Determinarea grupelor sanguine prin metoda Beth-Vincent cu ser antiA antiB Hematia uman are un numr foarte mare

de antigene pe suprafaa sa. Anticorpii respectivi poart numele de aglutinine pentru faptul c provoac reacii de aglutinare. Aglutininele sunt anticorpi naturali i se gsesc n serul sanguin. De o importan deosebit sunt aglutinogenele A i B, precum i aglutinogenul Rh. Fa de aglutinogenele A i B, n sngele altor persoane exist anticorpi naturali = aglutininele (alfa) (ANTI-A) i (beta) (ANTI-B). Coexistena unui aglutinogen cu aglutinina corespunztoare (A , B ) la aceeai persoan nu este compatibil cu viaa, deoarece prezena aglutinogenului i aglutininei omoloage produce aglutinarea globulelor roii. Studierea fenomenului de hemaglutinare a fcut posibil descoperirea grupelor sanguine de baz - sistemul O.A.B. (zero, A, B) Sistemul sanguin O.A.B. cuprinde patru grupe de snge. Grupele se noteaz dup numele aglutinogenului, deosebindu-se astfel: grupa: 0 (zero) A, B i AB. Un alt cercettor clasific grupele sanguine notndu-le cu cifre romane: I, II, III, IV. Astzi, pentru a nltura posibilitatea unei interpretri greite a grupelor sanguine de baz, ambele clasificri au fost unificate, sistemul sanguin OAB fiind reprezentat astfel: grupa 0 (zero unu) A II (A-doi) B III (B-trei) AB IV (AB-patru) aglutinogen (antigen) A B AB aglutinine (anticorp) i _

Dup cum se vede, grupa 0 (I) nu are nici un aglutinogen (zero aglutinogen), celelalte au aglutinogen A sau B, sau amndou - AB. Determinarea grupelor sanguine se face prin dou metode: 1) metoda direct Beth-Vincent (aglutinine cunoscute i aglutinogen necunoscut); 2) metoda invers - Simonin (aglutinogen cunoscut i aglutinine necunoscute) . Transfuzia de snge nu se poate efectua fr determinarea grupei sanguine. Metoda Beth-Vincent cu ser anti-A anti-B Anticorpii monoclonali ANTI A i ANTI B sunt de tip IgM i produc aglutinarea direct, pe lam, la temperatura camerei, a antigenelor omoloage A, respectiv B. Reactivii au fost testai prin mai multe metode, sunt specifici, au o aviditate mult mai mare dect cele de surs uman. Metoda de lucru: Se folosete snge venos 3-4 ml. Pe o lam cu godeuri, se picur cte o pictur de ser ANTI A respectiv ANTI B; alturi, n

dreptul fiecrei picturi de ser, se adaug cte o pictur de eritrocite de determinat (pictura de 10 ori mai mic dect pictura de ser); picturile de ser se omogenizeaz cu cele de eritrocite, cu colul unei lame sau cu bagheta de sticl; dup 3-4 secunde, apar primele semne de aglutinare, iar reacia este complet dup un minut. 1. Dac aglutinarea nu se produce, nseamn c sngele cercetat nu are aglutinogenul. Aparine grupei 0I. 2. Dac aglutinarea se produce n serul ANTI A, nseamn c sngele cercetat are aglutinogen A. Sngele aparine grupei AII. 3. Dac aglutinarea se produce n serul ANTI, B, nseamn c sngele de cercetat are aglutinogen B. Snge/e aparine grupei B III. 4. Dac aglutinarea se produce n ambele seruri-test, nseamn c sngele conine att aglutinogen A, ct i aglutinogen B ; Face parte, deci, din grupa AB IV. Important: simultan cu determinarea antigenelor A i B, prin metoda de mai sus, este obligatorie i determinarea anticorpilor, prin metoda Simonin: Metoda de determinare a aglutininelor Pentru metoda Simonin se folosesc hematii test care se obin de la fiecare punct de transfuzie; valabilitatea hematiilor este de maximum 3 zile. Avem, deci, aglutinogen cunoscut i aglutinine necunoscute. Materialele necesare sunt aceleai ca i la proba direct(seruri-test, lam cu 3 godeuri, lame de sticl curate i uscate, pipete pentru fiecare ser hemotest n parte, pipete pt.sngele de cercetat, materiale pentru recoltat sngele) dar, n loc de seruri-test, se folosesc eritrocite-test. Este nevoie, de asemenea, de ser sau plasm, deci nu este suficient recoltarea numai prin neparea pulpei degetului, ci trebuie s se recolteze snge prin puncie venoas.
Tehnica :
-

cu o pipet Pasteur, pune cte o pictur din serul sau plasma de cercetat n dou godeuri; deasupra fiecrei picturi de ser de cercetat, aflat pe lam, se pune o picatur din hematiile test cu aglutinogenul cunoscut, respectiv hematii - test AII i BIII; Atenie! i prin aceast metod, cantitatea de ser este de 10 ori mai mare dect cea de hematii. - se efectueaz omogenizarea. interpretarea rezultatelor

