Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
An rezidențiat: III
Formele de dozare parenterală cu eliberare prelungită sunt în mod obișnuit concepute pentru
a menține concentrația eficientă a medicamentului pe perioade de săptămâni, luni sau chiar ani. În
consecință, testele de eliberare in vitro „în timp real” pentru aceste forme de dozare sunt adesea
efectuate pe o perioadă lungă de timp. Metodele de eliberare accelerată in vitro pot oferi o evaluare
rapidă și, prin urmare, sunt de dorit în scopuri de control al calității. În acest scop, au fost dezvoltate
diferite metode de eliberare accelerată in vitro folosind aparate Farmacopeea Statelor Unite (USP).
Sunt discutate diferite mecanisme de accelerare a eliberării medicamentului din formele de dozare
parenterală cu eliberare prelungită, împreună cu metodele de testare cu eliberare accelerată in vitro
utilizate în prezent.
1. Introducere:
2
formulări. Testarea cu eliberare accelerată ar trebui să fie capabilă să servească drept instrument
discriminatoriu atâta timp cât toate formulările suferă modificări similare și continuă să prezinte
caracteristici de performanță care pot fi diferențiate unele de altele. Se recomandă ca specificațiile
pentru eliberarea accelerată să includă o determinare a cel puțin 80 % din cantitatea cumulativă
eliberată pentru comparație cu studiile „în timp real”. (2)
Microsferele polimerice sunt una dintre cele mai frecvent investigate forme de dozare
parenterală cu eliberare prelungită. Aceste sisteme pot fi administrate prin injecție subcutanată sau
intramusculară, precum și prin injectare directă în locul țintă sau țesut. Deoarece microsferele nu
pot fi recuperate după administrarea parenterală, polimerii utilizați în proiectarea formulării ar
trebui să fie biodegradabili, precum și biocompatibili. O varietate de polimeri biodegradabili,
inclusiv polimeri lactid/glicolid (cum ar fi acidul polilactic (PLA) și acidul poli(acid lactic-co-
glicolic) (PLGA)), poli-ε-caprolactonă, polianhidride, poliortoesteri și albumină , au fost utilizate
pentru a prepara microparticule.
Pe baza caracteristicilor fizico-chimice ale polimerului, eliberarea medicamentului din
microparticulele polimerice poate implica difuzia, eroziunea polimerului sau o combinație a
acestora. Se știe că difuzia guvernează faza inițială de eliberare în explozie, în timp ce eroziunea
polimerului este dominantă în faza de eliberare primară ulterioară. A doua lege a difuziei a lui Fick
poate fi folosită pentru a elucida faza de eliberare a medicamentului controlată prin difuzie. În cazul
fazei de eliberare controlată prin eroziune, eliberarea medicamentului este controlată în principal de
eroziunea polimerului rezultată din hidroliza lanțurilor polimerice. Așa cum se arată în Figura1,
există două scenarii diferite de eroziune a polimerului: eroziuni de suprafață (eterogene) și eroziuni
în vrac (omogene). În eroziunea de suprafață, eroziunea polimerului (de exemplu polianhidride sau
poliortoesteri) are loc la limita matricei externe, ceea ce poate duce la o scădere a diametrului
microsferei. În eroziunea în vrac, degradarea polimerului (de exemplu , polimeri polilactid/glicolid)
3
are loc în întreaga structură a microsferei. Mai mulți parametri, inclusiv proprietățile polimerului
(de exemplu , greutatea moleculară, compoziția copolimerului și cristalinitatea), proprietățile
medicamentului, mărimea particulelor, precum și condițiile de eliberare (cum ar fi mediul de
eliberare și agitația), pot afecta eliberarea medicamentului din microsferele polimerice.(3)
4
b. Sisteme de microparticule lipidice
5
difuzie/polimer. Hidrofobicitatea și concentrația purtătorului biodegradabil, natura
polară/miscibilitatea în apă a solventului organic, precum și solubilitatea în apă și încărcarea
medicamentului afectează viteza de eliberare a medicamentului.(5)
d. Sisteme implantabile
De obicei, sistemele implantabile sunt inserate în anumite locuri ale corpului prin proceduri
chirurgicale minore sau prin injecție simplă. Spre deosebire de sistemele de microparticule
polimerice, atât materialele biodegradabile, cât și cele nebiodegradabile pot fi utilizate pentru
prepararea implanturilor. În cazul implanturilor nebiodegradabile, este necesară o a doua procedură
chirurgicală pentru îndepărtarea implanturilor.
