Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
FIZIOLOGIA
APARATULUI
DIGESTIV
LUCRRI PRACTICE
EDITAT DE COLECTIVUL DISCIPLINEI
SUB REDACIA PROF.UNIV.DR. MARIA IANCU
2009
Autori:
Iancu Maria
Badea Daniela
Sfredel Veronica
Iancu Ionela
Romanescu Florin
Bleanu Tudor-Adrian
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
CUPRINS
Introducere............................................................ 9
5
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
6
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Bibliografie............................................................ 107
7
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
INTRODUCERE
10
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
FIZIOLOGIA GLANDELOR
SALIVARE
Saliva este un
amestec al produselor de
secreie ale celor trei perechi
de glande salivare mari
(parotide, submaxilare i
sublinguale) reprezentnd
aproximativ 99% din totalul
secreiei i ale numeroase
glande mici diseminate n
mucoasa oral, aproximativ
1%.
Glanda parotid
(gland seroas) produce o
saliv fluid, bogat n
Figura 1.1. Localizrile glandelor fermeni (amilaza salivar),
salivare mari saliva de masticaie i de
digestie, reprezentnd circa 25% din totalul secreiei salivare,
n repaus.
Glanda submaxilar (gland mixt, sero-mucoas)
produce o saliv sero-mucoas, ce umezete limba, nlesnind
simul sapid - saliva de gustare (cca. 70% din secreia
salivar).
11
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
12
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
13
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
14
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
15
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Roluri fizice:
mbib, nmoaie alimentele, ajut masticaia,
aglutineaz alimentele triturate, formnd bolul
alimentar;
lubrefiaz bolul alimentar i ajut astfel deglutiia;
prin solubilizarea alimentelor, permite funcionarea
simului gustului (sapid) - numai substanele
dizolvate n ap pot ajunge la receptorii gustativi,
pentru a-i excita;
ajut vorbirea;
cur gura;
asigur senzaia de confort, prin umezirea
permanent a gurii; n cazul febrei, n deshidratri,
la administrarea de atropin, apare o senzaie
dezagreabil, de uscciune a gurii.
Rol de eliminare:
metale grele (Pb, Hg, Bi) sau I, As, KSCN
(sulfocianat de potasiu - cale de detoxifiere a
organismului);
alcaloizi (morfina), antibiotice, alcool etilic;
uree, acid uric (la persoanele cu gut sau cu
afeciuni renale), glucoz ( n cazul n care glicemia
200-300 mg/ml);
virusuri (poliomielit, hepatit, rabie, parotidit
epidemic).
16
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
17
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Principiul metodei:
Se evideniaz activitatea amilazei salivare, de scindare
a amidonului preparat pn la stadiul de maltoz, trecnd prin
stadii intermediare de dextrine, prin adugare de soluie Lugol
(iod iodurat 1).
n prezena soluiei Lugol, amidonul d culoarea
albastr; pe msur ce se diger, culoarea vireaz spre violet
(amilodextrina), roz-rou (eritrodextrina) i apoi incolor
(acrodextrina i maltoza).
18
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
amilaz
amidon preparat amilodextrin + maltoz
(fiert sau copt) + H2O
amilaz
+H2O
eritrodextrin + maltoz
amilaz
+H2O
acrodextrin + maltoz
amilaz
+H2O
maltoz
Schema aciunii de scindare a amidonului
de ctre amilaz
Materiale necesare:
6 eprubete, pipete, stativ
saliv nativ
soluie 1% de amidon fiert, solubil
soluie Lugol
soluie NaOH 20%
soluie sulfat de cupru
bec de gaz.
Tehnica de lucru:
Se ia un stativ cu 6 eprubete (vezi tabelul nr.1.1.). n
fiecare eprubet se pun 2-3 ml soluie 1% de amidon fiert,
solubil, peste care se adaug cte o pictur de soluie Lugol.
Astfel, coninutul fiecrei eprubete capt culoarea albastr.
19
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Amidon
2-3 ml 2-3 ml 2-3 ml 2-3 ml 2-3 ml 2-3 ml
fiert
Soluie 1 1 1 1 1 1
Lugol pictur pictur pictur pictur pictur pictur
fiart i
Saliv - nativ nativ nativ nativ
rcit
Incolor
+
Culoare albastru albastru violet roz-rou incolor
Reacia
Trommer
20
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Rezultate:
eprubeta 1: culoare albastr (martor)
eprubeta 2: culoare albastr (enzim inactiv)
eprubeta 3: culoare violet (amilodextrin)
eprubeta 4: culoare roz-rou (eritrodextrin)
eprubeta 5: incolor (acrodextrin)
eprubeta 6: incolor, efectuarea reaciei Trommer
determinnd apariia unui precipitat rou crmiziu
(oxid cupros).
Principiul metodei:
Calciul, coninut n saliv, sau n alte lichide biologice
sub form de sruri, formeaz, la pH = 12, cu indicatorul
complexonometric murexid (sare de amoniu a acidului
purpuric sau indicator complexonometric I), un compus solubil,
de culoare roie.
Prin tratarea cu o soluie diluat de EDTA (Ac.
Etilendiaminotetraacetic sau complexon III ), ca urmare a
distrugerii compusului murexid - Ca2+ (rou), se formeaz
21
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Materiale necesare:
saliv (sau alt lichid biologic)
cristale de murexid
soluie de EDTA
soluie de NaOH 2N
ap bidistilat
eprubete, pipete, stativ.
Tehnica de lucru:
Se recolteaz ntr-un vas 1-2 ml de saliv, se dilueaz
cu 5 ml ap bidistilat (care nu mai conine calciu), se adaug
5 ml de NaOH 2N i 3 - 4 cristale de murexid. Se agit soluia
i se obine o coloraie roz-roie (n cazul n care soluia
conine calciu). Se adaug progresiv, picurnd, soluie de
EDTA pn ce se obine o coloraie violet, dat de murexidul
rmas liber n soluie.
22
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Rezultate:
La finalul reaciei, coninutul eprubetei se coloreaz
violet.
Principiul metodei:
Ditizona, n soluie de tetraclorur de carbon sau
cloroform, are o culoare verde; n contact cu saliva
impurificat cu o sare mercuric, va cpta o culoare
portocalie, prin formarea ditizonatului mercuric.
Reactivul este foarte sensibil, dar d reacii pozitive cu
mai muli ioni: Pb, Ag, Zn, Cu.
Limita de recunoatere pentru Hg este de 0,25 g
cantitate total n soluia cercetat.
Materiale necesare:
soluie cloroformic (sau n tetraclorur de carbon)
de ditizon
soluie de azotat mercuric
saliv nativ
eprubete, pipete, stativ.
