Activitatea antibacteriană și

biocompatibilitatea acoperirii cu argint prin

depunerea de aerosoli pe suprafețele de
titan și zirconiu
Scop
Scopul acestui studiu in vitro a fost de a investiga efectul antibacterian și biocompatibilitatea
straturilor de argint prin depunerea de aerosoli pe suprafețele de titan și zirconiu.
Metode
Suprafețele specimenelor de titan și zirconiu au fost lustruite și acoperite cu argint prin depunere
de aerosoli. După acoperirea cu argint, au fost măsurate compoziția elementară, rugozitatea
suprafeței și cantitatea de argint eliberată de pe suprafețele acoperite. Creșterea bacteriană pe
suprafețele acoperite cu argint a fost investigată prin testul cristal violet după incubare
cu Streptococcus gordonii timp de 24 ore, Fusobacterium nucleatum timp de 72 ore
și Porphyromonas gingivalis timp de 48 ore. Fibroblastele gingivale umane și preosteoblastele
de șoarece au fost, de asemenea, cultivate pe specimenele acoperite cu argint pentru a examina
biocompatibilitatea învelișului.
Rezultate
După acoperirea cu argint prin depunere de aerosoli, rugozitatea suprafeței a crescut
semnificativ, iar argintul eliberat a variat între 0,067 și 0,110 ppm. Bacteriile testate au format
mult mai puțin biofilm pe suprafețele de titan acoperite cu argint decât pe suprafețele de titan
neacoperite. În schimb, formarea de biofilm pe suprafețele de zirconiu acoperite cu argint a fost
mai mare decât cea de pe suprafețele de zirconiu neacoperite. Fibroblastele gingivale umane și
preosteoblastele de șoarece au proliferat pe suprafețele acoperite cu argint fără diferențe
semnificative față de suprafețele neacoperite.
Concluzii
Acoperirea cu argint prin depunere de aerosoli a oferit un efect antibacterian împotriva
bacteriilor orale pe suprafețele de titan, în timp ce a promovat o creștere mai mare a bacteriilor
pe suprafețele din zirconiu. Proliferarea fibroblastelor și osteoblastelor nu a fost afectată
semnificativ de acoperirea cu argint atât pe suprafețele de titan, cât și de zirconiu.
Utilizarea implanturilor dentare a devenit o modalitate de tratament larg acceptată și preferată
pentru reabilitarea pacienților cu locuri edentate [ 1 , 2 , 3 ]. Odată cu îmbunătățirea materialelor
implantare și a procedurilor de tratament, s-a raportat că ratele de supraviețuire pe termen lung
ale implanturilor dentare sunt mai mari [ 1 , 4 ]. Cu toate acestea, în ciuda ratei ridicate de
supraviețuire a implanturilor dentare, riscul de complicații rămâne.
Periimplantita este una dintre complicațiile reprezentative ale implanturilor dentare. Este un
răspuns al gazdei la provocarea microbiană care apare în țesuturile din jurul implanturilor și se
caracterizează prin inflamația distructivă a țesutului conjunctiv și pierderea progresivă a osului
de susținere, care poate duce la pierderea implantului [5 , 6 , 7 , 8 ] . Deoarece flora normală
trăiește în cavitatea bucală, suprafețele protezelor implantare din cavitatea bucală devin inevitabil
habitate pentru proliferarea bacteriilor [ 9 ]. În plus, proliferarea bacteriană pe suprafețele
implanturilor este strâns legată de periimplantită. Câțiva agenți patogeni parodontali specifici,
cum ar fi Porphyromonas gingivalis , au fost observați mai frecvent în periimplantită decât în
țesutul sănătos din jurul implanturilor [ 10 ], iar antecedentele de parodontită cronică și controlul
slab al plăcii sunt factori de risc cunoscuți pentru periimplantită, cu dovezi
puternice. 7 , 11 ]. Într-un studiu pe animale, progresia periimplantitei a fost indusă de ruperea
etanșării mucoasei din jurul implanturilor și de formarea biofilmului bacterian submucoasa
[ 12 ].
Pentru a evita formarea de biofilm pe suprafețele implanturilor dentare, au fost introduse diferite
tratamente de suprafață, cum ar fi modificări topografice sau încărcare cu agenți antibacterieni pe
suprafețe [ 13 , 14 ]. În metoda de acoperire a suprafeței, sunt necesari agenți antibacterieni
eficienți și metode de acoperire durabile pentru inhibarea fiabilă a formării biofilmului pe
suprafețele implantului. Argintul este un agent anorganic utilizat pe scară largă cu efecte
antibacteriene în diverse domenii, inclusiv implanturi medicale [ 15 , 16 ]. Dopajul argintului
direct pe suprafețe fără straturi suplimentare, creșterea unui strat de oxid de titan cu argint și
depunerea unei acoperiri cu argint pe suprafețe au fost propuse ca tehnici de aplicare a argintului
pe suprafețele implantului de titan [14 ] . Depunerea de aerosoli este o metodă de acoperire a
suprafețelor cu amestecuri ceramice sau ceramice la temperatura camerei fără un proces de
sinterizare la temperatură înaltă [ 17 ]. A fost de asemenea raportată acoperirea durabilă prin
depunerea de aerosoli pe suprafața de titan [ 18 ].
Titanul a fost stabilit de mult timp ca material standard pentru implanturile dentare cu un record
dovedit de succes [ 1 , 4 , 19 ]. Proprietățile sale fizice și biocompatibilitatea sunt potrivite pentru
utilizare ca material de implant. Cu toate acestea, odată cu cerințele estetice tot mai mari ale
tratamentelor dentare, culoarea gri a titanului a devenit un dezavantaj major. Zirconia nu numai
că are proprietăți fizice adecvate și o biocompatibilitate excelentă, dar are și o estetică
remarcabilă; astfel, utilizarea sa ca material de implant se extinde rapid [ 20 , 21 ]. În plus, deși
încă controversate, unele studii au arătat că zirconia este mai rezistentă la colonizarea bacteriană
decât titanul și poate fi potențial benefică împotriva contaminării bacteriene
[ 22 , 23 , 24 , 25 ]. Cu toate acestea, implanturile de zirconiu nu sunt complet lipsite de mucozită
periimplantară sau periimplantită [ 26 ]. Atât suprafețele din titan, cât și din zirconiu necesită un
tratament suplimentar pentru a reduce potențialul de colonizare bacteriană care poate provoca
inflamații periimplantare.
Scopul acestui studiu in vitro a fost de a examina efectul antibacterian al acoperirii cu argint pe
suprafețele de titan și zirconiu. Argintul a fost acoperit pe suprafețe prin metoda de depunere cu
aerosoli și a fost, de asemenea, investigată biocompatibilitatea acoperirii. Ipoteza nulă a acestui
studiu a fost că suprafețele de titan și zirconiu acoperite cu argint prin depunere de aerosoli ar
avea efect antibacterian și biocompatibilitate.