Mecanismul de eliberare a medicamentului din implanturi este complex și depinde de
diverși factori, inclusiv de tipul și cantitatea de material utilizat (de exemplu , polimeri
biodegradabili, lipide sau polimeri nebiodegradabili), proprietățile medicamentului încorporat,
precum și tehnicile de preparare. Similar altor forme de dozare pe bază de polimeri biodegradabili,
eliberarea medicamentului din implanturile polimerice este controlată în principal prin difuzie sau o
combinație de difuzie și eroziune a polimerului.Lipide (de eximplanturile de trigliceride,
monogliceride și acizi grași) au fost utilizate ca purtători alternativi pentru livrarea susținută a
proteinelor pentru a evita crearea de microclimate acide asociate cu degradarea prin hidroliză a
polimerilor biodegradabili (de exemplu PLGA). S-a raportat că eliberarea medicamentului din
implanturile lipidice este de obicei controlată prin difuzie.În plus, procesul de umflare, precum și
adăugarea modificatorilor de eliberare (de exemplu , PEG) pot juca, de asemenea, roluri importante
asupra eliberării medicamentului din implanturile lipidice.Polimerii nebiodegradabili sau
elastomerii biodegradabili au fost utilizați împreună cu presiunea osmotică pentru a obține o
cinetică precisă de livrare a medicamentelor de ordinul zero.Aceste implanturi controlate osmotic
sunt diferite de alte sisteme implantabile care se bazează pe difuzie sau eroziunea polimerului
pentru livrarea susținută a medicamentului.
Pentru a studia eliberarea medicamentului in vitro din sistemele implantabile, implanturile
sunt de obicei plasate în flacoane de sticlă cu sau fără agitare. În plus, un aparat de trecere a fost, de
asemenea, utilizat pentru a determina eliberarea medicamentului din astfel de sisteme.(6)
a. Temperatura
Temperatura ridicată a fost utilizată pe scară largă pentru a accelera eliberarea medicamentului
din formele de dozare parenterală cu eliberare prelungită. Temperatura ridicată poate crește
mobilitatea moleculară. La temperaturi peste temperatura de tranziție sticloasă a polimerului ( Tg ),
mobilitatea crescută a polimerului are ca rezultat o accelerare semnificativă a eliberării
medicamentului prin difuzie. În plus, temperatura ridicată poate îmbunătăți hidratarea și degradarea
polimerilor, accelerând astfel eliberarea de droguri controlată de eroziune.
Așa cum se arată în Figura 2, ratele de eliberare a dexametazonei din microsferele PLGA la
temperaturi ridicate au fost utilizate cu succes pentru a prezice eliberarea „în timp real” aplicând
ecuația Arrhenius. Constanta de viteză „în timp real” prezisă la 37°C (cerc solid) a fost în acord cu
valoarea experimentală la 37°C (cerc deschis).(7)
b. pH
pH-ul este un alt parametru important care poate afecta cinetica de hidroliză a poliesterilor
biodegradabili, rezultând o eliberare accelerată a medicamentelor din aceste sisteme (de exemplu ,
sisteme de microparticule polimerice sau implanturi polimerice). Este bine cunoscut faptul că
PLGA este degradat prin hidroliza neenzimatică a coloanei vertebrale esterului în condiții
7
fiziologice. În consecință, atât condițiile acide, cât și cele bazice pot accelera degradarea unor astfel
de polimeri. Cu toate acestea, mecanismul de eroziune a polimerului a apărut diferit în aceste două
condiții de pH. În condiții acide, eroziunea PLGA a urmat un profil de eroziune în vrac care a fost
similar cu caracteristicile de degradare obținute la pH 7,4.În timp ce în condiții de bază (pH>13),
degradarea părea să apară prin eroziunea de suprafață. S-a demonstrat, de asemenea, că modificările
morfologice în microsfere la pH acid este considerabil diferită de cea la pH 7,4. Acest lucru se
poate datora unui model de degradare mai omogen la pH 2,4.(8)
Deși condițiile extreme de pH pot grăbi eliberarea medicamentului, accelerarea eliberării
medicamentului nu este la fel de semnificativă ca cea atinsă la temperaturi ridicate. În plus,
condițiile de pH extreme pot să nu fie potrivite pentru medicamentele care sunt sensibile la aceste
condiții de pH extreme.