Tehnica de lucru:
Se recolteaz ntr-o eprubet 1-2 ml saliv, peste care
se adaug 1ml soluie azotat mercuric, pentru a se realiza
situaia n care saliva recoltat ar conine mercur (ar fi
recoltat de la persoane ce lucreaz n mediu toxic cu
mercur). Se pipeteaz apoi 2 ml soluie cloroformic de
ditizon (verde) i se agit.
23
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Rezultate:
Prin formarea ditizonatului mercuric, apare culoarea
portocalie n partea inferioar a eprubetei.
Materiale necesare:
soluie de sulfit de sodiu
soluie de azotat sau acetat de Pb
saliv nativ
pipete, stativ, eprubete.
Tehnica de lucru:
ntr-o eprubet se recolteaz 1-2 ml de saliv normal,
ce se impurific prin adugarea a 1-2 ml de soluie de sare de
plumb (ca i cnd ar fi recoltat de la o persoan ce lucreaz
n mediu toxic cu Pb). Se adaug apoi 2 ml de sulfit de sodiu.
Rezultate:
Apariia unui precipitat alb, de sulfit de Pb, indic
prezena plumbului n saliv.
Principiul metodei:
Soluiile apoase de cromat de potasiu formeaz cu
srurile de plumb din saliv un precipitat galben ca lmia, de
24
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Materiale necesare:
saliv nativ
soluie de cromat de potasiu (K2CrO4)
soluie de azotat sau acetat de Pb
pipete, stativ, eprubete.
Tehnica de lucru:
ntr-o eprubet, peste 2 ml de saliv normal, se
adaug 1-2 ml soluie de sare de Pb; pentru evidenierea
plumbului, se adaug apoi 2 ml de cromat de potasiu i se
agit coninutul.
Rezultate:
Apariia unui precipitat galben de cromat de Pb, indic
reacia pozitiv.
Principiul metodei:
Srurile stanoase (clorura stanoas), n mediu puternic
alcalin (KOH), se oxideaz i trec n sruri stanice. Sarea
stanic astfel obinut tetrahidroxistanitul dipotasic
K2Sn(OH)4 , n mediu alcalin, reduce ionul de Bi3+ din saliv,
aducndu-l n forma metalic pur, ce apare ca un precipitat
negru, n partea inferioar a eprubetei.
Limita de evideniere a bismutului este de 1 g.
Arseniul, stibiul i plumbul nu dau aceast reacie, deci se
poate decela bismutul i n prezena plumbului.
25
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Materiale necesare:
saliv
soluie proaspt de clorur stanoas (SnCl2)
soluie de KOH
soluie de Bi clorurat sau azotat
pipete, stativ, eprubete.
Tehnica de lucru:
ntr-o eprubet cu 0,5 ml clorur stanoas proaspt se
adaug ncet i se agit, o soluie de KOH, numai pn la
dizolvarea complet a precipitatului format iniial
(tetrahidroxistanitul dipotasic). Se adaug apoi 1-2 ml de
saliv, impurificat n prealabil cu 2 ml sare de bismut
(mimnd saliva recoltat de la o persoan care lucreaz n
mediu cu Bi sau face tratament pe baz de Bi).
Rezultate:
Se observ apariia de particule negre, ce se depun
ncet n partea inferioar a eprubetei (precipitat negru).
2-
Punerea n eviden a altor anioni prezeni n saliv (SO 4 i
-
HCO3 )
Materiale necesare:
eprubete, pipete, stativ
soluie acid clorhidric 10%
soluie clorur de bariu 5%
acid acetic.
Tehnica de lucru:
2-
Anionii de SO4
Se pun ntr-o eprubet 2-3 ml saliv fiart i filtrat. Se adaug 2-3
picturi HCl 10% i cteva picturi clorur de bariu. Apare un precipitat alb
de sulfat de bariu.
3-
Anionii de HCO
Peste 2-3 ml saliv nativ se adaug ntr-o eprubet 1-2 picturi
acid acetic. Apar bule gazoase de CO2.
26
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Reacia salivei
Materiale necesare:
- hrtie indicatoare
- penset.
Tehnica de lucru:
O fie de hrtie indicatoare este nmuiat n saliv. Se compar
culoarea obinut cu scala de culori a hrtiei indicatoare.
27
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
28
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
29
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
la administrarea de medicamente
parasimpaticolitice (atropina, scopolamina)
n stri de deshidratare a ntregului organism (febr,
transpiraii abundente, hemoragii, vrsturi, diarei
profuze, diabet insipid).
Suprimri totale i permanente ale secreiei pot apare
la menopauz, n caz de paralizie facial periferic, n boala
Mikulicz (hipertrofia bilateral a glandelor salivare), boala
Gugerot-Sjgren (scleroza glandelor salivare i lacrimale),
lipsa congenital a glandelor salivare sau a canalelor lor.
Alte modificri pot fi ntlnite la nivelul mucoasei bucale
sub form de inflamaii ale gingiilor, limbii (gingivite, glosite,
stomatite). Acestea apar mai ales la muncitorii ce lucreaz n
medii toxice cu Hg, Pb, Cd (fabrici de oglinzi, de termometre,
acumulatori cu Pb, evi i alte piese de plumb, la vopsitori ce
vopsesc cu miniu de Pb, tipografi, mineri, muncitori din
combinate chimice), sau la cei ce iau tratament cronic pe baz
de Bi sau unele antibiotice. La aceste persoane, pe lng
simptomatologia specific fiecrei intoxicaii, pot apare iritaii
gingivale i orale, datorit eliminrii acestor substane n
saliv.
Gingivita mercuric se caracterizeaz printr-o dung
cenuie pe marginea gingiilor, la baza dinilor (lizereu
gingival), o puternic iritaie i salivaie abundent; gingivita
bismutic produce un lizereu albastru-cenuiu, iar cea
saturnin (intoxicaie cu Pb) o dung albastru-cenuie.
Mai apar gingivite i stomatite n avitaminoze ale
complexului B, prin lipsa de fier din organism, n infecii orale
microbiene, virotice, fungice, mai ales la cei cu maladii
hematologice (agranulocitoz, leucemii), tratamente
ndelungate cu antibiotice, defecte imunologice. Aceste leziuni
nu sunt datorate salivaiei modificate sau glandelor salivare, ci
unor cauze generale extrasalivare.
30
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Calculii salivari
Calculii salivari (sialoliii: sialon=saliv, litos=piatr)
apar rareori i aproape exclusiv n canalul Wharton. Calculii
sunt formai din sruri anorganice (carbonai i fosfai acizi de
calciu).
