Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Lucru individual
La microbiologia alimentara
Chisinau 2017
Cuprins
Microbiota laptelui ................................................................................................................ 4
Evolutia microflorei laptelui proaspat .................................................................................... 4
Contaminarea interna a laptelui ............................................................................................ 5
Microorganisme patogene ................................................................................................. 5
Microorganisme nepatogene ............................................................................................. 6
Alte substane transmisibile prin lapte ............................................................................... 6
Contaminarea extern a laptelui ............................................................................................ 6
Calitatea microbiologic a laptelui ......................................................................................... 7
Microbiologia laptelui pasteurizat ......................................................................................... 7
Defecte de natur microbian ale laptelui crud i pasteurizat ................................................ 7
Microbiologia laptelui praf .................................................................................................... 8
Microbiologia iaurtului .......................................................................................................... 9
Produse fermentate cu bifidobacterii..................................................................................... 9
Microbiologia chefirului....................................................................................................... 10
Defecte de natur microbian a produselor lactate acide ..................................................... 10
Microbiologia untului .......................................................................................................... 10
Defecte de natur microbiologic la pstrarea untului ......................................................... 11
Microbiologia brnzeturilor .................................................................................................. 11
Alterri microbiene ale brnzeturilor .................................................................................... 13
Microbiota laptelui
Laptele este un aliment foarte valoros din punct de vedere nutritiv, deoarece contine in cantitati
corespunzatoare substante usor asimilabile, favorabile dezvoltarii microorganismelor.
Sursele de carbon oferite de lapte constau in: lactoza, acid citric, lipide. Sursele de azot sunt
protide, aminoacizi. Laptele mai contine si substante minerale dintre care P si Ca cu rol important
in metabolismul celular, enzime si vitamine ca factori de crestere necesari bacteriilor lactice.
Laptele proaspat are un pH=6,5, apropiat celui optim de dezvoltare a bacteriilor de putrefactie si
un rH=12-18, favorabil activitatii microorganismelor facultativ anaerobe. Daca laptele se
pastreaza, la suprafata lui se acumuleaza un strat de grasime, accesul aerului este astfel oprit,
are loc reducerea potentialului redox, iar bacteriile anaerobe se pot dezvolta.
Fiind un mediu nutritiv bogat, laptele ofera in special, conditii favorabile dezvoltarii bacteriilor
lactice.
In aceasta faza microorganismele din lapte nu se inmultesc datorita prezentei unor substante cu
efect antimicrobian: imunoglobuline, lactenine. Acestea sunt sensibile la temperaturi ridicate si
rezista doar 6 ore la temperatura de 25C si 48 ore la 0C.
In aceasta faza se dezvolta streptococii care produc acid lactic pana cand pH-ul scade la valoarea
4,5. In acest moment activitatea lor este inhibata si incep sa se dezvolte lactobacilii care sunt mai
acidotoleranti (pH=3,5).
Aceasta faza dureaza cateva zile (dupa 4 zile, streptococii sunt neviabili).
Dezvoltarea drojdiilor este favorizata de prezenta acidului lactic pe care il folosesc ca sursa de
carbon si energie. Are loc o neutralizare a mediului, pH-ul creste pana la valoarea neutra.
Sursele interne ofera microorganisme care contamineaza laptele in cursul vietii animalului.
Contaminarea este cu atat mai intensa cu cat animalul este bolnav, obosit deoarece creste
permeabilitatea tesuturilor biologice, iar diferite microorganisme pot fi astfel mai usor
transferate in laptele secretat de glandele mamare.
Alta sursa care permite contaminarea directa a laptelui este reprezentata de aer care antreneaza
microorganisme de pe furaje. Din acest motiv se recomanda ca alimentarea animalelor sa se faca
dupa mulgere.
Laptele adera la suprafata utilajelor de prelucrare, formand o pelicula care retine o cantitate
considerabila de microorganisme. In pasteurizatoare si concentratoare, datorita temperaturilor
de lucru, are loc precipitarea proteinelor si a fosfatilor, precipitare care conduce la formarea
pietrei de lapte care se indeparteaza foarte greu si nu permite o igienizare eficienta.
Contaminarea extern este ocazional dat de numeroase alte grupe de microorganisme care
prin activitatea lor poate fi n marea lor majoritate, ageni de alterare.
Microbiologia iaurtului
Iaurtul (yogurt) denumete corect, produsul obinut prin fermentarea laptelui cu o cultur mixt
din 2 specii de bacterii lactice termofile, Streptococcus thermophillus (SST) i Lactobacillus
bulgaricus (LDB), care trebuie s existe n stare vie n produsul final (aprox. 106 ufc/g iaurt).