Metode
Pregătirea specimenului
Specimenele de titan au fost prelucrate din bare de titan de gradul 4 (Seoul Titanium Co., LTD.,
Siheung, Coreea) în forme de disc de 20 mm în diametru și 0,5 mm în grosime. Discuri
policristaline tetragonale de zirconiu stabilizat cu ytriu, trei procente, care aveau 15 mm în
diametru și 2 mm în grosime, au fost preparate prin presarea izostatică la rece a amestecului de
pulbere (Tosoh, Tokyo, Japonia) la 200 MPa, urmată de sinterizare la 1500 °C timp de 2
h. Discurile de titan și zirconiu au fost lustruite după o metodă publicată anterior [ 25 ] până când
rugozitatea suprafeței a fost mai mică de 0,01 μm. Discurile lustruite au fost acoperite cu argint
folosind metoda depunerii cu aerosoli. În primul rând, discurile ca substraturi au fost spălate
secvenţial folosind acetonă, etanol şi apă şi montate în camera de depunere. Nanoparticulele de
argint disponibile comercial (ENB KOREA Co., LTD., Daejeon, Korea) amestecate cu pulbere
de alumină (Showa Denko, Tokyo, Japonia) la o concentrație de 1% în greutate au fost
preîncălzite și aerosolizate prin vibrație cu un gaz purtător în camera de aerosoli . Aerosolul de
argint a fost accelerat de diferența de presiune dintre cele două camere și depus pe substraturi
printr-o duză cu fantă la temperatura camerei. Grosimea stratului de acoperire a fost confirmată
prin microscopia electronică cu scanare ca fiind de aproximativ 1 μm.
Caracterizarea suprafeței
Suprafețele acoperite au fost observate folosind microscopia electronică cu scanare cu emisie de
câmp (SEM, S-4700, Hitachi High-Tech Corporation, Tokyo, Japonia), iar analiza elementară a
suprafețelor a fost efectuată utilizând spectroscopie cu raze X cu dispersie de energie. Înălțimile
medii aritmetice ale suprafețelor specimenelor neacoperite și acoperite au fost măsurate folosind
un microscop laser confocal tridimensional (LSM 800, Zeiss, Jena, Germania). Cantitatea de
argint eliberată de pe fiecare disc acoperit a fost măsurată prin incubarea acestuia într-un tub care
conține soluție salină tamponată cu fosfat (PBS) la 37 °C. După 24 de ore de incubare, discul a
fost îndepărtat din tub și cantitatea de argint din soluție a fost măsurată utilizând spectrometrie de
masă plasmă cuplată inductiv (ICP-MS, NexION 350D, Perkin-Elmer, Waltham, MA, SUA).
Aderența și proliferarea bacteriilor la suprafață
Pe baza datelor publicate anterior [ 25 ], am determinat condițiile optime de creștere pentru
fiecare bacterie în experimentele noastre. Celulele Streptococcus gordonii ATCC 10558 cultivate
în bulion sterilizat pentru infuzie pentru inimă (bulion BHI; Bacto™ Brain Heart Infusion, BD,
Franklin Lakes, NJ, SUA) au fost recoltate prin centrifugare, resuspendate în mediu proaspăt și
ajustate la o concentrație bacteriană de aproximativ 4,8 × 104 unităţi formatoare de colonii
(CFU ) /mL, corespunzătoare unei densităţi optice de 0,03 la 600 nm. Discurile acoperite cu
argint și neacoperite au fost sterilizate cu oxid de etilenă și incubate cu 1 ml de suspensie
bacteriană în condiții aerobe la 37 ° C în plăci cu 12 godeuri, iar creșterea bacteriană a fost
evaluată după 24 de ore. Celulele cultivate de Fusobacterium nucleatum ATCC 25586 în bulion
BHI sterilizat în condiţii anaerobe (80% N2 , 10% H2 , 10% CO2 ) au fost recoltate şi spălate cu
mediu proaspăt. Apoi, celulele au fost ajustate la o densitate optică de 0,064 la 600 nm,
corespunzătoare unei concentrații bacteriene de aproximativ 2 × 108 CFU /mL. Probele sterilizate
au fost inoculate cu 1 ml de suspensie bacteriană și 3 ml de mediu proaspăt în plăci cu 12
godeuri și incubate într-o cameră anaerobă la 37 °C timp de 72 de ore. Celulele Porphyromonas
gingivalis ATCC 33277 cultivate în bulion steril BHI suplimentat cu 0,5 mg/mL hemină și 5
