuzie la un moment dat se poate afla utilizndu-se ecuaia lui Nernst : P PK RT c1 E = E1 E2 = Cl ln PCl + PK zF c2 unde z este egal cu 1, c1 este concentraia soluiei de KCl turnat n compartimentul 1 iar c2 este concentraia soluiei de KCl turnat n compartimentul 2. Se observ c pentru PK = PCl, diferena de potenial este nul. Situaia ce va fi examinat acum ncepe s semene cu cea existent n sistemul bicompartimental celul vie - lichid extracelular. Este vorba, acum, de dou compartimente, unul coninnd o soluie apoas de KCl i proteinat de K iar cellalt fiind umplut cu ap distilat. Membrana care separ compartimentele este impermeabil numai pentru anionul proteic multivalent A-z. Ionii de K+ i de Cl- difuzeaz fr nici o restricie (se presupune c membrana are coeficieni mari i egali de permeabilitate pentru ambii ioni) n compartimentul 2, pn ce se instaleaz aa numitul echilibru de membran Donnan. Diferena de potenial va fi : E = RT [K + ] RT [Cl ]2 ln + 1 = ln + 1F [ K ]2 1F [Cl ]1

De aici rezult cele trei consecine ale echilibrului Donnan: Prima consecin este: [ K + ]1 [Cl ]2 = =r [ K + ]2 [Cl ]1 A doua consecin este c valoarea lui r este mai mare ca 1.

A treia consecin este: Presiunea osmotic a soluiei care conine ionul nedifuzibil este mai mare dect presiunea osmotic a soluiei din cellalt compartiment, apa tinznd s se deplaseze n primul compartiment (care, n analogia fcut aici, corespunde cu interiorul celulei) (n aceast situaie exist riscul spargerii celulei). Ultimul sistem bicompartimental ce va fi analizat aici descrie o situaie similar cu cea precedent, cu deosebirea c n compartimentul 2 se introduce un nou ion pozitiv, nedifuzibil prin membran (n cazul celulei vii, acest ion este Na+, care nu poate intra n celul, deoarece n timpul strii de repaus celular porile canalelor de Na+ sunt nchise) Se constat c acum numrul de particule de solvit pe unitatea de volum de soluie este acelai n cele dou compartimente i, deci, presiunile osmotice sunt, practic, egale. Sunt respectate i primele dou consecine ale echilibrului Donnan : [ K + ]i [Cl ]e = = 30 > 1 [ K + ]e [Cl ]i Aadar, interiorul unei celule vii aflate n stare repaus (adic nu n stare de excitaie celular) este electric negativ fa de mediul extracelular, diferena de potenial electric purtnd numele de potenial electric celular de repaus. Potenialul electric celular de repaus poate fi msurat direct cu ajutorul microelectrozilor sau indirect, determinnd concentraiile intracelular i extracelular a unei substane fluorescente ionizate (cum este ionul de tiocianat SNC-) i aplicnd, apoi, relaia lui Nernst. Potenialul electric celular de repaus poate fi, de asemenea, calculat teoretic cu ajutorul relatiei lui Goldman : + RT PCi [Ci ]ext + PAi [ Ai ]int E = ln + F PCi [Ci ]int + PCi [Ci ]ext A-i - diferitele specii i de anioni difuzibili, C+i - speciile de cationi difuzibili, PA-i -coeficienii de permeabilitate ai membranei pentru diferitele specii anionice, PC+ipermeabilitile pentru cationi iar simbolurile [C+i]int, [C+i]ext, [A-i]int i [A-i]ext-concentraiile intracelulare (int) i extracelulare (ext) ale cationilor i ale anionilor difuzibili prin membran. Aplicnd relaia lui Goldman la celula muscular i lund n considerare datele numerice precum i un set de valori relative pentru coeficienii de permeabilitate (PK = PCl = 1 i PNa = 0,02, adic permeabilitatea membranei celulare este de 50 de ori mai mic pentru ionii de Na+ dect pentru cei de K+ sau de Cl-), se obine : PK [ K + ]ext + PNa [ Na + ]ext + PCl [Cl ]int RT E = ln F PK [ K + ]int + PNa [ Na + ]int + PCl [Cl ]ext E = (8,3 . 310 / 96500) ln (1 . 5+0,02 . 145 + 1 .5 ) / (1 . 150 + 0,02 . 10 + 1 . 150) E = 0,0267 ln 0,043 = 0,0267 . (-3,147) = - 84 mV. Din cele de mai sus rezult c celula n repaus nu se afl n stare de echilibru termodinamic ci n stare staionar, fluxurile pasive de ioni fiind echilibrate de fluxurile

active. Trebuie menionat i faptul c n bioelectrogeneza de repaus intervin i ali ioni (Ca+ + , Mg++, PO3 - etc.), dar cu o pondere mult mai mic dect ionii monovaleni.

3. Poteniale electrice celulare de aciune

Prin potenial electric celular de aciune (PA) se nelege variaia de scurt durat a potenialului electric celular de repaus, ca form de rspuns celular la variaiile proprietilor mediului (i, uneori, ca activitate celular spontan). Potenialul de aciune const, de regul, ntr-o depolarizare trectoare a membranei celulare, n sensul c interiorul celulei devine mai puin negativ dect n starea de repaus i, deci, diferena de potenial de o parte i de cealalt a membranei scade. Tot de regul, PA sunt declanate de deschiderea porilor unor canale cationice membranare i reprezint efectul electric cumulat al fluxurilor de ioni prin aceste canale (ioni care i materializeaz, astfel, tendinele la care i oblig gradientul lor de potenial electrochimic). Cel mai adesea, ionii implicai n producerea PA sunt ionii de Na, care realizeaz faza ascendent a PA i ionii de K+, rspunztori pentru faza descendent a PA. Participarea altor specii ionice este mult mai redusa din punct de vedere cantitativ. Studiul experimental al PA se face, de obicei, prin excitarea celulelor cu stimuli electrici i nregistrarea (cu ajutorul microelectrozilor introdui n celul) a variaiei potenialului de repaus celular. Se remarc faptul c stimulii depolarizani de mic intensitate provoac o depolarizare de amplitudine redus a membranei i c, pe msur ce intensitatea stimulilor crete, crete i amplitudinea depolarizrii. Cnd intensitatea stimulului atinge un prag, numit prag de detonare, celula rspunde printr-o variaie de potenial deosebit de ampl (n jur de 120 mV), n cursul creia interiorul celulei devine pozitiv. Amplitudinea acestui potenial de aciune rmne constant, chiar dac intensitatea stimulului crete n continuare. Acest tip de PA respect o lege de tip "tot sau nimic", n sensul c nu i face deloc apariia dac stimulul este sub pragul de detonare dar apare i are amplitudinea maxim de ndat ce pragul a fost atins (amplitudine ce nu mai crete chiar dac intensitatea stimulrii ajunge la valori mari). Potenialele de aciune prin care rspunde o celul la stimuli subliminari (stimuli a cror amplitudine este mai mic dect pragul de detonare) poart numele de poteniale de aciune locale (PAloc) iar cele care apar ca rspuns la stimuli egali sau mai mari dect pragul de detonare se numesc poteniale de aciune de tip tot-nimic (PAtn) . Caracteristicile potenialului local de aciune sunt: -are o amplitudine care depinde de intensitatea excitantului; -se propag n vecintate, dar nu ajunge prea departe (este local), micorndu-i rapid amplitudinea pn ce dispare (propagare cu pierderi sau decremenial). Caracteristicile potenialului de aciune de tip tot-nimic sunt : -are o amplitudine constant (nu depinde de intensitatea excitantului, cu condiia ca aceasta s nu fie mai mic dect pragul de detonare); -se propag pe distane nelimitate, cu viteze mari i fr pierderi (propagare nedecremenial).

Valoarea pragului de detonare variaz de la celul la celul. De fapt, numai trei tipuri de celule (nervoase, musculare i glandulare) sunt capabile s genereze PAtn, fiind denumite, din aceast cauz, celule excitabile. Toate celulele vii sunt capabile s rspund la stimulare prin poteniale de aciune locale i unii autori numesc aceast proprietate iritabilitate, pentru a o deosebi de excitabilitatea celulelor musculare, glandulare i de cea a axonilor celulelor nervoase. Generarea potenialelor de aciune este posibil deoarece ionii de Na+, aflai n concentraie mare n mediul extracelular, sunt departe de a fi n stare de echilibru cu ionii intracelulari de Na+, cu att mai mult cu ct, purtnd sarcini pozitive, sunt atrai de interiorul negativ al celulei aflate n repaus. Dei ionii de Na+ manifest o puternic tendin de a ptrunde n celul, ei nu o pot materializa att timp ct canalele de Na+ sunt nchise. Stimulii de mic intensitate provoac deschiderea unui numr mic de canale de Na+, prin care ptrunde un numr relativ mic de ioni de Na+ care, fiind pozitivi, micoreaz electronegativitatea citoplasmei cobornd-o pn la valori n jur de -60 mV. Aceste noi valori nu mai convin ionilor de K+, aflai pn atunci n stare de cvasi-echilibru i acetia, de ndat ce porile canalelor de K+ se deschid, prsesc celula ntr-un numr egal cu cel al ionilor de Na+ intrai. Producerea potenialului de aciune de tip tot-nimic are loc ntr-o manier asemntoare, dar include un episod dramatic, guvernat de ceea ce n cibernetic se numete feed-back pozitiv. O dat pragul de detonare depit, ntre depolarizarea membranei i influxul de Na+ intervine un cerc vicios: cu ct ptrund mai muli ioni de Na+, cu att mai mult se depolarizeaz membrana i se deschid (din aceast cauz) mai multe canale de Na+ prin care ptrunde n celul un numr tot mai mare de ioni de Na+; ionii de Na+ intr, astfel, n avalan, anuleaz potenialul electric negativ al citoplasmei i l aduc la valori pozitive de pn la +30 mV. La aceast valoare, porile canalelor de K+ se deschid i ionii de K+ prsesc n numr mare celula, pn ce potenialul de repaus se restabilete la valori de -80 mV -90 mV. Potenialul de aciune produs dureaz n jur de o milisecund.

4. Modelul electric al unei celule exitabile

Privit din punct de vedere electric, o celul mpreun cu mediul ei extracelular poate fi asimilat cu o reea electric, alctuit din rezistene, condensatori i surse de tensiune electromotoare. Astfel, lichidul intracelular i cel extracelular pot fi considerate ca borne ale unei surse de tensiune electromotoare format din 3 baterii de curent continuu, grupate n paralel. Este vorba de bateriile de Na+, de K+ i de Cl-, ale cror tensiuni electromotoare pot fi calculate cu ajutorul relaiei lui Nernst. Lund din nou ca exemplu fibra muscular i utiliznd n calcul valorile numerice ale concentraiilor intracelulare i extracelulare ale ionilor de K+, Na+ i Cl-, se obin urmtoarele valori : [K + ] RT E K = ln + ext + 1F [ K ]int = 0,0267.ln 1 / 30 = 0,0267.(-3,4) = -91 mV

ECl = = 0,0267.ln 30 =-0,0267 . 3,4 = -91 mV E Na = = 0,027.ln 14,5= 0,0267 . 2,67 = +71 mV

[Cl ]ext RT ln 1F [Cl ]int

[ Na + ]ext RT ln + 1F [ Na + ]int

n acelai timp, lichidul extracelular i cel intracelular pot fi considerate ca armturi ale unui condensator al crui dielectric este membrana celular. Canalele de Na+, de K+ i de Cl- reprezint tot ati rezistori electrici care se opun curentului transportat de ionii de Na+, K+ i Cl-. n sfrit, lichidul extracelular i cel intracelular sunt ele nsele rezistene electrice, ale cror valori depind de rezistivitatea electric a lichidelor, de lungimea coloanelor de lichid i de aria transversal a seciunilor reprezentate (la nivel microscopic) de celul i de spaiile extracelulare. Sursele de tensiune, rezistenele i condensatorii descrii sunt, n marea lor majoritate, de valori variabile (valorile lor se modific n timp). Curenii electrici transportai de ionii care traverseaz membrana n timpul unui potenial de aciune (curenii transmembranari de Na+, de K+, de Cl-) pot fi msurai cu ajutorul tehnicii potenialului fixat (voltage clamp). Tehnica potenialului fixat se bazeaz pe o idee ingenioas, prin care se depete imposibilitatea practic a montrii unui ampermetru n grosimea membranei celulare. Orice curent transmembranar modific potenialul de repaus. Prin injectarea din exterior a unui curent de sarcini electrice, capabil s restabileasc acest potenial la valoarea iniial, i prin msurarea cu un ampermetru a acestui curent, problema este rezolvat, deoarece curentul astfel msurat este egal cu cel transmembranar. Este necesar un dispozitiv electronic automat care s msoare n permanen variaiile potenialului celular i s le corecteze de ndat ce s-au produs.

5. Propagarea potenialelor de aciune

Potenialul de aciune, aprut ntr-un punct al membranei, produce depolarizarea local a acesteia (i chiar inversarea polaritii electrice a membranei, n cazul PAtn). Apar, astfel, diferene de potenial ntre regiunea lichidului intracelular existent n zona n care s-a produs PA i regiunile vecine, nc neafectate de acesta. Aceste diferene de potenial dau natere unor cureni electrici, care traverseaz membrana la o anumit distan de zona n care s-a produs PA. Aceste microcircuite electrice poart numele de cureni locali Hermann. Cu ct axonul sau fibra muscular sunt mai subiri, cu att rezistena electric Ri pe care o opun curenilor Hermann va fi mai mare.

Se poate demonstra c distana d, msurat de la punctul apariiei unui PA i pn la punctul n care amplitudinea PA se njumtete (ca urmare a cderilor de tensiune prin rezistene) este : Rm d= Ri Rm- rezistena electric transmembranar pe unitatea de lungime a membranei Ri - rezistena electric pe unitate de lungime a coloanei de lichid intracelular. Cu ct distana maxim la care un curent Hermann poate depi, nc, pragul de detonare cnd traverseaz membrana este mai mare, cu att crete viteza de propagare a potenialului de aciune. Se poate spune c PA se deplaseaz n salturi (propagare saltatorie) iar viteza lui de deplasare este cu att mai mare cu ct salturile sunt mai mari. Din relaia distanei d (de mai sus) rezult dou posibiliti de a mri lungimea salturilor: micorarea rezistenei lichidului intracelular Ri sau mrirea rezistenei transmembranare Rm. Prima modalitate de sporire a vitezei de propagare a PA se ntlnete n cazul unor fibre gigante nervoase i musculare, deoarece mrirea diametrului fibrei scade rezistena interioar Ri. Nervii i muchii alctuii din asemenea fibre gigante trebuie s aib, ns, volume exagerat de mari, ceea ce constituie un dezavantaj pentru organismul respectiv. A doua modalitate de cretere a vitezei de deplasare a PA const n mrirea rezistenei transmembranare Rm prin nvelirea fibrelor cu teci izolatoare (din punct de vedere electric), aa cum se ntmpl n cazul axonilor mielinizai; teaca de mielin este ntrerupt din loc n loc, la distane relativ mari, de aa numitele noduri Ranvier, unde membrana axonului este n contact cu lichidul extracelular.

6. Poteniale electrice extracelulare; bioelectrogeneza esuturilor i organelor

Potenialele de repaus i cele de aciune (PR i PA) descrise mai sus sunt poteniale celulare (numite, uneori, i poteniale intracelulare PAc); ele pot fi msurate cu ajutorul a doi electrozi dintre care unul este introdus n celul iar celalalt este n contact cu lichidul extracelular, considerat a fi conectat la potenialul zero al pmntului. n practica medical se msoar n mod curent aa numitele poteniale electrice extracelulare ale celulelor, esuturilor i organelor, cu ajutorul unor electrozi plasai nu n celule ci n vecintatea acestora. Nu se poate vorbi de potenial extracelular de repaus; se pot msura numai poteniale de aciune extracelulare (PAe) n intervalul de timp n care n celule se desfoar fenomene de excitaie. Potenialele de aciune extracelulare (PAe) se deosebesc de cele celulare (PAc) prin cteva particulariti : -n nregistrarea PAe, electrodul extracelular explorator surprinde o negativare electric trectoare a zonei de lichid extracelular aflat n vecintatea membranei unei (unor) celule excitate; aceast negativare are drept cauz srcirea lichidului extracelular n cationi (de exemplu, Na+), care ptrund n celule; -amplitudinea PAe este mult mai mic dect cea a PAc, deoarece electrodul extracelular se gsete ntr-o mas extins de lichid bun conductor de electricitate (ntr-un conductor

volumetric); o bun parte din energia electric generat de ptrunderea cationilor n celule se disipeaz prin curenii ce circul prin conductorul volumetric; -forma i amplitudinea PAe depind mult de locul n care este plasat electrodul explorator (activ) (aceasta, n cazul unei nregistrri unipolare, n care cel de al doilea electrod (cel indiferent) este pus la pmnt); n cazul unei nregistrri bipolare (caz n care cei doi electrozi sunt pui n contact cu dou zone ale aceluiai esut sau organ), forma i amplitudinea PAe depind nc i mai mult de poziia electrozilor. Dac ntr-o regiune oarecare a unui conductor volumetric apare la un moment dat o diferen de potenial electric ntre dou puncte, cele dou puncte, unite printr-o linie dreapt, alctuiesc un dipol electric (+ -) de la care pleac suprafee coninnd puncte aflate la potenial electric identic (suprafee echipoteniale). Fiecare suprafa echipotenial corespunde unei anumite valori a potenialului electric. Potenialul de aciune al esuturilor i organelor este rezultatul sumrii n spaiu i n timp a PAe ale celulelor ce alctuiesc aceste esuturi i organe, dar sumarea se face ntr-o asemenea manier nct amplitudinea PAe este mult mai mic dect cea a PAc (de exemplu, amplitudinea PAe al inimii este de ordinul milivolilor iar cea a PAe cerebral, de ordinul microvolilor, ceea ce este foarte puin n comparaie cu PAc, care sunt de ordinul zecilor de milivoli). nregistrrile potenialelor de aciune ale esuturilor i organelor se numesc electrograme. Potenialul de aciune al nervului poart numele de electro-nervogram. Un nerv este alctuit din numeroase fibre nervoase de grosimi diferite, unele mielinizate i altele fr teac de mielin. Fiecare fibr nervoas conduce potenialul de aciune cu o vitez proprie, ce depinde de grosimea ei i de gradul de mielinizare. Dac toate fibrele sunt stimulate simultan ntr-un anumit punct al nervului, potenialele de aciune plecate de acolo ajung n momente diferite la electrozii de culegere plasai la o oarecare distan de cei de stimulare. Apar, astfel, mai multe unde succesive notate cu litere greceti . Biopotenialele electrice ale muchiului pot fi culese cu ajutorul acului Bronk introdus n muchi sau plasnd electrozi n contact cu pielea ce acoper muchiul investigat. In primul caz se obine PA al unitii motorii iar n cel de al doilea caz se nregistreaz electromiograma global sub forma unei succesiuni neregulate de PA ale unitilor motorii care, n contracia voluntar, se contract nesincronizat. Prin nregistrarea potenialelor electrice produse de inim, se obine o electrocardiogram (EKG); se disting cteva denivelri de la linia izoelectric (notate cu P, Q, R, S, T). Electrozii se aplic pe ncheieturile minilor i pe glezne (n derivaiile bipolare) sau precordial (n cele unipolare). Prin plasarea unor electrozi pe pielea capului i nregistrarea diferenelor de potenial electric aprute, se obine electro-encefalograma (EEG), o succesiune de unde alfa, beta, gamma, delta etc., caracterizate prin anumite frecvene i amplitudini i a cror semnificaie biomedical este mai puin clar dect n cazul EKG. Rspunsul electric al retinei la iluminare permite nregistrarea electro-retinogramei, folosind un electrod ce se aplic pe suprafaa globului ocular i alt electrod indiferent. Rspunsul electric la declanarea iluminrii poart numele de rspuns ON i const dintr-o und negativ a (generat de celulele fotoreceptoare) urmat de o und pozitiv ampl b (generat de celulele bipolare retiniene) i de una tot pozitiv dar mai puin ampl, c

(produs de celulele pigmentare i fotoreceptoare). ntreruperea iluminrii este marcat de o und pozitiv d, numit i rspuns OFF. n practica medical sunt utilizate numeroase alte electrograme printre care electrohisterograma (care red activitatea electric a uterului i este important n special n timpul sarcinii), electro-gastrograma, etc.

7. Noiuni de bioexcitabilitate
Celulele, esuturile i organele rspund prin excitaie biologic la excitani, dac acetia reuesc s le excite. O asemenea proprietate a structurilor vii poart numele de bioexcitabilitate. n paragraful de mai sus apar patru termeni care trebuie definii. Excitantul sau factorul excitant const dintr-o variaie suficient de intens, de ndelungat i de brusc a proprietilor mediului, pentru a produce excitarea sistemului biologic. Excitarea este fenomenul prin care excitantul modific permeabilitatea membranei celulare pentru ioni; este vorba de deschiderea (sau nchiderea) porilor unor canale ionice i crearea, astfel, a condiiilor necesare celulei pentru a rspunde excitantului prin excitaie. Mecanismul biofizic al excitrii se confund cu mecanismul prin care senzorii membranari comand deschiderea porilor canalelor ionice. Aceti senzori sunt sensibili la variaii ale potenialului celular de repaus, ceea ce explic eficiena, n toate cazurile, a stimulrii electrice precum i capacitatea PA de a se propaga prin intermediul curenilor Hermann. Canalele ionice din membranele postsinaptice ascult de comenzile receptorilor pentru mediatori, deschizndu-i porile de ndat ce mediatorul s-a combinat cu receptorul. Orice factor fizic sau chimic poate deveni excitant (poate produce excitare) dac este capabil s determine canalele ionice s-i deschid (sau, dup caz, s-i nchid) porile. Excitaia celular este totalitatea fenomenelor ce au loc n celul ca urmare a excitrii ei de ctre excitani. Dac se poate spune c excitarea este produs de excitant, excitaia este n ntregime opera celulei. Excitaia are aspecte electrice (potenialul electric de aciune), optice (modificri ale transparenei, refringenei i activitii optice ale citoplasmei), radiante (emisie de radiaii infraroii, vizibile i ultraviolete), chimice (hidroliza ATP, producere de amoniac etc.) calorice (producere sau absorbie de cldur) etc. Excitabilitatea este proprietatea unui sistem biologic de a rspunde prin excitaie la factorii excitani. Ea se evalueaz din punct de vedere cantitativ, prin valorile reobazei i cronaxiei. Reobaza este intensitatea minim a unui excitant a crui durat de aplicare este foarte mare (teoretic, infinit) i care poate nc s declaneze excitaia n sistemul biologic. Cronaxia este durata minim a unui excitant avnd intensitatea de dou ori mai mare dect reobaza, necesar pentru a provoca excitarea sistemului biologic. ntre valorile intensitii (i) i cele ale duratei (t) ale unui excitant capabil de a produce excitarea unui sistem biologic exist relaia lui Weiss (i = a/t + b), unde a i b sunt dou constante. De regul, verificarea relaiei lui Weiss se face cu stimuli electrici de diferite forme, intensiti, durate i frecvene de aplicare; reprezentarea grafic a dependenei intensitii stimulului de durata sa este o hiperbol.

NOIUNI DE BIOACUSTIC

1. Noiuni de acustic
Sunetele sunt vibraii mecanice ale particulelor unui mediu elastic, vibraii care se propag sub form de unde. Viteza de propagare v a unui semnal acustic printr-un mediu elastic, avnd densitatea i modulul de compresibilitate B, este: B v= n cazul gazelor ideale, B este egal cu produsul dintre presiunea p a gazului i exponentul adiabatic (B = p). Din ecuaia gazului ideal (pV = mRT/), rezult c p/ = RT/ . innd seama de toate acestea, se constat c, n gaze, viteza de propagare a semnalului acustic este : B p RT v= = = T - temperatura absolut, - masa molar a gazului, constanta universal a gazelor = 8,31 J/molK nlocuind simbolurile cu valorile lor numerice pentru aerul la 15C, se obine : 1,4 8,31 288 v= = 341m / s 0,0288 Mediile prin care se propag undele acustice sunt caracterizate de un parametru numit impedan acustic specific (Z) egal cu produsul dintre viteza de propagare v a semnalului acustic prin acel mediu i densitatea a mediului (Z = v). Dac se msoar presiunea aerului ntr-un punct oarecare, se constat c, n momentul trecerii unui semnal acustic, apar comprimri i destinderi succesive ale aerului, n ritmul imprimat de frecvena semnalului acustic. Amplitudinea maxim a variaiei presiunii gazului se numete presiune acustic pa. Variaia maxim a presiunii atmosferice care poate fi tolerat de urechea uman fr durere (presiunea acustic maxim a unui semnal acustic nenociv) este de 30 N/m2 (adic foarte puin fa de presiunea atmosferic de 100.000 N/m2); presiunea acustic minim a unui semnal acustic nc audibil este, pentru o frecven a semnalului de 1000 Hz, de ordinul 10-5 N/m2. Intensitatea acustic ntr-un punct este egal cu energia transportat n unitatea de timp de unda acustic printr-o suprafa de 1 m2 plasat n acel punct, perpendicular pe direcia de propagare a semnalului acustic. Unitatea de msur a intensitii acustice este W/m2. R-

Intensitatea acustic I este direct proporional cu patratul presiunii acustice i invers proporional cu densitatea a mediului i cu viteza v de propagare a semnalului acustic : 2 2 pa pa I= = 2v 2 Z Intensitatea acustic maxim tolerat de urechea uman se poate calcula (tiind c aer = 1,22 kg/m3) :

30 2 I= = 1W / m 2 2 1,22 341
Intensitatea minim a unui semnal de frecvena de 1000 Hz, nc audibil, este 10-12 W/m2. Rezult c intensitatea acustic a semnalelor acustice audibile se extinde de-a lungul a 12 ordine de mrime, astfel nct este mai avantajos s se calculeze nivelul semnalelor acustice, n loc de intensitatea lor. Nivelul acustic N al unui semnal acustic este logaritmul zecimal al raportului dintre intensitatea acustic a semnalului respectiv i intensitatea minim a unui semnal de 1000 Hz nc audibil. N = log (I/Imin) = log (I/10-12 W/m2) bell Unitatea de msur a nivelului acustic este bell-ul. n practic, se prefer utilizarea unui submultiplu numit decibel (db) i care este a zecea parte dintr-un bell : N = 10 log (I/Imin) = 10 log (I/10-12) decibeli Rezult c nivelul acustic al unui semnal acustic nc tolerabil este : N = 10 log (1/10-12) = 120 db iar nivelul unui semnal de 1000 Hz nc audibil este : N = 10 log (10-12/10-12) = 0 db S-a calculat c vorbirii n oapt i corespunde un nivel acustic de 20 db, conversaia normal are 65 db, operaia de nituire are 100 db iar turboreactorul produce 120 db. Teoretic vorbind, frecvena undelor acustice este cuprins ntre 0 Hz i infinit; deoarece omul nu poate auzi dect semnale acustice cu frecvena cuprins ntre 16 i 20.000 Hz, semnalele cu frecvene mai mici de 16 Hz au fost numite infrasunete, iar cele cu frecvene cuprinse ntre 20.000 Hz i 109 Hz au fost numite ultrasunete. n natur nu se produc semnale acustice pure de o anumit frecven, ci semnale compuse din mai multe semnale acustice de frecvene diferite, fiecare dintre ele avnd intensiti diferite. Semnalul cu cea mai mic frecven este numit semnal acustic fundamental iar celelalte sunt armonice ale acestui semnal. Dac frecvenele armonicelor sunt de un numr ntreg de ori mai mari dect frecvena fundamental, semnalul acustic este perceput ca un sunet muzical; n caz contrar se aude un zgomot. Prin metoda matematic numit analiz Fourier, este posibil descompunerea unui semnal acustic compus n semnalele componente, cu precizarea frecvenelor i a intensitilor acestora. Un caz special este zgomotul alb, care conine semnale acustice de intensiti egale i avnd toate frecvenele posibile.