Rolul culturii starter la fabricarea iaurtului. n culturile starter pentru iaurt raportul
ntre Lactobacillus bulgaricus i Streptococcus thermophillus este de 1:1. n cultura mixt ntre
bacteriile lactice se stabilesc relaii de cooperare, fiecare monocultur produce substane care
nu sunt iniial prezente n lapte i care influeneaz pozitiv creterea celeilalte.
Producerea de acid lactic de ctre LDB este stimulat la concentraii sczute ale acidului formic
produs de SST n absena oxigenului ct i de CO2 eliberat prin fermentaie. Streptococii cresc mai
repede i sunt responsabili pentru aciditate n timp ce lactobacilii adaug arom n special
datorit formrii aldehidei acetice. Prin activitatea lor, lactobacilii care au activitate peptidazic
produc compui cu azot, asimilabili pentru streptococi ceea ce explic relaia de sinergism ntre
streptococi i lactobacili la fabricarea iaurtului.
Rolul streptococilor i lactobacililor la obinerea iaurtului const n acidifierea laptelui, sinteza de
arom, dezvoltarea texturii i a vscozitii.
Interaciunile ntre bacterii lactice din iaurt sunt deosebit de complexe i benefice pentru
stimularea creterii activitilor fermentative. S. thermophillus nu posed activitate proteolitic
extracelular suficient, iar cantitatea de aminoacizi i peptide libere n lapte nu sunt suficiente
pentru creterea sa optim.
Lactobacilii produc proteaze care degradeaz cazeinele laptelui i asigur streptococilor sursele
necesare de azot pentru cretere. Activitatea endopeptidazic a lactobacililor este intracelular
i este optim la 45-50C i pH = 5,25,8 i sunt inactivate la 70C timp de 1 minut. Proteinazele
din Lb. bulgaricus sunt active fa de cazein. Prin activitatea proteazic lactobacilii termofili
contribuie la ameliorarea proprietilor reologice, a digestibilitii i aromei.
n timpul fabricrii iaurtului numrul maxim de bacterii lactice ajunge la valori de 109/g, apoi
numrul se reduce progresiv la pstrare la 107/g. n iaurtul congelat bacteriile lactice au
supravieuit i dup 60 sptmni.
Microbiologia untului
La fabricarea untului se poate folosi smntna dulce i mai frecvent smntna fermentat. n acest
scop smntna dulce este pasteurizat i dup rcire este inoculat cu culturi mixte de bacterii
lactice aromatizante productoare de acid lactic, diacetil i acetil metil carbinol.
Dintre acestea fac parte Lactococcus cremoris, Lactococcus diacetylactis i Leuconostoc
mesenteroides. Aceste bacterii pot produce substane de arom din acidul piruvic format prin
fermentaia lactozei, sau din acidul citric prezent n lapte. n general dup fermentare la 22C,
timp de 24 ore, smntna maturat cu aproximativ 55Thrner (pH 4,7), sufer operaia de batere
cu separarea n zar a unui numr mare de microorganisme.
Urmeaz splarea masei de unt cu ap pur din punct de vedere microbiologic, malaxarea i
caluparea. Se recomand ca apa potabil se sufere n prealabil o clorinare cu 5-10 mg Cl2/dm3,
timp de 15 minute pentru o decontaminare suplimentar. Prin malaxare are loc dispersarea fin
a apei, astfel nct untul poate conine aproximativ 1010 micropicturi per gram, majoritatea cu
diametrul < 5 m reinnd aproximativ 2% din microbiota apei.
Numrul de microorganisme n untul proaspt din smntna fermentat este de aproximativ 107-
109/g. n absena oxigenului i a nutrienilor are loc treptat o reducere a numrului de lactococi,
nct dup o lun de pstrare n microbiota untului predomin micrococi i drojdii,
microorganisme ce pot proveni din apa de splare sau antrenate de pe suprafaa utilajelor.
n untul din smntna dulce predomin microbiota remanent ataat de globulele de grsime
separate la centrifugare la care se adaug microorganisme de contaminare astfel nct numrul
de celule poate fi de ordinul 105-106/g. n funcie de temperatura de pstrare, evoluia creterii
microorganismelor este difereniat. Prin pstrare la temperaturi de 15C are loc o cretere a
numrului de bacterii lactice, care ajung la concentraii de 107/g, n schimb la pstrarea la 5C se
dezvolt mai intens bacteriile psihrofile, cu activitate lipolitic i proteolitic.
Pentru aprecierea calitii untului, standardele prevd absena bacteriilor coliforme pe gram
produs i admit, n funcie de calitatea untului, ntre 1000-2000 celule de drojdii i mucegaiuri/g.
Microbiologia brnzeturilor
Brnzeturile se obin ntr-o gam variat de sortimente, peste 600, variante posibile prin
modificarea componentelor principale din lapte sub aciunea culturilor selecionate de
microorganisme folosite drept culturi starter la prelucrarea laptelui.