mg/mL vitamina K în condiții anaerobe au fost recoltate, spălate și ajustate la o concentrație de
5,1 × 107 CFU/ mL ; suspensia a avut o densitate optică de 0,01 la 600 nm. Probele sterilizate au
fost inoculate cu 2 mL de suspensie bacteriană în plăci cu 12 godeuri și apoi incubate într-o
cameră anaerobă la 37 °C timp de 48 de ore.
După incubare, fiecare specimen a fost clătit ușor folosind PBS pentru a îndepărta bacteriile
neaderente de pe suprafață. După aceea, bacteriile aderente rămase au fost colorate cu soluție de
violet cristal 1% timp de 10 minute, spălate ușor cu PBS și colorate folosind 400 μL de soluție de
decolorare (un amestec de 80% etanol și 20% acetonă). Absorbanța fiecărei soluții a fost apoi
măsurată folosind un spectrofotometru cu microplăci (Epoch 2, BioTek, Winooski, VT, SUA) la
590 nm. Valorile absorbanței au fost calculate pe unitatea de suprafață a fiecărui disc.
Experimentul cu soluția de argint
Soluțiile de argint au fost preparate cu nanoparticule de argint disponibile comercial (ENB
KOREA Co., LTD.) în PBS la concentrații de 0,00001, 0,0001, 0,01 și 0,1% în greutate. După
sterilizarea a 5 ml de soluții de argint preparate la 121 °C timp de 15 minute, S. gordonii , F.
nucleatum și P. gingivalis au fost cultivate în soluții. Absorbanța fiecărei suspensii bacteriene a
fost măsurată în timp.
Test de proliferare celulară
Fibroblastele gingivale umane și preosteoblastele de șoarece au fost cultivate pe discurile
acoperite cu argint și neacoperite, iar proliferarea celulară a fost evaluată folosind o bromură de
3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difenil-tetrazoliu ( MTT) kit (TOX-1, Sigma-Aldrich, St. Louis,
MO, SUA). Probele au fost sterilizate cu oxid de etilenă și plasate în plăci cu 12
godeuri. Fibroblaste gingivale umane (HGF; PCS-201-018, ATCC, Manassas, VA, SUA)
cultivate în mediu bazal de fibroblaste (PCS-201-030, ATCC, Manassas, VA, SUA) folosind kit
de creștere cu ser scăzut (PCS-201) -041, ATCC, Manassas, VA, SUA) au fost colectate și
însămânțate pe specimene la o densitate de 105 celule /mL. După 24 de ore de incubare, mediul a
fost înlocuit cu un alt mediu proaspăt preparat care conține MTT în fiecare godeu, iar plăcile cu
12 godeuri au fost incubate la 37 °C timp de 4 ore. După îndepărtarea mediului care conține
MTT în fiecare godeu, a fost adăugată o soluție de solubilizare MTT și absorbanța la 570 nm a
fost măsurată folosind un cititor de microplăci (Epoch 2, BioTek). Absorbanța de fond la 690 nm
a fost, de asemenea, măsurată și scăzută din valorile de măsurare de 570 nm.
Celulele preosteoblaste de șoarece (MC3T3-E1, ATCC, Manassas, VA, SUA) cultivate în mediu
esențial α-minimal care conține 10% ser fetal bovin și 1% penicilină/streptomicină au fost, de
asemenea, însămânțate pe specimenele sterilizate în plăcile cu 12 godeuri. După 4 și 7 zile de
cultură, testele MTT au fost efectuate așa cum este descris mai sus. Martorii negativi au fost
pregătiți prin cultivarea celulelor fără specimene și valorile absorbanței au fost exprimate ca
procent din martori.
analize statistice
Testul Shapiro-Wilk a fost utilizat pentru a evalua normalitatea variabilelor, iar testul Levene a
fost efectuat pentru a evalua egalitatea varianțelor. Deoarece rezultatele au arătat o distribuție
nenormală a valorilor de măsurare, compararea formării biofilmului și a proliferării celulare între
suprafețele acoperite cu argint și neacoperite ale fiecărui material a fost efectuată utilizând testul
Mann-Whitney U. Versiunea 26.0 a software-ului IBM SPSS Statistics (IBM Corp., Armonk,
NY, SUA) a fost utilizată pentru toate analizele statistice, iar nivelul de semnificație a fost setat
la 0,05.

