• suporturi materiale si nutritive care

MEDII DE CULTURA servesc la cultivarea bacteriilor

• amestecuri de substante care asigura

cultivarea microorganismelor

Scopuri
Clasificarea mediilor de cultura
• Izolarea in cultura pura
Dupa consistenta: lichide
• Identificare
solide
• Diagnostic, tratament semisolide
• Producerea industriala a unor substante
(prepararea vaccinurilor) Dupa provenienta: naturale
• Controlul sterilitatii sau incarcarcaturii sintetice
microbiene a unor elemente de mediu (apa,
alimente) Dupa compozitie si scop: simple
complexe
speciale

1
 Caracterele culturii microbiene pe medii solide
Clasificarea mediilor de cultura
• Colonia = ansamblu localizat, alcatuit din populatie
• Medii complexe pura de bacterii provenite dintr-un singur parental.
– de utilitate generala: - uzuale
- cu proteine native Pe mediu solid se descrie:
– Medii speciale - forma coloniei - producerea de pigment
• selective - marimea coloniei - consistenta coloniei
• de imbogatire - suprafata coloniei - emulsificabilitatea
• anaerobi - marginile coloniei - mirosul culturii
• teste biochimice

Caracterele culturii microbiene pe medii solide

S type
• Colonia= ansamblu localizat, alcatuit din populatie
pura de bacterii provenite dintr-un singur parental. • Staphylococcus aureus

Colonii S (smooth):
marea majoritate a bacteriilor
Colonii R (rough):
3 genuri importante in patologia umana:
• Mycobacterium
• Corynebacterium
• Bacillus

2
 MYCOBACTERIUM
type R: Mediul Lowenstein-Jensen TUBERCULOSIS PE
MEDIUL LOWENSTEIN

type R CORYNEBACTERIUM GENUL CORYNEBACTERIUM

CORYNEBACTERIUM
“FLOARE DE
MARGARETA”
MARGARETA”

3
 CARACTERE DE CULTURA
type R Bacillus BACILLUS- GELOZA SIMPLA

CARACTERE DE CULTURA Caracterele culturii microbiene

BACILLUS GELOZA
SANGE
• In mediu lichid se descrie:
– Turbiditatea Formarea de depozite
– Culoarea Suprafata

4
 In functie de necesarul de
Bacterii anaerobe
oxigen:
– Bacterii • Mediu lichid
• Aerobe
• Anaerobe
• Aerob facultativ anaerobe
• Microaerofile

Medii pentru anaerobi: Metode de insamantare

- Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la
suprafata se adauga ulei de parafina
- Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; la suprafata
se adauga ulei de parafina)
- Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea
mediului, realizate prin incorporare)
Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid,
agenti reducatori si se sigileaza cu parafina)
• Insamantare = punerea in contact a unei
culturi bacteriene sau a unui produs patologic
cu mediile de cultura.
• Izolare = repicarea unei singure colonii pe
alte medii de cultura cu scopul de a obtine
cultura pura
• Cultura bacteriana = totalitatea bacteriilor
crescute in/pe suprafata unui mediu de
cultura

5
 Tehnici de insamantare
• Tehnica insamantarii prin epuizare:
– Scop: obtinerea coloniilor izolate
• Insamantarea prin intepare (pe medii solide
aflate in tuburi)
• Insamantarea in panza

Pigment

6
 Pigment Clasificare – hemoliza pe geloza sange

• hemoliza β:
= streptococi β -
hemolitici
• hemoliza α -
incompleta, verzuie
• streptococi γ -
nehemolitici,

Medii lichide - bulion simplu

Medii simple: Apa peptonata • Categoria: Mediu de
bază
Bulion simplu
• Componente: macerat
Geloza simpla de carne + peptonă +
NaCl 0,5%
Medii complexe: bulion sange • Utilizare: pentru
germeni nepretenţioşi
geloza sange
geloza chocolatie

7
 Geloza simpla Geloza simpla
• Categoria: Mediu de bază • Categoria: Mediu de bază
• Componente: bulion simplu + agar-agar • Componente: bulion simplu + agar-agar

Geloza sange HEMOLIZA

• Categoria: Mediu STAFILOCOC
pentru bacterii
- α COMPLETA
pretentioase
- β CALD-
CALD-RECE
• Componente: β α (se clarifica la 4°
4°C)
geloză simplă +
sânge
• Staphilococi STREPTOCOC
• Streptococi - α INCOMPLETA

VERZUIE
- β COMPLETA

8
α Hemoliza Geloza socolatie

• Categoria: Mediu
special
• Componente: geloză
simplă la 60-80°C +
sânge
• Utilizare: cultivarea
neisseriilor,
hemofililor

9
 Mediul Chapman Mediul Chapman

Categoria: Mediu
selectiv şi diferenţial
(evidentiaza o proprietate
biochimica a tulpinii)
Componente: geloză
simplă + NaCl 7,5% +
manitol + roşu fenol
Utilizare: selectiv
pentru stafilococ

Medii folosite pentru enterobacterii

Drigalski
Cele mai importante genuri:
Escherichia
Proteus
Klebsiella
Salmonella
Shigella
medii de cultura utilizate:
Drigalski
Levine
McConkey
Bacteriile care degradeaza lactoza din mediu = lactozo pozitive
Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu = lactozo negative

10
 Mediul Levine
• Categoria: Mediu selectiv
şi diferenţial

• Componente: geloză
simplă + eozină + lactoză +
albastru de metilen
• Utilizare: cultivarea
enterobacteriilor (E.coli)

KLEBSIELLA KLEBSIELLA
E.COLI
GELOZA-SANGE ADCL
LEVINE
COLONII MUCOASE COLONII MUCOASE

GENUL ESCHERICHIA

11
PROTEUS- INVAZIE Mediul Muller - Hinton
• Categoria: Mediu special
• Utilizare: Efectuarea antibiogramelor

Mediul Sabouraud
• Categoria: Mediu
special

• Componente: geloză
simplă +
maltoză/glucoză +
antibiotice

• Utilizare: cultivarea
fungilor

12