Determinarea fosforului total

 Prelevarea probei se poate face in recipient de plastic sau sticla.

 Daca proba nu se analizeaza in aceeasi zi , proba se conserva prin adaugarea a 2 ml H2S04 apoi se
pastreaza la 4 grade Celsius.
 Sticlaria se spala cu 1:1 HCl fierbinte si apoi limpezita cu apa distilata.
 Absorbanta solutiei se masoara la 880 nm.
 Se folosesc cuvete de plastic.

1.Prepararea reactivilor:
 Acid ascorbic 0.1M: se dizolva 1.76 g acid ascorbic in 100 ml apa distilata.Se pastreaza la 4 grade
Celsius.Se prepara proaspat saptamanal.
 Acid sulfuric 5 N.Intr-un balon cotat de 500 de ml umplut cu aproximativ 400 ml apa distilata se
adauga 70 ml de acid sulfuric concentrat cu atentie.Se aduce la semn cu apa distilata.
 Tartrat de potasiu si stibiu(antimoniu):Intr-un balon cotat de 500 de ml umplut cu aproximativ 400
ml apa distilata se adauga 1.3715 g tartrat de potasiu si stibiu. Se aduce la semn cu apa distilata.
 Molibdat de amoniu.Se dizolva 20 grame de molibdat de amoniu in 500 ml apa distilata.
 Reactivul combinat:
Intr-un balon cotat de 1 litru se adauga urmatorii reactivi in urmatoarea ordine:
50 ml acid sulfuric 5N
5 ml tartrat de potasiu si stibiu
Se amesteca bine
Apoi se adauga 15 ml molibdat de amoniu
Se amesteca bine
Apoi se adauga 30 ml acid ascorbic 0,1 M
Se amesteca bine.
Acest reactiv este stabil timp de 4 ore din momentul prepararii.

2.Mod de lucru
 Se toarna 50 ml de proba bine omogenizata intr-un pahar Berzelius gradat.
 Se adauga 1 picatura fenolftaleina
 Daca proba capata o culoare rozalie se adauga acid sulfuric 5N pana culoarea dispare.
 Se adauga 1 ml solutie acid sulfuric 5N si 0.4 grame persulfat de amoniu(NH4)S2O8
 Se adauga 1 bila de fierbere
 Se fierbe pe baia de nisip timp de 45 de minute sau pana volumul solutiei scade la 10 ml
 Se raceste la temperatura camerei(sau imersare in apa rece)
 Se dilueaza aceasta solutie la 30 de ml cu apa distilata
 Se adauga 1 picatura de fenolftaleina.
 Se adauga hidroxid de sodiu pana la o culoare roz pal.
 Se dilueaza aceasta solutie la 100 ml cu apa distilata.
 Din aceasta solutie bine omogenizata se iau 50 de ml in alt pahar Berzeluis
 Se adauga 1 picatura de fenolftaleina in cei 50 de ml mutati
 Daca culoarea vireaza spre roz se adauga acid sulfuric 5N pana dispare culoarea.
 Peste aceasta solutie se adauga 8 ml de reactiv combinat si se agita bine
 Dupa 10 minte, dar nu mai mult de 30 de minute se masoara absorbanta solutiei.

1
  Lungimea de unda 880 nm.
 Rezultatul(unitati de absorbanta se introduce in formula de calcul sau se obtine concentratie din curba
de etalonare astfel:
Mg fosfor/l rezultati din cei 58 de ml finali*100/ volumul de apa luat in analiza=mg P per litru proba

3.Pregatirea curbei de etalonare

Curba de etalonare se face din minim 6 solutii cu concentratii cunoscute si se repeta la minum 1 an.
Pregatirea solutiilor stoc:

Solutia stoc A: (100 mg/l)se dizolva 0.4393 KH2PO4(Fosfat monopotasic p.a) uscat in prealabil la 105 grade
Celsius timp de 1 ora in balon cotat de 1000 ml.
1ml=0.1mg fosfor

Solutia stoc B(10 mg/l)

Din solutia stoc A se iau 100 ml si se dilueaza la 1000 ml cu apa distilata.
1 ml=0.01mg fosfor

Solutia stoc C(1 mg/l)

Din solutia stoc B se iau 100 de ml si se dilueaza la 1000 ml cu apa distilata.
1 ml=0.001 mg fosfor.

Pregatirea etaloanelor(s-a folosit solutia stocB)

Etalon 1 : 0 mg/l(doar apa distilata)
Se pune 100 ml apa distilata intr-un pahar Berzelius gradat

Etalon 2 : 0.1mg/l
Se pune1 ml solutie stoc B in pahar Berzelius gradat si se aduce la 100 ml cu apa distilata

Etalon 3 : 0.2mg/l
Se pune2ml solutie stoc B in pahar Berzelius gradat si se aduce la 100 ml cu apa distilata

Etalon 4 : 0.4mg/l
Se pune 4 ml solutie stoc B in pahar Berzelius gradat si se aduce la 100 ml cu apa distilata

Etalon 5 : 0.8mg/l
Se pune 8ml solutie stoc B in pahar Berzelius gradat si se aduce la 100 ml cu apa distilata

Etalon 6 : 1mg/l
Se pune 10 ml solutie stoc B in pahar Berzelius gradat si se aduce la 100 ml cu apa distilata

Etalon 7 : 1.5mg/l
Se pune15ml solutie stoc B in pahar Berzelius gradat si se aduce la 100 ml cu apa distilata
Aceste etaloane trebuie tratate conform modului de lucru.

2
Note:
 Acidul ascorbic este stabil 1 saptamana la 4 grade celsiuc.
 Molibdatul de amoniu si tartratul de potasiu si stiubiu se pastreaza la 4 grade Celsius si se aduc la
temperatura ambianta inainte de folosire.
 Persulfat de de amoniu se pune in proba imediat dupa cantarire(deoarece este un reactiv higroscopic).
 La preparearea curbei de etalonare se foloseste doar sticlarie spalata temeinic cu acid clorhidric1:1
 Nerespectarea acestei conditii poate duce la rezultate eronate atat la prepararea solutiilor stoc cat si a
etaloanelor.
 La introducerea cuvetei cu proba de analizat in spectofotometru peretii cu suprafata clara se sterg usor
cu un servetel fin si se orienteaza astfel incat fluxul luminos sa treaca prin ele(nu prin peretii mati).
 Peretii cuvetelor trebuie sa fie curati , fara urme de praf si fara amprente
 In cazul luarii in lucru a 2 probe se prepara reactiv combinat dupa urmatorul model(pt economie
reactivi)
Intr-un balon cotat de 100 ml se adauga:
10ml acid sulfuric 5N
1ml tartrat de potasiu si stibiu
Se amesteca bine
Apoi se adauga 3 ml molibdat de amoniu
Se amesteca bine
Apoi se adauga 6ml acid ascorbic 0,1 M
Se amesteca bine.
Acest reactiv este stabil timp de 4 ore din momentul prepararii