Rezultate
Caracterizarea suprafeței
Analiza componentelor elementare ale suprafețelor acoperite folosind spectroscopie cu raze X cu
dispersie de electroni a confirmat prezența argintului atât pe suprafețele de titan, cât și pe
suprafețele de zirconiu (Tabelul 1 ). Înălțimile medii aritmetice ale suprafețelor specimenelor
acoperite sunt enumerate în Tabelul 2 . Sa constatat că stratul de argint crește semnificativ
rugozitatea suprafeței ambelor materiale și nu s-a observat nicio diferență semnificativă la
compararea celor două materiale. Cantitatea de argint eliberată din titanul acoperit cu argint a
fost de 0,067 ± 0,020 ppm iar cea din zirconia acoperită cu argint a fost de 0,110 ± 0,033 ppm.
Tabelul 1 Analiza elementară utilizând spectroscopie dispersivă cu raze X electronice

Tabel de dimensiuni complete

Tabelul 2 Înălțimi medii aritmetice ale specimenelor acoperite cu argint

Tabel de dimensiuni complete

Testul cristal violet

Cele trei bacterii au prezentat aceleași tendințe în formarea biofilmului. A existat o scădere
semnificativă a formării biofilmului pe suprafața de titan acoperită cu argint în comparație cu
suprafața de titan neacoperită și o creștere semnificativă a suprafeței de zirconiu acoperită cu
argint în comparație cu suprafața de zirconiu neacoperită (Figurile 1 și 2 ) .
Fig. 1

Absorbția soluției de cristal violet pe suprafețele de titan incubate cu A S. gordonii timp

de 24 ore, B F. nucleatum timp de 72 ore și C P. gingivalis timp de 48 ore. Barele și
intervalele reprezintă valorile medii de absorbție și, respectiv, abaterile standard ( n = 3;
* p < 0,05)

Imagine la dimensiune completă

Fig. 2
Absorbția soluției de cristal violet pe suprafețele de zirconiu incubate cu A S.
gordonii timp de 24 ore, B F. nucleatum timp de 72 ore și C P. gingivalis timp de 48
ore. Barele și intervalele reprezintă valorile medii de absorbție și, respectiv, abaterile
standard ( n = 3; * p < 0,05)

Imagine la dimensiune completă

Experimentul cu soluția de argint

Figura 3 prezintă curbele de creștere ale S. gordonii, F. nucleatum și P. gingivalis cultivate în
soluții de argint 0,00001, 0,0001, 0,01 și 0,1% în greutate. Creșterea bacteriană nu a fost afectată
de soluția de argint 0,0001% în greutate, în timp ce concentrațiile de peste 0,01% în greutate s-au
dovedit a inhiba creșterea bacteriană.
Fig. 3

Curbele de creștere ale A S. gordonii , B F. nucleatum și C P. gingivalis cultivate în soluție

de argint 0,00001%, 0,0001%, 0,01% sau 0,1%. Ag argint

Imagine la dimensiune completă

Test de proliferare celulară
Absorbanța măsurată în testul MTT a indicat proliferarea celulelor cultivate pe fiecare specimen
(Fig. 4 ). Atât pentru titan, cât și pentru zirconiu, nu a existat o diferență semnificativă în
proliferarea celulară între specimenele acoperite cu argint și cele neacoperite. Acoperirea cu
argint prin depunere de aerosoli folosind un amestec de argint de 1% în greutate pe suprafețele
de titan și zirconiu nu a arătat niciun efect citotoxic asupra proliferării celulelor HGF și MC3T3-
E1.
Fig. 4