1.4. NTREBRI
31
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
32
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
FIZIOLOGIA STOMACULUI
Stomacul este un
organ cavitar, plasat ntre
esofag i duoden.
Prezint o poriune
vertical, format din
fundul i corpul
stomacului, care este
considerat stomacul
acid, deoarece glandele
de aici secret HCl i
pepsinogen n cantitate
mare. Funcia motorie a
Figura 2.1. Localizarea regiunilor acestei poriuni este
gastrice diminuat, avnd mai ales
rol de depozitare. Poriunea
orizontal (antrul piloric i canalul piloric) este considerat
stomacul alcalin, glandele de aici secretnd mucus i
gastrin n cantitate mare. Activitatea motorie del la acest
nivel se caracterizeaz prin micri de amestecare i
propulsie a alimentelor.
Stomacul are trei funcii majore:
Secretorie, mucoasa gastric conine celule
glandulare care sintetizeaz i secret substane
33
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
34
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
LOCUL UNDE SE
SUBSTANA ROLUL
SECRET
-solubilizeaz proteinele, formnd -celulele oxintice sau
acidalbuminele, pregtindu-le pentru parietale, marginale
Acidul Clorhidric digestie ale glandelor gastrice,
(HCl) -confer pH-ul optim pentru aciunea situate mai ales n
enzimelor gastrice; stomacul acid.
-aciune bactericid
-favorizeaz transformarea Fe3+ n Fe2+
absorbabil
-enzim proteolitic -celulele peptice,
-hidrolizeaz proteinele, solubilizate n principale, ale
prealabil de acidul clorhidric, glandelor gastrice, sub
Pepsina
transformndu-le n peptide mai mici form inactiv, de
-la adult, n absena labfermentului, pepsinogen.
realizeaz digestia proteinelor din
lapte.
-enzim proteolitic -celulele peptice,
-prezent numai n secretia gastric a principale (chief cells)
Labfermentul sugarului ale glandelor gastrice.
-n prezena ionilor de Ca transform
cazeina n paracazeinat de Ca
-enzim proteolitic -celulele principale ale
-aciune lichefiant asupra ctorva glandelor gastrice.
Gelatinaza
proteoglicani, n special asupra
gelatinei.
-enzim lipolitic -celulele principale ale
Lipaza -hidrolizeaz lipidele fin emulsionate glandelor gastrice.
din lapte, fric, maionez.
-amestecul unei glicoproteine numit -celulele mucoase de
mucin cu apa suprafa, mai ales de
-protecie mecanic i chimic a la nivelul glandelor
mucoasei gastrice. pilorice.
-formeaz un gel alcalin, care se
dispune pe suprafaa epiteliului gastric,
Mucus
realiznd protecia mpotriva digestiei
mucoasei de ctre pepsin i HCl.
-alturi de HCO3- formeaz bariera
alcalin, protectoare a mucoasei
gastrice
-lubrefiaz alimentele.
-favorizeaz absorbia vitaminei B12 -n celulele oxintice,
(ciancobalamina) parietale ale mucoasei
-formeaz un complex cu aceast gastrice, alturi de
vitamin, care este absorbit n HCl.
intestinul subire
Factor intrinsec -cnd factorul intrinsec este absent sau
n cantitate mic, apare deficitul de vit.
B12, care determin anemia
megaloblastic Biermer, numit i
anemia pernicioas.
35
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
LOCUL UNDE SE
SUBSTANA ROLUL
SECRET
37
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Figura 2.2.
Experimentul Prnzul fictiv al lui I.P. Pavlov. Fistula gastric, combinat cu
esofagostomie.
Oe esofagul secionat i deschis la exterior (esofagotomie i esofagostomie)
pentru recoltarea alimentelor nghiite (alimentele nu ajung n stomac).
S stomac cu fistul gastric cronic Basov;
C canul gastric, prin care se scurge sucul gastric secretat n timpul prnzului
fictiv.
Alte modele presupun separarea, izolarea unor poriuni
din stomac, cu realizarea unor pungi, la care se poate pstra
inervaia vagal pentru evidenierea ambelor mecanisme ale
secreiei gastice (nervos i umoral) sau pot fi denervate, n
acest caz putndu-se studia doar mecanismul umoral.
38
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Figura 2.3.
Modelul de "mic stomac" imaginat de I.P. Pavlov, numit i "punga lui Pavlov", sau
"punga inervat vagal". Permite obinerea sucului gastric produs att prin mecanism nervos
(vagal), ct i umoral.
Principiul metodei:
Aciditatea sucului gastric se neutralizeaz cu o soluie
de hidroxid de sodiu 0,1N, n prezena reactivului Tpffer-
Linossier (un amestec de indicator Tpffer i fenolftalein,
care are culoarea galben - portocalie).
HCl liber coloreaz reactivul n rou, cnd pH-ul soluiei
este cel mult 2,9; la pH 3, reactivul capt culoarea portocalie,
iar la pH 4 culoarea devine galben, indicnd neutralizarea
HCl liber. n prezena fenolftaleinei, pn la o valoare a pH-
ului de 7, soluia este incolor i devine rou-violet la un pH
de 9 -10 (ceea ce indic momentul neutralizrii HCl
combinat).
39
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Materiale necesare:
pipete
balon Erlenmeyer
biuret
suc gastric
soluie NaOH 0,1 N
reactiv Tpffer-Linossier.
Tehnic:
ntr-un balon Erlenmeyer se introduc 10 cm3 suc
gastric i 3-4 picturi din reactivul Tpffer-Linossier.
n prezena reactivului Tpffer-Linossier, sucul gastric se
coloreaz n rou, datorit prezenei HCL, ceea ce indic un
pH mai mic de 2,9.
Se titreaz apoi cu soluie de NaOH 0,1 N, pn cnd
culoarea vireaz spre portocaliu i apoi spre galben. n acest
moment se oprete titrarea i se noteaz cu N1 numrul de
mililitri de NaOH utilizai la titrarea aciditii libere.
Se continu titrarea pn la apariia culorii rou-violet
(la pH 9-10), cnd s-a neutralizat cantitatea total de acid,
inclusiv a celui legat (se trece mai nti prin coloraia galben
deschis). Se noteaz cu N2 numrul de mililitri din soluia
de NaOH 0,1N, utilizai la titrarea acidittii totale.
Numr mililitri NaOH folosii pentru neutralizarea HCl
combinat = N2 N1.
Rezultate:
Rezultatele se exprim n grame acid clorhidric la 1000
3
cm suc gastric sau n mEq/l.
