Genetica

1. Ereditatea si variabilitatea

Ereditatea reprezinta mostenirea de catre urmasi a informatiei necesara

realizarii caracterelor parentale.
Ereditatea este o functie a organismelor vii.
Ereditatea este un proces informational: de stocare, de expresie, de trasmitere
a informatiei
ADN-ul este substratul molecular al ereditatii.
ADN-ul - stocheaza informatia la nivelul secventei nucleotidice
- exprima informatia prin sinteza de protein (transcriptiei)
- transmite informatia in descendenta prin replicare urmata de diviziune
celulara
Cromozomii reprezinta substratul morfologic al ereditatii si sunt vizibili numai in
diviziune.

Variabilitatea reprezinta ansamblul diferentelor dintre: indivizii unei populatii si

populatii diferite.
Sursele de variabilitate sunt: mutatiile, recombinarile genetice si migratiile.

2. Individualitatea bio-psiho-sociala

Genetica modern a demonstrat c fiecare om este unic att prin structura sa

genetic ct i prin mediul n care s-a dezvoltat n timp.
Rezult deci c unicitatea omului este bio-psiho-social..
Ansamblul unic de caractere specifice, produse prin interaciunea permanent,
dar n proporii diferite, dintre ereditate (genotip) i mediu se numete individualitate
biologic sau fenotip.

3. Determinismul caracterelor fenotipice

Caracterele fenotipice normale sau anormale ale organismului sunt produse prin
aciunea ereditii (genotipului) i mediului. n funcie de ponderea celor doi factori
cauzali se pot deosebi teoretic trei categorii de caractere: caractere pur ereditare;
caractere determinate de interaciunea ereditate - mediu; caractere pur ecologice
(neereditare).

CARACTERE FENOTIPICE PUR EREDITARE.

Caracterele pur ereditare sunt determinate exclusiv de structura genetic,
normal sau modificat, a unui individ, deci de ctre genotip. Caracterele pur ereditare
sunt de trei feluri: caractere de specie, caractere ereditare normale, caractere
anormale / boli genetice.
a). Caracterele de specie sunt strict genetice: fiecare specie are o anumit
structur genetic, ordonat ntr-un set fix i caracteristic de cromosomi, cu o anumit
morfologie. Aceast configuraie specific realizeaz o "barier" reproductiv ntre
specii.
b). Caracterele ereditare normale sunt determinate monogenic i transmise
mendelian. Ele sunt reprezentate de diferite sisteme grupale: grupele sanguine (ABO,
Rh, MN, etc.), serice (haptoglobine, transferine, .a.), enzimatice (fosfataz acid,etc.)
i tisulare (antigenele HLA).

c). Caracterele ereditare anormale sunt prezente numai la unii indivizi. Ele
sunt produse de mutaii i reprezentate de bolile cromosomice, bolile monogenice i
bolile mitocondriale.
Bolile cromosomice sunt produse de adiia (trisomie) sau pierderea (monosomie)
unui cromosom ntreg sau a unei pri din cromosom; de ex., sindromul Down
(trisomia 21) sau sindromul Turner (monosomia X).
Bolile monogenice sunt produse de mutaia unei gene (din genomul nuclear) cu
efect major, care determin boala prin anomalii ale unor proteine de structur
(hemoglobin, colagen, factori de coagulare, etc.) sau enzime (erori nnscute de
metabolism etc.). Aceste mutaii se transmit n succesiunea generaiilor dup tipul
mendelian: autosomal dominant.
Bolile mitocondriale sunt un tip particular de boli monogenice produse de mutaii n
genomul mitocondrial, care afecteaz producerea de energie n muchi i nervi; ele
au un rol important n mbtrnirea celular. Bolile mitocondriale se motenesc ntrun mod particular: de la mam la toi copii, dar bieii afectai nu transmit boala.