Viabilitatea fibroblastelor gingivale umane (HGF) timp de 24 de ore și a

preosteoblastelor de șoarece (MC3T3-E1) timp de 4 și 7 zile în testul MTT
pentru specimenele de titan A și zirconiu B. Valorile sunt prezentate ca procent de
control. Barele și intervalele reprezintă valorile medii și, respectiv, abaterile
standard. MTT bromură de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difenil-tetrazoliu

Imagine la dimensiune completă

Discuţie
Deoarece colonizarea bacteriană pe suprafețele implantului este strâns legată de rata de
supraviețuire a implantului, au fost efectuate multe studii pentru a suprima creșterea bacteriilor
prin aplicarea antibacteriană pe suprafețele implantului [ 14 , 27 ]. În acest studiu, am investigat
acoperirea cu argint ca tratament antibacterian pentru suprafețele implanturilor. Argintul este
unul dintre cei mai des utilizați agenți antimicrobieni cu diverse aplicații clinice. S-a demonstrat
că are un efect antibacterian cu spectru larg, eficacitate ridicată chiar și la concentrații scăzute și
stabilitate care permite aplicarea simplă pe suprafețe folosind diferite tehnici
[ 14 , 28 , 29 , 30 ]. Deși mecanismele de bază rămân neclare, a fost acceptat pe scară largă faptul
că proprietățile antibacteriene ale argintului pot fi atribuite ionului de argint, care contribuie la
stresul oxidativ, disfuncția proteinelor și deteriorarea membranei la bacterii [15 , 29 ] . În plus,
conform cercetărilor recente, nanoparticulele de argint în sine au, de asemenea, efecte
antibacteriene prin legarea de membrana celulară bacteriană [ 16 ].
Cantitatea de formare a biofilmului pe suprafețe a fost investigată prin testul de colorare cu
cristal violet. Valorile absorbanței în testul cristal violet sunt direct proporționale cu cantitatea de
biofilm format pe suprafețe. Rezultatele au arătat că suprafața netedă de titan înainte de acoperire
a fost un substrat favorabil pentru colonizarea bacteriană, în timp ce formarea de biofilm a fost
redusă semnificativ după acoperirea cu argint pe suprafață. Pentru suprafețele din zirconiu,
valorile scăzute ale absorbanței au indicat nivelul scăzut de formare a biofilmului pe suprafață,
sugerând afinitatea scăzută a suprafeței pentru creșterea bacteriană. După acoperirea cu argint,
creșterea bacteriană la suprafață a crescut semnificativ. Colonizarea bacteriană pe suprafețe este
afectată de mai multe proprietăți ale suprafeței, cum ar fi rugozitatea suprafeței, hidrofobicitatea,
sarcina și compoziția chimică [ 31 , 32 , 33 ]. Deoarece stratul de argint al suprafețelor poate
modifica proprietățile suprafeței, formarea de biofilm a suprafeței acoperite poate fi afectată de
acoperire.
După ce nanoparticulele de argint amestecate cu alumină la o concentrație de 1% în greutate au
fost acoperite pe suprafețe lustruite prin depunere de aerosoli, rugozitatea suprafeței a crescut
semnificativ până la 0,250 μm. Rugozitatea suprafeței este un factor critic care afectează
aderența bacteriilor la suprafață. În special, o rugozitate a suprafeței de 0,2 μm este rugozitatea
de prag care nu afectează aderența și colonizarea bacteriilor chiar dacă rugozitatea suprafeței este
mai mică decât aceasta [34 ] . Prin urmare, o creștere a rugozității suprafeței de la aproape 0 μm
pe o suprafață netedă la mai mult de 0,2 μm ar putea provoca o creștere semnificativă a aderenței
bacteriene.
O altă proprietate a suprafeței care ar putea fi modificată după acoperirea cu argint este
încărcarea de suprafață. Deoarece bacteriile sunt adesea încărcate negativ de componentele de
suprafață, ele colonizează mai ușor pe suprafețele cu sarcini pozitive spre neutre decât pe cele
care prezintă sarcini negative [ 33 ]. Zirconia este un oxid de metal care este acoperit cu grupări
hidroxil în condiții apoase și, astfel, sarcina sa netă de suprafață este afectată de pH-ul lichidului
în care este scufundat [35 ] . Deoarece pH-ul bulionului BHI a fost de 7,4 ± 0,2 și punctul
izoelectric al zirconiei a fost raportat a fi mai mic de 7 [ 36 ], sarcina netă de suprafață a
specimenului de zirconiu a fost negativă, ceea ce ar putea respinge colonizarea bacteriană la
suprafață. Cu toate acestea, pe suprafețele de zirconiu acoperite cu argint, nanoparticulele de
argint au eliberat ioni de argint încărcați pozitiv, care au neutralizat încărcătura negativă de
suprafață a suprafețelor goale de zirconiu. Perturbarea sarcinii negative a suprafeței după
acoperirea cu argint poate întrerupe afinitatea scăzută a suprafețelor netede din zirconiu pentru
colonizarea bacteriană, determinând o creștere a creșterii bacteriene după acoperirea cu argint pe
suprafețe. Argintul acoperit afectează, de asemenea, sarcina de suprafață a suprafeței de titan în
același mod.
Astfel, rugozitatea suprafeței și încărcarea suprafeței după acoperirea cu argint fac suprafețele
mai favorabile pentru creșterea bacteriilor. Colonizarea bacteriană pe suprafețele acoperite cu
argint ar fi afectată de proprietățile suprafeței prietenoase cu bacteriile, precum și de efectul
antibacterian al argintului acoperit.
Cantitatea de argint eliberată din specimenele acoperite a fost de aproximativ 0,1 ppm și nu a
existat nicio diferență semnificativă între substraturile de titan și zirconiu. Pentru a evalua dacă
acea cantitate de argint a fost eficientă în inhibarea creșterii bacteriene în stare dispersată,
bacteriile au fost cultivate în soluție de argint la aceeași concentrație de argint eliberat, 0,00001
% în greutate. Au fost, de asemenea, experimentate concentrații mai mari pentru a explora
concentrația eficientă de argint pentru activitatea antibacteriană. Rezultatele arată că cantitatea de
argint eliberată de pe suprafața acoperită este insuficientă pentru a inhiba creșterea bacteriilor în
soluție, iar concentrațiile de soluție de argint peste 0,01% pot prezenta efect
antibacterian. Diferența de concentrație efectivă dintre suprafața acoperită și soluție poate indica
o diferență în mecanismul antibacterian al argintului în suprafața acoperită și soluție.
Suprafețele implanturilor dentare sunt proiectate special pentru o osteointegrare eficientă și
etanșarea mucoasei. Încorporarea argintului prin depunerea de aerosoli ar putea întrerupe
răspunsul celular la suprafețele implantului. Cu toate acestea, acoperirea prin depunere de
aerosoli folosind un amestec de argint 1% în greutate nu a avut un efect semnificativ asupra
fibroblastelor și osteoblastelor, ceea ce a implicat biocompatibilitatea acestuia. În acest studiu,
fibroblastele gingivale umane și preosteoblastele de șoarece cultivate în specimene de zirconiu
au arătat o viabilitate mai mică decât martorii. Rezultatele testului MTT pot fi afectate de mai
multe condiții experimentale, cum ar fi numărul de celule de însămânțare, concentrația de reactiv
MTT și timpul de incubare cu MTT [ 37 ]. Astfel, valoarea absolută trebuie analizată cu
prudență.
Studiul nostru s-a limitat la colonizarea unei singure bacterii pe suprafețele
implantului. Deoarece speciile bacteriene formează în mod obișnuit structuri complexe în mediul
oral, aderența și proliferarea complexelor bacteriene pe suprafețele implanturilor trebuie
investigate în continuare. O altă limitare au fost dimensiunile diferite ale discurilor din titan și
zirconiu. Compararea directă a proprietăților de aderență bacteriană dintre titan și zirconiu a fost
imposibilă, deoarece aceste două materiale nu au fost expuse la aceleași condiții experimentale
din cauza dimensiunilor lor distincte ale discurilor.