Pentru exprimarea n grame HCl la 1000 cm3 de suc
gastric se nmulesc: cm3 NaOH 0,1N consumai cu
echivalentul gram al unui cm3 dintr-o soluie de HCl 0,1N
(0,00365g) i cu 100.
Pentru exprimarea n mEq/L:
40
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Exemplu calcul:
CNaOH x VNaOH = CHCl x VHCl
CNaOH = 100 mEq gram/L (concentraia soluiei de NaOH
utilizat la titrare)
VNaOH = N (nr. de ml NaOH utilizai n titrare)
CHCl = concentraia de HCl din sucul gastric necunoscuta
noastr
VHCl = 10 mL (numrul de mL de suc gastric utilizai)
nlocuind cu valorile din exemplu, obinem urmtoarea relaie:
Valori normale:
Corect este s exprimm aciditatea sucului gastric prin
debitul orar bazal de HCl (DOB), care reprezint cantitatea
de acid clorhidric secretat de stomac, ntr-o or, n condiii
bazale (fr stimularea secreiei), avnd o valoare de 1,5- 2,5
mEq/L.
41
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Principiul metodei:
Reactivul Gnsburg, n prezena acidului clorhidric liber,
prin nclzire i evaporare, d o coloraie rou-carmin. Scopul
lucrrii este de a evidenia acidul clorhidric liber din sucul
gastric, atunci cnd nu poate fi dozat, deoarece se afl n
cantiti foarte mici. Prezena lui ne dovedete c funcia
secretorie a mucoasei gastrice nu este complet compromis.
42
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Materiale necesare:
suc gastric proaspt (prin pstrare, HCl se
volatilizeaz)
reactiv Gnsburg (soluie de vanilin i fluoroglucin
n alcool)
capsul de porelan
surs de foc.
Mod de lucru:
ntr-o capsul de porelan se pun cte 2-3 picturi din
soluiile alcoolice de vanilin i fluoroglucin. Se adaug 2-3
picturi din sucul gastric de examinat. Se nclzete lent
coninutul pn la evaporare.
Rezultate:
Apariia culorii rou-carmin ne indic prezena acidului
clorhidric liber i faptul c mucoasa gastric mai are potenial
secretor.
Lipsa culorii ne arat compromiterea total a capacitii
secretorii a mucoasei gastrice.
Principiul metodei:
Evidenierea acidului lactic se bazeaz pe proprietatea
oxiacizilor de a da reacii de culoare cu srurile ferice.
43
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Materiale necesare:
suc gastric
reactiv Uffelman (conine clorur feric i are o
culoare albastru-violet)
pipete
stativ.
Tehnica de lucru:
Se efectueaz folosind 2 eprubete: martor i prob.
Rezultate:
n eprubeta 1, martor (fr acid lactic), nu se modific
culoarea
n eprubeta 2, prob, apare culoarea galben-verzuie,
datorit formrii lactatului feric.
Principiul metodei:
Se realizeaz hidrolizarea unui substrat, respectiv a
unei cantiti de cazein n soluie, de ctre pepsina din sucul
gastric, ntr-un interval de timp i la o temperatur standard
Materiale necesare:
suc gastric
ser fiziologic
soluie acid de cazein 1, nclzit la 37C
44
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Tehnica de lucru:
Eprubeta 1 Eprubeta 2
martor prob
Soluie acid de 10 ml 10 ml
cazein 1
Suc gastric - 1ml
Ser fiziologic 1ml -
Termostat 38C 15 min 15 min
Soluie de acetat de 1ml 1ml
sodiu 20%
Tabelul nr. 2.6. Substanele introduse n eprubetele de reacie
Rezultate:
se tie c, n prezena acetatului de sodiu, cazeina
precipit;
apariia precipitatului, n eprubeta martor, dovedete
fapul c, n aceast eprubet, cazeina nu a fost
hidrolizat, prin lipsa enzimei;
n eprubeta prob, soluia este clar, deoarece
pepsina a acionat i a hidrolizat cazeina.
45
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Principiul metodei:
Laptele coaguleaz, n prezena labfermentului i a
ionilor de calciu, rezultnd paracazeinatul de calciu, insolubil.
Aceast reacie are loc n dou etape:
prima etap (enzimatic): sub aciunea
labfermentului, la un pH 4,5-5,5 i la o temperatur
de 37C, cazeinogenul din lapte se transform n
paracazein (cazeogen), solubil.
a doua etap (chimic): sub aciunea ionilor de
Ca2+, paracazeina se transform n paracazeinat de
calciu (cazeum), insolubil.
Materiale necesare:
soluie labferment 1%
lapte proaspt
5 eprubete, stativ
termostat setat la 37C
soluie de oxalat de K 10%
soluie de clorur de Ca 10%.
Mod de lucru:
Eprubeta Eprubeta Eprubeta Eprubeta Eprubeta
1 2 3 4 5
Lapte proaspt 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml
Sol. oxalat de K - - 1 ml 1 ml 1 ml
Labferment 1 ml - 1 ml 1 ml 1 ml
Labferment inactivat - 1 ml - - -
(fierbere)
Sol. clorur de Ca - - - 1 ml -
Termostatare 37C 30 min 30 min 30 min 30 min 30 min
Fierbere - - - - 1 minut
Sol. clorur de Ca - - - - 1 ml
46
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Rezultate:
47
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
48
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
2.4. NTREBRI
49
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
50
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
FIZIOLOGIA PANCREASULUI
Pancreasul este o
gland anex a tractului
digestiv, fiind situat
retroperitoneal, la nivelul
vertebrelor L1 - L2. La
mamifere, pancreasul are
o dubl secreie: exocrin
i endocrin. Sucul
pancreatic este produsul
de secreie al pancreasului
exocrin. Secreia
Figura 3.1. Localizarea pancreatic n endocrin este produs de
raport cu duodenul insulele Langerhans i
este reprezentat de hormonii: insulin, glucagon,
somatostatin, polipeptid pancreatic, gastrin, etc. Structura
histologic a pancreasului este asemntoare cu cea a
glandelor salivare, fiind reprezentat de celule acinoase i de
un sistem canalicular, care se termin ntr-un canal principal
Wirsung i, uneori, ntr-un canal accesoriu Santorini. Canalul
Wirsung se vars n duoden la nivelul ampulei Vater, n
vecintatea canalului coledoc. Secreia exocrin a
pancreasului are dou componente:
Secreie hidrelatic (hidrolatic), bogat n ap i
bicarbonat de sodiu, cu o cantitate redus de
51
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
52
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
53
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Recoltarea experimental:
Se realizeaz fistule pancreatice permanente, pentru a
recolta sucul pancreatic direct din canalul Wirsung.