CARACTERE DETERMINATE DE INTERACIUNEA EREDITATE - MEDIU

Numeroase caractere fenotipice, normale sau anormale, sunt produse de
interaciunea, n proporii diferite, dintre ereditate i mediu. De aceea aceste caractere
sunt numite caractere multifactoriale.
a). Caracterele multifactoriale normale sunt determinate de interaciunea
variabil dintre ereditate i mediu; ex.: talia, greutatea, tensiunea arterial, inteligena,
etc. n realizarea acestor caractere multifactoriale ereditatea determin o parte din
caracter, mai mare sau mai mic (denumit heritabilitate), precum i limita superioar
sau potenialul genetic pn la care poate fi dezvoltat acel caracter, n cele mai
favorabile condiii de mediu.
b). Caractere multifactoriale anormale sunt reprezentate de anomaliile
congenitale izolate (de ex., malformaiile congenitale de cord, spina bifida, despicturile
labio-maxilo-palatine etc) i de numeroase boli comune ale adultului (hipertensiunea
arterial esenial, boala coronarian, diabetul zaharat, ulcerul gastric / duodenal, unele
cancere, etc.)
c) Bolile prin mutaii somatice sunt produse prin efectul cumulativ al unor
mutaii somatice succesive, n gene diferite, unele determinate de factori de mediu,
altele prin erori de replicare a ADN.

CARACTERE FENOTIPICE DETERMINATE DE MEDIU.

a). Caractere "ecologice". Mediul extern este reprezentat de diferii ageni fizici,
chimici sau biologici care pot produce deseori mbolnviri: arsuri, traumatisme, boli de
iradiere, intoxicaii, infecii. Aceste boli sunt aparent negenetice.
b). Ecogenetic i farmacogenetic. Studiul variaiilor individuale determinate
genetic la aciunea factorilor externi se realizeaz astzi de o ramur a geneticii umane
numit ecogenetic. De ex. alergenii induc astm la perosanele susceptibile (atopie);
laptele sau alcoolul nu sunt tolerate de persoanele cu deficiene n lactaz i, respectiv,
alcooldehidrogenaz.

RELATIA GENOTIP FENOTIP MEDIU.

Interaciunea dintre ereditate i mediu se poate exprima sintetic prin relaia:
GENOTIP

FENOTIP

MEDIU
Reamintim c prin genotip se nelege structura genetic unic i caracteristic
unui individ, care se stabilete n momentul fecundrii i rmne stabil n cursul
dezvoltrii. Prin termenul de fenotip se definete totalitatea caracterelor manifeste i
specifice ale unui organism determinate de interaciunea genotipului cu mediul n care
triete acel organism. Dependent de ereditate i mediu fenotipul este variabil, se poate
schimba.

4. Clasificarea acizilor nucleic

Acizi dezoxiribonucleici: ADN (format din dou lanuri de polinucleotide);

Acizi ribonucleici: ARN (format dintr-un singur lan de polinucleotide).

Tipuri de ARN

ARN-mesager (ARNm): copiaz informaia genetic de pe ADN i o transmite n

citoplasma celulei la locul sintezei proteice (n ribozomi);

ARN de transport (ARNt): transport aminoacizi la locul sintezei proteice;

ARN ribozomal (ARNr): intr n alctuirea ribozomilor;

ARN viral (ARNv): este material genetic la unele virusuri.

5. Structura primara si secundara a ADN-ului

n anul 1953, James Watson i Francis Crick au propus un model al moleculei de

ADN alctuit din dou catene polinucleotidice, legate complementar prin bazele azotate,
nfurate ntr-o elice dubl, rsucit spre dreapta.

STRUCTURA PRIMAR A ADN

Acizii nucleici sunt substante chimice macromoleculare formate din unitati simple
numite nucleotide.
Nucleotida este alcatuita din 3 componente: nucleosida (baza azotata si pentoza) si
radical fosfat (riboza in ARN si dezoxiriboza in ADN).
Bazele azotate sunt purinice (A, G) sau pirimidinice (T, C, U).

A, G, U sunt prezente in ADN si ARN, T doar in ADN, iar U doar in ARN.

Radicalul fosfat formeaza legaturi esterice cu pentozele.
Legatura se face intre al 5-lea atom de C al unei pentoze (C5) si al 3-lea atom de C al
pentozei urmatoare (C3) rezultand catene polinucleotidice.
Legarea nucleotidelor intre ele cu formarea lanturilor polinucleotidice, reprezinta structura
primara a acizilor nucleici.
Structura primara a ADN-ului este monocatenara, reprezentata de secventa de nucleotide
dintr-o catena.