Concluzii
În limitele studiului in vitro, rezultatele au implicat că stratul de argint de pe suprafețele de titan
prin depunere de aerosoli a furnizat efecte antibacteriene împotriva bacteriilor orale, în timp ce
acoperirea a avut un efect advers asupra suprafețelor de zirconiu, promovând o creștere mai mare
a bacteriilor. Acoperirea a fost biocompatibilă atât pe suprafețele de titan, cât și de zirconiu, în
ceea ce privește proliferarea fibroblastelor și preosteoblastelor.

Disponibilitatea datelor și materialelor

Toate datele generate sau analizate în timpul acestui studiu sunt incluse în această lucrare.

Abrevieri
PBS:
Soluție salină tamponată cu fosfat
CARE:
Infuzie pe creier inimă
CFU:
Unități formatoare de colonii
S. gordonii :
Streptococcus gordonii
F. nucleatum :
Fusobacterium nucleatum
P. gingivalis :
Porphyromonas gingivalis
MTT:
Bromura de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difenil-tetrazoliu
HGF:
Fibroblastul gingival uman
MC3T3-E1:
Preosteoblast de șoarece

Referințe
1. Howe MS, Keys W, Richards D. Supraviețuirea implantului dentar pe
termen lung (10 ani): o revizuire sistematică și meta-analiză a
sensibilității. J Dent. 2019;84:9–21.