Undele acustice au toate proprietile caracteristice undelor: reflexie, refracie, difracie, interferen, absorbie etc. n cazul n care o surs acustic se afl n micare fa de un receptor, se produce un fenomen numit efect Doppler, care const din creterea aparent a frecvenei semnalului cnd sursa se apropie de receptor i din scderea frecvenei semnalului, cnd sursa se deprteaz. Variaiile frecvenei permit calcularea vitezei de deplasare a sursei sonore.

2. Caracteristicile sunetului auzit

Principalele caracteristici ale sunetelor auzite sunt nlimea tonal, tria sonor i timbrul sonor. nlimea tonal a sunetului depinde de frecvena fundamental a semnalului acustic i se exprim prin tonuri i semitonuri (note muzicale) precum i prin octavele crora le aparin. Sunetele joase corespund semnalelor acustice de frecvene mici iar sunetele nalte corespund unor frecvene mari ale semnalelor acustice. Timbrul sonor depinde de compoziia n armonici a unui semnal acustic compus. Dou semnale acustice avnd aceeai frecven fundamental dar armonici diferite (sau chiar armonici cu aceleai frecvene dar de intensiti diferite) sunt percepute de ureche ca sunete avnd aceeai nlime tonal dar timbru diferit. n acest mod se poate face distincia ntre voci diferite sau semnale acustice emise de instrumente diferite. Tria sunetului T este egal cu de zece ori logaritmul raportului dintre intensitatea acustic I a semnalului care provoac senzaia auditiv respectiv i intensitatea acustic minim Imin a unui semnal acustic (avnd aceeai frecven), care poate fi nc auzit de o ureche normal. T = 10 log (I/Imin) foni Tria sonor se mai poate msura n soni. Sensibilitatea urechii scade pentru frecvene ale semnalului acustic mai mari sau mai mici de 1.000 Hz. Explorarea funciei auditive se face prin acumetrie (adic msurarea distanei maxime de la care urechea aude un anumit semnal acustic) i audiometrie (determinarea pragurilor audibil i dureros pentru semnale acustice de diferite frecvene).

3. Biofizica recepiei auditive

Pavilionul urechii concentreaz spre conductul auditiv energia semnalului acustic care pune n vibraie timpanul. Funcionarea normal a timpanului cere ca presiunea aerului s fie egal pe cele dou fee ale sale i acest lucru este posibil deoarece urechea medie comunic cu exteriorul prin trompa lui Eustachio. Vibraiile timpanului se transmit ciocanului, nicovalei i scriei, ajungnd n cele din urm la membrana ferestrei ovale a melcului, membran pe care se sprijin scria. Prin modul lor de articulare, oasele urechii medii se comport ca un sistem de prghii avnd ca rezultat o amplificare de 1,3 ori a forei la nivelul ferestrei ovale. Prin contracia muchilor care se inser pe oscioare se realizeaz variaia nivelului de amplificare a forei, n scopul de a se proteja urechea intern n cazul sosirii unor semnale acustice excesiv de intense. Adevrata amplificare, ns, este cea a presiunii acustice, realizat de urechea medie ca urmare a faptului c suprafaa membranei ferestrei ovale este de 15 ori mai mic dect cea a timpanului.

Presiunea acustic pa din conductul auditiv apas asupra timpanului cu o for Ft egal cu produsul dintre presiunea acustic pa i suprafaa St a timpanului (Ft = paSt). Aceast for crete de 1,3 ori la nivelul membranei ferestrei ovale, astfel nct presiunea acustic n urechea intern va fi, n final, de 20 de ori mai mare dect n conductul auditiv : p ureche intern = 1,3 . Ft/S f.oval = 1,3 . pa . St / ( St /15) = 20 pa n termeni tehnici, amplificarea realizat de urechea medie asigur adaptarea impedanei mecanice joase a urechii externe la impedana nalt a urechii interne. De la membrana ferestrei ovale, semnalul acustic avanseaz de-a lungul canalului vestibular al melcului, trece prin helicotrem (un orificiu care asigur comunicarea dintre canalul vestibular i cel timpanic) i revine spre urechea medie prin canalul timpanic, nchis de membrana ferestrei rotunde (prezena membranei ferestrei rotunde este necesar, deoarece lichidul din canalele vestibular i timpanic este incompresibil i n-ar putea fi pus n vibraie dac s-ar afla ntr-un conintor cu perei integral rigizi). O seciune transversal prin melc pune n eviden, pe lng cele trei canale schiate n figura, i alte detalii necesare pentru nelegerea mecanismului biofizic al auzului. Din cele de mai sus rezult c vibraia coloanei de lichid din canalul vestibular este n opoziie de faz cu vibraia coloanei din acelai lichid (perilimf) aflat n canalul timpanic. Acest fapt permite efectuarea unui "masaj" al canalului mediu care conine endolimf i punerea n vibraie a membranei bazilare (mpreun cu tot ce este cldit pe ea). Sistemul mecanic de captare, amplificare i transmitere a vibraiilor aerului asigur buna funcionare a urechii att pentru semnalele slabe, aflate la pragul de audibilitate, ct i pentru semnale acustice de 1012 ori mai intense, aflate la pragul dureros. Pe membrana bazilar se afl o structur complex, alctuit din dou rnduri de celule (pilieri) ce formeaz un tunel i din cteva iruri de celule ciliate, celule aflate n contact cu terminaii ale nervului auditiv. Deasupra acestei structuri, numit organ al lui Corti, plutete o membran acelular format din proteine intens hidratate i purtnd numele de membrana tectoria, membran care atinge uor cilii celulelor receptoare interne i ader efectiv la cilii cei mai nali ai celulelor externe ( i ncastreaza). Cilii sunt aranjai n forma de V pe suprafaa apical a celulei ciliate. La trecerea semnalului acustic prin canalele vestibular i timpanic, membrana bazilar vibreaz i, odat cu ea, vibreaz i celulele cu cili, cilii sufer deformri n contactul cu membrana tectoria. Deformrile cililor (ndoiri sau nclinri) se afl la originea unui proces care duce la variaia potenialului de repaus al celulelor ciliate (adic la apariia unor poteniale de aciune ale acestora) urmat de apariia unor poteniale de aciune locale n terminaiile nervului auditiv. n fibrele nervului auditiv vor lua natere i se vor propaga trenuri de poteniale de aciune de tip tot-nimic n care PAtn se succed cu o frecven cu att mai mare cu ct PAloc a fost mai amplu. Este de remarcat faptul c numai celulele ciliate interne sunt direct rspunztoare de recepia semnalului acustic. Celulele ciliate externe funcioneaz ca un sistem de amplificare mecanic a vibraiilor membranei bazilare, beneficiind att de excitabilitate ct i de contractilitate.

Mecanismul prin care deformarea cililor duce la apariia PAloc n celula receptoare nu este pe deplin cunoscut. Ar putea fi vorba de o deschidere (sau nchidere) a porilor unor canale ionice printr-un efect mecanic sau printr-un efect piezoelectric (ipotetic). Capacitatea urechii interne de a face deosebire ntre sunetele de tonalitate joas i cele de tonalitate nalt (de fapt, ntre semnale acustice de frecven mic i cele de frecven mare) a fost pus pe seama unui fenomen de rezonan similar cu cel care face ca dintre corzile unui pian sau ale unei harfe s intre n vibraie (n prezena unui semnal acustic) numai acelea care au lungimea potrivit pentru a intra n rezonan cu acel semnal acustic (adic au frecvena proprie de rezonan identic cu frecvena semnalului acustic recepionat). Aceast teorie a rezonanei a fost emis de Helmholtz, care s-a bazat pe faptul c membrana bazilar este ngust la baza melcului i mai lat la vrf, c ea conine circa 42.000 de fibre paralele dispuse ca i corzile harfei i c, ntr-adevr, sunetele joase sunt recepionate la vrful melcului iar cele nalte, la baza lui. Dei foarte atrgtoare, teoria rezonanei a fost abandonat, deoarece presupusele corzi din membrana bazilar nu ntrunesc condiiile de ordin acustic necesare pentru a putea intra n rezonan cu semnalele acustice audibile. Von Bksy a propus o nou teorie, numit teoria undei cltoare, conform creia, n membrana bazilar ia natere o und (sau un val) care se deplaseaz spre helicotrem. La nceput, nlimea acestui val este mic, dar crete brusc ntr-un anumit punct al membranei bazilare, dup care scade la fel de brusc . Punctul de pe membrana bazilar n care nlimea valului crete brusc, depinde de frecvena semnalului acustic recepionat. nlimea maxim a valului se produce la baza melcului pentru frecvenele nalte ale semnalului acustic i la vrful melcului pentru cele joase. Acolo unde se produce creterea brusc a nlimii valului, cilii celulelor receptoare interne ating membrana tectoria i iniiaz excitaia nervului auditiv. Mecanismul este extrem de sensibil, deoarece deplasarea membranei bazilare este de ordinul nanometrilor iar nlimea valului nu depete un micrometru nici pentru semnalele acustice deosebit de intense.

3. Elemente de fonaie
Structura aparatului vocal uman. Sunet primar i sunet secundar Aparatul fonator uman este alctuit (din punct de vedere fizic) din trei elemente principale : -cavitatea toracic, ce conine plmnii n calitate de rezervor de aer sub presiune. -corzile vocale, care sunt benzi musculare puse sub tensiune mecanic i care vibreaz n timpul fonaiei; corzile vocale genereaz sunetul primar caracterizat printr-o mare bogie n armonici. -caviti aeriene rezonante (cavitatea laringian, bucal i nazal), care joac rol de rezonatori; ele intr n rezonan numai cu unele dintre armonicile sunetului primar emis de corzile vocale, amplificndu-le numai pe acelea i genernd, astfel, sunetul secundar final. Frecvenele sunetului primar, care sunt amplificate prin rezonan, depind de gradul de deschidere a gurii, de poziia limbii n gur, de contracia muchilor oro-faciali etc.

Frecvena fundamental i componena n armonici a sunetului secundar pot fi modificate n procesul vorbirii sau al cntatului. Spre deosebire de cavitatea bucal i de cea laringian, desprite una de alta de ctre limb i care au volum i form variabile, cavitatea nazal (care include i sinusurile) are volum i form constante. n general, orice cavitate deschis coninnd aer poate fi un rezonator acustic. Masa de aer aflat la nivelul deschiderii este aceea care oscileaz, restul aerului din rezonator jucnd rolul unui corp elastic care permite aceste oscilaii. Vocalele sunt oscilaii sonore cu o durat mai mare de 0,02 secunde. Pronunarea uneia sau a alteia dintre vocale depinde de forma cavitilor rezonante. Aa cum s-a mai amintit, cavitatea bucal i cea laringian, desprite de limb, alctuiesc un rezonator dublu cu dou frecvene de rezonan distincte. Din aceast cauz, emisia fiecrei vocale utilizeaz cte dou domenii de frecvene, selecionate dintre armonicele sunetului primar i amplificate prin rezonan. Aceste domenii poart numele de formante, fiecare vocal avnd dou asemenea formante. Formantele de frecvene mai nalte sunt date de cavitatea bucal iar celelalte, de cavitatea laringian. Frecvenele formantelor sunt cuprinse, la brbat, ntre 80 i 180 Hz iar la femeie i la copil, ntre 150 i 300 Hz; nu exist, ns, deosebiri privind poziia acestor formante n spectrul vocal de frecvene. Consoanele sunt sunete scurte, la a cror formare particip un mare numr de componente de frecvene diferite. Exist consoane vibrante (de exemplu "r"), siflante ("s"), explozive ("p") etc. Dup modul n care particip limba la pronunarea lor, consoanele pot fi antero-linguale (t, d, n), postero-linguale (g) i medio-linguale (c, p, v). In funcie de participarea diferitelor regiuni ale cavitii bucale, consoanele pot fi labiale (p,b), linguale (d, l, t, j), guturale (c, g), nazale (m, n) etc. Edentaiile de diferite grade modific fonaia: lipsa incisivilor superiori face ca f i v s se pronune ca b, lipsa incisivilor inferiori altereaz pronunia consoanelor t, d, s, z. Lipsa molarilor duce la pronunia optit a cuvintelor, deoarece aerul scap n cavitatea vestibular. La edentaii totali se observ o alterare important a fonaiei, deoarece ntreaga cavitate rezonant bucal este modificat; edentaia nu afecteaz, ns, posibilitatea de a cnta relativ normal.

ELEMENTE DE OPTIC BIOLOGIC

1. Noiuni de optic
Corpurile pot emite radiaii luminoase prin incandescen sau prin luminescen. Cnd lumina ntlnete un obstacol, o parte a sa se reflect, alta l ocolete prin difracie i o a treia parte ptrunde n obstacol, schimbndu-i (eventual) direcia de propagare prin refracie i fiind treptat absorbit i transformat n alte forme de energie. Dac lumina este polarizat (adic alctuit din unde ale cror vectori electrici vibreaz ntr-un singur plan) iar obstacolul este optic activ, ptrunderea luminii n obstacol este nsoit i de o rotire a planului de polarizare a luminii. Mai multe unde luminoase care se ntlnesc ntr-un punct interfereaz i, dac sunt coerente, dau n acel punct maxime i minime luminoase (franje de interferen).

Viteza luminii este de 3.108 m/s n vid i scade de n ori ntr-un mediu care are indicele de refracie n. Propagarea n spaiu a luminii este bine explicat de teoria ondulatorie a luminii, iar interaciunea luminii cu substana este explicat de teoria corpuscular (fotonic) a luminii, astfel nct lumina are att proprieti ondulatorii ct i corpusculare. Exist o optic geometric (privind propagarea razei de lumin), o optic ondulatorie (privind comportarea ondulatorie a luminii) i o optic fotonic (sau cuantic). Optica geometric opereaz cu conceptul de raz de lumin, care este definit ca o linie imaginar trasat n direcia de propagare a luminii. Optica geometric postuleaz trei principii: principiul propagrii rectilinii a luminii n medii omogene i izotrope, principiul reversibilitii razei de lumin (la schimbarea sensului de propagare a luminii, drumul ei nu se schimb) i principiul independenei razelor de lumin. La ntlnirea unei suprafee care separ medii avnd indicii de refracie n1 i n2, raza luminoas sufer fenomenele de reflexie i de refracie. Prin reflexie, raza se ntoarce n mediul din care a provenit ntr-un asemenea mod nct raza incident, raza reflectat i normala n punctul de inciden s fie coplanare iar unghiul de inciden s fie egal cu cel de reflexie . Prin refracie, raza de lumin ptrunde n mediul al doilea sub un unghi de refracie legat de unghiul de inciden prin relaia n1 sin i = n2 sin r Suprafaa care separ dou medii transparente poart numele de dioptru. Imaginea unui punct printr-un dioptru se construiete ducnd de la acel punct dou raze care ntlnesc dioptrul; imaginea punctului se afl la intersecia razelor reflectate sau refractate (sau a prelungirilor acestor raze). Pentru aflarea distanelor dintre obiect i dioptru (o) i dintre imagine i dioptru (i) se folosete relaia : n2/i - n1/o = (n2 - n1)/R unde n1 i n2 sunt indicii de refracie ai celor dou medii iar R este raza dioptrului; prin convenie, segmentele din spaiul care conine obiectul sunt negative iar pentru imagini reflectate se consider c n2 = -n1. Trecnd prin prism, razele luminoase sufer fenomenul de dispersie, ca urmare a faptului c indicele de refracie al materialului transparent are valori ce depind de lungimea de und a radiaiei. Optica ondulatorie explic fenomenele descrise mai sus precum, i altele ca difracia, interferena i polarizarea, plecnd de la principiul Huygens-Fresnel, conform cruia lumina se propag prin unde sferice, fiecare punct de pe suprafaa undei putnd fi considerat ca surs a unor unde secundare sferice. n realitate, lumina se propag prin unde electromagnetice produse prin vibraia unui vector electric E i a unui vector magnetic H, perpendiculare unul pe cellalt , vectorul electric fiind rspunztor de efectele luminoase. O raz de lumin este alctuit din numeroase astfel de unde, vectorii electrici vibrnd n toate planurile ce conin direcia de propagare a razei. Prin reflexie pe suprafaa unui material dielectric sau prin traversarea unui cristal birefringent, rmn n raz numai undele ale cror vectori electrici vibreaz ntr-un singur plan, lumina devenind polarizat.

Exist substane care rotesc planul luminii polarizate spre dreapta (dextrogire) sau spre stnga (levogire); ele se numesc substane optic active. Optica fotonic sau optica cuantic are meritul de a putea explica, printre altele, emisia i absorbia luminii, presiunea luminii i efectul fotoelectric. Conform teoriei cuantice a luminii, la revenirea unui electron de pe un nivel superior de energie pe unul de energie mai mic, se emite un foton a crui energie este egal cu diferena dintre energiile celor dou nivele. Aceast energie este egal cu produsul dintre constanta lui Plank (h) i frecvena luminii (E = h). Printr-un procedeu tehnic (cu ajutorul laser-ului) este posibil revenirea simultan a unui mare numr de electroni pe nivele identice, lumina devenind coerent.

2. Proprietile dioptrilor oculari

Ochiul omenesc are o form globular i un diametru de aproximativ 2,5 cm. n poriunea anterioar a ochiului se afl corneea, irisul i cristalinul iar n cea posterioar, coroida i retina. ntre cornee i cristalin se afl umoarea apoas, n restul ochiului fiind umoare vitroas. Cristalinul este meninut n poziia sa (i n stare de tensiune mecanic) de ctre un ligament numit zonul, care se inser pe sclerotic. Cristalinul poate fi eliberat de sub tensiunea zonulei prin contracia unui muchi prevzut cu numeroase fibre circulare, numit muchi ciliar. Din punct de vedere al opticii geometrice, studiul ochiului se poate face n dou moduri : -cu ajutorul unui model al ochiului redus la un singur dioptru, dioptru care asigur mersul razelor la fel ca n ochiul real; -prin studierea mersului razelor prin toi cei patru dioptri ai globului ocular. La convergena total a ochiului (60 D), corneea particip cu aproximativ 40 de dioptrii iar cristalinul cu restul de 20 D. Irisul joac rolul unei diafragme care limiteaz fluxul luminos ce cade pe retin i care, n acelai timp, micoreaz aberaiile cromatice i de sfericitate produse de lentilele ochiului. n condiii de luminozitate slab, fibrele radiale ale irisului se contract, mrind diametrul pupilei iar cnd iluminarea este excesiv, fibrele circulare ale irisului micoreaz pupila. Acest fenomen se numete adaptare la lumin. ntr-un ochi normal, imaginea unor obiecte foarte ndeprtate se formeaz pe retin, n timp ce imaginile obiectelor situate la mai puin de 6 m de ochi s-ar forma n spatele retinei dac cristalinul nu s-ar bomba, mrindu-i convergena. Acest proces prin care se asigur formarea pe retin a imaginii obiectelor apropiate se numete acomodare la distan i se realizeaz prin contracia muchiului ciliar, care elibereaz cristalinul de sub tensiunea zonulei i i permite, astfel, s se bombeze sub efectul propriei sale elasticiti. Punctul cel mai apropiat de ochi care poate fi vzut clar cu acomodare maxim se numete punctum proximum (pp) iar punctul cel mai deprtat care poate fi vzut clar fr acomodare este punctum remotum (pr). n cazul ochiului emetrop (normal), punctum proximum este situat la 25 cm de ochi iar punctum remotum, la infinit.

Defectele geometrice ale vederii sunt legate de dimensiunile globului ocular (defecte axiale), de forma dioptrilor oculari (defecte de curbur), de indicii de refracie ai mediilor transparente din ochi (defecte de indice) sau de proprietile mecanice ale cristalinului (defecte de elasticitate). Miopia apare cnd ochiul are un diametru antero-posterior prea mare, astfel nct imaginea obiectelor se formeaz naintea retinei. Att pp ct i pr sunt situate mai aproape de ochi dect n cazul ochiului emetrop. Acest defect se poate corecta cu lentile divergente. Hipermetropia apare la ochiul care are un diametru antero-posterior prea mic, imaginea formndu-se n spatele retinei chiar i pentru obiecte situate la infinit. Cristalinul trebuie s se bombeze n permanen, pentru a aduce imaginea obiectelor pe retin. Corectarea acestui defect se face cu lentile convergente. Presbiopia se instaleaz dup vrsta de 40 de ani, ca urmare a faptului c elasticitatea cristalinului scade, fcndu-i mai dificil bombarea. Presbitul are nevoie de lentile convergente pentru a vedea clar obiectele apropiate. Astigmatismul este un defect de curbur i se datoreaz faptului c suprafeele corneei (sau cele ale cristalinului) nu sunt perfect sferice, devenind parial cilindrice. Astigmatismul se corecteaz cu lentile cilindrice.

3. Mecanismele biofizice ale recepiei vizuale

Imaginile se formeaz pe retin, care este o structur complex ce cptuete (mpreun cu coroida) sclerotica din partea posterioar a ochiului i are n compoziia ei un strat de celule receptoare cu prelungiri n form de conuri i bastonae, neuroni bipolari i neuroni ganglionari. Conurile (n numr de 3.000.000 n retin) i bastonaele (n numr de 100.000.000 n retin) sunt parial ngropate n stratul de celule pigmentare ale coroidei i plasate ultimele pe direcia de propagare a luminii. ntre celulele receptoare exist conexiuni realizate prin intermediul unor celule orizontale, tot aa cum celulele amacrine stabilesc conexiuni ntre neuronii bipolari. Celula receptoare cu bastona se numete astfel deoarece are o prelungire sub form de bastona (numit i segment extern), n compoziia creia se afl cteva mii de discuri membranare suprapuse. Membranele acestor discuri sunt formate din subuniti cu diametru de 5 nm, n centrul crora se afl o molecul de rodopsin, format dintr-o protein (scotopsin) i din aldehida vitaminei A, numit retinal. Membrana bastonaului conine numeroase canale ionice de Na+ care, la ntuneric, sunt deschise, permind ionilor de Na+ s intre n celula receptoare, unde potenialul lor electrochimic este mai mic. Ionii de Na+ intrai nu se acumuleaz, ns, n celul, deoarece sunt evacuai, pe msur ce intr, de pompele ionice din membrana corpului celulei receptoare, urmnd s reintre prin canalele de Na+ din membrana bastonaului etc. Se creeaz, astfel, un curent electric transportat de ionii de Na+, numit curent de ntuneric. n aceste condiii, potenialul electric celular este de -20 mV. Sub efectul luminii, rodopsina din membrana discurilor se activeaz i, printr-o succesiune de etape, determin nchiderea canalelor de Na+, urmat de dispariia curentului de ntuneric i de hiperpolarizarea membranei celulei receptoare (potenialul de repaus devine -35 mV).

Aceast variaie de potenial declaneaz excitaia neuronilor bipolari, ale cror terminaii sunt n contact cu celula receptoare; potenialele de aciune locale aprute n neuronii bipolari ajung la sinapsele cu neuronii ganglionari (n numr de 1.600.000 n retin), pe care i excit. Neuronul ganglionar genereaz trenuri de poteniale de aciune de tip tot-nimic care, dup cteva staii n mezencefal (n corpii geniculai), ajung la scoara cerebral (scizura calcarin) unde produc senzaia vizual. Mecanismul prin care rodopsina se activeaz i determin, n final, nchiderea porilor canalelor de sodiu este, n linii mari, urmtorul : La ntuneric, retinalul se afl n configuraia 11-cis i este combinat cu opsina; la lumin, el trece n configuraia 11-trans i se desprinde de opsin. Rodopsina activat, notat cu R*, interacioneaz cu o macromolecul proteic numit traductin (T), care este combinat cu acidul guanozin-difosforic (GDP) i formeaz mpreun complexul R*T-GDP. Acest complex va pierde GDP i va lega GTP (acid guanozin-trifosforic) n locul lui, devenind R*T-GTP. R*T-GTP se descompune imediat n R* i T-GTP. Rodopsina activat R* reintr n ciclul menionat, legndu-se cu un nou T-GDP etc. T-GTP se numete traductin activat; ea activeaz, la rndul ei, o molecul de fosfodiesteraz (PDE) cu care se combin, aprnd, astfel, PDE-T-GTP sau fosfodiesteraza activat care transform acidul guanozin monofosforic ciclic (c-GMP) n acid guanozin monofosforic (GMP). n felul acesta, concentraia intracelular de c-GMP scade, ducnd la nchiderea canalelor de Na+. ntre timp, PDE-T-GTP se transform n PDE-T-GDP prin pierderea unui grup fosfat (Pi), dup care se descompune n T-GDP i PDE, ambele urmnd s reintre n ciclurile biochimice descrise. Sub aciunea luminii, o molecul de rodopsin activat poate activa 50 de molecule de traductin pe secund; o singur molecul de traductin activat poate induce dispariia a 2000 de molecule de c-GMP pe secund (prin transformarea lor n GMP). Rezult c activarea de ctre lumin a unei molecule de rodopsin duce la dispariia a 100.000 de cGMP pe secund, urmat de deschiderea unui mare numr de canale de Na+. La ntuneric, rodopsina activat R* redevine rodopsin inactiv R. Celulele receptoare cu bastona fac posibil vederea n condiii de luminozitate sczut, fr a permite distingerea culorilor (vedere n alb-negru sau vedere scotopic). Perceperea culorilor se datoreaz celulelor receptoare cu conuri, celule care intr n funcie n condiii de luminozitate mare a obiectelor privite (vedere n culori sau vedere fotopic). Vederea fotopic se realizeaz, practic, numai la nivelul petei galbene (macula lutea) a retinei, care concentreaz marea majoritate a conurilor. Mai este de menionat c regiunea prin care ptrund n retin nervul optic i vasele de snge este lipsit de celule receptoare i poart numele de pata oarb (macula caeca). Din punct de vedere al structurii microscopice, celulele cu conuri se deosebesc de cele cu bastonae att prin form ct i prin faptul c nu conin discuri membranoase; n schimb, membrana prelungirii conice este adnc faldurat. Locul pigmentului rodopsin din celulele cu bastona este luat, n celulele cu conuri, de iodopsin, alctuit din fotopsin i retinal.