Recoltarea sucului pancreatic la om:
n mod curent, sucul pancreatic este recoltat prin tubaj
duodenal cu sonda Einhorn, introdus 60 70 cm, pn n
duoden. Prin aceast metod se recolteaz suc duodenal,
care este un amestec de suc gastric, pancreatic, intestinal i
bil. Pentru a obine un suc pancreatic cu o compoziie ct mai
pur se ntrebuineaz sonde cu dublu sau triplu lumen (n
54
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Principiul metodei:
Cazeina (substrat proteic) este hidrolizat pn la
aminoacizi, sub influena tripsinei, la temperatur de 37oC.
Cazeina nehidrolizat va cpta un aspect tulbure, prin
adugare de soluie alcool - acid.
Materiale necesare:
stativ cu eprubete
pipete
soluie NaCl 9
produs biologic: suc pancreatic
soluie de cazein 1
soluie alcool - acid (acid acetic glacial i alcool)
soluie tampon
termostat reglat la 37oC
ceas de laborator
Tehnica de lucru:
n 10 eprubete se fac diluii crescnde din lichidul de
cercetat (suc pancreatic). Se procedeaz astfel: n prima
eprubet se pun 2 cm3 de suc pancreatic, n celelalte cte 1
cm3 de soluie de NaCl 9. Din prima eprubet se ia 1 cm 3 i
55
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Eprubeta 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
suc 2
- - - - - - - - -
pancreatic cm3
Soluie
NaCl 9 1 1 1 1 1 1 1 1 1
-
(ser cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3
fiziologic)
Din prima eprubet se ia 1 cm3 suc pancreatic i se pune n eprubeta a 2-a, se amestec i
din acest amestec se ia 1 cm 3 i se trece n eprubeta a 3-a, .a.m.d.
soluie de
2 2 2 2 2 2 2 2 2 2
cazein
cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3
1
Soluie
tampon 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
(pH = 7,8 - cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3
8)
Se agit toate eprubetele i se las la termostat, la 37oC, timp de o or.
alcool 23 23 23 23 23 23 23 23 23 23
acid pic pic pic pic pic pic pic pic pic pic
56
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Rezultate:
Rezultatul se exprim n uniti triptice. Unitatea
triptic este cantitatea de enzim capabil s hidrolizeze 1
mg de cazein, ntr-o or, la 37 oC.
Exemplu: n eprubeta nr. 4, cantitatea iniial de 1 cm3
suc pancreatic sau duodenal, a fost diluat la 1/8, hidroliznd
2 mg de cazein. Tripsina coninut ntr-un cm3 de suc
pancreatic nediluat va fi 8 x 2 = 16 uniti triptice.
Principiul metodei:
Dozarea activitii proteolitice a tripsinei se poate face
i prin dozarea produilor rezultai prin hidroliza proteinelor,
pn la aminoacizi, realizat prin activitatea enzimei, n
condiii standard de temperatur (37 oC) i timp de aciune.
Aminoacizii sunt substane amfotere, deoarece posed
att funcie bazic (amino), ct i funcie acid (carboxil).
Substanele amfotere, la punctul izoelectric, disociaz n mod
egal funciile acide, respectiv bazice. n mediu mai acid dect
punctul izoelectric, disociaz funcia bazic, iar n mediul mai
alcalin dect punctul izoelectric, disociaz funcia acid.
Metoda de dozare Srensen se bazeaz pe
proprietatea general a aldehidelor de a reaciona cu -NH2
(radicalul amino, radical bazic) din molecula aminoacizilor,
dnd astfel natere la compui numii baze Schiff. n acest fel,
aminoacidul rmne numai cu funcia carboxil liber,
comportndu-se ca un acid obinuit, care disociaz doar H+,
aciditatea putnd fi titrat volumetric, cu soluie NaOH 0,1N.
Tripsina acioneaz n mediu alcalin (pH = 8 - 8,8), deci
aminoacizii rezultai din aciunea ei se afl ntr-un astfel de
mediu. naintea blocrii funciei amino cu o formaldehid,
trebuie procedat la neutralizarea mediului; n caz contrar, o
parte din funciile carboxil ale bazelor Schiff vor reaciona cu
57
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Materiale necesare:
lichid de digestie triptic
fenolftalein sol 1 %
formol neutralizat
NaOH 0,1N
HCl 1%
balon Erlenmeyer, biuret, pipete
Tehnica de lucru:
Exist 3 faze:
Faza 1: neutralizarea mediului alcalin. n balonul
Erlenmeyer se pun 5 cm3 lichid de digestie triptic,
se adaug 2 3 picturi din soluia de fenolftalein.
Lichidul avnd o reacie alcalin, fenolftaleina se
coloreaz n rou-violet (pH peste 8). Cu o pipet se
adaug pictur cu pictur HCl 1%, agitnd de
fiecare dat, pn cnd culoarea roie a devenit roz
palid.
Faza 2: legarea funciilor amino. Se adaug
acelai volum (5 cm3) de aldehid formic
neutralizat 40%, formndu-se baze Schiff,
aminoacizii transformndu-se n acizi. Culoarea roz
dispare imediat, fenolftaleina n mediul acid fiind
incolor.
Faza 3: titrarea acizilor rezultai (baze Schiff). Se
titreaz cu soluie NaOH 0,1N pictur cu pictur,
pn cnd lichidul din balon i recapt culoarea
slab roz.
58
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Rezultate:
Se exprim fie n uniti triptice n sucul pancreatic, fie
n grame de glicocol sau de alanin % sau (n funcie de
greutatea molecular a acestor aminoacizi).
Unitatea triptic reprezint (n acest caz) numrul de
cm3 de NaOH 0,1N, necesar pentru neutralizarea
aminoacizilor (ca baze Schiff), rezultai dintr-o substan
proteic, digerat timp de o or la 37oC i la pH=8, sub
influena unei cantiti determinate de suc pancreatic (1 cm 3).
Exemplu: s-au utilizat pentru titrare 4 cm3 NaOH 0,1N.
Greutatea molecular a glicocolului este 75 grame.
Greutatea molecular a alaninei este 89 grame.
Dac la 1 cm3 NaOH 0,1N corespund 0,0075 grame
glicocol, respectiv 0,0089 grame alanin, la 4 cm 3
NaOH 0,1N vor corespunde:
0,0075 4
x1 0,0300
1 grame glicocol sau
0,0089 4
x2 0,0356
1 grame alanin.