Articol PubMed Google Academic

2. Hof M, Tepper G, Semo B, Arnhart C, Watzek G, Pommer B.

Perspectivele pacienților despre implantul dentar și chirurgia grefei
osoase: sondaj de interviu bazat pe chestionar. Clin Implanturi Orale
Res. 2014;25:42–5.

Articol PubMed Google Academic

3. Lai HC, Si MS, Zhuang LF, Shen H, Liu YL, Wismeijer D. Rezultatele pe
termen lung ale implanturilor dentare scurte care susțin coroane unice
în regiunea posterioară: un studiu retrospectiv clinic de 5-10 ani. Clin
Implanturi Orale Res. 2013;24:230–7.

Articol PubMed Google Academic

4. Buser D, Janner SF, Wittneben JG, Brägger U, Ramseier CA, Salvi

GE. Supraviețuirea pe 10 ani și ratele de succes ale a 511 implanturi de
titan cu o suprafață sablata și gravată cu acid: un studiu retrospectiv pe
303 pacienți parțial edenți. Clin Implant Dent Relat Res. 2012;14:839–
51.

Articol PubMed Google Academic

5. Larsson L, Kavanagh NM, Nguyen TVN, Castilho RM, Berglundh T,

Giannobile WV. Influența epigeneticii asupra patogenezei parodontitei
și periimplantitelor. Parodontol. 2000;2022(90):125–37.

Google Academic

6. Schwarz F, Derks J, Monje A, Wang HL. Periimplantita. J Clin

Periodontol. 2018;45(Suppl 20):S246–66.

Articol PubMed Google Academic

7. Mombelli A, Müller N, Cionca N. Epidemiologia periimplantitei. Clin
Implanturi Orale Res. 2012;23(Suppl 6):67–76.

Articol PubMed Google Academic

8. Lang NP, Berglundh T. Bolile periimplantare: unde suntem acum? —

Consensul celui de-al șaptelea atelier european de parodontologie. J
Clin Periodontol. 2011;38(Suppl 11):178–81.

Articol PubMed Google Academic

9. Aas JA, Paster BJ, Stokes LN, Olsen I, Dewhirst FE. Definirea florei
bacteriene normale a cavității bucale. J Clin Microbiol. 2005;43:5721–
32.

Articol PubMed PubMed Central Google Academic

10.Robitaille N, Reed DN, Walters JD, Kumar PS. Boli parodontale și

periimplantare: infecții identice sau fraterne? Mol Oral
Microbiol. 2016;31:285–301.

Articol PubMed Google Academic

11. Dreyer H, Grischke J, Tiede C, Eberhard J, Schweitzer A, Toikkanen SE

și colab. Epidemiologia și factorii de risc ai periimplantitei: o revizuire
sistematică. J Parodontal Res. 2018;53:657–81.

Articol PubMed Google Academic

12.Albouy JP, Abrahamsson I, Berglundh T. Progresia spontană a

periimplantitei experimentale la implanturi cu diferite caracteristici de
suprafață: un studiu experimental la câini. J Clin
Periodontol. 2012;39:182–7.

Articol PubMed Google Academic

13.Hickok NJ, Shapiro IM, Chen AF. Impactul încorporării

antimicrobienelor pe suprafețele implanturilor. J Dent Res. 2018;97:14–
22.

Articol PubMed Google Academic

14.Ferraris S, Spriano S. Suprafețe antibacteriene din titan pentru
implanturi medicale. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2016;61:965–78.

Articol PubMed Google Academic

15. Yin IX, Zhang J, Zhao IS, Mei ML, Li Q, Chu CH. Mecanismul
antibacterian al nanoparticulelor de argint și aplicarea acestuia în
stomatologie. Int J Nanomed. 2020;15:2555–62.

Articol Google Academic

16.Qing Y, Cheng L, Li R, Liu G, Zhang Y, Tang X și colab. Mecanismul

potențial antibacterian al nanoparticulelor de argint și optimizarea
implanturilor ortopedice prin tehnologii avansate de modificare. Int J
Nanomed. 2018;13:3311–27.

Articol Google Academic

17. Akedo J. Depunerea cu aerosol a peliculelor groase ceramice la

temperatura camerei: mecanismul de densificare a straturilor
ceramice. J Am Ceram Soc. 2006;89:1834–9.

Articol Google Academic

18.Cho Y, Hong J, Ryoo H, Kim D, Park J, Han J. Răspunsuri osteogenice

la zirconiu cu acoperire cu hidroxiapatită prin depunere de aerosoli. J
Dent Res. 2015;94:491–9.