STRUCTURA SECUNDARA A ADN

Structura secundara a ADN-ului este reprezentata de structura bicatenara sub forma de
dublu helix.
Molecula de ADN este bicatenara, fiind formata din doua catene polinucleotidice rasucite
un in jurul celeilalte in spirala, formand un dublu helix, cu bazele azotate dispuse spre
interior.
Cele doua catene de ADN sunt antiparalele, o catena are orientare 5 - 3, iar cealalta
catena in sensul 3 5. Citirea informatiei genetice se face intotdeauna in directia C5-C3.
Cele doua catene sunt complementare, in sensul ca intotdeauna o nucleotida care
contine o baza azotata purinica se leaga cu o nucleotida care contine o baza azotata
pirimidinica si invers.
Structura bicatenara a ADN-ului se realizeaza cu ajutorul unor punti de hidrogen: duble
intre A si T, si triple intre G si C.

6. Polimorfismul structurii de ADN

7. Forma clasic a structurii ADN, descris de Watson i Crick, corespunde

conformaiei de tip B. S-au descris ns i alte conformaii sau isoforme: A i C,
mai frecvente, D i E, mai rare.
8.
n organism, n anumite regiuni ale moleculei de ADN (cu o anumit
secven nucleotidic) se produc frecvent modificri (tranziii) conformaionale A
B C.
9.
n 1979, Rich i Dickerson descoper un tip particular de ADN-Z sau ADNsenestra. El are o molecul dublu elical, orientat spre stnga, care i pierde
simetria caracteristic formei B, deoarece axul fosfo-glucidic ia o form neregulat
n zig-zag, producnd deformarea i alungirea moleculei de ADN (figura 2.8).
Conformaia ADN-Z este o conformaie normal, exist "in vivo" i apare, n
anumite condiii fizico-chimice, n regiunile bogate n perechi de baze G-C, prin
tranziia / conversia formei B (sub aciunea unei topoisomeraze, prin rotarea
bazelor cu 180 ); tranziia B Z este reversibil.
10.
ADN-Z intervine foarte probabil n inactivarea unor gene i, deci, n controlul
expresiei informaiei genetice. Conversia local B Z (mai ales n situsurile de
reglare a transcripiei) poate fi realizat prin fixarea mai intens a histonelor sau a
altor molecule ce produc represia genelor sau prin metilarea citozinei din situsurile
GC. Astfel, un "viraj la stnga" la nceputul unei gene determin stoparea activitii
ei.
11.
Tranziia B Z ar determina ns i evidenierea unor situsuri din ADN n
care se fixeaz mai facil ageni mutageni sau cancerigeni. Pentru aceasta pledeaz
faptul c mutaiile apar mai frecvent la nivelul secvenelor G-C care iau conformaia
Z.
12.
n finalul acestei prezentri este important de subliniat faptul c tranziia
ADN BZ ca i modificrile conformaionale A B C care apar n anumite
regiuni ale ADN (cu o secven special a nucleotidelor), demonstreaz elocvent
faptul c molecula de ADN nu are o structur fix, rigid, ncremenit. n funcie de
condiiile de mediu, moleculele ADN snt flexibile, ntr-o permanent stare
dinamic, deformndu-se nencetat; pe drept cuvnt se poate spune c molecula
de ADN (simbolul vieii) "pulseaz sau respir".

7. Structura genomului uman

Termenul de genom a fost creat (Winkler, 1920) pentru a denumi setul haploid de
cromosomi din gameii eucariotelor. Ulterior el a fost folosit pentru a desemna
ansamblul genelor unui organism.
Complementul cromozomial uman normal este alcatuit din 46 de cromozomi: 22
perechi de autozomi si o pereche de heterozomi (cromozomii sexului, notati cu XX la
femeie si XY la barbati).
Tipuri de cromozomi in functie de pozitia centromerului:
* Cromozomi metacentrici centromerul este plasat median
- au doua brate egale
* Cromozomi submetacentrici centromerul este plasat submedian
- au doua brate inegale
* Cromozomi acrocentrici centromerul este plasat aproape de unul dintre capete
- prezinte constrictie secundara care delimiteaza satelitul
* Cromozomi telocentrici centromerul este plasat la capatul cromozomului
- au un singur brat
- lipsesc la om
Cariotipul uman normal cuprinde 7 grupe notate cu litere: A, B, C, D, E, F, G.