Exist trei varieti de iodopsin: eritrolab (care absoarbe puternic lumina roie), clorolab (cu un maxim de absorbie n domeniul verde al spectrului vizibil) i cianolab, care absoarbe preferenial radiaii cu lungimi de und ce corespund culorii violet. Unele conuri conin eritrolab, altele clorolab i restul, cianolab. Dac unul dintre pigmeni este, ntr-o msur sau alta, insuficient, se poate vorbi de o tricromazie anomal care poate fi protanomalie (dac roul e vzut insuficient), deuteranomalie (pentru verde) i tritanomalie (pentru violet). Lipsa complet a unuia dintre pigmeni produce un defect de vedere numit dicromazie, care poate fi protanopie, deuteranopie sau tritanopie (dup tipul pigmentului care lipsete) i care se manifest prin incapacitatea de a distinge una sau alta dintre culorile menionate. Lipsa total a posibilitii de a distinge culorile poart numele de monocromazie sau acromatopsie. Ca i n cazul celulelor receptoare cu bastonae, membrana celulelor cu conuri se hiperpolarizeaz n urma excitaiei luminoase i iniiaz poteniale de aciune n neuronii bipolari i ganglionari.

4. Bioluminescena
Prin bioluminescen se nelege emisia de lumin de ctre organismele vii. Bioluminescena face parte din categoria mai larg a luminescenei, care se definete ca emisia de lumin de ctre atomi, molecule sau sisteme condensate, n urma excitrii lor de ctre o serie de factori fizico-chimici din rndul crora se exclude starea de incandescen. Bioluminescena este, de fapt, o chemoluminescen care are loc n organismele vii. Chemoluminescena poate fi direct (cnd nii produii reaciei chimice sunt excitai i emit lumin prin dezexcitare) sau indirect (cnd energia reaciei chimice este cedat altor molecule dect produii de reacie). Se cunosc peste 40 de specii de organisme bioluminescente. Organismele unicelulare dispun de microsurse luminescente adpostite n structuri membranare. Organismele pluricelulare emit lumin fie prin mijloace proprii (dispunnd de organe specializate n acest scop), fie utiliznd colonii de bacterii luminescente pe care le gzduiesc simbiotic. In primul caz, sursele bioluminescente sunt localizate n fotozomii din nite celule speciale numite fotocite. Reacia bioluminescent care se desfoar n fotozomi necesit prezena a doi participani: un substrat ce urmeaz s fie oxidat i care poart denumirea generic de luciferin (L) i un catalizator enzimatic al acestei oxidri numit, tot generic, luciferaz (E). Formulele chimice, att ale luciferinei ct i ale luciferazei, difer de la o specie la alta. Schema general a unei reacii luminescente este: E LH2 + O2 L* + H2O L + h + H2O unde L = luciferin, LH2 = luciferin redus, L* = luciferin oxidat, E = luciferaz, h = energia radiant a fotonului emis. n funcionarea unor sisteme bioluminescente (de exemplu, la licurici) este implicat i acidul adenozin-trifosforic (ATP) : E LH2 + O2 + ATP L + h + H2O + ADP + P

n aceste sisteme, luciferina nu este oxidat direct ci, n prealabil se combin cu ATP, formnd adenil-luciferina. Prin bioluminescen, organismele se fac observate de ctre alte vieuitoare, lungimea de und a radiaiei emise corespunznd posibilitilor de recepie ale destinatarilor. Randamentul bioluminescenei este foarte mare (la licurici atinge 99,6%); aceasta nseamn c lumina emis este rece, foarte puin din energia reaciei chimice transformndu-se n cldur. Uneori, printre fenomenele de bioluminescen este inclus (n unele publicaii) i fluorescena unor sisteme biologice, adic proprietatea lor de a emite lumin sub influena radiaiilor electromagnetice. Faptul c ciupercile care produc boala de piele numit microsporie devin luminescente cnd sunt iluminate cu radiaii ultraviolete, permite diagnosticul acestei boli i urmrirea evoluiei ei n cursul tratamentului

NOIUNI DE BIOCIBERNETIC
1. Definiia i capitolele ciberneticii
Cibernetica este tiina modurilor de recepie, pstrare, transformare i utilizare a informaiei de ctre maini, fiine vii i reuniuni ale lor. Sistemele materiale studiate de cibernetic poart numele de sisteme cibernetice i reprezint ansamble finite de elemente materiale care interacioneaz unele cu altele i cu mediul exterior prin interaciuni informaionale. Cele dou mari capitole ale ciberneticii sunt: teoria informaiei i teoria sistemelor de comand.

2. Modul de gndire n cibernetic: abstractizarea i modelarea

Cibernetica abordeaz probleme de orice natur, utiliznd o metod particular de gndire bazat pe abstractizare i pe modelare. n studiul cibernetic al sistemelor materiale, se face abstracie att de natura substanei din care este alctuit sistemul, precum i de natura energiilor care pun n micare sistemul. Ceea ce rmne este o schem structural i o schem comportamental a sistemului, aceasta din urm reprezentnd succesiunea strilor sistemului, precum i circulaia informaiei n sistem. Prin modelare se nelege desenarea, ntr-o prim etap, a schemelor menionate mai sus, sub forma unei niruiri de simboluri de form dreptunghiular, circular etc., reprezentnd pri ale sistemului despre ale cror compoziie i funcionare nu se tie nimic. Aceste simboluri se numesc "cutii negre" (n englez, black boxes). Tot ce intereseaz este informaia care intr i cea care iese dintr-o asemenea cutie neagr. Modelarea poate continua, dup desenare, prin realizarea unor dispozitive fizice care s ndeplineasc funcia sistemului studiat (dar care s fie de o construcie mai simpl dect cea a sistemului studiat). Un model este numai o aproximare, dintr-un anumit punct de vedere, a realitii i, de aceea, el trebuie comparat n permanen cu realitatea n procesul elaborrii, deoarece un model ofer ansa dobndirii de noi cunotine numai dac se dovedete adecvat i corect.

2. Informaie i entropie informaional

Definiia informaiei n sensul cel mai general, prin informaie se nelege o dat de orice natur, privind structura i comportamentul unui sistem. ntr-un sens mai restrns, informaia este definit ca fiind ceea ce obinem cnd aflm rezultatul unui experiment, rezultat ce nu ne era dinainte cunoscut. Prin experiment se nelege evoluia unui sistem ctre o stare final, starea final fiind evenimentul produs. Un experiment se ncheie prin producerea unui eveniment dintr-o mulime de evenimente posibile, fiecare dintre ele putnd surveni cu o anumit probabilitate. Pentru a cunoate probabilitile de realizare ale fiecrui eveniment posibil, experimentul trebuie repetat de un numr mare de ori (N) i trebuie notat de cte ori apar evenimentele i (i=1,2,3,...). Se obin, astfel, frecvenele absolute (ni) de apariie a evenimentelor i. mprind aceste frecvene absolute la numrul total de experimente (N), se obine frecvena relativ de apariie a evenimentului i (ni/N) iar dac N este foarte mare (teoretic infinit), se obine probabilitatea de realizare a evenimentului i : pi = limita (ni/N) Cantitatea de informaie Informaia obinut cnd aflm cum s-a ncheiat un experiment este cu att mai mare cu ct evenimentul produs era mai puin probabil sau, cu alte cuvinte, cu ct surpriza generat de apariia lui este mai mare. Este evident c ntre cantitatea de informaie obinut la realizarea unui eveniment i inversul probabilitii apariiei evenimentului exist o relaie de proporionalitate. n cazul n care evenimentul nu se poate ncheia dect ntr-un singur fel (i se ncheie, ntr-adevr, n acest fel), surpriza este nul i tot egal cu zero este i informaia dobndit la realizarea acestui eveniment cert, a crui probabilitate de apariie este egal cu 1. Singura relaie posibil ntre cantitatea de informaie i inversul probabilitii de apariie a evenimentului, relaie care s satisfac cele de mai sus este relaia logaritmic, deoarece log 1 = 0 n orice baz. Se definete cantitatea de informaie dobndit la realizarea evenimentului i ca fiind logaritmul inversului probabilitii de realizare a acelui eveniment : Ii = log (1/pi) = - log pi Dac se utilizeaz bitul drept unitate de msur a cantitii de informaie, atunci logaritmul utilizat n formula de mai sus este n baza 2. Bitul este cantitatea de informaie care se obine cnd se realizeaz un eveniment a crui probabilitate de apariie este : Ii = log2() = log2 2 = 1 bit Se utilizeaz i multipli ai bitului cum sunt byte (se pronun bait) care este 23 bit (adic de 8 ori mai mare dect bitul, motiv pentru care se mai numete i octet), Kbyte = 103 byte, Mbyte = 106 byte etc. Informaia medie a unui experiment Dac un experiment este repetat de N ori i se noteaz cu n1, n2, n3 ... etc. de cte ori i fac apariia evenimentele 1, 2, 3, ..., fiecare apariie a unui eveniment oferind informaia I1, I2, I3,..., se poate calcula informaia total obinut It :

It = n1I1 + n2I2 + n3I3 + ... = niIi Informaia medie Im se obine mprind informaia total It la numrul N de repetri ale experimentului : Im = (n1I1 + n2I2 +...+ nkIk)/N Im = (n1/N)I1+(n2/N)I2+...+(nk/N)Ik = (ni/N)Ii Dac N este foarte mare (teoretic infinit), atunci (ni/N) = pi iar Ii = log (1/pi) Im = pi log (1/pi) = - pi log pi bit/eveniment n cazul n care cele k evenimente sunt echiprobabile, pi = 1/k i Im devine: Im = k {(1/k) log k} = log k Relaia informaiei medii poate fi utilizat i pentru calcularea altor mrimi (de exemplu, coninutul informaional al unui sistem sau indicele de diversitate al unei populaii). Coninutul informaional I al unei macromolecule format din N uniti este produsul dintre acest numr i informaia medie a macromoleculei: I = N pi log (1/pi) unde pi este probabilitatea cu care poate fi ntlnit specia i a unei molecule n rndul moleculelor care alctuiesc macromolecula. Indicele de diversitate Id caracterizeaz o populaie. Dac populaia este format din indivizi identici, indicele ei de diversitate este egal cu zero. Dac, ns, indivizii aparin unui numr de k tipuri, fiecare tip i putnd fi ntlnit cu o probabilitate pi , Id va fi : Id = pi log (1/pi) Entropie informaional i entropie termodinamic ntre entropia termodinamic a unui sistem i informaia medie a acelui sistem (calculat prin mprirea coninutului informaional la numrul de componente ale sistemului) exist o analogie remarcabil. Dup cum s-a artat n cursul de termodinamic biologic, entropia termodinamic a unui sistem este S = k ln N, unde k este constanta lui Boltzmann iar N este probabilitatea termodinamic a strii sistemului. Entropia termodinamic a unui sistem alctuit din N particule identice dar avnd energii diferite, fiecrui nivel de energie i corespunzndu-i ni particule, este : S = -k (ni/N) ln (ni/N) Deoarece ni/N reprezint probabilitatea pi de ocupare a nivelului de energie i, relaia se scrie : S = -k pi ln pi i indic gradul de dezordine a particulelor din sistem. Relaia care exprim gradul de nedeterminare (din punct de vedere informaional) al unui sistem este chiar relaia informaiei medii a acelui sistem : Im = - pi log pi Asemnarea dintre cele dou relaii de mai sus justific denumirea de entropie informaional dat informaiei medii. Pentru a extrage informaia coninut ntr-un sistem este necesar ca sistemul s fie demontat n prile componente i analizat din punct de vedere fizic i chimic. Pe msur ce aceste operaii avanseaz, cantitatea de informaie extras crete dar crete i gradul de dezordine a sistemului investigat (entropia sistemului crete).

Preul oricrei informaii referitoare la un sistem este o dezorganizare a acelui sistem. Reciproca este valabil, n sensul c scderea entropiei unui sistem printr-o activitate creatoare i constructiv este posibil numai dac realizatorul posed informaia necesar. Uneori, evenimente care aduc aceeai cantitate de informaie impresioneaz diferit pe cel care dobndete informaia, n funcie de semnificaia pe care o are evenimentul pentru destinatar i depinznd de modul n care a fost programat destinatarul s reacioneze la aflarea diferitelor evenimente ce se produc.

3. Sisteme de transmitere la distan a informaiei

Semnale i mesaje informaionale Informaia privind producerea unui eveniment este dobndit nemijlocit de ctre experimentator. Ceilali pot afla ce s-a ntmplat prin intermediul unui mesaj transmis de ctre experimentator, prin mesaj nelegndu-se un ansamblu de date, imagini sau idei ce trebuie transmis. Mesajele sunt constituite din semnale, prin semnal nelegndu-se o anumit valoare particular a unei mrimi fizice sau numerice (cifrice). Totalitatea semnalelor utilizate pentru transmiterea mesajelor poart numele de alfabet de semnale. Semnalele sunt destinate s se propage la distan printr-un anumit mediu fizic, numit canal de informaii. Atunci cnd, n deplasarea lor, ntlnesc un alt mediu fizic care nu le ofer condiii favorabile de propagare, semnalele trebuie transformate n semnale de alt tip, compatibile cu noul canal i transportnd aceeai informaie. Traducerea, modularea i codificarea semnalelor informaionale Prelucrarea semnalelor implic trei operaii : a) Traducerea, adic nlocuirea mrimii fizice care sttea la baza semnalului, cu o mrime fizic de alt tip; b) Modularea, adic atribuirea de valori particulare acestei noi mrimi fizice, n scopul construirii de noi semnale. n cazul n care semnalele sunt mrimi fizice, modularea se face n sistem analogic, spre deosebire de situaia n care semnalele sunt cifre, cnd modularea se face n sistem digital. Atunci cnd modularea se face prin varierea amplitudinii unei mrimi fizice, avem de a face cu un sistem analogic cu modulare n amplitudine, iar cnd semnalele se construiesc prin varierea frecvenei unei mrimi fizice, vorbim despre un sistem analogic cu modulare n frecven. c) Codificarea, adic stabilirea unei corespondene ntre semnalele iniiale i noile semnale construite, ntre vechiul i noul alfabet de semnale. Operaiile de prelucrare a semnalelor au loc n dispozitive numite traductori. Este evident c, pentru a prelucra informaia, traductorul trebuie s o recepioneze n prealabil. Schema general a unui sistem cibernetic de transmitere a informaiei Cel mai simplu sistem de transmitere la distan a informaiei este format dintr-o surs de informaie care genereaz mesaje (alctuite din semnale), un canal informaional (adic un mediu fizic prin care se propag semnalele) i un destinatar (capabil s neleag mesajele transmise). Sistemul descris este afectat de perturbaii (adic semnale care nu fac parte din alfabetul sursei de informaii)

Cnd informaia trebuie transmis foarte departe sau n condiii dificile, semnalele sursei trebuie traduse n semnale adaptate unor noi canale i apoi retraduse n semnale accesibile destinatarului. Pentru astfel de situaii este nevoie de un sistem complex de transmitere la distan a informaiei. Perturbaiile pun n primejdie transmiterea corect a mesajului. n lipsa perturbaiilor, un mesaj ar fi neles de destinatar chiar dac ar conine numrul minim (strict necesar) de semnale. n practic, ns, se utilizeaz un surplus de semnale, numite semnale redundante care, dei nu sporesc cantitatea de informaie transmis, mresc ansele ca mesajul s fie neles de destinatar, n ciuda perturbaiilor care afecteaz sistemul.

4. Recepia, prelucrarea i transmiterea la distan a informaiei n sistemele biologice

Receptori i traductori de informaie n membranele celulare Receptorii membranari sunt structuri macromoleculare aflate n membrana celular i care au funcia de a recunoate o molecul semnal din mediul extracelular (numit mesager prim), de a interaciona rapid i reversibil cu ea i de a determina celula s sintetizeze o alt molecul semnal (numit mesager secund) care s declaneze rspunsul celular specific. Uneori, mesagerul secund este chiar complexul receptor-mesager prim. Existena unui organism pluricelular ar fi de neconceput n lipsa unui sistem complex de semnalizare intercelular la nivel nervos, glandular, paracrin i prin contact celular nemijlocit. Prezena sau absena unuia sau a mai multor semnale poate duce la diferite evenimente din viaa celulei: supravieuirea, diviziunea, diferenierea sau moartea. Mesagerii primi sunt reprezentai de o mare varietate de molecule (dar i de factori fizico-chimici). Printre moleculele cu rol de mesager-prim se ntlnesc mediatorii chimici, hormoni, antigeni, medicamente, droguri etc. Mesagerii secunzi mai frecvent ntlnii sunt acidul adenozin monofosforic ciclic (cAMP), acidul guanozin monofosforic ciclic (c-GMP), diacil glicerolul (DAG), inozitol trifosfatul (Inos P3) etc. Exist mai multe tipuri de receptori membranari: -receptori asociai cu canale ionice; ei dispun de o zon receptoare, prin care leag mesagerul prim i de o zon efectoare, prin care comunic senzorului canalului ordinul de a deschide sau de a nchide poarta canalului -receptori care, prin zona lor efectoare, determin sinteza mesagerilor secunzi (care vor activa o protein-chinaz citoplasmatic, declannd, astfel, rspunsul celular). Prin legarea mesagerului prim de zona receptoare, zona efectoare activeaz adenilat-ciclaza care catalizeaz transformarea ATP n AMP-ciclic; acesta din urm, la rndul su, activeaz protein-chinaza c-AMP-dependent, fcnd-o apt s declaneze rspunsul celular. Aceeai schem este valabil i pentru sisteme care folosesc c-GMP n calitate de mesager secund (bine neles, fcnd nlocuirile necesare: guanilat-ciclaza n locul adenilat ciclazei, GTP i c-GMP n loc de ATP i c-AMP, protein-chinaza c-GMPdependent n loc de cea c-AMP-dependent. n general, activarea adenilat-ciclazei nu se face direct de ctre receptor; n prealabil, acesta activeaz o protein reglatoare legat cu GTP, fcnd-o capabil s activeze adenilat-ciclaza sau, dup caz, guanilat-ciclaza.

Ali receptori folosesc ca mesageri secunzi diacil glicerolul (DAG) sau inozitol trifosfatul (Inos P3) care se sintetizeaz plecnd de la fosfatidil inozitol difosfat (PIP2) din membran. Spre deosebire de DAG, care activeaz direct protein-chinaza, Inos-P3 elibereaz Ca++ din depozitele celulare i acetia activeaz protein-chinaza Ca++-dependent. -receptori care sunt ei nii protein-chinaze (ce se activeaz prin legarea mesagerului) sau receptori care, prin zona lor efectoare, activeaz o proteinchinaz . Prelucrarea semnalelor n sinapsele neuronale Sinapsa este o structur prin care se realizeaz contactul dintre doi neuroni sau dintre un neuron i o celul muscular sau glandular. Exist dou tipuri de sinapse: sinapsa chimic i sinapsa electric. n sinapsa chimic, terminaia nervoas presinaptic este desprit de celula postsinaptic printr-un spaiu sinaptic ngust de 20 nm. n terminaia nervoas se disting mitocondrii i vezicule de 40 nm coninnd mediator chimic. Membrana postsinaptic are, n structura sa, receptori i canale ionice. Sosirea unui potenial electric de aciune PAloc (care poate fi considerat un semnal electric) determin fuziunea membranei presinaptice cu membranele unor vezicule, urmat de expulzarea prin exocitoz a coninutului veziculelor n spaiul sinaptic (semnalul electric se transform ntr-un semnal chimic). Moleculele de mediator din spaiul sinaptic se combin cu moleculele receptoare din membrana post-sinaptic, determinndu-le s comande deschiderea porilor canalelor ionice i, deci, intrarea unor ioni n celula post-sinaptic, cu generarea pe aceast cale a unui potenial electric de aciune PAloc. Asistm la o transformare a semnalului chimic ntrun semnal electric. Spargerea unei vezicule este urmat de apariia unui PAloc postsinaptic miniatural; spargerea mai multor vezicule produce un PAloc postsinaptic mai amplu. PAloc postsinaptic se deplaseaz (cu pierderi mari de amplitudine), ncercnd s ajung la axon. Adeseori, mai multe PAloc aprute simultan n diferite puncte ale membranei corpului neuronal i a dendritelor, sau PAloc aprute succesiv (la intervale mici de timp) n acelai punct, se sumeaz (sumaie spaial i sumaie temporal), rezultnd un PAloc mai amplu, capabil s ajung pn la punctul de emergen a axonului. Odat terminat misiunea sa, mediatorul este distrus de o enzim iar fragmentele lui difuzeaz prin membrana presinaptic n terminaia nervoas unde, cu ajutorul unei alte enzime, mediatorul este resintetizat. Se constat c, n termeni cibernetici, la nivelul membranei presinaptice are loc transformarea unui semnal electric (PAloc presinaptic) ntr-un semnal chimic (molecule de mediator) iar la nivelul membranei postsinaptice are loc fenomenul invers de transformare a unui semnal chimic n semnal electric (PAloc postsinaptic). Sinapsele electrice funcioneaz fr mediatori chimici iar spaiul sinaptic este extrem de ngust (practic, lipsete). Variaia de potenial ce apare la nivelul membranei presinaptice genereaz, prin inducie electric, o variaie similar a potenialului electric la nivelul membranei postsinaptice. Spre deosebire de sinapsa chimic (unde transmisia sinaptic dureaz circa 0,5 ms), transmisia n sinapsa electric este, practic, instantanee. Ea nu este, ns, strict unidirecionala (cum este transmisia n sinapsele chimice), putnd avea loc i n sens invers (n condiii experimentale).

Transformarea semnalelor electrice la nivelul conului axonal Zona de emergen a axonului din corpul neuronal are forma unui trunchi de con i se numete conul axonal. Aici sosesc potenialele locale de aciune (PAloc) avnd punctele de plecare pe membrana dendritelor i a corpului neuronal. Potenialele de aciune locale determin conul axonal s declaneze o salv de poteniale de aciune de tip tot-nimic (PAtn), cu o frecven cu att mai mare cu ct amplitudinea PAloc sosit a fost mai mare. Ajungnd la nivelul terminaiei nervoase, salva de PA-tn este reconvertit ntr-un PA-l, cu att mai amplu cu ct frecvena PA-tn din salv a fost mai mare. Canalul neuronal Un neuron care primete informaie de la ali neuroni (cu care este n contact) transmite aceast informaie altor neuroni cu care, de asemenea, realizeaz conexiuni sinaptice. Terminaia nervoas care intr n contact cu dendritele sau cu corpul neuronal reprezint sursa de informaie i emite semnale chimice (molecule de mediator chimic). Membrana postsinaptic se comport ca un traductor transmitor de tip 1 care transform semnalul chimic n semnal electric modulat n amplitudine (PAloc care circul de-a lungul unui canal de tip 1 reprezentat de membrana dendritelor i a corpului neuronal). Ajungnd la conul axonal (care se comport ca traductor transmitor de tip 2), PAloc se transform n PAtn care urmeaz s circule de-a lungul canalului de tip 2 (canal axonal) sub form de semnale modulate n frecven. Ajungnd la terminaia nervoas, PAtn sunt reconvertite de un traductor receptor de tip 1 n PAloc modulate n amplitudine, care circul decremenial (cu pierderi) de-a lungul unui canal de tip 1 format din membrana acestei terminaii. Sub influena acestui PAloc, membrana presinaptic fuzioneaz cu veziculele de mediatori, permind moleculelor de mediator s ajung n spaiul sinaptic. Membrana postsinaptic se comport ca un traductor receptor de tip 2 care transform semnalele electrice n semnale chimice pentru destinatarul reprezentat de un neuron, o celul muscular sau o celul glandular . Reele neuronale Neuronii din sistemul nervos central sunt interconectai, alctuind reele neuronale. Un neuron poate primi informaii de la mii de ali neuroni, dendritele i corpul su fiind literalmente acoperite de butoane sinaptice ale acestora i, pe de alt parte, poate trimite mesaje ctre alte mii de neuroni . Pentru a nelege i trata logic o astfel de reea, sunt necesare cteva ipoteze de lucru : -neuronul poate exista n dou stri: neexcitat i excitat; -pentru a trece din starea neexcitat n cea excitat este necesar ca excitantul s depeasc un prag de intensitate; -transmisia sinaptic a excitaiei se face cu o ntrziere de aproximativ o jumtate de milisecund; n cele ce urmeaz vor fi prezentate numai cteva tipuri de reele neuronale : -reeaua de sumare; pentru ca neuronul 3 s se excite este necesar s primeasc semnale simultane sau succesive de la neuronii 1 i 2; -reeaua de ntrziere; pentru ca neuronul 3 s rspund cu 1 ms mai trziu dect neuronul 1, se intercaleaz neuronul 2; -reeaua de multiplicare: la comanda dat de neuronul 1, neuronul 4 rspunde de 3 ori la rnd;

-reeaua reverberant: la o comand sosit de la neuronul 1, neuronul 4 rspunde de un numr infinit de ori; Acest ultim tip de reea st la baza memoriei de scurt durat. Cu timpul, ntre neuronul 1 i 4 se realizeaz o cale preferenial de circulaie a impulsurilor nervoase (ca urmare a unor modificri structurale ale sinapselor care i mresc suprafaa de contact; nu sunt excluse nici modificri biochimice mergnd pn la interesarea acizilor nucleici). Ca rezultat al acestor modificri se instaleaz memoria de lung durat.

5. Noiuni de informatic biologic i tehnic

Fluxuri informaionale prin nervii senzitivi i senzoriali Impulsurile nervoase, n calitatea lor de semnale purttoare de informaie, realizeaz n fiecare moment fluxuri uriae de informaie ctre creier. Capacitatea unui canal neuronal reprezentat de o fibr nervoas (capacitate egal cu numrul maxim de informaii transmise n unitatea de timp) este de 1000 bit/s. Capacitatea canalului reprezentat de un nerv alctuit din N fibre este, deci, 1000 N bit/s. Retina transmite ctre creier un flux de 1010 bit/s, (dac inem seama de faptul c n retin exist aproximativ 108 celule receptoare, fiecare putnd distinge 32 de nivele diferite de strlucire n cadrul unei imagini realizate n 1/16 secunde). Omul primete din lumea exterioar 1010 - 1011 bit/s dintre care numai 100 bit/s sunt contientizai, 10 bit/s sunt reinui n memoria de scurt durat i numai 1 bit/s este memorizat pentru lung durat. Aceast uria cantitate de informaie este recepionat, prelucrat, transmis i analizat de sisteme biologice complexe numite analizori. Schema cibernetic a analizorilor Semnalele mecanice, termice, chimice, luminoase i acustice sosite din mediul exterior, din mediul intern sau din organe i esuturi sunt traduse la nivelul receptorilor n semnale electrice de tipul potenialelor de aciune locale (PAloc). n funcie de natura semnalului ce urmeaz a fi tradus, receptorii (fig) pot fi termoreceptori (pentru cald i rece), mecanoreceptori, chemoreceptori pentru gust, miros, receptori pentru presiune osmotic, fotoreceptori, nocireceptori (pentru durere) etc. n funcie de sursa semnalelor, receptorii pot fi exteroreceptori (pentru semnale venite din mediul extern), interoreceptori (pentru semnale primite din mediul intern) i proprioreceptori (pentru semnale plecate din esuturi i organe). n funcie de modul n care reacioneaz la stimulare, receptorii sunt de tip ON, OFF, ON-OFF i continui, dup cum rspund numai la nceputul stimulrii, la sfritul ei, la nceputul i la sfritul stimulrii sau pe tot parcursul stimulrii. Orice analizor poate fi mprit, din punct de vedere cibernetic, ntr-un segment periferic (alctuit din celulele receptoare i din terminaiile nervoase aflate n contact cu ele) i un segment central (care cuprinde restul fibrelor nervoase mpreun cu corpii neuronali adpostii n ganglioni, reele neuronale din mezencefal i zona de proiecie din scoara cerebral). Jonciunea celor dou segmente se face n nite zone ale membranei terminaiilor nervoase, zone care au proprietatea de a transforma semnalele modulate n amplitudine (PAloc) n semnale modulate n frecven (PAtn) (echivalente ale conului axonal).