Principiul metodei:
Se titreaz acizii grai liberi, rezultai prin aciunea
lipazei n condiii standard, cu soluie NaOH 0,1N, n prezena
fenolftaleinei.
Materiale necesare:
suc pancreatic (duodenal)
59
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
ulei de msline
alcool 96o
fenolftalein soluie 1%
soluie NaOH 0,1N
balon Erlenmeyer, biuret, pipete
termostat reglat la 37oC
ceas de laborator
Tehnica de lucru:
Se efectueaz, folosind 2 baloane Erlenmeyer:
Martor: ntr-un balon Erlenmeyer se pun 10 cm 3 ulei
de msline i 2 cm3 suc pancreatic. Peste acest
amestec se adaug 10 cm3 alcool 96o, pentru a
inactiva enzima i cteva picturi de fenolftalein.
Coninutul balonului nu se va colora. Amestecul este
titrat cu NaOH 0,1N pn la apariia culorii roz.
Prob: ntr-un balon Erlenmeyer se pun 10 cm 3 ulei
de msline i 2 cm3 suc pancreatic. Nu se adaug
alcool. Se pune amestecul timp de o or, la 37oC la
termostat. Dup scoaterea de la termostat, se
adaug 10 cm3 de alcool 96, pentru a inactiva
enzima i a opri reacia. Acizii grai liberi, rezultai
prin activitatea lipazei pancreatice, sunt titrai cu
soluie NaOH 0,1N, n prezena fenolftaleinei, pn
la apariia culorii roz.
Rezultate:
Diferena dintre numrul de cm3 de NaOH 0,1N, utilizai
la titrarea probei i a martorului, reprezint activitatea lipazic
din cei 2 cm3 de suc pancreatic.
Valori normale: 50 60 cm3 NaOH 0,1N la 100 cm3
suc pancreatic.
60
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Principiul metodei:
Activitatea amilazei pancreatice se apreciaz prin
capacitatea ei de a hidroliza amidonul, n condiii standard, n
produi intermediari (dextrine) i finali (maltoz), evideniai cu
ajutorul soluiei Lugol.
Materiale necesare:
ser sanguin sau urin
soluie NaCl 9
soluie amidon 1
soluie Lugol (iod iodurat 1%)
stativ cu 10 eprubete
pipete
termostat reglat la 37oC
Tehnica de lucru:
Eprubeta 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Urin sau
2
ser - - - - - - - - -
cm3
sanguin
Soluie
NaCl 9 1 1 1 1 1 1 1 1 1
-
(ser cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3
fiziologic)
Din prima eprubet se ia 1 cm3 de urin i se pune n eprubeta a 2-a, se amestec i din
acest amestec se ia 1 cm3 i se trece n eprubeta a 3-a, .a.m.d.
Soluie de 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2
amidon cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3 cm3
o
Se agit toate eprubetele i se las la termostat, la 37 C timp de 30 de minute.
Dupa termostatare, eprubetele se rcesc.
soluie
Lugol. 12 12 12 12 12 12 12 12 12 12
(picturi)
2 u.W. x 32 = 64 u.W.
62
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Valori Normale:
Amilazemie 16 32 u.W./cm3 ser sanguin
Amilazurie 16 64 u.W./cm3 urin
63
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
64
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
65
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
3.4. NTREBRI
66
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
67
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
FIZIOLOGIA FICATULUI
69
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
70
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
71
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Ap 97%-98% 84%
74
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Pigmenii biliari
Sunt cei care dau coloraia galben-verzuie,
caracteristic bilei i sunt reprezentai predominant de
bilirubin i urobilinogen. Ei reprezint produii de degradare
ai hemoglobinei, provenit din hematiile distruse n procesul
de hemoliz fiziologic.
Odat ce eritrocitele mbtrnite sunt sechestrate i
lizate, hemoglobina este catabolizat rapid. Aminoacizii sunt
eliberai prin proteoliz i apoi neutralizai sau metabolizai.
Grupul hem este catabolizat de un sistem oxidativ microzomal,
inelul porfirinic fiind convertit n pigmeni biliari, care sunt
eliminai prin ficat. Fierul, eliberat n cursul catabolismului
hemului, este iniial ncorporat n feritin (proteina de depozit),
n final fiind transportat la precursorii eritrocitari medulari de
ctre transferin, o protein plasmatic ce leag fierul.
Bilirubina este produs n macrofage, prin
catabolismul enzimatic al fraciunii hem din diverse
hemoproteine. 80% din bilirubina circulant deriv din
eritrocitele mbtrnite, care la sfritul vieii lor normale, de
aproximativ 120 de zile, sunt distruse de celulele
reticuloendoteliale. Oxidarea hemului genereaz biliverdin,
care este metabolizat n bilirubin. Restul de 15-20% din
75
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
76
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Colesterolul
Se gsete n bila hepatic n concentraie de 80-180
mg%, iar n cea colecistic n cantiti de 10 ori mai mari.
Colesterolul biliar este n cea mai mare parte produsul de
sintez al celulelor hepatice i doar ntr-o mic proporie este
de provenien sanguin.
Colesterolul, ajuns n intestin mpreun cu bila, este n
parte transformat n coprosterol sub aciunea florei bacteriene
i eliminat prin fecale, iar n parte, este reabsorbit n
segmentele proximale ale colonului i ajunge din nou la ficat.
Bila mai conine fosfolipide, dintre care menionm
lecitina, care n combinaie cu srurile biliare i colesterolul,
mpiedic formarea de calculi de colesterol.
77
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Principiul metodei:
Srurile biliare produc scderea tensiunii superficiale a
picturilor de grsime, la nivelul contactului lor cu apa,
fracionndu-le n picturi mai mici i determinnd astfel
emulsionarea.
Materiale necesare:
bil sau soluie de sruri biliare
ulei de msline
ap distilat
pipete
eprubete
stativ.
Tehnica de lucru:
Se efectueaz folosind 2 eprubete: martor i prob.
78
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Eprubeta 1 Eprubeta 2
martor prob
Soluie sruri biliare - 3-4 ml
Ap distilat 3-4 ml -
Ulei de msline 1 ml 1 ml
se amestec, prin se amestec prin
agitare, coninutul agitare coninutul
eprubetei eprubetei
Rezultate:
Eprubeta 1, martor: se evideniaz dou straturi
nemiscibile.
Eprubeta 2, prob: se formeaz o emulsie stabil.
Principiul metodei:
Floarea de sulf n pulbere fin, presrat la suprafaa
apei sau urinei normale, se menine la suprafa. n cazul n
care apa sau urina conin sruri biliare, ea cade n poriunea
inferioar a vasului, n 2-3 minute, prin scderea tensiunii
superficiale.