8. Definitia genei

.
n concepia actual se consider c gena este un ansamblu de secvene ale
ADN necesar pentru producerea unei molecule funcionale (protein sau ARN); mai
concis, gena este o unitate de transcripie.
n concepia clasic, gena reprezint un segment de cromosom, precis delimitat,
continuu (indivizibil), care determin un anumit caracter fenotipic.
Regiunea central a genei ncepe cu situsul de iniiere (start) al transcripiei.
Exonii sunt secvene transcrise n ARN mesager precursor i pstrate n ARNm
matur (denumirea lor se bazeaz pe faptul c sunt secvene ce se exprim i prsesc
exit - nucleul. Ei sunt regiunile funcionale din structura genei, care deobicei codific
anumite pri structurale i/sau funcionale distincte ale proteinei, numite domenii.
Numrul exonilor variaz de la o gen la alta (ntre 2 i mai mult de 50) precum i la
diferite organisme.
Intronii - sunt secvene necodante, transcrise iniial n ARNm precursor
(transcript primar) dar decupate precis i ndeprtate ulterior din ARNm matur 1, ce va fi
alctuit prin asamblarea exonilor. Numrul intronilor este cu unul mai mic dect cel al
exonilor.
Regiuni reglatoare - Cadrul de lectur al oricrei gene este flancat de dou
regiuni laterale, netranscrise, (regiunea laterala 5 si regiunea laterala 3) care au rolul
de a semnaliza iniierea transcripiei de ctre ARN polimeraz i de a regla intensitatea
ei.

9. Concepia clasic privind structura i funcia genei (locus, alele, polialele,

dominan, recesivitate, codominan. homozogoie, heterozigoie, linkage,
crossing-over).

a). Locus
Gena ocup n cromosom o poziie fizic fix, totdeauna aceeai, numit locus
(plural = loci). Acesta poate fi situat pe autosomi ("loci autosomali") sau pe cromosomii
sexuali.

b). Gene alele. Polialelie.

Fiecare gen se gsete n natur, la indivizii unei specii, ntr-o form "standard",
normal sau de tip "slbatic". Ea poate suferi o mutaie, care produce o form
alternativ a genei; aceast variant alternativ a genei ce ocup acelai locus i
influeneaz acelai caracter se numete gen alel. O gen poate suferi ns mai
multe mutaii diferite cu efecte fenotipice variate dar limitate la acelai caracter; rezult
variante alelice diferite sau alele multiple iar fenomenul se numete polialelie.

c). Homozigot, heterozigot, hemizigot.

Genele alele (normale-N sau anormale-A) ce ocup loci omologi pot fi identice
sau diferite. n primul caz (gene alele identice) genotipul 2 ca i organismul care le
posed este homozigot (NN sau AA) iar n al doilea caz (gene alele diferite) va fi
heterozigot (NA).

d). Dominant, codominant i recesiv.

Gena i caracterul care se manifest la heterozigoi sunt numite dominante i
se noteaz de obicei cu majuscule. Gena care nu se manifest fenotipic la heterozigoi
i se exprim numai n stare homozigot se numete recesiv i se noteaz de obicei
cu liter mic;. De exemplu, la persoanele cu genotip Na gena N este dominant i
fenotipul va fi normal; indivizii respectivi vor fi ns purttori ai unei gene recesive a. n
acelai context, persoanele An vor fi fenotipic anormale / bolnave, deoarece gena A
este dominant iar gen n, recesiv. Genele recesive se exprim ns la homozigoii aa
sau nn.
Alteori, ambele gene alele se manifest fenotipic la heterozigoi i vor fi
codominante. De ex. genele A i B din sistemul multialelic ce determin grupul sanguin
ABO sunt dominante fa de gena O i codominante una fa de alta; genotipurile Ao,
Bo i AB determin fenotipurile sau grupele sanguine A, B i respectiv AB.

e) Inlantuirea genetica (linkage)

Fenomenul n care genele nealele situate aproape una de alta pe acelai
cromosom nu segreg (nu se separ) n meioz i au tendina de a se transmite mai
frecvent mpreun n succesiunea generaiilor se numete nlnuire genic ("linkage"
n limba englez).

f) Crossing-over
Fenomen prin care se realizeaz schimbul reciproc de gene ntre cromozomii
omologi, ceea ce determin recombinarea genetic a organismelor. Poate fi simplu,
dublu, triplu etc.; n general, fenomenul se produce n cursul meiozei.