- Dac aglutinarea s-a produs n ambele picturi omogenizate, nseamn c n serul de cercetat se afl ambele aglutinine ( i ) ; Serul de cercetat face, deci, parte din grupa 0I. - Dac aglutinarea se produce numai n pictura de ser n care am pus eritrocite - test BIII nseamn c aglutinogenul B s-a ntlnit cu aglutinina omoloag ; Deci serul aparine grupei AII. - Dac aglutinarea se produce numai n pictura de ser n care am pus eritrocite - test A II - nseamn

c s-a ntlnit cu aglutinina a, care a aglutinat hematiile-test. Serul aparine grupei B III. - Dac aglutinarea nu s-a produs n nici una din picturile serului de cercetat nseamn c serul nu are aglutinine, deci face parte din grupa ABIV. Probele de compatibilitate direct major - in vivo (Jeanbreau) - in vitro (Oelecker) in vivo - Jeanbreau scop : - verificarea, n plus, dar obligatorie, a felului n care prirnitorul reacioneaz fa de sngele ce i se introduce intravenos, prin transfuzie. materiale: - instrumentele i materialele necesare efecturii unei transfuzii (vezi transfuzia) - medicamentele necesare pentru eventuale accidente posttransfuzionale pacient - psihic i fizic, ca pentru puncia venoas execuia - asistenta se spal pe mini - mbrac mnui sterile - instaleaz aparatul de transfuzie - las s se scurg prin picurtor primii 20 ml de snge - regleaz ritmul de scurgere la 10-15 picturi/minut, timp de 5 minute - supravegheaz foarte atent pacientul timp de 5 minute - dac apar semnele incompatibilitii de grup (senzaie de frig , frison, cefalee, dureri lombare, tahicardie, urticarie, congestia feei), ntrerupe transfuzia i anun medicul - dac nu apar semnele incompatibilitii de grup, introduce din nou 20 ml snge n ritm mai rapid dup care regleaz ritmul Ia 10-15 picturi/minut - supravegheaz pacientul timp de 5 minute - dac nu apar semnele incompatibilitii de grup, continu transfuzia n ritmul prescris. DE TIUT: n stabilirea incompatibilitii de grup se vor observa simptomele obiective i sesizrile spontane ale pacientului DE EVITAT: - A se pune ntrebri frecvente pacientului ce ar sugera anumite simptome, ngreunnd orientarea n faa cazului. in vitro - Oelecker

Scop: deceleaz anticorpii din serul bolnavului, care ar putea distruge eritrocitele donatorului - pune n eviden incompatibilitatea n sistemul OAB, prezena de anticorpi imuni din sistemul Rh (dac primitorul este Rho (D) negativ i are anticorpi anti-Rho (D), iar donatorul Rh-pozitiv a fost greit determinat ca Rh-neg) materiale: - lame de sticl curate, degresate, uscate - flaconul sau punga cu sngele de cercetat - seringi i ace sterilizate - pipete, mnui de protecie - termostat, vat, alcool pacient Psihic i fizic ca la puncia venoas execuia -asistenta se spal pe mini -mbrac mnuile sterile - recolteaz snge prin puncie venoas - introduce sngele la centrifug - pune o pictur din plasma primitorului pe o lam peste care adaug eritrocite de la donator - respect proporia de 1/10 ntre globule i ser - citete rezultatul dup 5 minute, la rece -adaug o pictur de papain i introduce la termostat timp de 30 minute Interpretare -dac n pictur se produce aglutinarea, sngele primitorului nu este compatibil cu sngele donatorului -dac nu se produce aglutinarea, sngele este compatibil i poate fi transfuzat Accidentele i incidentele transfuziei de snge accidente - incompatibilitatea de grup n sistemul OAB, manifestat sub forma ocului hemolitic se ntrerupe transfuzia la apariia semnelor precoce (frison, tahicardie, dispnee, cianoz, stare general alterat, dureri lombare, retrosternale) - transfuzarea unui snge alterat infectat cu germeni viruleni care provoac frisoane puternice la 1-2 ore dup transfuzie; se nclzete pacientul cu pturi, buiote i se administreaz buturi calde, se ncepe antibioterapie masiv, dup antibiograma sngelui infectat

infectat cu virusul hepatitei epidemice, cu plasmodiul malariei, spirochete sau brucele manifestrile apar dup trecerea perioadei respective de incubaie

- prezena substanelor piretogene provoac frison, cefalee, febra - embolie pulmonar * cu cheaguri, manifestat prin agitaie, cianoz, dureri toracice, tuse chinuitoare, hemoptizie, febr * cu aer, manifestat prin alterarea brusc a strii generale, cianoz, dispnee, tensiunea arterial sczut, puls filiform; se iau msuri antioc de ctre medicul anestezist-reanimator - transfuzia sngelui nenclzit poate provoca hemoliza intravascular cu blocaj renal, oc posttransfuzional, acidoz metabolic, stop cardiac prin hipotermie incidente nfundarea aparatului cu cheag - se schimb aparatul sngele poate conine cheaguri sau pelicule de fibrin ce se depun pe filtru - se schimb flaconul i perfuzorul ieirea acului din ven perforarea venei coagularea sngelui venos refulat n ac - se schimb acul