Această metodă este cea mai utilizată metodă de cercetare pentru microparticule polimerice și
implanturi. În mod convenţional, microparticulele polimerice şi implanturile sunt introduse într-un
vas/flacon care conţine medii de eliberare şi eliberarea este evaluată în timp. În cazul
microparticulelor polimerice, centrifugarea mediului de eliberare urmată de prelevarea de probe a
supernatantului este utilizată pe scară largă. În unele cazuri, înlocuirea mediului de eliberare poate fi
necesară pentru a menține condițiile de chiuvetă sau pentru a evita degradarea medicamentului în
mediul de eliberare. Diferitele configurații experimentale (cum ar fi dimensiunea recipientului,
agitarea și metodele de prelevare a probelor) pot afecta in vitroprofilul de eliberare a
medicamentului.
Au fost dezvoltate metode accelerate bazate pe metodologia de eșantionare și separare la pH
acid (pH 4) și temperatură ridicată (50°C) pentru a accelera eliberarea acetatului de leuprolidă din
formulările de depozit PLGA. Eliberarea completă a fost realizată în 30-40 de ore la 50°C,
comparativ cu 42 de zile în condiții „în timp real”. Această metodă a putut să diferențieze diferite
formulări și să se coreleze bine cu eliberarea „în timp real” la 37°C. Aparatul USP 7 (suport de
disc/stent alternativ) a fost utilizat pentru a dezvolta o metodă de eliberare accelerată in vitro pentru
stenturile cu eluare a medicamentelor biodegradabile. În acest studiu, acetonitril a fost adăugat în
mediul de eliberare pentru a obține peste 80 % din eliberarea Everolimus în 24 de ore.
Deși metodologia de eșantionare și separare oferă o evaluare directă și rezonabil de precisă a
eliberării medicamentului in vitro , există unele limitări asociate cu această metodă, cum ar fi
agitarea inadecvată, pierderea microparticulelor în timpul prelevării probelor și utilizarea de
flacoane/vase de dimensiuni diferite. ceea ce face dificilă comparația intralaboratoare.(9)
Aparatul USP 4 (metoda cu celule cu flux continuu) a fost dezvoltat inițial pentru forme de
dozare orală cu eliberare prelungită. Modificările aparatului USP 4 au fost utilizate pentru a evalua
eliberarea medicamentului din formele de dozare parenterală cu eliberare prelungită, cum ar fi
microsfere, lipozomi, [ , stenturi și implanturi cu eliberare de medicamente. [ După cum se arată în
9
Figura 3, formele de dozare parenterale au fost introduse în flux prin celule împreună cu perle de
sticlă și/sau adaptoare. De exemplu, microsferele au fost încărcate în flux prin celule cu perle de
sticlă pentru a preveni agregarea microsferelor și pentru a facilita fluxul laminar al mediului de
eliberare în celule. Un adaptor de dializă a fost dezvoltat pentru a menține nanoparticule, cum ar fi
lipozomii, în fluxul prin celule. Mediul de eliberare este circulat prin fluxul prin celule și eliberarea
medicamentului este monitorizată din efluent (sistem deschis) sau din rezervorul de mediu extern
(sistem închis, Figura 3).(9)
Aparatul USP 4 poate simula mediul in vivo , cum ar fi țesutul subcutanat, deoarece pot fi
utilizate volume mici de mediu și circulația constantă poate imita mediul dinamic in vivo . în plus,
volumul de mediu utilizat cu aparatul USP 4 poate fi modificat pentru a permite testarea diferitelor
formulări, iar acest lucru este deosebit de important pentru multe formulări parenterale cu doze
mici. Testele de eliberare accelerată la temperaturi ridicate și pH acid folosind aparatul USP 4 au
fost dezvoltatepentru evaluarea rapidă a formulărilor de microsfere.
c. Metode de dializă
Metodele de dializă par a fi o opțiune atractivă pentru a studia eliberarea medicamentului din
microparticule polimerice sau din sistemele de formare a depozitelor in situ . Această metodă a fost
folosită pentru a studia eliberarea medicamentelor din depozitele parenterale
10
uleioase, microsfere,lipozomi și implanturi. Printre metodele de dializă au fost utilizate un model
rotativ de celule de dializă și o metodă Float-A-Lyzer® (Figura 4). Testarea accelerată a eliberării
medicamentului folosind Float-A-Lyzer® a fost efectuată la temperaturi ridicate pentru a investiga
eliberarea de acetat de leuprolidă din microsferele PLGA.În acest studiu a fost obținută o bună
corelație între profilul de eliberare accelerată și datele de eliberare „în timp real”.