Principala diferen ntre segmentul periferic i cel central const n faptul c primul opereaz cu semnale modulate n amplitudine (PAloc) iar cel de al doilea, cu semnale modulate n frecven (PAtn). La scoara cerebral ajung trenuri de impulsuri nervoase de frecvene diferite; n funcie de aceste elemente ca i de locul proieciei pe scoar se realizeaz codificarea diferitelor proprieti ale stimulilor (vezi cursul de Psihofizic). Informaia genetic Acizii dezoxiribonucleici (ADN) sunt macromolecule gigante, alctuite din dezoxiriboz, acid fosforic i din patru specii de baze azotate. Cele 4 tipuri de baze (adenina A, guanina G, citozina C i timina T) sunt semnale din care se construiesc mesaje informaionale destinate ribozomilor, unde se sintetizeaz proteine prin asamblarea ntr-o anumit ordine a aminoacizilor. Transferul informaiei de la ADN la proteine implic transformri de semnale; ntr-o prim etap (numit transcripie), informaia ADN este transferat moleculelor de acid ribonucleic mesager (ARN-m) care dispune de un alfabet de semnale diferit de cel al ADN (adenin A, guanin G, citozin C i uracil U). ntr-o etap ulterioar (numit traducere) se pune problema realizrii unui al treilea alfabet alctuit din semnale mai numeroase, pentru a corespunde tipurilor de molecule de ARN de transfer, destinate s selecioneze cei 20 de aminoacizi necesari construirii de polipeptide i proteine. n acest scop, cele patru baze azotate ale moleculei de ARN-m se grupeaz trei cte trei, fiecrui triplet de baze corespunzndu-i un anumit aminoacid (de exemplu, tripleta de baze azotate U-U-U corespunde fenilalaninei, U-G-C corespunde alaninei, U-C-G- argininei etc.). Trei din cele 64 de triplete (UAA, UAG i UGA) nu corespund nici unui aminoacid; ele au alte semnificaii, cum ar fi sfritul lanului polipeptidic etc. Calculatorul electronic n informatic, problemele, indiferent de natura lor, sunt reduse la aspectul lor informaional, transpuse n limbaj simbolic i rezolvate cu ajutorul calculatorului electronic dup o prealabil programare a acestuia. Un calculator electronic are n componena sa o magistral (care este un mnunchi de cabluri prin care circul semnale purttoare de informaii - comenzi i date - i care asigur interconectarea tuturor subansamblelor) i urmtoarele subansamble : -procesorul, care coordoneaz ntreaga funcionare a calculatorului, asigurnd accesul la magistral a utilizatorilor i executnd operaii aritmetice i logice -memoria intern, care poate fi fix (ROM-read only memory) sau operativ (RAMrandom access memory) Subansamblele menionate mai sus alctuiesc partea central a calculatorului; cele ce vor fi descrise n continuare poart numele de periferice : -memorie extern, realizat, n principal, pe discuri magnetice -dispozitiv de intrare sub form de tastatur care permite introducerea comenzilor i a datelor -dispozitive de ieire, care pot fi: monitor video, imprimant pentru tiprirea rezultatelor i plotter pentru desenarea reprezentrilor grafice -interfee specializate destinate conectrii calculatorului la alte dispozitive i permind culegerea direct de date de la instrumente de msur.

6. Sisteme cibernetice de comand. Aplicaii n biologie

Sisteme de comand simple Un sistem de comand este un ansamblu de elemente n care o mrime de intrare determin un element de execuie s genereze o mrime de ieire. ntre mrimea de intrare i cea de ieire exist o relaie matematic; n multe cazuri, sistemul de comand este astfel conceput, nct puteri mici aplicate la intrare comand puteri mari la ieire. Sisteme automate de comand Perturbaiile creeaz riscul ca mrimea de ieire s se abat de la valorile prestabilite; acest risc poate fi eliminat prim msurarea permanet a mrimii de ieire, compararea ei cu valorile prestabilite i modificarea mrimii de intrare astfel ca s se obin, totui, valoarea corect a mrimii de ieire, n ciuda perturbaiilor (mrimea de intrare, astfel modificat, poart numele de mrime de acionare). Circulaia informaiei n sens invers, adic de la mrimea de ieire ctre cea de intrare, poart numele de legtur invers, retroaciune sau feed-back. Un sistem de comand prevzut cu o legtur invers este un sistem automat de comand (sau sistem de comand cu reglare automat). Exist legturi inverse negative i legturi inverse pozitive. Legtura invers negativ acioneaz astfel nct s se opun variaiei mrimii de ieire, corectnd-o. Ea genereaz stabilitate n funcionarea sistemului de comand. Legtura invers pozitiv accentueaz abaterile mrimii de ieire. Dac mrimea de ieire este surprins n timp ce crete, legtura invers pozitiv accentueaz treptat aceast cretere pn ce sistemul se autodistruge prin explozie. n cazul n care legtura invers pozitiv intervine n timp ce mrimea de ieire este n scdere, aceast scdere este continuat pn cnd sistemul se blocheaz, ncetnd s mai funcioneze. Efectele legturii inverse pozitive pot fi evitate dac se instaleaz la timp o legtur invers negativ (care restabilizeaz sistemul nainte de explozie sau blocare) sau dac sistemul se modific ntr-o asemenea msur nct legtura invers s-i piard orice sens pentru el; are loc, n aceste condiii, o mutaie calitativ a sistemului. Sisteme biologice de comand cu reglare automat n organism exist numeroase sisteme automate de comand n care, de regul, acioneaz legturi inverse negative, care asigur constana parametrilor biologici (aa numita homeostazie). Exist sisteme destinate meninerii la valori constante a temperaturii, pH-ului, presiunii osmotice a plasmei, a concentraiei glucozei n snge etc. Un exemplu tipic de sistem biologic automat de comand este arcul reflex neuromuscular, n care impulsul nervos (mrimea de intrare) determin muchiul (element de execuie) s se contracte (mrimea de ieire). Parametrii acestei contracii (fora i scurtarea) sunt msurai de corpusculii Golgi din tendonul muchiului i de fusurile neuromusculare (element de msurare) care transmit informaia la centrii nervoi, unde se face compararea contraciei produs cu cea intenionat a se produce (element de comparare), dup care mrimea de intrare este modificat devenind mrime de acionare . Alt exemplu este mecanismul adaptrii vederii la lumin. Aici, mrimea de intrare este diametrul pupilei, elementul de execuie este irisul i mrimea de ieire este fluxul luminos czut pe retin.

Legtura invers este realizat prin fibre ale nervului optic, care comunic nivelul de iluminare a retinei unor neuroni aflai n centrul pupilo-motor din mezencefal (neuroni care inerveaz muchii irisului, modificnd diametrul pupilei astfel nct iluminarea retinei s se menin n limite normale). Un exemplu de sistem biologic de comand cu legtur invers pozitiv este cel care asigur apariia potenialului de aciune de tip tot-nimic (vezi cursul de bioelectrogenez) unde mrimea de intrare este deschiderea porilor canalelor de Na+, elementul de execuie este influxul de Na+ (ca urmare a gradientului su de potenial electro-chimic) iar mrimea de ieire este depolarizarea membranei axonale. Legtura invers pozitiv este realizat de senzorii canalelor ionice care, ca urmare a depolarizrii, comand deschiderea unor noi canale de Na+. Ptrunderea n avalan a ionilor de Na+ ar duce rapid la distrugerea axonului dac nu ar interveni la timp o legtur invers negativ (pozitivarea interiorului celular stopeaz intrarea n continuare a ionilor de Na+ i comand deschiderea porilor canalelor de K+, urmat de ieirea masiv a ionilor de potasiu i de restabilirea potenialului normal de repaus).

ELEMENTE DE PSIHOFIZIC
1. Definiia psihofizicii
Psihofizica este acea ramur a biofizicii care studiaz relaiile dintre excitanii de natur fizico-chimic i senzaiile pe care acetia le provoac. ntre intensitatea stimulului excitant i tria senzaiei provocate exist mai mult dect o simpl legtur de proporionalitate direct. S-a constatat, de exemplu, c pentru ca unui om s i se par c tria unui sunet se reduce la jumtate, este necesar s se reduc cu 90% intensitatea semnalului acustic care provoac senzaia auditiv respectiv. Pentru ca unui observator s i se par c lumina dat de 10 becuri a fost redus la jumtate, este necesar s se sting 9 becuri. Pentru ca unui om care ine n mn o greutate s i se par c aceasta s-a njumtit, ea trebuie redus cu numai 38% etc.

2. Msurarea obiectiv a triei senzaiilor

Constatrile de mai sus demonstreaz necesitatea elaborrii unor sisteme obiective de msurare, att a intensitii factorilor excitani ct i a triei senzaiilor provocate de acetia. Senzaiile se preteaz foarte greu la msurtori obiective, pentru c ele nsele sunt mrimi subiective, depinznd de o mare diversitate de factori, printre care starea afectiv a celui care triete senzaia respectiv, nivelul lui de cultur, experiena de via etc. Senzaiile pot fi de ordin cantitativ (de exemplu, ct de greu este un obiect) i de ordin calitativ (adic referindu-se la cum este i unde este un stimul excitant; de exemplu, tonalitatea unui sunet i direcia din care vine). Pentru msurarea triei senzaiilor, subiectul este stimulat cu un factor excitant oarecare i este chestionat asupra senzaiei pe care o ncearc. Apoi, stimulul este modificat, calitativ sau cantitativ, fr ca subiectul s o tie, relatnd, ns, ce simte. Trebuie avut n vedere

faptul c senzaiile la un moment dat pot fi influenate de amintirea senzaiilor anterioare sau de apariia fenomenelor de oboseal sau de adaptare. O alt problem este stabilirea unei uniti de msur a senzaiei i a unei scri a senzaiilor, ncepnd cu o limit inferioar zero care corespunde amplitudinii minime a stimulului care mai poate nc genera o senzaie (stimul prag sau prag inferior al excitantului) i terminnd cu o limit superioar ce corespunde unui stimul care nu mai poate fi perceput, fie pentru c a depit posibilitile organului de sim, fie pentru c provoac durere sau saturaie (prag superior al excitantului). Unitatea de msur a triei senzaiei corespunde intervalului minim dintre intensitile a doi stimuli de valori apropiate dar percepui ca distinci. Scara de trie a senzaiei se realizeaz pe baza datelor culese de la un numr ct mai mare de oameni tineri i sntoi, din ambele sexe; aceste date sunt, apoi, prelucrate statistic.

3. Legea Weber-Fechner
Legea Weber-Fechner stabilete relaia dintre tria senzaiei i intensitatea excitantului. Intervalul dintre intensitile stimulilor ce pot fi nc percepui ca distinci depinde de intensitatea acestor stimuli (un om poate sesiza lesne diferena de 1 g ntre masele a dou obiecte, dac aceste mase sunt 1 g i, respectiv, 2 g, dar nu i dac masele obiectelor sunt 1000 g i, respectiv, 1001 g). Weber a artat c ceea ce se percepe este nu diferena absolut E dintre intensitile E ale excitanilor ci raportul dintre aceast diferen i intensitatea excitantului (E/E), numit i diferen relativ ntre intensitile excitanilor sau putere de rezoluie a organului de sim respectiv. Organismele au de fcut fa unor factori excitani ale cror intensiti variaz de la valori foarte mici pn la valori de miliarde de ori mai mari. Unul i acelai organ de sim trebuie s fie capabil s msoare toat aceast gam uria de valori ale excitantului iar puterea de rezoluie trebuie s fie constant pe toat gama de valori. n fapt, Weber a constatat experimental constana puterii de rezolutie a organelor de sim (E/E = ct). Fechner arat c variaiei relative a intensitii excitantului (E/E) i corespunde o variaie S a triei senzaiei : S = k E/E sau dS = k dE/E unde dS i dE sunt variaii infinitesimale ale triei senzaiei (dS) i ale intensitii excitantului (dE) iar E este intensitatea excitantului. Prin integrare se obine : S = k ln E adic legea Weber-Fechner, unde k este o constant.

4. Legea puterii
Exist situaii n care legea Weber-Fechner nu este respectat. S = k En Aceasta este legea puterii (legea lui Stevens) care, ca i legea Weber-Fechner, leag tria senzaiei de intensitatea excitantului.

5. Codificarea parametrilor excitanilor

Tria senzaiilor este apreciat dup frecvena cu care sosesc impulsurile nervoase pe scoara cerebral. Se poate spune c intensitatea excitanilor de orice natur este codificat n frecvena impulsurilor sosite la nivelul scoarei cerebrale. Fiecrui analizor i corespunde o anumit regiune a scoarei cerebrale. Alte caracteristici ale excitanilor sunt codificate spaial sau temporal. Codificarea strlucirii, formei, dimensiunilor i culorii obiectelor Intensitatea strlucirii obiectelor se codific n frecvena impulsurilor nervoase sosite la nivelul scizurii calcarine a scoarei cerebrale. Forma i dimensiunea obiectelor se codific spaial, deoarece imaginea pe retin a obiectelor este realizat spaial iar impulsurile nervoase care pleac de la diferitele celule receptoare retiniene ajung n locuri diferite pe scoar. Culoarea obiectelor este codificat spaial, deoarece cele trei tipuri de celule cu conuri (coninnd eritrolab, clorolab i cianolab) sunt dispersate spaial n retin i trimit informaii (pe calea fibrelor nervului optic) n puncte diferite ale scoarei occipitale. Deprtarea la care se afl obiectele se codific n frecvena impulsurilor nervoase sosite de la poprioreceptorii muchilor globilor oculari care, pentru a asigura suprapunerea imaginilor date de cei doi ochi, realizeaz o convergen a axelor optice oculare, convergen cu att mai accentuat cu ct obiectele sunt mai apropiate de ochi. Codificarea intensitii, frecvenei, compoziiei i direciei semnalelor acustice Intensitatea semnalelor acustice se codific n frecvena impulsurilor nervoase sosite pe calea fibrelor nervului auditiv. n acest fel se apreciaz tria sonor a senzaiei auditive. Frecvena fundamental i compoziia n frecvene a semnalelor acustice se codific spaial, deoarece diferitelor frecvene acustice le corespund regiuni diferite ale melcului iar impulsurile nervoase sosite de la celulele receptoare din aceste regiuni ale melcului ajung n locuri diferite pe scoara cerebral. Direcia de unde vine semnalul acustic se codific temporal, deoarece semnalul acustic nu ajunge n acelai moment la cele dou urechi; exist un decalaj de timp care este amplificat n reele neuronale specifice permind localizarea sursei acustice.

NOIUNI DE FOTOBIOLOGIE
1. Definiia fotobiologiei
Fotobiologia studiaz interaciunile radiaiilor electromagnetice cu sistemele biologice (n mod deosebit a radiaiilor cu lungimi de und ce fac parte din spectrul vizibil sau apropiate de acesta) Radiaiile electromagnetice sunt forme de transport la distan a energiei prin unde electromagnetice. Din punct de vedere al lungimii lor de und, radiaiile electromagnetice se mpart n unde radio (lungi, medii, scurte i ultrascurte), microunde, radiaii infraroii, vizibile, ultraviolete, radiaii X i radiatii gamma.

2. Interaciunea radiaiilor electromagnetice neionizante cu substana

Energia E transportat de radiaiile electro-magnetice depinde de frecvena a acestora (E = h ), unde h este constanta lui Planck, egal cu 6,62.10-34 Js. Interacionnd cu substana, fotonii cedeaz energie atomilor i moleculelor ntlnite. Aceasta energie este utilizat fie pentru creterea energiei de agitaie termic, fie pentru excitarea sau ionizarea atomilor i moleculelor (prin ridicarea electronilor pe nivele superioare de energie sau chiar prin extracia lor din edificiul atomic). Radiaiile ale cror particule au energii mai mici de 10 eV (1 eV = 1,6.10-19 J) nu pot smulge electronii moleculelor i atomilor i se numesc, din aceast cauz, radiaii neionizante. Din rndul radiaiilor electromagnetice, numai radiaiile X i gamma au energii superioare valorii de 10 eV i sunt capabile s ionizeze atomii i moleculele (vezi cursul de Radiobiologie). Interaciunea radiaiilor cu substana se poate realiza prin : -transferul energiei fotonilor ctre molecule (avnd ca rezultat creterea energiei lor de rotaie i de vibraie i, deci, nclzirea substanei prin agitaie termic) -transferul energiei ctre electronii periferici ai moleculelor i atomilor, urmat de excitarea acestora prin ridicarea electronilor pe nivele superioare de energie. Revenirea electronilor pe nivele inferioare de energie produce dezexcitarea atomilor sau a moleculelor. Dezexcitarea poate fi neradiativ (dac are ca rezultat numai nclzirea substanei) sau radiativ (dac este nsoit de emisia unor radiaii electromagnetice). Dezexcitarea radiativ poate fi fluorescen (emisia de radiaii cu aceeai lungime de und ca aceea a radiaiei incidente - fluorescena de rezonan - sau cu lungimi de und mai mari; emisia fluorescent are loc numai pe durata iradierii) sau fosforescen (n care emisia de radiaii continu i dup ncetarea iradierii i care se datoreaz ridicrii electronilor pe nivele tripletice cu timp mare de dezexcitare i nu pe nivele singletice, ca n fluorescen). -transferul energiei ctre molecule, avnd ca rezultat creterea reactivitii lor chimice i, uneori, angajarea lor n reacii fotochimice ca izomerizri sau rearanjri interne ale moleculei, polimerizri sau combinri ntre molecule i fotosensibilizri, n urma crora energia primit de o molecula este transferat altei molecule, care i crete reactivitatea chimic. Reaciile fotochimice se desfoar n conformitate cu urmtoarele legi (legile fotochimiei) : 1) Reacia fotochimic are loc numai dac molecula a absorbit energie radiant 2) O molecul absoarbe energia unui singur foton 3) Absorbia energiei radiante de ctre o molecul nu este urmat obligatoriu de participarea ei la o reacie fotochimic.

3. Efecte biologice ale radiaiilor vizibile

Fotosinteza Cel mai important efect biologic al luminii vizibile este, la nivelul ntregii biosfere, fotosinteza, fr de care viaa nu ar putea exista (n formele ei superioare) deoarece regnul animal ar fi privat de hran i de oxigen. Fotosinteza reprezint conversia energiei radiante n energie chimic, necesar reaciilor de sintez a unor molecule complexe.

Captarea energiei radiante are loc n cloroplastele din celulele plantelor verzi, unde electronii pigmenilor clorofilieni i ai celor carotenoizi sunt ridicai pe nivele superioare de energie. Revenirea electronilor pe nivele fundamentale se face n trepte, de-a lungul aa numitului lan transportor de electroni. Fiecrei trepte i este asociat o reacie de fosforilare a ADP i, astfel, energia radiant este convertit n energie chimica a ATP, energie ce va fi folosit pentru sinteze moleculare. Reacia fundamental a fotosintezei este sinteza moleculei de glucoza : 6 CO2 + 6 H2O + h C6H12O6 + 6 CO2 Aceast reacie, simpl n aparen, este rezultanta unui numr de aproximativ 100 de reacii elementare, grupate n faza fotolitic (captarea energiei radiante i transformarea ei n energie chimic a ATP) i faza de sintez propriu-zis, care se desfoar la ntuneric. Printre aceste numeroase reacii, un rol important l joaca fotoliza apei: H2O + h H+ + OH+ Ionii H se fixeaza pe NADP (nicotinamid-adenin-dinucleotidfosfat) pe care l reduc la NADPH iar ionii OH- se combina ntre ei, genernd apa, oxigen (care se degaj) i electroni, care trec de-a lungul lanului transportor de electroni, ctre nivele energetice din ce n ce mai joase, cedndu-i treptat energia, pentru a permite sinteza de ATP (din ADP i P). Reacia de conversie fotochimic din faza fotolitic se scrie : H2O + NADP + ADP + P + h NADPH + ATP + O2 + H+ Se remarc apariia de protoni (H+) care creeaz un gradient de potenial electrochimic utilizabil n diferite sinteze. Reaciile menionate se petrec n structurile lamelare ale unor organite din celulele vegetale, numite cloroplaste. Fotorecepia cu ajutorul pigmenilor rodopsinici Principalele fenomene de fotorecepie au loc, n lumea biologic, n receptorii vizuali (n celulele retiniene cu bastona, care conin rodopsin, i n celulele cu conuri, care conin cele trei varieti de iodopsin: eritrolab, clorolab i cianolab). Mecanismul biofizic al recepiei vizuale a fost examinat n cursul de optic biologic. Rodopsina mijlocete fotorecepia i n unele bacterii (cum este Halobacterium halobium), care conin n membrana lor molecule de bacteriorodopsin compuse din retinal i o protein similar opsinei. Bacteriorodopsina funcioneaza ca o pomp de protoni alimentat cu energie radiant. Transportul de protoni este cuplat cu fosforilarea ADP (ADP + P ATP) i cu evacuarea ionilor de Na+ din corpul bacteriei, asigurnd acestor procese, fizice i chimice, energia necesar.

4. Efecte biologice ale radiaiilor ultraviolete

Din punct de vedere al efectelor biologice, radiaiile ultraviolete se mpart n trei categorii: domeniul A (cu lungimea de und cuprins ntre 315 i 400 nm), domeniul B (280 - 315 nm) i domeniul C (cu lungimea de und mai mic de 280 nm). Energia fotonilor ultravioletelor este de 3 - 7 eV, nu suficient de mare pentru a putea ioniza atomii i moleculele dar destul de mare pentru a putea rupe legturi chimice i pentru a promova reacii fotochimice. Printre aceste reacii se numr :

-dimerizarea unor perechi de baze azotate i, n mod deosebit, dimerizarea timinei (fig); consecina este sudura lanurilor de ADN n punctele n care dou timine stau fa n fa, devenind imposibil copierea informaiei (pe ARN-m) sau diviziunea celulara (efect bactericid). Efectele dimerizrii dispar parial prin iluminare cu raze violete, ca urmare a fenomenului de reactivare (activarea unei enzime care desface dimerii). -producere de eritem (arsuri tegumentare) de ctre ultravioletele cu lungimi de und cuprinse ntre 290-320 nm -pigmentarea pielii sub efectul ultravioletelor cu lungimi de und cuprinse ntre 320-420 nm, ca urmare a reaciei ce are loc n melanocite, unde tirozina se transform n melanin (n prezenta enzimei tirozinaz) -formare de vitamina D2 (antirahitic) prin iradiere cu ultraviolete avnd lungimea de und de 280 nm (prin transformarea ergosterolului iradiat n vitamina D2) -formare de ozon n straturile superioare ale atmosferei

ELEMENTE DE RADIOBIOLOGIE
1. Definiia radiobiologiei
Radiobiologia studiaz efectele biologice ale radiaiilor ionizante, adic a acelor forme de transport la distan a energiei prin particule care au energia cinetic mai mare de 10 eV.

2. Dozimetria radiaiilor ionizante

Apariia unor radiaii ionizante ntr-o regiune din spaiu se explic, de regul, prin existena n acel spaiu a unei substane radioactive (surs de radiaii). Activitatea radioactiv a unei surse de radiaii este viteza ei de dezintegrare, adic numrul de nuclee care se dezintegreaz n unitatea de timp. Unitatea de msur a activitii radioactive este becquerel (Bq) egal cu o dezintegrare pe secund. Se utilizeaz i unitatea tolerat curie (Ci) egal cu 3,7.1010 Bq. Dac substana radioactiv este dispersat n aer sau n ap, activitatea radioactiv a mediului se msoar n Bq/m3 sau Bq/l. Pentru aprecierea efectele radiaiei ionizante ntr-un anumit punct din spaiu i, n cele din urm, nocivitatea ei pentru un organism viu plasat n acel punct, a fost stabilit un sistem de dozimetrie care include doza incident, doza absorbit i doza biologic (precum i debitele acestor doze). Doza incident de radiaie ntr-un punct se apreciaz dup numrul de ioni produi n aer n acel punct. Unitatea de msur este C/kg, adic doza incident care produce ntr-un kg de aer aflat n acel punct un numr de ioni de acelai semn, avnd sarcina total de un coulomb. Este nc tolerat unitatea roentgen (r); 1 C/kg = 3876 r. Aceast doz incident se acumuleaz ntr-un timp mai lung sau mai scurt; de aceea, este necesar s se cunoasc i debitul dozei incidente care se msoar n C/kg.s i r/s. Doza de radiaie absorbit ine seama de existena, n punctul considerat, a unui material ce absoarbe energia radiaiei. Ea se msoar, de aceea, n energia absorbit de unitatea de mas a acelui material. Unitatea de msur este gray (Gy); doza absorbit ntr-un punct este de 1 Gy dac acolo, fiecare kg din materialul iradiat absoarbe 1 joule de energie (1 Gy

= 1 J/kg). Unitatea tolerat este rad, astfel nct 1 Gy = 100 rad. Debitul dozei absorbite se msoar n Gy/s sau rad/s. Doza biologic de radiaii ine seama, n plus, i de tipul de radiaie ionizant, precum i de nocivitatea biologic a acesteia (de exemplu, 1 Gy de radiaie este de 20 de ori mai duntor sntii dect un Gy de radiaie X). Cifra care arat de cte ori este mai duntoare o radiaie dect aceeai doz de radiaie X absorbit se numete efectivitate biologic relativ . Pentru radiaiile X, i , =1; pentru protoni, = 10 i pentru radiaii , =20 Unitatea de msur a dozei biologice este sievert (Sv), adic doza de radiaie care face ca 1 kg de esut s absoarb n punctul respectiv 1/ jouli de energie. 1 Gy de raze X corespunde unei doze biologice de 1 Sv, n timp ce 1 Gy de raze corespunde unei doze biologice de 20 de Sv. Unitatea tolerat este rem; 1 Sv = 100 rem. Debitul dozei biologice se msoar n Sv/s sau rem/s.