Materiale necesare:
soluie sruri biliare sau urin (care conine sruri
biliare)
floare de sulf n pulbere fin
pahare Berzelius.
Tehnica de lucru:
Se efectueaz folosind dou pahare Berzelius: martor
i prob.
79
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Rezultate:
Paharul 1-martor: floarea de sulf se menine la
suprafaa lichidului
Paharul 2-prob: floarea de sulf nu se menine la
suprafaa lichidului i cade n poriunea inferioar a paharului,
datorit aciunii de scdere a tensiunii superficiale a srurilor
biliare.
Principiul metodei:
Srurile biliare au proprietatea de a solubiliza acizii
grai, rezultai din hidroliza lipidelor sub influena lipazei, la
nivelul duodenului i de a forma mpreun cu acetia
compleci coleinici, care reprezint una dintre formele de
absorbie a lipidelor, la nivelul intestinului. n laborator, vom
utiliza ca lipid, spunul, iar n locul lipazei, vom folosi acidul
sulfuric.
Materiale necesare:
soluie sruri biliare sau bil diluat
acid sulfuric diluat
80
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
soluie spun
eprubete
pipete
stativ.
Tehnica de lucru:
ntr-o eprubet se introduc 5-6 ml soluie diluat de
spun, peste care se adaug cteva picturi de acid sulfuric
diluat, care hidrolizeaz grsimile, desfcndu-le n acizi grai
i glicerol. Se observ apariia unui precipitat, datorit faptului
c acizii grai nu sunt hidrosolubili i precipit n poriunea
inferioar a eprubetei. Se adaug apoi 3-4 ml soluie de sruri
biliare.
Rezultate:
Dup agitare, se remarc solubilizarea precipitatului de
acizi grai format anterior, ceea ce ne indic aciunea
hidrotrop a srurilor biliare.
Reacia Pettenkofer
Principiul metodei:
Reacia se bazeaz pe proprietatea srurilor biliare ca,
n prezena acidului sulfuric concentrat, s dea cu oximetil-
furfurolul un compus colorat n rou. Sub influena acidului
sulfuric, zaharoza se desface n levuloz i glucoz. Din
levuloz, prin eliminarea a trei molecule de ap, va rezulta
oximetil - furfurolul, care, mpreun cu acidul colic din srurile
biliare i, n prezena acidului sulfuric concentrat, va forma un
produs colorat n rou.
81
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Materiale necesare:
soluie acizi biliari (bil diluat de 3-4 ori)
soluie zaharoz 10 %
acid sulfuric concentrat
eprubete
stativ.
Tehnic de lucru:
ntr-o eprubet cu 4-5 ml soluie de acizi biliari sau bil
diluat, se adaug 0,5-1 ml soluie de zaharoz 10% i se
amestec bine. nclinnd uor eprubeta, se adaug cu
precauie 3-4 ml acid sulfuric concentrat, astfel nct s nu se
amestece cu soluia din eprubet, ci s formeze un strat
compact n poriunea inferioar a eprubetei. n tot acest timp,
eprubeta se ine sub un jet de ap rece, evitnd astfel
nclzirea ei.
Rezultate:
Agitnd foarte uor eprubeta, fr a omogeniza
coninutul, la limita de separare dintre acidul sulfuric, situat n
partea de jos i amestecul de bil i zaharoz, apare un inel
rou - violaceu.
Reacia Udranszky
82
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Principiul metodei:
Se evideniaz prezena pigmenilor biliari n urin,
utiliznd tinctura de iod. Urina care conine bilirubin, se
coloreaz n verde, n prezena iodului din tinctura de iod.
Materiale necesare:
bil diluat sau urin icteric
tinctur de iod
pipete
eprubete
stativ.
Tehnica de lucru:
ntr-o eprubet se introduc 10 ml bil diluat sau urin
icteric. Cu o pipet efilat se las s curg, n poriunea
inferioar a eprubetei, 2 ml tinctur de iod.
Rezultate:
Se observ apariia unui inel verde, la nivelul suprafeei
de contact dintre urin si tinctura de iod, ceea ce ne indic
prezena bilirubinei n lichidul de cercetat. Proba este extrem
de simpl, fiind folosit uzual n practica medical, ns nu
este strict specific, acest inel apare i dup administrarea de
antitripsin.
Reacia Gmelin
Principiul metodei:
Evideniem prezena pigmenilor biliari n urin,
cunoscnd faptul c bilirubina se coloreaz n verde, prin
83
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Materiale necesare:
bil diluat sau urin icteric
amestec format din acid azotic concentrat i nitrit de
sodiu
pipete
eprubete
stativ.
Tehnica de lucru:
ntr-o eprubet se introduc 10 ml bil diluat sau urin
icteric. Cu o pipet efilat se las s curg ncet, n poriunea
inferioar a paharului, 1-2 ml amestec format din acid azotic
concentrat i nitrit de sodiu.
Rezultate:
La limita de separare dintre cele dou lichide apar mai
multe inele colorate n verde, albastru, violet, galben, rou,
datorit oxidrii inegale a pigmenilor biliari. Prezena inelului
verde la limita de separare dintre cele dou lichide ne indic
existena n lichidul de cercetat a bilirubinei, care se oxideaz
la biliverdin.
Reacia Rosenbach
Principiul metodei:
Se evideniaz prezena pigmenilor biliari n urin,
cunoscnd faptul c bilirubina se coloreaz n verde, prin
oxidarea la biliverdin, n prezena acidului azotic.
Materiale necesare:
bil diluat sau urin icteric
84
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Tehnica de lucru:
Pe o hrtie de filtru, aezat pe o plac de porelan, se
las s cad 2-3 picturi din soluia de cercetat. n mijlocul
petei formate pe hrtie se adaug o pictur din amestecul
format din acid azotic concentrat i nitrit de sodiu.
Rezultate:
n mijlocul picturii de acid, respectiv la limita de
separaie dintre cele dou lichide de pe hrtie, apar cercuri
concentice colorate n galben, rou, albastru, violet i la
exterior verde. Prezena inelului verde, la limita de separare
dintre cele dou lichide de pe hrtie, ne indic existena n
lichidul de cercetat, a bilirubinei, care se oxideaz la
biliverdin.
Reacia Franke
Principiul metodei:
Se evideniaz prezena pigmenilor biliari n urin,
cunoscnd faptul c bilirubina se coloreaz n verde intens, n
prezena albastrului de metilen.
Materiale necesare:
bil diluat sau urin icteric
soluie de albastru de metilen 2
pipete
eprubete
stativ.