Pentru a dezvolta metode de dializă adecvate pentru testarea eliberării in vitro a formelor de
dozare parenterală cu eliberare prelungită, trebuie luați în considerare următorii parametri: condiții
de agitare; volumele celulelor donor și acceptoare; și limitarea greutății moleculare a membranei de
dializă. Se recomandă ca volumul interior al sacului de dializă să fie de cel puțin 6-10 ori mai mic
decât cel al mediului exterior de eliberare pentru a oferi o forță motrice pentru transportul
medicamentului prin membrana de dializă. În plus, dacă medicamentul se leagă de membrana de
dializă, această tehnică nu este aplicabilă.
Există mai multe dezavantaje asociate cu metodele de dializă, cum ar fi:
• încălcarea condițiilor de chiuvetă în sacii de dializă;
• lipsa de agitație in interiorul sacilor care poate duce la agregare si modificarea
consecutiva a profilelor de eliberare;
• deoarece aceasta este o metodă necompendială, diferite laboratoare pot utiliza
configurații diferite care pot avea ca rezultat profiluri de eliberare diferite.
11
d. Modele matematice
Pe lângă metodele experimentale de testare a lansării, așa cum s-a subliniat mai sus, un
model matematic este de asemenea de dorit pentru a evalua dacă datele de testare accelerată sunt
predictive pentru profilurile de lansare „în timp real”. Utilizarea funcției Weibull în modelarea
eliberării medicamentelor din forme de dozare cu eliberare prelungită (de exemplu , microsfere
biodegradabile) a fost recomandată la un atelier anterior AAPS/FIP. Funcția Weibull presupune că
eliberarea medicamentului este guvernată de eroziunea polimerului cuplată cu eliberarea inițială de
explozie minimă, precum și eliberarea difuză minimă. Această ecuație a fost utilizată pentru a
modela eliberarea medicamentului din microsferele PLGA
5. Concluzii
12
Alți factori care ar trebui luați în considerare în timpul procesului de dezvoltare a metodei
includ stabilitatea componentelor mediului de eliberare și a medicamentului, precum și robustețea
aparatului de testare pentru a rezista la condițiile extreme aplicate.
13
Bibliografie
1. Bhardwaj U, et al. PLGA/PVA hydrogel composites for long-term inflammation control following
s.c. implantation. Int J Pharm. 2010;1-2:78–86. [PubMed] [Google Scholar]
2. Martinez M, et al. In vitro and in vivo considerations associated with parenteral sustained release
products: a review based upon information presented and points expressed at the 2007 Controlled
Release Society Annual Meeting. J Control Release. 2008;2:79–87. [PubMed] [Google Scholar]
3. Faisant N, et al. PLGA-based microparticles: elucidation of mechanisms and a new, simple
mathematical model quantifying drug release. Eur J Pharm Sci. 2002;4:355–
366. [PubMed] [Google Scholar]
4. Larsen S Weng, Larsen C. Critical factors influencing the in vivo performance of long-acting
lipophilic solutions--impact on in vitro release method design. AAPS J. 2009;4:762–770. [PMC free
article] [PubMed] [Google Scholar]
5. Zentner GM, et al. Biodegradable block copolymers for delivery of proteins and water-insoluble
drugs. J Control Release. 2001;1-3:203–215. [PubMed] [Google Scholar]
6. Wright JC. Critical variables associated with nonbiodegradable osmotically controlled
implants. AAPS J. 2010;3:437–442.
7. Zolnik BS, et al. Elevated temperature accelerated release testing of PLGA microspheres. J Control
Release. 2006;3:293–300. [PubMed] [Google Scholar]
8. Zolnik BS, Burgess DJ. Effect of acidic pH on PLGA microsphere degradation and release. J
Control Release. 2007;3:338–344. [PubMed] [Google Scholar]
9. Kamberi M, et al. A novel accelerated in vitro release method for biodegradable coating of drug
eluting stents: Insight to the drug release mechanisms. Eur J Pharm Sci. 2009;3-4:217–
222. [PubMed] [Google Scholar]
14