3. Mecanismul interaciei radiaiilor ionizante cu materia vie

Efectul direct al radiaiilor ionizante Efectul direct al radiaiilor se produce prin impactul nemijlocit al particulei cu molecule importante pentru organism (acizi nucleici, enzime, hormoni etc.), soldat cu pierderea parial sau total a calitilor care permit acestora s-i joace rolul n procesele vitale. n urma acestor interaciuni, structura spaial a macromoleculelor se modific, datorit ruperii unor legturi de hidrogen sau puni bisulfidice, desprinderii unor lanuri laterale etc. Acizii nucleici iradiai pierd baze azotate, i desfac legturile de adenin-timin sau citozin-guanin, sufer rupturi ale lanului cu peroxidarea capetelor, se combin cu molecule proteice etc. Efectele radiaiilor ionizante depind de doz i se stabilesc determinnd procentul de indivizi supravieuitori (neafectai de radiaie). Rezultatele numeroaselor cercetri au artat c se obin dou tipuri de curb doz-efect: exponenial i sigmoid. Relaia matematic pentru curba exponenial este: N = No e -D/Do N- numrul de supravieuitori n cazul iradierii cu doza D, No- numrul iniial de indivizi, Do-doza pentru care 37% (adic 1/e) din numrul indivizilor rmn neafectai (supravieuiesc). O asemenea curb exponenial s-ar putea obine dac un individ ar putea fi distrus dintr-o singur lovitur, ca i cum ar prezenta o int unic pentru radiaie. Curba sigmoid corespunde unei relaii de tipul: N/No = 1 - (1 - e-D/Do)n care, pentru valori mari ale dozei D se simplific devenind: N = No n e-D/Do O asemenea curb s-ar obine dac un individ ar trebui s fie atins n n locuri pentru a fi distrus, adic dac ar prezenta n inte vitale pentru radiaii, toate intele trebuind s fie atinse. Tipul de curb obinut depinde de natura radiaiei, de debitul dozei, de temperatur, de gradul de oxigenare i de hidratare etc.

Efectul indirect al radiaiilor ionizante Uneori, macromoleculele nu sunt distruse direct de particulele radiaiei incidente ci de alte molecule lovite de acestea (este vorba de moleculele de ap care, fiind prezente n numr mare n esuturi, au anse mari s fie nimerite). n acest mod se realizeaz efectul indirect al radiaiilor ionizante. Moleculele de ap iradiate sufer un proces de radioliz prin care dau natere la radicali liberi (se scriu cu un punct n dreapta): H2O H. + OH. Aceast reacie se desfoar n etape succesive. Are loc nti ionizarea moleculei de ap: H2O H2O+ + eElectronul smuls parcurge civa nanometri, pn ce energia lui scade (ca urmare a ciocnirilor cu moleculele de ap) pn la valoarea energiei de agitaie termic; n acest moment, electronul se va gsi nconjurat de molecule de ap ale cror extremiti pozitive sunt atrase electrostatic. Un astfel de electron poart numele de electron hidratat numit i electron celibatar (single electron, n englez) sau polaron. Dup un timp, electronul se alipete la una din moleculele de ap din jur, declannd reacia: H2O + e- OH- + H. Ionul H2O+ sufer transformarea: H2O+ H+ + OH. Apar, astfel, cei doi radicali liberi H. i OH. care se pot recombina n diferite moduri: H. + H. H2 H. + OH. H2O OH.+ OH. H2O2 n prezena oxigenului au loc urmtoarele reacii: H. + O2 HO2. H. + HO2. H2O2 HO2. + HO2. H2O2 + O2 Se tie c radicalii liberi sunt foarte reactivi din punct de vedere chimic. Radicalii liberi HO2. precum i molecula de H2O2 sunt mai nocivi, deoarece au o via mai lung dect H. i OH.. Periculozitatea radicalilor liberi este legat de tendina lor de a ataca acizii nucleici, enzimele etc. n general, radiaiile ionizante acioneaz att direct ct i indirect. O metod simpl pentru a aprecia ponderea deinut de efectul direct i de cel indirect este iradierea probei n stare lichid i compararea rezultatelor obinute cu cele furnizate de iradierea probei n stare ngheat; dac efectele iradierii probei n stare ngheat sunt mai mici dect n stare necongelat, se poate aprecia c radiaiile au acionat predominant indirect, producnd radioliza apei, dar gheaa a mpiedicat difuzia radicalilor liberi formai.

4. Efectele biologice ale radiaiilor ionizante

Perioada de njumtire efectiv a nuclizilor radioactivi Iradierea organismelor este numit extern cnd sursa de radiaii este n afara corpului i intern cnd nuclizii radioactivi se afl n organism, intrai acolo prin ingestie, respiraie sau injectare.

Iradierea intern este frecvent ntlnit n practica medical, mai cu seam n tehnica scintigrafiei (prin care se obine imaginea distribuiei unor nuclizi radioactivi care se concentreaz n organul pentru care au afinitate). n aceast situaie, consecinele negative ale iradierii depind de timpul de njumtire prin dezintegrare al nuclidului (Tn) i de timpul de njumtire pe cale biologic (Tb) prin eliminarea din organism a nuclidului. Dispariia din organism a nuclidului se face ntr-o manier exponenial cu o perioad de njumtire efectiv Te care se calculeaz din relaia: 1/Te = 1/Tn + 1/Tb Efectele somatice i genetice ale radiaiilor ionizante Efectele somatice apar n diferite esuturi i organe, dac doza de radiaie depete un anumit prag i depind de radiosensibilitatea esuturilor, adic de capacitatea lor de a rspunde la iradiere printr-o leziune observabil. Legea Bergonie i Tribondeau afirm c un esut este cu att mai radiosensibil cu ct este mai puin difereniat i cu ct n el au loc mai multe mitoze. Cea mai sensibil faz a mitozei este metafaza, urmat de profaz, anafaz i telofaz. Radiosensibilitatea unui esut crete dac pH-ul este alcalin i dac esutul este hidratat, oxigenat i cald; ea scade n condiii de pH acid, deshidratare, anoxie i frig. Efectele genetice se datoreaz leziunilor cromozomiale din nucleele spermatozoizilor i ovulelor genitorilor i se manifest la descendeni prin moarte, boli genetice i mutaii (rareori favorabile). Nu exist prag la efectele genetice, n sensul c i cea mai mic doz imaginabil are ansa ei s produc o leziune genetic, dar este evident c probabilitatea efectelor genetice crete cu doza. Efectele radiaiilor se studiaz n special pe bacterii, pe musculia de oet Drosofila melanogaster, pe nematodul Caenorhabditis elegans precum i pe alte animale de experien. Studii pe oameni se fac cu prilejul iradierilor accidentale i terapeutice. Asemenea ocazii s-au ivit dup 1945, cnd au explodat primele bombe atomice, ntre 1959 i 1962 cnd se practica iradierea masiv pentru prevenirea respingerii grefelor, dup 1986 cnd a avut loc avaria de la Cernobl etc.

4. Protecia mpotriva radiaiilor ionizante

Doza maxim admisibil Cel mai judicios mod de protecie mpotriva radiaiilor este limitarea dozei recepionate. Exist o comisie internaional pentru protecia mpotriva radiaiilor ionizante (CIPR) care stabilete doza maxim admisibil (DMA) anual, adic doza total pe care o poate primi un om ntr-un an, fr a suferi leziuni observabile (nu se ine seama de efectele genetice). Au fost stabilite DMA pentru fiecare organ sau esut. Omul, ca organism ntreg, are radiosensibilitatea organelor sale cele mai radiosensibile (acestea sunt gonadele i mduva hematogen). DMA anual pentru om este 5 mSv/an i coincide cu DMA pentru gonade i mduva hematogen, n timp ce DMA pentru oase sau tiroid este 30 mSv/an. Organismul uman absoarbe din fondul natural de radiaii doza biologic de 1 mSv/an, la care se adaug 0,2 mSv/an din partea fondului artificial de radiaii.

Un examen radiologic pulmonar furnizeaz 0,27 mSv iar o radiografie abdominal produce 6,2 mSv (adic mai mult dect DMA ntr-un an). O iradiere de 6 Sv este urmat de moarte dup un interval de o lun. Protecia fizic mpotriva radiaiilor ionizante se face pe trei ci : distan ct mai mare ntre surs i individ, timp ct mai mic petrecut n vecintatea sursei i interpunere de ecrane ntre surs i individ. Radiaiile pot fi oprite cu uurin chiar de o foaie de hrtie. Radiaiile necesit ecrane din materiale plastice sau din metale uoare (aluminiu). Radiaiile X i pot fi numai parial oprite de ecrane de plumb; acestea trebuie s fie ct mai groase. Protecia mpotriva neutronilor necesit trei tipuri de ecrane: -un ecran din ap, ap grea sau grafit care s ncetineasc neutronii -un ecran din cadmiu pentru absorbia neutronilor ncetinii, conform reaciei nucleare: Cd113 + n Cd114 + -un ecran din plumb pentru atenuarea radiaiei rezultate. Protecia chimic mpotriva radiaiilor ionizante Acest tip de protecie const, n primul rnd, n anihilarea radicalilor liberi provenii din radioliza apei. mpotriva acestora se utilizeaz aa numiii "vntori de radicali liberi" printre care se numr substane de tipul cisteaminei ( HS - CH2 - CH2 - NH2 ), avnd formula general M - SH. Reaciile care au loc sunt: M-SH + R. RH + MS. MS. + MS. MS-SM Printre substanele utilizate n protecia chimic se numr i derivaii pirogalolului i naftolului (care creaz anoxie n esuturi, mpiedicnd formarea peroxizilor lipidici), histamin, serotonin, vitamine, hormoni, acizi nucleici etc.

CULEGEREA, AMPLIFICAREA, PRELUCRAREA I INREGISTRAREA BIOSEMNALELOR

1. Culegerea biosemnalelor; electrozi, traductori, biosenzori
Electrozi Un metal imersat ntr-un electrolit poate fi considerat electrod dac att el ct i electrolitul fac parte din acelai circuit electric. Orice metal introdus n ap dobndete un surplus de electroni liberi, ca urmare a desprinderii i dizolvrii n ap a unui numr de ioni metalici pozitivi. Are loc o reacie de oxidare a metalului, reacie care, pentru un metal M de valen z, se scrie M M+z + ze-. Este evident c n urma acestei reacii, ntre metal i lichidul n care este imersat acest metal, apare o diferen de potenial electric (metalul fiind negativ n raport cu lichidul). Dac metalul este introdus nu n ap distilat, ci ntr-o soluie bogat n ioni ai aceluiai metal, exist posibilitatea ca o parte a acestor ioni s se reduc (prelund electroni de la

metal) i s fie ncorporai de acesta ca atomi neutri ( M+z + ze- M ). n aceast situaie, metalul poate deveni chiar pozitiv fa de lichid. Diferena de potenial electric dintre metal i soluia n care acesta este imersat depinde, deci, de concentraia ionilor metalici [M+z] n soluie. Relaia care precizeaz aceast dependen este : E = E + (RT/zF) log [M+z] R fiind constanta universal a gazelor, T temperatura absolut i F numrul lui Faraday. n relaie apare E, care poart numele de potenial standard al electrodului i este diferena de potenial care ar aprea ntre metal i electrolit dac [M+z] ar fi egal cu unitatea, la temperatura de 25C. Pentru msurarea experimental a acestei diferene de potenial este nevoie de un al doilea electrod imersat n electrolit, electrod care s nu creeze, la rndul lui, o diferen de potenial fa de soluie. Un asemenea electrod cu potenial zero, ns, nu exist, astfel nct a fost necesar s se atribuie, prin convenie, valoarea zero potenialului electrodului standard de hidrogen, care devine, astfel, un electrod de referin. Prin comparare cu electrodul de referin de hidrogen, au putut fi determinate potenialele standard E ale diferitelor metale (de exemplu, EFe=-0,44 V, EAg=+0,79 V, EH fiind 0,00 V). Deoarece electrodul de hidrogen este greu de confecionat, se prefer folosirea drept electrozi de referin a electrodului de argint clorurat sau a celui de calomel. Aceti electrozi sunt, n plus, nepolarizabili. Electrozii sunt utilizai pentru : -Msurarea propriului lor potenial de electrod E, n scopul calculrii concentraiei acelor specii ionice la care electrozii sunt sensibili. Un electrod sensibil la un anumit ion (i, totodat, selectiv fa de acel ion), se confecioneaz dintr-un balon de sticl cu perei foarte subiri i care nu pot fi traversai dect de acel ion). Sticla obinuit este permeabil pentru ionii de hidrogen i este folosit, de aceea, pentru determinarea pH-ului. Exist reete pentru fabricarea unor sortimente de sticl, permeabile numai pentru anumii ioni, alii dect H+. Cu electrozi confecionai din aceste sticle se poate msura concentraia ionilor de Na+, K+, Ca++, Mg++, Cl-, F-, I- etc., iar prin miniaturizarea electrozilor se pot face determinri chiar la nivelul unei singure celule. Acest tip de determinri poart numele de analize poteniometrice, deoarece rezistena voltmetrelor utilizate este att de mare nct curentul prin circuit este, practic, zero. -Msurarea unei tensiuni electromotoare (t.e.m.), alta dect cea identificat ca potenial de electrod (generat, deci, de o alt surs de t.e.m. existent n electrolit). Asemenea surse sunt i potenialele electrice celulare de repaus sau de aciune dintr-un sistem biologic, poteniale ce necesit introducerea n celul a unor microelectrozi pentru a fi msurate. Potenialele de aciune extracelulare, aparinnd esuturilor i organelor, se culeg cu ajutorul macroelectrozilor. Perechea de electrozi cu care se culeg potenialele trebuie s aib poteniale de electrod identice; dac exist o diferen ntre potenialele electrozilor, aceasta trebuie cunoscut n prealabil i sczut din rezultatele msurtorilor ntreprinse. -Msurarea curenilor injectai ntr-o soluie electrolitic, n condiiile meninerii electrozilor la poteniale constante (analize amperometrice, coulombmetrice i polarografice), pentru determinarea cantitii de electricitate care intr ntr-o reacie de oxido-reducere de tipul substan redus substan oxidat + ze-.

Cunoscndu-se numrul de electroni care intr ntr-o reacie redox, se poate aprecia concentraia substanei din prob, att n forma oxidat ct i n cea redus . n acest mod se poate determina concentraia oxigenului (i variaia acesteia) n diverse soluii de electrolii, inclusiv n celule i esuturi vii, cu ajutorul electrozilor de oxigen. Exist un procedeu voltametric, n care ntre un fir de platin i un electrod de referin (de calomel sau Ag/ AgCl) se creeaz, cu ajutorul unei surse exterioare de curent continuu, o diferen de potenial de 0,7 V, firul de platin fiind negativ (catod). Oxigenul se reduce la suprafaa catodului, iar curentul consumat n acest scop este msurat, fiind proporional cu concentraia oxigenului. Reacia redox este, n acest caz, O2(gazos) + 4e- + 2 H2O 4 OH. Exist i un procedeu galvanic de determinare a concentraiei de oxigen, n care se folosete un electrod de Pb i altul de Ag. Avantajul acestui procedeu este c negativarea catodului (Ag) se face prin propria diferen de potenial electric dintre electrozi, fr a mai fi necesar o surs exterioar de curent; n acest caz, la reacia de mai sus se adaug reacia consumatoare de plumb Pb+4OH- PbO2--+2 H2O + 2eTraductori Traductorul este un dispozitiv care transform o mrime fizic de un anumit tip ntr-o mrime echivalent de alt tip. Marea majoritate a traductorilor utilizai n explorarea biomedical transform mrimi neelectrice (mecanice, termice, radiante etc.) captate de la sistemele biologice, n mrimi electrice (sau electronice), asemenea traductori fiind denumii traductori electrici. Exist i alte tipuri de traductori, care transform semnalele primite de la sistemele biologice n semnale optice; aceti traductori se numesc, uneori, n literatura de specialitate, optozi sau optrozi (probabil printr-o analogie de termeni electrod-optod). Printre traductorii electrici se numr: Traductorii mecano-electrici, care transform mrimi mecanice ca fora, deplasarea, presiunea etc. n mrimi electrice (sau n variaii ale unor mrimi electrice). Exist traductori dinamici i traductori statici. Traductorii dinamici nu pot opera cu mrimi mecanice constante ci numai cu variaii ale acestora. Printre traductorii dinamici se numr traductorii piezoelectrici i traductorii electrodinamici. Traductorii electrodinamici se bazeaz pe apariia unei tensiuni electromotoare (t.e.m.) ntr-o bobin, ca urmare a variaiei unui flux magnetic, provocat de o micare mecanic. T.e.m. va fi proporional cu viteza de variaie a fluxului magnetic i, deci, proporional cu viteza de variaie a acestei micri mecanice. Din punct de vedere constructiv, traductorii electrodinamici presupun micarea unui magnet n interiorul unui solenoid sau micarea unei bobine ntr-un cmp magnetic . Traductorii mecanoelectrici statici permit obinerea unei variaii n timp a unui parametru electric (rezisten, inductan, capacitate etc.) identic cu cea a parametrului mecanic tradus. n traductorul mecanoelectric cu lichid, micarea mecanic este msurat prin rezistena electric a unui ansamblu format dintr-un fir metalic nepolarizabil i o soluie de electrolit n care este cufundat, mai adnc sau mai puin adnc, firul. Dac ntr-un traductor electrodinamic, n locul magnetului se utilizeaz un miez mobil de ferit i se msoar inductana bobinei, se obine un traductor static care permite evidenierea n orice moment a poziiei miezului n solenoid. Exist numeroase tipuri de traductori mecanoelectrici statici; printre ei, de o bun apreciere se bucur traductorul mecanoelectronic RCA 5737, alctuit dintr-un tub electronic n care, prin variaia distanei

anod-catod (produs de fenomenul mecanic investigat) are loc o variaie important a curentului anodic. Printre traductorii dinamici se numr i traductorii piezoelectrici Traductorii piezoelectrici se bazeaz pe proprietatea unor cristale (cuar, sare Seignette etc.) de a separa pe feele lor sarcini electrice, la o solicitare mecanic exterioar. Cu ajutorul unor electrozi plasai pe cele dou fee ale cristalului, se poate culege o diferen de potenial electric, proporional cu presiunea mecanic aplicat. Cristalul genereaz semnale electrice cnd presiunea variaz, frecvena minim a acestor variaii de presiune ce pot fi traduse fiind cu att mai apropiat de zero cu ct rezistena electric a voltmetrului utilizat este mai mare. Traductorii magnetoelectrici sunt utilizai pentru detectarea variaiilor cmpului magnetic asociat biocurenilor electrici; ei permit realizarea unor magnetograme (magnetocardiograme, magnetoencefalograme etc.) care aduc informaii suplimentare fa de electrogramele corespunztoare (EKG, EEG etc.). Traductorul magnetoelectric este un magnetometru supraconductor, care utilizeaz una sau mai multe spire rcite sub temperatura critic (ce le asigur calitatea de supraconductor) i plasate n apropierea organului investigat, fr a intra n contact cu corpul pacientului.Variaiile fluxului magnetic genereaz n spire cureni electrici indui care sunt amplificai i nregistrai. Traductorii termoelectrici permit stabilirea temperaturii unui corp precum i a variaiei ei n timp, prin msurarea unor parametri electrici care depind de temperatur, aa cum sunt rezistivitatea unor substane sau t.e.m. aprut la jonciunea unor metale diferite. Termometrele cu rezisten metalic se bazeaz pe dependena de temperatur a rezistenei unui fir metalic R = Ro(1 + T). Se utilizeaz aa numitul montaj n punte n care un bra este firul metalic (de platin sau de nichel) iar cellalt bra este un fir de constantan (aliaj de Cu - 60% i Ni- 40%) care are un coeficient termic aproape de zero. Termometrele cu termistori se bazeaz pe proprietatea unor oxizi metalici de a avea un coeficient de temperatur foarte mare (de circa zece ori mai mare dect cel al metalelor), coeficient care poate fi pozitiv (BaTiO3) sau negativ (amestec de Fe2O3 i TiO2). Dei termistorii sunt foarte sensibili la variaiile de temperatur, utilizarea lor ridic probleme legate de etalonare, deoarece rezistena electric a termistorilor variaz exponenial (i nu liniar) cu temperatura. Termometrele cu semiconductori se bazeaz pe marea sensibilitate la variaii de temperatur a jonciunilor pn, curenii ce traverseaz aceste jonciuni crescnd cu temperatura. Se utilizeaz diode sau tranzistori (jonciunea baz-emitor fiind cea termosensibil). Termocuplurile se bazeaz pe efectul Seebeck (generarea unei tensiuni electromotoare cnd dou jonciuni a dou metale diferite sunt meninute la temperaturi diferite, t.e.m. fiind direct proporional cu diferena de temperatur). Perechea de metale cupru i nichel permite construirea unor termocupluri miniaturizate (pe suport de cuar) capabile s msoare temperaturi ale unor volume foarte mici de esut biologic. Precizia termocuplurilor este limitat de faptul c una dintre suduri trebuie meninut la o temperatur constant i cunoscut. Traductorul cu cuar se bazeaz pe variaia cu temperatura a frecvenei de oscilaie a unui cristal de cuar. Deoarece aceast variaie este de circa 1000 Hz/C, msurarea ei cu un frecvenmetru bun permite o precizie de 0,0001C n msurarea temperaturii.

Traductorii pentru termografie sunt detectori de radiaii infraroii realizai din aliaje In/Sb sau HgTe/CdTe; aceti detectori sunt sensibili la domeniul radiaiilor infraroii cu lungime de und n jur de 10 m, emise de corpurile aflate la 37C (deci i de corpul uman). Detectorul este meninut la 70 K cu ajutorul azotului lichid. Suprafaa corpului este baleiat (parcurs punct cu punct), folosindu-se un sistem optic i mecanic, prevzut cu oglinzi i lentile n infrarou iar imaginea care arat distribuia temperaturii pielii apare pe ecranul unui monitor (vezi fig) Traductorii fonoelectrici sunt microfoane electrodinamice, capacitive sau piezoelectrice, capabile s preia i s transmit fidel semnale acustice cu frecvene de pn la 1000 Hz; aceste microfoane sunt prevzute cu un inel de cauciuc i se aplic pe piele, n zona precordial (exist i microfoane miniaturizate ce pot fi introduce n vasele de snge sau n inim cu ajutorul unor sonde). Traductorii pentru radiaii radioactive sunt menionai n acest capitol, dei radiaiile nu sunt semnale biologice; cnd este vorba, ns, de radiaii emise de radioizotopi ncorporai n celule i esuturi, termenul de biosemnale (purtnd informaie referitoare la sistemul biologic care a ncorporat izotopii) devine legitim. Printre aceti traductori se numr : -camera de ionizare, care recolteaz un volum de aer din zona investigat i l plaseaz ntre doi electrozi meninui la o diferen de potenial constant de ctre o surs de curent continuu . Prezena n camera de ionizare a aerului coninnd ioni produi de radiaiile radioactive, permite instalarea unui curent electric proporional cu ritmul de producere a acestor ioni i, deci, cu debitul dozei incidente. Pentru msurarea dozei incidente acumulate ntr-un interval de timp, electrozii se ncarc la o anumit tensiune, dup care sunt deconectai de la surs; dup un timp, se msoar noua tensiune dintre electrozi iar diferena dintre tensiunea iniial i cea final este proporional cu doza incident. -Detectorul Geiger-Muller este un tub cilindric ce conine un gaz (sau un amestec de gaze) izolat de aerul atmosferic. Peretele metalic sau metalizat al cilindrului este electrodul negativ, cel pozitiv fiind un fir central (dispus pe axul cilindrului) iar diferena de potenial ntre electrozi este de 500 - 1000 V. Ptrunderea n cilindru a unui electron sau a unui foton X sau gamma este urmat de apariia unei perechi de ioni, rezultai din smulgerea unui electron aparinnd unei molecule de gaz. Cei doi ioni sunt atrai de electrozii cu semn contrar i, n drumul ctre ei, ciocnesc i ionizeaz multe alte molecule de gaz. Noii ioni astfel produi sunt, la rndul lor, atrai de electrozi, rezultatul fiind o ionizare n avalan, care duce la o cdere brusc de tensiune n circuit (sesizat ca un impuls, de ctre un numrtor de impulsuri, i producnd un pocnet ntr-un difuzor). Numrul de impulsuri este proporional cu doza incident, iar numrul de impulsuri pe unitatea de timp msoar debitul dozei incidente. -Traductorii termoluminesceni se bazeaz pe proprietile unor molecule (LiF, CaF2) de a-i propulsa electronii periferici pe nivele superioare de energie, ca efect al absorbiei radiaiei radioactive i proporional cu doza absorbit. Prin nclzire ulterioar, moleculele se dezexcit i emit radiaii vizibile msurate de un traductor fotoelectric. -Detectorii cu scintilaie conin n structura lor substane (NaI) care emit radiaii vizibile (scintilaii) cnd interacioneaz cu fotoni gamma. Scintilaiile sunt amplificate de un fotomultiplicator iar impulsurile generate de acesta sunt numrate de un numrtor de impulsuri. Dup cum se vede n figur, fotocatodul reacioneaz prin efect fotoelectric la scintilaiile produse de radiaii; electronii emii de fotocatod sunt atrai de un electrod

pozitiv numit dinod, pe care l ciocnesc, smulgndu-i un mare numr de electroni, care vor fi atrai de o a doua dinod mai pozitiv .a.m.d., pn ce anodul este pus n situaia de a recepiona un numr uria de electroni pentru o singur scintilaie. -Detectorii cu scintilator lichid conin substane chimice fluorescente dizolvate ntr-un solvent n care va fi introdus esutul sau suspensia de celule care au incorporat radioizotopi -radioactivi. Unele dintre substanele fluorescente emit radiaii ultraviolete, ca urmare a impactului cu electronii , iar celelalte emit radiaii vizibile sub efectul radiaiilor ultraviolete generate de primele, radiaii vizibile care sunt detectate de fotomultiplicator. Detectorul cu scintilator lichid realizeaz un contact direct ntre esutul radioactv i lichidul scintilator permind, astfel, detectarea ntregului numr de electroni emii prin nivelul luminescenei lichidului scintilator. Pentru supravegherea expunerii la radiaii a personalului din unitile nucleare, se utilizeaz dozimetre bazate fie pe gradul voalrii unui film fotografic (fotodozimetru), fie pe apropierea foielor unui electroscop miniaturizat, ncrcat n prealabil (stilodozimetru), ambele dozimetre fiind la purttor i cercetate periodic pentru notarea dozei de radiaie ncasate Traductorii fotoelectrici pot detecta biosemnale luminoase emise de speciile bioluminescente; pe de alt parte, ei sunt pri componente ale multor detectori de biosemnale neluminoase (inclusiv pri ale unor biosenzori). Celula fotoelectric este alctuit dintr-un fotocatod care, iluminat, emite electroni ce vor fi captai de anod, realizndu-se, astfel, un curent electric proporional cu iluminarea. ntre catod i anod trebuie s existe o diferen de potenial electric, asigurat de o surs exterioar. Dac ntre fotocatod i anod se interpun electrozi intermediari (dinode), se obine un fotomultiplicator. Fotorezistenele sunt semiconductori care i modific rezistena electric proporional cu gradul de iluminare. Pentru a deveni traductori fotoelectrici, fotorezistenele trebuie incluse ntr-un circuit electric prevzut cu surs de curent continuu i cu ampermetru destinat msurrii curentului care trece prin fotorezisten. Fotorezistenele sunt sensibile la o gam larg de frecvene ale radiaiilor electromagnetice, ncepnd de la radiaii infraroii i terminnd cu razele X. Fotodiodele i fototranzistorii sunt astfel construii, nct s permit iluminarea jonciunilor dintre semiconductori (n cazul fototranzistorului este vorba de jonciunea baz-emitor). i acesti traductori necesit surs exterioar de alimentare cu curent continuu. Fotoelementele (celule fotovoltaice sau celule cu strat de baraj) nu au nevoie de o asemenea surs deoarece ele produc, sub efectul iluminrii, propria lor tensiune electric, ce poate fi msurat cu un voltmetru . Biosenzori Biosenzorii sunt dispozitive care folosesc molecule biologice (ca sistem de recunoatere) pentru a detecta alte molecule biologice sau substane chimice (numite inte) . Primul biosenzor a fost realizat de Leland Clark n 1962. El a imobilizat glucozo-oxidaza pe vrful unui electrod de oxigen. Ca urmare a reaciei dintre enzim i glucoz, din prob apare H2O2 care se descompune conform reaciei H2O2 2H+ + O2+2e-, iar oxigenul eliberat este msurat amperometric.