85
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Tehnica de lucru:
ntr-o eprubet se introduc 5 ml bil diluat sau urin
icteric, apoi se adaug pictur cu pictur soluie de
albastru de metilen.
Rezultate:
Soluia se va colora n verde intens, indicnd prezena
bilirubinei, care prin oxidare s-a transformat n biliverdin. n
absena bilirubinei, soluia rmne albastr.
Principiul metodei:
Se evideniaz prezena pigmenilor biliari n urin,
cunoscnd faptul c bilirubina precipit, n prezena clorurii de
bariu, sub form de bilirubinat de bariu. Acesta este apoi
oxidat de amestecul dintre acid sulfuric i bicromat de potasiu,
la biliverdinat de bariu, de culoare verde.
Materiale necesare:
bil diluat sau urin icteric
soluie de clorur de bariu 10%
soluie de bicromat de potasiu 4%
soluie de acid sulfuric 20%
pipete
eprubete
plnie
hrtie de filtru
stativ.
Tehnica de lucru:
ntr-o eprubet se introduc 5 ml bil diluat sau urin
icteric, apoi 10 ml soluie clorur de bariu 10%. Dup agitare,
apare un precipitat de bilirubinat de bariu, de culoare galben,
86
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Rezultate:
Se observ, pe hrtia de filtru, apariia unor zone
concentrice de culoare verde, de biliverdinat de bariu, n
punctele unde a fost picurat reactivul oxidant.
Valori (mg/dl)
Bilirubina total:
Prematuri: 1 zi 6
Prematuri 2 zile 8
Prematuri 3-5 zile 15
La termen: 1 zi 6
La termen: 2 zile 7
La termen 3-5 zile 12
Copii i aduli 0,8-1
87
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
88
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
4.4. NTREBRI
89
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
90
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Tunica muscular
a tubului digestiv
(exceptnd poriunea
iniial i terminal a lui)
este reprezentat de
musculatur neted.
Muchiul neted, denumit
astfel datorit lipsei
striaiilor transversale,
este alctuit din fibre mici,
n mod obinuit de 1-5 m
diametru i 20-500 m
lungime.
esutul muscular
neted din componena
unui anumit organ difer,
n general, de cel din alte
organe prin: dimensiuni,
Figura 5.1. organizare (de exemplu,
dispunere n tunici,
straturi, etc.), rspunsul la
diferii stimuli, inervaie, funcii i este mprit n dou tipuri
majore, n funcie de tipul excitaiei:
91
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
De reinut:
Muchiul neted are filamente groase i subiri, care nu sunt
aranjate n sarcomere; de aceea nu apare striat ci neted.
Tipurile de muchi neted:
muchiul neted multiunitar:
se gsete n iris, muchii ciliari ai cristalinului i vase
deferente;
se comport ca uniti motorii separate;
nu are sau are foarte puine sinapse electrice (jonciuni
gap) ntre celule;
este bogat inervat, contracia este controlat n principal
de ctre sistemul nervos vegetativ
m. neted unitar:
este cel mai frecvent i este prezent n uter, tract gastro-
intestinal, ureter, vezic urinar
are activitate spontan (unde de contracie lente) i
prezint de asemenea o activitate ritmic (pacemaker)
modulat de hormoni i neurotransmitori; se poate, de
asemenea, contracta n urma unor stimuli mecanici
(traciune, lovire).
94
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
miozinei.
depolarizarea membranei celulare deschide canalele de Ca2+
voltage-gated n faza ascendent (upstroke) a potenialului de
2+
aciune i Ca ptrunde n celul, ca urmare a gradientului
2+
electrochimic, crescnd concentraia intracelular de Ca
2+
([Ca ]).
Ca , care intr n celul poate determina eliberarea
2+
2+
suplimentar de Ca n sarcoplasm din reticulul
2+ 2+
sarcoplasmic, prin canale de Ca Ca -gated. Hormonii i
2+
neurotransmitorii pot, de asemenea, elibera direct Ca n
2+
sarcoplasm prin intermediul canalelor de Ca IP3 (inozitol
1,4,5-trifosfat)-gated.
crete concentraia intracelular a calciului.
Ca se leag de calmodulin. Complexul Ca -calmodulin
2+ 2+
95
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Principiul metodei:
Un muchi neted de broasc (stomac), preparat cu
atenie, se fixeaz la o peni ce nscrie pe un kimograf o
secus, obinut prin stimulare electric.
Materiale necesare:
broasc
ace de sering, pentru spinalizarea broatei
ace cu gmlie, necesare montajului
planet, pentru fixarea broatei
kimograf Marey
cheie Morse, pentru stabilirea circuitului electric
srme subiri (li), pentru legturi electrice
surs de curent alternativ, pentru stimulare
vat
a
capsul de porelan
ser fiziologic pentru broasc (soluie NaCl 6)
foarfec
pense
cronograf.
Tehnic de lucru:
Se spinalizeaz broasca, prin introducerea unui ac de
sering, vertical, prin articulaia atlas - axis, la intersecia liniei
ce unete poriunea posterioar a petelor auditive (timpan) cu
96
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Figura 5.2.
Rezultate:
Dup cteva secunde de la oprirea excitaiei, muchiul
circular al stomacului ncepe s se contracte, astfel nscriind
pe cilindrul kimografului o curb, cu o faz ascendent, de
98
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Principiul metodei:
Preparatul obinut chirurgical (fragment de intestin),
este montat ntr-o baie de organ izolat i legat de o peni, ce
nscrie pe cilindrul unui kimograf variaiile de lungime.
99
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
seringi
a
ace cu gmlie
kimograf Marey sau sisteme de nregistrare cu
transductori specializai
substane active (acetilcolin, atropin, adrenalin)
Tehnic de lucru:
Un fragment de intestin de 2-4 cm (ileon terminal de
cobai sau de iepure, duoden de obolan), meninut de la
recoltare ntr-o cutie Petri cu ser fiziologic, este legat de cele
100
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Rezultate:
Pe muchiul neted intestinal, introdus n baia de organ
izolat, se observ:
101
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Figura 5.6.
efect contractil, determinat de acetilcolin; tot un
efect contractil poate fi dat i de: histamin,
bradichinin, pilocarpin, ionii de potasiu etc. Aceste
substane intensific i activitatea spontan a ansei
intestinale (fig. 5.7).
Figura 5.7.
102
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
Figura 5.8.
Figura 5.9.
103
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
4.3. NTREBRI
Figura 5.10.
105
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
BIBLIOGRAFIE
106
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
107
Lucrri practice Fiziologia aparatului digestiv
108