Disciplina de Microbiologie UMF Tg.

Mure LP1

Controlul creterii microorganismelor

n practica medical
spitale secii medicale i chirurgicale infecii nozocomiale cabinete medicale, stomatologice material infecios risc pentru contaminarea mediului, mbolnvirea personalului diagnostic corect: prevenirea contaminrii probelor din mediul extern

n microbiologie
-

Definiii:
DECONTAMINARE: reducerea numrului de germeni de pe un obiect sau dintr-o substan pn la 0, poate fi efectuat prin mai multe metode: ANTISEPSIE: decontaminarea tegumentelor i mucoaselor cu ajutorul unor substane chimice antiseptice bacteriostatice (netoxice pentru tegument): alcool etilic 70, tinctur de iod 5%, KMnO4 0,1%, detergeni cationici. Distruge doar formele vegetative DEZINFECIE: distrugerea patogenilor (mai puin a sporilor) de pe suprafee, din aer, cu ajutorul unor substane chimice dezinfectante bactericide (toxice pentru esuturi vii): fenoli, formol, H2CO3. mpiedic rspndirea bolilor infecioase. STERILIZARE: distrugerea sau ndeprtarea tuturor formelor vii (inclusiv spori) ASEPSIE: absena patogenilor meninerea sterilitii presupune aplicarea tehnicilor aseptice pentru a mpiedica ptrunderea microbilor ntr-un substrat steril. SANITIZARE msuri pentru asigurarea sntii publice PREZERVARE, CONSERVARE - pstrarea viabilitii microorganismelor o durat variabil de timp CURAT lipsit de murdrie organic/anorganic (fr referire la microorganisme)

Factori care influeneaz eficacitatea metodelor de control

mrimea populaiei bacteriene o moartea bacteriilor este exponenial (mai muli germeni = mai mult timp) timpul de expunere la agentul decontaminant o creterea timpului de expunere crete rata distrugerii efectul concentraiei, a temperaturii i a pH-ului o creterea concentraiei crete rata distrugerii o temperatura, concentraia, pH-ul la care acioneaz agentul o stabilitatea agentului la pH, temperatur structura germenului o endospori - clostridii o chist Protozoa o peretele celular - Mycobacterium interaciunea cu mediul nconjurtor protecia germenilor o prezena substanelor organice protejeaz microorganismele (curat murdar) o dezinfecie n spitale selectarea rezistenei

-1-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP1

Metode de decontaminare
Metodele se aleg n funcie de situaia practic. (materialele care urmeaz a fi tratate sunt termostabile/ termorezistente, etc. ?) Nu toate metodele de decontaminare sunt i metode de sterilizare!

Metode fizice
I. Cldura a. Cldura uscat: - nclzirea la rou ansa de platin - Flambare completarea sterilizrii trecerea obiectului prin flacr - Incinerarea arderea cu reducere la cenu indicaii: materiale dispozabile din plastic, reziduuri organice solide, carcasele, cadavrele animalelor - Sterilizarea prin aer cald mecanism de aciune: oxidare indicaii: sticlrie de laborator, vase din porelan, instrumentar chirurgical, pulberi termostabile contraindicaii: soluii apoase, obiecte din cauciuc, plastic, esturi i vat din bumbac sau fibr sintetic, materialele contaminate din laborator se realizeaz n etuv (cuptorul Pasteur, Poupinel) 160C 2h, 180C 1h b. Cldura umed: - Fierberea mecanism de aciune: denaturare distruge formele vegetative, nu i sporii nu este metod de sterilizare eficient 100C, 30 minute - Vapori flueni n vasul Koch, Arnold - Tindalizarea sterilizarea fracionat: evit nclzirea la temperaturi de peste100C nclzire n 3 zile consecutive, ntre nclziri incubare la termostat pentru germinarea sporilor tindalizare la 100C n vasul Koch (Arnold) utiliznd vapori flueni tindalizare la 65C n baie de ap sterilizarea unor medii de cultur, alimente - Sterilizare prin vapori sub presiune autoclavarea; mecanism de aciune: denaturare temperatura vaporilor de ap ntr-un spaiu nchis crete proporional cu presiunea 0,5 atm 115C 1 atm 121C 2 atm 134C n microbiologie: 121C timp de 15- 30 n blocurile operatorii: 134C timp de 30

-2-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP1

indicaii: sterilizarea materialului infecios din laborator, medii de cultur termostabile, instrumente chirurgicale, halate, cmpuri operatorii, etc. contraindicaii: material plastic, piele, blan

schem autoclav orizontal II. Pasteurizarea denaturarea proteinelor expunere la temperaturi de sub 100C produse alimentare termolabile nu se distrug: micobacteriile, enterovirusurile - joas (LTLT low temperature long time) - nalt (HTST high temperature short time) - (UHT ultra high temperature) Filtrarea reinerea microorganismelor din medii lichide sau aer trecerea prin membrane cu poroziti diferite (0,22, 0,45, 0,8) membrane: acetat, nitrat celuloz, policarbonat, teflon sterilizarea lichidelor termolabile i sterilizarea aerului pentru crearea unui mediu aseptic (boxe cu flux de aer laminar HEPA filter: High-efficiency Particulate Air) IV. V. Centrifugarea pentru virusuri se folosesc viteze mari (10000 rpm) Radiaii ionizante distrug ADN-ul - penetraie mare - sterilizarea instrumentelor chirurgicale, stomatologice - nu este o metod des folosit neionizante alterarea ADN-ului - ex. razele UV lampa germicid - nu sunt penetrante - sterilizarea suprafeelor de lucru netede, curate, sanitizarea saloanelor, slilor de operaie Vibraii ultrasonice -3-

III.

VI.

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP1

Substane chimice
I. Agenii alkilani: au aciune sporo- i bactericid (glutaraldehida, oxidul de etilen); formaldehida are doar efect dezinfectant sterilizarea instrumentelor medicale, a echipamentelor endoscopice, a medicamentelor oxidul de etilen: substan gazoas cu penetrabilitate mare glutaraldehida: soluie apoas 2% Soluii dezinfectante i antiseptice Halogenii - Clorul i derivaii de clor, hipocloriii - Iodoforii Derivaii fenolici Detergeni Alcooli etanol 70-80%

II.

Substane chimice utilizate n microbiologie: - pentru dezinfecie: cloramin 5%, fenol 3%, etc. - pentru antisepsia minilor: bromocet 1%o, cloramin 1%, etc.

Metode de prezervare
1. Frigul refrigerare: 4C: stare de via latent efect bactriostatic congelare la -21C sterilizare congelare brusc la -70C: prezervare 2. Desicare liofilizarea congelare brusc i desicare: prezervarea pe termen lung a culturilor bacteriene, presiune osmotic ndeprtarea apei din alimente (fructe, lapte praf)

Controlul sterilizrii i al sterilitii

Controlul sterilizrii: controlul procesului de sterilizare metode fizice controlul temperaturii (termometru), presiunii (manometru), timpului de expunere metode chimice: se folosesc substane cu punct de fuziune apropiat de temperatura la care se face sterilizarea (acidul benzoic are punctul de fuziune la temperatura de 121C) metode biologice: fiole Stearotest suspensie de spori de Bacillus stearotermophilus; atingerea temperaturii de 121C duce la distrugerea sporilor, indicatorul din fiole vireaz. Controlul sterilitii: eficiena sterilizrii i meninerea sterilitii; se realizeaz prin metode bacteriologice (recoltarea probelor de pe suprafee sterile, cultivare)

-4-