Biosenzorii sunt dispozitive capabile s detecteze prezena unor substane cu ajutorul unui sistem de recunoatere de natur biologic, cuplat cu un traductor electric, electronic, optic, termic sau piezoelectric. n majoritatea biosenzorilor, sistemul biologic de recunoatere este imobilizat pe traductor. Sistemele de recunoatere de natur biologic sunt extrem de variate, de la enzime i anticorpi, pn la bacterii, fragmente de organe (cortex renal de porc pentru detectarea glutaminei) sau chiar organe (antene de crustaceu pentru msurarea glutamatului). Traductorii care sunt cel mai frecvent asociai biosenzorilor sunt: -Traductori electrici poteniometrici i/sau amperometrici: Un biosenzor care are ca substan de recunoatere o enzim, imobilizeaz enzima respectiv prin lipirea ei de traductorul chemo-electric. Moleculele int aflate n prob difuzeaz ctre enzima imobilizat, unde are loc o reacie enzimatic, n urma creia se schimb pH-ul sau se modific potenialul redox (de exemplu, se consum oxigen care se detecteaz cu electrozi amperometrici) sau apar anumii produi (de exemplu NH4+ sau HCO3-, care sunt detectai cu electrozi poteniometrici). Un biosenzor de glucoz implantat subcutan monitorizeaz glicemia i ar putea s pun in micare, la nevoie, o pomp de insulin. -Traductori electronici: Mai frecvent utilizai sunt tranzistorii cu efect de cmp (Sistemul ISFET-Ion Sensitive Field Effect Transistor), a cror conductan depinde de polarizarea electric a electrodului de poart, polarizare care poate fi influenat de diveri ioni sau molecule (i n special de pH). -Traductori conductimetrici: Traductori conductimetrici detecteaz schimbri ale conductivitii probei ca urmare a interaciei cu sistemul biologic de recunoatere. -Traductori optici: Traductorii optici sunt asociai cu fibre optice (de obicei o pereche); printr-una din fibre se trimite un semnal optic ctre o substan fluorescent aflat pe terminaia celeilalte fibre prin care se culege semnalul fluorescent ce urmeaz s fie analizat spectrometric. Traductorii optici pot fi, n functie de configuraia lor optic, traductori extrinseci, intrinseci i de luminescen n cazul traductorilor extrinseci, radiaia incident nu trece prin prob ci atinge doar suprafaa acesteia, schimbndu-i unele proprieti n urma reflexiei . n cazul traductorilor intrinseci, radiaia incident trece prin prob i interacioneaz direct cu aceasta; se msoar transmisia sau extincia. n cazul traductorilor de luminescen, pe un circuit integrat (chip de siliciu) se aplic bacterii bioluminescente -Traductori piezoelectrici: Traductorul piezoelectric este un cristal de cuar pe care este imobilizat sistemul de recunoatere i a crui frecven de rezonan se modific n funcie de modificarea masei cristalului, ca urmare a degajrii de gaze sau a legrii moleculelor int (de exemplu, pentru fiecare mg n plus, frecvena de rezonan crete cu 2600 Hz, traductorii fiind sensibili chiar la variaii de ordinul 10-12 g) -Traductori calorici (termici): Traductorul caloric detecteaz mici variaii ale temperaturii provocate de legarea intei sau de eventuale reacii enzimatice (termistori enzimatici) -Traductori mecanici

Avantajele utilizrii biosenzorilor constau n marea lor sensibilitate i selectivitate, precum i n rapiditatea rspunsului. Dezavantajele sunt legate de stabilitatea lor redus n timp, precum i de necesitatea respectrii stricte a unor condiii (n special de sterilizare). Un interes deosebit este acordat imuno-senzorilor, capabili s detecteze reacii antigenanticorp; principalul obstacol n progresul cercetrilor n acest domeniu este saturarea rapid cu antigeni a anticorpului ncorporat n biosenzor; eforturile actuale sunt ndreptate spre asigurarea reversibilitii reaciei antigen-anticorp.

2. Sisteme de amplificare a biosemnalelor electrice culese

Schema general a unui sistem de nregistare a biopotenialelor electrice este prezentat n figura. Stimulatorul genereaz impulsuri electrice destinate stimulrii esutului excitabil. Impulsurile electrice se deosebesc ntre ele prin form (rectangular, triunghiular, trapezoidal etc.), amplitudine, durat i frecven de repetiie. Sistemul biologic este stimulat prin intermediul unor electrozi nepolarizabili de stimulare iar biopotenialele electrice aprute sunt culese printr-o a doua pereche de electrozi nepolarizabili de culegere. Este preferabil ca sistemul biologic studiat s se afle ntr-o incint ecranat electric, avnd perei metalici sau din srm mpletit legat la pmnt (numit camer Faraday), pentru ca perturbaiile electrice exterioare s nu poat induce cureni n electrozii de culegere (i s dea natere, astfel, artefactelor de nregistrare). Artefactele pot aprea i ca urmare a culegerii unor biopoteniale produse de esuturi sau organe, altele dect acela care este obiectul investigaiei. nregistrarea pe electrogram a impulsului stimulator poart numele de artefact de stimulare; alte artefacte sunt aa numitele zgomote electrice produse de eventualele contacte imperfecte ntre electrozii de culegere i sistemul biologic. nlturarea acestor artefacte se face prin filtrare electronic, avnd ca rezultat eliminarea prin neamplificare a tensiunilor alternative cu frecvene ce nu sunt caracteristice biopotenialelor investigate. Prin filtrare se ncearc "extragerea din zgomot" a semnalului util. Semnalul filtrat urmeaz s fie amplificat cu ajutorul unui amplificator electronic n componena cruia intr rezistori, condensatori, bobine, diode, tranzistori, circuite integrate etc. Amplificatorul are dou borne de intrare, o rezisten de intrare i dou borne de ieire (ce vor fi legate la o rezisten de ieire). Una dintre cele dou borne de intrare i una dintre cele de ieire sunt legate la pmnt (la mas). Printre caracteristicile amplificatoarelor, cea mai important este fidelitatea, adic proprietatea de a amplifica un semnal fr a-i modifica forma. Ali parametri ai amplificatoarelor sunt : -ctigul n voltaj, care, exprimat n decibeli, este de 10 ori logaritmul zecimal al raportului dintre tensiunea semnalului la ieire i tensiunea semnalului la intrarea amplificatorului, adic 10 log (Vie/Vint) -ctigul n putere, egal cu 10 log (Pie/Pint) db, unde P reprezint puterea electric -raportul semnal-zgomot care, exprimat i el n decibeli, este egal cu 10 log (Vsemnal util/Vperturbaii)

-banda de transfer, care este banda de frecvene pentru care ctigul este identic pentru toate frecvenele semnalului amplificat. Cunoaterea acestei caracteristici este esenial pentru asigurarea fidelitii amplificrii semnalului, nu numai n cazul n care semnalul cules este o tensiune alternativ de o anumit frecven, ci i n cazul unui semnal avnd o form oarecare (cum sunt semnalele biologice). n general, n alctuirea unui amplificator intr dou etaje succesive: un preamplificator de voltaj urmat de amplificatorul propriu-zis de putere. Reglarea dup dorin a ctigului final se face prin intermediul unui poteniometru care asigur cuplarea acestor dou etaje.

3. Sisteme de nregistrare a semnalelor electrice amplificate

Etajul de nregistrare poate fi un nregistrator grafic (inscriptor), un osciloscop, un sistem acustic sau un suport magnetic. nregistratoarele grafice cu nscriere analogic dispun de un vrf inscriptor care las urme pe o band de hrtie ce se mic cu o anumit vitez. Principalele tipuri constructive de inscriptoare analogice sunt : -inscriptoare cu cerneal, la care vrful inscriptor este o peni sau un creion cu fibr (carioca); -inscriptoare cu jet de cerneal, la care un jet rectiliniu de cerneal este proiectat pe hrtie sub diferite direcii sau la care jetul pornete pe o singur direcie dar este deviat de cmpuri electrostatice nainte de a ajunge la hrtie; -inscriptoare cu hrtie carbon, la care vrful inscriptor preseaz o hrtie de tip indigo suprapus pe hrtia de nregistrare; -inscriptoare cu hrtie termosensibil, la care vrful inscriptor este nclzit, lsnd urme pe hrtia care are proprietatea de a-i schimba culoarea la cald; -inscriptor cu hrtie fotosensibil, unde rolul vrfului inscriptor este jucat de o raz de lumin; -inscriptor prin puncte, unde nu exist un singur vrf inscriptor mobil ci mai multe vrfuri fixe, dar care preseaz succesiv hrtia nregistratoare. Osciloscopul permite vizualizarea semnalelor electrice pe un ecran fluorescent, prin proiectarea pe acesta a unui fascicul de electroni accelerai care produc n zona de impact un punct luminos (spot). Acestui spot i se imprim o micare cu vitez constant, pe o direcie orizontal, cu ajutorul unui subansamblu electronic numit etaj de baleiaj. Concomitent, fasciculul electronic este deplasat n sus sau n jos (de-a lungul axei Y), proporional cu diferena de potenial de la bornele osciloscopului. Pentru aceasta, tubul catodic al osciloscopului este prevzut cu dou perechi de plci de deflexie, una fiind situat n plan vertical pentru baleierea ecranului iar cealalt, n plan orizontal (pentru msurarea tensiunii semnalului electric). Principalul avantaj al nregistrrii semnalelor cu osciloscopul este legat de ineria mecanic extrem de mic a fasciculului de electroni, fapt ce permite nregistrarea fidel a unor variaii de potenial caracterizate de frecvene foarte mari. Imaginea aprut pe ecranul tubului catodic poate fi fotografiat sau filmat; exist i tuburi catodice cu memorie care pot reine pe ecran imaginea unui traseu, n vederea copierii pe o foi transparent de hrtie sau a fotografierii semnalului. Simultan cu nregistrarea grafic, un difuzor poate reda sonor semnalul; aceast situaie se ntlnete n serviciile spitaliceti, permind medicului s fie permanent la curent cu

starea funcional a inimii pacientului, chiar n intervalele de timp n care nu poate privi ecranul osciloscopului. nregistrarea semnalelor pe suport magnetic necesit un magnetofon special, capabil s realizeze n prealabil transformarea semnalelor, din semnale modulate n amplitudine n semnale modulate n frecven, utiliznd n acest scop o tensiune electric alternativ a crei frecven variaz n timp proporional cu valorile instantanee ale tensiunii semnalului. Noul semnal obinut conine ntreaga informaie a semnalului original; el poate fi mai uor transmis la distan, poate fi mai uor convertit ntr-o nou form care s permit utilizarea computerelor i, prin demodulare, permite revizualizarea semnalului original pe ecranul unui tub catodic. Se vede c pe ecranul osciloscopului apare un prim semnal, care este imaginea impulsului ce stimuleaz nervul median (semnal numit artefact de stimulare), urmat de semnalul propriu-zis, ce red forma potenialului unitii motorii. ntre apariiile celor dou semnale se scurge un timp, necesar propagrii impulsului nervos de la electrozii de stimulare rn la cei de culegere. Prin mprirea distanei dintre ES i EC la timpul de conducere citit pe ecranul osciloscopului, se obine viteza de conducere a impulsului nervos. Biosemnalele nregistrate urmeaz s fie analizate i interpretate de un specialist, care apreciaz starea funcional a sistemului biologic investigat i stabilete diagnosticul eventualei boli de care sufer pacientul. Specialistul poate fi ajutat de un computer, dac reuete s introduc parametrii semnalului n memoria RAM a acestuia i dac dispune de un program de prelucrare i interpretare a tipului de semnale investigate. Utilizarea computerului presupune existena unei interfee amplificator-computer care s converteasc semnalele amplificate modulate n sistem analogic n semnale modulate n sistem digital (convertor analog-digital). n acest scop, amplitudinea semnalului este msurat din timp n timp, obinndu-se un ir de valori numerice ale tensiunii instantanee, care pot fi introduse n memoria calculatorului. Pentru ca acest ir de valori s preia ct mai mult din informaia coninut n semnalul analogic original, este necesar ca intervalele de timp dintre dou msurri succesive ale tensiunii s fie ct mai mici. n prezent, explorarea biomedical asistat de calculator este din ce n ce mai rspndit, pe msur ce se elaboreaz softul necesar (programe de prelucrare pe calculator).

4. Amplificarea i nregistrarea altor biosemnale

Amplificarea i nregistrarea biosemnalelor mecanice Mecanogramele sunt nregistrri ale micrilor unor segmente ale organismului biologic sau nregistrri ale forelor mecanice generate de acestea. Este vorba, n general, de micri produse de contracii musculare (n rndul crora contraciile cardiace ocup un loc important) dar i de presiuni generate de acumularea unor lichide n caviti nchise. Traductorii mecanoelectrici (i n anumite cazuri traductorii fotoelectrici) furnizeaz semnale electrice care sunt filtrate, amplificate, nregistrate i analizate conform schemei presentate deja n paragraful referitor la nregistrarea biopotenialelor electrice. De cele mai multe ori se utilizeaz canalele de amplificare ale unei instalaii numite poligraf (n paralel cu amplificarea unor biopoteniale electrice).

Mecanocardiogramele nregistreaz micrile apexului (vrfului) cardiac (apexograma) precum i micrile produse de pulsaii la nivelul carotidei (carotidograma), a venei jugulare (jugulograma) etc. Balistocardiografia este o tehnic n care se nregistreaz micrile globale de recul ale corpului, ca urmare a contraciilor cardiace. Un traductor mecanoelectric detecteaz variaiile acceleraiei unei mese foarte uoare, sprijinit pe perne de aer, mas pe care este culcat pacientul. Semnalele electrice sunt amplificate de canalul unui poligraf i nregistrate grafic. Electrochimografia este nregistrarea grafic a micrilor unui organ (de regul inima), utilizndu-se n acest scop variaiile de luminozitate ale acelor puncte ale unui ecran radiologic aflate n dreptul marginilor imaginii n raze X a organului studiat. Semnalele generate de un traductor fotoelectric sunt amplificate i nregistrate. Oculografia reprezint nregistrarea grafic a micrilor globilor oculari; se utilizeaz lentile de contact speciale, pe suprafaa crora este plasat o surs luminoas miniaturizat, a crui fascicul luminos cade pe o un traductor fotoelectric. Micrile globilor oculari sunt traduse n variaii ale curentului fotoelectric, variaii care sunt amplificate i nregistrate. Velocimetria Doppler este o metod prin care se msoar viteza de curgere a sngelui prin vase i care se bazeaz pe faptul c undele acustice reflectate de un obiect mobil (n cazul de fa hematiile) i modific frecvena aparent proporional cu viteza acelui obiect (efect Doppler). Se utilizeaz un traductor de ultrasunete avnd o component emitoare de ultrasunete (cristal piezoelectric) i una receptoare, capabil s detecteze ultrasunetele reflectate de eritrocite. Diferena dintre frecvena semnalului incident i cea a semnalului reflectat este pus n eviden de un etaj electronic special dup care este amplificat i nregistrat. Velocimetrele Doppler simple se limiteaz s emit un semnal sonor prin care comunic medicului c vasul cercetat nu este obturat; cele mai performante msoar viteza sngelui i, dac se cunoate seciunea transversal a vasului, permit calcularea debitului sangvin prin vasul investigat. Amplificarea i nregistrarea biosemnalelor acustice Semnalele electrice produse de microfonul plasat n dreptul organului generator de semnale acustice (inima) sunt preluate de un preamplificator cu band de transfer cuprins ntre 2 i 1000 Hz i avnd un ctig de circa 30 db. Preamplificatorul este prevzut cu 5 filtre care pot fi alese de operator cu ajutorul unui comutator i care selecioneaz frecvenele joase, medii-joase, medii, medii-nalte i nalte (peretele toracal atenueaz n special frecvenele nalte). Pe fonocardiogram apar patru semnale, corespunznd unui acelai numr de zgomote cardiace. Zgomotul I marcheaz nceputul sistolei ventriculare iar zgomotul II apare la sfritul acesteia. Celelalte dou zgomote au amplitudini mult mai mici dect primele dou. Amplificarea i nregistrarea biosemnalelor magnetice Magnetometrul SQUID detecteaz cmpuri magnetice de mii de ori mai slabe dect cel terestru. Marea sensibiltate a acestui traductor face necesar ecranarea magnetic a incintei n care se afl pacientul, cu ajutorul unor foi de tabl de fier avnd grosimi de ordinul centimetrilor. n spira magnetometrului sunt indui cureni produi de fluxurile magnetice variabile generate de biocurenii de aciune. Magnetometrul poate nregistra, ns, i cmpuri magnetice constante, dac se imprim traductorului micri de rotaie sau de vibraie cu frecvene de cteva zeci de Hz,

pentru ca spira s intersecteze, totui, liniile cmpului magnetic constant. Prin aceast posibilitate, magnetomet

BAZELE FIZICE ALE IMAGISTICII MEDICALE

1. Radioscopia n raze X
Imagistica medical permite obinerea unor imagini ale corpului omenesc, imagini care scot n eviden detalii inaccesibile metodelor optice obinuite. Raxele X sunt radiaii electromagnetice, avnd lungimi de und de ordinul picometrilor (10-12m); producerea lor se face fie prin frnarea electronilor accelerai (radiaii X de frnare), fie prin tranziii energetice ale electronilor din straturile interioare ale nveliului atomic (radiaii caracteristice). Razele X de frnare se obin cu ajutorul tubului Coolidge, care este o incint de sticl vidat, n care se afl un catod ce emite electroni prin efect termoelectronic i un anod ce accelereaz electronii emii, printr-o tensiune electric aplicat de 10 - 400 kV. La impactul cu anodul (numit i anticatod), energia cinetic a electronilor frnai se transform n energia razelor X emise de anticatod. Razele X au o mare putere de ptrundere; traversnd un corp, razele X sunt mai mult sau mai puin absorbite (atenuate) de diversele regiuni ale acestui corp, astfel c pe un ecran plasat dincolo de acest corp, zonele mai dense apar mai umbrite (intensitatea razelor X care ajung la ecran este mai mic). Dac ecranul pe care se proiecteaz razele X (dup ce au traversat corpul) este fluorescent, pe el se va contura o imagine vizibil dar foarte puin luminoas, imagine care poate fi observat doar ntr-o camer obscur, dup o prealabil adaptare la ntuneric a vederii.

2. Tubului de intensificare a imaginii

Cu ajutorul tubului de intensificare a imaginii se pot obine imagini de mii de ori mai strlucitoare dar de dimensiuni mai mici, observabile printr-o lup sau lunet mritoare. Tubul de intensificare a imaginii este o incint vidat cu perei de sticl, n interiorul creia se afl dou ecrane fluorescente, unul mare E1 (cu diametru de 10 - 30 cm) pe care cad razele X care au strbtut corpul i unul mic E2 (cu diametru de civa cm) pe care apare imaginea final foarte luminoas. Ecranul mare conine un strat metalic subire care joac rol de fotocatod iar ecranul mic este asociat cu un anod. ntre fotocatod i anod se aplic o diferen de potenial electric care accelereaz electronii emii de fotocatod, determinndu-i s loveasc cu violen ecranul mic. De-a lungul tubului se afl o serie de ali electrozi care permit focalizarea imaginii, modificare dimensiunilor ei etc.

Dac imaginea aprut pe ecranul mic este nregistrat cu o camer electronic de luat vederi i proiectat pe ecranul unui monitor, condiiile de observare a imaginii radioscopice se mbuntesc considerabil. Att camera de luat vederi (videocaptorul) ct i monitorul au ca piese fundamentale tuburi electronice n care are loc conversia imaginii n semnale electrice (n videocaptor) sau a semnalelor electrice n imagine (n monitor). Tubul camerii de luat vederi este un cilindru vidat n care se afl un fotocatod pe care se proiecteaz, printr-un obiectiv fotografic, imaginea produs de ecranul mic al unui tub de intensificare a imaginii. Electronii emii de fotocatod ajung la o plac subire de sticl semiconductoare aflat la un potenial nul i care este explorat ("mturat", baleiat sau scanat) punct cu punct de un fascicul ngust de electroni produs de un tun electronic. Explorarea se face de la stnga la dreapta i de sus n jos, cu ajutorul unor plci sau bobine de deflexie. Poriunile plcii semiconductoare corespunztoare unor zone cu luminozitate mai mare ale imaginii proiectate pe fotocatod vor avea un potenial pozitiv mai ridicat, datorit emisiei unui numr mai mare de electroni secundari de ctre placa semiconductoare. Aceti electroni vor fi captai de un multiplicator electronic ce va genera un semnal video intens . Semnalele video corespunztoare zonelor mai slab iluminate au o amplitudine mai mic. Se obine, astfel, o succesiune de semnale video de diferite amplitudini, proporionale cu luminozitatea punctelor ce alctuiesc imaginea proiectat pe fotocatod. Aceste semnale sunt transmise prin cablu unui monitor care conine un tub catodic (care este o incint vidat n care un fascicul ngust de electroni, produs de un tun electronic, baleiaz suprafaa unui ecran fluorescent). Baleiajul din monitor este sincronizat cu baleiajul electronic din camera de luat vederi. Intensitatea fasciculului electronic variaz n timp, n funcie de semnalele video sosite de la videocaptor, producnd o fluorescen mai puternic a ecranului n acele zone care corespund unor puncte mai strlucitoare ale imaginii recepionate de camera de luat vederi.

3. Imagini digitale
O imagine poate fi reprezentat i printr-un ir de numere, dac este supus unei conversii analog-digitale, devenind o imagine n form digital sau o imagine digital. n procesul conversiei analog-digitale, imaginea original este descompus ntr-un numr de careuri, cu ajutorul unor linii orizontale i verticale. Reeaua de linii paralele orizontale i verticale alctuiete o matrice, n care se pot distinge rnduri orizontale i coloane verticale (de cele mai multe ori, matricea este ptrat, numrul rndurilor fiind egal cu cel al coloanelor). Fiecare careu din matrice poart numele de pixel. O matrice cu n rnduri i n coloane conine n2 pixeli. Imaginea digital se realizeaz n momentul n care fiecrui pixel i se atribuie o valoare numeric (proporional, de exemplu, cu gradul de luminozitate sau de negrire a imaginii n dreptul acelui pixel). Imaginea digital este un ir de numere corespunztoare succesiunii rndurilor sau coloanelor din matric Desigur, n imagistica medical se utilizeaz matrici mai mari, care opereaz cu mai muli octei pe un rnd (matrici cu 64 de rnduri i 64 de coloane care conin 4096 pixeli, matrici de 128/128 cu 16.384 pixeli etc., pn la matrici de 1024/1024 cu 1.048.576 de pixeli). Cu ct matricea utilizat este mai mare, cu att definiia imaginii ce va aprea pe monitor va fi mai bun.

Imaginile digitale pot fi stocate n memoria RAM a computerelor sau pe discuri magnetice, pot fi prelucrate n vederea ameliorrii contrastului, pot fi transmise la distan etc. O imagine digital poate fi reconvertit ntr-o imagine analogic obinuit n tonuri de gri sau n culori (cu ajutorul unui convertor digital-analogic) i proiectat pe ecranul unui monitor.

4. Tomografia computerizat n raze X

Tomografia computerizat n raze X permite realizarea unor imagini ale unor seciuni transversale n corpul uman, prin prelucrarea n computer a unui mare numr de imagini radioscopice ale acelei seciuni. n acest scop, tubul generator de raze X (tubul Coolidge) este plasat pe o in circular i se poate roti n jurul corpului pacientului, iradiindu-l succesiv dintr-un mare numr de direcii. Razele X care au traversat seciunea studiat ajung la o reea de detectori, astfel plasai nct s corespund careurilor din viitoarea matrice a imaginii digitale a seciunii vzute dintr-o anumit direcie. Exist sisteme mecanice n care sursa de raze X se rotete simultan i solidar cu reeaua de detectori i sisteme n care se rotete doar tubul de raze X, reeaua de detectori fiind staionar i dispus jur mprejurul corpului pacientului. Detectorii sunt mici cristale scintilatoare asociate cu fotodiode, cu fotomultiplicatori sau cu mici camere de ionizare. Fiecare detector genereaz un semnal electric de o amplitudine proporional cu intensitatea razelor X recepionate. La o rotire complet a tubului de raze X n jurul corpului pacientului, se iau cteva sute de "vederi" n raze X i se obin tot attea matrici cu pixeli, crora li se asociaz valori msurate ale razelor X (n total, sute de mii de msurtori individuale realizate de ctre detectori). Imaginea digital a fiecrei vederi este stocat n memoria calculatorului (sau pe harddisc, dac memoria RAM nu este suficient), dup care computerul trece la construirea imaginii digitale finale prin prelucrarea sutelor de vederi individuale. Se obine o matrice final, n care fiecrui pixel i este asociat o valoare numeric proporional cu gradul de opacitate fa de razele X a fiecrei uniti de volum a esutului strbtut de raze (acest mic volum de esut cruia i se asociaz un pixel poart numele de voxel; pentru o matrice de 256/256, un voxel are volumul de 1 mm3). Dimensiunea matricii finale poate fi aleas de operator, n funcie de definiia dorit a imaginii. Rezult, din cele de mai sus, c o raz X strbate, la un moment dat, un ir de voxeli ai esutului, dup care cade pe un detector care nregistreaz atenuarea total produs de toi voxelii, fr a se putea ti ct absoarbe fiecare voxel. Pelucrarea pe calculator a datelor furnizate de cele cteva sute de vederi individuale permite, ns, cunoaterea gradului de opacitate n raze X a fiecrui voxel. Pixelii viitoarei imagini digitale se obin prin atribuirea unei valori numerice fiecrui voxel, valoarea numeric atribuit fiind proporional cu acest grad de opacitate (aceast valoare este, pentru ap, prin definiie, zero; pentru materialele mai opace dect apa este pozitiv i pentru cele mai transparente dect apa este negativ). Imaginea digital final a seciunii transversale prin corpul omenesc poate fi reconvertit cu ajutorul unui convertor digital-analogic i proiectat pe ecranul unui monitor.