Pentru obinerea brnzeturilor se poate utiliza laptele ca atare n care bacteriile lactice trebuie s
reprezinte peste 50% din totalul microbiotei, cu restricii privind prezena bacteriilor butirice
(absente la 1 cm3), a bacteriilor coliforme, a bacteriilor de putrefacie din genul Pseudomonas.
Pentru evitarea unor defecte i a riscului de transmitere a unor bacterii patogene de la animale
bolnave, dup colectarea laptelui i verificarea lui din punct de vedere calitativ i cantitativ se
efectueaz pasteurizarea n regim t/T care s nu produc denaturarea proteinelor laptelui i s
asigure distrugerea microorganismelor patogene transmisibile prin lapte. Dup rcire se
realizeaz inocularea laptelui cu monoculturi sau culturi mixte specifice, are loc nmulirea
bacteriilor concomitent cu fermentaia lactic, iar etapele tehnologice urmresc s dirijeze
activitatea util a culturilor starter.
Brnzeturile nu reprezint un substrat ideal pentru dezvoltarea tuturor microorganismelor, dar
unele microorganisme, din care fac parte i microorganismele selecionate, utilizate drept culturi
starter n industria brnzeturilor, sunt adaptate acestui tip de biotop.
Dup inocularea n laptele pasteurizat i rcit la temperatura optim pentru culturi, bacteriile
produc fermentarea lactozei cu formare de acid lactic i substane de arom. La sortimentele de
brnzeturi cu past moale, fermentaia lactic dureaz 4-6 ore pn cnd, prin formarea de acid
lactic pH-ul scade sub 4,5, cnd se produce coagularea acid a cazeinei din lapte. La sortimentele
de brnzeturi cu past tare, de exemplu, cnd pH-ul ajunge la valoarea de 5, n laptele fermentat
se adaug enzime proteolitice din cheag, active la acest pH i are loc coagularea enzimatic.
n lapte are loc multiplicarea bacteriilor lactice favorizat de prezena lactozei, a surselor
asimilabile de azot (aminoacizi i peptide), a potenialului de oxidoreducere favorabil. Rolul
principal al bacteriilor lactice la fabricarea brnzeturilor este producerea intens i sigur de acid
lactic. Fermentaia are loc rapid la concentraie iniial de celule de 110 9 /cm3, care reprezint
masic aproximativ 500 g substan uscat per cm3 i necesit pentru sinteza acesteia 260 g
proteine.
Coagularea laptelui const n transformarea cazeinei solubile n paracazeinat insolubil i se poate
realiza pe dou ci:
coagularea acid poate avea loc ca urmare a acumulrii de acid lactic rezultat prin
fermentaie atunci cnd prin scderea de pH se ajunge la punctul izoelectric al cazeinei din
lapte; se formeaz paracazeinat insolubil i lactat de calciu;
coagularea enzimatic se realizeaz cu enzime proteolitice coagulante, cnd se obine,
prin formarea de paracazeinat insolubil, un coagul compact, mai bogat n calciu. Dintre
enzimele coagulante sunt folosite:
cheagul, obinut prin extragere din stomac de miel (viel), conine un complex de enzime
proteolitice din care fac parte: chimotripsina, tripsina, plasmina i renina;
enzime de origine vegetal : papaina, bromelaina, ficina, folosite n ri cu climat cald;
enzime de natur microbian, se obin cu ajutorul unor microorganisme selecionate cu
speciile: Mucor pussilus, Mucor miehei, Endothia parasitica.
Prelucrarea coagului . n funcie de sortimentul de brnz, coagulul este supus operaiei de tiere
(mrunire), care favorizeaz separarea zerului. n timpul operaiei are loc n continuare
multiplicarea bacteriilor, iar prin separarea zerului se apreciaz c aproximativ 2/3 din microbiota
laptelui rmne n coagul i restul se elimin o dat cu zerul.
Maturarea brnzeturilor . Este o etap foarte important pentru calitatea produsului finit i este
rezultatul activitii complexe a celulelor microbiene vii, a enzimelor microbiene exogene ale
acestora sau a enzimelor eliberate n urma procesului de autoliz a celulelor nevii, precum i a
enzimelor native ale laptelui sau adugate cu cheagul, asupra principalelor componente din
coagul i anume: lactoz nefermentat, lactai, acid lactic, protide i lipide. Ca rezultat al formrii
de lactat de calciu se reduce aciditatea n past i devine posibil activitatea bacteriilor care
necesit pentru dezvoltare valori neutre de pH.
