LUCRĂRI PRACTICE

 Analiza microscopică a unor celule procariote

Pregătirea preparatului.
Luaţi o mână de fân pe care o depuneti pe fundul unui vas. Turnaţi peste fân apă fierbinte
până la acoperirea completă a acestuia. Acoperiţi vasul si lăsaţi-l in repaus 48 de ore; veţi constata
că pe suprafaţa lichidului din vas s-a format o pojghiţă vâscoasă-mucilaginoasă.
Depuneţi pe lamă o picătură de apă. Luaţi cu ansa sau acul spatulat puţin material din pojghiţa
formată si amestecaţi-o bine în picătura de apă de pe lamă. Acoperiţi totul cu o lamelă. Preparatul
astfel obtinut se analizează la microscop.
Examinarea la microscop.
Se observă numeroase celule cilindrice-scurte mobile, incolore; acestea apartin bacteriei
fânului (Bacillus subtilis). Ele se pot remarca datorită mişcărilor în valuri pe care le efectuează.

 Structura celulei la ceapă

Pregătirea preparatului.
Se desprinde cu pensa un fragment din epiderma superioară (partea concavă) a frunzelor
cărnoase ale bulbului de ceapă. Fragmentul epidermic se pune în cutia Petri. Se taie cu foarfecele
sub apă o porţiune din acest fragment (circa 5x8 mm) şi se pune într-o picătură de apă pe lamă, în
aşa fel încât să fie bine etalat. Epiderma se aşează cu axa longitudinală paralelă cu latura mică a
lamei. Se aplică apoi lamela, lăsând-o să cadă uşor peste materialul vegetal.
Examinarea la microscop.
Preparatul se analizează mai întâi cu obiectivul mic. În câmpul microscopului se observă un
ţesut format dintr -un singur strat de celule. Pentru a putea să vedeţi nucleul, coloraţi preparatul pe
lamă cu o picătură de iod în iodură de potasiu (soluţie Lugol). Se aplică picătura de soluţie Lugol la
o margine a lamelei, iar la marginea opusă se absoarbe apa de sub lamelă cu ofâşie de hârtie
de filtru. Puteţi apoi să examinaţi preparatul cu obiectivul 20x.
Peretele celular apare ca un înveliş transparent cu porţiuni mai subţiri numite punctuaţiuni;
între pereţii a două celule vecine se află lamela mijlocie.
Citoplasma apare ca un strat subţire, transparent, de-a lungul peretelui celular. Are aspect granular,
este incoloră, după colorare este gălbuie.
Nucleul se poate afla în centrul celulei, la unul din
capete sau poate avea poziţie parietală, la celulele
mature. Este invizibil înainte de colorare. După
colorare cu iod devine vizibil având o culoare
galben strălucitor şi aspect granular.
Examinând epiderma bulbului de ceapă roșie se
observă în celule vacuole pline cu suc vacuolar, de
culoare roșie-purpurie.

1
  Demonstrarea prezenței plasmalemei și a permeabilitățíi sale selective

Mod de lucru.
Se desprinde un fragment din epiderma superioară (de pe partea concavă) a frunzelor cărnoase ce
intră în constituţia bulbului de ceapă şi se montează într-o picătură de apă. Se analizează la
microscop şi se constată starea de turgescenţă a celulelor. Pe una din laturile lamelei se depun 2-3
picături de soluţie concentrată de clorură de sodiu sau de zaharoză, iar pe latura opusă o bucăţică de
hârtie de filtru. Pe măsură ce apa este absorbită de hârtia de filtru, soluţia salină îi ia locul. În
consecinţă apa din vacuolă trece în mediul extracelular (fenomen numit exosmoză), vacuola îşi
micşorează treptat volumul, iar celula începe să se plasmolizeze. Plasmoliza începe la colţurile
celulei şi se extinde treptat, trecând de la forma concavă (incipientă) la cea convexă (finală).
Fenomenul este reversibil dacă plasmoliza a fost indusă de o soluţie fiziologică şi nu a depăşit un
prag critic. Deplasmoliza se poate realiza prin înlocuirea treptată ( ca mai sus, dar în sens invers) a
mediului hipertonic cu apa.

 Analiza cromoplastelor la morcov

Pregătirea preparatului.
Se fac secţiuni transversale prin rădăcina tuberizată de morcov. Imediat după secţionare se
pun în vasul Petri cu apă. Secţiunile trebuie să fie foarte fine. După ce am efectuat un număr mai
mare de secţiuni, alegem pe cea mai fină, de dimensiunile unei lamele şi o punem pe lamă într - o
picătură de apă. Se acoperă cu lamela.
Examinarea la microscop.
În câmpul microscopic se vor observa celule
poligonale prozenchimatice în care se află câte un nucleu
şi numeroase cromoplaste de formă aciculară,
dreptunghiulară sau paralelipipedică.

2
  Analiza cromoplastelor din celulele fructului de pătlăgele roșii

Pregătirea preparatului.
Se îndepărtează pielița fructului cu ajutorul unui bisturiu și se ia din miez un fragment de
țesut, care se pune pe o lamă de sticlă într-o picătură de apă. Se așează lamela si se presează ușor
deasupra ei pâna cănd materialul se etalează perfect.
Examinarea la microscop.
Se observă cu obiectivul 10X, apoi cu 40X. Celulele au de obicei formă ovală sau sferică. În
fiecare celulă se va observa un nucleu, în jurul căruia se găsesc numeroase cromoplaste.
Cromoplastele sunt roşii - portocalii, de formă rotundă sau ovoidă.

 Analiza amidonului din țesutul de depozitare de la cartof

Pregătirea preparatului.
Se taie în două un tubercul de cartof, apoi, cu ajutorul unui bisturiu se rade ușor suprafața
secționată. Materialul obținut se pune pe lamă într-o picătură de apă și se acopară cu lamela.
Examinarea la microscop.
Privind cu obiectivul mic se vor obseva numeroase granule de amidon de formă ovală si
mărime variată, incolore și stratificate. Stratificarea rezultă din depunerea intermitentă de amidon în
interiorul unui leucoplast, în jurul unui punct inițial de depunere numit HIL. Când leucoplastul este
complet ocupat de straturi de amidon, atunci el devine un amiloplast sau o granulă de amidon.
În același mod se pot analiza granulele de amidon din endospermul seminal de la fasole, grâu,
porumb, ovăz etc.

Granule de amidon

 Analiza cristalelor de oxalat de calciu din catafilele bulbului de ceapă

Pregătirea preparatului.
Se desprind de pe bulbul de ceapă câteva catafile (frunze externe de culoare galben-brună),
se fierb câteva minute în apă, după care se adugă puțină glicerină. Se detaşează dintr-o catafilă un
fragment şi se pune pe lamă într- o picătură de apă glicerinată şi se acoperă cu lamela.
3
Examinarea la microscop.
În catafilele de ceapă se observă celule în care se pot vedea numeroase cristale prismatice,
lungi, incolore, strălucitoare. De cele mai multe ori cristalele sunt izolate; uneori se întâlnesc
şi cristale asociate numite macle.

Cristale de oxalat de calciu în catafilele bulbului de ceapă