5. Tomografia computerizat R.M.N.

Tomografia computerizat de rezonan magnetic nuclear permite obinerea unor imagini ale seciunilor transversale ale corpului omenesc, imagini care pun n eviden proprietile magnetice ale esuturilor. Rezonana magnetic nuclear este un fenomen de rezonan ntre energia unui nucleu atomic aflat n cmp magnetic i o radiaie electromagnetic de o anumit frecven. Nucleele unor atomi se rotesc n jurul propriei lor axe (au un moment de spin) i, datorit faptului c au sarcin electric, se comport ca nite mici magnei. n lipsa unui cmp magnetic exterior, micii magnei nucleari sunt orientai la ntmplare i se agit termic. n prezena unui cmp magnetic uniform, magneii nucleari tind s se orienteze de-a lungul liniilor acestui cmp magnetic; unii dintre ei (civa dintr-un milion) se aliniaz cmpului, dar nu complet, deoarece axul lor magnetic se rotete cu o anumit frecven, ntr-o micare de precesie n jurul direciei cmpului exterior. Dac se trimite un puls de radiaie electromagnetic avnd exact aceeai frecven ca i cea a micrii de precesie a unui anumit nucleu (este vorba de o frecven din domeniul undelor radio ultrascurte), nucleul respectiv intr n rezonan cu aceast radiaie i i absoarbe energia. Acest fapt i permite s nu mai stea aliniat n cmp ci s ia o nou poziie (cu condiia ca aceast poziie s fie permis din punct de vedere cuantic). Procesul descris poart numele de excitaie. Dup un timp, nucleul se dezexcit, emind un semnal de radiofrecven (un ecou) i revine la poziia sa anterioar de aliniere n cmp. Nu toate nucleele excitate de pulsul incident se dezexcit simultan, astfel nct revenirea la vechea aliniere a tuturor nucleelor excitate este treptat (de fapt este vorba de o variaie exponenial n timp) i poart numele de relaxare. Semnalul emis de nucleele care se dezexcit este captat de un detector (o bobin cu rol de anten). El este cu att mai puternic cu ct n proba cercetat exist mai multe nuclee magnetice i cu ct aceste nuclee sunt mai sensibile la cmpul magnetic. Pe de alt parte, frecvena de rezonan difer de la nucleu la nucleu i chiar la acelai nucleu, dac aparine unor substane chimice diferite sau se afl n mprejurri fizice diferite, ceeace face posibil explorarea selectiv a diferitelor specii de nuclee, prin utilizarea unor frecvene specifice ale pulsurilor de radiofrecven. Msurarea i nregistrarea semnalului emis n procesul de relaxare permite stabilirea unor timpi ce caracterizeaz procesul de relaxare (timpul de relaxare longitudinal T1 i timpul de relaxare transversal T2), cunoaterea acestor timpi permind unui specialist s obin o mare cantitate de informaie privitoare la obiectul investigat. Pentru nregistrarea semnalelor ecou emise de nucleele atomice n timpul dezexcitrii lor, proba studiat este plasat ntr-un cmp magnetic uniform produs de un magnet permanent sau de un electromagnet avnd inducia magnetic ntre 0,15 i 1,5 T. Frecvena de rezonan, capabil s excite nucleele, depinde de sensibilitatea magnetic a acestora i de inducia magnetic a cmpului exterior. Rezonana poate fi atins fie prin varierea frecvenei radiaiei electromagnetice cu care se iradiaz proba meninut ntr-un cmp magnetic constant, fie prin varierea induciei magnetice a cmpului exterior n condiiile iradierii cu o radiofrecven fix. Semnalul RMN nregistrat aduce informatii cu privire la modificarea n timp a concentraiei unor molecule, unde este vorba de ATP, creatin-fosfatul i fosfatul anorganic dintr-un muchi.

n tomografia computerizat RMN, pacientul este introdus ntr-o incint n care se realizeaz un cmp magnetic uniform i constant, creat de o bobin supraconductoare rcit sub temperatura critic. Asupra acelei regiuni a corpului care face obiectul investigaiei se trimite o succesiune de pulsuri de radiofrecven; semnalele ecou emise dup fiecare puls de nucleele ce se dezexcit n irul de voxeli aflat de-a lungul direciei pulsului incident sunt nregistrate de un detector. Dup o prealabil analiz Fourier, semnalelor emise li se atribuie valori numerice, obinndu-se pixelii matricii viitoarei imagini digitale. Pentru obinerea unei matrici de dimensiunea 256/256 este necesar repetarea de cel puin 256 de ori a ciclului puls de radiofrecven - nregistare a semnalului ecou. Calculatorul electronic, utiliznd datele furnizate de cele trei seturi de bobine plasate n incinta n care este introdus pacientul, izoleaz i identific semnalul ecou produs de fiecare voxel, i atribuie o valoare numeric i genereaz, astfel, imaginea digital a seciunii investigate reprezentat de o matrice format din pixeli. Vizualizarea imaginii se face pe ecranul unui monitor, n condiiile n care fiecare pixel corespunde unui anumit nivel de strlucire sau de culoare. Tomografia computerizat RMN ofer informaii complemetare celor furnizate de tomografia n raze X, n special dac frecvena radiaiilor ce alctuiesc pulsurile este aleas astfel nct s fie egal cu frecvena de rezonan a nucleelor de 31P, deoarece atomii de fosfor sunt implicai n procesele metabolice tisulare.

6. Tomografia prin emisie de pozitroni (PET)

Se administreaz pacientului izotopi radioactivi care au deficit de neutroni (11C, 13N, 15O etc.) i care se dezintegreaz +, emind un pozitron. Aceti izotopi se acumuleaz n organele int iar pozitronul emis interacioneaz cu un electron din preajma lui, anihilndu-se reciproc i emind doi fotoni ,fiecare cu energia de 0,514 MeV, fotoni care pleac n sensuri diametral opuse. Fotonii sunt detectai de o pereche de detectori care se rotesc solidar; se iau n consideraie numai impulsurile detectate simultan. Imaginea digital se realizeaz asociindu-se fiecrui voxel cte o valoare numeric proporional cu numrul de fotoni emii.

7. Ecografia
Ecografia sau ultrasonografia se bazeaz pe interaciunea ultrasunetelor cu esuturile biologice. Traversnd esuturile, ultrasunetele sunt atenuate de acestea proporional cu grosimea stratului strbtut i cu coeficientul de atenuare specific fiecrui tip de esut. De mai mult interes pentru ecografie se bucur fenomenul de reflexie a ultrasunetelor la interfaa care separ dou esuturi diferite (sau dou structuri diferite n cadrul aceluiai esut). Intensitatea undei reflectate este cu att mai mare cu ct este mai mare diferena ntre impedanele acustice Z ale structurilor aflate de o parte i de cealalt parte a interfeei (detalii despre impedana acustic n cursul de bioacustic). Imaginile ecografice se realizeaz pe baza ultrasunetelor reflectate (numite ecouri); detectarea i nregistrarea acestor ecouri furnizeaz medicului dou tipuri de informaii. Amplitudinea ecoului aduce informaii despre natura interfeei reflectante, iar intervalul de timp scurs ntre plecarea pulsului ultrasonor incident i sosirea ecoului permite calcularea distanei dintre sursa de ultrasunete i interfaa reflectant. O a treia categorie de informaii

const n posibilitatea determinrii vitezei de deplasare a interfeei reflectante, deoarece unda reflectat de un obiect mobil i modific frecvena aparent (efect Doppler). n ecografie se utilizeaz un traductor, care este att surs de pulsuri ultrasonore ct i receptor al ecourilor acestora. Fasciculul incident de ultrasunete trebuie s fie ct mai ngust sau ct mai focalizat n punctul investigat al esutului. n acest scop se folosesc ultrasunete cu frecvene ct mai mari (n jur de 2,5 MHz) precum i lentile acustice de focalizare. Traductorul trebuie deplasat pe pielea de deasupra organului investigat (trebuie baleiat sau scanat), pentru obinerea unei imagini bidimensionale a acestui organ. Baleierea se poate face manual, operatorul plimbnd pe suprafaa corpului traductorul montat pe un bra articulat; articulaia posed senzori care trimit semnale electrice necesare stabilirii poziiei n fiecare moment a traductorului, n raport cu un sistem bidimensional de coordonate. O imagine complet se obine n cteva secunde. Baleierea mecanic se face cu ajutorul unui motor electric i este mai rapid, iar baleierea electronic utilizeaz un numr mare de traductori care alctuiesc o reea, fiecare traductor emind pulsuri i nregistrnd ecouri, ntr-o succesiune i ntr-o ordine bine stabilit (dispozitivul de scanare rmnnd nemicat pe suprafaa corpului). Ecourile produc semnale electrice, care sunt amplificate i nregistrate pe ecranul unui osciloscop, fiind puse n eviden att amplitudinea semnalelor (care permite stabilirea naturii esutului reflectant) ct i ntrzierea cu care sosesc ecourile (care permite stabilirea distanei la care se gsete esutul reflectant). Exist posibilitatea de a utiliza amplitudinea semnalelor produse de ecouri pentru a controla strlucirea sau culoarea spoturilor luminoase proiectate pe ecranul tubului catodic. Acest procedeu reprezint un alt mod de afiare a semnalelor ecografice. Semnalele electrice trimise de articulaia braului mobil al traductorului pot dirija spoturile de diferite strluciri n puncte diferite ale ecranului unui monitor, obinndu-se, astfel, imaginea bidimensional ecografic a esutului sau organului investigat.

8. Scintigrafia
Scintigrafia este o tehnic prin care se obine o imagine bidimensional a distribuiei unor substane radioactive n corpul pacientului. Scintigrafia se poate realiza prin scanarea rectilinie a zonei investigate sau aplicnd pe aceast zon o camer gamma. Scanerul are n compoziia sa un detector de scintilaie cuplat cu un inscriptor. Detectorul exploreaz punct cu punct, de la stnga la dreapta i de sus n jos, zona investigat i trimite semnale electrice (avnd amplitudini proporionale cu activitatea radioactiv detectat) ctre inscriptor, care execut, la rndul lui, micri de baleiere sincronizate cu cele ale detectorului, deasupra hrtiei de nregistrare. Camera gamma permite o mbuntire substanial a tehnicii scintigrafice. Pricipalele piese care alctuiesc camera gamma sunt colimatorul, cristalele de scintilaie, reeaua de fotomultiplicatori, analizorul de amplitudine a impulsurilor i monitorul. Colimatorul este o plac groas de plumb sau de tungsten, avnd cteva sute de perforaii sub forma unor canale cilindrice nguste i foarte apropiate unele de altele (separate prin septuri subiri). Fotonii emii de esutul radioactiv sunt obligai s treac prin aceste canale pentru a ajunge la cristalele scintilatoare plasate dincolo de colimator. Doar o mic parte dintre fotoni poate traversa colimatorul i anume, acea parte alctuit din

fotonii a cror direcie de mers este paralel cu axele canalelor (ceilali fotoni, care intr oblic n canale, fiind absorbii de septurile de plumb sau tungsten, materiale care absorb puternic fotonii ) . Aceste septuri trebuie s fie mai groase atunci cnd se lucreaz cu substane radioactive care emit fotoni de mare energie, pentru a se prentmpina riscul ca unii fotoni s traverseze septurile. n cazul n care canalele din colimator sunt paralele, imaginea n raze a sursei radioactive are dimensiuni egale cu cele ale sursei. n cazul n care canalele sunt dispuse dup direcii convergente (sau divergente), imaginea obinut va fi mai mic sau mai mare dect sursa iar dimensiunea imaginii va depinde de distana dintre colimator i esutul radioactiv. Un caz particular este reprezentat de colimatorul cu un singur orificiu, care conduce la obinerea unei imagini rsturnate a sursei, comportndu-se asemntor unui obiectiv fotografic. Cristalele scintilatoare se afl de cealalt parte a colimatorului; ele produc scintilaii a cror strlucire este proporional cu energia fotonilor absorbii i al cror numr este proporional cu numrul fotonilor absorbii. Cristalele scintilatoare traduc imaginea a sursei ntr-o imagine luminoas. Aceast imagine este "vzut" de o reea de fotomultiplicatori de mici dimensiuni, plasat n spatele cristalului. Fotomultiplicatorii genereaz semnale electrice, avnd amplitudinea proporional cu strlucirea scintilaiilor i fiind ntr-un numr egal cu cel al scintilaiilor. Fotomultiplicatorii emit, de asemenea, i o pereche de semnale electrice care permit identificarea poziiei fotonului incident (un semnal pentru poziia pe orizontal i altul pentru poziia pe vertical). Aceste dou semnale vor permite direcionarea fasciculului de electroni al tubului catodic din monitor ctre acel punct de pe ecranul fluorescent, punct care are coordonate identice cu cele ale izotopului radioactiv care a expediat fotonul respectiv. nainte de a ajunge la monitor, semnalele electrice sunt analizate de un spectrometru numit analizor de amplitudine a impulsurilor, care permite msurarea energiei fotonilor incideni. El mpiedic transmiterea ctre monitor a semnalelor care sunt produse de fotoni ce nu aparin sursei radioactive (de exemplu fotoni provenii din fondul natural de radiaii, fotoni generai prin efect Compton sau fotoni de raze X caracteristice, aprui n urma unor coliziuni ntre fotonii i atomi ai colimatorului).

9. Termografia
Temperatura msurat la suprafaa corpului variaz de la un punct la altul, n special datorit afluxului diferit de snge n diferitele zone ale esutului cutanat i subcutanat. Termografia este o tehnic prin care se obin imagini ale distribuiei valorilor de temperatur la suprafaa corpului i care se bazeaz pe captarea radiaiei infraroii emise de corp. Radiaia captat este focalizat pe un detector, dup ce traverseaz n prealabil un filtru optic transparent numai pentru radiaii infraroii. Detectorul (care este meninut la temperatura azotului lichid) produce semnale electrice avnd amplitudini proporionale cu temperatura pielii din zona de unde este emis radiaia captat. Aceste semnale sunt amplificate i nregistrate pe ecranul fluorescent al unui monitor. Intensitatea fasciculului electronic din tubul catodic al monitorului este modulat de amplitudinea semnalelor electrice sosite, astfel nct pe ecran apar spoturi cu att mai

luminoase (sau mai diferit colorate) cu ct temperatura zonelor explorate ale pielii este mai mare. Dispozitivul electromecanic care asigur baleiajul suprafeei corpului de ctre detector trimite spre monitor i semnalele necesare pentru a preciza coordonatele zonei de piele vizate i a asigura astfel proiectarea spotului pe ecranul monitorului ntr-un punct avnd aceleai coordonate. Deoarece termograful detecteaz diferene de temperatur de ordinul a 0,1C, este necesar ca, nainte de termografie, pacientul dezbrcat s stea nemicat 20 de minute la o temperatur de circa 21C i n absena curenilor de aer, pentru ca datele obinute s aib semnificaie diagnostic. ria aduce informaii suplimentare fa de electrometrie, avantaj care se adaug celui de a nu necesita electrozi n contact cu pielea (mai ales n cazul investigrii bolnavilor cu arsuri).

FACTORI FIZICI UTILIZAI N TERAPIE

1. Termoterapie
nclzirea local sau general a organismului produce efecte terapeutice, legate ndeosebi de vasodilataie i de creterea debitului sangvin, precum i de faptul c dezvoltarea tumorilor canceroase este inhibat prin creterea temperaturii acestor tumori. nclzirea local se poate face prin : -conducie, situaie n care zona ce trebuie nclzit este pus n contact cu obiecte calde (pern electric, pilot cu ap cald, bi calde etc.); -radiaie, prin expunere la soare sau la raze infraroii generate de lmpi de infraroii (lmpi cu filament incandescent i cu filtru de infraroii ce las s treac radiaii cu lungimi de und cuprinse ntre 0,8 i 40 m, radiaii ce ptrund la adncimi de pn la 3 mm n piele); -diatermie, care se clasific n : a) diatermie cu unde lungi sau D'Arsonvalizare, care utilizeaz cureni electrici alternativi cu frecvena de 10 kHz, aplicai prin intermediul unor electrozi aflai n contact cu pielea; b) diatermie cu unde scurte, care utilizeaz unde electromagnetice cu frecvena de 30 MHz, aplicate esutului prin plci metalice situate la o oarecare distan (capacitiv) sau inductiv prin bobine (magnetodiaflux), adic prin dispozitive care nu intr n contact cu pielea; c) diatermie cu microunde, care folosete microunde cu frecvena de 2450 MHz -ultrasonare, care folosete fascicule de ultrasunete cu frecvena de ordinul MHz i permite o bun localizare a nclzirii, att prin direcionarea fasciculului ct i pe baza capacitii diferite de absorbie a ultrasunetelor de ctre esuturi.

2. Crioterapie
Obinerea unor temperaturi sczute cu ajutorul bioxidului de carbon solid (zpad carbonic) la - 79C sau a azotului lichid (-196C), a permis utilizarea frigului n scopuri medicale, att pentru conservarea unor esuturi sau organe (sperm, mduv osoas etc. sau

chiar a unor persoane decedate sau a capetelor acestora) n vederea revitalizrii i/sau utilizrii lor ulterioare ct i pentru executarea unor manevre chirurgicale (criochirurgie). Avantajele criochirurgiei constau n lipsa durerii, sngerri puin importante i distrugeri bine localizate ale esuturilor (tumori, nevi sau chiar nuclee din talamus, ca n cazul tratamentului maladiei Parkinson). Fr a se ncadra strict n crioterapie, tehnicile de realizare a hipotermiei controlate (coborrea temperaturii corpului cu cteva grade) permit efectuarea unor operaii pe cord n condiiile unei mai mici crize de timp.

3. Electroterapie
n aplicaiile medicale, electricitatea se utilizeaz sub urmtoarele forme : -electricitate static sau franklinizare -curent electric continuu sau galvanizare -curent electric alternativ sau faradizare -curent electric n impulsuri Electricitatea static produs de un generator de curent continuu de nalt tensiune poate fi utilizat pentru a administra unui pacient o aa numit baie electrostatic, prin simpla conectare a acestuia la polul pozitiv sau negativ al sursei. Pacientul, aezat pe un suport bine izolat de pmnt, poate fi adus cu uurin la un potenial de cteva mii de voli. Electricitatea static poate fi administrat i local, sub form de efluvii sau de scntei, prin apropierea de corpul pacientului a unui electrod aflat la un potenial electric ridicat. Curentul continuu de joas tensiune, generat de baterii, acumulatori sau redresori de curent alternativ, se aplic esuturilor prin intermediul a doi electrozi, numii anod i catod. Curentul circul prin esuturi nu numai de-a lungul liniei drepte ce unete electrozii ci i prin regiuni aflate n afara acestei linii, dispersndu-se sub form de cureni din ce n ce mai slabi, pe msur ce se deprteaz de aceast linie. Aceti cureni poart numele de cureni electrotonici. n vecintatea anodului circul cureni anelectrotonici iar n apropierea catodului, cureni catelectrotonici. Primii au proprietatea de a micora excitabilitatea esuturilor iar ceilali de a o mri; aceste efecte justific utilizarea lor medical. O aplicaie medical important a curentului continuu este defibrilarea cardiac, ce poate salva viaa unui om aflat n stop cardiac Deoarece esuturile sunt conductori ionici, curentul continuu d natere n ele unor fenomene de electroliz, soldate cu apariia la catod a hidroxidului de sodiu i la anod a acidului clorhidric. Aa se explic de ce, la intensiti mari ale curentului electric continuu, pot aprea escare negative cenuii n zona de contact a tegumentului cu catodul i escare pozitive brune la anod. Asemenea efecte sunt folosite pentru distrugerea pe cale galvanocaustic a unor tumori. Curentul continuu de mic intensitate poate fi folosit pentru introducerea n organism, prin piele i prin mucoase, a unor ioni medicamentoi (iod, salicilat etc.) prin fenomenul numit ionoforez n cadrul ionoterapiei. Curenii alternativi de joas frecven (50-100 Hz) produc modificri circulatorii locale, senzaii dureroase, contracii musculare precum i o nclzire local. Curenii alternativi de nalt frecven nu produc excitaii. Efectele lor principale sunt cele termice iar aplicarea lor n medicin poart numele de diatermie.

Efectul curenilor de nalt frecven poate fi folosit i pentru distrugerea unor tumori prin diatermocoagulare, ca i pentru tierea esuturilor (bisturiu electric), precum i n electrofiziologia intervenional. Curentul electric poate fi aplicat i sub form de impulsuri. n funcie de forma, durata, amplitudinea i frecvena lor, impulsurile pot produce efecte biologice dintre cele mai diverse (de la stimulare, contracii musculare, durere i pn la sedare, anestezie sau somn). Impulsurile de durat mare se supun legilor lui Pflger conform crora, la nchiderea circuitului electric, excitarea nervilor i a muchilor se produce la catod iar la deschiderea circuitului, excitarea se produce la anod. Aplicate la nivelul capului, impulsurile pot produce sedare, electrosomn, electronarcoz sau electrooc (n aceleai scopuri se folosesc i curenii alternativi de joas frecven). n mod obinuit, impulsurile electrice sunt folosite n scopul stimulrii esuturilor. Conform legii lui Weiss (i = a/t + b), un stimul cu o durat (t) mai mic are nevoie de o amplitudine (i) mai mare pentru a putea produce excitarea (a i b sunt nite constante). Ocazional, pentru grbirea vindecrii fracturilor, pseudoartrozelor etc. se utilizeaz cmpuri electromagnetice pulsate. n anumite condiii, curentul electric poate deveni primejdios, provocnd electrocutarea. Cel mai periculos, n acest sens, este curentul alternativ de joas frecven, care poate produce moartea prin electrocutare la o intensitate de patru ori mai mic dect cea la care produce electrocutarea mortal un curent continuu, n condiii identice. Curenii alternativi de frecvene nalte nu produc electrocutare. Procedeele electroterapeutice sunt extrem de numeroase i variate, un loc deosebit n rndul lor fiind ocupat de stimulatoarele electrice, cu ntrebuinri multiple (defibrilatoare, stimulatoare cardiace, aparate de electroanestezie, aparate pentru electroocuri etc.).

4. Ultrasonoterapie
Ultrasunetele sunt vibraii mecanice ale particulelor unui mediu elastic, vibraii propagate prin unde, avnd o frecven mai mare de 20.000 Hz. Producerea ultrasunetelor se poate face cu ajutorul unor traductoare aeromecanice, hidromecanice i electromecanice. Traductoarele electromecanice se bazeaz pe efectul piezoelectric invers, pe efectul electrostrictiv sau pe efectul magnetostrictiv. Traductoarele piezoelectrice utilizeaz un cristal de cuar (sau de tartrat dublu de sodiu i potasiu, sulfat de litiu etc.), tiat dup un anumit plan geometric i conectat la bornele unei surse de curent alternativ de mare frecven. Alternana polaritii electrice pe feele cristalului determin comprimri i dilatri succesive ale cristalului, care constituie vibraiile ultrasonore. Amplitudinea acestor vibraii este maxim pentru acea frecven a tensiunii alternative care coincide cu frecvena proprie de vibraie a cristalului utilizat (apare un fenomen de rezonan). Traductoarele electrostrictive se bazeaz pe proprietatea unor dielectrici (cum este titanatul de bariu) de a se deforma sub aciunea cmpurilor electrice. Traductoarele magnetostrictive sunt construite din materiale feromagnetice plasate n interiorul unui solenoid alimentat cu curent electric alternativ de mare frecven. Miezul

solenoidului se comprim cnd curentul electric instantaneu din solenid atinge valori maxime i revine la dimensiunile iniiale cnd intensitatea electric trece prin valori nule. Propagarea ultrasunetelor prin medii elastice are loc cu viteze ce depind de densitatea i de proprietile mecanice (de compresibilitate) ale mediului i este nsoit de fenomene de reflexie, refracie, difracie, interferen i absorbie de ctre mediu a energiei transportate (vezi cursul de bioacustic). Principalul rezultat al absorbiei energiei ultrasonore este nclzirea materialului absorbant. n anumite condiii, ultrasunetele dau natere n lichide unui fenomen deosebit de complex, numit cavitaie. Explicaia acestui fenomen este legat de faptul c fiecare zon a lichidului este supus unor comprimri i destinderi succesive, n ritmul impus de frecvena ultrasunetului. innd seama de faptul c viteza ultrasunetelor n ap este de 1500 m/s iar lungimea de und, pentru o frecven de 2 MHz, este de 0,75 mm, rezult c dou puncte situate la o distan de o jumtte de lungime de und sunt, la un moment dat, unul comprimat iar cellalt decomprimat, diferena de presiune dintre ele putnd atinge zeci de atmosfere. Acest fapt duce, n anumite condiii, la despicarea lichidului i la formarea unei caviti, iniial vidat, dar care se umple repede cu gaze i vapori la presiune redus (fig). O asemenea cavitate are o via scurt (de circa o milionime de secund), dar n acest interval de timp se petrec fenomene remarcabile cum sunt : -apariia unor diferene de potenial electric ntre pereii cavitii care duc, uneori, la descrcri electrice n gazele rarefiate din cavitate; -excitarea i chiar ionizarea unor molecule; -emisie de radiaii luminoase (ultrasonoluminescen); -formare de radicali liberi. Formarea cavitii este urmat de dispariia ei, printr-o comprimare violent, care d natere unei unde de oc capabil s rup structuri multimoleculare sau chiar molecule mari aflate n zon. Printre alte efecte specifice ale ultrasunetelor se numr cele mecanice (orientarea, separarea sau coagularea particulelor unei suspensii, degazarea lichidelor etc.), electrice (apariia de tensiuni alternative n lichid ca urmare a oscilaiei particulelor purttoare de sarcini electrice), optice (variaii periodice spaiale ale refringenei lichidului i comportarea lui ca o reea de difracie ce permite vizualizarea ultrasunetelor), chimice (declanarea sau accelerarea unor reacii chimice) etc. Efectele biologice ale ultrasunetelor depind, n principal, de capacitatea lor de a nclzi esuturile; cnd sunt foarte intense, ultrasunetele pot produce distrugeri ale macromoleculelor, membranelor i chiar ale celulelor. Din acest punct de vedere, ultrasunetele au fost mprite n trei grupe: -ultrasunete de intensitate mic (mai puin de 0,5 W/cm2), care produc numai modificri funcionale;

-ultrasunete de intensitate medie (cuprins ntre 0,5 i 5 W/cm2), care produc, pe lng modificrile funcionale, i modificri structurale reversibile; -ultrasunete de intensitate mare (peste 5 W/cm2), care produc modificri structurale ireversibile i sunt, de aceea, utilizate pentru distrugerea bacteriilor, prepararea vaccinurilor, distrugerea tumorilor etc. Ultrasunetele de intensiti mici i medii sunt utilizate n medicin pentru tratarea afeciunilor inflamatorii, spastice i reumatismale. Trebuie menionat i posibilitatea folosirii fasciculelor ultrasonore focalizate, de puteri foarte mari (1000 W/cm2), n scopul distrugerii selective a esuturilor afectate (n special a tumorilor). De asemenea, prin utilizarea ultrasunetelor se poate realiza fragmentarea calculilor (renali, biliari etc., prin tehnica litotriiei), n vederea facilitrii eliminrii acestor calculi pe ci naturale. Alte utilizri medicale ale ultrasunetelor sunt legate de capacitatea lor de a se reflecta cnd ntlnesc suprafee care separ medii avnd impedane acustice diferite. Printre ele se numr : -ultrasonografia (sau ecografia) care, cu ajutorul computerului, permite obinerea de imagini ale unor organe, fr a pune n pericol organismul (aa cum se ntmpl, ntr-o msur mai mic sau mai mare, n radiografie, de exemplu); -determinarea vitezei de circulaie a sngelui pe baza efectului Doppler, adic urmrindu-se variaia frecvenei ultrasunetelor reflectate de hematiile aflate n micare.