La maturare se produce o hidroliz limitat a proteinelor din lapte, n special a cazeinei, cu
formarea de compui cu masa molecular redus, uor digerabili i a aminoacizilor. Prin maturare
are loc creterea gradului de digestibilitate i a valorii nutritive. Aminoacizii rezultai la maturare
pot suferi reacii de transaminare, decarboxilare, dezaminare, iar produsele rezultate pot fi
aldehide, alcooli .a., ceea ce explic diversitatea gustului i aromei. Lipidele sub aciunea
lipazelor produse de culturi sau provenite din cheag sau lapte sunt transformate n glicerol, surs
de carbon pentru microorganisme, iar acizii grai sunt transformai parial n aldehide, cetone,
compui ce dau un gust picant, specific.
Alterri microbiene ale brnzeturilor
n condiii de nerespectare a procesului tehnologic i a condiiilor igienico-sanitare la prelucrarea
laptelui, n urma activitii microorganismelor de contaminare pot avea loc alterri ale
brnzeturilor cu modificarea calitii senzoriale i pierderea valorii alimentare.
Balonarea timpurie apare dup 1-2 zile de la formare i este datorat prezenei n numr mare
a bacteriilor coliforme Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Enterococcus faecalis etc.
Aceste bacterii se pot nmuli concomitent cu bacteriile lactice i produc fermentaia lactozei cu
formarea de acid lactic, acid acetic, CO2 i H2. Ca urmare a degajrii intense de gaze, n condiiile
n care coaja nu este penetrabil apare balonarea formei de brnz, iar n seciune pasta este
buretoas cu alveole mici, neuniforme.
Prezena n concentraie ridicat a celulelor de Escherichia coli, facultativ patogen, productor
de enterotoxine, poate conduce prin consumul brnzei alterate la starea de toxiinfecie. Defectul
poate fi ntlnit la brnzeturi cu past moale tip Camembert, ca urmare a multiplicrii n perioada
de maturare a bacteriilor coliforme n lapte.
Balonarea trzie poate apare dup 20-60 zile (n timpul maturrii brnzeturilor) i este
datorat bacteriilor butirice din speciile Clostridium butiricum i Clostridium tyrobutiricum.
Aceste bacterii pot proveni din sol, ap furaje, cheag etc., rezist la pasteurizarea laptelui i rmn
n stare de endospori pn cnd pH-ul crete prin neutralizarea acidului lactic de fermentaie la
valori mai mari de 6.
n urma activitii lor prin formare de gaze (CO2 i H2) are loc balonarea, deformarea cu rupturi
inestetice, neordonate n past i sesizarea gustului iute, slciu, prin acumularea acidului butiric.
Balonarea brnzeturilor poate fi dat i de ctre Bacillus polymixa care utilizeaz ca surs de
carbon lactaii cu eliberare de CO2.
Defectul de gust amar este ntlnit n brnzeturi de tip Cheddar i Gouda i poate fi datorat
activitii proteolitice a culturilor starter sau a celor adugate cu cheagul. Prin aciune lipolitic
se elibereaz acizi grai cu formare de mono i digliceride responsabile pentru gustul amar. n
brnza Camembert, Roquefort, pot da gustul amar i culturile fungice. Pentru eliminarea acestui
defect prin metode tehnologice este favorizat dezvoltarea bacteriilor productoare de
peptidaze care produc hidroliza enzimatic a peptidazelor amare la aminoacizi.
Ptarea brnzeturilor este datorat bacteriilor din genul Pseudomonas. n condiii de pstrare
a brnzei n mediul umed, ca rezultat al proteolizei, se formeaz tirozina care prin oxidare
formeaz melanine de culoare cenuiu-brun.
Mucegirea brnzeturilor defect frecvent ce duce la deprecierea unor cantiti mari de
produse se caracterizeaz prin apariia de pete colorate specific, miros caracteristic, degradarea
cojii i a zonelor adiacente, risc de formare a micotoxinelor i difuzia lor n past.
Dintre mucegaiurile izolate din microbiota brnzeturilor alterate fac parte: Geotrichum
candidum cu activitate proteazic i lipazic, lipsit de potenial toxicogen, Geotrichum
auranticum, Monascus purpurens, Aspergillus sp., Penicillium sp., care produc pete diferit
colorate (portocaliu, rou, brun, verzui). Concomitent cu mucegaiurile, pe suprafaa brnzeturilor
se pot dezvolta drojdii ce dau modificri de culoare i aparin genurilor Rhodotorula, Candida,
Debaryomyces.
Bibliografie:
http://www.rasfoiesc.com/sanatate/alimentatie/MICROBIOLOGIA-
LAPTELUI-SI-A-PR58.php;
https://conspecte.com/Merceologia-marfurilor-
alimentare/microbiologia-laptelui-si-a-produselor-din-lapte.html;