10. Transcriptia si translatia. Codul genetic

Transcipia este procesul de copiere a informaiei genetice a unei gene, sub

form codificat, complementar i antiparalel, ntr-o molecula de ARN. Acest proces
are loc n nucleu.
Procesul de transcripie la eucariote se desfsoar n dou mari etape:
formarea ARN mesager precursor (pre-ARNm) sau transcriptul primar3, prin
transcripia integral a genei (exoni i introni);
maturarea pre-ARNm, printr-o serie de modificri din care rezult ARNm matur, ce
va trece n citoplasm.
Translatia consta in transfomarea unei secvente de nucleotide din ARNm intr-o
secventa de aminoacizi in molecula proteica.

Codul genetic este degenerat, fiind alcatuit din 64 codoni si 20 de aminoacizi.

Din cei 64 de codoni ai codului genetic, 61 codifica cei 20 de aminoacizi, iar 3 codoni
(UAA, UAG, UGA) nu codifica aminoacizi, sunt codoni STOP.
* Codul genetic este nesuprapus, ceea ce inseamna ca doi codoni vecini nu au
nucleotide ocmune.
* Codul genetic este fara virgule sau alte semne de punctuatie.
* Codul genetic este universal in toata lumea vie aceeasi codoni codifica acelasi
aminoacid.

Reglarea expresiei genetice

REGLAREA PRETRANSCRIPTIONAL (EPIGENETIC)

Reglarea pretranscripional a expresiei genice vizeaz manifestarea lor spaial n

anumite organe, esuturi, linii sau tipuri celulare i chiar celule individuale. Presupune
selecia anumitor gene n celulele embrionare difereniate i meninerea acestei expresii
difereniate n descendena lor. Sunt realizate prin intervenia unor mecanisme
epigenetice.

REGLAREA TRANSCRIPIONAL.

Controlul transcripional al expresiei genice vizeaz reglarea activitii ARN

polimerazei II. Reglarea transcripional implic interaciunea unor proteine (factori
trans-reglatori) cu secvene specifice de pe ADN (elemente cis-reglatoare).

REGLAREA POSTTRANSCRIPIONAL.

Reglarea expresiei genelor se poate face i prin mecanisme ce pot interveni

post-transcripional, modificnd calitativ sau cantitativ formarea ARNm matur. Mai
frecvent este vorba de matisarea sau poliadenilarea alternativ.

REGLAREA TRANSLAIONAL

Exist cu certitudine o reglare translaional a sintezei de proteine dar aceasta

este puin cunoscut. Probabil c unele mecanisme care produc acest tip de reglare
influeneaz stocajul mesagerilor.

Cromatina: eucromatina si heterocromatina

Eucromatina, cu localizare n regiunea central a nucleului, constituit din ADN

activ transcripional (de exemplu, gene ce pot fi traduse n proteine);
EUCROMATINA

include zone cu gene active

puin ADN repetitiv

acetilat

coninut bogat n C-G

fin dispersat n interfaz

replicare precoce

Heterocromatina, cu localizare la periferia nucleului, constituit din ADN inactiv

transcripional. Heterocromatina poate fi de dou tipuri: heterocromatin constitutiv
i heterocromatin facultativ.
HETEROCROMATINA (10% din genom)

include zone cu activitate transcripional redus

coninut bogat n A-T

bogat n secvene repetitive

slab acetilat

grad de condensare accentuat

o parte se pstreaz condensat pe toat durata ciclului celular

se replic tardiv

localizat pericentric, telomeric, NOR

Cromatina sexuala X

Cromocentru vizibil, in mod normal, in nuclei interfazici ai celulelor apartinand

sexului feminin; ea rezulta prin heterocromatinizarea unuia dintre cei doi cromozomi X.
Ciclul celular