Articol PubMed PubMed Central Google Academic

19.Duraccio D, Mussano F, Faga MG. Biomateriale pentru implanturi

dentare: tendințe actuale și viitoare. J Mater Sci. 2015;50:4779–812.

Articol Google Academic

20. Sadowsky SJ. A făcut zirconia o diferență materială în protecția

implantului? Un comentariu. Dent Mater. 2020;36:1–8.

Articol PubMed Google Academic

21.Cionca N, Hashim D, Mombelli A. Implanturi dentare cu zirconiu: unde
suntem acum și încotro ne îndreptăm? Parodontol. 2000;2017(73):241–
58.

Google Academic

22. Roehling S, Astasov-Frauenhoffer M, Hauser-Gerspach I,

Braissant O, Woeffler H, Waltimo T, et al. Formarea in vitro de biofilm
pe suprafețele implanturilor de titan și zirconiu. J
Parodontol. 2017;88:298–307.

Articol PubMed Google Academic

23. Wassmann T, Kreis S, Behr M, Buergers R. Influența texturii

suprafeței și a umectabilității asupra aderenței bacteriene inițiale asupra
implanturilor dentare din titan și oxid de zirconiu. Int J Implant
Dent. 2017;3:32.

Articol PubMed PubMed Central Google Academic

24. Oda Y, Miura T, Mori G, Sasaki H, Ito T, Yoshinari M, et

al. Aderența streptococilor la titan și zirconiu. Plus unu. 2020;15:
e0234524.

Articol PubMed PubMed Central Google Academic

25. Choi S, Jo YH, Yeo IL, Yoon HI, Lee JH, Han JS. Efectul
materialului de suprafață, rugozitatea și umectarea asupra aderenței și
proliferării Streptococcus gordonii , Fusobacterium
nucleatum și Porphyromonas gingivalis . J Dent Sci. 2023;18:517–25.

Articol PubMed Google Academic

26. Schwarz F, John G, Hegewald A, Becker J. Tratamentul non-

chirurgical al mucozitei periimplantare și al periimplantitei la
implanturi de zirconiu: o serie de cazuri prospective. J Clin Periodontol
J Clin Periodontol. 2015;42:783–8.

Articol PubMed Google Academic

27.Zhao L, Chu PK, Zhang Y, Wu Z. Acoperiri antibacteriene pe implanturi

de titan. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 2009;91:470–80.
 Articol PubMed Google Academic

28. Noronha VT, Paula AJ, Durán G, Galembeck A, Cogo-Müller K,

Franz-Montan M, et al. Nanoparticule de argint în stomatologie. Dent
Mater. 2017;33:1110–26.

Articol PubMed Google Academic

29. Lemire JA, Harrison JJ, Turner RJ. Activitatea antimicrobiană a

metalelor: mecanisme, ținte moleculare și aplicații. Nat Rev
Microbiol. 2013;11:371–84.

Articol PubMed Google Academic

30. Melaiye A, Youngs WJ. Argintul și aplicarea acestuia ca agent

antimicrobian. Expert Opin Ther Pat. 2005;15:125–30.

Articol Google Academic

31.Yeo IL, Kim HY, Lim KS, Han JS. Factorii de suprafață a implantului și
aderența bacteriană: o revizuire a literaturii. Int J Artif
Organs. 2012;35:762–72.

Articol PubMed Google Academic

32. Song F, Koo H, Ren D. Efectele proprietăților materialelor asupra

aderenței bacteriene și formării biofilmului. J Dent Res. 2015;94:1027–
34.

Articol PubMed Google Academic

33. Berna C, Ellison CK, Ducret A, Brun YV. Aderența bacteriană la

nivel unicelular. Nat Rev Microbiol. 2018;16:616–27.

Articol PubMed Google Academic

34. Bollen CM, Lambrechts P, Quirynen M. Comparația rugozității

suprafeței materialelor dure orale cu rugozitatea suprafeței de prag
pentru retenția plăcii bacteriene: o revizuire a literaturii. Dent
Mater. 1997;13:258–69.

Articol PubMed Google Academic

35. Parks GA. Punctele izoelectrice ale oxizilor solizi, hidroxizilor
solizi și sistemelor hidroxo complexe apoase. Chem Rev. 1965;65:177–
98.

Articol Google Academic

36. Kosmulski M. Punctele izoelectrice și punctele de încărcare zero

ale (hidr)oxizilor metalici: 50 de ani după revizuirea lui Parks. Adv
Coloid Interface Sci. 2016;238:1–61.

Articol PubMed Google Academic

37.Ghasemi M, Turnbull T, Sebastian S, Kempson I. Testul MTT: utilitate,

limitări, capcane și interpretare în analiza în vrac și cu o singură
celulă. Int J Mol Sci. 2021;22:12827.

Articol PubMed PubMed Central Google Academic