5. Radioterapie
Radioterapia este folosit, aproape n exclusivitate, pentru tratamentul bolii canceroase. Principiul de baz al radioterapiei este concentrarea iradierii n zona tumorii, asociat cu menajarea zonelor sntoase ale organismului. Respectarea acestui principiu presupune: -localizarea precis a tumorii (n special cu ajutorul tehnicilor de imagerie medical); -iradierea tumorii cu fascicule de radiaii proiectate pe mai multe direcii, care converg n centrul tumorii, sau prin iradiere local strict delimitat; -ecranarea i protejarea pe ct posibil a zonelor sntoase; -cunoaterea ct mai precis a dozelor de radiaie absorbite de tumor i de esuturile sntoase, n scopul optimizrii dozelor administrate (n acest scop se utilizeaz microdozimetre i se fac calcule teoretice cu ajutorul computerelor). Radioterapia const din proceduri teleradioterapice i brahiradioterapice. n teleradioterapie se utilizeaz surse exterioare de radiaii, care produc fascicule ce pot fi proiectate din multiple direcii asupra tumorii, n funcie de localizarea acesteia. Printre sursele de radiaii se numr: -surse de raze X sub form de tuburi Coolidge, alimentate cu tensiuni cuprinse ntre 250 kV i 1 MV; -surse de raze X realizate cu ajutorul unor betatroane (acceleratoare circulare de electroni), n care electroni accelerai la 25 MeV dau natere la radiaii X de frnare; -surse de electroni accelerai (betatronul menionat mai sus i acceleratori liniari n care electronii sunt accelerai sub o tensiune de 4 MV; aceti din urm acceleratori au dimensiuni relativ mici, comparabile cu cele ale unitilor de cobaltoterapie); -surse de raze produse de izotopul 60Co (cobaltoterapie). Radiaiile emise de 60Co au energii de 1,25 MeV; sursele utilizate sunt foarte intense, avnd o activitate radioactiv de 370 TBq (terabecquereli), adic 3,7.1014 dezintegrri/secund sau 10.000 curie. Sursele se

afl n containere de plumb i emit 200 rontgeni/minut la o distan de 1 m de surs, ceea ce asigur circa 3 Gray n mai puin de dou minute (vezi dozimetria radiaiilor ionizante n cursul de radiobiologie). Activitatea sursei scade la jumtate dup 5,3 ani (interval de timp care este perioada de njumtire a cobaltului 60); -surse de protoni, deuteroni, nuclee de heliu accelerate la peste 100 MeV n ciclotroane sau acceleratoare liniare; -surse de mezoni negativi, obinui prin ciocnirea protonilor accelerai cu nuclee atomice; -surse de neutroni, obinui prin frnarea de ctre inte de beriliu a deuteronilor accelerai n ciclotron . Brahiradioterapia (numit i radioterapie de mic distan sau radioterapie de contact) const n introducerea de izotopi radioactivi n tumor sau n imediata ei vecintate. Forma sub care se introduc sursele radioactive este cea de ace (de 226Ra sau 137Cs) care se las 3 - 7 zile n tumor, sau sub form de capsule implantate permanent n tumor. Capsulele, confecionate din aur sau platin, conin radioizotopi cu via scurt, aa cum sunt 222Rn (T = 3,8 zile), 198Au (T = 2,7 zile) sau 90Y (yttrium cu T 64 de ore; de fapt, capsula de yttrium conine 90Sr care, prin dezintegrare produce yttrium, a crui radiaie de 2,27 MeV este lsat s treac prin pereii capsulei, spre deosebire de radiaiile de numai 0,54 MeV ale stroniului). Un radioizotop special este 252Cf (californium), care emite neutroni rapizi. n anumite situaii, n tumor se poate injecta soluie coloidal de 198Au. Pacienii supui brahiradioterapiei devin surse de iradiere pentru ceilali bolnavi i pentru personalul medical, astfel nct acetia trebuie s ia msurile de protecie mpotriva radiaiilor ionizante (vezi cursul de radiobiologie).

6. Fototerapie
Iradierea corpului cu radiaii electromagnetice neionizante (radiaii infraroii, vizibile i ultraviolete), efectuat n aa numitele bi de soare sau bi de lumin (natural sau artificial) are efecte terapeutice n unele afeciuni generale, dereglri ale echilibrului hidromineral, boli de piele etc. n cursul de fotobiologie au fost menionate cteva efecte biologice ale radiaiilor ultraviolete, care justific utilizarea procedurilor terapeutice de iradiere cu aceste radiaii, fie ca atare, fie dup o prealabil administrare de substane fotosensibilizante. Terapie cu radiaie laser Punerea la punct a amplificrii luminii prin emisie stimulat (LASER) a permis dezvoltarea rapid a terapiei bazat pe iradierea cu raze laser a organismului. Un laser este alctuit dintr-un mediu activ (cristale dielectrice, semiconductori, soluii lichide de colorani sau amestecuri gazoase), un sistem de pompaj optic i un rezonator format din dou oglinzi semitransparente plane i paralele. Printre laserii cu cristale dielectrice se numr laserul YAG (sau laserul cu granat de yttrium i aluminiu dopat cu neodim) care emite raze infraroii avnd lungimea de und 1,06 m i laserul cu rubin (oxid de aluminiu impurificat cu ioni de crom) care emite radiaii vizibile (roii) cu lungimea de und de 0,69 m. Pentru a putea emite, aceti laseri au nevoie de un pompaj optic cu lumin de la o lamp cu descrcare n gaz, care realizeaz inversia de populaie a nivelelor energetice ale centrilor activi (n cazul de fa, centrii activi sunt ionii de neodim i ionii de crom).

Printre laserii cu amestec gazos, mai cunoscui sunt laserul cu heliu-neon care emite radiaii infraroii cu lungimi de und de 3,39 m i 1,15 m precum i lumin roie cu lungimea de und de 0,63 m (n laserul cu heliu-neon, atomii de neon sunt centrii activi care se excit prin ciocniri cu atomii de heliu i cu electronii liberi ce apar n cursul pompajului optic realizat prin descrcri electrice chiar n amestecul gazos) i laserul cu amestec de bioxid de carbon i azot care emite radiaii infraroii cu lungimi de und de 9,6 i 10,6 m.(n acest laser, centrii activi sunt moleculele de CO2). Laserii pot emite radiaii n mod continuu sau n impulsuri. Raza laser are un nalt grad de monocromaticitate i o foarte mic divergen n propagare ceea ce favorizeaz concentrarea unei mari puteri pe unitatea de suprafa. Utilizarea terapeutic a laserului const n chirurgia cu radiaii laser i n biostimularea cu radiaii laser. Un laser cu CO2 cu o putere de civa wai i care emite n regim continuu poate fi folosit pentru realizarea unui bisturiu cu laser; radiaia emis, condus printr-un ghid optic (un fascicul de fibre optice) fiind focalizat pe esutul ce urmeaz a fi tiat, esut pe care l nclzete rapid i extrem de localizat pn la vaporizare. Chirurgia cu laser este foarte precis, nu solicit efort mecanic i nu este nsoit de sngerri importante, deoarece pereii plgii se coaguleaz termic iar vasele mai mici se nchid. Terapia laser este foarte indicat n deslipirile de retin, deoarece fasciculul laser poate strbate mediile transparente ale ochiului fr a fi absorbit de acestea, ntreaga lui energie fiind cedat retinei, care se lipete de sclerotic prin fotocoagulare. Laserul este utilizat i n tratamentul glaucomului, permind refacerea sistemului de drenaj al lichidului intraocular i scznd, astfel, presiunea intraocular. n multe cazuri, laserul este utilizat n endoscopie, att pentru iluminare ct i pentru eventuale microintervenii chirurgicale. Un exemplu este utilizarea laserului in chirurgia cardiac: prin perforri punctiforme ale peretelui ventricular este stimulat geneza unor noi vase i, n final, o mai bun vascularizare a miocardului. n literatura de specialitate se fac referiri la capacitatea radiaiei laser de a stimula unele procese biologice, de a grbi vindecarea rnilor i a fracturilor, de a produce efecte terapeutice prin lasero-punctur (echivalent al acupuncturii) etc.

TEHNICI FIZICE UTILIZATE N STUDIUL MACROMOLECULELOR

1. Structura macromoleculelor biologice
Macromoleculele biologice sunt molecule care intr n compoziia structurilor biologice i care au greuti moleculare cuprinse ntre 103 i 106 uniti atomice de mas. Principalele macromolecule biologice sunt proteinele, acizii nucleici i polizaharidele. Macromoleculele sunt alctuite din subuniti care sunt: aminoacizii (n cazul proteinelor), nucleotizii (n cazul acizilor nucleici) i monozaharidele (n cazul polizaharidelor). Aceste

subuniti sunt, de regul, interconectate prin legturi covalente, astfel nct s formeze un ir fr ramificaii. Structura primar a unei macromolecule se refer la natura, numrul i secvena (ordinea de succesiune) a subunitilor. Macromolecula este format dintr-un lan principal, alctuit din atomi ntre care se stabilesc legturile covalente i din lanuri laterale sau grupe laterale care emerg din acest lan principal. Secvena atomilor care formeaz lanul principal este periodic, spre deosebire de cea a grupelor laterale, a crei aperiodicitate permite existena unei mari diversiti de specii macromoleculare i de structuri ale acestora. Grupele laterale care se desprind din lanul principal al polipeptidelor i proteinelor sunt reziduurile R1, R2, R3,... ale celor 20 de aminoacizi care intr n alctuirea acestor macromolecule. n cazul acizilor nucleici, grupele laterale sunt bazele azotate B1, B2, B3 i B4. Structura secundar a unei macromolecule se refer la aranjamentul spaial al lanului principal i depinde, evident, de structura primar dar i de proprietile fizico-chimice ale mediului n care se afl macromolecula (natura solventului, temperatur, pH etc.). Un lan de subuniti imersat ntr-un mediu oarecare i va cuta cel mai favorabil aranjament spaial (adic acel aranjament care, din punct de vedere termodinamic, i permite s aib cea mai mic energie liber). Acest aranjament spaial asigur lanului principal cea mai mare stabilitate, ca urmare a realizrii numrului maxim de legturi coordinative i Van der Waals ntre componenii lanului, n condiiile date. n aranjamentul spaial al atomilor dintr-un lan polipeptidic extins (situaie care nu se ntlnete n mod normal). Se vede c grupul de atomi HN-C'O se afl n acelai plan, deoarece rotaia n jurul legturii NC' nu este posibil. Sunt posibile, ns, rotaii n jurul direciilor legturilor CN i CC', cu respectarea distanelor interatomice i a valorilor unghiurilor C'CN (110), CNC' (123) i NC'C (114). Exist numeroase variante de structuri secundare, dintre care mai rspndite sunt structurile -helix i pentru lanurile polipeptidice i structurile elicoidale de tip dublu helix pentru lanurile principale ale acizilor nucleici ntr-un -helix, lanul polipeptidic formeaz o structur elicoidal cu un diametru de 1 nm i cu un pas de 0,54 nm; aceast structur secundar este asigurat de legturile de hidrogen care se stabilesc ntre atomi aparinnd unor spire vecine. Reziduurile de aminoacizi sunt orientate ctre exterior. Structura seamn cu o panglic plicaturat, reziduurile de aminoacizi fiind plasate alternativ de o parte i de cealalt a acestei panglici. O panglic conine mai multe lanuri paralele iar panglicile sunt dispuse una sub alta. Dublul helix al lanului de acizi nucleici poate exista n forma A sau n forma B. Structurile de ordin superior se refer la aranjamentul lanurilor care au deja o structur secundar (structura teriar) sau la aranjamentul lanurilor care au deja o structur teriar (structura cuaternar). Astfel, proteinele pot realiza structuri globulare, fibrilare i mixte, adic acele structuri care le asigur cea mai mic energie liber, prin realizarea numrului maxim de legturi coordinative, hidrofobe sau de alt natur. Deoarece majoritatea legturilor care stabilizeaz aceste structuri sunt legturi slabe (energia legturilor de hidrogen i a legturilor hidrofobe este de numai 10 ori mai mare dect energia de agitaie termic a moleculelor la 37C), defectele de structur produse ca

urmare a agitaiei termice sunt destul de numeroase. Numrul acestor defecte este proporional cu e-E/kT, unde E este energia legturii respective, k este constanta lui Boltzmann iar T este temperatura absolut. Prin nclzire sau sub efectul altor factori fizici, numrul acestor defecte crete brusc i are loc denaturarea macromoleculei, asociat cu pierderea capacitii ei de a-i ndeplini funcia n sistemul biologic. n condiii normale, ns, modificrile conformaionale ale macromoleculelor sunt chiar mijloacele prin care acestea i ndeplinesc funciile specifice (vezi cazul contraciei musculare i al transportului prin membrane realizat prin difuzie facilitat, prin canale sau prin pompare).

2. Determinarea experimental a masei macromoleculelor

n principiu, masa m a unei macromolecule se poate determina n dou moduri: (a) aflnd cte macromolecule (N) conine o cantitate de substan macromolecular a crei mas total M este cunoscut (m=M/N); (b) utiliznd n diferite experiene formula lui Newton F=ma. Prima cale se reduce la a numra macromoleculele dizolvate ntr-un solvent; aceast operaie se poate face, n cazul unor macromolecule foarte mari, iluminnd lateral soluia i numrnd punctele strlucitoare ce apar pe un fond ntunecat. n acest scop se utilizeaz tehnica de ultramicroscopie iar dispozitivul care asigur iluminarea lateral este condensorul cu cmp ntunecat. Conform principiului lui Huygens, orice punct aflat pe frontul undei luminoase poate deveni un centru secundar de vibraie (o surs secundar de lumin). Macromoleculele pot fi numrate i prin marcare cu o substan fluorescent, care emite lumin vizibil n urma iluminrii cu radiaii ultraviolete. n mod normal, ns, numrarea macromoleculelor se face prin msurarea presiunii osmotice a soluiei de macromolecule i prin metode de msurare a difuziei luminii. Utilizarea osmometriei se bazeaz pe faptul c presiunea osmotic a unei soluii este direct proporional cu concentraia acesteia (i, deci, cu numrul de macromolecule pe unitatea de volum) (vezi cursul despre ap i soluii apoase). Determinarea experimental a presiunii osmotice se face cu osmometrul cu membran semipermeabil sau prin metoda crioscopic. Metodele de msurare a difuziei luminii permit i ele numrarea macromoleculelor, deoarece difuzia luminii este realizat de nsei macromoleculele dizolvate, care devin centre secundare de vibraie (cu condiia ca o macromolecul s conin un singur centru de vibraie). Exist dou tipuri de difuzie a luminii: difuzia Rayleigh i difuzia Raman. Difuzia Rayleigh (sau difuzia elastic) se caracterizeaz prin faptul c radiaiile difuzate au aceeai lungime de und ca i radiaiile luminoase incidente. n cazul n care particulele care difuzeaz lumina sunt mult mai mici dect lungimea de und a acesteia (cazul macromoleculelor), intensitatea luminii difuzate este invers proporional cu puterea a patra a lungimii de und, indiferent de direcia razei difuzate. Difuzia luminii de ctre particule avnd dimensiuni de acelai ordin de mrime ca lungimea de und a luminii este mai complicat, deoarece depinde i de forma, dimensiunea i orientarea acestor particule (care devin sediul nu al unei singure surse luminoase secundare ci a mai multor asemenea surse). De aceea, studiul difuziei luminii n

aceste cazuri poate aduce informaii privind forma, dimensiunea i orientarea particulelor aflate n suspensie. Cea de a doua cale de a afla masa macromoleculelor const n determinarea vitezei de deplasare a acestora sub aciunea unor fore. Sub efectul unei micri rapide de revoluie produs de o ultracentrifug (adic o centrifug care poate efectua ntre 40.000 i 100.000 de rotaii pe minut), particulele de raza r aflate n suspensie ntr-un mediu de vscozitate se vor deplasa cu o vitez constant v, conform relaiei 422bm = 6rv, unde este numrul de rotaii pe secund iar b este raza traiectoriei micrii de revoluie a particulei. Determinarea masei macromoleculelor prin ultracentrifugare presupune cunoaterea n prealabil a dimensiunii particulei i a coeficientului de vscozitate al mediului lichid dispersant. Msurarea vscozitii se poate face cu vscozimetre rotaionale, translaionale, capilare i cu bil. Vscozimetrul rotaional este format din doi cilindri coaxiali, unul rotitor i cellalt fix, ntre care se afl lichidul de cercetat. Vscozimetrul translaional utilizeaz dou plci paralele care se deplaseaz una fa de cealalt i ntre care se pune lichidul investigat. Vscozimetrul cu bil msoar viteza de cdere a unei bile prin lichidul cercetat iar vscozimetrul capilar de tip Ostwald permite msurarea vitezei de curgere a lichidului printr-un tub foarte ngust.

3. Determinarea formei i dimensiunii macromoleculelor

Dimensiunea unei macromolecule se poate afla tot prin ultracentrifugare, dac se cunoate masa macromoleculei i vscozitatea lichidului dispersant (vezi formula 422bm = 6rv). O alt cale de a afla dimensiunea macromoleculelor este ultrafiltrarea soluiei prin filtre cu pori de diametru cunoscut. Forma macromoleculelor poate fi dedus prin msurarea indicelui de refracie (vezi cursul de optic biologic) al unei soluii macromoleculare aflate ntr-un proces de curgere. Dac macromoleculele au form alungit, ele se vor alinia de-a lungul direciei de curgere, devenind paralele ntre ele, astfel nct indicele de refracie msurat pe direcia curgerii va fi diferit de cel msurat perpendicular pe direcia de curgere, fenomen numit birefringen de curgere. La rezultate similare se poate ajunge i prin plasarea macromoleculelor n cmp electric, dac acestea au proprieti de dipol electric, obinndu-se n acest caz birefringen electric. Multe macromolecule, n special cele cu structuri secundare -helix i dublu helix, sunt optic active mai cu seam datorit acestei structuri secundare, astfel nct prin determinri polarimetrice se poate cunoate aceast structur secundar i, prin ea, forma macromoleculei. Se tie c efectul luminos al unei radiaii electromagnetice se datoreaz vectorului electric, care este orientat perpendicular pe direcia de propagare a luminii. n mod normal, vectorii electrici oscileaz n toate planurile ce conin direcia de propagare a luminii, lumina fiind nepolarizat. Dac toi vectorii electrici ai unui fascicul luminos oscileaz ntr-un singur plan, lumina este polarizat liniar. Exist, ns, i lumin polarizat circular precum i lumin polarizat eliptic.

Planul de polarizare al luminii polarizate liniar va fi rotit (la dreapta sau la stnga) de ctre o substan transparent optic activ (dextrogir sau levogir) traversat de lumin. Fresnel explic acest fenomen astfel: unda polarizat liniar care ptrunde n substana optic activ este descompus n dou unde polarizate circular, ale cror vectori electrici se rotesc spre dreapta sau spre stnga cu viteze unghiulare ce depind de frecvena luminii. Cele dou unde polarizate circular nainteaz n substana optic activ cu viteze diferite (cu alte cuvinte, indicele de refracie al substanei difer pentru cele dou unde). La ieirea din substana optic activ, cele dou unde nu vor fi n faz dar, avnd aceeai amplitudine, se vor recombina dnd natere unei unde polarizate liniar, dar ntr-un alt plan dect cel al undei incidente (planul de polarizare al radiaiei incidente este rotit). Unghiul cu care este rotit planul luminii polarizate liniar depinde de frecvena luminii, dependen ce poart numele de dispersie optic rotatorie. Unele substane, nu numai c au indici diferii de refracie pentru cele dou unde polarizate circular (stnga i dreapta) dar au i coeficieni de absorbie diferii pentru acestea, astfel nct la ieirea din substana optic activ recompunerea celor dou unde va da natere unei unde polarizate eliptic. Diferena dintre absorbiile sau dintre extinciile celor dou unde depinde de frecvena luminii, aceast dependen purtnd numele de dicroism circular. Spectrele de dispersie optic rotatorie i de dicroism circular aduc informaii privind contribuiile structurilor primare, secundare i de ordin superior la activitatea optic a macromoleculei, permind aprecierea formei ei. Cele mai multe informaii n acest sens sunt aduse de metoda difraciei n raze X, a difraciei electronilor i a difraciei neutronilor. Prin aceste metode se poate verifica corectitudinea stabilirii structurii primare prin metode chimice i se pot aduce informaii privind structura secundar i de ordin superior a macromoleculei. Acest tip de analiz poate fi fcut numai pentru macromoleculele care pot fi aduse n stare cristalin fr a le fi alterat, prin aceasta, structura. Cristalul, prin periodicitatea structurii sale, se comport ca o reea de difracie ale crei constante de reea (distanele interatomice) au dimensiuni de acelai ordin de mrime cu cele ale lungimii de und a razelor X, electronice sau neutronice (lungimi de und de Broglie). Dac se cunoate aceast lungime de und, se pot calcula, pe baza figurii de difracie, distanele dintre atomii care alctuiesc macromolecula. Figurile de difracie produse de cristalele proteice sau de cele ale acizilor nucleici conin cteva mii de pete i puncte luminoase, astfel nct interpretarea lor necesit utilizarea unui calculator electronic. Figurile de difracie pot fi intensificate i simplificate prin marcarea macromoleculei cu atomi cu mas atomic mare. Metoda difraciei n raze X se poate extinde i la studiul acelor structuri biologice care prezint un grad mare de ordine structural (membrane biologice, teaca de mielin, filamentele contractile din sarcomer etc.). n aceste cazuri este indicat metoda difraciei sub unghiuri mici, unghiuri care favorizeaz difracia dat de structurile mai mari, n imaginile de difracie lipsind, practic, punctele luminoase date de difracia moleculelor. Principalele diferene ntre difracia razelor X, cea a electronilor i cea a neutronilor sunt legate de puterea de ptrundere a acestor radiaii, dar mai ales de faptul c razele X sunt mprtiate de electroni, electronii de nucleele atomice iar neutronii de ctre protoni (de aceea difracia neutronilor este util mai ales n cazul macromoleculelor care au un coninut bogat de atomi de hidrogen).

La metodele menionate se adaug metodele de spectrometrie de rezonan magnetic i anume: rezonana electronic de spin (RES) i rezonana magnetic nuclear (RMN). Prin RES pot fi pui n eviden radicalii liberi. Marcnd macromoleculele cu markeri RES (de exemplu, oxizi de azot) se poate aprecia prin metoda RES gradul de libertate de micare a macromoleculelor n mediul n care sunt imersate. Prin RMN pot fi puse n eviden nucleele magnetice (care au un numr de mas sau/i un numr de ordine impare) precum i macromoleculele marcate cu asemenea nuclee (markeri RMN), obinndu-se informaii privind orientrile i deplasrile macromoleculelor. Macromoleculele pot fi marcate i cu markeri radioactivi (izotopi radioactivi). Un film fotografic aezat peste un strat de asemenea macromolecule marcate pune n eviden distribuia spaial a macromoleculelor, procedeu numit autoradiografie. Cnd se face autoradiografia unui esut biologic, procedeul se numete autohistoradiografie.

4. Studiul structurii de ordin superior a macromoleculelor prin metode calorimetrice

Aa cum s-a menionat, legturile care asigur stabilitatea structurilor de ordin superior ale macromoleculelor i chiar a sistemelor biologice construite de acestea (membrane, cromatin, filamente etc.) sunt legturi suficient de slabe pentru a putea fi rupte prin intensificarea agitaiei termice. Prin nclzire, macromoleculele sunt antrenate n transformri sau tranziii de faz. Temperaturile la care au loc aceste tranziii, ca i schimburile de cldur ce au loc n cursul acestor tranziii, sunt determinate prin microcalorimetrie, mai precis prin dou tipuri de determinri micro-calorimetrice i anume: analiza termic diferenial i calorimetria diferenial. n analiza termic diferenial (ATD), proba este plasat ntr-unul dintre cele dou lcauri identice spate ntr-o plac metalic, n cellalt fiind o substan de referin. n ambele lcauri se afl traductori termoelectrici. Placa metalic este nclzit (sau rcit) foarte lent iar temperaturile probei i ale substanei de referin sunt msurate continuu. Diferena (Ts-Tr) dintre temperaturile celor dou substane (proba i substana de referin) este reprezentat grafic n funcie de temperatura probei Ts. Apariia unui accident de relief al curbei are semnificaia unei tranziii de faz iar poziia n sus sau n jos a acestui vrf arat dac este vorba de o transformare endotermic sau exotermic. n calorimetrul diferenial se menin constante (printr-un ritm convenabil al nclzirii) temperaturile probei i ale substanei de referin. Diferena dintre ritmurile de nclzire (dintre cldurile transferate n unitate de timp) ale probei i ale substanei de referin sunt reprezentate grafic n funcie de temperatura probei (sunt baleiate numeroase valori ale acestei temperaturi, n sensul c se fac determinri ale ritmului de nclzire necesar pentru a menine constante numeroase valori de temperatur). Aceast metod permite calcularea cldurii specifice a probei i variaia acesteia cu temperatura. Aa cum s-a artat n cursul despre ap, metoda de calorimetrie diferenial permite determinarea procentului de ap legat i de ap liber ntr-un sistem biologic

5. Determinarea proprietilor electrice ale macromoleculelor

Macromoleculele dizolvate n ap au o sarcin electric de suprafa diferit de zero, deoarece o parte din gruprile aflate la suprafaa macromoleculei se ionizeaz.

Sarcinile electrice fixate de suprafaa macromoleculei atrag ioni de semn contrar din soluie (contraioni) i realizeaz mpreun un strat dublu electric, care poate fi comparat cu armturile unui condensator ncrcat la o anumit tensiune. Spre deosebire de un condensator, ns, armtura alctuit din contraioni nu este un strat compact monomolecular i, deci, cderea de potenial nu se realizez abrupt ntre suprafaa macromoleculei i stratul de contraioni. Stratul de contraioni are o concentraie care se micoreaz exponenial pe msura creterii distanei fa de suprafaa macromoleculei, astfel nct cderea de potenial se face n dou etape: prima ntre suprafaa macromoleculei i suprafaa interioar a stratului de contraioni i a doua de-a lungul stratului difuz de contraioni. Aceast a doua cdere de potenial poart numele de potenial electrocinetic zeta () i este un parametru electric important al macromoleculei, deoarece deplasrile ei n cmp electric vor depinde hotrtor de . Acest fapt se explic prin aceea c numai contraionii dispui n imediata apropiere a suprafeei macromoleculei rmn ataai permanent de aceasta; ceilali contraioni pot fi sustrai macromoleculei de ctre un cmp electric. Ansamblul macromolecul mpreun cu toi contraionii este neutru electric; prsit de o parte a contraionilor, macromolecula capt o ncrcare electric diferit de zero i se va deplasa prin electroforez ctre unul din electrozii plasai n soluie. Viteza de deplasare v poate fi msurat experimental, la fel ca i gradientul de potenial aplicat X, coeficientul de vscozitate i constanta dielectric ale mediului lichid. n aceste condiii, potenialul electrocinetic se poate calcula cu relaia = 4v/X. Dac macromoleculele sunt silite s se deplaseze de-a lungul unui tub, la capetele tubului apare o diferen de potenial electric numit potenial de curgere. Aceste fenomene poart numele de fenomene electrocinetice; la ele se adaug electroosmoza, care se produce n condiiile n care macromoleculele nu sunt libere s se deplaseze n cmp electric, solventul fiind acela care se deplaseaz.