Ciclul celular reprezint succesiunea de evenimente biochimice i morfologice

care se produc n viaa unei celule, din momentul formrii i pn la sfritul diviziunii sale.
Ciclul celular are dou mari perioade: interfaza i diviziunea.
Interfaza reprezint perioada cuprins ntre dou diviziuni succesive, n care se
desfoar toate activitile specifice unei celule. Evenimentul cel mai important al
interfazei este sinteza de ADN (replicarea). Ea se produce ntr-o perioad limitat a
interfazei, denumit faza S. Datorit acestui proces, interfaza poate fi subdivizat n trei
etape succesive: faza G1 (presintetic), faza S (de sintez) i faza G2 (postsintetic sau
premitotic).
Diviziunea celular sau faza M ("mitotic") este alctuit dintr-o serie de procese
secveniale prin care materialul genetic (ADN), replicat n interfaz, se distribuie egal i
total formnd doi nuclei distinci, iar celula se mparte n dou celule fiice (citokinez);
acestea vor fi identice cu celula din care au provenit. Prin replicarea ADN-ului i
diviziune se asigur transmiterea fidel a informaiei genetice n succesiunea
generaiilor celulare.

Replicarea ADN-ului

Schematic, dubla spiral a ADN se separ n cele dou catene componente,

formnd o structur n form de Y numit furc de replicare. Fiecare caten servete
apoi ca matri sau tipar
pentru aranjarea complementar i secvenial a
deoxiribonucleotidelor activate, care vor fi polimerizate sub aciunea ADN polimerazei.
Astfel, o molecul bicatenar de ADN va forma dou molecule noi, identice ntre ele
precum i cu molecula parental, fiecare format dintr-o caten "veche" i o caten
"nou sintetizat"; de aceea procesul de sintez al ADN a fost numit replicare
semiconservativ.

ADN polimerazele. La om au fost identificate cinci tipuri de ADN polimeraze,

denumite , , , i .
ADN helicazele desfac dublu helixul de ADN (folosind energia furnizat de ATP)
i elibereaz monocatenele ce vor funciona ca matrie pentru replicare.
ADN topoisomerazele I i II despiralizeaz helixul ADN i elibereaz tensiunea
din molecula de ADN.
Proteinele de replicare A (RPA) menin separate cele dou catene desfcute de
helicaze.
Proteinele de replicare C (RPC) recunosc specific i se leag la jonciunea
dintre primer si matri, fiind responsabile de medierea i stabilizarea interaciunii ADN
polimerazei cu matria ADN.
PCNA (de la Proliferating Cell Nuclear Antigen) se leag n imediata vecintate a
proteinelor RPC i, mpreun, sunt principalele proteine asociate ADN polimerazei.
PCNA se organizeaz sub forma unor dimeri care au configuraia spaial a unui inel ce
lunec de-a lungul matriei ADN i permit ncorporarea nentrerupt a mii de nucleotide
n catena ADN nou sintetizat. Blocarea PCNA (de exemplu, prin proteina p21) oprete
replicarea ADN.
Ribonucleaza H1 (RNaza H1) ndeprteaz amorsele ARN folosite de ADN
polimeraze pentru iniierea replicrii; lacuna rezultat este completat, refcut, de ADN
polimeraz iar refacerea continuitii catenei este realizat prin sudarea capetelor, de
ctre o ADN ligaz.

Replicarea telomerelor
Telomerele sunt structuri cromatiniene specializate, situate la capetele
cromosomilor eucariotelor, care asigur stabilitatea cromosomilor i mpiedic unirea
cromosomilor prin capetele lor.
In celulele umane, lungimea telomerelor este de 8000 perechi de baze la nastere,
3000 la maturitate si 1500 la varste inaintate. La fiecare ciclu celular se pierd 25-200 pb.
Aceasta duce la scurtarea progresiv a telomerelor.

Fidelitatea replicarii ADN-ului

Acurateea replicrii ADN este critic pentru transmiterea informaiei ereditare n
succesiunea celulelor i organismelor. De aceea, organismul uman posed numeroase

mecanisme care determin ca rata erorilor de mperechere aprute n cursul procesului

de replicare s fie extrem de redus.
Un prim mecanism prin care ADN polimerazele ajut la cresterea fidelitii
replicarii este prin inseria corect a bazelor n catena ADN nou sintetizat
Un alt mecanism major responsabil pentru acurateea replicrii ADN este
activitatea de autocorecie a ADN polimerazelor.